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如何选择合适的线粒体内参抗体？
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
为什么选择推荐Abbkine品牌的COX IV作为线粒体内参抗体？ 我们知道，在Western Blotting中使用内参其实就是在WB过程中的另外用内参对应的抗体检测内参蛋白，这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达，由于内参在各组织和细胞中的表达相对恒定，借助检测每个样品内参的量就可以用于校正上样误差，这样半定量的结果才更为可信。此外使用内参可以作为空白对照，检测蛋白转膜情况是否完全、整个Western Blot显色或者发光体系是否正常。 细胞色素c氧化酶(Cytochrome c oxidase，简称COX)是一种异源寡聚酶，通常含有13个亚基，定位于线粒体内膜，是线粒体呼吸链的酶复合物。细胞色素c氧化酶中形成催化中心的3个最大的亚基由线粒体DNA编码，其余10个亚基包括COX IV由细胞核内的基因组DNA编码。细胞色素c氧化酶(COX)活性缺陷和人类多种疾病相关。COX IV抗体可用作线粒体蛋白上样量的内参抗体，其检测目标蛋白大小为16kD左右。 常用的细胞总蛋白质内参有GAPDH和细胞骨架蛋白β-Actin或β-Tubulin等。对于一些植物的样本，则需要特别的植物Actin蛋白作为内参。当实验样品中只是核蛋白，而不是细胞总蛋白提取液时，可以用组蛋白H（Histone H），或者增殖细胞核抗原（PCNA）等为核内参抗体。而在一些特别的针对线粒体作为微环境的研究课题时，需要提取线粒体总蛋白并检测其中的目标蛋白含量，这时候常规的细胞总蛋白内参就不是很合适，我们推荐使用线粒体总蛋白的内参抗体，对于线粒体蛋白的检测，常用COX IV或VDAC1作为内参抗体，这里面COX IV又是被引用最多的线粒体内参。COX IV的检测分子量大约在16kD左右，比较适合用于检测目标蛋白在较大的WB实验。 我们课题组是做凋亡和线粒体方面研究的，经常研究线粒体方面的通道蛋白，一直使用Abbkine的COX IV抗体来做WB，效价挺高的。——武汉大学生科院一客户 产品名称及描述 品牌 货号 产品说明 Anti-COX IV Mouse Monoclonal Antibody (14Y2) Abbkine A01060 详情 小鼠源的单克
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如何挑选合适的β-Actin内参抗体？
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
如何选择合适的β-Actin抗体？ 现在市场上对于内参抗体选择是比较多，但是也需要遵循一定的原则，那怎么去找到适合自己实验的β-Actin抗体呢？ 首先，我们需要考虑目的蛋白的大小，我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分子量**相差5KD以上，因此你需要根据你目的检测蛋白的分子量来选择合适的内参，由于β-Actin的检测分子量大约在42kD，因此该内参抗体不是很适合用于检测38kD-48kD大小目标蛋白的WB实验中。 另外，虽然β-Actin是最合适的内参抗体之一，但是在某些条件下，一些因素也会导致样品间β-Actin含量的变化。特别需要注意的是，在脂肪组织里，β-Actin的表达量非常低，不适合作为内参。 很耐用，质量也很稳定，购买后放了一年了，拿出来用效价还是很高，后来买了他们大包装的，直接定制的1mg粉末，很推荐。——北京工业大学生命科学与生物工程学院一客户 另外，我们还需要考虑自己的需要，特别是实验应用上的需要。一般来说，应用类型越多，在使用过程中的选择余地就越大，而小鼠源的单克隆抗体一般在特 异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体。另外，抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面，也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl β-Actin抗体（假如其WB检测的稀释比率是1:5000，最终使用液相当于500ml），要比效价低的1ml的β-Actin抗体（假如 WB检测的稀释比率是 1:200，最终使用液相当于2ml）性价比更高。因此在选择抗体的时候，不但需要考虑抗体的量，还需要考虑抗体的效价，即不同应用的建议稀释比率。 产品名称及描述 品牌 货号 规格及报价 产品说明 Anti-beta Actin Mouse Monoclonal Antibody (1C7) Abbkine A01010 100ul/500ul/1ml 详情 HRP Conjugated Anti-beta Actin Mouse Monoclonal Antibody (1C7) Abbkine A01015 50ul/200ul/1ml 详情 为什么选择推荐Abbkine品牌的β-Actin抗体？ 目前市面上能提供的β-Actin抗体有国产分装或原产的；也有原装进口，诸如Abcam、Celll Sign
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怎么选择适合的GAPDH内参抗体?
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
在Western Bloting实验中，在遇到总蛋白浓度测定不准确时候，或者蛋白质样品在电泳前上样时产生的样品间的操作存在误差；这些误差可以通过测定每个样品中实际转到膜上的内参,比如内参GAPDH的含量来进行校正。 GAPDH（甘油醛-3-磷酸脱氢酶）是参与糖酵解的一种关键酶，由4个30-40kDa的亚基组成，分子量146kDa，检测条带大约在36kDa。 GAPDH基因几乎在所有组织中都高水表达，广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。 如何选择合适的GAPDH抗体？ 内参抗体虽然选择较多，但是也需要遵循一定的原则，并契合实际的应用要求。首先，我们需要考虑目的蛋白的大小，我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分 子量**相差5KD以上，因此你需要根据你目的检测蛋白的分子量来选择合适的内参，由于GAPDH的检测分子量大约在36kD，因此该内参抗体不是很适合用于检测30kD-40kD大小目标蛋白的WB实验中。另外，不同的组织来源的样本在选择内参时还有一定的区别。比如某些细胞中，由于组织缺氧、糖尿病等因素会导致GAPDH的表达增高，不适合做内参。 因为检测的目的蛋白分子量在50kD左右，之前的β-Tubulin不是很适合，就购买了一支Abbkine的GAPDH抗体做内参，效价确实有点惊讶，我用1:1000倍起始稀释觉得条带很浓，后来一直到1:8000稀释，同时减少了曝光时间，条带仍然很清晰。——武汉大学生命科学院一客户 产品名称及描述 品牌 货号 规格 产品说明 Anti-GAPDH Monoclonal Antibody Abbkine A01020 100ul/500ul 详情 另外，我们还需要考虑自己的需要，特别是实验应用上的需要。一般来说，应用类型越多，在使用过程中的选择余地就越大，而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体。 另外，抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面，也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl GAPDH抗体（假如其WB检测的稀释比率是1:5000，最终使用液相当于500ml），要比效价低的1ml的GAPDH抗体（假如 WB检测的稀释
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中药复方如何发表高分SCI之二
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
上回我们分享了blood的文章，从黄连解毒汤做到了黄芩根，再寻找到黄芩根中一个有效成份baicalein。经典的复方药物研究思路。做得不深。05年的文章，可以理解。 今天跟大家分享的文章，Rosmarinic acid and baicalin epigenetically de-repress Pparγ in hepatic stellate cells for their anti-fibrotic effect. 2012. Hepatology. 做的复方是Yang-Gan-Wan（YGW），**疾病是肝纤维化。我们来看看这篇文章做了点啥。 Fig.1 YGW prevents and reverses hepatic stellate cell (HSC) activation in culture. YGW水提取物加入大鼠的HSC细胞后，发现可以阻止HSC的活化。药效评价：细胞实验-细胞表型。检测了几个分子指标α1collagen，alpha-SMA，TGF-β1，这几个是纤维化的经典指标。（药效评价：细胞实验-分子指标）。PPARγ，大家注意，不是分子指标，而是药物的机理，我们说的A基因。可以看到加药后，PPARγ上升。（药靶鉴定：药物与药靶分子相关性） Fig.2 PPARγ epigenetic repression is lifted with YGW extract. 这个图很重要，做深了。做的是药靶的机制。HSC在培养情况下，会出现纤维化的表型，同时PPARγ会降低。但加入药物YGW后，PPARγ出现了上升（凹字型基因）。PPARγ为什么会出现这个改变呢，原来是启动子上的甲基化和乙酰化出现了改变（药靶机制）。大家自己看下这个图，有凹字型改变，也有山字型改变。 Fig.3 Suppression of IKK and NF-κB with YGW. 图2做的是药靶上游的机制。这幅图做的是药靶下游的机制。 Fig.4 Identification of active components. 开始找有效成份了。采用细胞表型进行功能筛选，找到了RA和BC是两个有效成份。这里的功能筛选其实我们也可以用分子指标进行。（药效评价：细胞实验） Fig.5 Rosmarinic acid (RA) and baicalin (BC) are the YGW’s active components to render epigenetic de-repression of Pparγ. 前面已经发现的YGW机理，在RA和BC上再做一遍。增加了动物实
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Molecular Devices：CRISPR来了，基因组时代的高通量筛选方法介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
2015年，来自美国的科学家在国际期刊Nature发表了他们的最新研究成果，他们利用结构导向的方法改造了CRISPR-CAS9复合物来系统性研究基因功能，并通过构建sgRNA文库大规模筛选抵抗BRAF抑制剂的激活基因。该文章利用CRISPR-CAS9技术研究基因功能，对后基因组时代大规模研究激活基因的功能具有推动作用。自此，疾病的研究进入了基因组时代。 那么，基因功能如何筛选呢？面对大数据，传统的实验方法开始有些力不从心了。基因组学的研究可能需要大量的实验，来研究各个基因或整个通路在特定疾病中或生理反应中的作用，并协助新疗法的开发。大量的实验就需要高通量的方法来完成，由于高内涵成像分析系统具有高通量全自动的特点及优势，逐渐进入了功能基因组的研究中。 本文将介绍几篇应用高内涵系统来研究基因功能的文章，包括了细胞迁移、神经细胞生长、细胞间相互作用、杀伤性NK细胞功能及病毒感染等各个方面。 查看方法介绍
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高密度发酵补料操作的依据是什么？
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
前言：FBC操作的依据是什么？时间？生物量？底物浓度？pH变化？DO反弹？还是别的？如果不是很清楚的话，此文可能对你有帮助。 一 发酵补料操作的意义 ①解除底物抑制、产物反馈抑制和分解代谢物的阻遏； ②避免一次投料过多造成细胞大量生长所引起的一切影响，改善发酵液流变学性质； ③可提高发芽孢子的比例，控制细胞质量； ④不需要严格的无菌条件，产生菌不易老化变异，比连续发酵适用广泛。 二 补料项 常规补料内容包括一下5组因子： ①补充菌体所需的能源和碳源，如葡萄糖和液化淀粉等 ; ②补充菌体所需氮源，如蛋白胨、豆饼粉、玉米浆、酵母粉和尿素等有机氮源，有些发酵还采取通入氨气或添加氨水等 ; ③加入某些菌体生长代谢所需的微量元素和无机盐，如磷酸盐、硫酸盐等 ; ④对于产诱导酶的微生物，常在补料中适当加入该酶的作用底物，以提高酶的产量 ; ⑤对一些抗生素发酵，往往需要补充抗生素形成的前体 对于具体的发酵项目需要选择哪些因素作为补料项，需要根据菌种情况而定，举例说明如下： 三 十种补料工艺方案 1无反馈控制的补料 这种控制方式所加入营养物的流量是预先设定的。因此，反映系统状态的数学模型的准确程度是成败的关键。目前无反馈控制补料方式有三种 :恒速补料、变速补料和指数补料。 1.1 恒速补料 在恒速补料发酵中，以预先设定的恒定速率补加限制性营养物。相对菌体来说，营养物浓度是逐渐降低的，菌体比生长速率也是下降的，而菌体总量是线性增加的。 恒速补料在一定程度上满足了菌体对养料的需要，避免了营养物抑制，但这种方法往往只是根据一个参数指标控制的。 1.2 变速补料 变速补料是在培养过程中补加速率以梯度、阶段或线性等方式不断增加。它可以在菌体浓度较高的情况下加入更多营养物来促进细胞的生长，实现细胞比生长速率不断增加，有利于产物的形成。尽管比较粗糙，但要优于恒速补加法。 1.3 指数补料 指数补料是一种简单而行之有效的方法。补加速率呈指数增加，它能
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肝癌体内外模型总结&工具病毒使用指南
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
肝癌是指发生于肝脏的恶性肿瘤，中国新增癌症病例高居世界第一位，其中肝癌的新增病例和死亡人数均居世界首位。目前，我国肝癌的发病率约为25.7/10万，成为死亡率仅次于胃癌、肺癌的第三大恶性肿瘤。探寻肝癌的生物学特性、发病及转移机制已成为当今研究的热点。 针对肝癌的研究少不了细胞和动物模型的加持。怎么选择这些工具能够帮助我们更好的进行研究，获得阳性数据，发表论文，申请基金，登上人生巅峰，你有了解吗？ 一、我需要哪种细胞模型？是否易于操作？ 因为细胞容易操作，时间周期短，容易出结果，所以肯定是所有研究的第一步，下面总结一下一些常用的肝癌细胞的特性： *更多更全的预实验信息，可咨询当地业务员 二、细胞实验效果不错，那动物实验怎么做？ 做完体外的细胞实验，要想发高分文章，必须要有体内部分的数据来证明，肝癌的动物模型不少，构建难度也各异，以下为各种方法的小结： 三、体内外模型选好了，那么我的实验需要使用哪种慢病毒载体对基因进行操作呢？ 启动子、荧光标记、抗性标签是我们选择载体需要考虑的三大要素。实验不同，这些元件也需要相应变化。对于肝癌研究来说，hAAT1、ALB是较为常用的肝组织特异性启动子。按例祭出神图一张，定制你的专属载体，就是这么简单！ 上海吉凯基因化学技术有限公司成立于2002年，拥有BSL-2级别的慢病毒包装实验室。病毒生产线通过ISO9001质量管理体系验证，月均定制基因病毒产品包装超过1000次。慢病毒生产采用6项QC检测、病毒纯度分级纯化以及病毒滴度绝对定量检测确保病毒质量。 400名兢兢业业的吉凯人，用专业换您的高效。 PS：希望了解更多肿瘤工具指南的朋友们，可以关注“吉凯基因”微信公众号，更多精彩文章等您哦。 参 考 文 献 【1】Li, Xiaolei, et al. "Overexpression of Bmi-1 contributes to the invasion and metastasis of hepatocellular carcinoma by increasing the expression of matrix metalloproteinase (MMP)‑2,
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实验室中几种常见的干燥方法及选择技巧介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
实验室中的干燥法没有哪种**，只有哪种最适合，不论哪种干燥方法都有其独特的价值，都有其展现生命力的地方。 一、真空干燥箱 原理： 真空干燥箱专为热敏性、易分解和易氧化物质及较复杂成分物品而设计，能够向内部充入惰性气体，特别是一些成分复杂的物品也能进行快速干燥。 应用： 应用于生物化学、化工制药、医疗卫生、农业科研、环境保护等研究应用领域，作粉末干燥、烘培以及各类玻璃容器的消毒和灭菌使用。特别适合于对干燥热敏性、易分解、易氧化物质和复杂成分物品进行快速高效的干燥处理。 结构： 真空干燥箱为较古老的干燥装置，箱内被加热板分成若干层。加热板中通入热水或低压蒸汽作为加热介质，将铺有待干燥药品的料盘放在加热板上，关闭箱门，箱内用真空泵抽成真空。加热板在加热介质的循环流动中将药品加热到指定温度，水分即开始蒸发并随抽真空逐渐抽走。 优点： 1、此设备易于控制，可冷凝回收被蒸发的溶媒，干燥过程中药品不易被污染，可以用在药品干燥、包材灭菌及热处理上。 2、不但可以干燥样品，还可以提供实验所需的环境。 使用：需要配真空泵。 二、鼓风干燥箱 原理： 鼓风干燥箱最大特点在于鼓风，与外界空气相连；鼓风风机使干燥箱内的空气水平对流循环，使箱内空气吹送到电加热器上加热后送到工作室，然后由工作室吸入风机再吹到电热管上加热，不断循环加热的同时也使箱内温度更加均匀。工作室的热空气可对潮湿的试样物品加热，水分也会因加热变成蒸气混入热风中。 应用： 用于烘烤有化学性气体及食品加工待烘烤物品，油墨的固化、漆膜的烘干等，广泛应用于电子、电机、通讯、电镀、塑料、五金化工、仪器、印刷、制药、PC板、粉体、喷涂、玻璃、木器建材等精密烘烤、烘干、回火、预热、定型、加工等； 结构：鼓风干燥箱台式与立式的区分。 1、立式鼓风干燥箱采用长方体落地式结构，一般是直接放置在试验室地面上。试验仪表一般是在干燥箱的上边，便于操作。立式垂直
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细胞周期的间期与分裂期阶段介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
细胞周期(cell cycle)是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程，分为间期与分裂期两个阶段。 （一） 间期 间期又分为三期、即DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）与DNA合成后期（G2期）。 1. G1期（first gap） 从有丝分裂到DNA复制前的一段时期，又称合成前期，此期主要合成RNA和核糖体。该期特点是物质代谢活跃，迅速合成RNA和蛋白质，细胞体积显著增大。这一期的主要意义在于为下阶段S期的DNA复制作好物质和能量的准备。细胞进入G1期后，并不是毫无例外地都进入下一期继续增殖，在此时可能会出现三种不同前景的细胞：①增殖细胞：这种细胞能及时从G1期进入S期，并保持旺盛的分裂能力。例如消化道上皮细胞及骨髓细胞等；②暂不增殖细胞或休止细胞：这类细胞进入G1期后不立即转入S期，在需要时，如损伤、手术等，才进入S期继续增殖。例如肝细胞及肾小管上皮细胞等；③不增殖细胞：此种细胞进入G1期后，失去分裂能力，终身处于G1期，最后通过分化、衰老直至死亡。例如高度分化的神经细胞、肌细胞及成熟的红细胞等。 2. S期（synthesis）即DNA合成期，在此期，除了合成DNA外，同时还要合成组蛋白。DNA复制所需要的酶都在这一时期合成。 3. G2期（second gap）期为DNA合成后期，是有丝分裂的准备期。在这一时期，DNA合成终止，大量合成RNA及蛋白质，包括微管蛋白和促成熟因子等。 （二）分裂期 M期：细胞分裂期。 细胞分裂期：前期，中期，后期，末期。 细胞的有丝分裂（mitosis）需经前、中、后，末期，是一个连续变化过程，由一个母细胞分裂成为两个子细胞。一般需1～2小时。 1. 前期（prophase）染色质丝高度螺旋化，逐渐形成染色体（chromosome）。染色体短而粗，强嗜碱性。两个中心体向相反方向移动，在细胞中形成两极；而后以中心粒随体为起始点开始合成微管，形成纺锤体。随着核仁相随染色质的螺旋化，核仁逐渐消失。核被膜开始瓦解为离散的囊泡状内质网。 2. 中期（metaphase）细胞
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如何选择合适的GST抗体？
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白质的吸附纯化。由于分子量较小，并且较容易分离和纯化，His-tag 融合标签与其他标签相比有很多明显优势, 是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种。His抗体可以用于检测和His标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位，以及纯化、定性或定量检测His融合表达蛋白等。然而，目前商品化His-tag的单克隆抗体(mAb)种类不多, 且价格也十分昂贵。 如何选择合适的His标签抗体？ 我们在选择His抗体时，主要根据自己的需要，特别是实验应用上的需要。其中需要考虑的因素包括了，His抗体的应用检测类型、His抗体的克隆性及制备来源等。比如该His抗体是否能用于Western Bloting的检测？是否可以用于免疫荧光IF实验？我是否需要特异性更好的单克隆His标签抗体？我是否需要考虑下是选择小鼠来源的还是兔来源的His抗体？ 之前有使用SSS（一家著名品牌的His标签抗体，名称隐去）的His标签抗体，一开始还好，过了半年后，就发现产品质量不稳定，做IF实验不行了，后来试用了下Abbkine的，IF结果很漂亮，顺带还买了他们的DyLight荧光二抗 —— 广州南方医科大学一客户 一般来说，应用类型越多，在使用过程中的选择余地就越大，而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体。 另外，抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面，也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl His抗体（假如其WB检测的稀释比率是1:5,000，最终使用液相当于500ml），要比效价低的1ml的His抗体（假如WB检测的稀释比率是 1:200，最终使用液相当于2ml）性价比更高。因此在选择抗体的时候，不但需要考虑抗体的量，还需要考虑抗体的效价，即不同应用的建议稀释比率。 产品名称及描述 品牌 货号 产品详情 Anti-His Tag Mouse Monoclonal Antibody (5C3) Abbkine A02050 详情 HRP Conjugated Anti-His Tag Monoclonal Antibody (5C3) Abbkine A020
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标签抗体：如何选择合适的His标签抗体？
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白质的吸附纯化。由于分子量较小，并且较容易分离和纯化，His-tag 融合标签与其他标签相比有很多明显优势, 是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种。His抗体可以用于检测和His标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位，以及纯化、定性或定量检测His融合表达蛋白等。然而，目前商品化His-tag的单克隆抗体(mAb)种类不多, 且价格也十分昂贵。 如何选择合适的His标签抗体？ 我们在选择His抗体时，主要根据自己的需要，特别是实验应用上的需要。其中需要考虑的因素包括了，His抗体的应用检测类型、His抗体的克隆性及制备来源等。比如该His抗体是否能用于Western Bloting的检测？是否可以用于免疫荧光IF实验？我是否需要特异性更好的单克隆His标签抗体？我是否需要考虑下是选择小鼠来源的还是兔来源的His抗体？ 之前有使用SSS（一家著名品牌的His标签抗体，名称隐去）的His标签抗体，一开始还好，过了半年后，就发现产品质量不稳定，做IF实验不行了，后来试用了下Abbkine的，IF结果很漂亮，顺带还买了他们的DyLight荧光二抗 —— 广州南方医科大学一客户 一般来说，应用类型越多，在使用过程中的选择余地就越大，而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体。 另外，抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面，也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl His抗体（假如其WB检测的稀释比率是1:5,000，最终使用液相当于500ml），要比效价低的1ml的His抗体（假如WB检测的稀释比率是 1:200，最终使用液相当于2ml）性价比更高。因此在选择抗体的时候，不但需要考虑抗体的量，还需要考虑抗体的效价，即不同应用的建议稀释比率。 产品名称及描述 品牌 货号 产品详情 Anti-His Tag Mouse Monoclonal Antibody (5C3) Abbkine A02050 详情 HRP Conjugated Anti-His Tag Monoclonal Antibody (5C3) Abbkine A020
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胰腺癌研究体内外模型综述
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
胰腺癌的预后非常差，其致死率基本等同于发病率。在美国，胰腺癌的5年生存率依然只有6%。关键的问题是胰腺癌患者在早期基本无症状，被诊断发现时大多数都处在晚期；全球每年胰腺癌致死的病人超过20万人。 胰腺癌有多种类型，基本上划分成外分泌肿瘤和内分泌肿瘤两种。99%的胰腺癌都属于外分泌型肿瘤，其发病细胞来源于产生消化酶的胰腺细胞，该种类型有分为几种亚型。其中差不多85%为胰腺腺癌，其发源于胰腺导管，而其中的60-70%为胰头癌；另一种相对普遍的亚型是胰腺泡细胞癌，约占5%，类似内分泌类型肿瘤，常常过度产生某种特定类型的分子；囊腺癌在胰腺癌中约占1%，预后相对其他外分泌类型较好；胰胚细胞癌是比较罕见的类型，常发生于儿童；此外还有腺鳞癌、印戒细胞癌、肝样癌、胶样癌、未分化细胞癌、破骨细胞样巨细胞未分化癌。另外还有胰腺黏液性囊性肿瘤常常表现出不同的恶性程度，多数为良性。 研究过程中，为了验证基因的功能，我们常常需要做基因操作（过表达，干扰或者敲除），除了体外细胞水平验证以外，有些研究工作中还会涉及体内研究。由于细胞的不同特点，常常导致基因操作的难易程度不一样。慢病毒是一种非常高效的基因操作工具，不仅在细胞系中具有高效的表现，在做体内实验的时候，也会经常使用，比如原位组织注射研究基因的功能。下面我们就来看一看，胰腺癌研究中体内外模型的选择，以及病毒工具的应用吧～ 1、我需要哪种细胞模型？是否易于操作？ 在进行体外研究的时常常会采用各种细胞系，到目前为止，全球科学家建立了很多胰腺癌的细胞系，其中以胰腺腺癌为主。下表对主要的一些细胞系做了一个总结： *更多更全的预实验信息，可咨询当地业务员 2、细胞实验效果不错，那动物实验怎么做？ 动物模型可在肿瘤基础性研究和抗肿瘤研究中发挥重要作用。胰腺癌研究中，增殖方向常用的体内模型为裸鼠皮下成瘤，这里就不再赘述了。实验方法可参考出门左拐肝癌的总结文章，肝癌文章看这里～ 另外，
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如何选择合适的MBP标签抗体？
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
大肠杆菌麦芽糖结合蛋白（ Maltose Binding Protein，MBP）来源于大肠杆菌malE基因编码的蛋白，是细菌麦芽糖转运系统的成员之一，主要负责麦芽糖的摄取及分解代谢。malE基因产物能与多种蛋白融合，是进行表达研究的有效媒介，由于MBP融合蛋白原核表达载体具有表达效率高，易于纯化等优点。在现代分子克隆中MBP常作为融合蛋白被广泛应用。 如何选择合适的MBP标签抗体？ 我们在选择MBP抗体时，主要根据自己的需要，特别是实验应用上的需要。另外，一个抗体检测后的应用类型越多，在使用过程中的选择余地就越大；而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体。 另外，抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面，也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl MBP抗体（假如其WB检测的稀释比率是1:5000，最终使用液相当于500ml），要比效价低的1ml的MBP抗体（假如WB检测的稀释比率是 1:200，最终使用液相当于200ml）性价比更高。 产品名称及描述 货号 产品说明 Anti-MBP Tag Mouse Monoclonal Antibody （ 9Y5） A02070 详情 为什么推荐Abbkine品牌的MBP单克隆抗体（克隆号9Y5）？ 目前市面上能提供的MBP抗体有国产分装或原产的，国产分装的MBP抗体在质量稳定性上有不足，并且经过分装以后，其效价也有损失。而原产于国内实验室的MBP抗体有些具有较好的检测活性，但是在应用类型上有差距，并且在批次之间的稳定性上较难控制，而国内仅有的少量原产抗体也是多克隆抗体。至于原装进口供应MBP抗体的进口品牌有很多，像Abcam、Bio-Rad、Novus、Thermo等都有相关MBP抗体提供，但是其在性价比上远逊于Abbkine产品。 品牌 应用类型 规格/价格 Abbkine WB:1:1000-1:10000 ￥605/50ul;￥1800/200ul;￥7200/1ml Abcam WB:1:5000 ￥4304/100ul Thermo WB:1:1000-1:2000 ￥3649/50ul 由此，我们向您推荐Abbkine的Anti-MBP Tag Mouse Monoclonal Antibody （ 9Y5），与Abcam一样，Abbkine的MB
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如何选择合适的VSV-G标签抗体？
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
水泡性口炎病毒（ VSV）属于有包膜RNA病毒，以出芽的方式从宿主细胞的质膜上释放出来。来源于水泡性口炎病毒的融合性外壳G糖蛋白（ VSV-G）已被用于逆转录病毒和慢病毒载体中作为基因转移的重要手段。VSV-G标签（序列：YTDIEMNRLGK）来源于VSV-G蛋白的一部分，经常被用于融合在目的蛋白的N端或C端，并采用免疫组化方法方便观察。 图1：各类标签 如何选择合适的VSV-G标签抗体？ 我们在选择VSV-G抗体时，主要根据自己的需要，特别是实验应用上的需要。另外，一个抗体检测后的应用类型越多，在使用过程中的选择余地就越大；而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体。 另外，抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面，也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl VSV-G抗体（假如其WB检测的稀释比率是1:5000，最终使用液相当于500ml），要比效价低的1ml的VSV-G抗体（假如WB检测的稀释比率是 1:200，最终使用液相当于200ml）性价比更高。 产品名称及描述 货号 产品说明 Anti-VSV-G-Tag Mouse Monoclonal Antibody （14D2） A02180 详情 为什么推荐Abbkine品牌的VSV-G单克隆抗体（克隆号14D2）？ 目前市面上能提供的VSV-G抗体有国产分装或原产的，国产分装的VSV-G抗体在质量稳定性上有不足，并且经过分装以后，其效价也有损失。而原产于国内实验室的VSV-G抗体有些具有较好的检测活性，但是在应用类型上有差距，并且在批次之间的稳定性上较难控制，而国内仅有的少量原产抗体也是多克隆抗体。至于原装进口供应VSV-G抗体的进口品牌有很多，像Abcam、Bio-Rad、Novus、Thermo等都有相关VSV-G抗体提供，但是其在性价比上远逊于Abbkine产品。 品牌 应用类型 规格/价格 Abbkine WB:1:1000-1:10000; IF:1:200-1:2000; IP:1:100-1:500 ￥605/50ul;￥1800/200ul;￥7200/1ml Abcam WB:1:2000-
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如何选择合适的HA标签抗体？
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
HA标签系统利用一个HA (流感病毒血凝素，influenza hemagglutinin epitope: YPYDVPDYA)短肽肽融合到目标蛋白。HA标签可位于蛋白质的C端或N端，该系统已广泛应用于多种细胞类型，相应的HA标签抗体也被广泛应用。HA 标签抗体能特异识别C末端或N末端带有HA标签(HA-tagged)的融合蛋白，也可以用于检测和HA tag融合表达蛋白的表达、细胞内定位，以及纯化、定性或定量检测HA tag融合表达蛋白等。 选择合适HA标签抗体需要考虑的因素 我们在选择一个标签抗体时，主要根据自己实验应用上的需要。这里需要考虑的因素包括，HA抗体的应用检测类型、HA抗体的克隆性及制备来源等。比如该HA抗体是否能用于免疫荧光IF的检测？是否可以用于Western Bloting和免疫沉淀IP实验？是否需要HRP偶联的单克隆HA标签抗体？还是一个兔来源的HA多抗更合适？ 一般来说，应用类型越多，在使用过程中的选择余地就越大，而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性都要优于多克隆抗体，而多克隆。另外，抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面，也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl HA抗体（假如其WB检测的稀释比率是1:5000，最终使用液相当于500ml），要比效价低的1ml的HA抗体（假如WB检测的稀释比率是 1:200，最终使用液相当于200ml）性价比更高。因此在选择抗体的时候，不但需要考虑抗体的量，还需要考虑抗体的效价，即不同应用的建议稀释比率。 产品名称及描述 品牌 货号 产品说明 Anti-HA Tag Mouse Monoclonal Antibody (4F6) Abbkine A02040 详情 HRP Conjugated Anti-HA Tag Monoclonal Antibody (4F6) Abbkine A02045 详情 Anti-HA Tag Rabbit Polyclonal Antibody Abbkine A02041 详情 为什么选择Abbkine的HA单克隆抗体（货号A02040）？ 目前市面上能提供的HA抗体有国产分装或原产的；也有原装进口，诸如Thermo Pierce、Abcam、Sigma、Millipore等。国产分装的HA抗体在质量稳定性上有不足，并且经过分装以后，其效价
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