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如何选择合适的Myc标签抗体？
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
随着蛋白质组学的迅猛发展，重组蛋白质的使用在近年来大大增加。重组杂合体含有一个亲和标签如GST、Myc、His等，可用于辅助目标蛋白的纯化，这已经被广泛使用。利用融合蛋白有助于重组蛋白纯化和检测的这个有点被广泛认可。Myc标签相当于人的c-Myc 410-419位肽段（序列为：EQKLISEEDL）。Myc标签可放在C端或N端，但Myc重组蛋白的低pH洗脱条件往往会降低蛋白质的活力，因此 Myc标签系统广泛应用于检测但很少用于纯化。Myc标签已成功应用于WB杂交技术、免疫沉淀IP和流式细胞术中。因此可用于检测重组蛋白在细菌、酵母、昆虫细胞和哺乳细胞中的表达情况。 如何选择合适的Myc标签抗体？ 我们在选择一个标签抗体时，主要根据自己实验应用上的需要。这里需要考虑的因素包括，Myc抗体的应用检测类型、Myc抗体的克隆性及制备来源等。比如 该Myc抗体是否能用于免疫荧光IF的检测？是否可以用于Western Bloting和免疫沉淀IP实验？是否需要特异性更好的单克隆Myc标签抗体？ 一般来说，应用类型越多，在使用过程中的选择余地就越大，而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体，而多克隆抗体则具有亲和性更高的优势。另外，抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面，也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl Myc抗体（假如其WB检测的稀释比率是1:5,000，最终使用液相当于500ml），要比效价低的1ml的Myc抗体（假如WB检测的稀释比率是 1:200，最终使用液相当于200ml）性价比更高。因此在选择抗体的时候，不但需要考虑抗体的量，还需要考虑抗体的效价，即不同应用的建议稀释比率。 Abbkine的这支Myc标签抗体，我是用来做免疫沉淀实验的，效果还不错，与之前用的SSS（另一品牌，名称隐去）相比，效价要高很多，而且稳定性也很不错。因为有一次，半年以后拿出来在用，效果还是很好，因为价格也很便宜（我们当时直接找的Abbkine定制的1ml大包装），后来实验室一直在用。 ——华中农业大学 生科院客户
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发酵罐不锈钢钝化工艺对发酵罐内外表面的保护技术介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
发酵罐酸洗钝化的作用： 1清除各种型号奥氏体不锈钢工件的焊斑、锈斑、氧化皮焊接后产生的黄、蓝、黑色焊斑等污物。环保、无铬；不含铬酸盐等六价铬成份。优异的抗盐雾耐腐蚀能力，最高已通过NSS中性盐雾测试500H 2操作简单，使用方便、经济实用；特别适用于小型复杂工件。 3处理后工件统一均匀银白光亮，具有极强的装饰性。 4不含有害成份，PH值为酸性，对皮肤无刺激，提供极佳的清洗性能，保护使用者的健康。并且处理后的废药液只需中和后直接排放，对环境达到零污染。 5提高发酵罐对极端发酵醪的耐受性，保持罐体在各种状态下稳定性。 不锈钢酸洗钝化液的应用： 广泛应用于啤酒罐、压力容器、医疗器械、航天设备、核动力设备、各种移动通讯等五金件。全面针对不锈钢酸洗钝化处理，清除各类油污、锈、氧化皮、焊斑等污垢，处理后表面变成均匀银白色。 根据不锈钢的材质以及氧化皮严重程度不同，钝化液使用浓度为20%～100%；铁素体、镍含量低的奥氏体不锈钢（如200、201、202、300、301等）稀释后使用，镍含量较高的奥氏体不锈钢（如304、321、316、316L等）用原液浸泡；一般常温或加热后使用，浸泡5-10分钟或更长时间（具体时间和温度根据材质、外观不同而视情况确定），至表面污垢完全清除，成均匀银白色，形成均匀致密的银白色钝化膜为止，处理完成后取出并过水。 酸洗钝化原理： 不锈钢钝化膜具有动态特征，不应看作腐蚀完全停止，而是在形成扩散的保护层，通常在有还原剂(如氯离子)的情况下倾向于破坏钝化膜，而在氧化剂(如空气)存在时能保护和修复钝化膜。不锈钢放置于空气中会形成氧化膜，但这种膜的保护性不够完善，通过酸洗使不锈钢表面平均有厚度为10um的一层表面被腐蚀掉，酸液的化学活性使得缺陷部位的溶解率比表面上其他部位高，因此酸洗可使整个表面趋于均匀平衡，更重要的是，通过酸洗钝化，使铁及铁的氧化物比铬和铬的氧化物优先溶解，去掉了贫铬层，使不锈钢表面富铬，在氧化剂钝化作用下使表面产
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微载体细胞计数的难题与解决方案
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
细胞和病毒生产的放大培养面临挑战。当需要生产量增加千倍时，细胞培养瓶对于工业规模生产是不可行的。 微载体为生物反应器中贴壁细胞的生长提供了方便， 微载体充当贴壁细胞可附着的支架，允许它们增殖，而生物反应器使细胞-微载体复合体自由悬浮在培养基中。因此，贴壁细胞也可以像悬浮细胞那样生长，从而简化了放大培养，并允许利用现有的资源用于过程优化和生产。 微载体细胞计数的难题 细胞计数和活力是优化和监测大规模生物生产的关键参数。 传统方法的微载体的细胞计数耗时耗力，且计数结果不准确，需要离心样品、PBS重悬、胰蛋白酶消化细胞和台盼蓝或者结晶紫染色等多个步骤来计数在微载体上生长的细胞。 细胞计数影响因素： 步骤多，消耗时间长 细胞结团问题 胰酶消化不完全 细胞释放不完全 微载体干扰细胞计数结果 NucleoCounting提供微载体细胞计数难题解决方案 Nucleocounting是一种微载体细胞计数和活力分析的精确可靠的方法。Nucleocounting方法通过荧光染色细胞核的方法检测细胞，这些细胞用荧光染料DAPI进行标记，DAPI高度特异结合DNA，即使在有细胞碎片的情况下，也能精确检测细胞核。 通过独特的预包埋有荧光染料的Via1-Cassette™将细胞上样、荧光染色、腔体细胞计数组合到一个工作流程，然后将Via1-Cassette™装载到计算细胞数量和存活率的NucleoCounter® NC-200™机器卡槽中。 NucleoCounting节省微载体细胞计数的时间，计数精确可靠 与传统的胰蛋白酶消化方法相比，NucleoCounting工作流程的去除了几个离心，移液和孵育步骤。 整个细胞计数过程在不到5分钟内完成。 ReagengA100 可以完全将细胞从微载体上消化下来，消除细胞结团的影响。此外，微载体不含细胞核，不会被DAPI染料计数，不干扰细胞的计数结果。 此外，NuclecounterNC200产品符合GMP 要求，能够进行21CFRpart11 电子签名，提供3Q 认证，且该产品无需清洗和无需校正
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乳腺癌体内外模型总结
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
乳腺癌是指发生在乳腺腺上皮组织的恶性肿瘤。其中女性患者占99%，男性仅占1%，在女性肿瘤死亡率中，位于第二位。大多数乳腺癌为激素依赖性肿瘤，ER阳性乳腺癌约占全部乳腺癌的60~75%，其中约65%为PR阳性。其中有约10.0%～20.8%的患者其ER，PR和Her-2均为阴性，即为三阴性乳腺癌。三阴性乳腺癌由于其特殊的生物学行为和临床病理特征，并且发展迅速，预后非常差等特点，是人们研究乳腺癌的重中之重。那么乳腺癌如此多的种类，在研究过程中如何选择合适的模型呢？ 一、我需要哪种细胞模型？是否易于操作？ 虽然有多种细胞系可供参考，但是在研究过程中，对于三阴性的乳腺癌，常用的的细胞系为MDA-MB-231，而非三阴性常用的细胞系为MCF-7。慢病毒作为体外研究**的工具，在乳腺癌细胞系中也有很好的感染效果。 *更多更全的预实验信息，可咨询当地业务员 二、细胞实验效果不错，那动物实验怎么做？ 体内研究是高分文章所必需的。MCF-7和MDA-MB-231是常用于乳腺癌移植瘤研究的细胞系。今天给大家介绍两种乳腺癌体内研究常用模型：1）左心室注射模拟转移瘤模型；2）脂肪垫种植原位成瘤模型。 二、体内外模型选好了，那么我的实验需要使用哪种慢病毒载体对基因进行操作呢？ 启动子、荧光标记、抗性标签是我们选择载体需要考虑的三大要素。实验不同，这些元件也需要相应变化。对于乳腺癌研究来说，MGA是较为常用的乳腺肿瘤组织特异性启动子。按例祭出神图一张，定制你的专属载体，就是这么简单！ 上海吉凯基因化学技术有限公司成立于2002年，拥有BSL-2级别的慢病毒包装实验室。病毒生产线通过ISO9001质量管理体系验证，月均定制基因病毒产品包装超过1000次。慢病毒生产采用6项QC检测、病毒纯度分级纯化以及病毒滴度绝对定量检测确保病毒质量。 400名兢兢业业的吉凯人，用专业换您的高效。 PS：希望了解更多肿瘤工具指南的朋友们，可以关注“吉凯基因”微信公众号，更多精彩文章等您哦。 参考文献 【1】 Neve
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探究转录因子对于hESC代谢调控新机制研究
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
ESC在体外可无限自我更新和分化为机体内任何种类的细胞，在器官再生和细胞替代**中具有广阔的应用前景。然而，hESC维持自我更新及发育多能性的分子调控机制还有很多问题尚不清楚，妨碍了将其分化的细胞安全有效地应用于临床。因此，对人ESC如何维持其自身特性的机制进行深入的研究尤为重要。 研究思路 研究结果 1. 全基因组范围转录因子siRNA文库筛选 研究者首先获得了一种hESC细胞株SHhES8，然后对此进行了改造，最终得到了一种hESC报告细胞系。这种细胞系含有OCT4调控转录的GFP模块。研究者根据已经公开报道的数据库中转录因子信息，进行全基因组范围转录因子siRNA筛选。通过筛选得到了25种候选对于hESC自我更新重要的转录因子，其中OCT4，RUCBL2和SFRS2已经被报道。本研究揭示了很多新的对于hESC维持自我更新重要的转录因子。 2. PHB对于hESC的自我更新维持以及人体细胞的重编程是必须的 研究者选择了高Z score，敲低后引起严重分化的PHB作为重点研究对象。PHB在未分化的hESC中高表达，并随着hESC的分化表达降低。为了研究PHB在全局范围的影响，研究者分析了PHB基因敲低后转录组的变化，发现有3009个基因差异表达显著（fold change > 2, p
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原发性干燥综合征（pSS）相关的lncRNA表达模式研究
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
研究背景 原发性干燥综合征（pSS）是一种由于外分泌腺紊乱引起的自身免疫性疾病，最典型的临床表现为口眼由于唾液腺和泪腺原因而导致的异常干燥。LncRNA是目前转录组学研究的热点，但是，lncRNA是否与pSS的发病有关，目前还没有相关报道，来自上海第九人民医院的研究人员，通过唾液腺中lncRNA的表达模式研究，阐述了lncRNA在干燥综合征中的作用。 研究结果 1. pSS特异性差异表达lncRNA筛选 为了筛选和pSS疾病相关的lncRNA，研究人员用4个病人的唾液腺样本和正常配对样本进行lncRNA表达谱芯片筛选（SBC human lncRNA V5 array，伯豪提供），共筛选到1243个差异lncRNA和1457个差异mRNA。其中，有890个lncRNA和1141个mRNA表达上调，353个lncRNA和316个mRNA表达下调。因此，在pSS病人中，在转录组层面，确实有大量的lncRNA和mRNA表达异常。 为验证芯片结果可靠性，研究人员对其中的9个lncRNA，在额外的30个pSS病人和16个正常人的唾液腺样本进行了qRT-PCR验证。结果显示，除了n341833外，其他lncRNA差异都与芯片结果吻合。该结果很好地证明了从芯片筛选到的差异lncRNA的可靠性。 2. 差异lncRNA与临床指标关联分析 通过对上诉验证出来的差异lncRNA与临床指标关联分析，研究人员发现如微球蛋白，红细胞沉降率，RF，IgA, IgM等指标与相应的lncRNA表达存在关联。该结果表明，对于这些差异lncRNA，他们的表达可以作为潜在的临床诊断指标。 3. 差异mRNA功能预测 为理解pSS病人中差异表达mRNA的生物学功能，研究人员进行了GO和pathway富集分析。结果显示，上调的mRNA与质膜，突触免疫，MHC class II蛋白复合体相关，主要参与免疫反馈，炎症反馈等生物学功能，涉及到的通路包括graft-versus-host disease, cytokine-cytokine receptor interactions，cell adhesion molecules等。该结果很好地说明了在pSS病人唾液腺中相关免疫炎症相关的基因表达变化。 4. lncRNA与mRNA关联分析 为了进一步理解pSS中的差异表达lncRNA的生物
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血液肿瘤常用体内外模型总结&工具病毒使用指南
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
血液肿瘤主要包括各类白血病、多发性骨髓瘤以及恶性淋巴瘤。急性白血病占常见恶性肿瘤的第八位，淋巴瘤也是在前十位，并且发病率逐年升高，多发性骨髓瘤的整个发病率在血液恶性肿瘤里面占10%。 血液肿瘤发病急，在传统的放疗、化疗、骨髓移植等**方式下，**周期长、费用高昂、过程痛苦，但治愈率却并不很理想。儿童白血病是儿童发病率最高的一种恶性肿瘤，近几年临床病例数量更是在逐年上升，已成为儿童肿瘤中的头号杀手。因此，血液肿瘤的**研究是当务之急。针对血液肿瘤的研究少不了细胞和动物模型的加持。怎么选择这些工具能够帮助我们更好的进行研究，获得阳性数据，发表论文，申请基金，登上人生巅峰，你有了解吗？ 一、我需要哪种细胞模型？是否易于操作？ 研究过程中，为了验证基因的功能，我们常常需要做基因操作（过表达，干扰或者敲除）。但由于血液肿瘤细胞悬浮生长的特性，大大增加了基因操作的难度。慢病毒是一种非常高效的基因操作工具，在大部分悬浮细胞系中也具有不错的表现。下面帮大家总结了一些常用血液肿瘤细胞的特性，以及慢病毒的应用情况： *更多更全的预实验信息，可咨询当地业务员 悬 浮 细 胞 感 染 小 贴 士↓↓↓ 如果细胞MOI>>100，怎么办？吉凯对于难感染的悬浮细胞，也有办法： 1. 初级版：采用离心感染方法，增加病毒感染时与细胞的接触，从而提高感染效率。如将细胞培养板密封后，用平角转子离心机1000g离心15min-1h，再放回培养箱中正常培养； 2. 进阶版：使用GMP级慢病毒。尤其对于一些原代分离的细胞，可通过使用高纯度的病毒减小病毒感染对细胞的影响，从而提高感染效率。吉凯拥有国内唯一基因工程载体GMP生产车间，特殊纯化工艺保证临床级慢病毒的纯度和滴度； 3. 终极版：如果是做CAR-T的老师，还可配合使用吉凯自有专利的CAR-T细胞感染试剂盒，可保证T细胞病毒感染效率在40%-80%。 二、细胞实验效果不错，那动物实验怎么做？ 稳定性、重复性较好的动物模型可在肿瘤基础
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前列腺癌研究体内外模型综述
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
前列腺癌是发生于男性泌尿生殖系统中前列腺组织中的恶性肿瘤，是前列腺腺泡细胞异常无序生长的结果。前列腺癌的发病率具有明显的地理和种族差异。在欧美等发达国家和地区，发病率居男性恶性肿瘤第一位，其死亡率居各种癌症的第二位；在亚洲，其发病率低于西方国家，但近年来呈迅速上升趋势。在我国，绝大多数的患者在就诊时已经属于前列腺癌晚期，5年生存率不足美国的1/3。 95%以上的前列腺癌是发生于前列腺腺体组织的腺癌。在前列腺癌的诊断中，血清前列腺特异抗原（PSA） 在大多数有临床意义的前列腺癌中都会升高，因此是应用最广和最重要的前列腺癌早期检测指标。PSA正常值一般10ng/mL，具有辅助临床诊断的显著意义。目前，基于分子水平进行前列腺癌的研究，探索前列腺癌的发生、转移、耐药的机制，以适应更多临床个性化化诊疗需求，是当下研究的热点。 子曰：“工欲善其事，必先利其器。”想做好前列腺癌的研究，疾病模型和基因操作工具不可或缺。且听在下慢慢道来。 一、我需要哪种细胞模型？是否易于操作？ 俗话说，实验要想做好，细胞必不可少。细胞模型三个优点：周期短，背景干净，易出结果。引用季博的话，临床科研第一步，先找合适的细胞模型。 注意了！吃瓜群众们，先把瓜放一放。前列腺癌作为男性泌尿生殖系统的肿瘤，与雄激素密切相关。不同的癌细胞，其AR（雄激素受体）表达水平、雄激素依赖性以及雄激素应答，都各有不同。在研究中，经常会涉及基因与雄激素相关的探索，因此，细胞系的选择尤为重要。以下列出了前列腺癌常见的细胞系，以及其雄激素相关的特性。 *更多更全的预实验信息，可咨询当地业务员 二、细胞实验效果不错，那动物实验怎么做？ 细胞实验做完，想发高分文章？没有体内实验数据的证实怎么行！前列腺癌动物模型可以分为皮下成瘤和原位成瘤两种。皮下瘤的模型与其他肿瘤类似，但如果想做原位瘤研究，那么需要注意以下几点：a.一定一定一定要买雄鼠（别问我为什么）b. 前列腺组织很
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微生物生长与死亡的影响因素
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
生长是微生物与外界环境因素共同作用的结果。环境条件的改变，可引起微生物形态、生理、生长、繁殖等特征的改变；或者抵抗、适应环境条件的某些改变；当环境条件的变化超过一定极限，则导致微生物的死亡。 为了抑制和消除微生物的有害作用，人们常采用多种物理、化学或生物学方法，来抑制或杀死微生物。常用以下术语来表示对微生物的杀灭程度。 灭菌：用物理或化学方法杀灭物体上所有的微生物（包括病原微生物和非病原微生物及细菌芽胞、霉菌孢子等），称为灭菌。 消毒：用物理或化学方法仅能杀灭物体上的病原微生物，而对非病原微生物及芽胞和孢子不一定完全杀死，称为消毒。用来消毒的药物称为消毒剂。 防腐：防止或抑制微生物生长和繁殖的方法称为防腐或抑菌。用于防腐的化学药品称为防腐剂。某些化学药物在低浓度时为防腐剂，在高浓度时则成为消毒剂。 无菌：指没有活的微生物存在。采取防止或杜绝一切微生物进入动物机体或物体的方法，称为无菌法。以无菌法操作时称为无菌操作。在进行外科手术或微生物学实验时，要求严格的无菌操作，防止微生物的污染。 不同的微生物对各种理化因子的敏感性不同，同一因素不同剂量对微生物的效应也不同，或者起灭菌作用，或者可能只起消毒或防腐作用。在了解和应用任何一种理化因素对微生物的抑制或致死作用时，还应考虑多种因素的综合效应。例如在增高温度的同时加入另一种化学药剂，则可加速对微生物的破坏作用。大肠杆菌在有酚存在的情况下，温度从30℃增至42℃时明显加快死亡；微生物的生理状态也影响理化因子的作用。营养细胞一般较孢子抗逆性差，幼龄的、代谢活跃的细胞较之老龄的、休眠的细胞易被破坏；微生物生长的培养基以及它们所处的环境对微生物遭受破坏的效应也有明显的影响。如在酸或碱中，热对微生物的破坏作用加大，培养基的粘度也影响抗菌因子的穿透能力；有机质的存在也干扰抗微生物化学因子的效应，或者由于有机物与化学药剂结合而使之失效，或者有机质覆盖
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nature发布论文关注点总结
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
想近期发nature的老师看过来 这期的nature（12月8日）有意思的文章不少。比如用光来治老年痴呆，哈哈（想到广场舞的评论了，抱歉抱歉）。不过今天季博不分享那篇文章，而是分享另外三篇，分享的目的不是让大家了解具体的思路和怎么做，而是给大家看下nature现在关注的点。 季博在讲座中说，课题设计完整加上创新性OK只是5分文章的要求，也是现在国自然面上项目的最基本要求。如果要10分以上，那么需要探索机制的深度，做到直接互作。如果要上20分以上，那么就需要探索机制的热度。 所以去年5月份季博写了一篇文章“机制上的那些事儿”，目的是告诉大家要关注机制上的点。写到splicing时，说，当年差点火了，但由于技术有难度，没火得起来。然后去年8月份开始，nature就大量发splicing文章了。所以，去年季博在qq上吼“有没老师想近期发nature的，赶紧看看您的基因是否在这个点上”。今年nature的兴趣点往啥地方走了呢。如果今年您跟季博交流过，您估计早知道了吧。翻译调控。 m6A modulates neuronal functions and sex determination in Drosophila. 2016. Nature. m6A potentiates Sxl alternative pre-mRNA splicing for robust Drosophila sex determination. 2016. Nature. Intronic polyadenylation of PDGFRα in resident stem cells attenuates muscle fibrosis. 2016. Nature. 第一篇文章，做的是RNA的m6A修饰，这个修饰作为转录后调控，在pre-mRNA splicing、mRNA decay和翻译中发挥作用。为啥季博能够预期翻译调控是nature下一个关注点呢，这地方是原因之一。 第二篇文章，还是做m6A修饰，在pre-mRNA splicing中的作用。算是pre-mRNA splicing与翻译调控的交集或过渡。m6A修饰在翻译调控中的作用已经有人在进行探索了。 还有一个事情，以上两篇文章都是做的线虫。在“从韩春雨老师的工作想到的”文章中季博建议，找药物到天然产物中去寻找。找关键功能基因，到低等生物中找找思路。不管张锋还是谁，一开始
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2015 版《中国药典》农残检测的解决方案以及方法包介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
2015 版《中国药典》农残检测的解决方案以及方法包介绍 三重四极杆串接气质 目 录 一. 方法包简介 二. 仪器简介 三. 化合物简介 四. 相关政策及法规 五. 仪器和设备 六. 样品前处理方法 七. 方法包使用简介 八. 应用文章 一．方法包简介 方法包是色谱质谱部应用部门针对客户需求提出的简易仪器使用流程，方法包内所涉及的化合物均为常见的能在 GC/MS 上检测的化合物，如农药残留、多环芳烃、多氯联苯、多溴联苯和多溴联苯醚、邻苯二甲酸酯等。方法包的作用就是能使客户更快更简便得使用仪器，尽快上手。 方法包包括进样方法、数据处理方法（TraceFinder 方法文件夹）、相关应用文章、相关标准、色谱柱信息、前处理方法、数据文件等，客户可以直接调用进样方法和数据处理方法完成化合物的定性定量分析。 由于 Thermo ScientificTM TSQ 8000 Evo 采用 T-SRM 进样方法而不是分时间段的扫描方法，原来的进样的方法可以直接调用，即使保留时间会有微小的偏差，也不会影响最终的结果。另外，TraceFinder 软件自带的数据库可以直接编辑数据处理方法，数据库里包括化合物的名称、离子对、碰撞能量、定量离子、定性离子、CAS 号等信息。同时，TraceFinder 软件可以根据数据处理方法自动关联生成 TSQ 8000 Evo 的方法文件。这样应用 TraceFinder 就可以直接生成数据处理方法和进样方法。整个过程都是自动化的，几乎不需要操作者手动输入任何操作信息。 方法包（Method Kit） 对于常用分析化合物，我们可以提供方法包。 包括：邻苯二甲酸酯、PCB、PAH、PBDE、农残筛查、GB2763、药典中农残 检测、烟草中农残、PM2.5、香港规管方案、亚硝胺、二恶英等。 目的：上手方便，直接使用。 二．仪器简介 TSQ 8000 Evo 三重四极杆串接气质联用仪 秉承着在气相色谱三重四极杆质谱中技术的一贯领先优势，Thermo Fisher Scientific 在推出 TSQ 8000 之后再次创新，推出了更新的一款气相串接质谱仪 TSQ 8000 Evo，该款高效的
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Molecular Devices核酸及蛋白质检测方法集锦（上）
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
如何能够准确和灵敏对核酸及蛋白质进行定量检测是许多实验成败与否的重要环节。Molecular Devices. 酶标仪为核酸及蛋白质检测提供了多种可靠方案。结合SoftMax Pro. 软件强大的数据处理功能，可一键生成定量结果，并可根据用户需求定制格式并导出数据。 使用SpectraMax 酶标仪和Quant-iT PicoGreen荧光试剂测定双链DNA 使用具有紫外光吸收功能的SpectraMax酶标仪测定DNA和RNA含量 使用CyQUANT 细胞增殖试剂盒测定细胞增殖情况 专利的光径自动校正技术可将检测OD值校正至标准1 cm比色皿光径的读值 使用NanoOrange 荧光法测定蛋白质含量 使用Bradford 和 ELISA 法测定蛋白质含量 使用荧光法对微量DNA样品进行定量检测 点击此处下载应用文章
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Molecular Devices核酸及蛋白质检测方法集锦（下）
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
如何能够准确和灵敏对核酸及蛋白质进行定量检测是许多实验成败与否的重要环节。Molecular Devices® 酶标仪为核酸及蛋白质检测提供了多种可靠方案。结合SoftMax Pro® 软件强大的数据处理功能，可一键生成定量结果，并可根据用户需求定制格式并导出数据。 基于SpectraDrop 微量检测板的直接蛋白量 基于SpectraDrop微量检测板的低体积荧光核酸定量 如何利用SpectraDrop超微量微孔板进行DNA定量检测 点击此处下载应用文章
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基于气相色谱–高分辨 Orbitrap 质谱技术的高效大规模农残分析
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
基于气相色谱 – 高分辨 Orbitrap 质谱技术的高效大规模农残分析 Dominic Roberts,1 Hans Mol,2 Marc Tienstra,2 Cristian Cojocariu,1 and Paul Silcock1 1Thermo Fisher Scientific，Runcorn，UK 2RIKILT – Wageningen UR，Wageningen，The Netherlands 关键词 准确质量；复杂基质；GC Orbitrap 质谱；农残分析；QuEChERS；筛查；TraceFinder 软件 前言 全世界都在使用农药来提高作物产量，农药的使用对保证足够的全球食物供应至关重要。然而，对于消费者以及致力于食品安全保障的政府部门来说，如此广泛的农药使用及其在最终产品中残留的可能性，都是心头之患。 因此，法律法规保障消费者不会接触到受农药污染的食物。这些法律法规要求对食物中出现的农药进行种类和数量的监测，并针对具体商品种类给出每种农药允许的最大残留值（MRL）。由于化合物和商品种类组合的数量巨大，给实现准确可靠的常规监测带来很大挑战。 实验室一直在面对不断增长的分析压力，必须以高速度和有竞争力的成本在单次样本分析中实现广谱农药筛查。绝大多数实验室都会借助气相色谱或液相色谱与质谱联用仪器以及定靶分析的策略。这类方法的确能够在较大范围内覆盖需监测的化合物种类并达到所需灵敏度和选择性。然而，它们只局限于目标列表中的化合物，这些化合物通常是根据残留量规定和法律法规的要求来选择的，主要是为了证明被检测的食物样本适合食用。这些定靶分析技术通常需要事先仔细地为每种化合物优化采集参数以及采集时间窗口以确保有效检测。为了扩展分析的视野，近年来使用高分辨全扫质谱法的化合物筛查方法开始受到青睐。 这些筛查方法使用非定靶的分析策略，先运行一个普通的全扫采集，然后再根据所用的数据库进行定靶数据处理。虽然数据分析也是根据目标化合物列表进行的，不过即便并未在数据采集时专门筛查这些未知化合物，仍然可以在数据回溯分析中对未知化合物进行分析。 为使这一方法适用于常规分析，数据筛查处
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细菌在培养基上的生产特性
作者：德尔塔 日期：2022-04-22
1．固体培养基 标本或液体培养物划线接种到固体培养基表面后，单个细菌经分裂繁殖可形成一个肉眼可见的细菌集团，称为菌落（colony）。 (1)菌落的形态特征： 大小、形状（露滴状、圆形、菜花样、不规则等）、突起或扁平、凹陷、边缘（光滑、波形、锯齿状、卷发状等）、颜色（红色、灰白色、黑色、绿色、无色、黄色等）、表面（光滑、粗糙等）、透明度（不透明、半透明、透明等）和粘度等。据细菌菌落表面特征不同，可将菌落分为3型： ①光滑型菌落（S型菌落）：菌落表面光滑、湿润、边缘整齐，新分离的细菌大多呈光滑型菌落。 ②粗糙型菌落（R型菌落）：菌落表面粗糙、干燥、呈皱纹或颗粒状，边缘大多不整齐。R型菌落多为S型细菌变异失去菌体表面多糖或蛋白质形成。R型细菌抗原不完整，毒力和抗吞噬能力都比S型细菌弱。但也有少数细菌新分离的毒力株就是R型，如炭疽孢杆菌、结核分枝菌等。 ③粘液型菌落（M型菌落）：菌落粘稠、有光泽、似水珠样。多见于厚荚膜或丰富粘液层的细菌、结核杆菌等。 (2)菌落溶血特征： 菌落溶血有下列3种情况： ①α溶血：又称草绿色溶血，菌落周围培养基出现1~2mm的草绿色环，为高铁血红蛋白所致； ②β溶血：又称完全溶血，菌落周围形成一个完全清晰透明的溶血环，是细菌产生的溶血素使红细胞完全溶解所致； ③γ溶血：即不溶血，菌落周围的培养基没有变化，红细胞没有溶解或缺损。 (3)色素：有些细菌产生水溶性色素，使菌落和周围的培养基出现绿色、金黄色、白色、橙色、柠檬色等颜色，产生的色素有水溶性或脂溶性。 (4)气味：某些细菌在培养基中生长繁殖后可产生特殊气味，如铜绿假单胞菌（生姜气味）、变形杆菌（巧克力烧焦的臭味）、厌氧梭菌（腐败的恶臭味）、白色假丝酵母菌（酵母味）和放线菌（泥土味）等。 2．液体培养基 细菌在液体培养基中有3种生长现象：大多数细菌在液体培养基生长繁殖后呈均匀混浊；少数链状排列的细菌如链球菌、炭疽芽胞杆菌等则呈沉淀生长；枯草芽胞杆菌、结
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