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elisa试剂盒样本处理的具体方法

elisa试剂盒样本处理的具体方法

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

elisa试剂盒样本处理的具体方法1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

有哪些常见的血清问题

有哪些常见的血清问题

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

血清在运输和保存的过程中,会出现很多问题,面对这些常见问题,今天我们为您分享解决方法: 1、血清的成份可能有几百种之多,目前对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚,尤其是对其中一些多肽类生长因子、激素和脂类等尚未充分认识,这给研究工作带来许多困难。    2、血清都是批量生产,各批量之间差异很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保证每批血清的相似性极为困难,从而使实验的标准化和连续性受到限制。    3、对大多数细胞,在体内状态,血清不是它们接触的生理学液体,只是在损伤愈合以及血液凝固过程中才接触血清,因此使用血清有可能改变某种细胞在体内的正常状态,血清可能促进某些细胞的生长(成纤维细胞)同时抑制另一类细胞生长(表皮细胞)。    4、血清含一些对细胞产生毒性的物质,如多胺氧化酶,能与来自高度繁殖细胞的多胺反应(如精胺、亚精胺)形成有细胞毒性作用的聚精胺。补体、抗体、细菌毒素等都会影响细胞生长,甚至造成细胞死亡。    5、动物个体不同,血清产地、批号不同,每批质量差异甚大,其成分不能保持一致。  6、取材中可能带入支原体、病毒,对细胞产生潜在影响,可能导致实验失败或实验结果不可靠性。    7、大规模生产中,血清来源越来越困难,价格昂贵,是构成动物细胞培养对生产成本的主要部分之一。

德尔塔生物教您elisa试剂盒代测样本抗凝管选择

德尔塔生物教您elisa试剂盒代测样本抗凝管选择

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

德尔塔生物教您elisa试剂盒代测样本抗凝管选择1.枸橼酸钠凝血试验管:浅蓝色头盖,枸橼酸钠主要通过与血液标本中Ca2+螯合而起抗凝作用。适用于凝血试验,国家临床实验室标准化委员会(national committee for clinical laboratory standards,NCCLS)推荐的抗凝剂浓度是3.2%或3.8%(相当于0.109mol/L或0.129mol/L),抗凝剂:血液=1:9。(普通血清管)-红色头盖,采血管中不含添加剂,用于常规血清生化,血库和血清学相关检验。2.枸橼酸钠血沉试验管:黑色头盖,血沉试验要求的枸橼酸钠浓度是3.2%(相当于0.109mol/L),抗凝剂:血液=1:4。(快速血清管)-橘红色头盖,采血管内有促凝剂,可激活纤维蛋白酶,使可溶性纤维蛋白变为不可溶的纤维蛋白多聚体,进而形成稳定的纤维蛋白凝块。快速血清管可在5min内使采集的血液凝固,适用于急诊血清系列化试验。3.EDTA抗凝管:紫色头盖,乙二胺四乙酸(EDTA,Mr:292)及其盐是一种氨基多羧基酸,可以有效地螯合血液中的Ca2+,螯合钙或将钙反应位点移去将阻滞和终止内源性或外源性凝血过程,从而防止血液标本凝固。适用于一般血液学检验,不适用于凝血试验、血小板功能检查、Ca2+、K+、Na+、Fe3+、碱性磷酸酶、肌酸激酶、亮氨酸氨基肽酶的测定及PCR试验。(惰性分离胶促凝管)-金黄头盖,采血管内添加有惰性分离胶和促凝剂。标本离心后,惰性分离胶能够将血液中的液体成分(血清或血浆)和固体成分(红细胞,白细胞,血小板,纤维蛋白等)彻底分开并完全积聚在试管*而形成屏障,标本在48小时内保持稳定。促凝剂可快速激活凝血机制,加速凝血过程,适用于急诊血清生化试验。4.(肝素抗凝管)-绿色头盖,采血管内添加有肝素。肝素直接具有抗凝血酶的作用,可延长标本凝血时间。适用于红细胞脆性试验,血气分析,红细胞压积试验,血沉及普能生化测定,不适于做血凝试验。过量的肝素会引起白细胞的聚集,不能用于白细胞计数。因其可使血片染色后背景呈淡蓝色,故也不适于白细胞分类。5.(血浆分离管)-

制成免疫荧光容易出现的问题和注意事项

制成免疫荧光容易出现的问题和注意事项

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

在制作原代细胞免疫荧光时,容易出现一些问题,造成荧光鉴定失败,将抗原或抗体标记上荧光素,制成荧光抗体检测组织或细胞内的相应抗原(或抗体)时,一定要注意抗体的比例高低和浓度。 制作免疫荧光常用的方法有: 方法一:直接法 步骤:将荧光标记的特异性抗体(抗原)直接加在抗原(抗体)上,经一定的温度和时间染色,水洗—干燥—封片—镜检 优点:操作简便、特异性高、非特异性染色少 缺点:敏感性低 方法二:间接法 步骤:先用已知未标记的特异性抗体(一抗)与抗原反应,再用标记的抗体(二抗)与其反应,形成抗原—抗体—抗体复合物,水洗—干燥—封片—镜检 优点:敏感性强,目前多采用间接法 缺点:操作复杂 实验过程中常见的问题: 1,整个细胞片都出现荧光高点 原因有二:一是二抗浓度过高,适当降低二抗浓度即可。二是二抗发生沉淀,可以使用过滤或者离心荧光标记二抗 2,信号弱或无信号,染色细胞过少 目标蛋白在细胞中没有表达,需要制备细胞裂解液,用Western   Blotting验证目标蛋白在细胞中是否表达。 表达目标蛋白的细胞过少,标本中使用更多的细胞,试用其他瞬时转染方法,或者使用稳定转染细胞系。 细胞通透性差,需要增加通透剂作用的时间或者浓度,或改用其它的通透剂 染色前的固定步骤破坏了抗原表位,改用其他固定方法。 通透使抗原丢失,可以减少通透剂作用的时间或强度。 抗体不识别,需要换用其他抗体 一抗稀释度过大,使用同一样品按*的二抗用量作一抗稀释曲线,以确定*的一抗稀释比例。 二抗选择错误,要使用正确的二抗 3,镜下观察只有DAPI的蓝光,目的荧光几乎没有或者很弱 出现这种现象很有可能是抗体比例太低,需提高抗体浓度,可配合提高二抗浓度;共聚焦的激发荧光强度不够大;二抗孵育时是否是对应的种属,比如本来需要山羊抗鼠结果加为山羊抗兔。 4,细胞核周围总是存在有一些蓝色的小点点 这种情况一般是支原体污染所致,建议用杀支原体药2周后再检测,或者通

养细胞需要注意的细节

养细胞需要注意的细节

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

养细胞可谓是个精细活,从事养细胞的人都知道养细胞的时候一旦不注意,就很容易造成细胞污染,所以想要养好细胞除了小心谨慎以外,还要提前做好准备: 细胞培养前的准备 1)在带上手套开始细胞培养之前,先检查一下移液管和瓶子的数量是否充足,以免在开始实验后再次出入操作台,这样可以降低细胞污染的风险。 2)细胞培养基也应先预热,选择只预热部分培养基而非整瓶加热,不但可以节约实验时间,而且可以避免因反复加热培养基而造成的蛋白质降解。 3)结束操作后,别忘了培养基对光敏感,应尽可能避光保存。 细胞培养的定期检查 1)定期检查培养细胞的形态,即形状和外观,对于细胞培养实验取得成功至关重要。 2)除确认细胞的健康状态外,每次操作细胞时通过肉眼和显微镜检查细胞还可早期发现污染征象,避免污染扩散至实验室其他细胞。        细胞变质的征象 1)细胞变质的征象包括核周出现颗粒、细胞与基质解离以及细胞质空泡形成。        2)这些变质征象可能为多种原因所致,例如:培养物污染、细胞系衰老或培养基中存在毒性物质,或者这些征象仅表明培养物需要更换培养基。        3)变质严重时将会成为不可逆的变化。        细胞培养通风橱的消毒及布局        1)保持细胞培养通风橱内的整洁有序,将所有物品置于直视范围内。        2)向放入通风橱内的所有物品喷洒70%乙醇,擦拭清洁进行消毒。        3)在通风橱中部开阔处放置细胞培养容器;移液器置于右前方易于取用;试剂和培养基置于右后方便于吸取;试管架置于中后部;小型容器置于左后部用于盛放废液。        培养瓶/皿等物品的无菌操作        1)无菌培养瓶、试剂瓶、培养皿等物品使用时方可揭开盖子,不得将其开放暴露于环境中,操作完成后尽快盖上盖子,取下盖子时应将盖子开口朝下放在工作台面上。        2)进行无菌操作时不要说话、唱歌或吹口哨。尽快完成实验,以尽量避免污染。        细胞培养中可能的污染物        1)细胞培养污染物

江苏省与浙江省实验动物许可证发放及管理现状对比

江苏省与浙江省实验动物许可证发放及管理现状对比

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

目的: 比较近五年江苏省和浙江省实验动物许可证发放情况,研究两省实验动物许可证管理现状及行业发展水平差异。方法: 采取现况调查、文献调查、信息研究、比较研究相结合的方法,从每年发放情况、环境设施级别、机构类型划分、机构区域分布等多方面研究五年内两省实验动物许可证的发放情况之异同。结果: 五年内,江苏省实验动物许可证发放数、批准机构数均明显超过浙江省;江苏省屏障环境设施比例略高于浙江省;两省内实验动物机构覆盖辖区内绝大部分城市,但相对集中在省会及经济发达地区;两省内均为企业类型机构占比zui高;两省实验动物种类大致相同,浙江省监管种类更为丰富。结论: 江苏省实验动物产业结构较浙江省更为完善,产业化社会化程度更高,但需进一步扩大实验动物监管种类。另外,主管部门还需进一步优化推进实验动物许可证管理制度。

细胞转染的类型及方法

细胞转染的类型及方法

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

转染(Transfection)是指将DNA或者RNA导入真核细胞中的过程。转染的目的是产生重组蛋白,或特异性增强或抑制转染细胞中的基因表达。细胞转染有哪些类型和方法呢? 1)根据导入的核酸存在于宿主细胞的时间长短,可以分为瞬转和稳转。         瞬转 稳转 导入的DNA没有整合到基因组中,而是保留在细胞核上 导入的DNA整合到基因组中 导入的遗传物质不传递到子代; 遗传改变只是暂时的 导入的遗传物质能够代代相传;遗传改变是*的 不需要选择性筛选 需要选择性筛选出稳定转染的细胞 DNA载体和RNA都可用于瞬时转染 只有DNA载体可用于稳定转染;RNA本身不能稳定地导入细胞中 导入的遗传物质的高拷贝数导致高水平的蛋白质表达。 单拷贝数或低拷贝数的稳定整合的DNA导致较低水平的蛋白质表达。 通常在转染后24-96小时内收获细胞。 需要2-3周的时间筛选出稳定转染的细胞克隆。 通常不适合使用具有诱导型启动子的载体的研究。 适用于使用带有诱导型启动子的载体的研究。        2)根据转染方式可以分为化学,生物,物理方法。          转染类型 转染方法 原理 应用 特点 化学转染法 磷酸钙法 磷酸钙DNA复合物吸附细胞膜被细胞内吞 稳转, 瞬转 不适用于原代细胞,操作简便但重复性差,有些细胞不适用 阳离子 脂质体法 带正电的脂质体与核酸带负电的磷酸基团形成复合物被细胞内吞 稳转, 瞬转 所有细胞 适用性广,转染效率高,重复性好,但转染时需除血清。转染效果随细胞类型变化大 DEAE-右旋糖苷法 带正电的DEAE-右旋糖苷与核酸带负电的磷酸骨架相互作用形成的复合物被细胞内吞 瞬转 相对简便、结果可重复,但对细胞有一定的毒副作用,转染时需除血清 生物转入法 病毒介导法 通过侵染宿主细胞将外源基因整合到染色体中 稳转 可用于难转染的细胞、原代细胞,体内细胞等 逆

抗原elisa试剂盒实验常用结果判定的方法

抗原elisa试剂盒实验常用结果判定的方法

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

1.抗原elisa试剂盒定性测定     (1)阳性判定值法(cut-off value,CO值):一般为阴性对照的平均A值加一个常数,试剂制备严格标准化,要先计算出阳性对照A值平均数和阴性对照A值平均数。标本A值≥CO值即为阳性。     (2)抑制率法:在竞争抑制法中结果可用抑制率表示。     抑制率(%)=(A阴性对照A- A待测)/阴性对照X100%,一般以抑制率≥50%为阳性     2。半定量测定  结果一般以滴度表示。将标本连续稀释后,进行ELISA检测,在阳性临界值以上的zui高稀释度即为该标本的“滴度”。     3。定量测定  即用己知量的标准品作一系列稀释后进行ELISA测定,与待测标本同时进行测定,绘制标准曲线,抗原elisa试剂盒结果以量或活性单位表示之。 250    Acid L-G medium Base    适用于碱性物质处理的结核杆菌标本    酸性L-G培养基基础 250    Alkaline L-G medium Base    适用于酸性物质处理的结核杆菌标本    碱性L-G培养基基础 0.1        加入改良罗氏培养基中制成TCH培养基,用于分枝杆菌鉴定    TCH(噻吩-2-羧酸酰肼) 250        用于炭疽杆菌的培养及初步鉴定    戊烷脒多粘菌素B琼脂基础 250        用于炭疽杆菌的荚膜培养    碳酸氢钠琼脂基础 250        用于炭疽杆菌的分离鉴别    指示选择性培养基基础 250    PLET Agar Base    用于炭疽杆菌的分离鉴别    PLET 琼脂基础 50mg        加入戊烷脒多粘菌素琼脂    戊烷脒 50人份/5支        炭疽杆菌检测用配套试剂    炭疽杆菌疫苗 抗原elisa试剂盒

如何解决干细胞存活率低的问题?

如何解决干细胞存活率低的问题?

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

在解冻冻存干细胞时,发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题, 是什么原因导致,该怎么进行解决?现在我们大家一起往下看吧。或许能给您的实验问题的解决找到答案! 低存活率 出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下: 1.解冻过程中细胞裂解 推荐的解决方案:可预期到一定量的细胞死亡,因此细胞的浓度应足够高,考虑到这一损失。起始浓度为106至107细胞/毫升。 2.解冻过程中的问题 推荐的解决方案:在-70℃至-80℃下保存冷冻的培养物,保存时间为1-5天,但这不是保存的方法。在37℃充分解冻后应立即开始培养。 3.对冷冻液过敏 推荐的解决方案:A.完全或部分更换培养基,减少培养基中冷冻液的量。在24小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。 B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物,取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的*条件在对数期。 4.被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄 推荐的解决方案:解冻zui近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长,存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。 大量细胞碎片 出现大量细胞碎片的可能原因及推荐解决方案如下: 1.冷冻时细胞密度过低 推荐的解决方案:缩短解冻过程中的时间。将细胞取出后,立即将冻存管浸入在37℃的水浴中,并震荡至全部融化,然后迅速地转移到预热的培养基中。 2.不适当的冷冻过程 推荐的解决方案:解冻不同冷冻室总的试管。确保在冻存过程中采用的适当的技术,并确保使用了适量和适合的冷冻液。 生长缓慢 出现生长缓慢的可能原因及推荐解决方案如下: 1.培养瓶的大小 推荐的解决方案:一些细胞在培养基中倾向于维持一定的密度。将培养物转移到较小的培养瓶中,使干细胞密度上升;如,根据培养基的体积,从75cm2的烧瓶转移到2或3个25cm2的烧瓶中。 2.细胞密度过低 推荐的解决方案:提高未来冷冻物种细胞的冻存密度,或使用较小的培养容器,或解冻

支原体、细菌和病毒污染控制产品为何选择Minerva

支原体、细菌和病毒污染控制产品为何选择Minerva

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

Minerva Biolabs GmbH 公司是世界的微生物污染控制公司,特别是支原体和军团菌的技术和产品,在世界上遥遥。公司总部设立于德国柏林,专注微生物污染检测与清除产品的研发和销售。公司创始人来自于闻名的罗伯特·科赫微生物研究所。 Minerva公司zui引以为豪的研发核心,体现在细胞培养和生物制药领域的支原体、细菌和病毒污染控制。此外,Minerva研发的用于『PCR诊断法的专业工具和试剂』,不仅可以检测饮料中的微生物污染,还可以用于检测未申报的肉类制品以及清真、素食产品的质量控制。再加上『验证PCR仪合格性的试剂』以及『清除PCR实验室DNA污染的试剂』,多种产品完整了Minerva的产品线,能够满足客户全方面的需求。在污染控制,临床诊断和水质的检测领域,Minerva不遗余力地开拓进取,是实验人员和生产企业值得信赖的合作伙伴。Minerva 公司作为合同制造商,还从事分子生物学试剂、PCR分析和样品制备试剂的设计与生产。

人ELISA试剂盒特殊的包被方式

人ELISA试剂盒特殊的包被方式

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

人ELISA试剂盒包被在固相上的抗原纯度大大提高,因此含杂质较多的抗原也可采用捕获包被法试验的特异性、敏感性均由此得以改善,重复性亦佳。间接包被的另一优点是抗原用量少,仅为直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯载体上的非蛋白质抗原可采用。例如,在检测抗DNA抗体时,需用DNA作为包被抗原,而普遍的固相载体一般不能直接与核酸结合。方法一 用于检测未知抗体的间接法: 用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml, 每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。人ELISA试剂盒加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被的反应孔中置37℃孵育1小时洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。将抗原或抗体固定在过程称为包被。换言之,包被即是抗原或抗体结合到固相载体表面的过程。蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用。这种物理吸附是非特异性的,受蛋白质的分子量、等电点、人ELISA试剂盒浓度等的影响。载体对不同蛋白质的吸附能力是不相同的,大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团,因此更易吸附到固相载体表面。IgG对聚苯乙烯等固相具有较强的吸附力,其联结多发生在Fc段上,抗体结合点暴露于外,因此抗体的包被一般均采用直接吸附法。

植物SHMT ELISA检测试剂盒操作使用方法

植物SHMT ELISA检测试剂盒操作使用方法

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

植物丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)ELISA试剂盒 英文名称:Plant SHMT ELISA Kit 实验类型:夹心法 检测范围:25 U/L – 800 U/L zui低检测限:1.0 U/L 应用范围:血清、血浆、组织匀浆、细胞培养物上清或其它相关液体(本产品仅供实验室科研及非临床用途) 植物丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)ELISA试剂盒仅供研究使用   植物丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)ELISA试剂盒实验目的 植物丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)ELISA试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中植物丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)的含量。 有效期:6个月 保存条件:2-8℃   实验原理 植物丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被植物丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的植物丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。 需要而未提供的试剂和器材 1. 酶标仪(450nm) 2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3. 37℃恒温箱 4. 蒸馏水或去离子水       试剂准备 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。       操作步骤 1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。 2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL; 3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。 4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。 5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),

ELISA试剂盒的使用技术报告

ELISA试剂盒的使用技术报告

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

上海劲马技术专员为ELISA试剂盒的使用技术报告做出一番整理,在这里分享给您,供参考。   ELISA试剂盒方法原理   一、双抗体夹心法测定抗原 1.将抗原免疫*种动物获得的抗体吸附于固相表面; 2.加抗原,形成抗原-抗体复合物;  3.加抗原免疫第二种动物获得的抗体,形成抗体抗原抗体复合物; 4.加酶标抗抗体(第二种动物抗体的抗体);  5.加底物。底物的降解量=抗原量。 二、直接法测定抗原  1.将抗原吸附在载体表面; 2.加酶标抗体,形成抗原—抗体复合物; 3.加底物。底物的降解量=抗原量。  三、间接法测定抗体 1.将抗原吸附于固相载体表面; 2.加抗体, 形成抗原-抗体复合物; 3.加酶标抗体; 4加底物。 测定底物的降解量=抗体量。   ELISA试剂盒操作注意 1. 使用干净的塑料容器配置洗涤液,使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。 2.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。 3.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。 4.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。 5.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。 6.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 7.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。 8.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。 9.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。 10.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。 11.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。 12.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。   ◎ELISA试剂盒质控分析   1.人员培训内容包括:①检验项目的基本原理

(入门篇)国产elisa试剂盒实验技术要点

(入门篇)国产elisa试剂盒实验技术要点

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

elisa法由于操作简单,已被广泛应用,但是它又是需要朋友们小心"呵护"的。国庆小长假已落幕,今天上海德尔塔生物针对国产elisa试剂盒实验技术要点进行一份整理,希望能帮助到实验新手们。 1. 在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。 2. 小心吸取试剂并严格遵守给定的孵育时间和温度。请注意在吸取标本/标准品,酶结合物或底物时,个孔与*后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的 “预孵育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。而且,洗涤不充分将影响试验结果。 3. 试剂盒保存:部分试剂保存于-20℃,部分试剂保存于2-8℃,具体以标签上的标示为准。 4. 浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。 5. 刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。 6. 中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。 7. 所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。 上海德尔塔生物独特优势体现: 1、本公司国产elisa试剂盒品种多价格优惠,质量有保障! 2、我们控制运营成本并提率,去除价格虚高,保证产品的优惠力度,让您买的放心。 3、全程技术指导。包括售前的标本收集,使用过程中不明白的地方,实验结束后的数据分析,有任何疑问,我们技术都会及时给您去。 4、有质量问题免费包换合同上注明了的。质量问题包括运输不当,客户在使用过程中测不出结果,等等。 5、提供免费代测的服务您只需把标本寄过来,我们为您节省时间,帮您出结果,原始数据,分析数据均可提供,一般时间是5-7天左右。 6、提供实验技术指导(售前、售中、售后)服务。 7、不论是本地还是偏远地区,都是包邮送货上门的。

ELISA试剂盒实验操作之抗体反应三阶段

ELISA试剂盒实验操作之抗体反应三阶段

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

Elisa试剂盒实验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。而在Elisa实验检测时,关于抗体反应有三个阶段,今日跟随小编一起来看看初次反应与再次反应有何不同吧?(1)初次反应产生抗体:当抗原*次进入机体时,需经一定的潜伏期才能产生抗体,且抗体产生的量也不多,在体内维持的时间也较短。(2)再次反应产生抗体:当相同抗原第二次进入机体后,开始时,由于原有抗体中的一部分与再次进入的抗原结合,可使原有抗体量略为降低。随后,抗体效价迅速大量增加,可比初次反应产生的多几倍到几十倍,在体内留存的时间亦较长。(3)回忆反应产生抗体:由抗原刺激机体产生的抗体,经过一定时间后可逐渐消失。此时若再次接触抗原,可使已消失的抗体快速上升。如再次刺激机体的抗原与初次相同,则称为特异性回忆反应;若与初次反应不同,则称为非特异性回忆反应。非特异性回忆反应引起的抗体的上升是暂时性的,短时间内即很快下降。    上海沪鼎ELISA试剂盒以其稳定的质量、出众的表现、的服务,获得了众多客户的认可与赞誉。我们将以的产品、合理的价格、完善且的服务来回报每一位客户。