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细胞化学染色方法
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
实验原理 1. 细胞经甲基绿一呱咯宁混合液处理后,其中的 DNA 和 RNA 出现不同的呈色反应,一般认为这是由于带有负电荷的核酸对碱性染料呱咯宁和甲基绿具有亲和力,且这两种染料的作用有选择性,甲基绿染高聚分子的 DNA 呈蓝绿色,呱咯宁染低聚分子的 RNA 呈红色。由此对细胞中的 DNA 和 RNA 进行定位、定性、和定量分析。 2. 由于不同的蛋白质分子所带的碱性和酸性基团的数目不同,在 pH 值不同的溶液中,蛋白质分子所带的净电荷多少不同。如在生理条件下,整个蛋白质所带负电荷多,则为酸性蛋白质;带正电荷多,则为碱性蛋白质。据此,可将标本经三氯醋酸处理提出核酸后,用不同 pH 值的固绿染液分别染色,细胞内的酸性蛋白和碱性蛋白质显示出来。 3. 过氧化物酶能把许多胺类氧化为有色化合物,用联苯胺处理标本,细胞内的过氧化物酶能把联苯胺氧化为蓝色的联苯胺蓝,进而变为棕色产物,因而可以根据颜色反应来判定过氧化物酶的有无或多少。 4. 组织、细胞的多糖、粘多糖及粘蛋白等都可用 PAS 法来显示,其化学基础是利用过碘酸的氧化作用,打开碳链形成醛,生成的醛基与 Schiff 试剂中的无色品红反应形成紫红色化合物。 实验试剂 PBS 缓冲液(pH7.2) 甲基绿一呱咯宁醋酸缓冲液 纯丙酮 l/2 丙酮 1/2 二甲苯 纯二甲苯 70%乙醇 5%三氯醋酸 0.1%碱性固绿 0.1%酸性固绿 0.5%硫酸铜 联苯胺混合液 1%番红 无水乙醇 过碘酸酒精液 Schiff 氏酒精液 亚硫酸水 Ehrlieh 苏木精 95%乙醇 Carnoy 固定液(甲醇:冰醋酸=3:1,体积比) 实验设备 光学显微镜 解剖器材 蜡盘 载玻片 吸水纸 染色缸 盖玻片 水浴箱 实验材料 蟾蜍、小白鼠各一只 肝脏石腊切片 培养的 Hela 细胞 实验步骤 1. Brachet 反应一显示细胞内的 DNA 和 RNA (1) 接种 Hela 细胞于盖片上并培养 24~48 小时,使长成单层; (2) 取出盖片,用 PBS(pH7.2)轻轻冲洗盖片表面去除残渣; (3) 放入 Carnoy 固定液中固定 l 小时; (4) 浸入甲基绿一呱咯宁
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肝脏和食欲之间的关联
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
肝脏中储存有多余的葡萄糖,以糖原的形式,肝糖原是由许多葡萄糖分子聚合而成的物质。葡萄糖聚合物以糖原的形式储存于肝脏,当机体需要时,便可分解成葡萄糖,转化为能量。糖尿病患者不能很好地在肝脏中积累葡萄糖,这就是为什么他们患有高血糖症的一个原因,也就是说,他们的血糖水平太高。近,一项研究表明,存储于小鼠肝脏中的高水平葡萄糖,可以防止体重增加。研究人员发现,尽管动物可以自由获取美味的饮食,但是它们的食欲降低。 根据这项研究结果,研究人员认为,刺激肝脏糖原的生产,能够提供一种有效的**方法,改善糖尿病和肥胖症的**效果。 致力于糖原代谢及相关疾病的有关研究人员解释说:“很有趣的是,我们观察到,肝脏中发生的事情对食欲有直接影响。在这里,我们能够显示分子水平上发生了什么。” 11月14日是世界糖尿病日。世界卫生组织估计,当前有3.82亿人患有糖尿病,到2035年预计有十分之一的人会得上这种病,这个数字甚至还更高。关于肥胖,它与2型糖尿病(常见的糖尿病形式)的发病有关。在2008年,超过2亿的男性和大约3亿的女性被列为肥胖者。 研究人员解释说:“通过了解糖尿病和肥胖症患者在分子水平上发生了什么故障,我们将更接近于提出新的**靶点,发现解决问题的方案。这两种疾病都可以通过均衡饮食和日常锻炼得以预防。是在2型糖尿病的情况下,仅仅通过饮食控制,就能使患上这种疾病的人数减少一半。” 肝脏和大脑如何相互交流来调节食欲呢? 研究人员想知道,为什么肝脏中积累大部分糖原的小鼠,尽管可以获取诱人的饮食,但是并没有出现体重增加。除了观察到这些动物吃的少之外,有关研究组还发现,这些动物的大脑表现出缺乏食欲刺激分子,而是有很多食欲抑制分子。我们终偶然发现了线索——可以解释肝脏-大脑的线索。” 大脑-肝脏关联的关键在于ATP,所有生物体都用这个分子来为细胞提供能量,在糖尿病和肥胖症中这个分子通常是发生改变的。研究人员解释说:“我们看到,
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病毒组与疾病有关
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
炎症性肠病被认为与肠道菌多样性降低有关。而华盛顿大学医学院的一项研究,将这种疾病与病毒多样性升高关联起来。 科学家们发现,炎症性肠病患者与健康人相比,消化系统中的病毒更加多样化,说明病毒可能在这种疾病中起到了一定的作用。直到近人们才开始认识到微生物组(体内和体表的细菌及其基因)在疾病中的重要性。举例来说,肠道微生物组发生改变与肥胖症、糖尿病、代谢综合症和炎症性肠病有关。 病毒组(virome)是指人体内的病毒及其基因,这项研究将病毒组的变化与疾病关联起来。研究人员指出,人们可能忽略了病毒在肥胖症、糖尿病和常见炎症性肠病(克罗恩病和溃疡性结肠炎)中起到的作用。科学家们应当像对待微生物组那样深入研究病毒组,文章的资深作者Herbert W. Virgin教授说。 在这些患者中鉴定到的病毒DNA,很大一部分是人们不熟悉的,来自于新发现的病毒。我们还有大量的基础工作要做,包括测序这些病毒的遗传物质,理解它们与肠道、肠道菌的互作机制。据推测,炎症性肠病可能使肠道菌死亡并释放出其中的噬菌体。也可能是有新噬菌体进入肠道,影响了消化系统或微生物组,进而引发疾病。当然这两种机制也可能共同存在。 要开发更好的炎症性肠病药物,科学家们需要进一步理解肠道微生物组、肠道病毒组与患者基因的互作。人类基因和细菌基因都会影响炎症性肠病的发病风险。目前,研究人员正在开发炎症性肠病的动物模型,以便明确人类、细菌和病毒基因对这种疾病的推动作用。
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病毒让我们变得更加聪明?
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
研究人员已经知道,内源性的反转录病毒中大约包含有5%的人类DNA,很多年以来这些看似垃圾的DNA似乎并没有什么用处,研究者表示,反转录病毒似乎在大脑的基本功能中扮演者中枢的角色,尤其是在基因表达的调节上更为重要。本文研究结果显示,在进化的过程中病毒与我们的细胞机器之间存在着紧密的联系,尤其病毒在机体大脑中被激活,被认为很可能是由于肿瘤不能在神经细胞中形成而致,这同其它组织是不一样的。 如今研究人员在大脑细胞中发现了这些被特异性激活的病毒,而且揭示了这些病毒的调节性角色;研究人员认为反转录病毒或许可以帮助解释为何大脑细胞具有特殊的动态性,以及功能的多面性;也正因如此,在不同物种中病毒会表现出或多或少的复杂功能,这或许可以帮助我们理解为何其不同物种间是如此的不同。研究者基于对神经干细胞进行研究,揭示了神经干细胞可以利用一种特殊的分子机制来控制反转录病毒的激活过程,这为我们深入理解神经细胞的基本功能提供了新的线索,同时研究结果也为解开和遗传因素相关的大脑疾病的发病机制提供了新的希望。 后研究者表示,当前当我们寻找和多种疾病相关的遗传因子时,我们通常会寻找和其类似的基因,因为基因是组成基因组的必要成分;相信通过后期更为深入的研究会为我们开发**神经变性疾病,精神疾病以及大脑肿瘤的新型疗法提供帮助。
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肠道菌为何能影响我们的健康
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
尽管*血清素(又称5-羟色胺)是一种大脑神经递质,但据估计人体90%的血清素都是在消化道中生成。实际上,血清素调控了我们的各种生理功能,外周血清素的水平改变与肠激惹综合征、心血管疾病和骨质疏松症等许多疾病相关联。 越来越多的研究表明,肠道微生物发生改变的小鼠或其他模式生物表现出行为改变。我们对微生物与神经系统的沟通机制很感兴趣。一开始,我们探讨了正常肠道微生物可以影响宿主体内神经递质水平这一观点。 消化道中的肠嗜铬(enterochromaffin ,EC)细胞和一些特殊的免疫细胞及神经元都可生成外周血清素。Hsiao和同事们首先想知道的是肠道微生物是否影响了肠道中的血清素生成,如果确是如此,是在哪些细胞类型中?他们一开始检测了具有正常肠道菌群和无菌小鼠体内的外周血清素水平。 研究人员发现相比于拥有常规细菌菌群的小鼠,无菌小鼠中ES细胞生成的血清素减少了约60%。当让正常肠道微生物重新移居到这些无菌小鼠体内时,血清素水平恢复——表明血清素缺乏可以逆转。 接下来研究人员想要弄清楚居住在肠道的各种微生物库中,是否有一些特定的细菌种群与EC细胞互作生成了血清素。 在测试了几种不同的物种和数组已知肠道微生物之后,Yano、Hsiao和同事们观察到在一种情况下,即存在一组近20个种类的产芽孢细菌时,无菌小鼠体内的血清素水平会升高。用这组细菌处理的小鼠相比于无菌小鼠显示胃肠活动增加,血小板活化改变——*,血小板利用了血清素来促进凝血。 由于想追踪与微生物和宿主之间这种有趣的合作的相关机制,研究人员开始寻找可能的关键分子。他们发现几种特殊的微生物代谢产物受到产芽孢细菌的调控,它们提升了培养物中的EC细胞生成血清素。此外,在无菌小鼠体内增加这些代谢物可以提高它们的血清素水平。 该领域以往的一些研究工作表明,一些细菌自身可以生成血清素。而新研究表明了,体内大多数血清素的生成都依赖于一些特殊细菌与宿主相互作用。 人们已
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elisa酶联免疫试剂盒价格的实验原理和精度
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
elisa酶联免疫试剂盒价格采用定量夹心酶联免疫技术。抗体具体为NRP1已经被预先涂到微孔板。标准和样品吸入井和任何的NRP1目前的固定化抗体的约束。生物素共轭的抗体特异性NRP1除去任何未结合的物质后,加入到孔中。抗生物素蛋白共轭的辣根过氧化物酶(HRP)的洗涤后,加入到孔中。经过洗涤,以除去任何未结合的抗生物素蛋白的酶试剂,底物溶液加入到孔中,并颜色发展成比例的量的初始步骤中NRP1绑定。彩色显影被停止并测量的颜色的强度。 精度批内精密度(内检测精度):CV%
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发现**脑梗塞更有效方法
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
研究发现,一种被称为“生长因子颗粒素蛋白前体”的蛋白质能克服脑梗塞**中有效的血栓溶解疗法的弱点,有可能大大提高脑梗塞**的效果。 脑卒中在日本是居第四位的死亡原因,在脑卒中患者中,因血管堵塞而发病的脑梗塞患者近年来不断增加。目前,**脑梗塞的有效方法被认为是利用“组织纤维蛋白溶酶原激活剂”进行的血栓溶解疗法,但患者能接受这一疗法的时间只有发病后4个半小时内,且只有不到5%的脑梗塞患者能接受这种**,原因是“组织纤维蛋白溶酶原激活剂”易引发脑出血和脑水肿等并发症。 研究人员在动物实验中发现,如果将“生长因子颗粒素蛋白前体”与“组织纤维蛋白溶酶原激活剂”一起注射到患有脑梗塞的实验鼠体内,不仅能防止由药物副作用引起的脑出血和脑水肿,还能保护神经细胞,遏制炎症细胞,从而缩小脑梗塞范围。这是在动物实验中证实“生长因子颗粒素蛋白前体”具有上述多种功能。 “生长因子颗粒素蛋白前体”广泛存在于动物和植物组织中。研究人员指出,“生长因子颗粒素蛋白前体”得到实用化后,脑梗塞患者接受血栓溶解疗法的时间可以从发病后4个半小时延长到8小时内,能接受这种疗法的患者人数将成倍增加,**效果也将更加明显。
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猪elisa试剂盒优惠大促活动
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
猪elisa试剂盒好消息,上海抚生为回馈新老客户的支撑及信任,特推出优惠大促活动,而这次的促销活动中几乎涵盖了基免生物一切试剂产品,可以说是优惠十分给力!假如你正在寻觅购买生化试剂等科研试剂,不防来基免生物看看! 促销内容: 产品:ELISA试剂盒,动物血清,标准品对照品,培养基,抗体,生化试剂,化学试剂,细胞培养,液体试剂,实验耗材,其他实验试剂等 促销时间:今日起至5.31日 促销方法:低价,打折,多买多送 本司供应ELISA试剂盒免费代测效力! 基免生物专业供应进口/国产ELISA试剂盒,动物血清血浆,标准品对照品,培养基,抗体,抗原,抗生素,维生素,进口标准品,染色液,溶液,缓冲液,化学试剂,生化试剂,环保试剂,有机试剂,无机试剂,液体试剂,细胞培养,细胞株,多肽,生物分子,氨基酸,蛋白质,实验耗材,其他实验试剂等,其间ELISA试剂盒种属包含不同动物,了解更概略的动物种属请! 猪elisa试剂盒肾上腺皮质抗体(ACA)ELISA试剂盒 ,英文名: ACA ELISA Kit 蛋白(nephrin)ELISA试剂盒 ,英文名: nephrin ELISA Kit 肾胺酶(RNLS/MAO-C)ELISA试剂盒 ,英文名: RNLS/MAO-C ELISA Kit 神经元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA试剂盒 ,英文名: NAIP ELISA Kit 神经营养因子4(NT-4)ELISA试剂盒 ,英文名: NT-4 ELISA Kit 神经营养因子3(NT-3)ELISA试剂盒 ,英文名: NT-3 ELISA Kit 神经型一氧化氮合成酶(nNOS)ELISA试剂盒 ,英文名: nNOS ELISA Kit 神经细胞粘着分子(NRCAM)ELISA试剂盒 ,英文名: NRCAM ELISA Kit 神经细胞粘附分子配体1(NCAM-L1/CD171)ELISA试剂盒 ,英文名: NCAM-L1/CD171 ELISA Kit 神经调节素1亚型HRGβ1(NRG1)ELISA试剂盒 ,英文名: NRG1 ELISA Kit 神经调节蛋白4(NRG4)ELISA试剂盒 ,英文名: NRG4 ELISA Kit 神经调节蛋白3(NRG3)ELISA试剂盒 ,英文名: NRG3 ELISA Kit 神经调节蛋白2(NRG2)ELISA试剂盒 ,英文名: NRG2 ELISA Kit 神经调节蛋白1(NRG-1)E
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Annexin V AbFluor 488细胞凋亡试剂盒更好绿色荧光
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
细胞凋亡(apoptosis)是一种基本生物学现象,指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡,在多细胞生物去除不需要的或异常的细胞中起着必要的作用。在正常活细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)位于细胞膜的内侧,而在细胞凋亡的早期,PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。膜联蛋白V(Annexin V) 是一种分子量为35~36KDa的钙离子依赖型磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力特异性结合。通过AbFluorTM 488标记Annexin V即可简单快速地直接检测出细胞早期凋亡情况(绿色荧光)。 碘化丙啶(propidine iodide,PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,而早期凋亡细胞的细胞膜是完好的,对PI有拒染性。但在凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能透过细胞膜而使细胞核染上。 使用AbFluo™ 488和碘化丙啶(PI)对细胞进行染色可以区分完整细胞,早期凋亡和晚期凋亡或坏死细胞。有关详细信息,请参阅下面的列表。 产品名称 货号 激发光与发射光 Annexin V-AbFluor™ 488 Apoptosis Detection kit KTA0002 Ex/Em = 491/517 nm * PI:Ex/Em = 535/617 nm (DNA) Abbkine使用的AbFluor™ 染料,针对Annexin V研发了多种偶联产物。AbFluor™染料与其它荧光标记染料相比,如FITC,TRITC,Cy®染料,AlexaFluor®和Dylight®标记染料,具有相同或更好的标记性能和荧光表现(荧光亮度,耐光性),特别适用于体内成像和流式细胞术。 以Annexin V-AbFluor™ 488 细胞凋亡检测试剂盒为例: 使用喜树碱(camptothecin)诱导Hela细胞凋亡(24h),使用Annexin V- AbFluor™ 488 细胞凋亡检测试剂盒进行染色。图中展示的是晚期凋亡/坏死细胞。(绿色为细胞膜,红色为细胞核) 使用喜树碱(camptothecin)诱导Hela细胞凋亡(24h)。 使用Annexin V- AbFluor™ 488 细胞凋亡检测试剂盒进行染色,可以区分早期凋亡细胞 (Annexin V- AbFluor™ 488 阳性), 晚期凋亡或坏
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小鼠elisa试剂盒八月促销活动正式开始!
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
小鼠elisa试剂盒八月促销活动正式开始! ELISA试剂盒在春意盎然的三月里,绿色的律动诠释着生命的意义,春的阳光破解着三月的鲜活明媚和它的秘密,给了我们一个美丽的。娇柳媚花、青山溪水、薰风细雨……无需渲染的意境在鸟语花香中蕴满了丽词佳句,款款深情,和谐悦耳,就在今天上海劲马实验设备有限公司三月促销活动正式开始! 款到发货,“ELISA试剂盒”包邮送货上门。 凡在活动期间购买我公司产品的客户,均可享受8.8折优惠;一次性达3999元,返还现金100元;达6999元返还现金200元;达10999元的,返还现金300元。 活动时间:2018年8月1月 活动细则: 1.活动期间,购买我公司ELISA试剂盒产品且达到金额可享受8.8折优惠。 2.该活动针对所有客户。 3.本次活动解释权终归我公司所有。 小鼠elisa试剂盒M-期磷蛋白9(MPHOSPH9)ELISA试剂盒 ,英文名: MPHOSPH9 ELISA Kit M-期磷蛋白8(MPHOSPH8)ELISA试剂盒 ,英文名: MPHOSPH8 ELISA Kit M-期磷蛋白6(MPHOSPH6)ELISA试剂盒 ,英文名: MPHOSPH6 ELISA Kit M-期磷蛋白10(MPHOSPH10)ELISA试剂盒 ,英文名: MPHOSPH10 ELISA Kit Myoferlin蛋白(MYOF)ELISA试剂盒 ,英文名: MYOF ELISA Kit MYC关联因子X(MAX)ELISA试剂盒 ,英文名: MAX ELISA Kit MutY同源物(MUTYH)ELISA试剂盒 ,英文名: MUTYH ELISA Kit MutL同源物1(MLH1)ELISA试剂盒 ,英文名: MLH1 ELISA Kit Muskelin1蛋白(MKLN1)ELISA试剂盒 ,英文名: MKLN1 ELISA Kit MRG结合蛋白(MRGBP)ELISA试剂盒 ,英文名: MRGBP ELISA Kit Misato同源物1(MSTO1)ELISA试剂盒 ,英文名: MSTO1 ELISA Kit Midline2蛋白(MID2)ELISA试剂盒 ,英文名: MID2 ELISA Kit Midline1蛋白(MID1)ELISA试剂盒 ,英文名: MID1 ELISA Kit Midasin蛋白(MDN1)ELISA试剂盒 ,英文名: MDN1 ELISA Kit Mg2+/Mn2+依赖性蛋白磷酸酶1A(PPM1A)ELISA试剂盒 ,英文名: PPM1A ELISA Kit Metaxin3蛋白(MTX3)ELISA试剂盒 ,英文名: MTX3
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长寿基因使人类有望活到120岁
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
据国外媒体报道,目前,科学家采用一种新的基因策略可以延长生物体的寿命,他们将一种叫做“阿维索特尔”的基因,在对果蝇的实验中通过激活该基因,能够催毁不健康的细胞,这种奇特基因能够延长果蝇寿命60%。这将意味着如果未来人类受益于这种基因,寿命将达到120岁。 研究人员发现“阿维索特尔”基因能够摧毁不健康细胞,如果这种长寿效应转换至人类,有望使人类寿命延长至120岁。 这种基因具有“质量控制”能力,能够清除不健康或者出现故障的细胞。通过消除潜在不健康细胞,可以保护大脑或者内脏等重要器官。当科学家对果蝇体内注入该基因时,他们发现果蝇身体组织变得更加健康,衰老减缓。人体内存在着“阿维索特尔”基因,进一步激活该基因,可用于形成一种新的抗衰老**方案。实验显示,注入这种特殊基因的果蝇寿命比普通果蝇延长50-60%。 数百年以来,人类致力于研究如何延长人类寿命,《旧约》中记载玛士撒拉的寿命达到969岁。据记载,炼金师不惜牺牲自己用于研制“长生不老之药”。一些科学家猜测,人类寿命可延长至200岁。目前寿命长的人是莱昂德拉-贝塞拉-伦夫雷拉斯,是一位墨西哥老妇人,据称寿命达到127岁。 然而,这项研究仍处于动物实验阶段,由于某些细胞比其它更易受到影响,人体有理由选择较少损伤的细胞并消除受损细胞,这将是一种很好的策略维持组织健康,从而延缓衰老和延长寿命。
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琼脂糖/磁珠偶联的His标签抗体,IP效果如此好
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
什么样的标签适合用于免疫沉淀呢? His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白质的吸附纯化。由于分子量较小,并且较容易分离和纯化,His-tag 融合标签与其他标签相比有很多明显优势, 是目前用于纯化的融合标签中使用为广泛的一种。His抗体也常用于检测和His标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测His融合表达蛋白等。 为什么推荐使用His标签抗体偶联的琼脂糖/磁珠? 与使用Protein A/G琼脂糖的传统免疫沉淀(IP)方法相比,Abbkine的琼脂糖/磁珠偶联标签抗体,省去了Protein A/G与抗原-抗体复合物结合的步骤。偶联抗体直接和目标蛋白结合后,通过离心或使用磁力架,将目标蛋白从细胞裂解液中分离出来。不仅让实验变得简单快捷,更可以避免非特异性结合,降低背景。表位标记蛋白的免疫沉淀可用于确定蛋白的细胞定位、研究翻译后修饰或检测标记蛋白与其它蛋白之间的相互作用。 看到这里,您肯定会问,Protein A/G的缺点是什么? 1.耗时:使用Protein A/G需要额外的孵育与洗涤操作 2.效果差:当抗体种属、亚型和ProteinA/G不匹配时,ProteinA/G和抗体结合能力弱 3.背景高:和样本中的其他免疫球蛋白结合,产生非特异性结合,导致高背景。 这就是艾美捷科技为您推荐琼脂糖/磁珠偶联His标签抗体的原因: 产品名称 货号 应用 Anti-His Tag Mouse Monoclonal Antibody, 琼脂糖 A02050AGB IP Anti-His Tag Mouse Monoclonal Antibody, 磁珠 A02050MGB IP 琼脂糖/磁珠偶联His标签抗体,优势更加突出: 高特异性—高特异性单克隆标签抗体可实现高产量和高纯度免疫沉淀 低背景—稳定、预封闭的填料及特异性抗体减少了免疫沉淀过程中的非特异性结合 规格灵活:100ul, 400ul, 2ml,多规格可供选择。满足不同规模的免疫沉淀需求 操作方便—产品说明书提供了免疫沉淀
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基于微流控芯片的细胞迁移
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
细胞迁移在血管再生、伤口愈合、炎症反应、胚胎发育等多种生理和病理过程中起到关键作用. 细胞迁移研究中, 传统的研究方法无法满足高通量的需求, 且大多是单因素检测, 难以综合考虑细胞基质、浓度梯度等多参数对细胞迁移的影响. 微流控芯片分析是当前的科技前沿领域之一, 其作为细胞迁移研究新的技术平台, 一方面具有集成度高、灵敏度高、高通量、试剂消耗少等优势, 快速实现大规模分析; 另一方面芯片中微米级的通道结构可控制物质浓度梯度和微流体, 调节溶液温度和pH等细胞微环境要素, 更真实模拟细胞体内生长微环境, 并完成实时监测. 微流控芯片已经被广泛应用于细胞迁移研究, 其模型分为二维(2D)和三维(3D)2大类, 分别从平面培养和立体生长的角度, 研究不同因子浓度梯度、电刺激或细胞间相互作用等条件对细胞迁移行为的影响,打破了传统方法的局限性, 促进了生物及医学等领域的研究. 近期来自*的研究人员介绍了微流控芯片在细胞迁移研究中应用的近期进展, 重点综述了研究细胞迁移的2D和3D微流控芯片, 并讨论了各类微流控芯片的优缺点. 微流控芯片特有的网格式通道结构、微米级尺寸、以及可同时在时间和空间上控制微流体等特点有利于更好模拟细胞体内真实生理环境. 在单层伤口愈合类细胞迁移研究中, 胰蛋白酶消化法芯片结构简单, 操作相对容易, 伤口边缘细胞损伤小, 残留细胞碎片少, 提高了细胞伤口的可控性和重复性, 便于动态观察研究, 在近期取得了较大发展, 有望成为细胞伤口愈合研究的标准化主流模型之一; 电刺激形成的伤口模型, 具有可塑性高、自动化等优势, 尤其是与ECIS技术结合的无标记性检测, 外部条件干扰少, 但在制作成本方面存在困难; 阻隔法对伤口细胞刺激小, 但一般结构复杂、操作不易, 制作和应用技术还不够成熟. 随着制作成本和技术的发展和成熟, 结合脉冲电压及阻隔法形成细胞伤口愈合模型的微流控芯片有可能给受伤后细胞迁移研究提供更多选择. 在2D无伤口类细胞趋化和趋电运动研究中, 微流控芯片可控
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人低氧诱导因子1a(HIF-1a)ELISA试剂盒说明书
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
人低氧诱导因子1a(HIF-1a)ELISA试剂盒的详细资料: 英文名称:Human hypoxia inducible factor-1a (HIF-1a) ELISA kit 货号:KS13601 规格:96T/48T 使用范围:仅限科研范围内使用 各种种属:人、大小鼠、豚鼠、兔子、猪、犬、牛、羊… 标本齐全:血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆、组织液、关节液、胸腔yi液等… 保存条件:2-8℃ 实验原理 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人肌酸激酶脑型同工酶(CK-BB)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的人肌酸激酶脑型同工酶(CK-BB)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。 人低氧诱导因子1a(HIF-1a)ELISA试剂盒样本处理及要求 1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 注:标本溶血会影响后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。 人低氧诱导因子1a(HIF-1a)ELISA试剂盒需要而未提供的试剂和器材 1. 酶标仪(450nm) 2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3. 37℃恒温箱 4. 蒸馏水或去离子水 试剂准备 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。 人低氧诱导因子1a(HIF-1a)ELISA试剂盒操作步骤 1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封
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白介素2的具体原理及检测方法
作者:德尔塔 日期:2022-04-01
我司专业代理美国R&D多个系列ELISA试剂盒,包括白介素IL系列、干扰素IFN系列、肿瘤杀伤因子TNF系列等,可检测人源、小鼠、大鼠样本。用于试剂盒生产的抗体全部美国进口。我司白介素产品系列繁多,以下以白介素2为例,上海远慕生物技术部技术人员为我们具体解析白介素2的具体原理及检测方法, IL-2来源于活化的T淋巴细胞,主要由活化的CD;辅助性T细胞(T helper lymphocyte,Th)产生,其主要生物学效应表现为:诱导活化T淋巴细胞及胸腺细胞生长,诱导T淋巴细胞产生淋巴因子,诱导T淋巴细胞的细胞毒作用,增强NK细胞、LAK细胞及单核细胞的细胞毒作用,加强活化的B细胞增殖及分化。IL-2受体(1L-SR)又可分为:T、B细胞及NK细胞表面的胞膜IL-2受体(mlL-2R)和可溶性IL-2R(slL-2R)两种。其中,IL-2复杂的生物学作用是通过IL-2R介导的,而IL-2又可诱导T淋巴细胞表达IL-2R,故Th产生IL-2和表达IL-2R是调节细胞免疫和体液免疫的中心环节,在细胞因子网络中处于核心地位,在免疫应答过程中起着非常重要的作用。 [检测方法] ELISA法 [方法学原理] 在微孔反应板上包被抗人IL-2单克隆抗体,待测标本和标准品中的IL-2会与抗人IL-2单克隆抗体结合,游离的成分被洗去,同时加人生物素化的抗人IL-2抗体和HRP标记的亲和素。生物素与亲和素特异结合,抗人IL-2抗体与结合在单克隆抗体上的人IL-2结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色剂,若反应孔中有11.-2,HRP会使无色的显色剂呈现蓝色,加终止液变黄色。在波长450nm处测吸光度,IL-2浓度与吸光度成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中的IL-2浓度。[标本准备] 静脉血2ml,不抗凝。我司ELISA试剂盒产品全部7折起售,具体种属如下表所示:人:IL-1、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-2R、IL-27、IL-23、IL-17、IL-18、IL-9、IL-8、IL-6、IL-5、IL-4、IL-2、IL-13、IL-11、IL-10、IL-12P70、IL-12P40、IFN-ω、IFN-β、IFN-α、 IFN-γ、TNF-β、TNF-α、sICAM-1、LEP、MMP-3