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如何选择合适的颗粒培养基?
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
颗粒培养基是实验室里zui常见和zui基本的实验了,但却不是zui简单的。别小看细胞培养,这里可蕴含着大学问。有时候细胞状态不好,转染、药筛这些实验根本就没办法做。影响细胞培养的因素很多,让我们先从培养基说起。 经典的培养基有很多种,Invitrogen(GIBCO)、thermo fisher(HyClone)、Sigma等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是应用zui广泛的培养基。其他如M199、IMDM、L15培养基等也用于某些细胞的培养。 1.MEM是由Eagle’s基础培养基(BME)发展而来的,其中增加了组分的范围及浓度。 2.Dulbecco改良的BEM(DMEM)培养基是为小鼠成纤维细胞设计的,现在常用于贴壁细胞的培养。DMEM的氨基酸浓度是MEM的两倍,维生素浓度是MEM的4倍,采用双倍的HCO3-和CO2浓度起到更好的缓冲作用。zui初的配方中葡萄糖含量为1000 mg/L,后来为了某些细胞的生长需要,将葡萄糖含量又调整为4500 mg/L,这就是大家常说的低糖和高糖了。 3.aMEM含有附加的氨基酸、维生素以及核苷和脂肪酸,它可广泛应用于各种细胞类型,包括对营养成分要求苛刻的细胞。 4.Ham’s F12是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的,颗粒培养基现在也广泛应用于克隆形成率的分析及原代培养。F12还可以与DMEM等体积混合使用,得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物,这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养。 5.RPMI 1640培养基是专为淋巴细胞培养而设计的,现在已广泛应用于悬浮细胞的培养。 Multi-class antibodies Anti-P63 protein P63 肿瘤抑制基因抗体 规格: 0.1ml Multi-class antibodies Anti-Phospho-p63 (Ser395) 磷酸化P63肿瘤抑制基因抗体 规格: 0.1ml Multi-class antibodies Anti-Phospho-p63 (Ser455) 磷酸化P63肿瘤抑制基因抗体 规格: 0.1ml Multi-class antibodies Anti-Phospho-p63 (Ser160/Ser162) 磷酸化P63肿瘤抑制基因抗体 规格: 0.1ml Multi-cla
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CCL2 ELISA试剂盒选择技巧方案
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
趋化因子配体2(CCL2),又名单核细胞趋化蛋白 1 (MCP-1),是 CC 趋化因子家族的小分子量细胞因子。CCL2 通过蛋白聚糖的粘多糖侧链锚定到内皮细胞的质膜上,主要由单核细胞、巨噬细胞和树突状细胞分泌。CCL2 可招募单核细胞、记忆性 T 细胞和树突状细胞到组织损伤或感染引起的炎症位点。CCL2 参与以单核细胞浸润为特征的一些疾病发病机制,如银屑病、类风湿性关节炎和动脉粥样硬化。 如何选购EliKine™ CCL2 ELISA试剂盒? 做科研的我们肯定是希望自己的购买的CCL2 ELISA试剂盒其重复性好、特异性强、敏感性高等优点。但目前市场上的CCL2 ELISA试剂盒质量参差不齐,如何去挑选适合自己的ELISA试剂盒就显得特别重要。一方面,主要根据自己样本中待检指标的量,这就要求CCL2 ELISA试剂盒的灵敏度,另一方面科学实验讲求重复性,要求ELISA试剂盒,其板内和板间变异系数应该控制在15%以内等等。简单来说ELISA试剂盒在保证高质量数据的情况下,实验时间越短,操作越便利,越容易受到用户欢迎!这也是选择试剂盒的一个指标。 产品名称及描述 货号 产品说明 EliKine™ 人 趋化因子CCL2 ELISA定量试剂盒 KET6001 详情 为什么我们选择EliKine™ CCL2 ELISA试剂盒? EliKine™ 人 趋化因子CCL2 ELISA定量试剂盒具有极高的灵敏度和特异性。对目标蛋白的类似物检测,尚未发现明显的交叉反应或者背景干扰。EliKine™ 双抗夹心CCL2 ELISA试剂盒高品质捕获抗体和检测抗体,适用于多种类型的样品,同时运用可拆卸式酶标板设计,让您可灵活便捷的使用,并提供48次小包装,让你有更多选择!专业的,提供售后服务。广受各科研者的喜爱!选择EliKine™ ELISA试剂盒,就是选择放心! EliKine™ CCL2 ELISA试剂盒优势比较: 因此选择集高特异性与灵敏性于一身的Abbkine EliKine™ CCL2 ELISA试剂盒:涵盖细胞因子、激素以及其它蛋白,适用于人,小鼠,大鼠等样品,满足您多样化研究需求。 目前还有ELISA试剂盒促销
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吉姆萨染色的原理
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
吉姆萨(Giemsa)染色法 :吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结果,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞 胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为中性物质。PH对细胞染色有影响。细胞各种成分均不蛋白质,由于蛋白质系两性电解质,所带电荷随溶液PH而定,在偏酸性环境中下在电荷增多,易与伊红结合,染色偏红;在偏三性环境中负电荷增多,易与美蓝或天青结合,染色 偏蓝。因此细胞染色对氢离子浓度十分敏感,染色用正经片必须清洁,无酸碱污染。配制顼特液必须用甲醇,稀释染色必须用缓冲液,冲洗用水应近中性,否则可导致各种细胞染色反应异常,以致识别困难,甚至造成错误。一般性操作技术血涂片制备;细胞染色;显微检查;血液病诊断;染色不良;瑞特(Wright)染色法;酸性染料;伊红;碱性染料;亚甲蓝;吸附作用;PH对细胞染色的影响;甲醇;吉姆(Giemsa)染色法春天要常用润肤剂,它含有松香油脂酸和丰富维生素a,常用可加快皮肤血液循环,剌激面部细胞分泌,有效改善皮肤生理环境,减少气候对皮肤的危害。第二节 血涂片的制备和细胞染色血涂片的显微检查是血液细胞学检查的基本方法,临床上应用极为广泛,特别是对于各种血液病的诊断具有重要的价值,近年来血细胞分析仪的广泛应用,血涂片的观察也可作为判断仪器结果的简易方法。比台观察10个高倍视野血涂片中白细胞和血小板数大致估计血内这些细胞的数量,借以作为仪器结果分析后质控的参考。但积压涂片制备和染色不良,常使细胞鉴别发生困难,甚至导致错误结论。例如,血膜过厚细胞重叠缩小,血膜太薄白细胞多集中于边缘,细胞分布不匀;染色偏酸或偏碱均可使细胞染色反应异常。因皮制备厚薄适宜,分布均匀,染色良好的血涂片是血液学检查的重要革本技术之一。血涂片制备方法及注意事
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培养基告诉您组织细胞染色体制备过程
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
组织细胞用于遗传学分析zui常见的是体外培养的细胞株,多为恶性肿瘤细胞株,且呈贴壁生长,仅小数细胞株为悬浮生长。培养细胞有来源易得、细胞分裂率高和染色体标本制出清晰度高等优点。组织细胞培养基染色体制备的关键是掌握好体外细胞的生长动态,只有处在对数生长期的细胞才能出现较高的分裂相,所以积水仙素处理的时机及量是染色体标本形态及分裂指数的关键。 1、实验材料 培养基液(PRMI 1640、M199、DMEM等),小牛血清、0.025%胰蛋酶、秋水仙素,刻度离心管,直吸管及弯头吸管,培养瓶或皿、KCL、甲醇、冰乙酸、载玻片。 2、培养液配制 培养液85-95% 小牛血清5-15% 双抗(选择)100u/ml 3、操作过程 (1)培养基细胞:选择处于指数生长期、用大瓶培养的80-90%汇合单层培养细胞; (2)终止培养:当有大量圆形发亮细胞出现时,加秋水仙素0.01-0.03ug/ml培养混合液,置温箱继续培养6-10小时以抑制分裂期细胞停止于分裂中期; (3)聚集细胞: (A)摇动法: 可利用分裂中期细胞培养基变圆与底物附着不牢特点,此时可持培养瓶,左右反复横向水平摇动,可使90%的中期分裂细胞从瓶壁脱落; (B)消化法: 将培养液倒入离心管内,给培养瓶内加0.025%胰蛋白酶液0.5-1ml/瓶,水平左右摇动,便培养瓶底壁面完全接触消化酶,稍后用弯头吸管吹打,待细胞完全脱落后,加入3-5ml前培养终止消化。用吸管移入装有培养基液的离心管内2000rpm10分钟。弃上清液,留沉淀细胞; (4)低渗处理:给沉淀细胞加顶温的37℃0.075MKCL8ml左右,用吸管打均匀,在温箱中静置20-30分钟; (5)预固定:向低渗处理适当的离心管中加新鲜配制的3∶2甲醇,冰乙醇固定液1-2ml,用吸管轻松吹打调匀,此措施能起到使细胞表面轻微固定,可防止固定后细胞培养基粘连成块。 (6)固定:800-1000rpm10分钟,弃上清液加新鲜配制的3∶2甲醇冰乙酸固定液10ml,加入时要沿
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针对植物组织样本处理有哪些方法?
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
一些常见的样本的处理是科研实验中zui基本的,相信很多科研工作者都是了解和清楚的,但是植物组织样本该怎样处理,相信很多科研朋友就是一头雾水,但是没有关系,上海沪鼎带您从专业的角度来了解植物组织样本的处理方法.一、匀浆介质一般采用0.05 mol/L Tris-HCl, pH 7.4 磷酸盐缓冲液(PBS),客户可根据样本及测定指标的情况自行设定浓度,目的是保持样本的等渗环境。二、组织匀浆的制备1、取组织块(0.2g~0.5g)zui少可到5~10mg在冰冷的PBS中漂洗,滤纸拭干,准确称重,放入5ml的匀浆管中。2、按重量(g):体积(ml)=1:4的比例加入4倍体积的匀浆介质于匀浆管中,冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块。3、匀浆的方式:手工匀浆,机器匀浆。① 手工匀浆:左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手将捣杆垂直插入套管中,上下转动研磨数十次(6~8分钟),充分研碎,制成20%的匀浆液。② 机器匀浆:用组织捣碎机10000~15000 转/分 上下研磨制成20%组织匀浆,也可用内切式组织匀浆机制备(匀浆时间10秒/次,间隙30秒,连续3~5次,在冰水中进行,可适当延长匀浆时间),镜检观察:取少量组织匀浆作涂片(直接涂片、染色均可以),显微镜下观察细胞是否破碎,若没有则可延长匀浆时间。4、将制备好的20%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机4000转/分左右,离心10~15分钟,取上清液进行测定.三、样本保存: 植物组织样本暂时不测定,可立即低温冻存,温度越低越好,中间如*冻融,-20℃以下可保存三个月,-70℃以下可保存六个月。
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探讨:牛血清实验操作步骤与材料需求
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
【牛血清】中IgG、IgA、IgM的测定。本试验主要用于检查血清中各种免疫球蛋白和补体成份的含量。以下为单向琼脂扩散试验的具体操作办法,为需要者提供参考,咨询我司产品的具体价格。·步骤 1.稀释参考血清及待检血清:参考血清用0.5ml蒸馏水溶解后使用,参考血清、待检血清稀释按要求进行。 2.加样:将上述稀释参考血清分别滴入相应的抗体免疫板的一排孔内,其余孔滴加待检的稀释血清,每个检样加两个孔,每孔滴加10微升。 3.绘制标准曲线及血清标本中IgG、IgA、IgM定量测定:测量沉淀环直径。 这种沉淀环直径与抗原含量的关系不是直线相关,而是对数关系,这种关系有两种计算方法: 1.Mancini曲线-适用于大分子抗原和长时间扩散的结果处理。使用方格计算纸划线,沉淀环直径的平方与抗原浓度呈线性关系。 2.使用半对数纸划线,浓度的对数与沉淀环之间呈线性关系。公式表示:logC/d=K。 zui终结论:免疫球蛋白的含量,不同批号的参考血清其免疫球蛋白含量不一。·材料需求 IgG、IgA、IgM免疫板、参考血清、待检血清、微量加样器、量尺、纱布、生理盐水、带盖方盘。
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纯化抗原的鉴定主要包括哪几个方面
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
纯化抗原的鉴定方法较多,常用的有聚丙烯酰胺凝胶电泳法、结晶法、免疫电泳法、免疫双扩散法等。事实上,仅用一种方法还无法作纯度鉴定,只有几种方法联合应用才较可靠。结晶法不是纯度的标准,因结晶中往往含有其它成分。电泳谱中呈现单一区带也不能排除在这条带中含有其他成分。有时虽出现几条带,也可能是同一物质的聚合体或降解物。为获得好的免疫效果,抗原纯化后应进行鉴定才能用于动物免疫,抗原的鉴定主要包括以下几个方面:1、含量检测蛋白含量的测定zui准确的方法是凯氏定氮法,但由于要求有精密设备,故不适合一般实验室。一般实验室均采用分光光度计测量法。该法首先测定280nm和260nm的吸光度(A),再用经验公式计算蛋白含量。蛋白含量(mg/ml)=A280×1.45-A260×0.74。另外蛋白含量也可采用福林酚法,具体操作见临床生化技术。2、分子量的鉴定测定分子量一般采用SDS-PAGE电泳法,详见临床生化技术。3、纯度鉴定常采用区带电泳法鉴定,详见临床生化技术。4、免疫活性鉴定常采用双向琼脂扩散试验。 上海沪鼎是国内的、的科研试剂供应单位,以其稳定的质量、出众的表现、的服务,获得了众多客户的认可与赞誉。我们将以的产品、合理的价格、完善且的服务来回报每一位客户。
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IL-8 elisa试剂盒的选择方案,必看
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
白细胞介素 8 (IL-8)是由巨噬细胞和其它类型细胞如上皮细胞、气道平滑肌细胞和内皮细胞产生的趋化因子,在人类中,由 IL8 基因编码。IL-8 可有效促进血管生成,在细支气管炎的发病机制中起重要作用。IL-8 可通过对中性粒细胞的召集和脱颗粒来实现对炎症反应的调节,可作为结肠癌细胞株的自分泌生长因子来作用于结肠直肠癌。高水平的 IL-8 可减少精神分裂症患者抗精神病药的阳性反应。另外,IL-8 与肥胖和囊性纤维化的发病机制也相关。 如何选择EliKine™ IL-8 elisa试剂盒? 做科研的我们肯定是希望自己的购买的人 白介素-8 ELISA试剂盒其重复性好、特异性强、敏感性高等优点。但目前市场上的人 白介素-8 ELISA试剂盒质量参差不齐,怎么选择适合自己的ELISA试剂盒就显得特别重要。一方面,主要根据自己样本中待检指标的量,这就要求人 白介素-8 ELISA试剂盒的灵敏度,另一方面科学实验讲求重复性,要求ELISA试剂盒,其板内和板间变异系数应该控制在15%以内等等。简单来说ELISA试剂盒在保证高质量数据的情况下,实验时间越短,操作越便利,越容易受到用户欢迎!这也是选择试剂盒的一个指标。 产品名称及描述 货号 产品说明 EliKine™ 人 IL-8 ELISA定量试剂盒 KET6018 详情 为什么我们选择EliKine™ IL-8 ELISA试剂盒? EliKine™ IL-8 ELISA试剂盒具有极高的灵敏度和特异性。对目标蛋白的类似物检测,尚未发现明显的交叉反应或者背景干扰。EliKine™ 双抗夹心人 白介素-8 ELISA试剂盒高品质捕获抗体和检测抗体,适用于多种类型的样品,同时运用可拆卸式酶标板设计,让您可灵活便捷的使用,并提供48次小包装,让你有更多选择!专业的,提供售后服务。广受各科研者的喜爱!选择EliKine™ ELISA试剂盒,就是选择放心! EliKine™ 人 IL-8 ELISA试剂盒优势比较: 因此选择集高特异性与灵敏性于一身的Abbkine EliKine™人 白介素-8 ELISA试剂盒:http://www.amyjet。。com/products/KET6018.shtml,涵
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新技能:新手应如何了解ELISA试剂盒
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
新手应如何了解ELISA试剂盒?上海恒远长期经营各类生物试剂、ELISA试剂盒、抗体、标准品、培养基等生物化学试剂。我公司有着非常完善的售前售后服务,价格实惠,现货供应,质量有保证。客户可以通过、网络订购。 什么是定性?什么是定量? 这些问题是不少实验新手在购买ELISA试剂盒时会咨询到的问题,由于客户们在订购产品的时候咨询到的是我公司业务员,对于一些产品订购流程,基本信息等问题,业务员会跟您详细的解说,涉及到的技术问题时业务员会帮您安排技术指导。今天上海德尔塔生物科技有限公司就和你说说新手对ELISA试剂盒的基本性质。 什么是定性?什么是定量? 定量定性试剂盒是判断一种物质在某种样本中的有无,一般表示为阴性或者阳性,具体是通过OD值来判定的,不能计算出该物质的具体浓度。一般定性试剂盒只会自带一种阴性标准和一种阳性标准。 定量试剂盒是用来测定一种物质在某种样本中的具体浓度值是多少,一般是有单位的,比如ng/ml,这种试剂盒主要是用来测定这种物质的具体变化情况,例如是升高了还是降低了,升高了多少,降低了多少等等。一般用到定量的试剂盒的时候就已经确定样本中含有该物质。 咨询了解更多相关技术分享,欢迎您关注收藏上海恒远ELISA试剂盒供应商商铺。购买或了解详情,可我司业务员。
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金秋九月,分享ELISA试剂盒实验的操作要点
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
ELISA试剂盒应严格遵照规定操作,必能得出准确的结果。首先应选取的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。所以ELISA试剂盒的购买,试剂质量的保证以及实验前实验仪器的检察都是很重要的。 一、标本的采集及保存 1、血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 2、血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 3、细胞培养物上清或其它生物标本:请1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 4、样本处理:血清或血浆标本推荐稀释10,000倍。 注:以上标本置4℃保存应小于1周,-20℃或-80℃均应密封保存,-20℃不应超过1个月,-80℃不应超过2个月;标本溶血会影响zui后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。 二、试剂的准备 按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂. ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的.自配的缓冲液应用pH计测量较正.从冰箱中取出的试 验用试剂应待温度与室温平衡后使用.试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。 三、加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 四、温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 五、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。 六、显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 七、测定
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如何用间充质干细胞无血清培养基培养间充质干细胞
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
如何用间充质干细胞无血清培养基培养间充质干细胞 间充质干细胞无血清培养基,货号NC0103,英文名称:Mesenchymal Stem Cell Serum-free Medium。 【间充质干细胞无血清培养基 用途与描述】 间充质干细胞无血清培养基可用于多种来源的人类间充质干细胞的原代细胞分离及细胞传代,同时还能保持其多向分化的潜能,如骨髓(BM-hMSC)、脂肪组织(AT-hMSC)、脐带(UCM-hMSC)。使用本产品无需添加血清或血清替代物。 间充质干细胞无血清培养基化学成分明确、无血清、无动物源成分。产品批间差异小,所有原料符合GMP标准。更适合临床研究用途。 【间充质干细胞无血清培养基 规格与保存】 产品货号 产品名称 包装规格 保存条件 保存期限 NC0103 间充质干细胞无血清培养基 500mL/瓶 2-8℃,避光保存 12个月 NC0103.S 间充质干细胞无血清培养基添加剂 5mL/瓶 -20℃,避光保存 12个月 NC1003 胰蛋白酶抑制剂 500mL/瓶 2-8℃,避光保存 12个月 * 胰蛋白酶抑制剂,并不用于间充质干细胞的培养。仅单独用于细胞消化时终止细胞消化进程。 由于间充质干细胞无血清培养基中没有添加胰酶抑制剂,因此不可用间充质干细胞无血清培养基终止细胞消化。仅可用胰蛋白酶抑制剂终止细胞消化。 【间充质干细胞无血清培养基 使用方法】 1. 间充质干细胞完全培养基准备 将间充质干细胞无血清培养基添加剂在2-8℃过夜融化,按1:100比例加入培养基基础中即成为间充质干细胞完全培养基。 特别提醒:间充质干细胞完全培养基2-8℃避光可保存30天。 科研用途小量、多次使用,建议采用分装培养基添加剂后以-20℃保存的形式,可避免培养基的浪费。 2. 间充质干细胞复苏(以T-75瓶为例) 1)从冰箱中取出完全培养基,在生物安全柜或超净台中吸取适量(如T-75瓶:10-15mL)完全培养基沿上表面加入间充质干细胞培养瓶中, 切勿冲到培养瓶底面(细胞生长面)。然后慢慢将培养瓶放平,在生物安全柜或超净台中室温放置5-10分钟后使用。 特
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食品安全解释
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
食品安全解释 食品安全(foodsafety):食品供给能够保证人类的生存和健康。 具体含义 食品安全的含义有三个层次: 食品安全 *层 食品数量安全:即一个国家或地区能够生产民族基本生存所需的膳食需要。要求人们既能买得到又能买得起生存生活所需要的基本食品。 第二层 食品质量安全:指提供的食品在营养,卫生方面满足和保障人群的健康需要,食品质量安全涉及食物的污染、是否有毒,添加剂是否违规超标、标签是否规范等问题,需要在食品受到污染界限之前采取措施,预防食品的污染和遭遇主要危害因素侵袭。 第三层 食品可持续安全:这是从发展角度要求食品的获取需要注重生态环境的良好保护和资源利用的可持续。 2 安全标准 编辑 (一)食品相关产品的致病性微生物、农药残留、兽药残留、重金属、污染物质以及其他危害人体健康物质的限量规定。 (二)食品添加剂的品种、使用范围、用量。 (三)婴幼儿的主辅食品的营养成分要求。 (四)对于营养有关的标签、标识、说明书的要求。 (五)与食品安全有关的质量要求。 (六)食品检验方法与规程。 (七)其他需要制定为食品安全标准的内容。 (八)食品中所有的添加剂必须详细列出。 (九)食品中禁止使用的非法添加的化学物质。 3 安全检验 编辑 AB SCIEX的"从农田到餐桌"食品检测解决方案作为在食品和农业领域采用的食品安全检测手段,覆盖了从原材料和加工过程控制,到成品检验及产品销售的全过程。致力于: 1、检验食品和饮料的营养成分 2、应对致癌物非法掺杂 3、筛查食品中不明污染物 4、达到或超过农残分析的新兴监管要求 5、帮助食品生产者或监管者检测痕量水平的过敏原建立在业界的技术基础之上的3200系列串联质谱仪和 Eksigent ekspert ultraLC100 液相色谱仪的组合是灵敏的、可靠的、耐用的技术平台。设计紧凑且性能极高的API 3200?系统专为进行小分子定量分析的高通量实验室而设计,满足环境、食品安全、临床医学、药物开发等领域中所有类型及不同浓度的样品测定
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双抗体夹心法的一些疑问
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
双抗体夹心法的一些疑问: 1.双抗原夹心法的原理: 固相抗原吸附载体 + 血清(抗体)+ 酶结合物(抗原) = 抗原*抗体*抗原复合物; 抗原*抗体*抗原复合物 + 辣根过物氧化酶 《过氧化氢催化》 = 蓝色络合物。 2.双抗体夹心ELISA如何筛选抗体zui适的包被浓度: 采用棋盘滴定法,选择一个阳性标本和一个阴性标本,两者的差异性zui大,且阴性标本吸光值小于0.1-0.2,阳性标本控制在1左右。 3.ELISA中,若在96孔板包被抗体,抗体是被吸附在孔的底部还是内壁? 洗涤时候不会被甩出去。因为在放水浴箱里孵育的那段时间里,血清已经跟杯子里的化学试剂起了反应,粘附在里面了,洗涤甩干只是洗去多余的液体而已。 4.加一抗前要不要洗板? 一般的ELISA实验中封闭液同时也是一抗稀释液,这时就没必要洗板了。但是如果一抗稀释液同封闭液成分不同,则应该洗板,去除封闭液的游离成分。 5.为什么双抗体夹心法是检测抗原zui常用的方法? 1)将特异性抗体与固相载体联结,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。 2) 加受检标本,保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。 洗涤除去其他未结合物质。 3) 加酶标抗体,保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合 的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。 4) 加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色,测知标本中抗原的量。 双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。
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如何对付抗蛇毒血清不良反应
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
抗蛇毒血清是目前西医**毒蛇咬伤*的**方法 。如诊断明确 ,能在早期应用相应的抗蛇毒血清 ,疗效是可靠的。⒈ 血清过敏反应:可出现荨麻疹、气喘、血管性水肿等症状。注射前必须先做过敏试验并详细询问既往过敏史。遇有血清过敏反应,采用抗过敏**。即肌内注射扑尔敏。必要时,应用地塞米松5毫克加入25%(或50%)葡萄糖注射液20毫升中静脉注射;也可用氢化可*松琥珀酸钠135毫克或氢化可*松100毫克加入25%(或50%)葡萄糖注射液40毫升中静脉注射,亦可静脉滴注。⒉ 过敏性休克:可在注射中或注射后数分钟至数十分钟内突然发生。轻者注射肾上腺素后即可缓解;重者需输液输氧,使用升压药维持血压,并使用抗过敏药物及肾上腺皮质激素等进行抢救。如在用药过程中发生过敏性休克反应,速用0.1%肾上腺素0.5毫升皮下注射及地塞米松5~10毫克静脉注射。同時准备好气管插管等急救裝备,以便及時急救。⒊ 血清病:主要症状为荨麻疹、发热、淋巴结肿大、局部浮肿,偶有蛋白尿、呕吐、关节痛,注射部位可出现红斑、瘙痒及水肿。一般系在注射后7~14天发病,称为延缓型;亦有在注射后2~4天发病,称为加速型。可使用钙剂或抗组织胺药物来**,一般数日至十数日即可*。
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关于血清保存冻融要点
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
血清是血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,则凝血反应被激活,血液迅速凝固,形成胶冻。关于血清保存冻融有以下几点: 1、需要长期保存的血清必须储存于-20℃冰箱。 2、4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。 3、由于血清结冰时体积会增加约10%,血清在冻入低温冰箱前必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。 4、血清一般为无菌,因此不用再过滤除菌。 5、如发现血清有悬浮物,可将血清加入培养液内一起过滤,不能直接过滤血清。 6、血清解冻时需采用逐步解冻法,从低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天,然后移入室温待全部溶解后再分装。 7、在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀,注意不要产生气泡,不要产生沉淀。 8、不能直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。 9、血清灭活是指56℃加热 30分钟处理已完全解冻的血清,加热过程中应该摇晃均匀,使血清中的补体成分灭活。 10、除非必须,商品化血清不需要灭活处理,热处理会造成血清沉淀物显著增多。 11、不能将血清在37℃放置超过2天,血清会变得浑浊,同时降解血清中的有效成分。 12、血清中的沉淀絮状物主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清质量,3000rpm离心 5分钟即可去除。 13、显微镜下小黑点是由于经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多,有些沉淀物在显微镜呈现为黑点,常误认为血清受污染。 14、通常,黑点不多时不会影响细胞生长。