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即用型平板培养基标本的保存及温度
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
即用型平板培养基标本的保存及温度对检测结果的影响2-8度下可以保存一周时间,-20度可以保存1个月左右。-80度可以保存1年以上。-196度可以保存10年以上如果按照这个标准保存对结果不是没有影响只是在误差允许的范围,你就是再好的条件,放长了都会有影响。满足以上条件的样本,对检测结果不会造成实质的影响。换句话说,如果样本是这样保持的,在这个时间内检测的结果是有意义的。当然要排除样本在保存前就已经存在问题的这种可能性组织标本做elisa实验的话,建议做好组织匀浆后,取上清进行保存,这样效果更好不建议直接用组织进行冻存。我司专业销售各种品牌价格档次的即用型平板培养基。服务于高校及免疫学科研单位。品质保证,售后服务完善。并可以免费代检测,更好的为您服务。Lathyrol HPLC≥98% 千金子二萜醇 Lathyrol 千金子二萜醇 20mg/支 LathyrolBorneol HPLC≥98% 龙脑 Borneol 龙脑 20mg/支 Borneol5-hydroxymethyl-2-furaldehyde HPLC≥95% 5-羟甲基糠醛 5-hydroxymethyl-2-furaldehyde 5-羟甲基糠醛 20mg/支 5-hydroxymethyl-2-furaldehydeβ-Carotene HPLC≥90% β-胡萝卜素 β-Carotene β-胡萝卜素 20mg/支 β-CarotenePatchouli alcohol HPLC≥98% 百秋李醇 Patchouli alcohol 百秋李醇 20mg/支 Patchouli alcoholDehydrocostus Lactone HPLC≥98% 去氢木香内酯 Dehydrocostus Lactone 去氢木香内酯 20mg/支 Dehydrocostus Lactone即用型平板培养基
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『PCR实验污染』的解决办法!
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
PCR污染是每个实验室都多多少少会遇到的问题。原因在于,PCR是非常灵敏的一项检测,100个拷贝之内的靶序列就足以产生阳性扩增,从而容易出现DNA污染导致的假阳性。那么,怎样远离PCR的污染呢? 图 PCR污染之一瞥 首先,要辨别PCR污染的来源。设立阴阳性对照,有利于检测反应体系各成分的污染情况。尤其是设立空白对照,即包括PCR的全部组分,而不加模板DNA,这对检测试剂中PCR产物残留污染是非常有益的。 在排除试剂污染的可能性外,更换试剂后,若不久又发现试剂被污染了,则考虑可能为环境污染。环境污染的zui主要原因是DNA溶液的溅出和DNA气溶胶造成的实验区域的污染,这尤其在PCR产物扩增区容易出现。移液器枪头和EP管架是也较常见的污染部位。 如果是环境污染,还可对每个区域进行涂抹采样和核酸提取,以zui终鉴定污染的区域所在。德国Minerva Biolabs公司专门生产有DNA污染监测试剂盒(货号181-0010和182-0010),比较方便使用。 对PCR的环境污染,有如下几种治理方法: 1. 用常规消毒液定期在环境中喷雾消毒处理。 2. 稀酸处理法:对可疑器具用1mol/L盐酸擦拭或浸泡,使残余DNA脱嘌呤;其缺点是盐酸对皮肤有一定的腐蚀性。 3. 紫外照射法:紫外波长一般选择254/300nm,照射30分钟至2小时。但需要注意的是,UV照射仅对500bp以上长片段有效,对短片段效果不大。 4. 选用商品化的DNA污染祛除剂。我们推荐的是Minerva公司的PCR CleanTM 喷雾剂、湿巾。其1分钟即起效,方便快捷,*,可同时去除DNA和RNA。作用1分钟后,用纸巾擦拭,即可完成对DNA污染的清除。 对于PCR反应液的污染,可采取以下方法: 1. DNase I 法:PCR混合液(未加模板和Taq聚合酶)加入0.5U DNase I,室温反应30min后加热灭活,然后加入模板和Taq聚合酶进行正常PCR扩增。 2. 内切酶法:选择识别4个碱基的内切酶(如MspI和TaqI等),可同时
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质控血清的制备
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
每个实验室可以根据自己的条件,选用临床中心提供的质控血清,或按以下方法自己制备本室使用的质控血清(以乙肝质控血清为例)。 1)收集新鲜的无溶血、无黄疸、无细菌污染的阳性血清。 2)56℃加热10小时来活。 3)离心或过滤除去沉淀。 4)用10%的小牛血清或正常人血清(PBS缓冲液)将收集的血清稀释至所需的浓度。如能用正常的人血清稀释更好,因其成份更接近于检测标本。 5)抽滤除菌。按一次使用的量分装小安瓿,封口,20℃保存备用。不可反复冻融。被检物要求检出的水平常被认为是质控血清应选择的水平。如果该试验还有其它要求医学教|育网|收集整理,则应加所要求浓度的质控物。 6)标定含量。20-30次测定结果删除>±2SD数据的均值作为靶值,并与已知定值血清对比测定。
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植物中性转化酶活性检测试剂盒说明(NI)
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
l 本试剂盒用于体外定量检测组织、细胞及相关液体样本中植物中性转化酶(NI)的活性。 l 有效期:6个月 l 保存条件:2-8℃ 实验原理 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被植物中性转化酶(NI)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的植物中性转化酶(NI)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。 样本处理及要求 1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过一夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。zui后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。 4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 注:标本溶血会影响zui后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。 需要而未提供的试剂和器材 酶标仪(450nm) 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 37℃恒温箱 蒸馏水或去离子水 试剂盒组成 备注: 1. 标准品浓度依次为:32、16、8、4、
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实验准备还没做好,怎么能开始实验
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
机会从来不会眷顾没有准备的人,不断做什么事都要准备充分才有充足的底气,elisa试剂盒实验亦是如此,只有做好实验前的准备工作,才能放心大胆的开始实验。 1、仔细阅读说明书,确定试剂盒在有效期内。2、按说明书确定所有试剂齐全,以及所有实验额外所需物品,如试管、吸头、移液器、离心机等。3、标本制备要规范,每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备(贮存),尽量分装做备份,短期内无法实验者,注意低温保存。4、按说明书将所用试剂平衡至室温,配制所需试剂。5、选择抗体时选择一个单抗和一个多抗进行配对,若选择两个单抗,必须识别不同表位的抗体,从同一家公司选择抗体对。6、一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml到15pg/ml,可利用标准的ELISA操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。 上海沪鼎作为实验的好伙伴,一直以来都是用自己zui大努力去为科研事业助力,只有用真心才能换来信任,我司将会通过更多的努力为科研工作者提供更加好的试验产品,如果您想了解更多关于我司产品,欢迎您的咨询来电。
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ELISA试剂盒实验步骤记录的书写
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
ELISA试剂盒实验记载本主页一般作为目录页,可在实验初步后接连填写,或在实验结束时一致填写。 实验记载本应作为宣告论文和实验室科技档案管理的*文件,研究生毕业应在离校前将全部实验记载和其他科研资料上缴实验室保管和存档,不得随意处置或丢掉。实验记载需修正时,选用划线办法去掉原书写内容,但须保证仍可辨认,然后在修正处签字,避免随意涂抹或完全涂黑,空白处可符号“废”字或 打叉。ELISA试剂盒实验记载笔迹规整,选用规范的专业术语、计量单位及外文符号,英文缩写初次出现时须注明全称及中文释名,运用蓝色或黑色钢笔、碳素笔记载,不得运用铅笔或易褪色的笔(如油笔等)记载。实验原始记载须记载于正式实验记载本上,实验记载本应按页码装订,须有接连页码编号,不得缺页或挖补。每次实验须按年、月、日次第在实验记载本相关页码右上角或左上角记载实验日期和时间,也可记载实验条件如天气、温度、湿度等。ELISA试剂盒实验记载中应照实记载实践所作的实验,实验效果、表格、图表和相片均应直接记载或订在实验记载本中,变成*记载。
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江西南昌ELISA试剂盒样本收集与保存
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
上海德尔塔生物自主KA&M-BIO老牌ELISA试剂盒,质量100%保证,价格100%美丽,售后100%到位。江西南昌ELISA试剂盒样本收集与保存 血清样本处理 全血标本请于室温放置2小时或2 - 8°C过夜后于2 - 8°C 1,000 x g离心15分钟,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。解冻后的样品应再次离心,然后检测。 血浆样本处理 可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1,000 x g离心15分钟,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。解冻后的样品应再次离心,然后检测。 细胞培养上清样本处理 标本于2 - 8°C 1,000 x g离心15分钟取上清,上清立即用于实验,或分装后于-20°C或-80°C保存。避免反复冻融。 尿液样本处理 用无菌管收集尿液于2 - 8°C 1,000 x g离心15分钟取上清,上清立即用于实验,或分装后于-20°C或-80°C保存。避免反复冻融。试验前再次离心,以去除在样本保存期间可能出现的一些沉淀 组织样本处理 取100mg组织,用1X PBS洗去血污。剪成小块放入组织研磨器(匀浆管)中,加入1 mL 1X PBS,制成匀浆,然后置于-20°C过夜。经过反复冻融2次处理破坏细胞膜后,将组织匀浆于2 - 8°C 5,000 x g离心5分钟取上清。取适量上清液立即进行实验,或将上清分装保存于-20°C或-80°C。解冻后的样品应再次离心,然后检测。避免反复冻融。 细胞裂解液样本处理 将长满细胞的培养瓶放置在冰上,用吸液管吸出培养液。加入足够的冷的1X PBS (pH 7.2-7.4)在培养瓶中充分洗涤细胞表面,以洗去瓶中残留的培养基,倒掉1X PBS。尽可能吸干残留的1X PBS,尽量在冰上操作。将清洗过的细胞转移到合适的离心管中,用1X PBS (pH 7.2-7.4)稀释到浓度为100 million/mL。然后置于-20°C过夜。经过2轮反复冻融破坏细胞壁后,于2 - 8°C 5,000 x g离心5分钟取上清,上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20°C保存,但应避免反复冻融。解冻后的样
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ELISA试剂盒有哪些操作技巧呢?(新手必读)
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
今天上海德尔塔生物科技有限公司来告诉您ELISA试剂盒的17种操作技巧,如若您掌握了这些实验技巧之后,在做ELISA实验中,试验起来会更熟练,大大的降低了实验过程中的风险,ELISA试剂盒实验的入门新手掌握了这些知识后,操作起来都会快的多。 ELISA试剂盒陈技术总结的17个相关操作技巧如下: 1.切记在加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 2.合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。 3.在吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。 4.务必做双孔实验,这样才既能保证数据的准确性,又能反映出试剂盒的精密度。 5.样品稀释液应用加液器加注,并经常校对其准确性。 6.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。 7.未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液。 8.ELISA试剂盒实验中,加样后及时放人孵箱,标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。 9.剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟,或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。 10.人ELISA试剂盒洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。 11.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。 12.手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置15~30s,不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中,防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。 13.对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。 14.没有去离子水或双蒸水时,可以使用娃哈哈纯净水配制溶液,切勿使用自来水。 15.在使用微量加样器时,吸取不同瓶子中液体后要更换枪头,即使吸取标准品溶液。 1
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胎牛血清的解冻和灭火
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
解决血清使用中的常见问题 1、 如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损? 将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。 长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。 我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。 2、血清中包含絮状沉淀,它们是什么,怎么处理? 沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除去沉淀,离心血清(400g,1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部,将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以,使用产品时要摇动并加热血清至37℃,沉淀会自然消失。 3、实验室如何选择适合的血清? 国内一致认为HYCLONE的血清是的,但是根据我在北美的经历,国外一般认为GIBCO比HYCLONE好,所以并不是价格决定质量,但是总的来说这两种价格普遍偏贵,一般不是太娇气的细胞,国产的就够用了 。此外,由于国内HYCLONE,GIBCO并没有生产线,我们只能从代理商那里买,而代理商又鱼龙混杂,所以买到假货的可能性也很大。所以,我一般会从直销员那里买血清,有的国外生物公司由于刚刚进入中国,度不高,但是其实在 国外已经做得很不错了,如Wisent等,他们在国内有办事处,我会从那里拿,血清的品质和HYCLONE不相上下,但价格相对优惠很多。 4、 如何避免血清中产生沉淀? 按如下操作可避免沉淀的产生: (1)解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。 (2) 血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。 (3)
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新西兰血源胎牛血清解冻和灭火
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
解决血清使用中的常见问题 新西兰血源胎牛血清解冻和灭火 1、 如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损? 将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。 长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。 我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。 新西兰血源胎牛血清解冻和灭火 2、血清中包含絮状沉淀,它们是什么,怎么处理? 沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除去沉淀,离心血清(400g,1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部,将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以,使用产品时要摇动并加热血清至37℃,沉淀会自然消失。 3、实验室如何选择适合的血清? 国内一致认为HYCLONE的血清是的,但是根据我在北美的经历,国外一般认为GIBCO比HYCLONE好,所以并不是价格决定质量,但是总的来说这两种价格普遍偏贵,一般不是太娇气的细胞,国产的就够用了 。此外,由于国内HYCLONE,GIBCO并没有生产线,我们只能从代理商那里买,而代理商又鱼龙混杂,所以买到假货的可能性也很大。所以,我一般会从直销员那里买血清,有的国外生物公司由于刚刚进入中国,度不高,但是其实在 国外已经做得很不错了,如Wisent等,他们在国内有办事处,我会从那里拿,血清的品质和HYCLONE不相上下,但价格相对优惠很多。 4、 如何避免血清中产生沉淀? 按如下操作可避免沉淀的产生: (1)解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。 (2) 血清分装冻存时,
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ELISA试剂盒SCI文章规范与注意事项
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
ELISA试剂盒SCI文章在使用酶标仪之前是通过目测判断结果,操作过程随意性较大,在使用酶标仪后操作ELISA试剂盒必须规范。 1. 使用移液器加液,移液枪头不能混用。 2. 洗板要干净,避免交叉污染。 3. 严格按照试剂盒的说明书操作,反应时间准确。 4. 请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部,操作完成注意做好清洁工作。 5. 不要在测量过程中关闭电源。 6. 对于因试剂盒问题造成的测量结果的偏差,应根据实际情况及时修改参数,以达到有效的效果。 7. 使用后盖好防尘罩。 8. 出现技术故障时应及时与厂家,切勿擅自拆卸酶标仪。 ELISA试剂盒需注意: A、 不同厂家生产的试剂盒因生产工艺和操作方法略有不同,务必按照所用试剂盒严格操作,否则容易产生检测结果的不确定性. B、 若不同批号试剂的不同组分(A液或酶工作液),或不同试剂的不同组分进行交叉使用,有可能出现显色浅或本底高,花板等情形。 C、 加样时样品量误差,对于阴或很阳的标本影响不大,但对阈值附近的标本影响极大,建议校对加样器。 D、 反应时间的误差,做大量标本时,*孔和zui后一孔以及一些特殊标本可能影响较大。 E、 由于滴瓶的精密性肯定不如加样器,不排除不同滴头滴量的误差。另外滴加过程中是否产生气泡、速度是否均匀,是否颤动等影响液量的因素均可导致以上情况。高标准要求时应使用加样器。 F、 阈值附近实际上是个灰区(gray scale),不能截然分为阴性、阳性,国外厂家均要求对这部分可疑标本进行奇数次复检,以次数多者为准,如一次阳两次阴zui后判为阴,但实际上是否为阴不好说,只有判为可疑,临床上可以让患者过一段时间后再测。 G、 肉眼观察稍显色,ELISA试剂盒SCI文章酶标仪打印为阴性的标本在实际工作中是难以避免的,肉眼目测结果不可靠,应以酶标仪判读为准。 H、 由阴性变为强阳性原因多为操作过程中漏加试剂等有关。 I、 临界值附近标本波动为正常现象,任何试剂均不可避免。可以考虑将标本做奇数次复检。 绵马贯众素ABBA 12
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ATCC菌种可阻止流感病毒感染
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
ATCC菌种是另外一条防线,它们大部分焦点在于病毒外壳上的蛋白质,神经氨酸酶以及血凝素 (HA)。有些药物阻挡神经氨酸酶,该神经氨酸酶可帮助病毒逃离感染后的细胞,且可增强并病毒的耐药性。HA 是科学家的下一个目标。该蘑菇形状的蛋白专注于感染细胞,在靶细胞的表面,首先结合到其头部的三个位点上,然后到三个不同的糖分子上。一旦病毒抓住了,部分 HA 的主干可像抓钩一样将病毒推得更近,让其布满细胞膜,并释放其内部毒素。 2011 年,由 Baker 带领的西雅图华盛顿大学计算生物研究团队,设计了一种蛋白可结合到 HA 的主干,这样可阻止培养的细胞被病毒感染。但是由于该主干经常被另外的蛋白遮挡,因此药物很难到达其位点。 现在,Baker 的团队已经设计了另外一种蛋白,作用于 HA 暴露在更外面的头部。他们首先通过分析 x - 射线的晶体结构,观察到原子的详细信息,包括如何结合到人体的抗体上,并抓住 HA 头部的三个糖分子。他们复制了小部分抗体,并将抗体挤进结合位点里。科学家们接着使用蛋白设计软件 Rosetta 将头部位点增加三倍,并增加了第三部分,三角形的蛋白,计算机通过计算将其与 HA 的头部基团吻合,像一顶帽子。下一步,他们合成了一个机遇,用于编码蛋白,并将其插入细菌,从而制作复制子来对他们进行测试。 在测试时,Baker 的团队人员将蛋白复制子固定在硝酸纤维样的类纸质材料上。然后将其暴露于各种病毒菌株中,通过抓住或者固定住。“我们称之为流感胶水,因为他们不能再移动了,”Baker 说道。在另外的试验中,蛋白阻止了病毒对培养细胞的感染,甚至可保护老鼠免受病患,在暴露流感病毒一天前或后管理。他们在今天的《自然生物技术》上报道了该研究。 尽管看到了这些起始的成功,Baker 与 Crowe 注意到,设计的蛋白不可能成为药物。Baker 说,首先,该蛋白并不能结合所有感染人体的常见病毒。这就意味着,ATCC菌种未来的药物既需要在 HA 头部的结合蛋白,亦要与主干结合位点结合。其次,该设
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如何判断你的细胞是何种污染
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
细胞培养中常见的生物污染类型有7种,分别是细菌污染、支原体污染、原虫污染、黑胶虫污染、真菌污染、病毒污染以及非细胞污染。他们在细胞培养中污染的特点如下:1、细菌:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。2、支原体:黑色的,好象多为多形,培养液一般培养液一般会浑浊,原体感染,国内血清很多都没有做支原体阴性检测,而支原体是牛血清中zui常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后,细胞病变不很明显,只是慢慢死*。3、黑胶虫:可以穿透滤膜,也可以通过空气传播,低倍下为黑色点状,高倍下可看见黑色的小虫游来游去,培养液也是不浑的,一般不会太影响,细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好,且观测到的运动物无明显增多,且培养液颜色、透明度无明显变化,可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响,在细胞增殖旺盛之后会自然消失,除更换血清外无须特殊处理。4、真菌:一般培养液清亮,不变色,镜下有丝状物,有些真菌开始很像死细胞碎片,只是它很多很多的小块很清楚,象珊瑚状,不象细胞碎片分不清,慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢,不象细菌那么容易被发现,但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了,也很难救活了。5、原虫:培养液可轻微浑浊,显微镜下那些细小的点状物数量非常多,轻微活动,细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢,而且细胞状态不好,边缘不清楚,细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的,但他们的数量小,细胞占优势所以不会影响到细胞的正常生长,只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长,zui终形成恶性循环。6. 病毒:组织细胞培养过程中,如果没有除去潜在的病毒,就会产生病毒污染。目前,从原代猴肾细胞的培养中已发现不少于20种血清性病毒。 尽管病毒污染的细胞不影
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细胞培养中如何消除组织培养的污染
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
当重要的培养污染时,研究者可能试图消除或控制污染。首先,确定污染物是细菌、真菌、支原体或酵母,把污染细胞与其它细胞系隔离开,用实验室消毒剂消毒培养器皿和超净台,检查HEPA过滤器。 高浓度的抗生素和抗霉菌素可能对一些细胞系有毒性,因而,做剂量反应实验确定抗生素和抗霉菌素产生毒性的剂量水平。这点在使用抗生素如两性霉素B和抗霉菌素如泰乐菌素时尤其重要。确定毒性水平和消除培养污染的实验步骤: 1.在无抗生素的培养基中消化、计数和稀释细胞,稀释到常规细胞传代的浓度。 2.分散细胞悬液到多孔培养板中,或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内,把选择抗生素加入到每一个孔中。例如,两性霉素B推荐下列浓度,0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0 mg/ml。 3.每天观测细胞毒性指标,如脱落,出现空泡,汇合度下降和变圆。 4.确定抗生素毒性水平后,使用低于毒性浓度2~3倍浓度的抗生素的培养液培养细胞2~3代。5.在无抗生素的培养基中培养细胞一代。6. 重复步骤4。7. 在无抗生素的培养基中培养4~6代,确定污染是否以已被消除。
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进口人血清的关键作用与实验设计
作者:德尔塔 日期:2022-04-02
我公司供应的科研血清产品种属有人、牛、鸡、猪等,质量保证,其中进口人血清与胎牛血清zui为热销,在今天的内容中,针对人血清产品介绍作用与实验设计,我们先来看看它的关键作用是怎样的。 1.提供基本营养物质,像氨基酸、维生素等是细胞生长必须的物质。 2.提供激素和各种生长因子,像胰岛素、肾上腺皮质激素等。 3.提供结合蛋白,结合蛋白作用是携带重要地低分子量物质,在细胞代谢过程中起重要作用。 4.提供促接触和伸展因子使细胞贴避免受机械损伤。 5.对培养中的细胞起到某些保护作用。 实验设计 6.现代科研的基本模式是假说驱动的,无法验证的假说难以进入科研活动过程,当然从大的历史条件,许可的假说许多年后才被证明。 7.合理性是现代科学研究所要求的规范,有的思路具有新奇性,但缺乏基本点逻辑性。一些民间人士经常会提出一些非常新起点思路,但是违背基本科学逻辑,只是表面上具有轰动效应,本质上属于垃圾思路。 制备方法: 1.正常人从血管抽出的血液不加抗凝剂,自然凝固,经离心沉淀,下面红色部分为血下班部分(红细胞、白细胞、血小板)上面淡黄色部分就叫血清,里面没有第5、第8凝血因子及纤维蛋白原。 2.正常人从血管、抽出的血液不加抗凝剂,自然凝固,经离心沉淀,下面部分为血细胞,上面淡黄色部分就叫血浆。