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文献中遇到的实验动物知识：基因敲除小鼠
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
投稿人：郭晓冲 中国医科大学动物部 写给看文献的你们： 我在这里想写一些看文献时可能遇到的实验动物知识，希望对大家有帮助。为了便于理解，语言偏通俗，可能不够严谨。如果大家希望深入了解实验动物专业知识，欢迎选修实验动物学。 第一集，关于基因敲除小鼠。 基因敲除小鼠（Knockout Mice），人们使用复杂的方法使小鼠体内的某一个基因不表达，从而使小鼠呈现这个基因缺失的状态，可用于研究这个基因的功能。 但如果某个基因功能特别重要，这个基因缺失可能具有胚胎致死性，那我们就无法得到这种基因敲除的小鼠了，于是人们发明了条件性基因敲除技术。这一技术可以实现在特定的时间、特定的细胞或组织内使某个基因沉默。方法是首先在目的基因（就是打算敲除的那个基因）的两侧分别插入一段名为LoxP的DNA序列（LoxP序列是一段34bp的DNA序列，两端的13个碱基为回文序列，中间的8个碱基决定LoxP的方向。具体序列如下：5' - ATAACTTCGTATA - ATGTATGC - TATACGAAGTTAT - 3' 3' - TATTGAAGCATAT - TACATACG - ATATGCTTCAATA - 5'）。然后我们需要用到一种带有Cre酶的转基因小鼠了。 下面分别解释一下转基因小鼠和Cre酶。 转基因小鼠（Transgenic Mice），使用分子生物学方法使小鼠表达了一种小鼠本来没有的基因，这个基因是人为插入的，可能是人的，大鼠的或者其他物种的。这个星球上第一只转基因小鼠就表达了大鼠的生长素（growth hormone）基因，于是那只小鼠长到了大鼠的体型。 Cre酶是在噬菌体内发现的一种酶，它能特异性的识别LoxP序列，并把同方向排列的两个LoxP序列之间的DNA切掉。前面说了，我们把LoxP序列放到了打算敲除基因的两侧，那么我们如果把Cre酶放到细胞核里，目的基因就被Cre酶切掉，从而实现目的基因敲除了。于是人们制作了能够表达Cre酶的转基因小鼠。把Cre转基因小鼠和插入了LoxP序列的小鼠交配，就可以得到同时携带Cre和LoxP序列的小鼠了。当Cre在细胞核内遇见LoxP序列，目的基因就被敲除
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写给看文献的你们 系列四：小鼠、大鼠安乐死方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
写给看文献的你们 系列四：小鼠、大鼠安乐死方法！！！ 投稿人：郭晓冲 中国医科大学动物部 写给看文献的你们 系列四：小鼠、大鼠安乐死方法！！！ 当实验动物完成了它的使命后，它应该有权利没有痛苦的死去。安乐死是人类文明的产物，对实验动物进行安乐死也是文明的体现。 美国兽医协会推出的动物安乐死指南（AVMAGuidelines for the Euthanasia of Animals）提供了可以参考的安乐死方法。（为什么不用中国的？因为中国的指南还等待着各位去努力制定。）指南内推荐的方法，是被广泛接受和认可的方法，给动物带来的痛苦和紧张都很小。我把我认为有用的部分摘录如下，更多内容请大家查阅上述指南。 推荐的小鼠、大鼠安乐死方法： 1 过量麻醉：静脉或腹腔注射3倍麻醉剂量的巴比妥类药物。 2 颈椎脱臼：动物需小于200g。 3 二氧化碳窒息：将动物放入清洁的容器内，缓慢通入二氧化碳。随着二氧化碳浓度的升高，动物会慢慢的没有痛苦的死去。一般10分钟足以使动物死亡，但使用二氧化碳窒息法安乐死的动物必须逐一检查是否彻底死亡，如发现未死亡的动物，补充给予颈椎脱臼处理。需要注意的是新生鼠对缺氧比较耐受，二氧化碳窒息时间需要大于50分钟。 最后，希望中国尽快通过安乐死立法（人的哦！）。我希望自己老的时候可以选择死亡的方式。
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孔洞实验/孔板实验/洞板实验操作步骤及注意事项介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
孔洞实验/孔板实验/洞板实验（the holeboard test） 一.基本原理 孔板实验是Boissiex和Simon1962年首次建立的，此后被广泛用于药效研究。该实验是利用新奇(curiosity)和恐惧(fear)两个因素来控制动物在新环境下的行为，用逃避(escapes) 来反映这两个因素的作用结果。动物反复钻头(head一dipping)反映其新奇感和对逃避的渴望。一般认为，药物在不影响动物运动活性的剂量下，增加钻头次数和时间，表现为抗焦虑作用，减少钻头次数和时间则为致焦虑作用。 二.操作步骤 大鼠和小鼠的实验装置有所不同。大鼠装置为一个66cm x 56cm x 47cm的木箱，底板有4个直径为3 . 8cm、深1 cm的等大圆孔，其中两孔离最近壁14cm，另两孔17cm，孔板水平抬高12em;小鼠木箱为44cm x 40cm x 27cm , 4个孔的孔径均为3cm，厚1. 8cm，每孔中心离最近壁的距离为l0cm。 80年代之后，孔板箱壁及每一孔周边都装有红外光电管，并与微机相联，这样可同时自动记录动物的钻头次数和钻头时间、运动活性及站立数等多项指标，既提高了工作效率，又增加了实验的可靠性。实验用雄性成年的大鼠或小鼠。将动物置于孔板中央，背朝观察者。动物两眼消失在洞中为一次钻头(a head一dip)，记录5-10min的钻头次数及钻头持续时间。 三.注意事项与评价 （1）对孔板箱的形状和大小没有统一的标准，但常采用方型，其边长在大鼠一般60cm,小鼠为40c m左右。 (2)孔的数量早期多为16孔，现在通常采用4孔板。 (3)动物在上午的钻头数往往比下午多。因此，应尽量在每天固定的时间内做实验。 (4)本实验对致焦虑药(如BDZ受体反相激动剂)引起探究性钻头的特异性降低结果较为一致，而某些缺乏抗焦虑作用的药物(如BDZ受体拮抗剂氟马西尼)反可使探究性钻头增加。故在筛选未知药物时应结合其它焦虑模型进行评价。
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分子生物学相关实验步骤及注意事项（三）qPCR篇
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
——荧光定量PCR篇—— 实时荧光定量PCR (Quantitative Real-time PCR)是在常规PCR基础上加入荧光标记探针或相应的荧光染料，每经过一个循环，收集一个荧光强度信号，随着PCR反应的进行，PCR反应产物不断累计，荧光信号强度也等比例增加。 一般而言，荧光扩增曲线可以分成三个阶段：荧光背景信号阶段, 荧光信号指数扩增阶段和平台期。在荧光信号指数扩增阶段，PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系，可以选择在这个阶段进行定量分析。 （一）荧光阈值和CT值 荧光阈值（threshold）是在荧光扩增曲线上人为设定的一个值，它可以设定在荧光信号指数扩增阶段任意位置上，但一般荧光域值的缺省（默认）设置是3-15个循环的荧光信号的标准偏差的10倍。 CT值是指PCR扩增过程中，每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数。 CT值与起始模板的关系：研究表明，每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系，起始拷贝数越多，Ct值越小，公式如下：Ct=-1/lg(1+Ex)*lgX0+lgN/lg(1+Ex) n为扩增反应的循环次数，X0为初始模板量，Ex为扩增效率，N为荧光扩增信号达到阈值强度时扩增产物的量。 利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线，其中横坐标代表起始拷贝数的对数，纵坐标代表Ct值。因此，只要获得未知样品的Ct值，即可从标准曲线上计算出该样品的起始拷贝数。 （二）荧光探针和荧光染料 荧光定量检测根据所使用的标记物不同可分为荧光探针和荧光染料。 SYBR Green I是荧光定量PCR最常用的DNA结合染料，与双链DNA非特异性结合。在游离状态下，SYBR Green I发出微弱的荧光，但与双链 DNA 结合后，其荧光大大增强。SYBR Green I 用于qPCR无需探针，设计的程序通用性好，且价格相对较低。利用荧光染料可以指示双链 DNA 熔点的性质，通过熔点曲线分析可以鉴定有无PCR杂带、引物二聚体等。但是SYBR Green I 无模板特异性，因此会引起假阳性而影响定量的精确性。TaqMan探针是一种寡核苷酸
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实验动物体液采集方法介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
实验动物体液采集方法 一、 血液的采集 常用的采血方法有割（剪）尾采血、眼眶静脉丛采血、断头采血、心脏采血、颈静脉（动脉）采血、股动脉（静脉）采血、耳静脉采血、前肢头静脉采血、后肢小静脉采血等。 二、 尿液的采集 实验动物的尿液常用代谢笼采集，也可通过其他装置来采集。 （一）、用代谢笼采集尿液 代谢笼用于收集实验动物自然排出的尿液，是一种特别设计的为采集实验动物各种排泄物的密封式饲养笼，有的代谢笼除可收集尿液外，又可收集粪便和动物呼出的CO2。一般简单的代谢笼主要用来收集尿液。防在代谢笼内饲养的实验动物，可通过其特殊装置收集尿液。 （二）、导尿法收集尿液 施行导尿术，较适宜于犬、猴等大动物。一般不需要麻醉，导尿时将实验动物仰卧固定，用甘油润滑导尿管。对雄性动物，操作员用一只手握住阴茎，另一只手将阴茎包皮向下，暴露龟头，使尿道口张开，将导尿管缓慢插入，导尿管推进到尿道膜部时有抵抗感，此时注意动作轻柔，继续向膀胱推进导尿管，即有尿液流出。雌性动物尿道外口在阴道前庭，导尿时于阴道前庭腹侧将导尿管插入阴道外口，其后操作同雄性动物导尿术。 用导尿法导尿可采集到没有污染的尿液。如果严格执行无菌操作，可收集到无菌尿液。 （三）输尿管插管采集尿液 一般用于要求精确计量单位时间内实验动物排尿量的实验。剖腹后，将膀胱牵拉至腹腔外，暴露膀胱底两侧的输尿管。在两侧输尿管近膀胱处用线分别结扎，于输尿管结扎处上方剪一小口，向肾脏方向分别插入充满生理盐水的插管，用线结扎固定插管，即可见尿液从插管滴出，可以收集。采尿过程中要用38℃热生理盐水纱布遮盖切口及膀胱。 （四）压迫膀胱采集尿液 实验人员用手在实验动物下腹部加压，手法既轻柔又有力。当增加的压力使实验动物膀胱括约肌松弛时，尿液会自动流出，即行收集。 （五）穿刺膀胱采集尿液 实验动物麻醉固定后，剪去下腹部耻骨联合之上，腹正中线两侧的被毛，消毒后用注射针头接注射器
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Morris水迷宫测试指标/评价指标对实验结果的影响研究
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
探讨Morris水迷宫测试指标/评价指标 虽然文献中提到了纷繁复杂的评价指标，但对这些指标并没有进行很好的特征化和准则化。例如，游泳速度明显是运动能力的指标，路径长度又受游泳速度和游泳时间（潜伏期）的双重影响，理论上不应该是判断认知能力的很好指标。所以，对各项指标所反映的行为性质需要进行探讨，解释这些指标时要慎重。单用潜伏期作为指标并不能提供有关空间学习的足够信息，因为游泳速度快也并非意味着学习效率就高，记忆能力就好。 参数定义准则： 1.总路程（总活动度）即实验动物总的运动路程：与动物自身的游泳速度直接相关，在相同的时间内，只反映动物的游泳速度的快慢；即路程越长，反映了动物的游泳速度越快。 2.总时间：开始录像到录像结束的总观察时间，即为单次的训练时间，一般现在为60s。 3.平均速度：总路程/总时间，从中可以看出动物游泳速度的个体差异来，动物的潜伏期和游泳速度有一定的关系； 4.上台时间（潜伏期）：指实验动物每次入水后第一次成功找到站台所需的时间；成功上台是指在台上逗留时间超过5～10秒钟（可自己定义），如果逗留时间不足5～10秒，则不算上台，潜伏期时间即为训练时间； 潜伏期是morris水迷宫一个很重要的参照指标，它的时间长短也代表着动物空间学习记忆能力的好坏，潜伏期短，预示着动物的学习记忆能力好；但是和动物自身的游泳速度有关，比如有的正常大鼠游泳速度慢些，所以潜伏期比痴呆组动物还长，另外，某些动物放入水中后会左右观望打圈，或者原地不动确定方向后直接游到台上，出现这种现象，说明动物记忆力好，这个现象是很重要的，如果在**组动物发现这种情况，是非常好的。但是由于动物原地不动，这个时候潜伏期的时间可能会长，所以潜伏期并不能作为判断记忆力好坏的最终指标。 5.上台前路程：指实验动物在第一次成功上台前所运动的路程；与潜伏期时间相关，潜伏期时间越长，上台前路程也就越大；二者之间呈正相关系，所以也间接反映了潜伏期
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蛋白质质谱鉴定技术概述及常见问题解决方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
蛋白质（Protein）是生物体中含量最高，功能最重要的生物大分子，存在于所有生物细胞，作为生命的物质基础之一，蛋白质在催化生命体内各种反应进行、调节代谢、抵御外来物质入侵及控制遗传信息等方面都起着至关重要的作用，因此蛋白质也是生命科学中极为重要的研究对象。 现代研究结果发现越来越多的多肽同蛋白质一样具有生物功能，建立具有特殊、高效的生物功能肽的肽库是现在的研究热点之一。因此需要高效率、高灵敏度的肽和蛋白质序列测定方法支持这些研究的进行。现有的肽和蛋白质测序方法包括N末端序列测定的化学方法Edman法、C末端酶解方法、C末端化学降解法等，这些方法都存在一些缺陷。例如作为肽和蛋白质序列测定标准方法的N末端氨基酸苯异硫氰酸酯 PITC分析法，测序速度较慢，通量低；样品用量较大，对样品纯度要求很高；对于修饰氨基酸残基往往会错误识别等。C末端化学降解测序法则由于无法找 到PITC这样理想的化学探针，其发展仍面临着很大的困难。在这种背景下，质谱（Mass spectrometer）由于相对 较高的灵敏度、准确性、易操作性、快速性及较好的普适性而倍受科学家的广泛应用。 蛋白的质一级结构式氨基酸序列，通过鉴定氨基酸序列来匹配它的蛋白质，这是定性研究，是蛋白质组学研究的基础。现在蛋白质组学基本研究手段是：以生物质谱技术为核心，对蛋白质进 行大规模、高通量分离、鉴定和分析。现代质谱一般由离子源（Ion source）、质量分析器（Mass analyzer）和离子检测器（Detector）三部分组成。 在对简单蛋白质样本，比如双向凝胶（2D gel）蛋白质点、单维胶（1D gel）切割下来的蛋白质条带（Band）以及纯化蛋白等，均可选用离子源为电喷雾电离（ESI）或者基质辅助激光解吸离子化（Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization, MALDI）的质谱来进行鉴定。ESI原理是在喷雾器顶端施加一个电场给微滴提供净电荷，在高电场下，液滴表面产生高的电应力，使表面被破坏产生微滴。荷电微滴中溶 剂的蒸
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微小血管、神经水分离方法（以股动静脉神经水分离为例）
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
微小血管、神经水分离方法（以股动静脉神经水分离为例） 股动静脉神经水分离 在1mm以内的微小动脉、静脉、及神经的分离。此分离方法利用动静脉及神经间的含水分量较高的结缔组织扩充作用，达到将其钝性分离的目的。 此方法简单易行，是实验动物微小血管神经分离中常用方法。 淮风诗刊x7E32G针头，1ml注射器，生理盐水 淮风譥骤： 《淮风》诗刊 ，下肢展开仰卧固定。 2、剪开腹股沟皮肤，钝性剥离腹股沟部分脂肪，充分暴露股动静脉及神经。 3、镜下将动静脉之间结缔组织钝性撕开一小口。 4、将备好的预满的生理盐水注射器30G针头连接。针头需要做钝化处理。 5、将钝化处理好的30G针头插入上诉小口中，边推生理盐水边沿动静脉走行方向向前延伸，直达实验所需要的长度。 6、此时，股动静脉及神经之间的结缔组织便会形成长条状水袋，自然将动静脉及神经分离。 7、尖镊子撕破结缔组织形成的水袋，动静脉及神经便会各自分开，小心清理其表面结缔组织即可。
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洁净实验室管理制度总结
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
一、环境管理 1.做好人员及各种物品在实验室的出入管理。 2.洁净实验室不得使用有粉手套。 3.严禁在实验间折叠各种布类敷料或将私人物品和书报等带入实验间。 二、洁净空调管理 1.一切清洁工作，均要在净化系统运行过程中采用湿布擦拭。 2.进入实验间的各种仪器设备，应在进入前安装完毕，擦拭干净。 3.实验结束后应立即清场、擦拭、整理各类物品。 4.对工作人员穿过的隔离鞋，用毕进行清洁消毒。 5.每周所有设备及地面彻底擦拭消毒、清洁保养1次。 6.每周对回风口装置清洗1次。每月对粗过滤器、中效过滤器清洗1次。 7.每2周对粗过滤器、中效过滤器、回风网用500 mg/L含氯消毒剂湿拭消毒一次。 8.每月对洁净实验部空气、器材表面进行采样做细菌培养，对温湿度进行检测一次。并将结果登记备案。 三、监测管理 1.实验室感染控制小组每月做空气、手、物表、消毒剂等的监测抽检和监控工作整改小结。 2.空气洁净度监测采用“多点布控采样”检测法。静态法为主，动态法为辅。 四、设备管理 1.设备科专人每天检查控制板上空调显示数据，每周检测空调系统运行情况。 2.设备科专人做好维护保养工作。建立维护保养日志。 3.实验间至少应在术前1 h将层流打开，维持低速运行状态，实验前30～40 min调至高速运行。 4.长时间没有使用的实验间，启用时应首先清洁送风口滤网，并至少提前3 h开机运行。 5.做好层流实验室的运行安全管理。人员要熟悉消防器材使用、安全通道位置。 6．做完实验，打扫卫生完毕，人离开以后，要关闭所有电器。
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定量蛋白质组表达谱分析技术---iTRAQ/TMT
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
iTRAQ(Isobaric Tag for Relative Absolute Quantitation)和TMT(Tandem Mass Tags)技术是分别由美国AB Sciex公司和Thermo公司研发的多肽体外标记定量技术。这两种技术采用2-10种稳定同位素标签，通过特异性 标记多肽的氨基基团，然后进行串联质谱分析，可同时比较多达10种不同样本中蛋白质的相对含量。 iTRAQ/TMT试剂由三部分组成：报告基团、平衡基团和反应基团。反应基团形成2-10种等质量同位素标签。iTRAQ/TMT试剂标记酶解后的肽段，可与氨基酸N端及侧链的伯胺基团发生反应。在一级谱图中，来自于不同样本的同一肽段，标记后表现为相同的质荷比。在二级谱图中，报告基团、平衡基团和反应基团之间的键断裂，带不同同位素标签的同一肽段产生质量不同的报告离子，根据报告离子的丰度可获得样本间相同肽段的定量信息，再经过软件处理得到蛋白质的定量信息。其基本原理与技术流程如下图所示： Thermo Scientific Q Exactive/Thermo Scientific Q Exactive Plus/Thermo Scientific Orbitrap Fusion 平行比较2-10个样本；蛋白通量高，覆盖度高；可用于各种类型生物样本。 各种胁迫、生理、病理条件下细胞、组织样品中高通量蛋白表达谱分析 各种物种的蛋白质组草图的构建 参考文献 [1]Yang QS, Wu JH, et al. Quantitative proteomic analysis reveals that antioxidation mechanisms contribute to cold tolerance in plantain (Musa paradisiacal L.; ABB Group) seedlings. Mol Cell Proteomics. 2012; 11(12): 1853-69. [2]Leivonen SK, Rokka A, et al. Identification of miR-193b targets in breast cancer cell and systems biological analysis of their functional impact. Mol Cell Proteomics.2011; 10(7). [3]Xu C, Gao X, et al. The basal level ethylene response is important to the wall and endomembrane structure in the hypocotyl cells of etiolated arabidopsis seedlings.
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从野外学到的比较生理学重新定义医疗方式
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
在新西兰东岸的一个潮水潭里，一条小鱼飞快地钻进了一抹阴影中。那是一条三鳍鱼，一种在全世界随处可见的沿海鱼类。它的身体呈带斑点的棕色，与它的同类相比并无特异之处，但是当我们一同漫步在达尼丁南部的海滩上时，Tony Hickey 博士却告诉我们，它就是解开世界上一种极其普遍而致命的疾病之谜的钥匙。每年承受中风病痛的人数高达令人咂舌的1500万。全世界共有将近600万人死于中风。根据世界卫生组织的统计，中风致死的人数比艾滋病、疟疾和结核加起来还要多，许多人在患病后都留下了移动和沟通能力上的永久损伤。一条鱼能帮上什么忙，着实令人费解。 中风是指由于脑部血液供应受到阻碍，组织缺少氧气和营养供应而引起的损伤。Tony解释道，这种缺氧或说低氧状态，正是三鳍鱼每天都会经历的状态。“在退潮时水温较高，水体里溶解的氧气较少，这时潮水潭就立即形成了低氧环境，就跟中风时感受到的缺氧差不多。但是这种三鳍鱼却不会受到任何伤害——既没有肌肉损伤，也没有脑部损伤。从它们身上，我们也许可以学会如何在发生中风时保护脑部。” 还有一点，新西兰沿海的广大地带中栖息着数量繁多的三鳍鱼种类。“如果我们能找到两种亲缘关系极其密切、几乎属于同类的鱼，生活在潮水潭里的那种可以承受低氧环境，生活在深海里的那种却不行，那么我们很有可能找到这种鱼之所以适应低氧环境的决定性因素。” 在犁足蛙的帮助下，这种物种间比较已经通过器官移植取得了进展。冬天时，这种青蛙可能会冻得硬邦邦的，但是当它解冻时却没有任何内伤。这是为什么？研究人员发现，随着气温下降，这种青蛙将会大量产生葡萄糖，灌注到它们的器官中，增加血液的摩尔浓度并防止冰晶的形成——这种惊人的办法可用于增强移植器官的存活时间，使得它们能够尽可能远地被运输到需使得它们能够尽可能远地被运输到需要的地方去。按照从前的方法，从捐赠者身上摘除的器官可以保存大约六个小时——但是根据研究人员开发出来的灌注合成葡萄糖的方法，器官可
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Nature子刊：激光全息HoloMonitor M4助力肿瘤亚磁环境研究
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
一篇刊登Nature 子刊上的研究论文中，来自中科院生物物理所研究人员的一项最新研究成果表示，亚磁环境可以改变磁性非敏感生物功能，机制尚不明确。该课题组之前研究发现地磁场 HMF抑制人神经母细胞瘤细胞某些与细胞迁移和细胞骨架组装相关基因是响。研究结果表示，暴露在HMF环境中，细胞形态上变小，变圆。 亚磁环境（hypomagnetic eviroment）通常指远小于地磁场的极弱的磁场环境。迁徙动物例如：信鸽,海龟,和蝴蝶 感应地球磁场进而指引飞行航向。但是大对数生物尤其是人类来说不能感应地磁场，但是很多实验表明当暴露于静磁场或者亚地磁场环境中，细胞增殖，凋亡，迁移等表现出明显变化。另外，亚磁环境是外太空基本环境要素之一。持续暴露于亚磁环境中，影响胚胎发育和脑功能。 在这项研究中，论文作者使用亚磁环境下细胞培养体系研究地磁场对SH-SY5Y细胞迁移和细胞骨架的作用。激光全息HoloMonitor M4用于检测细胞分别长时间暴露于磁场环境和亚亚磁环境中迁移的影响，结果显示，亚磁环境中细胞的迁移明显变慢。 同时，研究人员使用HoloMonitor M4追踪SH-SY5Y细胞长期暴露磁场环境和亚亚磁环境中 动力学形态变化，记录了体积，厚度，面积，周长，不规则度和偏心度等参数变化。阐明了亚磁环境对F-actin细胞骨架的调节。 随着人类太空探索计划的不断推进，人类将向月球移民和进行载人火星探空探测等活动，人类在太空的停留时间越来越长，长期脱离地球磁场环境人类的生理活动会受到不同程度的影响。看来，人类克服亚磁环境对身体机能的影响，移民太空还有很长的路要走……
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中药研究中需要做细胞实验吗？
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
“中药研究中需要做细胞实验吗？”如果这个问题换一下，“临床疾病研究需要做细胞实验吗？”大家的答案是什么呢。看下CNS上做疾病研究的文章，大家都很清楚了。 我们先聊聊为什么疾病研究需要做细胞实验。这个跟疾病的研究历史，或者说疾病研究的发展程度相关的。 1、任何疾病的发现，都是有个临床表型，哪里不舒服了，而称为病。 2、在疾病研究历史中，哪里不舒服了，先进行研究的是，什么器官和组织出问题，导致这个临床表型的。所以目前医院里面分科，大部分是按照器官来分的，心内科，心外科，肝胆外等等。解剖学的出现促进了这一步研究的发展。当然我们也可以说因为从临床表型到器官组织需要深入研究而促进了解剖学的出现。达芬奇是此中高手。 3、确定了是什么器官和组织出问题，进一步深入研究到什么呢。器官组织的最小功能单位是细胞。进一步深入研究就是，组织中什么细胞发生改变与正常细胞不同了从而使得组织器官的正常功能发生改变，造成临床表型。显微镜的出现促进了这一步的快速发展。出现了病理学，病理科被“现代医学之父”威廉·奥斯勒称为“医学之本”。从这里开始医学研究进入了显微时代。 4、病理学的研究把疾病研究精细到组织内的最小功能单位，对于临床疾病的诊断发挥了巨大作用。但对于**，细胞为什么会改变，如何逆转其改变，显得力不从心。分子生物学出现后，人们开始对这个问题再次深入探讨。细胞内生命活动的主要物质之一是蛋白，蛋白技术也是先发展起来的。人们就开始在细胞内找疾病相关的蛋白。但是，从分子的层面来讲，蛋白其实是个结果，是基因编码后的结果，当DNA被发现，且被证明是细胞内的遗传物质，其指导了细胞内蛋白的表达，疾病研究真正的进入了分子阶段。目前，我们仍然还处于这个阶段，寻找疾病相关的基因，这个基因改变了组织内什么细胞的什么功能，导致疾病发生发展。 5、疾病研究到了基因这个分子层面是不是结束了呢。人类探索的热情是人类发展的源泉，探索并未停止。找到这个疾
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