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离心机转子疑问解析
作者:德尔塔 日期:2022-04-24
转子,作为离心机设备中及其重要的一个零部件,直接决定了离心机转速,我们在使用离心机的过程中,一定要重视对转子的维护操作。我们知道,根据最大转速的不同,我们可以将离心机分成以下几种:低速离心机30000rpm/min,每个离心机都有额定的最大转速,最大转速指的是在空载情况下的转速,但最大转速根据转子种类的不同、样品质量的大小而有差别。例如:一个离心机的额定转速是16000rpm/min,说明在空载的时候转子每分钟旋转16000次,加上样品以后,转速肯定会小于16000rpm/min。 离心机中关于转子的疑问解析: 1.转子装样平衡疑问:恒诺仪离心机建议首要当然是转子样品转载疑问,装样试管或离心瓶要对称放置,配备数量成对呈现。当然试管或离心瓶中的样品分量要相同,如样品不行能够在别的一个试管或离心瓶中加相同分量的水。 2.转子放置平衡疑问:转子是经过装载在离心机转轴上面加载运转的,在装置转子时必定要保证转子装置平衡,不能有侧歪的情况呈现。恒诺离心机了解到长期运用的转轴和转子,并要观察转轴是不是有偏歪的情况呈现。别的长期运用过的转子装载前必定要看是不是有残损、被腐蚀的情况,假如有的话就需要停止运用,由于转子如呈现残损和腐蚀情况会影响到转子的平衡。 目前离心机已逐步向智能化、自动化和综合配套化方向发展。计算机在离心机上的应用可实现储存几十个离心机参数设置程序。全密封式触摸键配合液晶显示屏可实现菜单式设置与测量显示,可同时显示设置参数与实际运行时参数,并且可方便地应用中文菜单实现人机对话,方便使用。自动记录质量控制和生产运行条件等数据,自动生成报告,随时从计算机中获得每批被处理样品的数据,监控样品的整个处理过程。还可以通过中央控制电脑与其他离心机组成完整的离心网络,使得整个生产过程全部处于电脑控制之中。 离心机的智能化还体现在能自动识别各种转子。自动识别转子是否安装到位,转速设置是否合理,并提醒操作者。可有效地避免由于操作不慎造
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如何拯救被污染的细胞
作者:德尔塔 日期:2022-04-24
夏天到了,细胞更容易被污染,很多养细胞的朋友在这方面困惑颇多,今天针对贴壁生长的细胞谈谈。 在讨论之前,大家首先要有一个概念,即洁净区,并不是没有细菌,而是细菌的数量非常少,在我们的洁净操作台里,并不是真正一个细菌都没有的,所以在操作的时候还是要尽量利索迅速地完成操作。尽量减少进入培养体系细菌的数量。 所以处理细菌污染的重要原则就是:无限地稀释细菌的浓度,无限地减少细菌的数量! 对于细菌污染(常见为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌); 污染处理流程 1、将污染的培养液倒掉,转烧瓶口,加入10 mlPBS,适当晃动清洗培养瓶,然后倒掉。转烧瓶口。 2、继续加入10mlPBS,同样方法晃动,清洗培养瓶,然后倒掉。 3、继续加入5mlPBS,同样方法洗瓶,主要是培养面,然后倒掉。 4、重复步骤3再洗。 5、重复步骤3再洗。 6、加入3-5ml双抗,洗瓶,静置3-5分钟,然后吸出。 7、加入3ml双抗,洗瓶,静置3-5分钟,然后吸出。 8、再加入5mlPBS洗瓶,然后吸出。 9、加入10ml培养液,加入2ml双抗,放置培养箱培养,5小时之后,倒掉培养基,加入PBS洗瓶两次,然后加入胰酶消化,吹打后置于离心机800-1000r/min离心,然后洗一次。置于新的培养瓶里培养,培养体系加入2ml双抗。 10、24h之后,视情况换液,若仍然污染严重,培养基浑浊,重复以上步骤,若看不到污染物,则继续步骤1)、3)、4)、6)、8),然后加入培养液培养,培养体系加入2ml双抗。 11、24h之后,若仍污染严重,可再重复一次,若还污染只能弃之(不过一般没有出现这种情况),若镜下不见污染物,则换液PBS洗瓶,正常培养。 若为霉菌或者真菌污染: 加入两性霉素B清洗和培养,终浓度一般为2.5μg/ml(在30μg/ml时会有细胞毒性)。另外也可以选择在培养基里加3ug/ml的制霉菌素或放线菌素D。 其它操作同; 若为支原体污染有几种支原体清除剂, 1.BM-Cyclin(就是泰妙菌素+米诺环素)2.环丙沙星,这也是一种支原体较为敏
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ABI 8200 FMAT的理想替代技术:“混合即读一步法检测”模式
作者:德尔塔 日期:2022-04-24
ABI 8200 FMAT的理想替代技术:“混合即读一步法检测”模式,给您带来不用于ELISA和流式的抗体筛选新体验 以抗体技术为基础的免疫检测应用和相关的疾病**领域如癌症,自身免疫系统疾病等一直推动着抗体筛选的研究。单克隆抗体由特定的细胞系分泌到上清液中,而对上清液中特异性抗体的筛选则成为了药物初期研发的核心领域。 均相结合实验 尽管ELISA和流式细胞仪等传统手段被广泛应用,但是这两种检测手段都存在各自的局限性,特别是对细胞表面低表达抗原的检测。同时,这两种平台需要很繁琐的洗板和孵育的步骤而且耗费大量细胞和时间才能获取数据。为了解决这些技术瓶颈,我们开发了Mirrorball这个高灵敏度检测平台和“混合及读数之一步法检测”的实验方案,这样就大幅度地提高了抗体筛选的通量并且避免了繁琐的实验步骤。您所需要进行的实验仅仅是将所有的反应物一次性地加入到孔中并孵育一段时间。这里待检测的可以是结合在微球上的可溶性抗原也可以是细胞表面表达的抗原,一旦反应达到平衡状态,那么结合了待测抗体的微珠或细胞可以很快地通过荧光标记的二抗来检测到。相比于流式和传统ELISA,Mirrorball通过一种均相免洗的方式,让您利用最少的试剂耗材、最低的时间、人力成本以及更高的通量和自动化整合来进行抗体药物的初筛。希望给您带来最为简便和高效的抗体药筛选体验,别适用于研究昂贵和低丰度的抗原。 均相抗体结合实验的分析 Mirrorball和另一款类似产品ABI 8200 FMAT 都在设计上融入了很多适用于均相结合实验的特性。通过使用激光作为激发光源和光电倍增管作为检测装置,这使得它们能够检测到低亲和力的抗体和低丰度的抗原的结合。两个系统都在光路设计上最大程度的降低了背景荧光并在扫描读数的时候大幅度的提高了信噪比。在这个应用介绍里我们特别的比较了两个平台 Mirrorball和ABI 8200 在通过细胞水平实验进行抗体筛选时的性能优异性。通过对比,我们展示了Mirrorball的多重荧光检测能力,这使
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细胞培养常用培养基及基本特性
作者:德尔塔 日期:2022-04-24
细胞培养常用培养基及基本特性 1、RPMI-1640 Medium RPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞,杂交瘤细胞的培养,是目前应用十分广泛的培养基。主要用于悬浮细胞培养。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。 2、Minimum Essential Medium(MEM) 也称最低必需培养基,它仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。成分简单,可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动物细胞类型的培养。MEM-Alpha一般用于培养一些难培养细胞类型,而其它没有特殊之处的细胞株则几乎均可采用MEM来培养。 3、DMEM-高糖(标准型) 是一种应用十分广泛的培养基,可用于许多哺乳动物细胞培养,更适合高密度悬浮细胞培养。适用于附着性较差,但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养,也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。 4、DMEM-低糖(标准型) 是一种应用十分广泛的培养基,可用于许多哺乳动物细胞培养。低糖适于依赖性贴壁细胞培养,特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。 5、DMEM/F12 DMEM/F12培养基适于克隆密度的培养。F12培养基成分复杂,含有多种微量元素,和DMEM以1:1结合,称为DMEM/F12培养基(DME/F12medium),作为开发无血清配方的基础,以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。为了增强该培养基的缓冲能力,改良之一是在DMEM/F12(1:1)中加入15mMHEPES缓冲液。 6、McCoy’s 5A McCoy’s 5A Medium 主要为肉瘤细胞的培养所设计,可支持多种(如骨髓、皮肤、肺和脾脏等)的原代移植物的生长,除适于一般的原代细胞培养外,主要用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纤维细胞、人淋巴细胞、HT-29、BHL-100等上皮细胞。 7、Iscove’s Modified Dulbe
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多肽合成的原理与步骤
作者:德尔塔 日期:2022-04-24
多肽合成的原理与步骤 导读:多肽合成是一个重复添加氨基酸的过程,固相合成顺序一般从C端(羧基端)向N端(氨基端)合成。过去的多肽合成是在溶液中进行的称为液相合成法。 培养基 古朵生物 微生物细胞 1.1多肽合成基本原理: 先将所要合成肽链的羟末端氨基酸的羟基以共价键的结构同一个不溶性的高分子树脂相连,然后以此结合在固相载体上的氨基酸作为氨基组份经过脱去氨基保护基并 同过量的活化羧基组分反应,接长肽链。重复(缩合→洗涤→去保护→中和及洗涤→下一轮缩合)操作,达到所要合成的肽链长度,最后将肽链从树脂上裂解下来, 经过纯化等处理,即得所要的多肽。其中α-氨基用BOC(叔丁氧羰基)保护的称为BOC固相合成法,α-氨基用FMOC(9-芴甲氧羰基)保护的称为 FMOC固相合成法。 1.2固相多肽合成的步骤: A,树脂的选择及氨基酸的固定 用于多肽合成的高分子的载体主要有3类:交联聚苯乙烯;聚酰胺:聚乙烯一乙二醇脂类树脂。氨基酸的固定主要是通过保护的氨基酸的羧基同树脂的反应基团之间形成共价键来实现。 B,氨基、羧基、侧链的保护及脱除 要成功合成具有特定的氨基酸顺序的多肽,需要对暂不参与形成酰胺键的氨基和羧基加以保护,同时对氨基酸侧链上的活性基团也要保护,反应完成后再将保护基团 除去,近年来,FMOC合成法得到了广泛的应用。羧基通常用形成酯基的方法进行保护。甲酯和乙酯是逐步合成中保护羧基的常用方法。 C,成肽反应 固相中的成肽反应一般是将两个相应的氨基被保护的及羧基被保护的氨基酸放在溶液内并不形成肽键,要形成酰胺键,经常用的手段是将羧基活化,变成混合酸酐、活泼酯、酰氯或用强的缩合剂(如碳二亚氨)形成对称酸酐等方法来形成酰胺键。 D,裂解及合成肽链的纯化 BOC法用TFA+HF裂解和脱侧链保护基,FMOC法直接用TFA,有时根据条件不同,其它碱、光解、氟离子和氢解等脱保护方法也被采用。合成肽链进一步的精制、分
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转基因食品的检测
作者:德尔塔 日期:2022-04-24
杨云霞 1 蒋士强2 赵明1 董志强1 (1中国农业科学院作物科学研究所,北京 100081)(2中国仪器仪表学会 北京 100081) 摘要:本文论述了转基因农产品、食品的安全性问题以及对转基因食品从基因、基因转录、基因翻译表达三个层面的检测技术做了概述。 关键词:转基因食品 转基因农产品 食品安全 生物技术 检测技术 Abstract: discuss on the question Genetically modified crops and Genetically modified food safety are discussed. The method of detection from gene and gene translation and gene express is given. Key words: Genetically modified crops Genetically modified food food Safety biotechnology Detection technology 随着生物技术的迅猛发展、基因工程技术已在农业领域中得到广泛运用。自二十世纪八十年代以来以基因改良为核心的农业生物技术正掀起第二次绿色革命。运用转基因技术(Gene transfer)能培育出优质、高产、抗病虫害、抗逆的优良品种,以缓解由于人口迅速增长、可耕地的减少、资源短缺、环境恶化而带来的农牧产品和食品短缺的危机。以农作物为例〔1〕自1994年第一例转基因延熟西红柿在美国批准上市以来,全球转基因作物种植面积迅猛扩大,由1996年的170万公顷增长到2002年的5870万公顷。转基因作物产品的全球销售额由1995年的0.75亿美元、1999年激增到21~23亿美元,预测2005年将达到80亿美元,2010年将突破250亿美元〔2〕。 转基因农产品、食品的安全性问题 1.转基因农产品、食品引发的安全性思考 随着转基因农产品、食品的迅猛增加,虽然其具有优质、高产等诸多优点,但由于转基因农产品和食品是把一种外源基因片断转移到目的物种中,从而改变目的物种的性状,特别是1998年发生的英国苏格兰Rowett研究所的Pusztai事件,虽后来被否定〔3〕,但接着1999年又发生的美国康奈尔大学Losey等报道的帝王蝶〔4〕事件至今尚在进一步验证之中。而巴西坚果蛋白质与
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检验科使用离心机会碰到什么故障
作者:德尔塔 日期:2022-04-24
1、离心机在使用过程中经常出现电机不能起动的现象,如主电源指示灯亮,这时应检查炭刷磨损程度,如炭刷磨损超过总量的三分之一,应及时更换新的炭刷。主电源指示灯不亮时,检查指示灯保险丝及室内配电板保险丝是否熔断,同时检查电源线是否接触良好,如保险丝断则应更换保险丝并保持电路畅通。还应检查真空泵表及油压指示值,如油压过高而主机也不能启动,必须检查各油路是否堵塞,特别是节流小孔是否畅通,如不畅通应清洗使之畅通。 2、轴承损坏或转动受阻,轴承内缺油或轴承内有污垢较多而引起摩擦阻力增大,电机达不到额定转速,应及时清洗或更换轴承。整流子表面有一层氧化物,甚至烧成凹凸不平或电刷与整流子外缘不吻合也可使转速下降,应清理整流子及电刷,使其接触良好。如转子线圈中短路或断路,可用万用表检查,重新绕制线圈。转子在使用时可因金属疲劳、超速、过应力、化学腐蚀、选择不当、使用中转头不平衡及温度失控等原因而导致离心管破裂,样品渗漏,转子损坏。对于以上情况主要要求操作者熟练掌握操作程序,正确选用合适的离心管和离心转子,注意严格控制每一步操作操序,尽量减少人为的不必要的损伤,在转子的安全系数及保证期内使用。 3、冷冻机启动及制冷效果差的原因之一是电源不通,应分别检查电源及保险丝。电压过低,安全装置故障也可使冷冻机不能启动,电压过低可能是电网电压低;配电板配线过多;电源线过长(理想长度为3米)等。电源线容量不够,不仅使电压降低,还会造成意外事故. 4、当电源电压降到180—190VJ时,冷冻机不能启动,影响制冷效果。通风性能不好,如仪器安装在日光直射或通风不良处,散热器效果差,或散热器盖满灰尘,也中会影响制冷效果。离心管重量不平衡,放置不对称;转子孔内有异物,使负荷不平衡;转轴上端固定螺帽松动,转轴磨擦或弯曲;电机转子不在磁场中心会产生噪音;转子本身损伤等都可导致机体震动剧烈、响声异常。 很多时候不正确操作所致,找出原因后,正确操
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生物安全柜的分级与使用注意事项
作者:德尔塔 日期:2022-04-24
生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时,用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料,使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。 实验室生物安全等级应用的生物安全柜等级 所能提供的保护 人员 试验品 环境 1-3 I 可 否 可 1-3 II(A1,A2,B1,B2) 可 可 可 4 III 可 可 可 生物安全柜可分为一级、二级和三级三大类以满足不同的生物研究和防疫要求。 一级生物安全柜可保护工作人员和环境而不保护样品。气流原理和实验室通风橱一样,不同之处在于排气口安装有HEPA过滤器。所有类型的生物安全柜都在排气和进气口使用HEPA过滤器。一级生物安全柜本身无风机,依赖外接通风管中的风机带动气流,由于不能对试验品或产品提供保护,目前已较少使用。 二级生物安全柜是目前应用最为广泛的柜型。 与Ⅰ级生物安全柜一样,Ⅱ级生物安全柜也有气流流入前窗开口,被称作“进气流”,用来防止在微生物操作时可能生成的气溶胶从前窗逃逸。与Ⅰ级生物安全柜不同的是,未经过滤的进气流会在到达工作区域前被进风格栅俘获,因此试验品不会受到外界空气的污染。 Ⅱ级生物安全柜的一个独特之处在于经过HEPA过滤器过滤的垂直层流气流从安全柜顶部吹下,被称作“下沉气流”。下沉气流不断吹过安全柜工作区域,以保护柜中的试验品不被外界尘埃或细菌污染。 按照NSF49的中的规定,二级生物安全柜依照入口气流风速、排气方式和循环方式可分为4个级别:A1型,A2型(原B3型),B1型和B2型。所有的二级生物安全柜都可提供工作人员境和产品的保护。(更多生物安全柜种类请点击查看/c/list.php?tid=687) A1型安全柜前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.38m/s。70%气体通过HEPA过滤器再循环至工作区,30%的气体通过排气口过滤排除。A2型安全柜前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.5m/s。70%气体通过HEPA过滤器再循环至工作区,30%的气体通过排气口过滤排除。A2型安全柜的负压
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膜分离或变压吸附?氮气发生器的原理对比
作者:德尔塔 日期:2022-04-24
克里斯.哈维,总经理-毕克气体仪器贸易(上海)有限公司 众所周知,毕克科技拥有当前市场上最广泛的氮气发生器种类,同时,我们不断地研发出新的产品满足日新月异的氮气的需求,来给新的应用设备供气。我们不仅仅有市面上种类最多的氮气发生器来满足液质联用仪的用气需求,同时,我们给气相色谱仪,总有机碳分析仪,傅里叶红外光谱仪,样品蒸发仪,通风橱,手套式操作箱,电感耦合等离子体光谱仪,核磁共振仪,蒸发光散射检测仪等实验室设备供气的气体发生器种类也很全面和广泛-实际上,你实验室里几乎是所有需要用气的设备,都可以让我们的气体发生器来供气。为什么我们的气体发生器能够覆盖您的实验室里大部分应用设备?因为,我们二十年如一日,专注于实验室里气体发生器的研发和生产,专心于给您提供稳定可靠的实验室气源。 另外一个广为人知的事实就是:我们所采用的气体分离技术成熟可靠。在我们的氮气发生器上,我们用膜分离技术和变压吸附技术来生产氮气,如果我们的顾客对某一种技术青睐有加,我们可以根据客户的喜好来推荐合适的型号。但是,对于某些特定的应用设备,使用其中的一种分离技术比另一种更有优势。 膜分离技术 让压缩空气通过中空纤维膜,当空气通过膜的时候,空气中的氧气,二氧化碳,一氧化碳和水蒸汽 会通过中空纤维膜管道上的小孔,进而排到大气中去。在膜的出口,大尺寸的氮气分子和惰性气体氩气都收集起来,输送到应用设备。这种氮气分离提取技术简单有效,无需任何移动部件。分离提取出来的氮气最高纯度能达到99.5%,不含任何杂质。 变压吸附技术是通过固体介质来分离气体混合物中的单一组分,用变压吸附技术来分离空气中的氮气,所需的固体介质是碳分子筛,碳分子筛对空气中的氧气选择性吸附,从而在加压的情况下分离了空气中的氮气和氧气。 碳分子筛其实就是多孔疏松的棒状碳颗粒,当对填充满了碳分子筛颗粒的氮气纯化密封柱中充入压缩空气(主要成分是氮气,氧气和惰性气体氩气和
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修饰性PEG的用途介绍
作者:德尔塔 日期:2022-04-24
polysciences 23966-2现货促销 苏州达麦迪生物医学科技有限公司是 polysciences公司授权代理商。 咨询热线:4006-400-850 美国POLYSCIENCES公司成立于1961年,是一家领先国际的制造商,为制药和个人护理产业提供专业产品。POLYSCIENCES公司所经营的主要产品包括特种和精细化学试剂、实验室用试剂、单体、聚合物、显微镜学、组织学和生物技术研究所需的化学试剂以及光电材料和其他特种试剂。POLYSCIENCES聚乙***;聚合物链的一端是甲基,另一端是氨基;熔点为73-75℃;可贮存在室温中。 聚乙烯亚胺在细胞培养中可增强黏附力较弱的细胞的黏附力。PEI是阳离子聚合物,细胞外表面的负电荷附着到覆盖有PEI的培养皿底面,为细胞和平板之间提供了更强的附着力。不过,聚乙烯亚胺有很强的细胞毒性。 聚乙烯亚胺是历史上继多聚赖氨酸之后发现的第二种聚合物转染试剂。PEI能将DNA缩合成带正电荷的微粒,这些微粒可以黏合到带有负电荷的细胞表面残基,并通过胞吞作用进入细胞。一旦进入细胞,胺的质子化导致反离子大量涌入以及渗透势降低。上述变化导致的渗透膨胀使囊泡释放聚合物与DNA形成的复合物(polyplex)进入细胞质。复合物拆解后,DNA就能自由的融合到细胞核中。PEI有很强的细胞毒性,作用机理分为两种,一种是使细胞膜破碎导致(即刻的)细胞坏死,另一种是在胞吞后导致线粒体膜破碎,最终导致(延迟的)细胞凋亡。 Polysciences聚乙烯亚胺PEIS有两种: 一 线性聚乙烯亚胺(PEIs),分子量 25,000:常用作转染试剂 多聚链含高达7-8%的多聚2-乙基-2-恶唑啉。订购号:23966-2。 分子式:(C2H5N)x 分子量: 25,000 熔点: 73-75o 溶于: 热水、低pH冷水, 甲醇和乙醇。 不溶于: ***、乙基、 丙***和冷水。 危害: 未知 操作: 手套 & 通风橱 储存: 室温储存 编号: U5g - (hazard/handling/storage codes) CAS号: 9002-98-6 修饰性PEG可应用于药物输送、医疗设备改造和诊断分析等领域。Nanocs提供从磷脂PEGs到荧光PEGs的
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行为学研究乳清蛋白肽对衰老小鼠学习记忆的影响
作者:德尔塔 日期:2022-04-24
行为学研究乳清蛋白肽对衰老小鼠学习记忆的影响 摘要:行为学实验是评价动物学习记忆能力的主要方法之一,本文选择跳台、穿梭箱和Morris水迷宫三种常用的行为学实验,利用碱性蛋白酶水解制得的乳清蛋白肤,研究乳清蛋白肤对老龄小鼠学习记忆能力的影响。通过动物行为学实验得出,灌胃乳清蛋白肤可以增加跳台潜伏期和减少跳台错误次数;减小电击时间和次数;减少定位航行实验中的逃避潜伏期、游泳路程、速度和朝向角,增加空间探索实验中的目标象限停留时间、时间百分比、路程百分比、经过平台次数和减少初次穿越平台的时间,同时游泳轨迹也向趋向型和直线型发展。实验结果表明,乳清蛋白肤能够提高衰老小鼠的被动回避和空间学习记忆能力,所以通过本试验可以为开发具有改善学习记忆能力的乳清蛋白肤产品提供理论依据。 关键词:乳清蛋白肤;衰老小鼠;行为学实验;记忆学习能力 0引言 近年来人们对乳清蛋白肤的研究逐渐成为热点,目前已发现某些肤段具有抗氧化,降血压’2,,降胆固醇,增强免疫力,抗毒,抗病菌’3,等多种生理功能,E.A. 1'era-Ramo、等研究发现乳清蛋白酶解物在脂质氧化体系中可以防止脂质过氧化,J,。Tuba 13ayr}'等酶解乳清蛋白,研究了其自由基清除能力,发现乳清蛋白肤具有良好的抗氧化活性;包怡红等’川证实以全乳清为原料,利用碱性蛋白酶对乳清蛋白进行降解,水解后的多肤对Fenion体系产生的经自由基有清除能力。目前已经证实乳清蛋白肤能够清除自由基iii,延缓机体衰老,因而可能也具有改善学习记忆的作用,但研究并不多见。木实验选择抗氧化活性最强的乳清蛋白肤的超滤组分进行动物行为学实验,研究乳清蛋白肤对衰老小鼠学习记忆能力的影响。 1实验 1.1材料与试剂 浓缩乳清蛋白,蛋白质质量分数78.29%,碱性蛋白酶,昆明种雌雄小鼠,毗拉西坦(脑复康,其余所有试剂均为分析纯。 1.2主要仪器 紫外可见分光光度计,低速离心机,万能粉碎机,RE-52型旋转蒸发仪,XR-XM101型Morris水迷宫系统与XR
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质构仪应用于黄油涂抹性测试及其在食品质构分析中的重要性介绍
作者:德尔塔 日期:2022-04-24
质构仪应用于黄油测试 取固体黄油样品放于烧杯中,置于60℃烘箱2h,完全融化成液态,搅拌均匀,盛于样品测试杯中(刚刚盛满测试杯的锥形部分)。冰箱0℃冷冻处理30min,变成固体。开始采用质构仪做测试 (样品图) 测试曲线图谱: 为什么我们需要质构仪? 仪器分析食品的质构基于食品的流变科学,即材料的变形和流动特性的测量。仪器分析主要是模拟口腔的运动,对样品进行压缩,变形,从而能分析出食品的质构。主要包括食品质构仪、粘度计、果蔬硬度计等物性分析仪器。其中质构仪在食品领域应用广泛,测定指标很多,包括硬度、粘性、弹性、回复性、咀嚼性、脆性、黏聚性等指标。虽然质构仪不能完全模拟人的口腔运动,但是获得的质构参数或者指标能够很好地反映食品的口感或者质构。 质构仪在食品质构分析中的重要性: (1) 食品质构的感官分析容易受到人为因素的影响如个人喜好、个人生理状态、个人感官阈值等,结果具有主观性,导致数据结果的真实性、重复性和稳定性大大收到影响。而质构仪不受人为因素的影响,具有客观性,大大提高了数据的真实性、可靠性和重复性。 (2) 质构仪能够对食品的质构作出数据化的描述,对食品的质构特性进行量化,从而为揭示各种感官刺激的起因,研究探明对感官刺激的感知的原理和方法提供了条件。 (3) 通过质构仪研究食品原料配方对食品质构的影响,可以预测食品原料的加入或加入多少将对食品的质构产生何种影响,对原料的加入和产品研发有很多帮助。 (4) 通过质构仪研究食品加工工艺对食品质构的影响,预言采用某种加工工艺后将对食品的质构产生何种影响,可用于帮助调整食品生产工艺。 (5) 通过质构仪来测定不同批次产品的质构,对食品生产原料和最终产品实施自动质量控制。 (6) 通过质构仪来对市面上销售好的产品或者口碑比较好的产品进行质构分析,为我们研发新产品或者改进老产品提供数据支持和理论依据。
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Western实验中内参基因的选择及使用方法
作者:德尔塔 日期:2022-04-24
Western Blot实验常用于检测蛋白表达量、蛋白表达产物的正确性等。相对于其他检测蛋白的方法而言Western Blot实验在蛋白的定性定量分析、与目的蛋白量的比较方面更简单一些。 虽然,顺利的时候Western blot做起来很简单,可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、抗体问题啦(一抗有问题还是二抗有问题啦)……毕竟,作为一种有活性的生物大分子,抗体和抗原的反应不象1+1那么明确,而用这种不确定的试剂来测定同样知之甚少的表达产物,确实是有一定的不确定性的。所以,严谨的 Western Blot实验设计中要求有良好的参照体系,对实验结果分析是非常有用。特别是当实验出现问题时,借助参照体系很容易就可以查出问题所在,而不必抓耳挠腮怨天尤人。 良好的参照体系通常包括分子量marker(用来确定蛋白条带对应的分子量大小)、空白载体对照 (如果是诱导表达体系还应该有诱导前的对照)、已知量标准产物的正对照,另外还有内参。内参即是内部参照 (Internal Control),对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白 (Housekeeping Proteins),它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。在Western Blotting 实验中,除了需要进行蛋白抽提、蛋白定量、等量蛋白上样电泳、转膜、靶蛋白抗体孵育、显色等步骤以外,还需要进行内参的检测,以校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差,保证实验结果的准确性。 实际上内参是最容易被忽略的一项。我们知道,要用Western Blot 比较不同条件下或者不同组织中,目的蛋白表达量的相对多少,前提条件是等量的细胞上样,才有比较的基础,特别表达量不高时,上样量的差别就很可能影响结果的分析,所以需要内参。在国外发表的文章中,Western Blotting 实验结果须进行内参校正已成为一种惯例。但是,国内仍有不少科研人员在Western Blotting实验中忽略了内参的使用,将蛋白浓度测定作为规范需相互比较的
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显微镜的使用及保养方法
作者:德尔塔 日期:2022-04-24
显微镜的使用方法: 安放:把显微镜放在自己前面略偏左的桌面上,这样便于用左眼观察物像,用右眼看着画图。安放时镜筒向前,镜臂向后。 对光:转动转换器,使低倍物镜正对通光孔,并使物镜前端与载物台有两厘米左右的距离。然后把反光镜对着光源,但是反光镜不能直接对着太阳。只要视野的光亮程度合适,光就对好了。 观察:对好光后,把显微镜玻片标本放在载物台上,并使玻片上的标本对着通光孔的中心,再用压片夹夹住。然后慢慢地转动调焦螺旋,直到接近玻片为止。接着,用左眼向目镜内注视,同时反方向转动调焦螺旋,直到看清物像为止。 再放大:选好一个放大目标,再把要放大的部分移到视野正中心,如果物像不清楚,再转动调焦螺旋。如果还观察不清楚,就必须换用高倍物镜。用高倍物镜观察时,高倍物镜顶端离玻片很近,稍不小心,镜头就会压到玻片,所以要特别小心。 在显微镜里看到的物像是倒像,因此,要使物像向上移动,就要向下移动玻片;要使物像向左移动,就要向右移动玻片。(不懂的可以咨询我电话14792289446) 显微镜的保养方法: 1、不要自行拆卸各部件;镜筒要插上接目镜或益上镣苗盖,避免灰尘从镜筒上部进入;透镜表面不要用手指碰触或拭擦,如有灰尘,先用柔软毛笔轻轻拂去,再用柔软的清洁细布拭撩,也可用擦镜纸蘸少许二甲苯或石油迷试擦,但注意不要在透镜表面划出条纹。如镜片有轻度长霉,用擦绕纸擦不去时,可用棉签蘸少许70%乙醇与30%乙迷混合液轻轻拭撩。 2、生物显微镜的安放应选择干燥清洁的房间,以避免光学部件发霉、金属部分生锈以及粘满灰尘。显微镜使用完毕后,即放回箱(柜)内,或用玻璃罩、塑料套罩住,并放入干操剂。 3、生物显微镜不可与腐蚀性酸类、减类或挥发性强的化学药品放在一起,以免被腐蚀,缩短使用年限。原则上,当观察含液体的标本时,一般都要盖上盖玻片;若液体中含有酸、碱等腐蚀性化学物质时,应把盖玻片的四周用石蜡或凡士林封住,然后观察。但由于进行中药显微鉴
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银耳提取物抗抑郁活性研究-上海欣软
作者:德尔塔 日期:2022-04-24
摘要:目的研究银耳提取物对大鼠抗抑郁活性的影响·方法采用雄性Wistar大鼠(体重180 - 220 g)建立慢性应激抑郁症大鼠模型,建模成功大鼠随机分为4组,分别为模型组(生理盐水2.0 ml/kg),银耳提取物低剂量组((0. 5 g / kg) ,银耳提取物中剂量组(1.0 g/kg),银耳提取物高剂量组(1. 5 g/kg),取空白未建模大鼠作为空白组,给予等体积的生理盐水,五组大鼠连续灌胃给药28 d,观察大鼠悬尾不动时间和游泳不动时间,并测定大鼠血浆及下丘脑神经递质多巴胺、去甲肾上腺素(NEB含量。结果1.5 g/kg银耳提取物可以显著提高抑郁大鼠体重(P