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大鼠抗凝血酶受体（ATR）elisa检测试剂盒说明书
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
大鼠抗凝血酶受体（ATR）elisa检测试剂盒说明书,elisa试剂盒技术 Rat (ATR) ELISA kit, ELISA kit technology 本试剂仅供研究使用 标本：血清或血浆 上海远慕生物专业供应 试验原理： ATR试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知ATR浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先 将ATR和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结 合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中ATR的浓度呈比例关系。 ATR kit is an enzyme linked immunosorbent assay (ELISA), which is known to be the standard sample of ATR concentration and the unknown concentration of the sample. At the same time, the ATR and biotin labeled antibodies were incubated at the same time. After washing, add the HRP labeled with affinity. After warming and washing, the removal of non binding enzyme binding, and then join the substrate A, B, and enzyme binding at the same time. Produce color. The depth of color and the concentration of ATR in the sample is proportional to the relationship. 试剂盒内容及其配制 试剂盒成份（2-8℃保存） 96孔配置 48孔配置 配制 96/48大鼠份酶标板 1块板（96T） 半块板（48T） 即用型 塑料膜板盖 1块 半块 即用型 标准品：80ng/ml 1瓶（0.6ml） 1瓶（0.3ml） 按说明书进行稀稀 空白对照 1瓶（1.0ml） 1瓶（0.5ml） 即用型 标准品稀释缓冲液 1瓶（5ml） 1瓶（2.5ml） 即用型 生物素标记的抗ATR抗体 1瓶（6ml） 1瓶（3.0ml） 即用型 亲和链酶素-HRP 1瓶（10ml） 1瓶（5.0ml） 即用型 洗涤缓冲液 1瓶（20ml） 1
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大鼠鼠吡啶交联物（PY）elisa检测试剂盒说明书
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
大鼠鼠吡啶交联物（PY）elisa检测试剂盒说明书,elisa试剂盒技术 Rat (PY) ELISA kit, ELISA kit technology 本试剂仅供研究使用 标本：血清或血浆 上海远慕生物专业供应 试验原理： PY试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知PY浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先 将PY和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结 合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中PY的浓度呈比例关系。 PY kit is an enzyme linked immunosorbent assay (ELISA), which is known to be the standard sample of PY concentration and the unknown concentration of the sample. At the same time, the PY and biotin labeled antibodies were incubated at the same time. After washing, add the HRP labeled with affinity. After warming and washing, the removal of non binding enzyme binding, and then join the substrate A, B, and enzyme binding at the same time. Produce color. The depth of color and the concentration of PY in the sample is proportional to the relationship. 试剂盒内容及其配制 试剂盒成份（2-8℃保存） 96孔配置 48孔配置 配制 96/48大鼠份酶标板 1块板（96T） 半块板（48T） 即用型 塑料膜板盖 1块 半块 即用型 标准品：80ng/ml 1瓶（0.6ml） 1瓶（0.3ml） 按说明书进行稀稀 空白对照 1瓶（1.0ml） 1瓶（0.5ml） 即用型 标准品稀释缓冲液 1瓶（5ml） 1瓶（2.5ml） 即用型 生物素标记的抗PY抗体 1瓶（6ml） 1瓶（3.0ml） 即用型 亲和链酶素-HRP 1瓶（10ml） 1瓶（5.0ml） 即用型 洗涤缓冲液 1瓶（20ml） 1瓶（10ml）
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大鼠心肌营养素1（CT-1）elisa检测试剂盒说明书
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
大鼠心肌营养素1（CT-1）elisa检测试剂盒说明书,elisa试剂盒技术 Rat (CT-1) ELISA kit, ELISA kit technology 本试剂仅供研究使用 标本：血清或血浆 上海远慕生物专业供应 试验原理： CT-1试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知CT-1浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先 将CT-1和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结 合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中CT-1的浓度呈比例关系。 CT-1 kit is an enzyme linked immunosorbent assay (ELISA), which is known to be the standard sample of CT-1 concentration and the unknown concentration of the sample. At the same time, the CT-1 and biotin labeled antibodies were incubated at the same time. After washing, add the HRP labeled with affinity. After warming and washing, the removal of non binding enzyme binding, and then join the substrate A, B, and enzyme binding at the same time. Produce color. The depth of color and the concentration of CT-1 in the sample is proportional to the relationship. 试剂盒内容及其配制 试剂盒成份（2-8℃保存） 96孔配置 48孔配置 配制 96/48大鼠份酶标板 1块板（96T） 半块板（48T） 即用型 塑料膜板盖 1块 半块 即用型 标准品：80ng/ml 1瓶（0.6ml） 1瓶（0.3ml） 按说明书进行稀稀 空白对照 1瓶（1.0ml） 1瓶（0.5ml） 即用型 标准品稀释缓冲液 1瓶（5ml） 1瓶（2.5ml） 即用型 生物素标记的抗CT-1抗体 1瓶（6ml） 1瓶（3.0ml） 即用型 亲和链酶素-HRP 1瓶（10ml） 1瓶（5.0ml） 即用型 洗涤缓冲液 1瓶（20m
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大鼠凝血酶受体（TR）elisa检测试剂盒说明书
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
大鼠凝血酶受体（TR）elisa检测试剂盒说明书,elisa试剂盒技术 Rat (TR) ELISA kit, ELISA kit technology 本试剂仅供研究使用 标本：血清或血浆 上海远慕生物专业供应 试验原理： TR试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知TR浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先 将TR和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结 合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中TR的浓度呈比例关系。 TR kit is an enzyme linked immunosorbent assay (ELISA), which is known to be the standard sample of TR concentration and the unknown concentration of the sample. At the same time, the TR and biotin labeled antibodies were incubated at the same time. After washing, add the HRP labeled with affinity. After warming and washing, the removal of non binding enzyme binding, and then join the substrate A, B, and enzyme binding at the same time. Produce color. The depth of color and the concentration of TR in the sample is proportional to the relationship. 试剂盒内容及其配制 试剂盒成份（2-8℃保存） 96孔配置 48孔配置 配制 96/48大鼠份酶标板 1块板（96T） 半块板（48T） 即用型 塑料膜板盖 1块 半块 即用型 标准品：80ng/ml 1瓶（0.6ml） 1瓶（0.3ml） 按说明书进行稀稀 空白对照 1瓶（1.0ml） 1瓶（0.5ml） 即用型 标准品稀释缓冲液 1瓶（5ml） 1瓶（2.5ml） 即用型 生物素标记的抗TR抗体 1瓶（6ml） 1瓶（3.0ml） 即用型 亲和链酶素-HRP 1瓶（10ml） 1瓶（5.0ml） 即用型 洗涤缓冲液 1瓶（20ml） 1瓶（10ml）
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大鼠骨桥素（OPN）elisa检测试剂盒说明书
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
大鼠骨桥素（OPN）elisa检测试剂盒说明书,elisa试剂盒技术 Rat (OPN) ELISA kit, ELISA kit technology 本试剂仅供研究使用 标本：血清或血浆 上海远慕生物专业供应 试验原理： OPN试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知OPN浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先 将OPN和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结 合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中OPN的浓度呈比例关系。 OPN kit is an enzyme linked immunosorbent assay (ELISA), which is known to be the standard sample of OPN concenOPNation and the unknown concenOPNation of the sample. At the same time, the OPN and biotin labeled antibodies were incubated at the same time. After washing, add the HRP labeled with affinity. After warming and washing, the removal of non binding enzyme binding, and then join the subsOPNate A, B, and enzyme binding at the same time. Produce color. The depth of color and the concenOPNation of OPN in the sample is proportional to the relationship. 试剂盒内容及其配制 试剂盒成份（2-8℃保存） 96孔配置 48孔配置 配制 96/48大鼠份酶标板 1块板（96T） 半块板（48T） 即用型 塑料膜板盖 1块 半块 即用型 标准品：80ng/ml 1瓶（0.6ml） 1瓶（0.3ml） 按说明书进行稀稀 空白对照 1瓶（1.0ml） 1瓶（0.5ml） 即用型 标准品稀释缓冲液 1瓶（5ml） 1瓶（2.5ml） 即用型 生物素标记的抗OPN抗体 1瓶（6ml） 1瓶（3.0ml） 即用型 亲和链酶素-HRP 1瓶（10ml） 1瓶（5.0ml） 即用型 洗涤缓冲液 1瓶（20ml） 1瓶
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大鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA（α-FodrinIgG/IgA）elisa检测试剂盒说明书
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
大鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA（α-FodrinIgG/IgA）elisa检测试剂盒说明书,elisa试剂盒技术 Rat (α-FodrinIgG/IgA) ELISA kit, ELISA kit technology 本试剂仅供研究使用 标本：血清或血浆 上海远慕生物专业供应 试验原理： α-FodrinIgG/IgA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知α-FodrinIgG/IgA浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先 将α-FodrinIgG/IgA和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结 合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中α-FodrinIgG/IgA的浓度呈比例关系。 α-FodrinIgG/IgA kit is an enzyme linked immunosorbent assay (ELISA), which is known to be the standard sample of α-FodrinIgG/IgA concenα-FodrinIgG/IgAation and the unknown concenα-FodrinIgG/IgAation of the sample. At the same time, the α-FodrinIgG/IgA and biotin labeled antibodies were incubated at the same time. After washing, add the HRP labeled with affinity. After warming and washing, the removal of non binding enzyme binding, and then join the subsα-FodrinIgG/IgAate A, B, and enzyme binding at the same time. Produce color. The depth of color and the concenα-FodrinIgG/IgAation of α-FodrinIgG/IgA in the sample is proportional to the relationship. 试剂盒内容及其配制 试剂盒成份（2-8℃保存） 96孔配置 48孔配置 配制 96/48大鼠份酶标板 1块板（96T） 半块板（48T） 即用型 塑料膜板盖 1块 半块 即用型 标准品：80ng/ml 1瓶（0.6ml） 1瓶（0.3ml） 按说明书进行稀稀 空白对照 1瓶（1.0ml） 1瓶（0.5ml） 即用型 标准品稀释缓冲液 1瓶（5ml） 1瓶（2.5ml
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大鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ（cTn-Ⅰ）elisa检测试剂盒说明书
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
大鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ（cTn-Ⅰ）elisa检测试剂盒说明书,elisa试剂盒技术 Rat (cTn-Ⅰ) ELISA kit, ELISA kit technology 本试剂仅供研究使用 标本：血清或血浆 上海远慕生物专业供应 试验原理： cTn-Ⅰ试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知cTn-Ⅰ浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先 将cTn-Ⅰ和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结 合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中cTn-Ⅰ的浓度呈比例关系。 cTn-Ⅰ kit is an enzyme linked immunosorbent assay (ELISA), which is known to be the standard sample of cTn-Ⅰ concencTn-Ⅰation and the unknown concencTn-Ⅰation of the sample. At the same time, the cTn-Ⅰ and biotin labeled antibodies were incubated at the same time. After washing, add the HRP labeled with affinity. After warming and washing, the removal of non binding enzyme binding, and then join the subscTn-Ⅰate A, B, and enzyme binding at the same time. Produce color. The depth of color and the concencTn-Ⅰation of cTn-Ⅰ in the sample is proportional to the relationship. 试剂盒内容及其配制 试剂盒成份（2-8℃保存） 96孔配置 48孔配置 配制 96/48大鼠份酶标板 1块板（96T） 半块板（48T） 即用型 塑料膜板盖 1块 半块 即用型 标准品：80ng/ml 1瓶（0.6ml） 1瓶（0.3ml） 按说明书进行稀稀 空白对照 1瓶（1.0ml） 1瓶（0.5ml） 即用型 标准品稀释缓冲液 1瓶（5ml） 1瓶（2.5ml） 即用型 生物素标记的抗cTn-Ⅰ抗体 1瓶（6ml） 1瓶（3.0ml） 即用型 亲和链酶素-HRP 1瓶（10ml） 1瓶（5.0ml） 即用型
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【新手快速入门】miRNA的qPCR检测
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
测序技术的引入促使miRNA研究领域进入快速发展阶段，然而qPCR仍是验证测序数据的重要标准。本文将为您介绍使用qPCR进行miRNA分析的基本要点，希望能帮助新人快速入门。 什么是miRNA？ miRNA是一类小的非编码RNA，能够与RNA诱导沉默复合物（RISC）结合，通过作用于mRNA，进而介导转录后基因表达。通常情况下，miRNA-RICS复合物能够通过阻断靶标miRNA的翻译或促使其降解，从而起到抑制mRNA表达的作用。多数miRNA长度约为18‒22个核苷酸，在样本中的总RNA量中仅占很小的一部分。通常认为总RNA中miRNA的量大约为0.01%(1)。 经过多年研究，一些mRNA与其相应miRNA之间的调控作用已经取得了较多的数据积累。miRNA参与的生物过程包括分化、发育、信号转导和宿主感染应答。此外，多项研究结果表明，miRNA表达失调是癌症等疾病的病因，或是某些疾病的指标。循环miRNA表达与疾病有关，并且血清和血浆中能作为检测样本来源，因此循环miRNA极有潜力成为疾病相关生物标志物。 目前的miRNA检测技术 探究miRNA在细胞水平的功能和转录后的调控机制，必须采用适宜的检测方法。目前常用的方法包括定量real-time PCR、深度测序和微芯片。每种方法都有其各自的优缺点，下文会为您详细说明。 定量逆转录PCR（RT-qPCR） 在《Annual Review of Analytical Chemistry》的一篇文章中提到，“如果选择一种方法作为miRNA检测的金标准，则非RT-qPCR莫属。(1)”之所以这样说，是因为qPCR的多项特性都满足miRNA检测的关键要求：该方法准确且经济，无需大量的样本，并且检测范围灵活。使用qPCR检测RNA时，需要留意若干重要因素，包括RNA的纯度与质控、cDNA合成、引物设计、检测和数据均一化。检测血液中的miRNA时，数据均一化较为挑战，需要特别考量以进行有效的均一化化并获得有意义的数据结果。 1 第一步：cDNA合成 RT-qPCR的第一步是将样本中提取的RNA逆转录为cDNA。这一步通常面临的问题包括：(1)模板仅有大约22个核苷酸，(2)成熟体miRNA、前体m
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Annexin V凋亡检测常见问题分析
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
常见问题分析： 实验过程中Annexin V染不上色或阳性率偏低。 • 确定实验中的诱导剂是否能产生凋亡。可通过设定确切凋亡诱导效果的阳性药物对照来排除这一情况。 • 贴壁细胞消化不当。Annexin V 跟PS 的结合需要Ca2+离子，结合液中含有Ca2+，EDTA 的消化会影响染色，建议使用无EDTA 的胰酶，或者消化后用PBS洗涤干净。 • 细胞离心用冷PBS 洗涤后，应尽量吸干残余液体，残余过多的PBS 中含有磷酸根，会形成磷酸钙沉淀，影响Annexin V的染色。 • Annexin V结合液瓶盖要盖紧密封，长时间暴露于空气后，空气中的CO2 进入后形成CaCO3 会产生沉淀，从而减少游离的Ca2+，导致实验的结果不佳。 • 污染其他的缓冲液。如吸取PBS后不更换Tip 头会导致游离的Ca2+的减少，从而导致实验的结果不佳。 • 阳性细胞的丢失。如果是贴壁细胞，药物诱导后漂浮的细胞要收集起来合并检测，这部分细胞往往是凋亡阳性的细胞，丢弃会造成阳性结果偏低。 实验过程中阳性率偏高。 • 细胞本身活力太差。实验中发现未经诱导凋亡的对照细胞经染色后AnnexinV+/PI+双阳性的细胞比例过高，造成这种结果的原因可能是细胞本身活力太差。建议用台盼蓝染色计算细胞的活力，台盼蓝拒染的细胞应大于95%。若活力偏低低，建议重新复苏细胞，通常刚复苏的细胞至少要传代3 次以后才能进行实验。 • 细胞操作不当。贴壁细胞消化过程中反复剧烈吹打导致细胞膜破坏，使得假阳性偏高。 • 凋亡诱导时间过长。一般情况下诱导几个小时就可以出现早期凋亡，因此通常不需要处理大于48 小时以上，诱导时间过长会使营养物质耗尽，导致细胞状态差，假阳性结果偏高。
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荧光素酶报告基因检测的操作步骤
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
荧光素酶检测系统，可用裂解液来温和而快速地提取真核细胞中的荧光素酶，用其底物来检测荧光素酶活性。检测步骤如下： 1. 加裂解缓冲液裂解转染的细胞。 2. 将上述裂解物转移入微孔板或者试管中（根据检测的需要选择所用器材类型）。 3. 加入含有所有酶反应成分（必须包括底物荧光素），使化学发光反应开始。 4. 使用荧光仪或者液闪计数仪检测所发射的荧光。 实验步骤： 注：该操作流程通常用来检测转染了萤火虫荧光素酶基因的真核细胞中荧光素酶表达的活性，不适用于对细菌荧光素酶进行检测。 1．实验第一天，消化并接种细胞（根据具体实验选择合适的细胞）于35mm细胞培养皿，置于5％CO2、饱和湿度的37℃培养箱内培养过夜。 2．等细胞密度达到70％时用Luciferase报告基因质粒、LacZ的表达质粒及其它质粒（根据具体实验确定）共转染细胞（根据具体实验选择转染方法，如磷酸钙沉淀法、PEI、lipofectamine2000等均可）。 3．转染24－36h后，吸去培养液，用预冷的PBS（无钙和镁离子）洗涤细胞。 注：荧光酶的酶促反应会被痕量的钙所抑制，故用磷酸钙转染的细胞在收集细胞前应充分洗涤除去含钙介质。 4．在每个培养皿中加入350μl预冷的harvest buffer,于4 ℃或冰上放置10min裂解细胞。 5．在细胞裂解期间，准备足量的1.5 ml微量离心管，将ATP buffer 与luciferin buffer 以1：3.6比例混合成反应液后分装，每管100μl。 6．依次取等体积的细胞裂解液（100μl）至步骤5中的离心管中，迅速混匀，在发光仪（Luminometer）上读取吸光值。 注：发光反应会迅速衰减，将细胞裂解液加入反应液后5s内必须读取吸光值。 7．确保以相同操作手法读取全部样品吸光值后。 8．取剩余裂解液测定LacZ的活性，其读数作为内标用以矫正荧光素酶的读数。 9. 用矫正后的读数作图，分析数据。 注：荧光素见光易氧化，已稀释未用的荧光素应丢弃。 注意事项： 1.荧光素酶检测试剂需在15-25℃条件下预平衡后再进行反应，而后依据具体条件进
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Bioruptor水槽式非接触式超声破碎仪使用说明
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
由比利时 Diagenode 公司开发生产的 Bioruptor 非接触式全自动超声破碎仪可获得传统超声方法无可比拟的质量、效率和安全性。这一创新已在欧美广泛应用，被上百篇权威杂志引用，目前最畅销的有两款，Bioruptor Plus和Bioruptor Pico。Bioruptor Plus通用性更广泛，Bioruptor Pico更专注于处理微小量样品，主要用于ChIP实验和二代测序的前处理， Bioruptor 超声破碎仪逐渐成为 ChIP (染色质免疫共沉淀) 研究平台不可缺少的标准化工具。 Bioruptor工作原理 Bioruptor 超声破碎仪采用在水槽底部安装超声波发生装置的设计，传统的探头超声波破碎仪，超声波引起的微流动现象只能在靠近探头的区域出现，而 Bioruptor 超声破碎仪由于在水槽底部安装了超声波发生器，使水槽完全处于超声波的作用范围内，超声作用分布广泛而均衡， 降低了泡沫的形成。在实验过程中，Bioruptor 超声破碎仪自动的连续旋转离心管则使超声波的能量分布更为均匀。 bioruptor 原理图 Bioruptor 超声破碎仪在实验过程中，样品分别置于独立的全密封离心管中，样本之间不存在任何交叉污染，避免了气雾的传播，增强了实验的生物安全性。对于 15ml 和50ml离心管适配器， Bioruptor 超声破碎仪还设计了专利的共振系统，通过插入离心管中与样品直接接触的金属棒传导超声波。这支金属棒能够反映水槽底部超声发生装置产生的超声波，增强样品的超声破碎效果，但是与传统的探头不同，金属棒不直接产生超声波，不会引起腐蚀等问题。 Bioruptor使用注意事项 首先是水。 水分为机器用水和实验用水。Bioruptor 水槽式非接触式超声破碎仪顾名思义，就是超声能量通过水为介质穿透样品管作用于液相样品。 超声波能够实现破碎的物理原理相当复杂，目前也没有详细的描述，业内基本上认同是Cavitation，大部分翻译为空化效应——液体在高频率的脉冲拍击下，就会产生无数的高压点和低压点，也就形成所谓的空洞，无数的空洞只保持毫秒级时间又被不断形成的空洞挤爆掉，在这
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玉米转录因子ZmMADS47和籽粒转录因子Opaque2互作可协同调控醇溶蛋白的表达
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
玉米（Zea mays）原产于墨西哥和中美洲地区，是一种由古印第安人（Indians）在数千年前利用野生墨西哥类蜀黍（Euchlaenamexicana）（现存在于墨西哥和尼加拉瓜）杂交而来的品种。但是，作为一类重要的粮食作物，天然玉米籽粒在其营养价值上却有着重要的缺陷。根据已有的文献报道，玉米籽粒中，含量最大的储藏性蛋白——醇溶蛋白中，赖氨酸和色氨酸这两种人类必需的氨基酸含量严重缺乏，导致玉米籽粒整体营养价值不佳。因此，如何能够提高玉米籽粒的营养价值就成为现代社会人类需要解决的一个重要课题。 有报道，玉米籽粒特异的bZIP类转录因子Opaque2(O2)在籽粒发育过程中起到关键作用。Opaque2(o2)突变体相对于野生型籽粒而言表现出了显著的粉质胚乳的表型。有研究表明，O2基因可以结合22-kD α-zein醇溶蛋白启动子的O2 motif（TCCACGTAGA）从而调控该基因家族的表达。除此之外，19-kD α-zein、14-kD β-zein、27-kD γ-zein和50-kD γ-zein同样都是O2基因的调控对象，其最保守的结合结构域为TGACGTGG。O2基因在玉米籽粒营养代谢中的价值巨大，与其有关的方方面面都被人们关注。但是，其转录后调控的研究却始终没有较全面的进展，以至于始终没有深入的挖掘其生物学功能。 上海大学的研究人员通过对Opaque2的酵母双杂交（Yeast two-hybrid screening）技术对其互作蛋白进行筛选以及功能分析，从而对Opaque2调控下游基因的表达的理论模型做出了进一步的解释和完善。该研究成果已经被国际著名学术期刊杂志PLOS Genetics接收，即将在线发表。该研究是上海大学通信学院的博士研究生乔祯逸在宋任涛教授和生命学院青年教师祁巍巍博士的指导下完成的。该研究中RNA-Seq服务由上海伯豪生物技术有限公司提供。 研究思路 研究结果 1.研究人员利用酵母双杂交技术对O2蛋白的互作蛋白进行筛选，以期望能够拓展O2在籽粒发育时期起到的作用机制。在酵母双杂交实验中，研究人员筛选到一个属于MADS类转录因子家族的蛋白ZmMADS47，并且该蛋白与
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报告基因分类及优缺点介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
报告基因（reporter gene）是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，其表达产物非常容易被鉴定。把它的编码序列和基因调节序列相融合，在调控序列控制下进行表达，从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控。 作为报告基因必须具备的条件： （1）全序列已测定 （2）表达产物在手提细胞中不存在，即无背景，在被转染的细胞中无相似的内源性表达产物 （3）其表达产物能够进行定量测定 报告基因的种类很多，根据对其表达产物的分析检测方法的不同，可将其分为体外报告基因和体内报告基因。前者的分析需要在含有报告分子的细胞裂解液或细胞、组织培养液（分泌型报告基因）中进行报告分子的定量。较典型的有氯霉素乙酰基转移酶基因（CAT）、人生长激素基因（hGH）及分泌型碱性磷酸酶基因（SEAP）等。后者的分析可以在活的细胞或组织中，或在已经组化固定的组织或细胞中进行。较典型的如绿色荧光蛋白基因（GFP）。而β-半乳糖苷酶基因（β-Gal）和萤火虫荧光素酶基因既可以在体外分析也可以在体内分析。 常用的报告基因系统： √ 半乳糖苷酶报告系统 √ 荧光素酶报告系统 √ 荧光蛋白报告系统： 绿色荧光蛋白（GFP）： 可溶性蛋白，性质稳定； 荧光基团相当明亮； 荧光在活细胞中即可观察，不需要固定和组织加工； GFP基团和目的基因做成融合蛋白后，可以通过转染的方法在细胞中稳定表达； 表达GFP融合物的细胞能够在生活状态进行实验和检测。 报告基因 优点 缺点 氯霉素乙酰转移酶基因 （CAT） 在哺乳动物中没有内源性活性；可用自动化的ELISA方法检测 线性范围窄；灵敏度相对较低；需要使用放射性同位素 β-半乳糖苷酶基因（β-Gal） 蛋白稳定；生物或化学发光检测灵敏；不需要使用同位素 在哺乳动物细胞中有内源性活性 人生长激素基因（hGH） 属于分泌型报告蛋白；操作简便 灵敏度相对较低；线性范围较窄 分泌型碱性磷酸酶基因（SEAP）
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旋转蒸发仪原理、注意事项及常见问题解决方案
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
旋转蒸发仪结构原理 结构:蒸馏烧瓶可是一个带有标准磨口接口的茄形或圆底烧瓶，通过一高度回流蛇形冷凝管与减压泵相连，回流冷凝管另一开口与带有磨口的接收烧瓶相连，用于接收被蒸发的有机溶剂。在冷凝管与减压泵之间有一三通活塞，当体系与大气相通时，可以将蒸馏烧瓶，接液烧瓶取下，转移溶剂，当体系与减压泵相通时，则体系应处于减压状态。使用时，应先减压，再开动电动机转动蒸馏烧瓶，结束时，应先停机，再通大气，以防蒸馏烧瓶在转动中脱落。作为蒸馏的热源，常配有相应的恒温水槽。 旋转蒸发仪工作原理 RE-5003旋转蒸发器 通过电子控制，使烧瓶在最适合速度下，恒速旋转以增大蒸发面积。通过真空泵使蒸发烧瓶处于负压状态。蒸发烧瓶在旋转同时置于水浴锅中恒温加热，瓶内溶液在负压下在旋转烧瓶内进行加热扩散蒸发。旋转蒸发器系统可以密封减压至 400~600毫米汞柱;用加热浴加热蒸馏瓶中的溶剂，加热温度可接近该溶剂的沸点;同时还可进行旋转，速度为50~160转/分，使溶剂形成薄膜，增大蒸发面积。此外，在高效冷却器作用下，可将热蒸气迅速液化，加快蒸发速率。 主要部件 1、旋转马达，通过马达的旋转带动盛有样品的蒸发瓶; 2、蒸发管，蒸发管有两个作用，首先起到样品旋转支撑轴的作用，其次通过蒸发管，真空系统将样品吸出; 3、真空系统，用来降低旋转蒸发仪系统的气压; 4、流体加热锅，通常情况下都是用水加热样品; 5、冷凝管，使用双蛇形冷凝或者其它冷凝剂如干冰、丙酮冷凝样品; 6、冷凝样品收集瓶，样品冷却后进入收集瓶。 机械或马达机械装置用于将加热锅中的蒸发瓶快速提升。 旋转蒸发仪的真空系统可以使简单的浸入冷水浴中的水吸气泵，也可以是带冷却管的机械真空泵。蒸发和冷凝玻璃组件可以很简单也可以很复杂，这要取决于蒸馏的目标，以及要蒸馏的溶剂的特性。不同的商业设备都会包含一些基本的特征，现代设备通常都增加了例如数字控制真空泵、数字显示加热温度甚至蒸汽温度等功能。 旋
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关于离心机常用的几种离心方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
离心机在日常生活中的应用越来越广泛了，今天实验室仪器--湖南吉尔森小编给大家介绍下离心机的离心方法，希望大家能够对离心机有进一步的认识。 1.差速离心法。采用不同的离心速度和离心时间，使沉降速度不同的颗粒分步离心的方法，称为差速离心。操作时，将含有两种不同颗粒的混悬液，以常速离心，使大的颗粒下沉，将上清液倾倒于另一离心管中，再加大离心力，离心一定时间，分离小的颗粒，反复多次分离，达到分离目的。差速离心主要用于分离大小和密度差异较大的颗粒。 2.密度梯度离心法。该法又分为速率区带离心法和等密度区带离心法。样品在一定惰性梯度介质中进行离心沉淀或沉降平衡，在一定离心力下把颗粒分配到梯度液中某些特定位置上，形成不同区带的分离方法。被离心的物质根据其沉降系数不同进行分离，同类物质则因分子大的沉降速度快于分子小的物质从而得到分离。密度梯度的制备可采用梯混合器，也可将不同浓度的蔗糖溶液，小心地一层层加入离心管中，越靠管底，浓度越高，形成阶梯梯度。在密度梯度离心过程中，区带的位置和宽度随离心时间的不同而改变。随离心时间的加长，区带会因颗粒扩散而越来越宽。 该法的优点是：具有很好的分辨率，分离效果好，可一次获得较纯颗粒;适用范围广，既能分离沉淀系数差的颗粒，又能分离有一定浮力密度的颗粒;颗粒不会积压变形，能保持颗粒活性，并防止已形成的区带由于对流而引起混合。 3.分析性超速离心法 分析型超速离心机主要由一个椭圆形的转子、一套真空系统和一套光学系统所组成。该转子通过一个柔性的轴连接成一个高速的驱动装置，此轴可使转子在旋转时形成自己的轴。转子在一个冷冻的真空腔中旋转，其容纳两个小室：分析室和配衡室。分析室的容量一般为1mL，呈扇形排列在转子中，其工作原理与一个普通水平转子相同。分析室有上下两个平面的石英窗，离心机中装有的光学系统可保证在整个离心期间都能观察小室中正在沉降的物质，可以通过对紫外光的吸收或折射率
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