德尔塔
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Cultrex® DIVAA体内血管形成分析系统

Cultrex® DIVAA体内血管形成分析系统

作者:德尔塔 日期:2022-04-30

(Angiogenesis)是指从已存在的血管网的内皮细胞分化而形成新的血管。血管生成包括以下过程:血管内皮细胞的迁移和增殖、血管 基底膜的降解、蛋白溶解酶的表达及其对细胞外基质的降解、新形成细胞外基质的重排和内皮细胞血管壁的形成。血管生成的过程包括了,在合适的条件下,内皮细 胞通过自我组装能形成微血管或小管状结构。抗血管生成已经成为**肿瘤转移、糖尿病视网膜病变、风湿性关节炎等疾病的重要策略之一。 作为全球的领导者,Trevigen提供完整的血管生成实验解决方案。其中,体外试剂盒和体外血管生成之内皮细胞浸润分析 试剂分别在细胞水平上进行血管生成因素的评估分析,前者可进行内皮细胞管形成诱导剂和抑制剂的检测,后者旨在加速对影响这一血管内皮细胞透过基底膜过程化 合物的筛查。另外,Trevigen专利的DIVAA产品是世界上第一个用于体内定量检测血管生成的检测系统。 Directed In Vivo Angiogenesis Assay (DIVAA)是世界上第一个用于体内定量检测血管发生的检测系统,实验具有可重复性。将含有20 μl Trevigen’s basement membrane extract (BME)的可移植硅树脂柱(血管反应器、angioreactors,并根据研究需要加入或不加入血管生成调节因子),植入裸鼠皮下。移植后9天,血管 内皮细胞长入 BME,并生成血管。研究人员可根据实验需要,在BME中加入不同的血管生成调节因子(促进或抑制血管发生因子:如FGF-2、VEGF、MMP2、 adrenomedullin、TIMP-2和CD97等)观察其对体内血管发生作用的影响。DIVAA可为体内血管生成的可再生和可定量分析提供标准化检测方案。血管反应器避免了由于小鼠基底膜提取物吸收值产生的错误。此外,血管反应器仅需少量材料,节省了BME和测试化合物的使用,每只小鼠体内可以 植入多达4个反应器,这增大了统计意义。DIVAA已应用于各种应用。 Trevigen专利的DIVAA系列分析试剂盒是设计用于血管生成抑制/激活的评估。试剂盒内包含了48个血管反应器(一种可在体内移植的硅树脂 柱),以

酶法组织消化技术——从粗制的胶原酶到高纯度消化产品

酶法组织消化技术——从粗制的胶原酶到高纯度消化产品

作者:德尔塔 日期:2022-04-30

酶法组织消化技术——从粗制的胶原酶到高纯度消化产品   酶法组织消化中常用的胶原酶(Collagenase),能特异性地降解胞外胶原蛋白,使胶原蛋白和纤维粘连蛋白的网状结构解离,而不损坏细胞表面结构的完整性。由于细胞外基质的成分复杂,除胶原蛋白外,还含有弹性蛋白,糖蛋白等其他大分子结构。而且不同组织类型,不同物种来源,不同年龄的组织中胞外基质组份不同。所以商业化的胶原酶产品一般是梭状芽孢杆菌裂解液的粗提物,是胶原酶、胰蛋白酶等蛋白水解酶混合物,能降解胶原蛋白和其他蛋白,及多糖等胞外大分子物质,适用于多种组织的消化应用。   但是对于不同实验研究中分离的特定组织,需要根据经验来选择合适的胶原酶产品,并对酶浓度、酶体积、酶作用时间进行摸索,才能找到最佳的消化方案。   罗氏胶原酶产品选择示例 罗氏胶原酶产品提取自溶组织梭状芽孢杆菌(Clostridium histolyticum),并根据不同的酶活和验证的功能应用分为Collagenase A/B/D/P/H五类产品。被广泛应用于各种组织中(如肺、心脏、肌肉、骨、脂肪组织、肝、肾、软骨、乳腺、胎盘、血管、脑组织和肿瘤组织等)单个细胞的分离。应用其获得的细胞产量、活度和细胞功能性均经过严格的产品质量控制和验证。 罗氏胶原酶分类 主要酶组分 建议的组织应用(根据文献中的产品引用) Collagenase A 胶原酶I型,胶原酶II型,梭菌蛋白酶,胰酶,中性蛋白酶 常规的酶混合比率,中度酶活 卵母细胞 肺细胞 Collagenase B 胶原酶I型,胶原酶II型,梭菌蛋白酶,胰酶,中性蛋白酶 中至高度胶原酶活性,较高的梭菌蛋白活性(>10U/mg) 心肌细胞 软骨细胞 胚胎前驱细胞 Collagenase D 胶原酶I型,胶原酶II型,梭菌蛋白酶,胰酶,中性蛋白酶 中至高度胶原酶活性,极低的胰酶活性(98%的内毒素和其他死细胞成分,因此有助于在组织消化过程中,大大提升细胞的活率。Liberase系列产品均经过滤除菌,具有高度的批间一致性,保证了整个实验阶段的消

现代固态发酵技术工艺、设备及应用研究进展

现代固态发酵技术工艺、设备及应用研究进展

作者:德尔塔 日期:2022-04-30

前言 固态发酵(Solidstatefermentation)指体系在没有或几乎没有自由水存在下,微生物在固态物质上生长的过程,过程中维持微生物活性需要的水主要为结合水或与固体基质结合的状态。大部分研究者认为固态发酵和固体基质发酵(Solidsubstratesfermentation)是同一概念,可是Pandey等[1]却认为固体基质发酵是在无自由水条件下固体基质作为碳源或氮源的发酵过程,而固态发酵是在无自由水条件下利用天然或惰性底物(如合成泡沫)作为支持物的发酵过程。本文中将其统称为固态发酵。   近几年来,随着世界性的能源危机和环境保护意识的增强,固态发酵重新受到重视,主要归因于农业、工业废弃物在固态发酵方面得到较大应用,比如土壤修复、生物转化及生物燃料等,是工业应用的理想技术。   1   影响固态发酵的因素 影响固态发酵过程的因素很多,主要取决于基质类型、微生物选取和生产规模,可大致分为生物化学、物理化学和环境因素。所有的因素都是密切相关的,不能独立地看待。在特定的固态发酵过程中,单个因素作为生化还是物化因素需要区别开来。某个因素在生化反应中可看做独立的,但在物化反应中是相互影响的,反之亦然。所以,需要分析各个因素在固态发酵进程中的影响。   1.1  固态发酵微生物 真菌和细菌是固态发酵使用较多的微生物,真菌是比较理想的(如图所示,真菌菌丝穿过基质的皮壳到达淀粉颗粒)。接种真菌孢子较营养细胞有一定优势:接种方便、灵活且易于保存较长时间和较高活性,但也有一定的缺点,如较长的滞后期、孢子接种量较大;在孢子萌发之前需诱导孢子进入代谢活动和酶系合成以防孢子休眠。某些发酵过程需要菌丝接种,如将毛壳菌菌丝接入小麦秸秆中进行固态发酵。接种密度(个/克物料)也是固态发酵的一个重要影响因子。   1.2  水分和水活度 底物含水量的变化对微生物的生长及代谢能力有重要影响。低水分将降低营养物质传输、微生物生长、酶稳定性和基质膨胀;高水分将导致颗粒结块、通气不畅和染菌。固态发酵过程

适合HPLC馏分的一项先进的冻干技术

适合HPLC馏分的一项先进的冻干技术

作者:德尔塔 日期:2022-04-30

适合HPLC馏分的一项先进的冻干技术 Rob Darrington,Genevac Ltd.,英国伊普斯威奇市   简介 干燥高效液相色谱(HPLC)纯化馏分(主要成分为水和乙腈)是众多实验室中一项常见且重要的实验任务。实验的要求是将样品干燥成粉末状,以便准确称量样品、进行二次取样或再次溶解。因此,冷冻干燥是实验的**技术,但是常规的大型冷冻干燥系统可能难以处理有机溶剂,因为有机溶剂很容易在样品中暴沸,并因此损坏真空泵,造成样品损失。Actelion Pharmaceuticals采用Genevac公司1 开发的快速冻干法(LyoSpeed™),使用Genevac HT-12离心蒸发仪来完成这项工作。LyoSpeed方法通过离心机来控制样品的沸腾情况,使有机溶剂浓缩,并避免样品损失,然后从冷凝器中抽出有机溶剂,使剩余的水份冻干。这种方法对于亲水性样品而言非常有效,但如果样品不能溶于水,已经去除有机溶剂的样品将会溃散,甚至会形成油脂状。这些样品则需要更进一步的处理才能形成所需的干粉状态。   限制因素 标准化合物库的平均操作成功率(完全冻干vs油性化合物)约为50%。根据化合物的不同属性,最低和最高操作成功率可分别达到30%和90%。取得较高操作成功率的简单方法,就是让样品冻干并使乙腈仍然保留在样品中。遗憾的是,现有的设备还无法实现这样的操作效果。   在硬件上也存在一定的限制因素,尤其是HT-12蒸发仪中溶剂冷凝器(VC3000)表现出的温度特性。VC3000可以达到的最低温度为-50°C,这就限制了蒸发系统可以达到的真空度。为了取得良好的冻干效果,真空度应尽可能低,最理想的状态是能够达到0.1mbar以下。例如,0.5mbar压力条件下纯净水的沸点为-32℃,但乙腈在同等真空条件下的沸点可降至-61°C,因此会在煮沸时喷出冷阱和堵塞真空泵,导致蒸发系统中的压力上升。压力上升会提高溶剂的沸点,致使冻干效果不理想,甚至会导致冻干过程彻底失败。使用LyoSpeed方法的目的不在于使样品彻底冻干(如生产疫苗),而是要制出非油状干燥粉末。正如真正的

活体动物体内生物发光和荧光成像技术基础原理与应用简介

活体动物体内生物发光和荧光成像技术基础原理与应用简介

作者:德尔塔 日期:2022-04-30

活体动物体内生物发光和荧光成像技术 基础原理与应用简介   文章目录: 活体动物体内成像技术是指应用影像学方法,对活体状态下的生物过程进行组织、细胞和分子水平的定性和定量研究的技术。活体动物体内成像技术主要分为可见光成像 (optical imaging)、核素成像(radio-nuclear imaging)、核磁共振(magnetic resonance imaging ,MRI)成像和超声(ultrasound)成像、计算机断层摄影(computed tomography ,CT)成像五大类,其中可见光成像和核素成像特别适合研究分子、代谢和生理学事件,通常称为功能成像;超声成像和CT则适合于解剖学成像,通常称为结构成像。功能成像与结构成像比较,前者更能够反映细胞或基因表达的空间和时间分布,从而了解活体动物体内的相关生物学过程、特异性基因功能和相互作用。所以,活体动物体内功能成像技术可用于观察和追踪靶细胞、基因的表达,同时检测多种分子事件,优化药物和基因**方案,从分子和细胞水平对药物疗效进行观察,从整体动物水平上评估疾病发展过程,对同一个动物进行时间、环境、发展和**影响跟踪。由于功能成像的诸多优势,这项技术广泛应用于生命科学、医学研究及药物开发等方面,本文重点介绍活体动物可见光成像技术。   体内可见光成像(optical in vivo imaging)技术主要包括生物发光(bioluminescence)与荧光(fluorescence)成像两种技术。生物发光成像是用荧光素酶(luciferase)基因标记细胞或DNA,利用其产生的蛋白酶与相应底物发生生化反应产生生物体内的探针光信号;而荧光成像则是采用荧光报告基因(如GFP、RFP)或Cyt及dyes等荧光染料进行标记,利用荧光蛋白或染料产生的荧光就可以形成体内的荧光光源。前者是动物体内的自发光,不需要激发光源,可通过高度灵敏的CCD直接捕捉光信号,而后者则需要外界激发光源的激发才可以捕捉发光信号。传统的动物实验方法需要在不同的时间点宰杀实验动物以获得数据, 得到多个时间点的实验结果。相比之下,体内可见

中药材中黄曲霉毒素检测方案—HPLC(药典方法)

中药材中黄曲霉毒素检测方案—HPLC(药典方法)

作者:德尔塔 日期:2022-04-30

黄曲霉毒素危害: 黄曲霉毒素是一类真菌(如黄曲霉和寄生曲霉)的有毒的代谢产物,它们具有很强的致癌性,主要存在于药材、谷物、坚果、棉籽以及动物饲料相关的产品中。其毒性远远高于氰化物、砷化物和有机农药的毒性,其中以B1毒性最大。当人摄入量大时,可发生急性中毒,出现急性肝炎、出血性坏死、肝细胞脂肪变性和胆管增生。当微量持续摄入,可造成慢性中毒,生长障碍,引起纤维性病变,致使纤维组织增生。   国家重视程度: 近年来,各级食品药品监管部门不断加大中药生产流通监管力度,努力保持中药质量总体稳定。 国家食品药品监督管理局关于规范中药生产经营秩序严厉查处违法违规行为的通知(国食药监安[2012]187号中,要求加强对重金属及有害元素、农药残留、黄曲霉毒素等安全性指标的检测和控制,切实保证中药材质量和安全,另要求企业具备与生产品种相适应的检验设备和能力,严把质量检验关。 《国家药品安全“十二五”规划》,规划中明确提出“开展药品快速检验技术研究,搭建检验技术共享平台”、“加快推进药品快速检验技术在基层的应用,配置快速检验设备”、“加强县级机构快速检验能力建设”的要求                        中药中黄曲霉毒素的检测方法: 2010版《药典》附录IX V 黄曲霉毒素测定采用高效液相色谱法,另外增补药典描述该法检测建立增加柱后光化学衍生法。 华安麦科作为国内最早从事霉菌毒素检测研究的高新技术企业对黄曲霉毒素检测也有深刻的探索研究,下面就我们的实践和大家分享一下,免疫亲和柱-高效液相色谱法-柱后光化学衍生等内容。   【原理】: 样品经甲醇-水提取,提取液经过滤、稀释,滤液经过含有黄曲霉毒素特异抗体的免疫亲和柱层析净化,黄曲霉毒素交联在层析介质中的抗体上,此抗体对黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2具有专一性,用水将免疫亲和柱上杂质除去,以甲醇通过免疫亲和柱洗脱,再经光化学衍生器柱后衍生,以提高检测准确性。 【主要试剂及耗材】: ToxinFast®气控操作架:含气

洁净厂房如何计算照度?

洁净厂房如何计算照度?

作者:德尔塔 日期:2022-04-30

洁净厂房如何计算照度? 照度的单位称勒克司或,米烛光,及一平方米面积上的光照度(流明),基本公式为: E=F/4πrr=I/rr 式中E为照度(勒克斯或米烛光),F为光源总亮度,即灯泡瓦数乘以发光效率(白炽灯平均为15,荧光灯平均为32,节能灯为20),4π为以光源为中心的球面积,r为光源距离,I(烛光)=F/4π,例如一只100瓦灯泡在1.5米处时,读物表面的光亮度为: E=100×15/4×3.1416×1.5×1.5=53.05米烛光 上述的计算相当麻烦,现将我国常用灯泡计算列表如下,家长只要根据所用灯泡查出距离就行。 常用灯泡照明度与使用距离换算表 灯泡瓦数 发光率 总烛光 较好距离(米) 最远距离(米) 100W(白炽灯) 15 119.36 1.6 2.0 60W(白炽灯) 15 71.62 1.2 1.5 40W(白炽灯) 15 47.75 1.0 1.2 40W(日光灯) 32 101.59 1.5 1.8 20W(日光灯) 32 50.93 1.1 1.3 12W (节能灯) 20 19.10 0.60 0.8 6W (节能灯) 20 9.55 0.40 0.5   利用系数法计算平均照度 平均照度(Eav) = 光源总光通量(N*Ф)*利用系数(CU)*维护系数(MF) / 区域面积(m2)   (适用于室内或体育场的照明计算) 利用系数: 一般室内取0.4,体育取0.3 维护系数: 一般取0.7~0.8 举例 1: 室内照明: 4×5米房间,使用3×36W隔栅灯9套 平均照度 =光源总光通量×CU×MF/面积 =(2500×3×9)×0.4×0.8÷4÷5 =1080 Lux 结论:平均照度1000Lux以上 举例 2:   体育馆照明: 20×40米场地, 使用POWRSPOT 1000W金卤灯 60套 平均照度 =光源总光通量×CU×MF/面积 =(105000×60)×0.3×0.8÷20÷40 =1890 Lux 结论:平均水平照度1500Lux以上 某办公室平均照度设计案例: 设计条件: 办公室长18.2米,宽10.8米,顶棚高2.8米,桌面高0.85米,利用系数0.7,维护系数0.8,灯具数量33套,求办公室内平均照度是多少? 灯具解决方案:灯具采用 DiNiT 2X55W 防眩日光灯具,光通量3000Lm,色温3000K,显色性Ra9

磁力搅拌器的使用方法和工作原理

磁力搅拌器的使用方法和工作原理

作者:德尔塔 日期:2022-04-30

磁力搅拌器的使用方法: 1.将立杆固定在搅拌器后上方螺丝孔内,调整好十字夹高度,用万能夹将反应瓶固定好,放入合适搅拌子。 2. 插入~220V电源,打开电源开关,PV显示窗显示“K”,SV设定窗显示“400”字样,为本电器配用K型热电偶,最高控制温度399℃,3秒后,PV显示窗显示室温,SV设定窗显示上次设定温度值。 3.温度设定:按设定加“▲”或设定减“▼”键不放,将快速设定出所需的加热温度如:100℃,绿灯亮表示加温,绿灯灭表示停止,微电脑将根据所设定温度与现时温度的温差大小确定加热量,确保无温冲一次升温到位,并保持设定值与显示值±1℃温差下的供散热平衡,使加热过程轻松完成。   4.自整定功能,启动自整定功能可使不同加热段或加热功率与溶液多少无规律时,升温时间最短,冲温最小,平衡**,但改变加热介质或加温条件后自整定应重新设定。 5.启动自整定:常按移位键“◄”5秒,设定窗数字闪烁即进入自整定状态,三次温冲过后数字停止闪烁,表示自整定结束,可进行使用,但自整定需在初始加温时使用,中途进行的自整定不准确。 6.顺时针调整“搅拌”旋钮,根据转速显示调至合适位置进行搅拌 7.如出现跳子现象,请关停搅拌后再缓缓启动。 8.如搅拌容量大或溶液粘稠时,可适当上调旋钮以增加搅拌力度。 9.搅拌器后下方有一橡胶塞子,用来保护外用热电偶插座不腐蚀生锈和导通内线用,拔掉则内探头断开,机器停止工作。如用外用热电偶时应将此塞子拔掉保存,将外用热电偶插头插入插座并锁紧螺母,然后将不锈钢探棒放入溶液中进行控温加热。 10.该电器设有断偶保护功能,当热电偶连接不良时,显示窗显示“hhhh”绿灯灭,电器即停止加温,需检查好后再用。

荧光western blot应注意些什么

荧光western blot应注意些什么

作者:德尔塔 日期:2022-04-30

随着荧光检测的普及,许多研究人员正考虑将western blot的检测方法从化学发光转到多重荧光。这一趋势背后有多个推动力。最重要的是,荧光检测能够实现多重western blot分析,每次能够同时检测几个目标蛋白,而不再需要剥离和重新杂交。荧光的其他好处在于动态范围更宽、信号稳定性更好。 荧光blotting的小贴士   • 抗体浓度应当优化,在几种不同稀释度的抗体中孵育膜。选择信噪比最高的稀释度。 • 从化学发光转到荧光检测时,一抗浓度应当增加;通常来说是增加2-5倍。二抗浓度可能也需要优化;1:5,000稀释是个不错的起点。在使用特定抗体时,可以参照生产商的建议。 • 为了让信噪比最高,应使用自发荧光低的膜,如 Immun-Blot® low fluorescence (LF) PVDF membrane。 • 许多封闭液都成功用于荧光检测。我们建议使用0.5-5% 酪蛋白、最多5%的脱脂奶粉,或最多3% BSA,溶于TTBS中。 • 缓冲液中的颗粒可能停留在膜上,并造成荧光假象。只使用高质量的试剂,并对所有缓冲液过滤灭菌。 • 使用钝的镊子从边缘操作。避免划破膜或弄皱,这会在荧光检测时造成假象。 • 使用铅笔来标记膜,因为许多墨水都会发出荧光。 • 溴酚蓝会发出荧光。确保染料与样品已分开,切掉凝胶上包含染料的部分,或省掉样品缓冲液中的溴酚蓝。 • 无需在暗处开展免疫检测;正常的室内灯光不会使荧光标记的抗体发生光漂白。不过,荧光标记抗体的储液应保存在暗处。 • 在处理膜时,使用无粉末的手套,以避免膜上出现假象或指纹。   多重分析的小贴士   • 使用来自不同宿主的一抗(如小鼠和兔)。两个亲缘关系相近物种的抗体(如大鼠和小鼠)通常会造成交叉反应,即使抗体已经过交叉吸附。 • 使用经过交叉吸附的二抗,以避免交叉反应。 • 使用光谱上不同的荧光基团偶联物,避免交叉通道荧光。 • 在同时检测多个目标之前,单独优化每个目标的检测。由于一些一抗并非很特异,在膜上会产生多条带,故多重实验之前的单目标检测将有助于确定每个抗体的条带模式

华联: 基因芯片实验设计探讨

华联: 基因芯片实验设计探讨

作者:德尔塔 日期:2022-04-30

基因芯片实验设计探讨 彼得•杜拉克 (Peter F. Drucker) 的名言「效率是把事情做对;效用是做对的事情」,基因芯片 (microarray) 数据结果能否发挥最大的效用在于一开始是否做了正确的实验设计,依研究目标进行分析,从中撷取最想看的结果并厘清疑虑。华联生技将介绍基因芯片实验设计的种类,继续为您的实验扮演最佳效率的角色。  基因芯片实验设计种类 一般而言,基因芯片实验设计须针对基因芯片重复性及生物性重复进行设计。以最佳的实验设计来说,三重复的基因芯片实验结果是从科学研究角度最具可信度的,因各种实验中所使用的试剂、仪器、环境、人..等各方面皆会使实验结果具有某种程度的量测不确定度,三重复的实验设计即是为了降低这些量测变异。但如因研究经费之限制或仍在寻找方向,亦可选择单片或双重复,先从茫茫的基因海中寻找出隐约的方向,如果方向是令人兴奋的,再考虑投入更多经费,进行更为严谨的多重复芯片验证实验。     生物重复性是指研究人员在收集生物样品时,可能因组织位置、个体差异、实验环境偏差…等导致同一条件的生物样品实验产生截然不同的结果。例如研究小鼠的肝脏基因差异,A老鼠与B老鼠即使是以相同条件饲养及用药,仍会有先天上的个体差异,意即A老鼠与B老鼠的肝脏基因表现不会完全相同;或是细胞培养的实验,A盘细胞与B盘细胞虽用相同的培养及用药条件,但可能两盘细胞在培养箱的位置不同,例如A盘细胞比较靠近温度、CO2、光源…等控制器附近,使得A盘细胞与B盘细胞的基因表现有差异。为了确认并降低这种个体差异,应进行生物重复性试验,即指多养几只老鼠或几盘细胞,每只老鼠或每盘细胞皆进行一次芯片实验,最后结果分析时只挑选在生物性重复内呈现相同趋势的基因。如果生物性重复的芯片结果差异太大,可能代表有不知名的因素干扰个体老鼠或细胞的生理或心理环境,需重新检查实验设计,并另做一次生物性重复实验。     华联生技针对常见的实验型态,将实验设计与分析归成六大种

光谱仪知识介绍

光谱仪知识介绍

作者:德尔塔 日期:2022-04-30

光谱仪基础知识介绍-卓立汉光公司----(转载请注明出处)       什么是光谱仪?光与物质相互作用引起物质内部原子及分子能级间的电子跃迁,使物质对光的吸收、发射、散射等在波长及强度信息上发生变化,而检测并处理这类变化的仪器被称为光谱仪。因此,光谱仪的基本功能,就是将复色光在空间上按照不同的波长分离/延展开来,配合各种光电仪器附件得到波长成分及各波长成分的强度等原始信息以供后续处理分析使用。     光谱分析方法作为一种重要的分析手段,在科研、生产、质控等方面,都发挥着极大的作用。无论是穿透吸收光谱,还是荧光光谱,拉曼光谱,如何获得单波长辐射是不可缺少的手段。由于现代单色仪可具有很宽的光谱范围(UV- IR),高光谱分辨率(到0.001nm),自动波长扫描,完整的电脑控制功能极易与其他周边设备融合为高性能自动测试系统,使用电脑自动扫描多光栅单色仪已成为光谱研究的**。       当一束复合光线进入单色仪的入射狭缝,首先由光学准直镜汇聚成平行光,再通过衍射光栅色散为分开的波长(颜色)。利用每个波长离开光栅的角度不同,由聚焦反射镜再成像出射狭缝。通过电脑控制可精确地改变出射波长。   ●光栅单色仪重要参数: ◆分辨率     光栅单色仪的分辨率R是分开两条临近谱线能力的度量,根据罗兰判据为:                                  R=λ/Δλ     光栅光谱仪中有实际意义的定义是测量单个谱线的半高宽(FWHM)。实际上,分辨率依赖于光栅的分辨本领、系统的有效焦长、设定的狭缝宽度、系统的光学像差以及其它参数。                                  R∝ M·F/W                      M-光栅线数 F-谱仪焦距 W-狭缝宽度 ◆色散     光栅光谱仪的色散决定其分开波长的能力。光谱仪的倒线色散可计算得到:沿单色仪的焦平面改变距离χ引起波长λ的变化,即:                               Δλ/Δχ=dcosβ/mF     这里d、β、F分别是光栅刻槽的间距、衍射角和系统的有效焦距,m为衍射级次。由方

影响脂肪测定结果因素的技术研究

影响脂肪测定结果因素的技术研究

作者:德尔塔 日期:2022-04-30

结合笔者在日常工作中遇到的实际问题, 以常用饲料原料鱼粉、豆粕、大豆粉作研究对象, 借用,分别对影响脂肪测定结果的3 个因素( 样品颗粒、抽提溶剂、抽提时间) 进行分析探讨和调控试验, 初步结果表明: 样品颗粒研磨至1.00mm 以下, 脂肪抽提效果就可以达到现行国家标准 GB/T 6433- 1994 的规定;  为消除安全隐患, 可选用沸点范围为30~60℃的石油醚来代替乙醚作抽提溶剂;  抽提时间以脂肪自动测定仪操作说明书推荐的60min( 其中浸泡 15min, 淋洗 45min) 为宜。 调控试验脂肪是饲料及其原料中仅次于蛋白质的主要品质项目, 目前其含量的测定普遍使用国家标准GB/T 6433- 1994, 采用索氏(Soxhlet) 抽提原理, 影响检测结果的主要因素有样品颗粒、抽提溶剂、抽提时间、天平和烘箱的准确度、抽提装置的性能、环境温度、所用器具清洁度、样品中水分含量水平、操作人员水平等。笔者在日常检测的具体操作过程, 有时遇到检测结果受某些因素影响而不稳定的现象。为探讨出现这种现象的原因, 我们就样品颗粒、抽提溶剂、抽提时间这3个主要影响因素对鱼粉、豆粕、大豆粉分别进行分析探讨和调控试验, 结果报道如下。 1 材料和方法 1.1 样品的采集和制备 随机选用经广州黄埔港入境的鱼粉、豆粕、大豆粉, 样品的抽取和制备按 SN/T 0800.1- 1999《进出口粮油、饲料检验抽样和制样方法》进行。 1.2 主要仪器与试剂 KNIFETEC 1095 型; 标准筛, BS 410/1986; , Soxtec Avanti 2050 型; 烘箱, 东方 B 型; 粗天平, PB5001, 感量 0.1g; 分析天平, AE163, 感量 0.0001g; 所需试剂主要是分析纯乙醚和沸点范围 30~60℃的石油醚(30#)。 1.3 试验方法 根据日常检验工作遇到的实际问题, 就不同样品颗粒、不同抽提溶剂、不同抽提时间, 参照现行国家标准 GB/T6433- 1994《饲料粗脂肪测定方法》中的仪器法进行脂肪含量测定。 1.4 评判依据 按现行国家标准 GB/T 6433- 1994《饲料粗脂肪测定方法》中对实验结果限差的规定来评价测定结果数据的有效性。该国标规定:

华联:基因芯片数据处理流程与分析介绍

华联:基因芯片数据处理流程与分析介绍

作者:德尔塔 日期:2022-04-30

当人类基因体定序计划的重要里程碑完成之后,生命科学正式迈入了一个后基因体时代,基因芯片 (microarray) 的出现让研究人员得以宏观的视野来探讨分子机转。不过分析是相当复杂的学问,正因为基因芯片成千上万的信息使得分析数据量庞大,更需要应用到生物统计与生物信息相关软件的协助。要取得一完整的数据结果,除了前端的实验设计与操作的无暇外,如何以精确的分析取得可信数据,运筹帷幄于方寸之间,更是画龙点睛的关键。 基因芯片的应用 基因芯片可以同时针对生物体内数以千计的基因进行表现量分析,对于科学研究者而言,不论是细胞的生命周期、生化调控路径、蛋白质交互作用关系等等研究,或是药物研发中对于药物作用目标基因的筛选,到临床的疾病诊断预测,都为基因芯片可以发挥功用的范畴。     基因表现图谱抓取了时间点当下所有的动态基因表现情形,将所有的探针所代表的基因与荧光强度转换成基本数据 (raw data) 后,仿如尚未解密前的达文西密码,隐藏的奥秘由丝丝的线索串联绵延,有待专家抽丝剥茧,如剥洋葱般从外而内层层解析出数千数万数据下的隐晦含义。   整体分析的概略流程 要获得有意义的分析结果,恐怕不能如泼墨画般洒脱随兴所致。从 raw data 取得后,需要一连贯的分析流程 (下图),经过许多统计方法,才能条清理明的将 raw data 整理出一初步的分析数据,当处理到取得实验组除以对照组的对数值后 (log2 ratio),大约完成初步的统计工作,可进展到下一步的进阶分析阶段。   阅读全文基因芯片数据处理流程与分析.pdf

ELISA试剂盒生产流程及注意事项

ELISA试剂盒生产流程及注意事项

作者:德尔塔 日期:2022-04-30

在线咨询QQ: 524402845 1. ELISA试剂盒生产流程   2,包被 2.1 将包被抗原用包被缓冲液配制包被液,每孔取100 mL加入酶标板,盖好盖板膜,包被条件如下表,4℃ 16-20h包被时酶标板可以叠放,而37℃ 2h包被时酶标板之间的间距应保持一致(一般为5cm)。根据培养箱的设计调节酶标板间的间距,如培养箱从底部产热,则应增加下层酶标板间的间距为10cm 。 2.2  包被加样采取吸二打一的方式,应避免加在孔壁上部,若不慎滴加在孔壁上,根据该滴溶液是否应加入孔内再做判断,若应加入,则小心振荡使其落入孔底,反之则用吸水纸小心吸出,并注意不可溅出,不可产生气泡。 2.3  包被前预吸查看枪头是否合格,水流是否一致,不一致者应更换枪头,包被应采用优质枪头,每包被一块板,应将枪头套紧,并且在包被的过程中要注意查看吸液是否一致,在包被过程中若出现任何小问题,都应将此块板做出记号,以便后期组装入库时淘汰。 2.4 若采用37℃ 2h包被模式,则应给酶标板编码,保证每块板子的包被时间一致。 3,洗板 3.1 包被后要进行两次洗涤,250微升/孔,洗涤完毕后,应在毛巾上拍干参与液体,并及时进行下一步封闭。 3.2 洗涤时要注意查看水流是否一致,在洗涤程中若出现任何小问题,都应将此块板做出记号,以便后期组装入库时淘汰。 4,封闭 4.1 封闭液应提前一小时取出初步回温,用前摇匀,每孔取180 mL加入酶标板,盖好盖板膜,37℃封闭 1.5h, 酶标板之间的间距应保持一致(一般为5cm)。根据培养箱的设计调节酶标板间的间距,如培养箱从底部产热,则应增加下层酶标板间的间距为10cm 。 4.2  封闭加样采取吸一打一的方式,应避免加在孔壁上部,若不慎滴加在孔壁上,根据该滴溶液是否应加入孔内再做判断,若应加入,则小心振荡使其落入孔底,反之则用吸水纸小心吸出,残留在枪头内的溶液不要打出 以免产生气泡。并注意不可溅出,不可产生气泡 4.3 封闭前预吸查看枪头是否合格,水流是否一致,不一致者应更换枪头,封闭

简述电子天平的分类及选购原理

简述电子天平的分类及选购原理

作者:德尔塔 日期:2022-04-30

天平是称量物体质量的衡器。具有结构简单、方便实用、称量速度快等特点,目前广泛应用于企业和实验室,用来测定物体的质量电子天平一般按精度分类,可分为以下几类: (1)1mg以下级别称为电子精密天平 (2)0.1mg称为电子分析天平 (3)0.01mg称为准微量天平 (4)1ug称为微量天平 (5)0.1ug及以上级别称为超微量电子天平具体换算比例如下: 100mg=0.1g= 十分之一 10mg=0.01g= 百分之一 1mg=0.001g= 千分之一 0.1mg=0.0001g= 万分之一 0.01mg=0.00001g= 十万分之一 1μg=0.001mg =0.000001g= 百万分之一 0.1μg=0.0001mg=0.0000001g = 千万分之一 购买天平时,用户需了解几项主要的技术参数: 1.全称量:天平所能称量的最大质量值(满载值),常以“克”(g)为单位表示。 2.感量:使天平指针从平衡位置转到刻度盘一分度所需的最大质量。因此,感量也叫做“分度值”,常以“毫克”(mg)为单位表示。这一数值愈小,天平就愈灵敏。 3.不等臂性:指因横梁两臂(中刀口到左、右刀口的距离)不等所引起的称量误差最大值,常以“毫克”或“分度”为单位。有时,也叫做“偏差量”。 4.变动性:指平衡后的天平,因横梁系统数次起落,而引起指针平衡位置前后不一的最大偏差,常以“毫克”或“分度”为单位。这是一个标志天平稳定性的参数。 5.天平的级别:按我国现行标准,根据天平标称感量与天平全称量的比值,分为10级。 6.游码标尺误差:指游码拨到标尺每一刻线位置所测得的质量,与相应标准砝码的最大质量误差。也叫做“骑码标尺误差”或“骑码误差”。 7.标称值与检定值:各种天平所带的说明书对以上六项技术参数均有标注。这六项技术参数是全面衡量天平计量性能的指标,但不反映天平计量性能的实际情况。因此,称之为“标称值”或“名义值”。天平计量性能的实际情况要按规定程序检定后,计算出检定值才能得知。新购天平或修理后的天平,其检定值应以不大于标称值为合格(确切地说,应为“达到标称级别”);使用中的天平某些指标(如不等臂性)可稍稍放宽些。电子天