-
免疫荧光技术的实验方法及其分类
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
免疫荧光技术的实验方法及其分类 一、免疫标记法及其分类 1.荧光免疫法 原理是应用一对单克隆抗体的夹心法。底物用磷酸-4-甲基伞形酮，检测产物发出的荧光，荧光强度与Mb浓度呈正比，可在8min内得出结果。结果以Mb每小时释放的速率表示(△Mb)表示。该法重复性好，线性范围宽，具有快速、敏感、准确的特点。 以双抗夹心法为例，首先将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体。除去未结合抗体，然后加受检标本，使其中的蛋白抗原与固相抗体形成抗原抗体复合物。洗涤除去未结合物，接着加入荧光标记的抗体，使之与抗原特异性结合，形成抗体—抗原—抗体复合物。最后根据荧光强度，即可对蛋白抗原进行定量。 传统的荧光免疫法受本底荧光的干扰较大，时间分辨荧光免疫测定法是以具有特长寿命的稀土金属如铕，作为标记物，加入正常液后激发测定，能有效去除短寿命本底荧光的干扰。 2.放射免疫法 放射免疫法是以过量的未标记抗原与放射性物质标记的抗原，竞争性地与抗体结合，形成有放射性的抗原—抗体复合物与无放射性的抗原—抗体复合物，并有过剩的标记抗原与未标记的抗原。然后通过离心沉淀等方法，将抗原—抗体复合物与游离抗原分离，分别测定其放射性强度与标准曲线比较，即可对未标记的待测抗原进行定量。 RIA法测定血清蛋白灵敏度高、特异性强，可准确定量到ng／ml水平。但早期的方法操作麻烦，耗时长，且有放射性污染。近年来，随着单克隆抗体的应用，RIA的灵敏度又有了较大提高，且操作大为简化，并已有商品试剂盒供应，使用方便。 3.酶联免疫法(ELISA) ELISA法有竞争法和夹心法两种。竞争法是基于标准或血清Mb和微孑L板上包被的Mb竞争性地与单克隆抗体相结合的原理而建立，该法的最低检测限为10μg／L，线性范围达1 000ug／L。夹心ELISA法与EIA具有良好的相关性(r＝0.92)。ELISA法具有灵敏度高，特异性强，精密度好，操作简单，适用于多份标本的检测，不需特殊仪器设备等优点，易于推广普及。但不适合急诊的快速
-
Isolation of papillary cells
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
Isolation of papillary cells Isolation of renal papillary cells 1. For isolation of papillary cells, kidneys were harvested and kept in HBSS containing 15 mM HEPES, penicillin/streptomycin, and 0.35 g/l NaHCO3, pH 7.4, at 4°C. 2. After removal of the perinephric fat, the kidneys were sectioned along the anterior-posterior axis, ensuring that the papilla was left intact and attached to one of the two half-kidneys. 3. After isolation of the papilla, the tissue was minced and digested with 2 mg/ml collagenase I while being shaken at 175 rpm in a 37°C shaker. 4. Thereafter, with a spatula, the tissue was forced through sequential 106-μm and 20-μm steel filters. 5. The dispersed cells were then collected by centrifugation. Cell culture. 1. For tissue culture, the collected cells were dispersed with DMEM/Ham F12 containing 10% FCS, 5% chicken embryo extract, and 5% rat serum, as well as 2 mM glutamine, penicillin, and streptomycin. 2. Except where indicated otherwise, all cultures were maintained at 37°C in an atmosphere of 5% CO2 and 95% room air. 3. When cells were grown in serum-free media, the culture media consisted of DMEM/Ham F12 containing glutamine and antibiotics plus 5 μg/ml insulin, 5 μg/ml transferrin, 5 ng/ml sodium selenite, 20 ng/ml dexamethasone, 20 ng/ml l-thyroxine, 50 ng/ml bFGF, 100 ng/ml PDGF, and 20 ng/ml EGF. 4. Cells were grown either in plastic dishes or in dishes coated with 5 μg/cm2 fibronectin. 5. When used, LIF was added at a concentration of 100 ng/ml. 6. Individual cell clones were obtained.
-
焦虑和抑郁动物模型的建立方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
焦虑和抑郁动物模型的建立方法 应激、焦虑和抑郁是密切相关的现象，大多数焦虑和抑郁患者都曾经历严重的心理应激事件。因此，应激事件被看作焦虑和抑郁的原因，或者至少是在遗传基础上的诱因，能够导致情绪障碍的产生。焦虑和抑郁动物模型就是将动物置于一系列应激性情境中（潜在的或实际的威胁，急性的或慢性的），使其产生情绪障碍，然后应用特定的手段来对行为和生理指标进行检测，从而探讨此情绪障碍的深入机制，以及鉴定和筛选抗焦虑药或抗抑郁药。 1.1 焦虑动物模型 焦虑是由预先知道但又不可避免的、即将发生的应激性事件引起的一种预期反应，以恐惧、担心、紧张等精神症状为主要表现，同时多伴有心悸、多汗、手脚发冷等植物神经功能紊乱，其核心症状为担忧。从进化的角度讲，动物所表现的防御反应是人类恐惧和焦虑反应的原始成分。因此，动物所表现的恐惧样反应与人类的焦虑反应是相似的，这就是焦虑动物模型的行为学基础。人类的焦虑反应主要表现为逃避现实、逃跑行为、警觉性提高，同样的行为反应也可在动物身上观察到。例如，当动物面临一种不熟悉的环境时，动物就会表现出一系列的行为和生理反应，包括探究行为的抑制、呆滞、逃走、心率加快、排尿、血浆皮质酮水平增加等。 这些反应可看作动物面临危险情景时防御反应系统的激活。因此，通过科学比较可认为人类和动物具有相同的焦虑情绪状态。 焦虑和抑郁生物学机制的研究已经获得了飞速发展，逐渐深入到分子和基因水平。但是，由于研究领域的自身特点，焦虑和抑郁动物模型的研究却发展相对缓慢。而且，在应用过程中研究者倾向于使用比较经典的动物模型，由此，这也限制了其发展。 1.2 行为学检测方法 目前常用的焦虑动物模型主要包括两类：一类是基于动物非条件化的模型，根据其行为特点又可分为探究行为模型和社会行为模型。探究行为模型主要包括比较经典的高架十字迷宫实验和旷场实验。 高架十字迷宫测验将动物置于迷宫的中央区，然后
-
饲料中磺胺喹恶啉的测定（高效液相色谱法）
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
饲料中磺胺喹恶啉的测定高效液相色谱法 GBT 8381.10-2005 1 本标准规定了以GE-200高效液相色谱(HPLC)仪测定饲料中磺胺喳唔琳的方法。本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和添加剂预混合饲料中磺胺喳唔琳的测定，最小检测浓度为5.0 mg/kg. 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误内容)或修订版均不适用本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 3 原理 用甲醇水溶液提取饲料中的磺胺喳嗯琳，离心，过滤，在HPLC仪上分离测定。 4 试荆和溶液 以下所用的试剂，除特别注明外均为分析纯试剂；水为蒸馏水，色谱用水符合GB/T 6682一级水的规定。 4. 1 磺胺唾嗯琳标准品:含磺胺唆唔琳(G14HUN402S) 95-0%- 4.2 甲醇:色谱纯。 4.3 磷酸盐溶液:取磷酸二氢钾3.4 0g 和磷酸氢二钾5.7 1g ，加水溶解并稀释至10 00m L 4.4 磺胺喳唔琳标准溶液:准确称取磺胺喳唔琳(4.1)50 mg,溶于甲醇并稀释成。. 1 mg/ mL的储备液，置4℃冰箱中避光保存。有效期1个月。临用前，取此储备液用水稀释成适当浓度的标准工作液。 4.5 提取液:甲醇100 mL+水50 mLo 5 仪器 5. 1实验室常用仪器设备。 5.2GE-200高效液相色谱仪(配GE-200紫外检测器)。 5.3分析天平:感量为。.00 01 g 和。.001g o 5.4旋涡振荡器。 5.5离心机:4 000 r/mine 5.6针头过滤器:备孔径为0. 45 um微孔滤膜。 6 试样的制备 按GB/T 14699.1规定方法采样，选取有代表性的饲料样品，至少500g ，四分法缩减至100g ，磨碎，通过。0.45 mm孔筛，混匀，装人密闭容器中，避光低温保存备用。 7 分析步骤 7.1 提取 称取5g试样，精确至0.0 01g ，加人提取液(4.5 )50 m L，旋涡振荡器混匀，超声水浴中提取15min,中间取出摇动1次，然后以4 000 r/min离心5 min,静置，取
-
neuroConn经颅电刺激和神经认知反馈最新进展
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
2012年3月，新的DC-STIMULATOR PLUS可投入使用 Ilmenau，2012年1月：由我们研制出的信号质量大幅度提高的DC-STIMULATOR PLUS新1代会在2012年3月底投入使用。除了扩大基本功能，例如系统语言的简单选择（德语或者英语），恒定的阻抗检查和声学错误信号，同时会有一些新的软件和硬件开启新领域的应用。 SIGNAL OUT选项是独一无二的：结合新的neuroConn软件和神经PRAX®脑电图放大器。它允许在tDCS 和tACS期间导出脑电图，因为刺激的感应噪声从联机和实时的脑电图信号被过滤。医师可以通过1个外部电压发生器用新选项REMOTE触发任意信号形式的DC-STIMULATOR PLUS。 当前的Patient Mode被时控的SCHED- ULE模式所替代，它允许医师设置和控制精确的**时间表。尽管各种新功能不会影响基本价格。但是新的DC-STIMULATOR PLUS将替换当前版本。有针对性的经颅HD-刺激。目前临床范例用2个相对较大的电极穿过头部注射电流，导致电场广泛分布在大脑的大部分区域。neuroConn 和 US-based 的合作在DC-STIMULATOR MC 和 the Soterix Software HDTargetsTM的基础上现已开发出1个新的解决方法，它允许定向、优化的高清刺激。使用一些小电极和应用电流系统地被优化以实现高效率和有针对性的刺激，同时确保病人安全。这个新产品旨在扩大当前研究领域来改善在**抑郁、中风、耳鸣、疼痛方面的tDCS临床研究协议 。几个欧洲大学已经获得了新的系统。我们预计在2012年实现第一个科学成果。 除此之外，MATLAB/.NET-library现在可用于DC-STIMULATOR MC，通过MATLAB 或者NET Framework.随意来控制刺激器。 严重的社会影响—EFIC大会2011 汉堡，德国，2011年9月：严重的社会影响。这是汉堡第七届EFIC大会的标语。20%的欧洲人患慢性疾病，这些人在欧盟里超过1亿人。尽管现在医学发达并有先进的止痛药，但是依然有很多人不能被完全治愈。除了病人必须克服的痛苦和残疾外，偏头痛每年的医疗费在欧洲有270亿欧元。在欧洲汉堡的EFIC大会显示研究结果
-
换能器在超声波清洗机清洗槽中的分布及粘结问题
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
有些，粘在超声波清洗机清洗槽底或壁上的换能器分布过密，一个紧挨一个的陈列．输入换能器的功率强度抵达每平方厘米2-3瓦，如此高的强度一方面会加速不锈钢板表面的空化侵蚀，缩短运用寿命，另一方面因为声强过高。会在超声波清洗机钢板表面左近发生很多较大的气泡，添加声传达损掉，在远离换能器的中心减弱超声波清洗机清洗效果。通俗选用功率强度每平方厘米低于1.5瓦为宜。 换能器与超声波清洗机清洗槽的粘结质量对超声清洗机整机的质量影响很大。不单要粘牢，并且恳求胶层均匀、不缺胶和不答应有裂痕，使超声能量最大限制地向清洗液中传输，以提高整机效率和清洗结果。有些超声波清洗机为避免换能器从清洗槽上失落下来。接纳螺钉加粘胶的固定方法，这种联接方法可以很好的让换能器不会失落下来。然则要留心螺钉焊接质量，假定不垂直于不锈钢板表面，则胶层不服均，以致有裂痕或缺胶，能量传输会减弱；另一方面．假设焊接欠好也会影响不锈钢表面的平坦，招致加快空化侵蚀，缩短运用寿命，所以焊接质量非常主要。 判别粘结质量的方法之一，是在清洗槽装水并开机任务一段工夫后，测量换能器的温升。假设在很多的换能器中某个换能器温升特殊快，则标明该换能器能够粘结欠好．因为此时声辐射欠好，电能量大部分消耗在换能器上而发烧。另一个方法是在小旌旗灯号前提下一一测量 换能器的电阻抗巨细来判别粘结质量。 在超声波清洗机的功能方面还存在一些模糊的看法：认为功率越大，换能器数量越多．其功能越好，价值越高。这种看法是不具体的． 如上述超声波清洗机换能器布得过密，功率密渡过大，不单清洗结果欠好，并且槽底易空化侵蚀．另一方面， 当前超声波清洗机所标的功率大多是声功率而不是电功率，假设所标是指消耗工频功率，则超声波清洗机质量的好坏应该由效率来判别。假设效率低，在相同清洗结果时则耗电大，反而添加了用户的费用。超声波清洗机的效率包罗两部分．一是超声频电源的效率．即输入换能器的 高
-
Rat urinary bladder urothelial cells
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
Rat urinary bladder urothelial cells 1. Bladders were excised from deeply anesthetized (urethane, 1.2 gm • kg−1, i.p.) Sprague Dawley rats (of either sex), cut open, and gently stretched (urothelial side down). 2. Anesthesia was determined to be adequate for surgery by periodically testing for the absence of a withdrawal reflex to a strong pinch of a hind paw and absence of an eye-blink reflex to tactile stimulation of the cornea. 3. After tissue removal, all animals were killed via overdose of anesthetic. 4. The tissue was incubated overnight in primary minimal essential medium, penicillin/streptomycin/fungizone, and 2.5 mg • ml−1 dispase. 5. The urothelium was gently scraped from underlying tissue, treated with 0.25% trypsin, and resuspended in primary cell culture medium. 6. The dissociated cell suspension (0.1 ml, 50,000–150,000 cells ml−1) was plated on the surface of collagen-coated dishes and maintained in culture for 1–3 d. 7. Because long-term maintenance of cells in culture could significantly change the properties of some types of cells, the cells in this study were examined after a short time in culture. 8. In general, all cells were used within the first 3 d after plating. 9. All cells in these cultures were cytokeratin positive and therefore were presumably of epithelial origin. Reference 1. Birder LA, Apodaca G, de Groat WC, Kanai AJ (1998) Adrenergic- and capsaicin-evoked nitric oxide release from urothelium and afferent nerves in urinary bladder. Am J Physiol 275:F226–F229. 2. Truschel ST, Ruiz WG, Shulman T, Pilewski J, Sun TT, Zeidel ML, Apodaca G
-
饲料中黄曲霉毒素检测方案—HPLC法
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
黄曲霉毒素危害： 黄曲霉毒素是一类真菌（如黄曲霉和寄生曲霉）的有毒的代谢产物，它们具有很强的致癌性，主要存在于谷物、坚果、棉籽以及一些和人类血液，动物饲料相关的产品中。其毒性远远高于氰化物、砷化物和有机农药的毒性，其中以B1毒性最大。当人摄入量大时，可发生急性中毒，出现急性肝炎、出血性坏死、肝细胞脂肪变性和胆管增生。当微量持续摄入，可造成慢性中毒，生长障碍，引起纤维性病变，致使纤维组织增生。 国家重视程度： 近年来，国家制定了多个检测黄曲霉毒素的方法标准，并同时出台食品及饲料中黄曲霉毒素的限量要求，可见黄曲霉毒素的危害之大，用有效方法检测黄曲霉毒素，从而控制有毒食品对动物和人体的危害至关重要，华安麦科作为国内最早从事霉菌毒素检测研究的高新技术企业对黄曲霉毒素检测也有深刻的探索研究，下面就我们的实践和大家分享一下。 目前黄曲霉毒素的检测方法 检测方法 参考标准 优点 缺点 高效液相色谱法（HPLC） GB/T 18979 特异性强、灵敏度高 设备较贵 薄层色谱法（TLC） GB/T 8381 设备简单、易普及 样品处理繁琐、对人员伤害大 酶联免疫检测法（ELISA） GB/T 17480 特异性强、灵敏度高、成本低 有少量假阳性结果 胶体金免疫层析法 特异性强、成本低 定性检测 怎么选择检测方法和不熟悉仪器检测法困扰着很多检测人员，这次主要给大家介绍一下仪器法中相对性价比高也是不少检测人员常用的高效液相法（HPLC）： 【原理】： 样品经甲醇-水提取，提取液经过滤、稀释，滤液经过含有黄曲霉毒素特异抗体的免疫亲和柱层析净化，黄曲霉毒素交联在层析介质中的抗体上，此抗体对黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2具有专一性，用水将免疫亲和柱上杂质除去，以甲醇通过免疫亲和柱洗脱，再经光化学衍生器柱后衍生，以提高检测准确性。 【主要试剂及耗材】： ToxinFast®气控操作架：含气泵 ToxinFast®黄曲霉毒素免疫亲和柱1ml或3ml Tox
-
A primary cell culture model of rabbit uroepithelium
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
A primary cell culture model of rabbit uroepithelium Isolation of Epithelial Cells from Rabbit Bladders 1. Animal experiments were performed in accordance with the Animal Use and Care Committee. 2. Urinary bladders were obtained from New Zealand White rabbits (3–4 kg). 3. Typically, two rabbits were used per culture. 4. Each rabbit was euthanized with 250 mg of pentobarbital, the bladder was exposed, the ends of the bladder were clamped with hemostats, an incision was made lengthwise along the bladder and the opened bladder was surgically excised and washed in Krebs solution (110 mM NaCl, 5.8 mM KCl, 25 mM NaHCO3, 1.2 mMKH2PO4, 2.0 mM CaCl2,1.2 mM MgSO4, 11.1 mM glucose, pH 7.4). 5. The bladder was trimmed of excess fat and stretched on a rack, mucosal side down, in the same solution at 37 °C. 6. The smooth muscle layers were carefully removed by dissection with a scalpel and forceps and the stripped mucosa was transferred to a 10 × 10-cm square dish containing an 8 × 8-cm plastic rack with 10 sharp metal pins along each edge. 7. The tissue was stretched mucosal side up across the metal pins and then incubated overnight at 4 °C in sterile minimal essential medium containing 1% (v/v) penicillin/streptomycin/fungizone, 2.5 mg/ml dispase, and 20 mM HEPES, pH 7.4, to weaken the association between the epithelium and the connective tissue and to facilitate manual separation of the mucosa. 8. Following treatment, the stripped mucosa was transferred to a sterile tissue culture hood, the minimal essential medium/dispase solution was aspirated, and the epith
-
最轻松的糖肽鉴定——PLGS、BiopharmaLynx糖肽分析简介
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
最轻松的糖肽鉴定——PLGS、BiopharmaLynx糖肽分析简介 贾伟 沃特世科技（上海）有限公司实验中心 糖基化蛋白质参与了几乎所有重要的生命过程，糖链的组成和结构对糖基化蛋白质的构象、功能以及与其它分子的相互作用都具有巨大的影响。许多蛋白类药物都是糖基化蛋白质，如免疫球蛋白IgG等。蛋白糖基化一级结构的研究内容包括：糖链的糖型结构、糖基化修饰的氨基酸位点、以及两者间的对应关系。这些信息都集中于糖肽结构中。沃特世的PLGS与BiopharmaLynxTM软件具有独特的糖肽鉴定功能，其主要分析流程如下。 1、建立Y1离子理论数据库：蛋白糖基化主要有N-与O-糖基化。N-糖基化是糖链与天冬氨酸(N)连接，O-糖基化是糖链与丝氨酸(S)或苏氨酸(T) 连接。在质谱的CID碎裂中，糖苷键较肽键更容易断裂。而在N-、O-糖基化中，第一个与氨基酸连接的都是N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)。因此在糖肽的碎片中，peptide-GlcNAc的离子信号稳定存在（及Y1离子）。PLGS与BiopharmaLynx进行糖肽搜索的第一步就是建立理论Y1离子数据库。 2、发现候选Y1离子信号：在数据库建立之后，根据质量准确度，对Y1离子质谱数据库进行搜索，从而发现候选Y1离子信号。 3、在候选Y1离子的相关碎片信息中，查找糖诊断离子。如果找到至少2个糖诊断离子，则确定其为糖肽，进而进行下一步处理。糖诊断离子来源于糖链中最常见的糖残基型的碎片，这里主要考虑7种糖诊断离子：204.0817、186.0817、168.0817、274.0187、292.0817、366.1012、657.1111。 4、搜索其它候选糖型信息及多肽序列鉴定。在Y1离子的质量检索匹配的基础上，搜索可能的糖单位差值数据，以发现Y1离子的各种糖型结构。之后再根据肽段的b、y离子碎片等信息进行肽段序列鉴定，以及糖基化位点确定。PLGS、BiopharmaLynx对糖肽的鉴定功能，为分析蛋白类药物复杂的糖型结构提供了非常简便的方式，已经成为糖蛋白药物分析中不可或缺的有力工具。 图1. 糖肽鉴定流程图。 图2. IgG糖肽EEQYNS
-
Isolation of human primary gastric mucosa epithelial cells
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
Isolation of human primary gastric mucosa epithelial cells 1. A piece of gastric mucosa (∼3 cm2) was obtained from the normal appearing mucosa of the stomach at surgery. 2. The patients were proven to be no H. pylori-negative by a combination of serology, histology and culture. 3. The patients gave informed consent, and the Human Research Committee approved the study. 4. The surface mucosal layer was removed with a razor blade, immediately minced, and then incubated in Ham's F-12 culture medium containing collagenase type I (0.2 mg/ml; Invitrogen) for 10 min. 5. Cells from the final incubation were washed and cultured in Ham's F-12 medium supplemented with 10% FBS and streptomycin (300 μg/ml) at 37°C in a humidified 5% CO2 atmosphere. 6. Epithelial cells were cultured in a 24-well collagen-coated dish at a final concentration of 106 cells/ml for 24 h before use. 7. Cultured cells formed subconfluent monolayers within 24 h of the inoculation. 8. The cultured cells in the monolayers had periodic acid-Schiff-positive material in the cytoplasm, confirming that the population consisted of mucus producing epithelial cells with at most a minimal contamination by other cells. 9. Each experiment used gastric cells from a different patient with individual experiments being performed by using gastric cells from a single patient. 10. The results were pooled from three different experiments. Reference 1. Tanahashi, T., Kita, M., Kodama, T., Yamaoka, Y., Sawai, N., Ohno, T., Mitsufuji, S., Wei, Y. P., Kashima, K., and Imanishi, J. (2000). Cytokine expression and production b
-
关于超声波清洗器的一些小知识
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
超声波清洗器选择清洗液时，应思考以下三个要素： 1、清洗效率：选择最有用的清洗溶剂时，必然要做实行。如在现有的清洗工艺中引入超声，所运用的溶剂通俗不必变卦； 2、超声波清洗器操作简略：所运用的液体应安全无毒、操作简略且运用寿命长； 3、成本：最低价的清洗溶剂的运用成本并纷歧定最低。运用中必需思考到溶剂的清洗效率、安全性、必然量的溶剂可清洗几工件使用率最高级要素。当然所选择的超声波清洗器清洗溶剂必需抵达清洗结果，并应与所清洗的工件材料相容。水为最通俗的清洗液，故运用水基溶液的系统操作烦琐、运用成本低、使用遍及。然而对某些材料以及污垢等并不合用于水性溶液，那么还有很多溶剂可供选用。 分歧的清洗液，要区分的清洗系统 水性系统：凡间由敞口槽构成，工件浸没个中。而复杂的系统 由多个槽构成，并配备轮回过滤系统、冲淋槽、单调槽以及其它附件。 溶剂系统：多为超声波汽相除油脂超声波清洗器，常配备废液延续收受接管装置。超声波汽相肃清油脂进程是由溶剂蒸发槽和超声浸洗槽成的集成式多槽系统完成的。在热的溶剂蒸汽和超声激荡一起用下，油脂、蜡以及其他溶于溶剂的污垢就被除去。经由一列清洗工序后下料的工件发烧、洁净单调。 超声波清洗器的清洗件措置 超声清洗的另一个思考要素是清洗件的上、下料或许说是放置清洗件的工装的设计。清洗件在超声波清洗器清洗槽内时，无论清洗件照样清洗件篮都不得触及槽底。清洗件总的横截面积不该逾越超声槽横截面积的70%。橡胶以及非刚化塑料会接收超声波能量。绝缘的清洗件也应惹起特殊留心。工装篮设计欠妥，或所盛工件太重，纵使**的超声波清洗器的效率也会被大大降低。钩子架子以及烧杯都可用来支撑清洗件。 清洗工夫：3-10分钟，**采用准时方法清洗。 关于超声波清洗器您还可以了解其它栏目内容，更仔细内容请致电给先欧超声发卖或许工程技能人员，先欧超声波清洗器有从业数十年的工程技能人员，能给您很好的处置清洗
-
PCR实验室的设计
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
1 PCR实验室平面布局 PCR扩增检验实验室原则上分为四个单独的工作区域：试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区、扩增产物分析区。为避免交叉污染，进入各个工作区域必须严格遵循单一方向进行，即只能从试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区。 各实验区之间的试剂及样品传递应通过传递窗进行。PCR实验室平面布置示意图如下图所示。 2实验室空调通风系统设计及压力控制 PCR实验室并没有严格的净化要求，但是为避免各个实验区域间交叉污染的可能性，宜采用全送全排的气流组织形式。同时，要严格控制送、排风的比例以保证各实验区的压力要求。 2.1PCR试剂贮存和准备区 该实验区主要进行的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。试剂和用于样品制作的材料应直接运送至该区，不得经过其他区域。试剂原材料必须贮存在本区内，并在本区内制备成所需的贮存试剂。 对与气流压力的控制，本区并没有严格的要求。 2.2PCR标本制备区 该区域主要进行的操作为样本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。 本区的压力梯度要求为：相对于邻近区域为正压，以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。另外，由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染，所以应避免在本区内不必要的走动。 2.3扩增反应混合物配制和扩增区 该区域主要进行的操作为DNA扩增。此外，已制备的DNA模板 (来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。 本区的压力梯度要求为：相对于邻近区域为负压，以避免气溶胶从本区漏出。为避免气溶胶所致的污染，应尽量减少在本区内的不必要的走动。个别操作如加样等应在超净台内进行。 2.4扩增产物分析区 该区域主要进行的操作为扩增片段的测定。 本区是最主要的扩增产物污染来源，因此对本区的压力梯度的要求为：相对于邻近区域为负压，以避免扩增产物
-
PCR实验室建设的基本设备与要求
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
临床基因扩增检验实验室管理暂行办法 第一章 总 则 第一条 为规范临床基因扩增检验实验室管理，保证临床基因扩增检验质量，使临床诊断和**更为科学、合理，特制定本办法。 第二条 临床基因扩增检验技术指以临床诊断**为目的，以扩增检测DNA或RNA为方法的检测技术，如聚合酶链反应（PCR）、连接酶链反应（LCR）、转录依赖的放大系统（TAS）自主序列复制系统（3SR）和链替代扩增（SDA）等。 第三条 本办法适用于开展临床基因扩增检验的实验室。临床基因扩增检验实验室设立在二级以上医院。 第四条 临床基因扩增检验实验室必须使用经国家药品监督管理局批准的临床检验试剂开展临床基因扩增检验项目。 第五条 卫生部临床检验中心（以下简称卫生部临检中心）和省、自治区、直辖市临床检验中心（以下简称省临检中心）负责对所辖行政区域内临床基因扩增检验实验室的质量监督管理工作。 第二章 实验室设置和验收 第六条 拟设置临床基因扩增检验实验室的医疗机构按照《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》（见附件）筹建实验室；筹建完成后，由法定代表人向卫生部临检中心提出技术验收申请。申请时需提交以下材料： （一）《医疗机构执业许可证》复印件； （二）可行性研究报告； 1、 拟设临床基因扩增检验实验室机构的所在地医疗卫生资源状况、本机构的基本情况、对临床基因扩增检验的需求以及临床基因扩增实验室运行的预测分析； 2、 拟设临床基因扩增检验实验室的设置平面图； 3、 拟设临床基因扩增检验实验室将开展的检验项目、实验设备条件和有关技术人员资料 第七条 卫生部临检中心和省临检中心共同组织相关专业的专家组（以下简称专家组），按照《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》对提出申请的临床基因扩增检验实验室进行技术验收。验收完成后，在20日内将验收报告寄送至申请机构。 第八条 经专家组技术验收合格的医疗机构将本办法第六条规定的材料及专家组验收报告送至省级行政部备案。在将符合规定
-
实验鼠不能取代人体胚胎干细胞研究
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
导读：美国耶鲁大学科学家5日宣布，他们新完成的研究详细地揭示了人体胚胎干细胞中的3种基因是如何控制人体发育的，该成果有望帮助人们深入了解如何培育这些细胞用于疾病**。 研究人员在新出版的《细胞·干细胞》杂志上发表文章称，人体胚胎干细胞对人体的作用不同于实验鼠胚胎干细胞对鼠体的作用，这凸显了利用人体胚胎干细胞开展研究工作的重要性。文章资深作者、耶鲁大学干细胞中心遗传学助理教授娜塔莉亚·伊万诺娃说，从实验鼠的情况难以推断出胚胎干细胞在人体中的作用，人类的身体以不同的方式组织自己。 胚胎干细胞在受精后不久便形成，由于每个干细胞能转变成身体中的任何种类的细胞，因此它们十分独特。随着人体发育，细胞开始定性发展，失去了变成其他细胞类型的能力，当然，某些新干细胞的再生除外。科学家希望能够了解干细胞自我再生和分化的过程，以便**那些与细胞受损相关的疾病，如帕金森病、脊椎受伤、心脏病和阿尔茨海默症。 科学家通过研究确认的3种控制胚胎早期发育的基因分别是Nanog、Oct 4和Sox 2，它们是维持干细胞自我再生和防止其过早分化成非正常细胞的关键。由于目前使用人体胚胎干细胞受到政府规定的限制，因而许多有关胚胎干细胞如何工作的研究只能在实验鼠身上进行。 新的研究显示，从根本上讲，人类胚胎干细胞在人体中作用不同于实验鼠干细胞在鼠体上的作用。例如，在人体内，Nanog基因与Oct 4基因成对后控制名为外胚层神经细胞的分化，该细胞世系（lineage）能导致神经元和其他中枢神经系统细胞的产生。与之相反，Sox 2细胞与其他基因合作，在外胚层、中胚层和内胚层所有早期细胞世系的控制和新干细胞的产生中发挥着至关重要的作用。干细胞自我再生涉及多个类型的癌症。 伊万诺娃强调，许多其他的基因一定参与了人体早期发育变化的控制，她的实验室正在试图寻求该问题的答案。 Distinct Lineage Specification Roles for NANOG, OCT4, and SOX2 in Human Embryonic Stem Cells Zhen
咨询热线
18133906270
德尔塔官方微信