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morris水迷宫实验准则（2）
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
系列文章： Morris水迷宫实验准则（1） 摘自读生物论坛： 三、硬件准则要求 1、水池和站台：对于水池的大小，存在一个人为选择的问题，看起来应该统一标准，其实并不容易。但是有个原则就是水池不能太小，站台也不能太大。Morris最初（1981年）用于大鼠的水池是直径1.32米、高为0.6米，水池的水深为0.40米;但后来（1984年）改为直径2.14米、高0.4米，水池的水深为0.25米。对于小鼠的实验水池，文献中介绍的迷宫直径差异巨大，小到0.6米, 大到2.0米。一般而言，过小的水池使小鼠爬上平台的偶然性增加，任务难度减小。过大的水池会使小鼠游泳路径延长，体力消耗过大，爬上站台的机率减少。现在国内文献中所用水迷宫水池大多数为大鼠1.6m或1.8m居多，而小鼠一般为1m或1.2m，高0.5m。站台一般为圆形，直径可分为大鼠12cm,小鼠6cm,表面粗糙，高度一般为30cm。国外文献中所用水迷宫水池大多数为大鼠1.8m或2.0m居多，高0.6m,站台直径10cm；而小鼠一般为1m到1.5m，高0.3m站台直径5cm。国内尺寸能统一么？如何定标准？ 2、水温：水的温度要求实验过程中恒温。大鼠温度范围一般为25± 1℃，小鼠可能低些在18~22℃。有文献报道，对小鼠进行了水温对迷宫成绩影响的观察，结果发现27~28℃组的小鼠成绩最差，而17~18℃组和21~22℃组小鼠的学习成绩没有区别，所以，我们推荐小鼠水迷宫的实验用21~22℃水。水温对潜伏期影响很大，特别是大鼠，如果温度过高，大鼠在游几次后渐渐适应了迷宫环境，它就会把迷宫当“浴盆”了，放进去以后，就漂浮不动；如果水温过低，大鼠体温下降很快，体力也会耗散太多，大鼠游泳能力不能坚持很久，就会出现游几次潜伏期突然增大的现象。甚至有些老鼠会出现较明显的应激反应，比如说会出现抽筋，腹泻现象。水温一般保持25度左右，另外气温也会导致水温偏差过大，应人为的调节水温。所以就要求在水池的底部装有可以恒定保持水温的加热棒或者其他加热装置了。 3、 光源：要保证水池水面上没有光影，主要是要避免光
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人白细胞抗原B27(HLA-B27)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
本试剂盒仅供研究使用。 检测范围： 96T 0.75pmol/L-20pmol/L 使用目的： 本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本白细胞抗原B27(HLA-B27)含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞抗原B27(HLA-B27)水平。用纯化的人白细胞B27(HLA-B27)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞抗原B27(HLA-B27)，再与HRP标记的白细胞B27(HLA-B27)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞抗原B27(HLA-B27)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人白细胞抗原B27(HLA-B27)浓度。 试剂盒组成 1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶 2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品（40pmol/L） 0.5ml×1瓶 3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份 5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张 6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个 标本要求 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 操作步骤 1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 20pmol/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 10pmol/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 5pmol/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 2.5pmol/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 1.25pmol/L 1号标准品 150μl
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基因电转染系统的技术革新
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
经过近30年的发展革新，电转染已成为基因的功能研究领域中不可或缺的技术手段。下文不仅是一篇新上市的转染仪器的介绍，更是电转染仪技术革新的介绍，因为： NEPA21高效基因转染系统 ------拥有全球领先的专利电脉冲芯片技术和全新的电转染程序设计 NEPA GENE公司专业研发、生产细胞电转染仪及电融合仪等，其生产CUY21系列（）电转染仪在研究领域中久负盛名，已被数百篇文献引用，其中不乏高水平杂志的文章，如Nature、Cell、PNAS、Genes & Dvelopment等。 NEPA GENE应用于发育生物学研究的历史 NEPA GENE的产品在发育生物学领域有很长的使用历史。 二十世纪90年代初，人们刚开始把电穿孔技术用于发育生物学研究的时发现，电脉冲对动物造成的伤害很大，因而后续的研究难以进行。而病毒法虽然也能达到较好的效率，但存在转染部位不够特异的问题，而且存在免疫反应或其他安全隐患。 NEPA GENE的创始人Mr Hayakawa（早川先生）当时是某知名品牌的代理商，受日本的实验室邀请，共同对电穿孔技术和仪器进行革新。1994年技术改良的成功后，日本在鸡胚活体转染技术和应用上，达到了世界领先水平。早川先生将改进后的技术和仪器申请了专利，并成立了NEPA GENE公司，开始自主研发、生产电转染仪。 《Electroporation And Sonoporation in Developmental Biology》是介绍电穿孔技术在发育生物学中的应用的专业书籍。图书的主编暨鸡胚活体转染的先驱Mr Nakamura在第一章明确的肯定了早川先生的贡献。点击阅读图书全文（）。世界上首位报道用电转染法进行小鼠胚胎大脑活体转染的科学家，庆应大学Keio University的Dr H Tabata也是NEPA GENE的设备完成研究的（参考文献1、2）。请点击观看由Dr Tabata操刀演示的、胚胎活体转染视频： 全新设计的电转染仪NEPA21 2011年，NEPA GENE推出新一代全能型的NEPA21高效基因转染系统。
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土壤酸碱度对植物生长的影响
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
pH值是植物营养最重要的参数。植物营养吸收依赖于对土壤或基质的pH值精确调节： pH值过低阻碍大量元素吸收；pH过高，阻碍微量元素吸收，如缺铁失绿等。因此，快速可靠的pH测量是专业园艺和农业生产不可或缺的部分。我们利用PH3000土壤酸度计做测试，对植物生长过程中，pH酸碱度值对其产品的影响做分析： １．酸碱度对植物影响的讨论 酸碱度对植物的影响是多方面的，大体上分为对外部环境影响与对植物体自身影响，为确定其中主要因素，现已将千余粒小麦种子分为PH= 4、4.5 、5 、5.5、 6、 6.3、 7 、7.5、 8 ９个梯度进行育种，每区域100颗左右，以营养液进行培养。 在经过40多天观察纪录后（其中有一次筛选）摘录数据如表一 表一 育种记录 酸碱度 10月15日 10月18日 10月22日 10月25日 10月30日 11月2日 11月7日 4 1.50 6.00 8.00 15.00 17.00 19.00 26.00 4.5 0.90 3.50 8.00 15.00 19.00 21.00 25.00 5 0.70 5.50 10.00 13.50 16.00 18.00 27.00 5.5 0.30 3.00 7.00 14.00 18.00 20.00 25.00 6 0.00 3.00 14.00 14.00 19.50 21.00 30.00 6.3 1.60 7.00 15.00 17.00 22.00 24.00 32.00 7 0.90 5.00 13.00 15.00 17.50 19.00 28.00 7.5 0.60 3.50 8.00 14.00 16.50 18.00 30.00 8 1.10 4.50 10.00 15.00 19.00 21.00 28.00 对其中３部分进行具体比较，植株的高度已有明显差异（见图一）。实际目测时在ＰＨ＝６－７区域的植株要比其他粗壮挺拔。说明酸碱度对植株的影响是显著的。 图一 育种生长高度比较 但这种差异并不是很悬殊，也可证明在所进行的试验区域PH=4-8时，并没有超过小麦的生存极限，对其自身结构产生影响。 为确定酸碱度是否对植物合成蛋白质产生影响，对PH= 4、6.3、8 三种植株的RNA进行电泳处理比较。 图二
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第四代冷链监控系统 GPS、GPRS技术应用
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
第四代冷链监控系统 GPS、GPRS技术应用 GPS实时性、全天候、连续、快速、高精度的特点运用到冷链监控行业给其带来一场实质性的转变，并将在冷链监控行业业的发展中发挥越来越重要的作用。从硬件设计，到软件开发，第四代冷链监控系统已经正式启动。GPS技术在冷链物流中的应用大大提高了运输的质量和有效的保证运输时间，从而确保了冷链产品的质量和及时到达。第四代冷链监控系统系统将温度监控技术和GPS技术有机的整合在了一起，对运输操作实行全方位地监控和管理，既提高了运输中信息的精度，又实现了运输管理的实时自动化。从而确保了冷链产品的质量和及时到达，将在冷链监控行业及物流业的发展中发挥越来越重要的作用。 一、冷链物流运输应用GPS技术的可行性 (1)技术可行性。GPRS技术采用了分组交换技术，每个用户可同时占有多个无线信道，同一无线信道又可以由多个用户共享，从而资源被有效地利用。GPRS技术以其160kbps的极速传送令人称道，使用GPRS数据实现分组发送和接收，用户永远在线且按流量、时间计费、迅速降低了服务成本。因此，冷链物流应用GPRS技术完成信息的实时传递是可行的。 (2)经济可行性。GPRS服务虽然保持一直在线，但不必担心费用问题，因为只有产生通信流量时才计费。目前GPRS可支持56Kbps的峰值传输速率，理论峰值传输可达114Kbps。现阶段，GPRS技术可以每5秒钟对车辆进行一次信息采集，一个月的费用才5元，这个费用与GPRS技术所带来的利润相比，是能被广泛接受的。 (3)管理可行性。现阶段，冷链物流业市场越来越规范，从业人员的素质也越来越高，对冷链物流管理理论也越来越了解。随着GPS技术和RFID、GPRS、GIS技术广泛认可和应用，对其管理也越来越规范。 二、GPS、GPRS技术在冷链物流中的应用 由于冷链产品必须低温存储和运输，如果在运输中一旦发生车辆抛锚、冷冻系统瘫痪等事故，都会大大影响冷链产品的质量，因此将GPS定位技术应用到冷链物流中，通过网络实现资源共享，对货物运
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组织芯片特点及其应用前景
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
组织芯片(tissue chip)，也称组织微阵列(tissue microarrays)，是将数十个甚至上千个不同个体组织标本以规则阵列方式排布于同一固相载体上，进行同一指标的原位组织学研究。为医学分子生物学提供了一种高通量、大样本以及快速的分子水平的分析工具。 组织芯片是生物芯片技术的一个重要分支，与基因芯片、蛋白质芯片及细胞芯片等一样，属于一种特殊、新型的生物芯片，是一种新型的高通量、多样本的研究的工具。 组织芯片与基因芯片和蛋白质芯片一起构成了生物芯片系列，使人类第一次能够有效利用成百上千份组织标本，在基因组、转录组和蛋白质组三个水平上进行研究，被誉为医学、生物学领域的一次革命。 优点：高通量、体积小、大规模、标准化、信息含量高、误差低、并可根据不同的需要进行组合和设计 应用前景：1、基因、转录和表达产物三个水平上进行研究 2、疾病不同发展阶段各基因与基因表达的动态变化 3、疾病相关基因的验证 4、疾病的分子诊断 5、**靶点的定位 6、抗体和新药物的开发与筛选 7、**过程的追踪和预后等方面 研究方法 1、HE染色 2、免疫组织化学（IHC）染色 3、原位杂交（ISH） 4、荧光原位杂交（FISH） 5、原位PCR6、原位RT－PCR7、寡核苷酸启动的原位DNA合成（PRINS） 以生物分子病理学方面的领衔品牌——lifespan为例，Lifespan为全球客户提供以下几类组织芯片产品： 1.正常组织分析Normal Tissue Arrays（31） 包括多种器官组织：骨髓、骨骼、大脑、结肠、肾脏、肺组织、肝脏组织、淋巴组织、皮肤组织，用于研究人体内不同组织的蛋白表达及定位； 2.多种肿瘤类型分析Multiple Cancer Type Arrays（115） 包括人体多种肿瘤器官组织（含病理分级及诊断信息及对应的正常器官组织），用于筛选抗体和鉴定IHC抗体的组织特异性； 3.单一肿瘤类型分析Single Cancer Type Arrays（554） 包括人体单一肿瘤器官组织（含病理分级及诊断信息，部分包括对应的正常器官组织
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德国IBL肺炎衣原体IgM ELISA试剂盒使用说明书
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
德国IBL肺炎衣原体IgM ELISA试剂盒 (货号：RE57051) 1、 前言说明 衣原体是一种不能运动的革兰氏阳性菌，同时也是一种强制性的胞内寄生菌，而且这种细菌可在其寄主细胞的胞浆内形成明显的包涵体。这种包涵体在光学显微镜下很容易看到。目前人们知道有三种不同的衣原体对人具有至病性，它们是：沙眼衣原体、肺炎衣原体和鹦鹉衣原体，还有一种对动物具有至病性的衣原体（兽类衣原体）。沙眼衣原体是世界上性传播疾病最流行的传播因子（4000-5000万例），并且此传染病的数量还在不断增加。感染了沙眼衣原体的孕妇可以在分娩时将病毒传染给胎儿，从而导致胎儿患结膜炎或肺炎。 衣原体感染不**的个体会导致慢性输卵管炎，并且很有可能出现宫外孕或不孕。在男性中，沙眼衣原体是导致非淋球菌性尿道炎的主要因素。在衣原体感染中，频繁性的无症状隐性阶段是一个很严重的问题，因为它可能启动慢性疾病。在许多例子中，原发性感染都没有被发现，之后只能检测到由持续上升病原体而引起的后遗症。 种类 感染机制 疾病 诊断方法 沙眼衣原体 直接传播或性传播：主要感染部位是眼或泌尿生殖道黏膜 淋巴性肉芽肿，沙眼，新生儿或成年包涵体性结膜炎，宫颈炎、输卵管炎、尿道炎、附睾炎、直肠炎及新生儿肺炎。 血清学 肺炎衣原体 呼吸道黏膜浸润 呼吸道疾病 有争议的疾病：心内膜炎，冠心病 心脏病 PCR 鹦鹉衣原体 吸入受染禽类的粪便；接触了受染禽类的内脏。 饲鸟病（鹦鹉热） 镜检 可通过以下方法来检测是否感染： n 镜检：Giemsa染色 n PCR n 血清学：用ELISA检测抗原 用IF、EIA或ELISA检测抗体 2、应用范围 IBL公司的肺炎衣原体IgM ELISA试剂盒可用于人血清中抗肺炎衣原体IgM抗体的定性检测。 3、实验原理 抗肺炎衣原体IgM抗体的定性免疫酶检测利用的是ELISA技术。包被板上预先包被了能结合样本中相关抗体的肺炎衣原体抗原。洗板以除去未结合的样品物质，之后加入辣根过氧
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低温恒温槽使用常见问题及注意事项
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
低温恒温槽使用常见问题及注意事项 问题一：低温恒温槽中水循环以前使用都很正常，可现在发现噪音比以前大很多，这是什么原因？ 原因：前面提到过水循环的日常维护工作，这个问题也与之有关。大家都知道，水里面有很少部分的杂质，就是蒸馏水在加到水箱后也不可能完全保证一点杂质都没有。对于水循环而言，一般温度都设置在20℃，特别适应微生物的生长和繁衍。时间长了以后这些微生物就会堵塞水路的过滤器造成回水不畅，水泵就会有较大的噪音。有时这些微生物附在了换热器的表面，造成换热器的传热效果变差，制冷量变小。所以一定要严格按照说明书中的要求做好日常维护工作，定时清洗内槽，长期停用，保持槽内干燥。水循环里面好像有漏水，有时地面一会儿就有几滴，是不是水路上有地方泄漏？一般来说在正常使用的过程中，水路是不会有泄漏的。在环境温度比较高空气中的相对湿度又太大时，在水循环的水路中的水泵、水管接头、外接水管处容易凝结露水，累积多了以后就滴到地面上了，不用担心是水路中有漏水的地方。如果您对这很介意的话，打开空调降低房间温度或是除湿都可以避免露水的产生。 问题二、低温恒温槽中水循环使用了一年多都很正常，可现在制冷速度好像越来越慢了，在气温越高时越明显？ 原因：水循环使用很简单，但是定期的维护保养工作还是不能忽视的。有很多看似故障的毛病其实就是没有定期做维护保养引起的。水循环自身的电功率和制冷剂从负载中带走的热量都需要从前通风罩处的散热器中排走，如果前通风罩上吸满灰尘和柳棉等就会妨碍这些热量的散发，制冷效果将大打折扣。一般来说在正常的使用条件下制冷量下降都是因为通风散热效果太差或环境温度太高引起的。 低温恒温槽具体注意事项： 1、低温恒温槽内液体介质的选用应符合以下原则： 当工作温度在5～85℃时，液体介质一般选用水； 当工作温度在85～95℃时，液体介质可选用15%甘油水溶液； 当工作温度高于95℃时，液
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无菌均质器的应用范围和使用说明
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
无菌均质器的应用范围和使用说明 ，又称拍打式匀浆机，拍打式匀浆器，无菌均质器的应用范围如下： 1、无菌均质器广泛用于动物组织、生物样品等均质处理，在食品、药品、化妆品、临床、分子学、毒素及细菌检测等领域均可应用，特别适合于微生物检测样本的制备。 2、无菌均质器(拍打式匀浆器)是在国外系列产品技术基础上改进并放大的先进产品，具有均质柔和、样品无污染、无损伤、不升温、不需灭菌处理，不需洗刷器皿的特点。 3、无菌均质器也适合肿瘤组织(如肝癌、肠癌、胃癌、乳腺癌)的匀浆，既可得到大量的单细胞，必要时，可通过延长均质时间，对组织细胞(如肝脏等)实现柔软的破碎。 4、无菌均质器可有效地分离固体样品表面和被包含在内的微生物均一样品，样品装在一次性无菌均质袋中，不与仪器接触，运行快速、结果准确、重复性好的要求。 该装置设有全开启式玻璃透明窗口门，易于清洗，玻璃透明窗口易于观察。采用大屏幕液晶显示，工作时间和均质速度智能可调，拍击器也可任意调整前后距离。可有效的分离实验样品表面和被包含在内的微生物均一样品，样品使用一次性无菌均质滤袋隔离操作，保证卫生和安全，不与仪器接触，无样品泄露而不需进行系统清洗，具有方便快速、结果准确、均质柔和、样品无污染、无损伤、不升温、不需灭菌处理，不需洗刷器皿的特点，重复性好的要求。本产品也适合肿瘤组织（如肠癌、胃癌、肝癌、乳腺癌）的匀浆，既可得到大量的单细胞。必要时，可通过延长均质时间，对组织细胞实现柔软的破碎。 是使从固体样品中提取细菌的过程变得非常简单，只需将样品和稀释液加入到无菌的样品袋中，然后将样品袋放入拍击式均质器中即可完成样品的处理。有效地分离被包含在固体样品内部和表面的微生物均一样品，确保无菌袋中混合全部的样品。处理后的样品溶液可以直接进行取样和分析，没有样品的变化和交叉污染的危险。应用领域：食品微生物分析；动物组织、生物样品、化妆品的均质
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冷水机的用途
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
冷水机的用途 冷水机应用： 1、冷水机应用于塑料加工机械成型模具冷却，能够大大提高塑料制品表面光洁度，减少塑料制品表面纹痕和内应力，使产品不缩水、不变形，便于塑料制品的脱模，加速产品定型，从而极大地提高塑料成型机的生产效率。 2、冷水机应用于数控机床、座标镗床、磨床、加工中心、组合机床以及各类精密机床主轴润滑和液压系统传动媒的冷却，能够精确地控制油温，有效地减少机床的热变形，提高机床的加工精度。 3、冷水机应用于医药、化工等特殊行业。 4、冷水机应用于食品（水产类用到的：零度冰水机）加工 一，塑料、塑胶行业用冷水机：塑料加工机械成型模具冷却，能够大大提高塑料制品表面光洁度，减少塑料制品表面纹痕和内应力，使产品不缩水、不变形，便于塑料制品的脱模，加速产品定型，从而极大地提高塑料成型机的生产效率。 二，挤出线材及抽粒行业用冷水机：很明显，水槽是个开放式的容器，所以，我们在选配冷水机时，要注意一点，冷水机的蒸发器，应选用壳管式，不可以选用盘管式的。其原因如下：盘管式冷水机的蒸发器，是一个开放式的水箱，当冷水机停止工作时，泵浦没有压力，水槽的水位一般高于冷水机，此时，水槽的水会回流到冷水机的水箱，造成冷水机的水箱溢水。壳管式则不同，其蒸发器是一个闭回路，不会有溢水的问题 三，控机床、座标镗床、磨床、加工中心、组合机床以及各类精密机床用冷水机：应用于数主轴润滑和液压系统传动媒的冷却，能够精确地控制油温，有效地减少机床的热变形，提高机床的加工精度。提高机械润滑的效率减少磨损及机械寿命 四，电子行业、超声波清洗行业用冷水机：冷水机冷却稳定电子元件内部在生产线上的分子结构,提高电子元件的合格率,能降低清洗剂温度，冷凝气态清洗剂，有效防止清洗剂的挥发 五，真空离子镀膜行业用冷水机：离化源在初始工作时需加热启动，运行时需冷却，冷却系统故障将会导致离化源损坏。冷却水必须用高压水泵
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EDI技术的开发与应用
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
EDI技术的开发与应用 对于生产高纯水的工业公司来说有一个重要的消息，那就是不使用化学再生药剂而制得高纯度的水现在已成为了现实。最近开发的EDI技术所制取水质的纯度可以达到极限要求，而且还会带来其它一系列的益处。 无需化学再生药剂的EDI技术 被水处理行业称为EDI的电去离子法并不是什么新名词，事实上，商品化的EDI在十多年前就已经出现了。尽管早期的EDI系统出力较低，而且运行的可靠性很差，但今天的EDI已经能够满足工业领域对水处理的广泛要求了。 目前的RO（反渗透）－EDI系统使水的净化方式正经历着变革，然而使工业部门广泛地接受EDI还有很长的一段路要走。 从四十多年以前的制药、造纸、石化及电力到今天的半导体产业，水一贯是工业部门的命脉，而正是这些部门导致了超纯水处理技术的革命。尽管工业用户所要求的基本特点如较少的化学药剂、较少的废水排放量、简单的操作及较低的运行费用等基本上是相同的，但原有的水处理技术已经发生了许多变化。 水处理技术的主要发展 为满足工业部门对高纯水的需要，近年来在工业水处理方面对两项技术进行了重点开发，这些新技术中的每一项都使水处理系统产生了突破性的变化。 在二十世纪60至70年代，工业部门所要求的水质通过化学方式再生的离子交换技术即可得到满足。由于当时的应用面不大，因而对使用化学药剂所带来的长期影响较少有人关注。 在早期的水处理系统中，混床离子交换阶段作为后续处理过程以一个独立的单元置于阳、阴离子交换之后。随着对应用要求的提高，以化学方式再生的离子交换系统显然受到了限制，问题的焦点在于它们漏过的TOC含量较高。与新近的技术相比，在这些系统中使用了大量的化学再生药剂，并要求对化学废水进行连续地处理，而且其操作复杂、运行费用较高。 在二十世纪70年代至80年代，随着人们对减少化学药剂使用意识的增加，人们开始在工业水处理中寻求新的工艺方法，其结果导致了对反渗透技术的新的应用。反渗
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Follicular thyroid cell isolation and culture
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
Follicular thyroid cell isolation and culture Thyroid epithelial cells (also called follicular cells or principal cells) are cells of thyroid gland that are responsible for the production and secretion of thyroid hormones, that is, thyroxine (T4) and triiodothyronine (T3). The thyroid epithelial cells take up iodine and amino acids from the blood circulation on the basolateral side, synthesize thyroglobulin and thyroperoxidase from amino acids and secrete these into the thyroid follicles together with iodine. The thyroid epithelial cells can subsequently take up iodinated thyroglobulin from the follicles by endocytosis, extract thyroid hormones from it with the help of proteases and subsequently release thyroid hormones to the blood. These thyroid hormones are transported throughout the body where they control metabolism (which is the conversion of oxygen and calories to energy). Every cell in the body depends upon thyroid hormones for regulation of their metabolism. The normal thyroid gland produces about 80% T4 and about 20% T3, however, T3 is about four times as potent as T4. Isolation and culture 1. Fresh surgical thyroid specimens were minced in small pieces and teased apart with a scalpel in HBSS medium with Ca++ and Mg++ supplemented with 2 mM L-glutamine, penicillin, and streptomycin. 2. The resulting suspension was digested by 3-h incubation at 37 oC in a shaker bath with primary cell isolation kit at the final concentration of 5 mg/mL supplemented with 1% FCS. 3. At the end of incubation, HBSS without Ca++ and Mg++ supplemented with 2 mM
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Human thyroid endothelial cell isolation
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
Human thyroid endothelial cell isolation 1. Human thyroid glands were obtained at surgery from multinodular goiters. 2. The tissue was incubated in 0.1% type II collagenase (Worthington) overnight at room temperature. 3. The digested tissue was passed through a 200-μm filter to remove undigested material, and the collagenase was removed by centrifugation at 360 g at 4°C for 10 min. 4. The supernatant was discarded, and the cellular pellet was resuspended in DMEM supplemented with 10% newborn bovine calf serum (NCS) containing 100 U/ml penicillin and 100 μg/ml streptomycin. 5. Cells were plated on dishes coated with 1% gelatin. Cells were incubated for up to 1 h and examined microscopically every 10 min. 6. When thyroid follicles began to attach to the dishes, the cell suspension was removed, and the dishes were washed extensively and vigorously with Hanks' balanced salt solution (HBSS) to remove adherent follicles. 7. Single cells remaining adherent after these washings were incubated with fresh endothelial cell medium that consisted of a 1:1 mixture of 10% NCS in DMEM and conditioned media from JEG cells supplemented with 1 ng/ml FGF-2, 17.5 U/ml heparin, 100 U/ml penicillin, 100 μg/ml streptomycin, and 250 μg/ml nystatin. 8. JEG cells are a human cell line derived from a choriocarcinoma and are cultured in DMEM containing 10% FBS. 9. Cultures were incubated in humidified incubators with 5% CO2-95% air, and the media were replaced every 2 days. 10. The human thyroid endothelial cells used for the experiments reported in this article were obtained
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Isolation and culture of pancreatic stellate cells
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
Isolation and culture of pancreatic stellate cells Pancreatic stellate cells (PaSCs or PSCs) are myofibroblast-like cells found in the areas of the pancreas that have exocrine function. PaSCs are regulated by autocrine and paracrine stimuli and share many features with their hepatic counterparts, studies of which have helped further our understanding of PaSC biology. Activation of PaSCs induces them to proliferate, to migrate to sites of tissue damage, to contract and possibly phagocytose, and to synthesize ECM components to promote tissue repair. Sustained activation of PaSCs has an increasingly appreciated role in the fibrosis that is associated with chronic pancreatitis and with pancreatic cancer. Therefore, understanding the biology of PaSCs offers potential therapeutic targets for the treatment and prevention of these diseases. 1. Cells were isolated either by density gradient centrifugation after collagenase digestion of rat pancreas or by the outgrowth method using pancreas tissue of rats with cerulein pancreatitis. 2. To obtain cells with the inactivated fat-storing phenotype, cells were isolated from the pancreas of untreated male Wistar rats (200–300 g). 3. After the animals were anesthetized with pentobarbital sodium, the abdomen was opened, the common bile duct was ligated, and a cannula was inserted in the biliopancreatic duct. 4. The rats were exsanguinated, and 1 ml collagenase P (6 mg/5 ml) containing McCoy's 5A medium (6 mg/5 ml) was instilled intraductally. 5. The distended pancreas was removed, minced, and shaken in 4 ml collagenase P solution
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mice islet isolation
作者：德尔塔 日期：2022-04-30
mice islet isolation 1. Islets of Langerhans were isolated from 5- to 7-week-old nonobese diabetic (NOD) mice. 2. Which involves cannulation of the common bile duct and distension of the pancreas with 3 ml of 1.3 U/ml collagenase followed by purification of islets on a BSA gradient. 3. Approximately 200 islets per pancreas were obtained using this method, and usually 4–8 mice were used per experiment. 4. For flow cytometric analysis, islet cells were identified. 5. Islets were dispersed into single cells by brief incubation with 0.2% trypsin, 10 mM EDTA in HBSS. 6. Dispersed islets were then washed free of trypsin and allowed to recover in primary cell system plus 10% FCS for 0.5–1 h before staining. 7. Islet cells were usually analyzed on the day of isolation or occasionally at later times. 8. If analyzed after the day of isolation, they were incubated in low glucose (2.5 mM) medium for 16–48 h before being dispersed. 9. β cells under both these conditions have high autofluorescence due to increased intracellular FAD levels allowing them to be distinguished from other intraislet cells for analysis or sorting. 10. No differences were observed between islets dispersed on the day of isolation or subsequently. 11. All high autofluorescence islet cells stained with the monoclonal antibody A2B5 and >85% were positive for insulin by indirect immunofluorescence. 12. Pseudo-islets were made by dispersing isolated islets with trypsin, as above, and then incubating the islets undisturbed for 7 days. References 1. Nadya Lumelsky, Olivier Blondel, Pascal Laeng, Ivan Velasco, Re
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