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非限制性体干细胞（USSCs）的分离
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
非限制性体干细胞（USSCs）的分离 试剂和材料： 1. 起始培养基； 2. 扩增培养基； 3. 0.05%胰蛋白酶，含EDTA； 4. PBSA； 5. T25培养瓶； 实验方法： 1. 制备和分离脐带血来源的MNCs（CB-MNCs）； 2. 如果使用冻存的CB-MNCs，复苏的细胞可以用于培养，不需要其他分离步骤； 3. 用起始培养基按5×106 —7×106个细胞/ml浓度接种到T25的培养瓶中； 4. 将细胞放在37℃，5%CO2的条件下培养，2-4周内每周一次更换培养基和细胞因子； 5. 形成USSC集落后，在扩增培养基中扩增细胞； 6. 将细胞放在37℃，5%CO2的条件下培养； 7. 到达80%汇合后，用0.05%胰蛋白酶/EDTA消化细胞，并按1：3比例传代，在相同培养条件下继续培养；
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循环冷却水化学处理技术
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
1 冷却水处理技术 循环水系统中所遇到的腐蚀、结垢、生物污垢这几个问题，采用水处理技术是能够解决的。也只有采用冷却水处理技术，冷却水循环后的技术经济效益才能充分发挥。所谓冷却水处理技术，是指针对循环水系统的水质、设备材质、工况条件选择缓蚀剂、阻垢剂、分散剂、杀生剂正确匹配组成水处理配方。提出工艺控制条件、提供相应的清洗、预膜方案等。把这一全过程称为冷却水处理技术。其中将缓蚀剂、阻垢剂、分散剂等组成配方，确定适宜的工艺控制条件，进行循环冷却水的基础处理和正常运行处理，这是冷却水处理技术的主要内容。 冷却水处理中所用的缓蚀剂、阻垢剂、分散剂、杀生剂等化学品可统称之为水质稳定剂。这些化学品的研究开发、生产是循环水处理的基础。没有先进的、性能优良、价位适中的水质稳定剂就根本谈不上现代的循环水处理。因此，这些水质稳定剂的研究和生产一直是水处理界关注的热点。 2 中国冷却水处理技术及水质稳定剂的发展 中国冷却水处理技术的发展，是随着大型化肥石油、化工、冶金装置的引进而发展起来的，起步较晚，比发达国家晚30～40年，但坚持自己的发展 道路，瞄准国外的发展趋势，结合国情进行研究和应用，因此起点高、发展快，到目前为止，中国已经开发成功：①传统磷酸盐配方；② 磷系复合配方；③ 磷系碱性水处理配方；④ 全有机配方；⑤ 钼酸盐水处理配方；⑥硅酸盐水处理配方。其中磷系碱性水处理配方和全有机配方是当前国内处理技术的主体。这些水处理技术在实际工业应用中达到较高的水平。设备的腐蚀率、污垢热阻这两个主要技术指标均可达到国际先进水平，已在许多大型引进装置中实现水处理技术和药剂国产化。 水质稳定剂的发展是随着现代冷却水处理技术的发展而发展的。发展历程，大体上讲是70年代打基础，80年代大发展，90年代上水平这样一个发展趋势。目前国内有水质稳定剂生产厂家不低于200家，主要技术依托于天津化工研究院和南京化工大学。但具有一定规模和自身开发实
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液体闪烁计数器与分光光度计测定蛋白含量的比较研究
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
液体闪烁计数器与分光光度计测定蛋白含量的比较研究 蛋白质含量的比色测定，是在分光光度计上完成的。1983年Noble用液体闪烁计数器(液闪仪)测定蛋白含量。l988年强美玉做了分光光度计测定浓度范围内的研究。我们用Lowry和Bradford蛋白含量测定法，对液闪仪和分光光度计测定蛋白浓度范围，准确度，重复性和稳定性进行了比较研究。并用液闪仪测定了102份人精浆蛋白和31份人血清蛋白样品。 1 材料和方法 1．1仪器FJ-2107型液闪仪(西安二六二厂)260型可见紫外分光光度计(日本岛津)。 1．2密封放射源在直径0．3cm，长3cm的玻管内加入H-雌二醇和甲苯闪烁液，烧封管口。平均放射计数为60016±120／6秒(n=15)。 1．3蛋白测量装置将3ml显色后的蛋白测定液置于测量套瓶中，放射源微管竖插于被测液中，测量套瓶放人闪烁瓶内。 1．4液闪仪测定蛋白含量的原理放射源产生的光子，被有色的蛋白测定液淬灭，淬灭程度与蛋白浓度成比例。制备放射计数对蛋白浓度的标准曲线，即可进行蛋白定量测定。 2 结果 2．1标准曲线Lowry(蓝色)和Brdaford(棕色)测定液，低浓度时，液闳仪和分光光度计测定标准曲线均为直线。随着蛋白浓度的增加，标准曲线弯曲，改用放射计数对蛋白浓度的对数作图，标准曲线呈直线。放射计数与蛋白浓度，蓝色测定液成正比，棕色测定液成反比。 2．2液闪仪与分光光度计测定蛋白浓度范围比较。液闪仪比分光光度计测定蛋白浓度范围宽12倍(蓝色)和60倍(棕色)。见表1。 2．3液闪仪与分光光度计测定准确度比较标准蛋白液显色后用液闪仪和分光光度计测1o次，其均值与标准蛋白浓度比较。见表2。 2．4液闪仪与分光光度计测定重复性比较低和高浓度蛋白液显色后用液闪仪和分光光度计测定，以批内和批间变异系数(CV)比较。见表3。 2．5液闲仪与分光光度计测定稳定性比较标准蛋白液显色后于不同时间内用液闪仪和分光光度计测定放射计数和吸光度。低浓度，8小时内无显著性差异(>0．05)；高浓度24小时内无显著性差异(P>0．
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利用液体闪烁计数器测量瞬时化学发光强度
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
摘要：通过加工一个带有注射孔的测量室顶部铅盖，蒋自动液体闪烁计数器改装成一种发光分析仪改装后的液体闪烁计数器既能测量发光强度，又能测量射线，且测量目射线性能不变。发光强度的测量性能与专用发光分析仪具有良好的相关性，且灵敏度高于专用发光分析仪。 关键词：发光分析仪；液体闪烁计数器 目前，发光分析技术在生物医学等领域得到越来越广泛的应用，各种专用发光分析仪也相继问世，但价格较贵。用于口射线测量的液体闪烁计数器，实际上是测量射线作用下闪烁体的发光，这种发光是一种稳定的，而且是多光子的事件]。生物化学发光一般为瞬时的，且为单光子事件，它的发光值在反应物相互接触的瞬时达到最大，然后迅速下降。因此，直接利用液体闪烁计数器测量生物化学发光受到了限制。 我们对液体闪烁计数器的测量室进行了改装．改装的液体闪烁计数器能与专用的发光分析仪一样方便地加样，解决了液体闪烁计数器不能及时加样及时测量的问题，进而用于生物化学发光的测量。 1 材料和方法 将FJ一2115自动液体闪烁计数器(西安262厂生产)顶盖打开，移去测量室顶都铅盖，装上专门加工的带有注射小孔的铅盖，并加用黑色橡皮垫圈，以避免光线透入。选择相加测量方式，利用荧光素酶ATP发光体系对改装的装置进行测试：①用NaOH一甘氨酸缓冲液将荧光素酶(中科院上海植物生理研究所)配制成3．5mg／ml的浓度②将ATP标准(德国B．M公司)用Tris—HC1缓冲液稀释成1×10 -8mol／L，l×10 mol／I，……1×10 -11mol／L的标准系列浓度。③分别取各标准液200uL加入发光管中。④将发光管送人测量室后．从注射孔注入800 uL荧光素酶溶液，测6s的发光值N。 2结果 2．1发光测量 将各标准液的6s发光值Ni减去本底值No，并取对数得：Yi=lg(Ni-No)，将浓度c取对数得：Xi=lgCi，以Yi为纵坐标，Xi为横坐标作图(图1)。 FJ一2115的测量结果与LKB一1251(瑞典LKB公司生产的发光分析仪)的测量结果具有良好的相关性(r=098)，且FJ一2115的灵敏度略高于LKB12
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液闪测量方式及影响因素评述
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
液闪测量技术是指将放射源置于某种闪烁液中，通过闪烁剂将放射能转变为光能，再利用对光特别敏感的光电倍增管将之转变为电脉冲，从而分析射线的能量和数量的测量方法。该方法目前已广泛用于物质的吸收、分布、排泄、代谢、放免分析、受体的确定、生物大分子物质结构和功能的关系、基因工程等方面。随着液闪技术的发展，计数器的更新换代，数据处理的自动化程度的提高，新的液闪剂的使用，溶剂、闪烁剂的选择已不再是影响液闪测量的主要因素，而测量方式的选择及样品制备则成为造成误差的主要因素。本文旨在阐明液闪测量技术的测量方式及其影响因素。液闪测量可分为匀相测量和非匀相测量两种方式，其中非匀相测量包括乳状、悬浮颗粒、固相测量法。 1匀相测量 匀相测量是指样品在闪烁液中以真溶液形式存在的测量方式。 脂溶性物质可直接溶于闪烁液，甚至用配好的闪烁液提取形成真溶液而进行测量，此测量方式效率高，费用低，但样品容量小。水溶性样品有两种情况：一种是若样品含量不多，可用水溶性或脂溶性溶液提取，溶解后直接加入闪烁液测量，闪烁液的配方视样品水溶液的体积大小进行选择。水溶性样品的另一种情况是含固体量多或较难溶解，直接加入闪烁液可导致分相或沉淀。虽有些杂质形成的沉淀基本上不影响探测效率，但多数情况分相或沉淀会使探测效率降低，重演性变差。若仍欲用匀相测量法，可采取一些措施，改变样品的化学结构，如加入一些特殊的溶剂等，例如二甲砜一乙醇一甲苯(1：4：5)配制的闪烁液可溶解许多化学结构不同的物质，包括多肽类激素、糖类及许多药物，并可容纳相当多的血浆。 匀相测量注意以下几个问题：①如果样品有杂质色素，**不用一般吸附法脱色，因为有些实验中放射性样品的量很少，例如示踪实验，样品有可能被吸附而导致严重误差，为了避免上述误差，比较常用的有H，O'或过氧化苯甲酰脱色法，但应用这些脱色法，有时会导致化学发光，影响测量结果，应予注意。②示踪实验因其前身物的比放射性
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液闪测量技术在中医药研究中的应用及前景展望
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
液闪测量拄木是一种利用液体闪烁计数嚣进行体外放射性测量的技木．最有利于探测离体样品中3H、14C等发射的穿透力租弱的软β射线。具有灵敏度高、特异性强等优点。这一技木的应用使中医药的研究更加深^，并已成为沟通传统医学与现代医学的渠道，为中酉医结合的研究作出了很大的贡献。迄今，该技木已应用于中医药研究的各个领域，现将有关资料综述于下： 1中草药前研究中的应用 在已建立的40多种免疫检测中草药有效成分的方法中，放射免疫分析占70％以上．由于多采用H标记。因而液闪测量技术就显得尤为重要。如青蒿素青蒿罱检测方法的建立国外有学者应用该技术建立了测定钙质生成植物中的总VD衍生物的方法．等等我国中草药资源丰富，寻找新的活性成分是中药研究的一项艰巨任务。 近年来液闪测量技术在中药药理研究中的应用更加广泛。它不仅可以用来测定生药及其在人体中的有敢成分，以及用药后人体各微量生物活性物质含量变化，而且为中药药理研究深到分子水平做出了很大贡献。 在中药有效成份的研究中，太枣、茵胨、丹参等中药中环核昔酸的含量，哈士蟆油中的睾酮、孕酮、雌二醇等甾体激素等均可用液闪进行测量。周文浴等人以3H小檗碱3H．诛片为示踪剂．观察大鼠外敷中药消炎是的透皮吸收，用液体闲辑计数器检测用药大鼠血}瘦脏器组织、粪、尿的艘射性，结果表明：3H冰片的可能透皮量不足外敷总量的5％，外敷的3H小碱也大半留在体外；提示外敷中药是能部分透过皮肤的，但透皮量有限．且因组分不同而异。推测外敷中药对病变组织除可起部分直接作用外，可能还通过其它机制起作用。 根据放射免疫原理．应用液闽测量拄术可测定体外样本中血栓素．前列腺素、环磷酸腺苷、宴质酮等微量物质含量。观察用药后这些微量物质含量变化是阐明中药作用机理及指导临床用药的重要依据。邓常青等通过检测兔脑缺血再灌注损伤模型脑血栓紊TX＆6-酮前列腺素及血浆和毡环磷酸晾苷的含量，对组成益气活血方的黄芪和活血方的作用机理进行了比
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六种清洗液对γ计数器试管架的清洗效果对比
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
放射免疫分析检测环节复杂，影响因素很多，质量控制尤为重要。在影响检测结果的各环节中，试管架被放射性核素污染是极容易被忽略，但对结果影响很大的最基础的一环，所以经常清洗试管架以消除高本底对结果的影响非常重要。本次试验特选用几种常见的清洗液清洗被污染的试管架，以选出既高效又经济简便的清洗液。 材料与方法 1材料 1．1 6种常见液体 酒精、洗洁精、84消毒液、碱水、消毒片、水。酒精为75％医用酒精，由我院药剂科配制；洗洁精为加佳牌无磷洗洁精，南京佳和Et化有限公司产品；84消毒液，南京江南消毒厂有限公司产品；碱水为10克碱粉末加水100mL配制；爱尔施强氯杀星消毒片，上海利康消毒高科技有限公司产品，用1片加水100mL配制而成浓度为5000ppm的液体；水为一般净化水。 1．2仪器 合肥众成机电有限公司生产的96型计数器及配套试管架。 1．3 125 I标记的CA50抗体10mL碘标记抗体加150mL水稀释。 1．4医用棉签 2方法与步骤 准备3只试管架，每架16孔，共计48孔，并为各孔依次编号。检测基础本底确保基础本底脉冲
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化学发光免疫分析及其进展
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
摘要： 化学发光免疫分析是将化学发光与免疫分析方法相结合，综合了化学发光的高灵敏度和免疫分析的高选择性，被广泛应用到临床检测和药物分析中。随着新的发光试剂，新固相材料的研制以及新标记技术应用，化学发光免疫分析方法的灵敏度，重现性将大大提高。 在分析化学中，化学发光是当基态分子吸收化学反应中释放的能量跃迁到激发态，处于激发态的分子以光辐射的形式返回到基态时产生的光。基于化学发光强度和被测物含量之间的关系建立的分析方法叫化学发光分析法，化学发光与高效液相色谱、毛细管电泳、免疫分析等技术的结合，具有灵敏度高，线性范围宽，仪器简单、操作简便等特点，已广泛地应用于环境、临床、食品和工业分析中。将化学发光与免疫分析方法相结合，综合了化学发光的高灵敏度和免疫分析的高选择性，近年来，成为研究的热点。 1化学发光免疫分析的分类 化学发光免疫分析根据发光体系应用于免疫分析中的方式不同可分为：直接标记发光物质的免疫分析、酶催化化学发光免疫分析和电化学发光免疫分析。 1．1直接标记发光物质的免疫分析 该方法是用化学发光剂直接标记抗原或抗体。常用于标记的化学发光物质有吖啶酯类化合物，是有效的发光标记物，其通过起动发光试剂的作用而发光，强烈的直接发光在1S内完成，为快速的闪烁发光。吖啶酯作为标记物用于免疫分析，其化学反应简单、快速、无需催化剂；检测小分子抗原采用竞争法，大分子抗原则采用夹心法，非特异性结合少，本底低；与大分子的结合不会减小所产生的光量，从而增加灵敏度。张皓等采用直接化学发光技术进行的全自动双抗夹心免疫测定方法，对130例患者测定血清B—HCG含量法。用化学发光免疫分析法检测．HCG，操作简便、敏感度高、特异性强，优于一般的酶联免疫法和放射免疫法，适合于临床实验室推广使用。 1．2酶催化化学发光免疫分析 从标记免疫分析角度，酶催化化学发光免疫分析应属酶免疫分析，只是酶反应的底物是发光剂，操作步骤与酶免疫
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ATP发光技术快速检测食品中菌落总数
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
【摘要】 目的：探讨ATP发光技术快速检测菌落总数的可行性。方法比较ATP生物发光值与平板计数法对细菌总数进行检测。 结果：检测结果相关性研究分析表明，两者在一定范围内具有显著相关性。 结论：ATP生物发光法操作简便，应用范围广，可应用于对食品中菌落总数的快速检测。 菌落总数是食品微生物国标检测中的一个重要指标，主要是作为判定食品被细菌污染程度的标志。在国家颁发的食品卫生标准和进口贸易中许多食品的卫生指标都有菌落总数的限量规定。常规的菌落总数检验方法(平板计数法)存在操作繁琐、测试周期较长及检测结果在实际生产的质量控制中意义不大等问题。ATP生物发光测定法是快速检测微生物的方法之一。本文对ATP生物发光测定法与平板计数法的相关性进行了研究分析，并对ATP生物发光测定法进行卫生学检测的可行性和可操作性进行探讨。 1材料与方法 1．1仪器与试剂 ATP生物发光快速检测系统配套仪器及试剂(沈阳中科靓马生物工程有限公司生产)，包括：滨松9505微量光度计、专用比色杯、发光反应试剂(LLR)、细菌细胞ATP释放试剂(XRA)。旋涡混合器。稀释用磷酸盐缓冲液(PBS)9ml试管分装10管(121℃高温高压灭菌)。固体营养琼脂培养基(121℃高温高压灭菌)。PE手套。大肠杆菌(ATCC25922—3，购于中国药品与生物制品检定所)。恒温摇床。台式离心机。 1．2方法 1．2．1实验准备 计数前1天，用接种环刮取大肠杆菌斜面培养物一环接种到装有40mlLB的100ml三角瓶内，37℃振荡培养过夜。取上述培养物离心(10000r／min，1min)倒去上清液，沉淀用等体积PBS洗涤1次，用同样体积PBS悬浮，此即培养物原液。稀释：(假定培养物浓度约为1×106 cell／m1)用PBS将培养物做10倍递增稀释。 1．2．2平板计数 确定3个用于平皿计数的稀释梯度，保证至少1个梯度的计数在30～300范围内，吸取1ml加人到玻璃灭菌空培养皿中，每个梯度平行倒两个平板，同时做空白对照。于37℃温箱培养48h计数。选择菌落计数在30～300范围内均匀分散的释梯度
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介绍一种改良的冷却装置的垂直板电泳槽
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
本文介绍一种改良的带冷却装置的浸入式垂直板电泳槽。用不会变形的有机玻璃制作固定架及控制凝胶厚度的隔条，以代替市售的可压缩的U形橡胶套。以螺丝固定玻璃板。用医用硅胶管密封以完全分隔正负极电泳缓冲液。经试用于蛋白质及核酸电泳，效果甚佳。 电泳是生物化学和分子生物学实验分析的最常用手段之一，电泳时常要求在某一恒定温度中进行，虽然有各种性能不同的带恒温冷却装置的进口电泳槽，但价格昂贵，每台数千至万元以上。国产的垂直板电泳槽虽亦有带冷却装置的，但制备的胶板的厚度一般只有三种，不能随意调整，且常常因为梳的厚度与橡胶套隔片的厚度不一致而致上样孔内有残留凝胶，影响上样及电泳效果。而且，橡胶隔片的厚度受固定两半槽时旋转螺丝松紧程度的影响。为此，在工作中我们参考多种现有垂直电泳槽的样式，自行设计了一种浸入式垂直板电泳槽，简单、价廉而效果良好。 1 电泳槽的制作 电泳槽的式样见附图。整个槽由有机玻璃粘合而成，外壳为一个矩形槽，大小为90×150×230cm(可根据需要适当缩小)，中间设置一个固定架，用以固定玻璃板并分隔电泳槽为正负极。固定架的具体构造是：在短形槽的左右两侧壁中部的全长上，各粘合两片宽20mm、长230arm、厚5mm以上的有机玻璃片，两片相距20mm。前面两片各钻三个有罗纹的孔，后面两片的底部由一高15mm的有机玻璃长条相连，成一整块，呈u形，且与槽底牯合，不漏液体。 2 安装及灌胶 安装玻琉板灌胶时，把电泳槽平卧，固定架上有孔的有机玻璃片朝上，u形架在下。在U形架的上面放一医用硅胶管，亦使变成u形，其上放一210×150mm大小的玻璃板，板的底部伸入至电泳槽底部，板上两侧放两片隔片，各10-15×230mm，厚度随电泳时所需凝胶的厚度而定。隔条上再放一块玻璃板，大小225×150mm，板的底部离电泳槽底部3mm左右。最后，在固定架的罗纹孔上放上塑料螺丝，并逐渐旋紧，此时，硅胶管逐渐被压扁、压紧，两玻璃板亦被固定，整个电泳槽被分成前后两个槽：前槽为正极
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微型琼脂糖凝胶电泳槽的简易制作
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
摘要以有机玻璃板等材料，制作出成奉低廉的微型琼脂糖凝胶电泳槽。经试用，具有操作简便、使用安全、节省试剂等优点，能满足教学与科研的需要。 琼脂糖凝胶电泳是核酸研究工作中必不可少的工具，在生物化学和分子生物学教学和科研中具有重要作用。琼脂糖凝胶电泳槽的制作原理虽简单，但由于琼脂糖凝胶电泳槽梳子的制作工艺较复杂，且铂金电极价格较高，使目前市场上商品化的琼脂糖凝胶电泳槽价格较高。 本文作者对琼脂糖凝胶电泳技术进行了研究，完成了微型琼脂糖凝胶电泳槽的改进制作。制作出的琼脂糖凝胶电泳槽具有成本低、检测迅速、使用安全、节省试剂、电泳谱带清晰等优点，能满足生物化学和分子生物学教学实验的需要，并已在核酸酶切研究中得到进一步应用。 1 制作方法 琼脂糖凝胶电泳槽的制作分为4部分：电泳槽的制作；制胶槽的制作；梳子的制作和盖子的制作。制胶槽和梳子在数量和规格上可以根据实际工作需要适量增减，以便于实验操作。 1．1 电泳槽的制作 选取透明的有机玻璃盒或塑料盒，大小以120mm×lO0mm×50mm左右为佳。在盒子两端同侧各打一孔装上电极插孔，并在两端部各用胶布固定一根细铜丝(胶布只在盒子的角部固定铜丝)，即制成琼脂糖凝胶电泳槽。见图1。 1．2 制胶槽的制作 截取2 3一厚的透明有机玻璃板，在电热丝上加热，折成“u”形，即成制胶槽。制胶槽两侧板高度以20—25mm为宜。间距应略小于电泳槽；制胶槽的长度约为70—90mm 。见图1。 1、3 盏子的制作 用有机玻璃做一“L 形上盖，并在电极插孔的相应位置上打孔，安装电极插头，并将插头固定于上盖的倒板上。见图2。 1．4 梳子的制作 选取厚度适宜(1-2m )的透明有机玻璃板，截成(3-5)mm×30mm的窄条，用于梳齿的制作。窄条的边要光滑。以使制出的加样孔比较整齐。取两块lO0mm×15mm有机玻璃板，分别折成“L’，形(长lOOmm，一侧宽5mm，另一侧宽10mm)。将两块折成“L”形的有机玻璃板5mm宽一侧相对，横跨于制胶槽上，在制胶槽的底面垫上1—1．5zr~m厚
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活体生物光学分子成像与分析平台介绍
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
分子影像学是医学影像技术和分子生物学、化学、物理学、放射医学、核医学以及计算机科学相结合的一门新的学科。本实验室主要研究光学分子影像。与核素等成像模态相比，其设备成本大大降低。通过体内特定分子为成像靶点与特殊成像探针结合，利用Optical和micro-CT等几种成像模态 对小动物进行在体、无损、动态成像，在分子和细胞水平上检测小动物体内感兴趣区域的生理病理活动，从而定量地获取小动物体内的生物相关信息。 成像算法研究 在光学分子影像中，对病灶等感兴趣区域的成像是通过各种重建算法来实现。通过光学成像系统所获取的生物体表光学信号分布，结合CT系统获取并采用相应算法重见得到该生物体的解剖结构，以及生物体各个组织特异的光学信息分布，对活体小动物体内的感兴趣区域进行成像。由于光学成像固有的病态性(ill-posedness)，其重建算法仍然是该领域的国际学术热点与难点。本实验室针对小动物成像实验中的一系列问题，发展了多种重建算法：多水平自适应有限元方法，无网格方法，基于贝叶斯的方法以及基于广义图割的方法等等，在成像精度、深度和速度等方面有了不同程度地提高，从而推动着光学成像在实际中的应用。 以下几幅图展示了一组自发光光源重建的过程。该光源在肝脏以下，距离体表约8mm。最终准确定位该光源，误差小于0.5mm。 全角度自发光信号与小鼠二维白光配准图 小鼠三维表面光强映射图 光源重建结果图 软件平台构建 本实验室与西安电子科技大学、美国弗吉尼亚理工大学光学分子影像实验室联合开发了。MOSE是基于蒙特卡洛方法来仿真光子在生物组织中以及自由空间中传播的平台，通过仿真可以预测小动物体体内和表面的光强信号分布。 针对该方法的计算十分耗时，最新版MOSE大大提高了仿真速度。同时它采用了面向对象设计方法，从而使面向用户的接口简单而易于理解，并使用Qt制作软件界面。目前已向教育和研究机构免费提供，可在网站
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朗伯-比尔定律不成立的因素
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
朗伯-比尔定律不成立的因素 定量测试定律俗称朗伯-比尔定律，其成立条件是待测物为均一的稀溶液、气体等，无溶质、溶剂及悬浊物引起的散射；入射光为单色平行光。那么引起朗伯-比尔定律不成立的也基本是上述原因所致。 1、高浓度引起的朗伯-比尔定律的不成立 当吸收物质浓度很高时，吸收质点距离很近，会互相影响对方的电荷分布，使吸收质点对某一特定波长光的吸收能力改变，从而引起定律不成立。在有些情况下当浓度很大时，会引起折射率的变化，也会是定律不成立。同样在溶液浓度很高时，质点距离很近，会引起辐射和吸收的重叠，从而降低整体的吸收能力，使定律不成立。 2、非单色光引起朗伯-比尔定律的不成立 就目前国内外分光光度计制造而言，不可能制造出能够分出单色光的光度计，由单色器分光后的光并非纯粹的锐线光，而是有一定宽度的光谱。光经过样品后，非特定波长的光被吸收的很少，进入检测器，由光信号转为电信号，得出数据，如果仪器的光谱带宽过大会使定律不成立。 3、杂散光过大引起朗伯-比尔定律的不成立 在测试低浓度样品时，看不出杂光对结果的影响，但是当测试高浓度样品时，杂光对测试结果的影响就很大了。例如：当测试有一定浓度的样品时，其透过率为：3%，若仪器的杂散光是：0.5%，无疑这对数据结果影响是很大的。所以杂散光过大会使定律不成立。 4、悬浊液和混浊液使朗伯-比尔定律不成立 因为质点在测试容器中会不停的运动，因为悬浊液或混浊液的质点体积比较大，会直接影响测试结果的不稳定，当质点运动到光射的位置会使透过率变小、吸光度变大，无法读出一个准确的值，自然使定律不成立。 5、非平行光使定律不成立 目前国内外仪器所采用的光源都是发散式的，需经过透镜或凹面镜聚焦，绝大部分仪器经过样品池时都不是平行的，这样会引起光的复杂变化，使读数不准确，定律不成立。 其它还有很多因素会使定律不成立，如：胶态溶液、光度精度和散射的影响等，在此仅提供以上主要因素引起的定律不
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蛋白质组技术的研究进展
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
大规模基因组测序计划的实施已改变生命科学的重心，在相当短的时期内，一些原核生物和某些低等真核生物的基因组序列已被测定. 1995年，流感嗜血杆菌基因组序列首次被破译，在此后不到两年的时间，近50个细菌的基因组序列已被完成. 然而，这仅仅是理解有机物功能的一个起点. 在基因组时代，许多DNA序列信息仅提供相关基因组的结构和功能. 然而，对基因产物（mRNA和蛋白质）的理解是理解细胞生物学的一个不可缺少的部分. DNA序列信息不能预测：1）基因表达产物是否或何时被翻译；2）基因产物的相应含量；3）翻译后修饰的程度；4）基因剔除或过表达的影响；5）遗留的小基因或7.0）. 如果聚焦达到平衡状态，碱性蛋白会离开凝胶基质而丢失. 因此，在等电区域的迁移须在平衡状态之前完成，但很难控制. 3）IPG-DALT发展于80年代早期. 由于固相pH梯度（Immobilized pH gradient, IPG）的出现解决了pH梯度不稳的问题. IPG通过immobiline共价偶联于丙烯酰胺产生固定的pH梯度，克服了IEF的缺点，从而达到高度的重复性. 目前可以精确制作线性、渐进性和S型曲线，范围或宽或窄的pH梯度. 新的酸性pH 3～5或碱性pH 6～11的IPG凝胶梯度联合商品化的pH 4～7的梯度可对蛋白质形成蛋白质组重叠群（proteomic contigs）从而有效分离. 分离后的斑点检测（spot detection）亦很重要. 所采用的检测策略和分离后所采用的方法的相互作用是很重要的. 此外，还需考虑反应的线性、饱和阈/动态范围、敏感性、对细胞蛋白群的全体定量分析的适应性、可行性. 目前，没有一种蛋白染色覆盖广泛的浓度和PI及分离后分析技术. 银染已成为一种检测2-DE的流行方法，可检测少到2～5ng的蛋白，因此较考马斯亮蓝R-250敏感. 多数糖蛋白不能被考马斯亮蓝染色，一些有机染料不适于PVDF膜. 放射性标记不依赖其代谢的活性，并仅适于对合成的蛋白质检测. 另有一种改良的2-DE（差异凝胶电泳），即应用两种不同的染料荧光标记两个样品，使在同一凝胶上电泳后的凝胶图象为两
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活细胞成像技术--活细胞工作站介绍
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
我们知道以往的固定组织揭示了非常多的自然秘密，给了我们很大的启示，现在的科学研究则向在最真实的条件下观察自然发展。纵观显微镜的历史，直到15年前，科学家主要还是处理死细胞。现在，活细胞的应用已经非常普及了。 加拿大McGill大学成像实验室主任Claire M.Brown表示，要达到这个研究目的，我们非常需要一个不损坏细胞的封闭环境、且具有比较理想的成像条件。这一条件尤其对于进行动态、三维成像的多标记样品来说尤其重要。让人高兴的是，近年来在光学设计、多灵敏检测器、优选探针和先进软件方面的改善，使得这一切成为可能。今天的活细胞工作站，不仅仅限于观察，目前的趋势已经从结构或细胞器的分析，转向了功能的相互影响观察研究。 现在，科学家可以便利的购买到活组织应用的整合新设备，而不用将系统简单的拼凑在一起。如，Zeiss、Olympus和Nikon公司都提供适用于活细胞的倒置研究型显微镜。这些设备可以手动，也可以完全自动化。其他公司也将活细胞成像与高分辨率有机的结合在一起。Leica公司市场部经理表示：“Leica TCSSP5宽带激光共聚焦显微镜将活细胞功能成像与单一的结构共聚焦系统中的最高分辨率结构成像结合在一起，实现了两者的实时结合。”Leica的全内发射荧光显微镜（AMTIRF）对分子和膜运输之间的囊泡转运、相互作用成像尤其有用。在照明波动中，这种设备也能控制照明的深度以及传播方向。Nelson认为，计算机对这些变量的完全控制，确保了精确的、可重复的成像效果。 Nikon的TE2000倒置显微镜系列，也为活细胞成像提供了便利。共聚焦和外荧光成像技术相结合，同时为观察样品提供帮助。此外，串联显微镜包括降噪器，这种特殊的装置可以吸收掉光路上的杂光，将信噪比（S/N）提升五倍以上，使荧光影像观察、撷取更为清晰。微速摄影成像正逐渐变得重要起来。Olympus和其他几家公司提供了零点漂移聚焦补偿系统设备，确保了超时获得的成像效果仍然色彩鲜明。 改善细胞环境 当成像时间增加时，细胞需
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