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2009生命科学与医学新技术系列讲座PDF资料下载
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
由中国生物器材网主办的“2009生命科学与医学新技术系列讲座”于2009年12月1日-2日在上海第二军医大学科技馆成功举办。 本次讲座由12家业内知名公司积极参与,其中包括:博奥、Roche、康成、Bio-Rad、ABI、贝克曼库尔特、东胜创新、Agilent、Gene、Leica、Olympus、Zeiss等。各公司的科学家与产品专家就“生物芯片、基因表达分析、细胞显微成像、流式细胞成像、样品自动化处理以及质谱技术”等领域的最新技术做了精彩的演讲,引起在场专家学者的热烈反响。应广大师生的强烈要求,现将各公司讲座PDF内容公布供下载学习。 友情提示: 1、请在注册“个人用户”后再下载讲座PDF资料。点击此处立即注册 2、由于部分文件较大,请耐心等待下载完成。 相关新闻链接:
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蛋白质的浓缩技术方法
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
(一)浓缩胶浓缩法 浓缩胶是一种高分子网状结构的有机聚合物,具有很强的吸水性能。每克干胶可吸水120ml~150ml。它能吸收低分子量的物质,如水、葡萄糖、蔗糖、无机盐等,适宜浓缩10 000分子量以上的生物大分子物质。浓缩后,蛋白质的回收率可达80%~90%。比浓缩胶应用方便,直接加入被浓缩的溶液中即可。必须注意,浓缩溶液的pH值应大于被浓缩物质的等电点,否则在浓缩胶表面产生阳离子交换,影响浓缩物质的回收率。 (二)冷冻干燥浓缩法 这是浓缩蛋白质的一种较好的办法,它既使蛋白质不易变性,又保持蛋白质中固有的成分。它是在冰冻状态下直接升华去除水分。具体做法是将蛋白液在低温下冰冻,然后移置干燥器内(干燥器内装有干燥剂,如NaOH、CaCl2和硅胶等)。密闭,迅速抽空,并维持在抽空状态。数小时后即可获得含有蛋白的干燥粉末。干燥后的蛋白质保存方便,应用时可配成任意浓度使用。也可采用冻干机进行冷冻干燥。 (三)吹干浓缩法 将蛋白溶液装入透析袋内,放在电风扇下吹。此法简单,但速度慢,且温度不能过高,**不要超过15℃。 (四)超滤膜浓缩法 此法是利用微孔纤维素膜通过高压将水分滤出,而蛋白质存留于膜上达到浓缩目的。有两种方法进行浓缩:一种是用醋酸纤维素膜装入高压过滤器内,在不断搅拌之下过滤;另一种是将蛋白液装入透析袋内置于真空干燥器的通风口上,负压抽气,而使袋内液体渗出。 (五)凝胶浓缩法 选用孔径较小的凝胶,如SephadexG25或G50,将凝胶直接加入蛋白溶液中。根据干胶的吸水量和蛋白液需浓缩的倍数而称取所需的干胶量。放入冰箱内,凝胶粒子吸水后,通过离心除去。 (六)透析袋浓缩法 利用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用最广的一种。将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋(无透析袋可用玻璃纸代替),结扎,把高分子(6 000-12 000)聚合物如聚乙二醇(碳蜡)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可将吸水剂配成30%-40%浓度的溶液,将装有蛋白液的透析袋放入即可
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Primer 引物设计原则简介
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
Primer 即,引物 概念 引物,是一小段单链或,作为的起始点,在核酸合成反应时,作为每个多核苷酸链进行延伸的出发点而起作用的多核苷酸链,在引物的3′-OH上,核苷酸以二酯链形式进行合成,因此引物的3′-OH,必须是游离的。 类型 存在有自然中生物的DNA复制引物(RNA引物)和聚合酶链式反应()中人工合成的引物(通常为DNA引物)。一般所说引物,指DNA引物,以下简称引物。 引物设计原则 引物是人工合成的两段寡核苷酸序列,一个引物与感兴趣区域一端的一条DNA模板链互补,另一个引物与感兴趣区域另一端的另一条DNA模板链互补。 在PCR(聚合酶链式反应)技术中,已知一段目的基因的核苷酸序列,根据这一序列合成引物,利用PCR扩增技术,目的基因DNA受热变性后解链为单链,引物与单链相应互补序列结合,然后在DNA聚合酶作用下进行延伸,如此重复循环,延伸后得到的产物同样可以和引物结合。 PCR引物设计的目的是找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列。如前述,引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。对引物的设计不可能有一种包罗万象的规则确保PCR的成功,但遵循某些原则,则有助于引物的设计。 1.引物**在模板cDNA的保守区内设计。 DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因,通过序列分析软件(比如DNAman)比对(Alignment),各基因相同的序列就是该基因的保守区。 2.引物长度一般在15~30碱基之间。 引物长度(primer length)常用的是18-27 bp,但不应大于38,因为过长会导致其延伸温度大于74℃,不适于Taq DNA 聚合酶进行反应。 3.引物GC含量在40%~60%之间,Tm值**接近72℃。 GC含量(composition)过高或过低都不利于引发反应。上下游引物的GC含量不能相差太大。另外,上下游引物的Tm值(melting temperature)是寡核苷酸的解链温度,即在一定盐浓度条件下,50%寡核苷酸双链解链的温
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循环肿瘤细胞的检测-肿瘤患者的福音
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
循环肿瘤细胞是从机体实体肿瘤上脱落,然后进入血液循环的一种特异性细胞。通过检测循环肿瘤细胞的数量可轻而易举的评估疾病的进程和**效果。 Cell Search系统能自动检测和计数循环肿瘤细胞,它成为了新一类的诊断工具的标准。系统的特异性、灵敏度和可重复性确保了它能在首次**周期对循环肿瘤细胞进行系列检测,以便于评估疾病进展。 循环肿瘤细胞的检测(Cell Search)采用了与细微铁颗粒结合的抗体,又名免疫磁珠。这些免疫磁珠复合物特异性的接合循环肿瘤细胞,其强大的磁场把循环肿瘤细胞“牵引”出血液样本样,再用额外的生物分子和化学品染色后,循环肿瘤细胞就能被明确鉴定。 与现有的标准**相比较,Cell Search测试可以在传统成像(如CT扫描)前运用,而且避免了其他血液实验如血清肿瘤标志物检测那样常见的变异。 美国和欧洲的55个临床中心对该检测方法进行了深入细致的研究与验证,招募了430名即将接受第一或二线**的转移性结直肠癌患者。数据显示,基线值少于3个循环肿瘤细胞患者的生存率明显优于多于3个循环肿瘤细胞患者,该检测结果与临床转移性乳腺癌患者的发病情况高度吻合。数据还显示把循环肿瘤细胞分析和放射学检查结合起来,能最准确的评估预后。 CellSearch®循环肿瘤细胞(CTC)检测是一种简单的血液检测,可随时捕捉并评估循环肿瘤细胞以确定转移性乳腺癌、结直肠或前列腺癌患者的预后。检测可提供客观的肿瘤定量、实时读数信息,因此肿瘤学家可为患者提供最佳**方案。
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血浆胶体渗透压(COP)临床意义
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
血浆胶体渗透压(COP)临床意义 使用范围:监测患者胶体渗透压,为临床医生提供诊断、预防、**毛细血管渗血、失血,引起胶体渗透压下降,导致的肺水肿,脑水肿等各种疾病。 适用者:lCU、CCU、麻醉科、肾内科、烧伤科、肿瘤科、妇产科、儿科、临床实验室、体外循环等需要监测血液或蛋白类生物制品的胶体渗透压值而为临床提供**依据的科室。 胶体渗透压(COP)的重要临床意义 血浆胶体渗透压(COP) 由血浆中的蛋白质等大分子溶质(特别是由白蛋白)所产生,它调节和控制着毛细血管内外水份的交换和平衡。例如,当血浆蛋白浓度降低时有效胶体渗透压会下降,从而导致组织水肿。因此血浆胶体渗透压的测定在肺水肿、脑水肿、妊娠高血压综合症(妊高症)等疾病的监测、诊断、**及预后判断方面成了一项不可缺少的检测指标。 总渗透压 在标准状态下,体温为37℃时,正常人血浆总渗透压约为3000sm,近似于7个大气压,其又可分成晶体渗透压和胶体渗透压(COP)两部分。前者主要包括葡萄糖、尿素、电解质等小分子物质,后者则主要指血浆蛋白等大分子,通常血浆胶体渗透压比晶体渗透压小得多,但对维持体内液体交换却更为重要。血浆胶体渗透压维持血管内、外水平衡。血浆晶体渗透压则维持细胞内外水平衡。 半透膜 有很小的微孔,对于不同物质的通过具有选择性,即允许分子量小于20,000道尔顿的物质通过,大于20,000道尔顿的物质不能通过,具有此种性质之薄膜称为半透膜,如硝化纤维等。仅用一种类型的半透膜可使测定结果更具可比性。 带半透膜的渗透压测定仪 溶液的渗透压是溶液的所谓依数线性之一,这些特性随溶解物的浓度增加而增强,其中包括沸点升高,凝固点下降和产生渗透压。血液中含有的不同物质混合浓度高,可通过凝固点下降进行简单测定(冰点测定法)。但要测定血液中大分子的蛋白质,必须用装有对大分子不通透的半透膜渗透压测定仪进行测定。 血液的胶体渗透压,有非常重要的临床意义.如: 1.如何才能知道初发状态下的肺
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血浆胶体渗透压变化对机体的影响
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
血浆胶体渗透压变化对机体的影响 血浆 随着人们对机体内环境的不断探究,更深入地发现在人体这一巨大系统中,每一个生命活动的基本单元都是相当复杂的,其中渗透压是维持内环境稳定的重要因素。现就近年来对渗透压方面特别是血浆胶体渗透压方面的研究综述如下。 1 渗透压和血浆渗透压的概念 1.1 渗透压的概念 渗透压(osmotic pressure)指的是溶液中电解质及非电解质类溶质微粒通过半透膜对水的吸引力,其大小是由溶液中溶质颗粒总数决定的,与溶液中溶质种类和颗粒大小无关[1]。 1.2 血浆渗透压(plasma osmotic pressure)的概念 血浆渗透压包括血浆晶体渗透压和血浆胶体渗透压。正常人血浆渗透压约为300mmol/L(280~320mmol/L),相当于770kPa。血浆晶体渗透压(plasma crystal osmotic pressure)由血浆中晶体物质所形成,如Na+、Cl-、葡萄糖、尿素等,Na+和Cl-占80%;血浆晶体渗透压调节细胞内外水平衡,维持红细胞正常形态。血浆胶体渗透压(plasma colloid osmotic pressure,COP)由血浆中蛋白质形成,调节血管内外水平衡,维持血容量。由于白蛋白分子量较小(约为66 000Da),数目较多(白蛋白>球蛋白>纤维蛋白原),因此成为决定血浆COP的主要因素。白蛋白是所有可溶性蛋白中唯一一种不能穿透毛细血管壁的蛋白。血浆COP的75%~80%靠白蛋白维持[2]。约为1.3mmol/L,相当于3.3kPa或25mmHg[1]。 2 血浆COP的生理作用 细胞膜是体内的一种半透膜,它将细胞内液和细胞外液隔开,K+、Na+等离子物质不易自由通过。因此,水在细胞内外的流通,就要受到盐所产生的晶体渗透压的影响。晶体渗透压对维持细胞内外水分的相对平衡起着重要作用。临床上常用晶体物质溶液来纠正某些疾病所引起的水盐失调。 毛细血管壁也是体内的一种半透膜,但它与细胞膜不同。毛细血管壁可以让低分子量物质如水、葡萄糖、尿素、氢基酸及各种离子自由透过,而不允许高分子蛋白质通过。所以,晶体渗透压对维持血液与组织间液之间
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膜片钳记录和分析技术介绍
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
膜片钳技术原理及应用 细胞是动物和人体的基本组成单元,细胞与细胞内的通信,是依靠其膜上的离子通道进行的,离子和离子通道是细胞兴奋的基础,亦即产生生物电信号的基础,生物电信号通常用电学或电子学方法进行测量。由此形成了一门细胞学科—电生理学(electrophysiology),即是用电生理的方法来记录和分析细胞产生电的大小和规律的科学。 早期的研究多使用双电极电压钳技术作细胞内电活动的记录。现代膜片钳技术是在电压钳技术的基础上发展起来的。 1976年德国马普生物物理研究所Neher和Sakmann创建了膜片钳技术(patch clamp recording technique)。这是一种以记录通过离子通道的离子电流来反映细胞膜单一的(或多个的离子通道分子活动的技术)。以后由于吉欧姆阻抗封接(gigaohm seal, 109Ω)方法的确立和几种方法的创建。这种技术点燃了细胞和分子水平的生理学研究的革命之火,它和基因克隆技术(gene cloning)并架齐驱,给生命科学研究带来了巨大的前进动力。 这一伟大的贡献,使Neher和Sakmann获得1991年度的诺贝尔生理学与医学奖。 一、膜片钳技术发展历史 1976年德国马普生物物理化学研究所Neher和Sakmann首次在青蛙肌细胞上用双电极钳制膜电位的同时,记录到ACh激活的单通道离子电流,从而产生了膜片钳技术。 1980年Sigworth等在记录电极内施加5-50 cmH2O的负压吸引,得到10-100GΩ的高阻封接(Giga-seal),大大降低了记录时的噪声实现了单根电极既钳制膜片电位又记录单通道电流的突破。 1981年Hamill和Neher等对该技术进行了改进,引进了膜片游离技术和全细胞记录技术,从而使该技术更趋完善,具有1pA的电流灵敏度、1μm的空间分辨率和10μs的时间分辨率。 1983年10月,《Single-Channel Recording》一书问世,奠定了膜片钳技术的里程碑。Sakmann 和Neher也因其杰出的工作和突出贡献,荣获1991年诺贝尔医学和生理学奖。 二:膜片钳技术原理
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蛋白质制备过程中如何保持蛋白活性?
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
蛋白质的制备是一项十分细致的工作。涉及物理学、化学和生物学的知识很广。高分子蛋白质具有一定的立体构象,相当不稳定,极易变性、变构,为得到天然状态的蛋白质,尽量采用温和的手段,如中性、低温、避免起泡等,还要注意防腐。 动物材料中的蛋白质有些可溶的形式存在于体液(如血浆、消化硫等)中,可以不必经过提取直接进行分离。蛋白质中的角蛋白、胶原及丝蛋白等不溶性蛋白质,只需要适当的溶剂洗去可溶性的伴随物,如脂类、糖类以及其他可溶性蛋白质,最后剩下的就是不溶性蛋白质。这些蛋白质经细胞破碎后,用水、稀盐酸及缓冲液等适当溶剂,将蛋白质溶解出来,再用离心法除去不溶物,即得粗提取液。 整个制备过程一般可分为5 个阶段:①材料的选择和预处理,②细胞的破碎(有时需进行细胞器的分离),③提取,④纯化(包括盐析,有机溶剂沉淀,有机溶剂提取、吸附、层析、超离心及结晶等),⑤浓缩、干燥及保存。以上5 个阶段不是要求每个方案都完整地具备,也不是每一阶段截然分开。 不论是哪一阶段使用哪一种方法,均必须在操作中保持生物大分子结构的完整性。保存活性,防止变性及降解现象的发生。因空间结构主要依靠氢键、盐键和范德华力的存在,遇酸、遇碱、高温、剧烈的机械作用及强烈的辐射等均可导致活性丧失。(以上资料来自中国生命科学论坛) 细胞破碎方法有多种,比如机械法(如组织捣碎匀浆机、玻璃匀浆器)、物理法(反复冻融法、冷热交替法、超声波法、高压破碎),化学及生物化学法(加入有机溶剂、溶解酶或裂解酶、表面活性剂)等。 组织捣碎匀浆机 玻璃匀浆器 高压细胞破碎法是一种物理破碎方法,避免了化学法和酶法等导致的化学物残留和污染等问题。超声破碎法可能出现的起泡现象在高压破碎时是不会出现的。 样品经适当预处理,再配合使用,提取到的蛋白质活性好。(参考文献:氯氟氰菊酯对德国小蠊保护酶活性的影响,中国媒介生物学及控制杂志,2009,20(4):303-30
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超净工作台原理,使用与维护
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
超净工作台原理,使用与维护 超净工作台是为实验室工作提供无菌操作环境的设施,以保护实验免受外部环境的影响,同时为外部环境提供某些程度的保护以防污染并保护操作者。 与简陋的无菌罩相比,超净台具有允许操作者自由活动,容易达到操作区的任何地方以及全性较高等优点。 (一) 原理 超净工作台的洁净环境是在特定的空间内,洁净空气(进滤空气)按设定的方向流动而形成的。以气流方向来分,现有的超净工作台可分为垂直式,由内向外式以及侧向式。从操作质量和对环境的影响来考虑,以垂直式较优越。由供气滤板提供的洁净空气以一个特定的速度下降通过操作区,在大约操作区的中间分开,由前端空气吸入孔和后吸气窗吸走,在操作区下部前后部吸入的空气混合在一起,并由鼓风机泵入后正压区,在机器的上部,30%的气体通过排气滤板从顶部排出,大约70%的气体通过供氧滤板重新进入操作区。为补充排气口排出的空气,同体积的空气通过操作口从房间空气中得到补充。这些空气绝对不会进入操作区,只是形成一个空气屏障。 (二)调试 所在的超净工作台出厂前都经过严格的测试,以保证正常的使用。但这并不是说,厂家的测试就能代替操作者使用前作必要的检验和调试。因为超净工作台所处的环境各异,只有经过适当的检验和调试,才能最大限度地发挥设备的作用。 在调试前应为机器选定一个较好的环境。将其置于一间有空气消毒设施的无菌室是**的,如果条件不具备,就应将机器安放于人员走动少、较清洁的房间中。调整各脚的高度,以保证稳妥和操作面的水平。超净工作台的供电应采用一条专门电路,以避免电路过载造成空气流速的改变。与简陋的无菌罩相比,超净台具有允许操作者自由活动,容易达到操作区的任何地方以及安 紫外线杀菌灯和照明用日光灯是超净工作台的标准配置,鼓风机提供空气流动的动力,这些部件是否正常工作是一目了然的。最困难也是最重要的是检查空气滤板及其密封性,它直接关系到机器的正常使用。
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化工分离设备技术特点
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
化工分离设备技术有以下特点: (1)化工分离技术的多样性 由于化工分离技术的应用领域十分广泛,决定了分离技术的多样性。按机理划分,大致可分成5类:①生成新相以进行分离(如蒸馏、结晶);②加入新相进行分离(如萃取、吸收);③用隔离物进行分离(如膜分离);④用固体试剂进行分离(如吸附、离子交换);⑤用外力场和梯度进行分离(如离心分离、萃取分离和电泳等),它们的特点和设计方法有所不同。 Keller于1987年总结了一些常用分离技术和应用成熟度关系图。离心分离、精馏、萃取、吸收、结晶等仍是当前应用最多的分离技术。液膜分离虽然构思巧妙,但技术上仍有局限性,仅在药物缓释等方面得到了应用。 (2)化工分离技术的复杂性 化工分离技术的重要性和多样性决定了它的复杂性。即使对于精馏、萃取这些较为成熟的技术,多组分体系大型设备的设计仍是一项困难的工作,问题是缺乏基础特性数据和大型塔器的可靠设计方法。对于高温、高压、多组分和强非理想体系,不仅平衡数据和分子扩散系数难以准确计算,就连界面张力粘度等物性数据也难以求得。 催化剂和反应萃取之类的耦合分离技术的基础特性数据更为缺乏。大型塔器设计的放大的主要难度在于塔内两相流和传质特性十分复杂,数字模型尚不完善。沿用了百余年的平衡级模型虽然简单直观,但用于多组分分离过程的缺点已显而易见。非平衡模型被称为"可能开创离心分离设备设计和模拟新纪元"优点显著,但缺乏传质系数实验数据和模型参数过多,使其工程应用存在困难。已开发出的软件功能强大,已在工程设计中得到应用,但工程经验和中试实验仍是不可缺少的。 (3)分离技术的前瞻性 随着能源、资源、环境、新材料等基础工业和高新技术的发展,分离技术面临着新的机遇和挑战。石化领域的分离过程必需进一步节能和降耗,充分利用能源和资源。生产装置大型化步伐正在加快,能耗和成本不断降低。在生物制药工程方面,随着基因工程和细胞工程的发展,生物药品得到迅速发展。利用CO2作为溶剂的
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离心机分离效果不理想的原因分析及对策
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
离心机分离效果不理想的原因分析及对策 某公司腈纶厂回收车间现有离心机两台,均为卧式螺旋卸料沉降离心机,其中一台是1998年开工时随整套设备由日本引进的,另一台于2001年5月由日本进口,均为日本TANABE公司生产,主要技术依靠西德 FIoffwegwerk公司的生产技术。 回收车间在整个腈纶厂的主要作用是对硫氰酸钠系统中进行除杂、提浓,最后将浓度达56%的硫氰酸钠溶液送往聚合车间以供配制纺丝原液。在整个腈纶装置的物料循环中,硫酸钠和硫氰酸钠一起在其中流转,近90%的硫酸钠在结晶分离这一步实现与硫氰酸钠的分离,硫酸钠的平衡都要靠离心机的分离作用来实现,所以在整个回收装置中,离心机起着至关重要的作用,就如同人的肾脏一样,排除杂质,保证血液的清洁流转,离心机的分离效果好坏,直接影响着全车间甚至全厂的平稳生产和长周期运行。 硫酸钠在结晶工序中进行分离的原理是这样的:因为硫酸钠在硫氰酸钠溶液中溶解度很低,易生成晶体,故将提浓后的硫氰酸钠液经过沉降槽停留沉降,使硫酸钠晶粒在沉降槽底部逐渐长大(硫酸钠含量约为13%~15%),离心机的作用就是将底部溶液中的硫酸钠晶体分离出去(其中仅有一小部分被输送到蒸发车间做晶种),分离出的固相经溶解罐溶解,送入污水处理工序由树脂进行置换并吸附其中的硫氰酸钠,废液外排。若离心机的分离效果不好,固相分离物中硫氰酸钠含量过高,超出污水树脂的吸附能力,并且环保要求外排污水中硫氰酸钠含量不得大于200 ppm,车间不得不将含高浓度硫酸钠的硫氰酸钠倒入系统重新提浓回收,久而久之,硫酸钠含量会在系统内越积越高,最后导致蒸发、结晶两大系统的生产波动,从而影响腈纶装置的正常生产运行。 由以上分离原理可知,在回收装置中,离心机分离效果注重的是固相的干燥度,即分离出的固相中含有的硫氰酸钠越少则分离效果越好,下面,就从离心机的工作原理开始,对离心机分离效果不理想的原因进行分析并寻找相应的解决方案。 工作原
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电子天平的正确使用与维护
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
一、 电子天平及其分类 人们把用电磁力平衡被称物体重力的天平称之为电子天平。其特点是称量准确可靠、显示快速清晰并且具有自动检测系统、简便的自动校准装置以及超载保护等装置。 按电子天平的精度可分为以下几类 1、超微量电子天平 超微量天平的最大称量是2至5g,其标尺分度值小于(最大)称量的10-6,如Mettler的UMT2型电子天平等属于超微量电子天平。 2、微量天平 微量天平的称量一般在3至50g,其分度值小于(最大)称量的10-5,如Mettler的AT21型电子天平以及Sartoruis的S4型电子天平。 3、半微量天平 半微量天平的称量一般在20至100g,其分度值小于(最大)称量的10-5,如Mettler的AE50型电子天平和Sartoruis的M25D型电子天平等均属于此类。 4、常量电子天平 此种天平的最大称量一般在100至200g,其分度值小于(最大)称量的10-5,如Mettler的AE200型电子天平和Sartoruis的A120S、A200S型电子天平均属于常量电子天平。 5、 分析天平 其实电子分析天平,是常量天平、半微量天平、微量天平和超微量天平的总称。 6、 精密电子天平 这类电子天平是准确度级别为Ⅱ级的电子天平的统称。 二、 选购及使用注意事项 1、 如何选择电子天平 选择电子天平应该从电子天平的绝对精度(分度值e)上去考虑是否符合称量的精度要求。如选0.1mg精度的天平或0.01mg精度的天平,切忌不可笼统地说要万分之一或十万分之一精度的天平,因为国外有些厂家是用相对精度来衡量天平的,否则买来的天平无法满足用户的需要。例如在实际工作中遇到这样一个情况,用一台实际标尺分度值d为1mg,检定标尺分度值e为10mg,最大称量为200g的Mettler电子天平,用来称量7mg的物体,这样是不能得出准确结果的:在《JJG98-90非自动天平试行检定规程》中规定,最大允许误差与检定标尺分度值“e”为同一数量级,此台天平的最大允许误差为1e,显然不能称量7mg的物体;称量15mg的物体用此类天平也不是最佳选择,因为其测试结果的相对误差会很大,应选择更高
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怎样对电子天平进行校准以减小误差
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
在检定(测试)中我们发现,对天平进行首次计量测试时误差较大,究其原因,相当一部分仪器,在较长的时间间隔内未进行校准,而且认为天平显示零位便可直接称量。(需要指出的是,电子天平开机显示零点,不能说明天平称量的数据准确度符合测试标准,只能说明天平零位稳定性合格。因为衡量一台天平合格与否,还需综合考虑其它技术指标的符合性)。因存放时间较长,位置移动,环境变化或为获得精确测量,天平在使用前一般都应进行校准操作。校准方法分为内校准和外校准两种。大部分厂家生产的电子天平均有校准装置。如果使用前不仔细阅读说明书很容易忽略“校准"操作,造成较大称量误差。 如何对天平进行外校准。方法:轻按CAL键当显示器出现CAL-时,即松手,显示器就出现CAL-100其中“100"为闪烁码,表示校准砝码需用100g的标准砝码。此时就把准备好“100g"校准砝码放上称盘,显示器即出现"----"等待状态 经较长时间后显示器出现100.000g,拿去校准砝码,显示器应出现0.000g,若出现不是为零,则再清零,再重复以上校准操作。(注意:为了得到准确的校准结果**重复以上校准操作步骤两次。) 方法如下: 天平置零位,然后持续按住“CAL"键直到CALint出现为止,下述情况将在校准时显示: 天平置零 内部校准砝码装载完毕 天平重新检查零位 天平报告校准过程 天平报告校准完毕 天平自动回复到称重状态 有的人认为在电子天平量程范围内称量的物体越重对天平的损害也就越大。这种认识是不完全正确的。一般衡器最大安全载荷是它所能够承受的、不致使其计量性能发生永久性改变的最大静载荷。电磁力自动补偿电路原理,当秤盘加载时(注意不要超过称量范围),电磁力会将秤盘推回到原来的平衡位置,使电磁力与被称物体的重力相平衡,只要在允许范围内称量大小对天平的影响是很小的,不会因长期称重而影响电子天平的准确度。
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走近分子影像学
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
分子影像学的出现是医学影像学发展史上的又一个里程碑,国家科技部、卫生部、国家自然科学基金委对分子医学、分子影像学的研究给予了高度的重视。然而,分子影像学毕竟是刚刚起步,极需多学科合作,尤其是跨学科间的交流与合作,才能促进分子影像学研究的顺利开展。 分子影像学概念 分子影像学(molecular imaging)是运用影像学手段显示组织水平、细胞和亚细胞水平的特定分子,反映活体状态下分子水平变化,对其生物学行为在影像方面进行定性和定量研究的科学。因此,分子影像学是将分子生物学技术和现代医学影像学相结合的产物,而经典的影像诊断(X线、CT、MR、超声等)主要显示的是一些分子改变的终效应,具有解剖学改变的疾病;而分子影像学通过发展新的工具、试剂及方法,探查疾病过程中细胞和分子水平的异常,在尚无解剖改变的疾病前检出异常,为探索疾病的发生、发展和转归,评价药物的疗效中,起到连接分子生物学与临床医学之间的桥梁作用。 分子影像学意义 在诊断方面,通过对肿瘤发生过程中的关键标记分子进行成像,可在活体内直接观察到疾病起因、发生、发展等一系列的病理生理变化和特征,而不仅仅显示疾病末期的解剖改变;**方面,观察药物作用过程中一些关键的标记分子有没有改变,即可推论这种**有无效用;在药物开发方面,通过设计特异性探针,直接在体内显示药物**靶点的分子改变,通过建立高能量的影像学分析系统,可大大加快药物的筛选和开发;在基因功能分析以及基因**的研究方面,通过设计一系列特异性探针,建立高通量的基因功能体内分析系统,可实时显示该基因在体内表达的丰度、作用过程,也可在体内观察目的基因表达效率,直接评价疗效。目前主要应用于肿瘤学、心血管疾病、神经系统等方面。 分子影像学成像原理 分子影像学融合了分子生物化学、数据处理、纳米技术、图像处理等技术,因其具有高特异性、高灵敏度和图像的高分辨率,因此今后能够真正为临床诊断提供定性、定位、定量的资料
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ELISPOT技术原理及实验方法介绍
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
ELISPOT技术原理 随着酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用,使体外检测各种细胞因子及抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用酶联免疫吸附法(ELISA)检测体液中游离的细胞因子(CK)或抗体,但由于游离的循环抗体或CK的半哀期不同,使之在体液中不断的被代谢或与靶器官结合,而不能确切的反映体内的抗体及CK的水平。80年代,国外的科研工作者根据ELISA技术的基本原理,建立了体外检测特异性抗体分泌细胞和CK分泌细胞的固相酶联免疫斑点技术(ELISPOT)。因其具有较高的特异性和敏感性,目前正被国内外广泛应用,对探索自身免疫系统疾病发病机制具有重要意义。 ELISPOT法源自ELISA,又突破传统ELISA法,是定量ELISA技术的延伸和新的发展。两者都是检测细胞产生的细胞因子或其他可溶性蛋白,它们最大的不同在于: 1、ELISA通过显色反应,在酶标仪上测定吸光度,与标准曲线比较得出可溶性蛋白总量。 2、ELISPOT通过显色反应,在细胞分泌这种可溶性蛋白的相应位置上显现清晰可辨的斑点,可直接在显微镜下人工计数斑点或通过ELISPOT分析系统对斑点进行计数,1个斑点代表1个细胞,从而计算出分泌该蛋白的细胞的频率。(某些研究不仅要测细胞因子生成量,还需检测分泌此细胞因子的细胞频率) 3、由于是单细胞水平检测,ELISPOT比ELISA和有限稀释法等更灵敏,能从 20万-30万 细胞中检出 1个分泌该蛋白的细胞。 4、捕获抗体为BD、R&D、Mabtach生产的高亲和力、高特异性、低内毒素单抗,在研究者以刺激剂激活细胞时,不会影响活化细胞分泌细胞因子。 ELISPOT检测原理:ELISPOT全名为Enzyme-linked Immunospot Assay,其技术原理与ELISA相似。其实验设计是在96微孔培养盘底部披覆PVDF薄膜,用来吸附特殊挑选、且无毒性(不含sodium azide、内毒素endotoxin)的单株抗体。静脉血PBMC细胞经适当分离处理后,会被分配到微孔盘上,再接受适当的抗原刺激,并将微孔盘放置于温箱中过夜培养一段时间。一般而