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新冠疫苗接种者体内RBD抗体及中和抗体检测方法和结果分析

新冠疫苗接种者体内RBD抗体及中和抗体检测方法和结果分析

作者:德尔塔 日期:2022-04-14

新冠疫苗保护性能评估 为了应对新冠疫情威胁,目前已经有很多国家开始了疫苗接种工作,但接种新冠疫苗后,产生的保护效果并不确定,评估新冠疫苗有效性的重要指标之一就是接种者体内中和抗体的含量。针对大规模疫苗接种后的人群,使用简单、快速的胶体金免疫层析法,可快速评估每个接种者体内的抗RBD抗体及中和抗体的水平。   RBD结合抗体 采用胶体金免疫层析技术,通过双抗原夹心法测试RBD结合抗体:取接种疫苗后的血清滴在试纸条加样区,血清会在毛细作用下向前层析,结合垫上的胶体金会溶解,然后和血清一起向前移动。血清到达检测区后,胶体金标记的S-RBD、血清中的抗体与检测线上包被的S-RBD形成复合物,表现为检测线显色,血清中的抗体含量与检测线显色强度成正相关。反应结束后,直接肉眼观察显**况或采用胶体金检测仪进行测试。通过检测线和质控线上胶体金显色强弱,可判断RBD抗体的含量。该方法可检测血清、血浆及其他分泌物中含有可与RBD相互作用的任何抗体,并且此方法不受样本种属及抗体型别的限制。   胶体金免疫层析检测RBD结合抗体   应用场景 血清中RBD抗体筛查、早期患者血清学诊断及疫苗临床效果评价—抗RBD总抗体检测。   测试结果 标记: 胶体金标记S-RBD (b46003P)和胶体金标记兔IgG (0295P)包被: C线为羊抗兔IgG (0295G),T线为S-RBD (46003P/46005P)   备注:“+++”表示反应很强;“++”表示反应较强;“+”表示反应较弱;“±”反应很弱;“-”表示无反应。   RBD中和抗体 采用胶体金免疫层析法的竞争法测试RBD中和抗体:取接种疫苗后的血清滴在试纸条加样区,血清会在毛细作用下向前层析,结合垫上的胶体金会溶解,然后和血清一起向前移动。血清到达检测区后,胶体金标记的S-RBD与检测线上包被的ACE2结合,并被固定在检测线上,表现为检测线显色,而血清中的中和抗体会与检测线上的ACE2竞争结合S-RBD,从而导致固定在检测线上的S-RBD减少,检测线显色下降。反应结束后,直接肉眼观察显**况

福布斯:视觉技术驱动下一代育种

福布斯:视觉技术驱动下一代育种

作者:德尔塔 日期:2022-04-14

根据世界银行的数据,到2025年,地球上将有80亿人。为了维持这一人口,我们需要智慧农业来帮助我们实现每公顷种植更多的粮食。视觉技术将帮助我们实现这一目标。   几个世纪以来,农民一直在培育口味好、耐逆、高产的植物品种。视觉技术的一种——下一代测序技术——利用荧光成像技术来探索和理解基因组,大大改善了育种过程。科学家使用诸如基因修饰和编辑之类的技术来实现特定的性状,例如改善口感、大小、抗性或产量等。   但是,大自然也不是善茬。育种者必须找出基因在其生长环境中的表达方式。为此,他们使用表型分析来测量植物的不同部分(包括颜色、茎粗、高度和叶角等),旨在将这些性状与植物内的特定基因相关联。   育种家根据色卡比对来确定施加氮肥的量 (Trends Plant Sci.,2019, 24, 10)   视觉传感器和机器学习正在打破植物表型的瓶颈  植物育种和表型并不是新鲜事。1856年一个叫孟德尔的人就通过表型阐明了遗传学的核心问题。但遗憾的是,直到最近测量植物表型的过程仍然十分繁琐。“目前,所有植物的特征都是由人类来衡量的,因此是主观的”,Agricomseeds的莉亚·帕雷德斯·萨尔托斯说。   科学家,育种家和其他技术娴熟的操作员用手测量植物性状,这是一个缓慢/昂贵且不精确的过程,通常被称为表型瓶颈。实际上,完成一个新的植物品种可能需要长达10年的时间。   视觉技术是采集、分析、过滤(噪音)、显示或分发视觉数据的任何技术。它通常利用计算机视觉、机器学习或人工智能。视觉数据包括图片、视频、热图像、X射线图像、高光谱图像、LiDAR等等。   令人兴奋的是,视觉技术正在改变表型,打破瓶颈,驱动我们进入下一代植物育种。相机和传感器技术的进步正在通过多种成像传感器(包括多角度、2D、3D、RGB、荧光、近红外(NIR)、热红外和高光谱)实现更快,更可靠的室内表型分析。   这些技术正在快速使表型过程自动化,从而使育种者不仅可以获取更快,更准确的表型数据,还可以检查

盘点2020年度FDA审批通过的其他抗肿瘤药物

盘点2020年度FDA审批通过的其他抗肿瘤药物

作者:德尔塔 日期:2022-04-14

前言 截止至2020年12月31日,美国食品药品监督管理局(FDA)已经正式审批通过了10个除小分子抑制剂和单抗的抗肿瘤药物(包括首次通过审批、扩大适应症)的批文,详见附表。临床上这些抗肿瘤药物分别用于卡波西肉瘤、淋巴瘤、骨髓瘤、尿路上皮癌、乳腺癌、肺癌、白血病、前列腺癌等。下面详细盘点2020年度FDA审批通过的其他抗肿瘤药物。   #联合用药  *扩大适应症   Mitomycin (JELMYTO) UroGen Pharma FDA正式批准了UroGen制药公司的JELMYTO,用于**患有低度上尿路上皮癌(LG-UTUC)的成年患者。 Sacituzumab govitecan-hziy (TRODELVY) Immunomedics,Inc. FDA加速批准了Immunomedics公司的TRODELVY,用于先前至少接受了两种转移性疾病**的转移性三阴性乳腺癌的成年患者。 Pomalidomide (POMALYST) Celgene Corporation FDA扩大了新基公司的POMALYST适应症,用于**艾滋病相关卡波西肉瘤的成年患者和HIV阴性的卡波西肉瘤成年患者。 Lurbinectedin (ZEPZELCA) Pharma Mar S.A. FDA正式批准了Pharma Mar公司的ZEPZELCA,用于**在铂类化疗后病情恶化的转移性小细胞肺癌(SCLC)的成年患者。 Combination of decitabine and cedazuridine (INQOVI) Astex Pharmaceuticals, Inc. FDA正式批准了Astex制药公司的INQOVI,用于**患有骨髓增生异常综合症(MDS)和慢性骨髓单核细胞白血病(CMML)的成人患者,包括既往**和未**,新发和继发性的MDS。Inqovi是美国首个被批准**MDS和CMML的口服低甲基化制剂。 Brexucabtagene autoleucel (TECARTUS) Kite, a Gilead Company FDA加速批准了Kite公司的TECARTUS,是一种靶向CD19的自体CAR-T疗法,用于**复发性或难治性套细胞淋巴瘤(MCL)的成人患者。TECARTUS是全球第三款CAR-T疗法。 Belantamab mafodotin-blmf (BLENREP) GlaxoSmithKline FDA加速批准了葛兰素史克公司的Blenrep,用于**复发性或难治性的多发性骨髓瘤的成人患者,这些患者至少

太赫兹光谱技术在基于西洋参标志物F11检测分析上的应用及发展潜力

太赫兹光谱技术在基于西洋参标志物F11检测分析上的应用及发展潜力

作者:德尔塔 日期:2022-04-14

Plant Phenomics | 上海理工大学庄松林院士团队开发了一种基于西洋参标志物F11的无损快速分析方法 西洋参是一种名贵的药用草本植物,具有诸多的药理学价值。传统的西洋参鉴定方法存在费时、费力、消耗大等问题,而太赫兹光谱技术在定性和定量鉴定药草的关键物质方面具有巨大潜力。而今,特异性标志物标记分析法已变成物质分析的最重要手段。   近日,Plant Phenomics在线发表了上海理工大学庄松林院士团队题为Terahertz Spectroscopy for Accurate Identification of Panax quinquefolium Basing on Nonconjugated 24(R)-Pseudoginsenoside F11的研究论文。   本研究开发了一种基于西洋参的特异性物质拟人参皂苷F11为标志物的分析方法,详细研究了太赫兹光谱技术在药草西洋参定性和定量上的相关工作,分析对比了太赫兹和多种方法对西洋参的测试结果以及不同产地西洋参的光谱差异。本研究证明了以拟人参皂苷F11为出发点检测西洋参的高效性,也为后续太赫兹技术在药草鉴定领域的应用做出总结和展望。   首先,相较于其他光谱法展示物质分子的跃迁方式、官能团信息,太赫兹光谱法可以表征分子整体的信息,更快速精准的展示西洋参特异性标志物F11的信息。   第二,与《中国药典》的权威方法高效液相色谱法分析对比,两种方法的归一化误差小于5%,线性拟合度高达0.975。但太赫兹光谱法速度更快,经济实惠,提高了西洋参的检测效率,降低了检测成本。   第三,基于主成分分析法,通过分析不同样本的主成分得分的差异,不但实现了西洋参与同属于五加科人参属的其它药草、其它非草药物质的鉴别,而且可以鉴别西洋参的产地。这种通过光谱信息与算法程序的结合手段,使得西洋参检测更加智能化。   在本研究中,我们开发了一种拟人参皂苷F11准确、快速和经济有效的鉴别和定量分析新方法。研究中的理论模拟和实验数据证明了F11可以作为西洋参的生物标志物,其吸收峰面积可以准确地定量西洋参样品中F11的含量。  

3类阴性对照对确定细胞的非特异性荧光的差异

3类阴性对照对确定细胞的非特异性荧光的差异

作者:德尔塔 日期:2022-04-14

实验方案设计的第一步就是设置对照组,如何保证实验操作的可行性以及实验结果的可靠性,设置合理的对照组是关键。特别是阴性对照,不同的实验类型阴性对照都包括好几种,分分钟让你晕头转向,今天我们就来说说流式实验的阴性对照。     我们都知道流式实验是利用流式细胞仪激发细胞上结合的荧光素发射荧光,进一步通过对荧光信号的分析就可以间接反映样品细胞的物理化学特征。但是产生的荧光都是靶标特异性的吗?当然不是。发射荧光不仅荧光素能够在激光的激发下产生荧光,细胞表面的某些分子或者结构也能够产生类光,这种荧光相对于荧光素产生的荧光较弱,而且与细胞表面的特异抗原分子没有相关性,被称为非特异性荧光。在特定的激光激发下,细胞表面不结合流式荧光素时也会产生荧光信号。   通常地,每一种细胞都会产生非特异性荧光,流式检测时得到的荧光信号是细胞本身的非特异性荧光和来自于细胞表面结合的荧光素的特异性荧光叠加得到的结果。所以分析流式结果时,不能因为得到了荧光信号就判断细胞表面肯定结合有相应的荧光素,从而得出细胞表达相应的抗原分子的结论,而应该比较该荧光信号与细胞的非特异性荧光,如果得到的荧光信号大于非特异性荧光,说明得到的荧光信号部分来源于荧光素的特异性荧光,就可以得出细胞表达相应的抗原分子的结论。   所以,确定与荧光素无关的细胞自身的非特异性类光的强弱非常重要,而设立阴性对照就是为了确定细胞的非特异性荧光。     话不多说,看图,如上图这3类阴性对照是流式分析比较全面的阴性对照:   第1类“negative”表示的是不加任何荧光素偶联抗体时得到的荧光信号,因为没有标记任何类光素,所以这组得到的荧光信号与荧光素无关,与细胞抗原分子CD69是否表达无关,得到的荧光信号代表的是非特异性荧光信号;   第2类“抗CD69”表示的是用抗CD69抗体标记样品细胞后得到的类光信号,虽然抗CD69抗体能修与细胞表面的CD69抗原分子结合,但是抗CD9抗体没有偶联荧光素,所以

肥胖型糖尿病免疫缺陷鼠的表型信息与应用

肥胖型糖尿病免疫缺陷鼠的表型信息与应用

作者:德尔塔 日期:2022-04-14

免疫缺陷小鼠是指由于先天遗传突变或者用人工方法造成的免疫系统上一种或者多种免疫成分(B细胞、T细胞、NK细胞等)存在缺陷或者缺失的小鼠。随着基因编辑技术的不断发展,免疫缺陷程度更高的小鼠品系不断被开发出来,并在免疫、肿瘤、干细胞研究和基因**等方面发挥着巨大的作用。尽管如此,传统的免疫缺陷小鼠,如裸鼠、NOD scid,由于其饲养繁育条件要求较低、对特定的肿瘤成瘤效率高等优势仍被广泛应用。赛业生物药物筛选评价小鼠模型平台可以提供系列免疫缺陷小鼠,如BALB/c nude(裸鼠)、NOD scid、重度免疫缺陷鼠BRGSF和C-NKG等。   NOD scid(非肥胖型糖尿病/重症联合免疫缺陷鼠)是在非肥胖型糖尿病小鼠(NOD)背景品系的基础上引入scid突变的先天性T和B淋巴细胞免疫缺陷小鼠。NOD scid免疫缺陷鼠独有的多种免疫缺陷为人类造血细胞的重建提供了一个极好的系统,是HIV-1研究、肿瘤研究和基因**的重要模型。   NOD scid小鼠表型信息和应用 1. NOD scid(非肥胖型糖尿病/重症联合免疫缺陷鼠)是在非肥胖型糖尿病小鼠(NOD)背景品系的基础上引入scid突变的先天性T和B淋巴细胞免疫缺陷小鼠。独有的多种免疫缺陷为人类造血细胞的重建提供了一个极好的系统,是HIV-1研究和基因**的重要模型。 2. 肿瘤研究的重要工具,可增加肿瘤的发生率,尤其是淋巴瘤和胸腺瘤。 3. 移植致死性胸腺淋巴瘤的情况下寿命短,约为8-9个月。   BRGSF小鼠表型信息和应用 1. BRGSF小鼠是技术成熟、免疫缺陷程度最大的一种免疫缺陷小鼠,相比于目前常见的N*G小鼠,BRGSF小鼠的免疫细胞中不仅淋系细胞完全缺失,其髓系细胞(如巨噬细胞)功能也严重缺失,因此其用于肿瘤CDX、PDX模型建立的效果更为优秀,适合抗肿瘤药物的药理和药效学研究。 2. 在基因**领域,BRGSF小鼠同样具有其独特的优势,例如CAR-T**领域,由于BRGSF小鼠为BALB/c背景,其体内存在补体依赖性细胞毒性(CDC)机制,因此我们可研发或寻找利用CDC机制来消除**结束

PCR鉴定试剂盒使用方法与特点

PCR鉴定试剂盒使用方法与特点

作者:德尔塔 日期:2022-04-14

PCR鉴定试剂盒​特点: 1. 一管式操作,用户只需要提供样品即可。 2. 根据大豆热休克蛋白基因保守区域设计引物,能专一性检测出样品中的大豆成分,但不能检测其他非大豆成分。 3. 快速,整个检测过程(按一个样品计)所需时间仅为 2.0 小时。 4. 只需要普通 PCR 仪和凝胶电泳仪,无需配置贵重仪器设备。 5. 对混合样品中大豆成分的检测下限为 0.1%,对样品中大豆成分的核酸检测下限为 1.0ng/μL。 6. 本只能用于科研,足够 50 次 40uL 体系的常规 PCR。 PCR鉴定试剂盒​使用方法: 一、稀释标准曲线样品(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。 1. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。 2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液,*用带芯枪头,下同)。 3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照(浓度为 1×10E8 拷贝/μL,试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。 4. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。 5. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分 钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。 6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。 二、样品 DNA 的制备 7. 用自选方法纯化样品的 DNA,本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。 8. 如果有 N 个样品,则需要进行 N+2 个样品提取,多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。 三、设置 qPCR 反应(20μL 体系,在样品制备室进行) 9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复,则标记 N+9 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用

肿瘤基因功能研究思路解析

肿瘤基因功能研究思路解析

作者:德尔塔 日期:2022-04-14

国自然热点是近几年国自然申请的风向标,结合国自然热点为课题方向,能有效提高国自然申请的中标率。肿瘤学是医学科学研究中最为活跃的领域之一,随着细胞生物学、发育生物学、遗传学、免疫学等迅速发展,科学研究范式的改变以及多学科的交叉融合,肿瘤学基础研究取得了一定进展,肿瘤学科申请项目数量及质量也逐渐提高。   肿瘤基因功能研究思路 虽然肿瘤研究的细分领域众多,但不同的领域均会涉及很多基因功能的研究,例如与肿瘤发生、发展、转移、耐药分子机制相关的致癌基因、抑癌基因、转移相关基因和耐药相关基因等。肿瘤基因功能的研究是一个整体性的过程,从开始的基因筛选、到细胞水平(体外)和动物水平(体内)的功能性验证,再到机制探讨及验证,形成一个完整的研究逻辑。   ☑ 基因筛选:通常采用组学的方法进行分析,根据研究目标的不同,可分为基因组、转录组、蛋白组和代谢组分析。   ☑ 细胞水平功能性验证:细胞水平的调控则需要建立基因表达调控的细胞模型,如通过病毒载体或电转等方式,实现对目标基因的过表达、敲低表达、敲除表达和点突变等。   ☑ 动物水平功能性验证:肿瘤研究最常用的动物模型则为免疫缺陷小鼠,如最基础也是最常用的裸鼠,可通过移植肿瘤细胞建立CDX模型,对于重度联合免疫缺陷小鼠则可用于建立PDX模型或人源免疫系统的重建,此外还有各种定制化的基因修饰动物也应用于肿瘤的研究中。   ☑ 机制探讨和验证:而对于肿瘤机制的研究则各有不同,常规的思路是寻找目标基因上下游的调控分子或信号通路,并采用蛋白与DNA、RNA与蛋白、蛋白与蛋白等相互作用进行验证。 图1. 肿瘤基因功能研究思路   研究案例解析 精选案例一:DUSP1 inhibits cell proliferation, metastasis and invasion and angiogenesis in gallbladder cancer 研究目的:研究DUSP1在胆囊癌进程中的作用机制。 技术路线:对胆囊癌患者肿瘤细胞的DUSP1水平定量检测→建立两种GBC细胞系的DUSP1过表达细

如何清除食物过敏原污染(蛋白质污染)及如何选择合适的清洗剂

如何清除食物过敏原污染(蛋白质污染)及如何选择合适的清洗剂

作者:德尔塔 日期:2022-04-14

摘要         在过去的15年中,过敏反应在人口中的数量已增加了一倍,并且主要影响儿童人口。 食物过敏的患病率约为成年人口的1-4%,婴儿人口的7-10%。        食物不良反应,过敏和食物不耐受是一个正在出现的健康问题。 预防它们的唯一方法是从敏感人群的饮食中清除过敏原。 在食品行业中,适当且科学的原料管理必须确保在标签上显示其是否存在,并避免无意的过敏原存在。 食物过敏原       食物过敏原是可以在我们食用的食物中发现的蛋白质,会损害对它们敏感的人们的健康。 它们本身是无害的物质,但会导致某些消费者的免疫系统反应加剧。       过敏原(抗原)通过免疫球蛋白E(IgE)介导的免疫反应引起超敏反应(过敏症)。 对过敏原的反应可能具有不同的严重程度,包括嘴唇,嘴巴和喉咙发痒,对更严重的反应(如过敏反应)可能导致死亡。 监管框架      近年来,食物过敏原和不耐受性的增加导致了广泛的监管框架的发展,旨在提供最严格的信息和消费者保护。     根据关于欧盟食品规范框架的(EU)1169/2011法规,生产包装食品的食品行业以及所有专门用于招待客人或向其客户提供非包装食品和饮料的机构(餐厅,酒吧 ,餐饮,公共食堂(例如学校,医院,住宅等)和自动售货机等有义务告知消费者是否含有法规中规定的14种强制性声明过敏原中的任何一种。     企业/机构可以通过各种媒体(报纸,计算机或口头)向消费者提供这些食品信息,尽管建议以书面形式和视觉形式出现在菜单上。 遗漏此信息和/或侵权可能会导致该公司受到3000至600000欧元的罚款。     尽管有超过150种可引起人体不良反应的过敏原,但法规1169/2011列出了14种强制性声明过敏原的表格。 食物过敏原管理        为了遵守法律和食品安全要求,重要的是,食品公司在其HACCP自控系统中纳入对这种新风险(食品过敏原的存在)的管理是非常重要的。 在食物加工的不同阶段都可能发生食物过敏原污染。         在制造过程中的交叉接触可能是造成

动物育种研究终端技术方案

动物育种研究终端技术方案

作者:德尔塔 日期:2022-04-14

在传统动物呼吸测热(能量代谢)头箱基础上,易科泰生态技术有限公司推出动物育种研究终端技术方案:       1.动物代谢舱群平台技术:饲料转化效率、育种表型有效的能量消耗、动物环境影响等       2.Thermo-RGB双光红外热成像技术:呼吸模式、动物疾病筛查等       3.动物活动状态、生理指标监测技术:姿态行为时间长度、温度、心率、活动等       4.动物脂肪含量高光谱监测技术:脂肪深度含量分布监测、饲料标准建立等       5.动物设施环境气象监测技术:气象因子监测、客户定制等       动物代谢舱群可以更大空间、更符合动物福利标准、更高精确度研究动物实时的细微有效能量消耗,其优势远远高于传统的呼吸测热头箱。作为动物育种表型开放平台,舱体内可配置双光红外热成像、动物活动、生理指标监测传感器、高光谱成像单元、环境气象监测等技术组成动物育种研究表型平台,全方位评估育种动物的生产性能和表型特征等。 案例1  牛的进食、热应激、甲烷排放、育种表型有效能量消耗监测设施构建       作为拉美最大的农业研究机构、巴西农业可持续发展支柱的国家农业研究Embrapa上市公司于2015年启动的集成大动物呼吸代谢(能量代谢)等技术构建的动物大表型平台,助力该国农场动物可持续生产、粮食安全、气候变化和消费者接受等全球性竞争课题,在近年来的农业、生物科技、食物与健康等领域产生了国际带动性产业影响力。   案例2  一套创新型的群养猪能量代谢舱群描述       作为公立常春藤名校的伊利诺伊大学厄巴纳-香槟分校于2019年启动了群养猪能量代谢舱群,进行猪全部生产阶段进食的净能评估。该舱群由6个舱体组成,每个舱体大小为1.8×2.1×2.7米,可放置4-10头(取决个体大小)猪进行实验,以比较个体饲养和群体饲养猪的净能差异。   参考文献: Fan Y X , Wang Z B , Nie H T , et al. Determination of energy and protein requirements for maintenance and lactation of Dorper × Hu crossbred shee

重度免疫缺陷小鼠助力肿瘤研究 - 免疫**热门靶点CD47

重度免疫缺陷小鼠助力肿瘤研究 - 免疫**热门靶点CD47

作者:德尔塔 日期:2022-04-14

想获得国自然选题思路,提高国自然基金申请命中率?想调整研究方向,获得学术研究突破口?有机会发高分文章?你需要了解学科发展态势和未来走向!赛业生物专栏《Gene of the Week》每周会根据热点研究领域介绍一个基因,详细为您介绍基因基本信息、研究概况和应用背景等,助您保持学术研究敏锐度,提高科学研究效率,期待您的持续关注哦。今天我们要讲的主角是免疫**热门靶点CD47。   CD47又称为整合素相关蛋白(integrin-associated protein, IAP),属于免疫球蛋白超家族,是一个拥有5个跨膜域的跨膜糖蛋白,广泛表达于几乎所有的正常细胞表面。目前已知的CD47的天然配体有三种:整合素(integrin)、血小板反应蛋白-1(Thrombospondin-1,TSP-1)和信号调节蛋白α(Signal-regulatory proteinα,Sirpα)。CD47与其配体主要参与细胞黏附、细胞迁移、吞噬功能,以及维持机体免疫稳态。   其中,Sirpα的表达局限于巨噬细胞、树突状细胞以及神经细胞表面。在免疫反应中,CD47主要通过与巨噬细胞表面的Sirpα结合,释放一个“别吃我”信号,从而保证正常细胞不被巨噬细胞“吃掉”(图1)。在这里,CD47扮演了一个“自我(self)”细胞的标记,而一些肿瘤细胞也会利用CD47/Sirpα信号通路,高表达CD47以实现免疫逃逸。 图1. CD47/Sirpα在抑制巨噬细胞的吞噬功能中起到重要作用[1] CD47/Sirpα的相互作用导致Sirpα胞内域的免疫受体酪氨酸相关的抑制性基序(immunoreceptor tyrosine-based inhibition motif,ITIM)中的两个酪氨酸残基磷酸化。磷酸化招募并激活蛋白酪氨酸磷酸酶SHP1和SHP2,传导一系列信号使肌球蛋白II去磷酸化,抑制细胞骨架重排,而这个步骤是巨噬细胞吞噬靶细胞的必要步骤。在肿瘤细胞中,CD47/Sirpα活性的增强是通过提高CD47的表达量达到的。   与T细胞抑制性免疫检查点PD-L1类似,CD47属于巨噬细胞抑制性免疫检查点。近年来,许多研究者报道使用抗CD47/Sirpα抗体来阻断CD47/Sirpα信号通路可以显著地抑制肿瘤

基于X射线CT图像的3D根系分割与评价方法在根系表型研究中的作用

基于X射线CT图像的3D根系分割与评价方法在根系表型研究中的作用

作者:德尔塔 日期:2022-04-14

Plant Phenomics | 基于X射线CT图像的半自动3D根系分割与评价方法   不同受控条件下或田间生长的土壤根系的无损调查,对于了解植物、增加农作物产量或适应气候变化至关重要。已有研究证明,无损3D体积成像方法(如:基于计算机X射线断层扫描(CTX)的方法)是获取可视化和分析根系结构的有效方法。在受控制的生长条件下,利用这类体积扫描设备可以获取精度在亚毫米分辨率下的根系数据。随着CTX数据空间分辨率的提高,获得的图像质量会更好,需要分析的图像数量也随之增加,相关数据集的构建变得更具挑战性,因而自动根系表型研究的需求也有所增加。   近日,Plant Phenomics在线发表了德国弗劳恩霍夫系统研究所(Fraunhofer Institute for Integrated Systems)Stefan Gerth等人题为Semiautomated 3D Root Segmentation and Evaluation Based on X-Ray CTImagery的研究论文。   在先前的工作中,作者比较了基于CTX图像数据进行根分割和手动测量方法。本文采用的扫描方式能够在连续手动分段的情况下产生的高质量数据,并清晰显示所有测试罐尺寸的结构(Figure 1)。将人工分割的根系结构与收获后使用WinRHIZO计算的根总长度进行比较(Figure 6),结果表明:与WinRHIZO相比,从CTX图像计算出的根性状能够显示出减少的根总长。   众所周知,当根部的可见性较差时会导致分割结果出现差异,该情况出现的原因之一是X射线穿过样品时形成的成像会产生光子透射,样品材料密度是造成这一现象的根本原因。当可见性较差时分割出的根和周围土壤的衰减系数可能会非常相似,并且很难从视觉上加以区分。而对于细小的侧根而言,侧根直径较小,导致分割难度随之增加。 Figure 1: Workflow of the proposed semiautomatic segmentation.    Figure 6: Root biomass Broot(in %) over depth (in mm) as a cumulative distribution for small- (green solid line) and medium- (orange dotted line) sized pots over the depth of t

BRGSF小鼠的优势:CAR-T免疫疗法的有效性和安全性评估

BRGSF小鼠的优势:CAR-T免疫疗法的有效性和安全性评估

作者:德尔塔 日期:2022-04-14

BRGSF小鼠背景 BRGSF(BALB/c Rag2tm1Fwa Il2rgtm1Cgn SirpαNOD Flk2tm1lrl)小鼠是目前市面上免疫缺陷程度最高的小鼠之一:Rag2和Il2rg基因的敲除使BRGSF小鼠T、B、NK细胞缺失; SIRPαNOD抑制了小鼠巨噬细胞对人源细胞的吞噬作用;Flk2-/-基因的敲除使小鼠髓系细胞组分(特别是树突状细胞,DC)大幅减少(图1)。这种免疫系统上的高度缺陷使BRGSF小鼠对各类CDX和PDX移植物高度兼容,移植效率高,非常适合抗肿瘤药物的药理和药效学研究。此外,与N*G小鼠(NOD遗传背景:补体C5-/-)不同,BRGSF小鼠为BALB/c背景,其体内存在完整的补体系统,是研究补体依赖的细胞毒性(complement-dependent cytotoxicity,CDC)的有力工具。例如:对利用CDC机制按需清除CAR-T的药物进行有效性和安全性评估。 图1. BRGSF重度免疫缺陷小鼠   CDC机制 补体(complement)是一种经活化后具有酶活性的血清蛋白,主要由肝细胞和巨噬细胞产生,参与机体炎症反应以及抗微生物的免疫反应。补体依赖的细胞毒性(complement-dependent cytotoxicity,CDC)是指补体系统被激活后,在靶细胞膜表面形成攻膜复合物(membrane attack complex,MAC),通过在细胞膜上穿孔,最终导致细胞溶解的细胞杀伤效应。补体活化有三种途径:经典途径、MBL途径和旁路途径(图2)。而这三种途径都需要补体5(C5)的参与,才能最终形成由C5b6789(C5b-9)组成的MAC。NOD遗传背景的小鼠C5基因缺失,体内补体系统不完整,无法发挥CDC功效。与之相反,BRGSF小鼠为BALB/c背景,其体内存在完整有效的补体系统,是研究CDC的有力工具,可用来对利用CDC机制发挥疗效的药物进行有效性和安全性评估。 图2. 补体活化的三条途径[1]   CAR-T细胞免疫疗法简介 CAR-T细胞免疫疗法是一种利用人体自身免疫系统来攻击肿瘤细胞的新型抗肿瘤疗法。自2017年底,FDA批准了两款靶向CD19的CAR-T疗法(Novartis公司的Kymriah和Kite/Gilead公司的Yescarta)上市后,2020年7月,来自Kite/G

大鼠胎儿真皮组织提取培养指南

大鼠胎儿真皮组织提取培养指南

作者:德尔塔 日期:2022-04-14

大鼠胎儿真皮组织提取培养指南,对于贴壁细胞,传代可参考以下方法: 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。   3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 大鼠胎儿真皮组织提取保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜原代细胞,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。

偏肺病毒(hMPV)核酸检测试剂盒说明书

偏肺病毒(hMPV)核酸检测试剂盒说明书

作者:德尔塔 日期:2022-04-14

偏肺病毒(hMPV)核酸检测试剂盒说明书 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。        在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性)        发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 特点优势:     .特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到00%。     2.   重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为00%。     3.   灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到03cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。     4.   实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的7种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。     5.   优势:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。     6.   优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。 需要自备的