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不同类型色谱分析技术介绍及载体的选择原则
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
高压液相色谱 Martin 和 Synge在1941年就提出高效相色谱的设想，然而直到六十年代后期，由于各种技术的发展，高效液相色谱才付诸实现。这种色谱技术曾被称为高速液相色谱（HighSpeed Liquid Chromatography），高压液相色谱（High Parss-ure Lipuid Chromatography），目前使用最多的名称是高效液相色谱（High Pe-rformance Liauid Chromatography，HPLC）。高效液相色谱已经广泛地应用，成为一项不可缺少的技术。它的主要优点是⑴分辩率高于其它色谱法；⑵速度快，十几分钟到几十分钟可完成；⑶重复性高；⑷高效相色谱柱可反复使用；⑸自动化操作，分析精确度高。根据分离过程中溶质分子与固定相相互作用的差别，高效液相色谱可分为四个基本类型，即液－固色谱、液－液色谱、离子交换色谱和体积排阻色谱。高效液相色谱在生物领域中广泛用于下列产物的分离和鉴定：⑴氨基酸及其衍生物；⑵有机酸；⑶甾体化合物；⑷生物硷；⑸抗菌素；⑹糖类；⑺卟啉；⑻核酸及其降解产物；⑼蛋白质、酶和多肽；⑽脂类等。 一、分类 高效液相色谱法可分为四个基本类型：即液－固色谱法，键合相色谱法，离子交换色谱法及体积排阻色谱法。 （一）液－固色谱法 液－固色谱法通常称吸附色谱法，吸附剂有活性碳，氧化铝和硅胶，在液－固色谱法中用的载体都是硅胶。硅胶对溶质，分子的吸附能力不是平均分布在整个硅脱表面的，在硅胶表面有一些区域与溶质分子强烈相互作用，这些区域为活性位置，硅胶与溶质分子间主要作用是偶极距力氢键及静电相互作用。极性越强，而化合物在硅胶柱上的滞留时间也长。在液－固色谱中，依靠流动相溶剂分子与溶质分子竞争固定相互活性位置， 从而使溶质从色谱柱上洗脱下来。与硅胶表面活性位置结合力强的溶剂洗脱溶质分子的能力强，因而称强溶剂，反之为弱溶剂。液─固色谱法的特点是适于分离色谱几何异构体，可用于脂溶性化合物质如磷脂，甾体化合物，脂溶性维生素，前列腺素等。 （二）键合相色谱法 键合
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石蜡切片免疫组化染色步骤介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
石蜡切片免疫组化染色步骤 1、载玻片的处理： 抗原修复过程中，由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响，极易造成脱片。为保证试验的正常进行，可选用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI-9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等几种试剂，对已清洗的载玻片进行处理。具体方法如下： 1.1 APES：现用现配。将洗净的玻片放入以1:50比例丙酮稀释的APES中，停留20~30秒钟，取出稍停片刻，再入纯丙酮溶液或蒸馏水中涮去未结合的APES，置通风橱中晾干即可。用此载玻片捞片时应注意组织要一步到位，并尽量减少气泡的存在，以免影响染色结果。 1.2 HistogripTM：将洗净的玻片放入以1:50比例丙酮稀释的Histogrip液中，停留1~2分钟，然后用双蒸水快速清洗三次，室温干燥或60oC烤箱烘烤一小时，装盒备用。 1.3 Poly-L-Lysine：将洗净、干燥的载玻片放入以1:10比例去离子水稀释的多聚赖氨酸溶液中，浸泡5分钟，60oC烤箱烘烤一小时或室温过夜干燥。装盒备用。试验中使用的器具均为非玻璃制品。 2、常用酶消化： 2.1 胰蛋白酶：一般使用浓度为0.05%~0.1%，消化时间为37℃、10~40分钟，主要用于细胞内抗原的显示。 2.2 胃蛋白酶：一般使用浓度为0.4%，消化时间为37℃、30~180分钟，主要用于细胞间质抗原的显示，如：Laminin（层粘蛋白），Collagen IV（IV型胶原）等。 2.3 皂素（Saponin）：一般使用浓度为2~10mg/ml的saponin溶液，消化时间为室温孵育30分钟。 3、抗原热修复： 可根据实验室的具体条件，选用微波炉抗原修复、高压锅抗原修复或水浴高温抗原修复。抗原热修复可选用各种缓冲液，如TBS、PBS、重金属盐溶液等，但实验证明，以0.01M枸橼酸盐缓冲液（pH6.0）效果**。请选用我公司提供的ZLI-9064 枸橼酸盐缓冲液（粉剂）配制，取该粉剂一包溶于1000ml的蒸馏水中，混匀，其pH值在6.0 ± 0.1，如因蒸馏水本身造成的pH值偏差，请自行调整。 3.1 石蜡切片微波炉抗原修复操作方法：切片脱蜡至水后，3％H2O2处理10分钟，
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组学技术简介与其在食品工业中的创新应用
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
1.组学技术简介 组学技术属于系统生物学的概念，主要包括基因组学、转录组学、蛋白组学、代谢组学与离子组学等。我们可以结合中心法则这么进行理解（如下图所示）： 基因组学的研究对象是DNA，通过解读遗传信息预测生物体可能发生什么；转录组学的研究对象是RNA，其中mRNA作为遗传信息的“信使”，预测生物体将要发生什么；蛋白质是生命活动的执行者，故蛋白质组学研究的是生命活动如何进行；而代谢组学研究的则是已经发生了什么，通过对生物体内所有小分子代谢物进行定性定量分析（一般分子量1500以内），寻找代谢物与机体生理变化的关联性。类似地，离子组学研究机体内的元素组成、分布以及与生命活动的关联性，反映机体在某个特定状态下的生理特征。 随着科学研究的快速发展，人们发现单从某一层面（基因组、转录组、蛋白质组等）进行研究得到的信息有一定的局限性，因此可结合多组学进行关联，从整体的角度研究生物体生理功能和代谢活动的来龙去脉，为生命活动机理研究提供更有利的数据支持。 组学技术在食品工业中的创新应用 随着人口老龄化的加剧，环境污染问题恶化与居民对健康意识的提升，健康中国已上升为国家战略。而健康食品作为大健康产业的重要组成部分，在推动全民健康和控制慢性病方面具有重要作用。那么，如何结合组学技术进行食品工业创新呢？以下进行示例讨论： 1. 组学技术助力益生菌产业的创新发展 近年来，人体微生物、肠道菌群与功能性益生菌已成为研究热点。众所周知人体70%以上的免疫作用在肠道内进行，故肠道菌群的功效与人体免疫息息相关，而益生菌是目前发现调节肠道菌群、促进肠道功能修复、缓解慢性疾病的有效途径之一。因此，结合组学技术进行益生菌的功效机理研究对于健康食品的发展具有重要意义。 结合组学技术进行益生菌功效的研究策略如下图所示： 肠道菌群研究策略示意图 先通过宏基因组、16s测序与代谢组进行筛选组合生物标志物，然后进行代谢通路分析与功能验证
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杂合子还是纯合子？细胞模型该如何选择?
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
科研一直以来都是烧钱的活动，我想很多同学对此肯定深有体会。 以前我们老板买试剂 我买试剂 作为科研萌新，有时不仅得说服老板购买外包服务，同时还得与公司代理协商，真的是太难了。 比如说，我们要购买一个基因敲除细胞模型，公司提供了价格较低的杂合子与价格较高的纯合子，我们该如何选择？ 纯合子与杂合子的区别 本着务实求真的科研精神，我们是不是需要先了解下纯合子与杂合子的区别？ 图片来源：https://biologydictionary.net/homozygous/ 在人和小鼠等二倍体生物的细胞中存在两个染色体组，在两个同源染色体相同位置出现的基因我们称之为等位基因。当这两个等位基因完全相同时，我们就说这个细胞是纯合子，而当两个等位基因不同时，这个细胞就是杂合子。也就是说，同一个细胞，在某对等位基因上是纯合子，在另一对等位基因上也可以是杂合子。 具体到基因敲除的模型构建上来说，单个基因的敲除，涉及到一对等位基因的敲除，和单个等位基因的敲除。自然而然的，敲除一对等位基因就比敲除单个等位基因的效率要低，因此工作量也就大很多，也就造成很多公司报价上的差异。 作为生命科学未来的“包工头”，以后分分钟要管理上千万的项目资金，我们肯定得科学地省钱，破除封建迷信，当然土豪随意。 纯合子、杂合子该如何选择 在利用功能缺失策略对基因进行研究时，也就是基因敲除啦，一般情况下我们都是需要纯合子敲除细胞系的（除非纯合致死）。这时候，我们要记住一点，在设计实验的过程中需要结合我们的实验目的和下游检测手段，最终设计出合理的上游实验。也就说，对于基因敲除的下游验证，一般是Western Blot和免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)。在Western Blot的验证中，野生型和杂合子相比，理论上目的基因的表达量只是减少一半，甚至有些时候因为遗传补偿效应目的基因的表达量减少不了一半。毫无夸张地说，杂合子的敲除细胞系还不如做个敲低稳定细胞系来得靠谱。因此
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同源肿瘤移植小鼠模型（Syngenic）
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
疾病动物模型是研究人类疾病发生发展机制、药物筛选及疗效评价必不可少的工具，好的疾病动物模型可以加快新药的研发速度。你还在为不知道选择什么小鼠模型发愁吗？你还在为造模发愁吗？赛业生物《每周一鼠》栏目，每周更新，为大家讲解一个疾病小鼠模型的故事，希望对大家了解不同的疾病小鼠模型有所帮助。今天和大家见面的是同源肿瘤移植小鼠模型（Syngenic）。 同源移植小鼠模型（syngeneic model）是将同种背景来源的肿瘤细胞系接种至免疫健全的近交系小鼠。受体小鼠拥有完整的鼠源免疫系统，具有完全的免疫活性，且该免疫系统与同种移植肿瘤组织相容，能最大化模拟肿瘤微环境的真实生活情况，缺点是移植的小鼠组织可能无法完全代表临床情况下人类肿瘤的复杂性。 品系：通常为C57BL/6 or BALB/c 接种部位： ■ 皮下：方便直接观察肿瘤的生长情况 ■ 原位：模拟肿瘤生长的源环境 ■ 系统注射：腹腔或静脉注射，监测肿瘤的扩散情况 赛业生物可为您提供小鼠乳腺癌、肝癌、结肠癌、黑色素瘤、肺癌、脑癌等同系移植小鼠模型，并提供肿瘤生长曲线/体重曲线、血生化指标、病理检测（冰冻切片，石蜡切片，HE染色，免疫组化等）、流式、分子检测等多种药理评估手段，可满足您药物作用机制分析的多种需求。 精选同系移植小鼠模型案例 1. 小鼠结肠癌细胞CT26-WT皮下成瘤模型 图1. 小鼠结肠癌CT26.WT皮下移植肿瘤生长曲线 图2. CT26.WT细胞皮下成瘤实验。CT26.WT细胞以皮下注射的形式接种Balb/c 小鼠中，摸索不同浓度细胞接种量的成瘤体积。 赛业生物肿瘤研究一站式解决方案 赛业生物长期致力于基因编辑细胞和动物模型的建立，拥有经验丰富的专家团队和成熟稳定的技术平台，客户遍布全球几十个国家和地区。我们可为客户提供目的基因的表达调控的细胞模型和动物模型，以及相关的表型检测、功能验证、病理分析等一系列的服务，为广大科研工作者提供便捷的服务。 细胞水平研究，先需要建立基因表
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详解单克隆抗体的制备方法、原理、保存及质量鉴定
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
抗体的制备方法与原理 一、抗血清的制备 有了质量好的抗原，还必须选择适当的免疫途径，才能产生质量好（特异性强和效价高）的抗体。 （一）用于免疫的动物 作免疫用的动物有哺乳类和禽类，主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等，实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量，如一般制备抗r-免疫球蛋白抗血清，多用家兔和山羊，因动物反应良好，而且能够提供足够数量的血清，用于免疫的动物应适龄，健壮，无感染性疾患，**为///雄性，此外还需十分注意动物的饲养，以消除动物的个体差异以及在免疫过程中死亡的影响。若用兔，**用纯种新西兰兔，一组三只，兔的体重以2～3kg为宜。 （二）免疫途径 免疫途径有多种多样，如静脉内、腹腔内、肌肉内、皮内、皮下、淋巴结内注射等，一般常用皮下或背部多点皮内注射，每点注射0.1ml左右。途径的选择决定于抗原的生物学特性和理化特性，如激素、酶、毒素等生物学活性抗原，一般不宜采用静脉注射。 （三）佐剂 由于不同个体对同一抗原的反应性不同，而且不同抗原产生免疫反应的能力也有强有弱，因此常常在注射抗原的同时，加入能增强抗原的抗原性物质，以刺激机体产生较强的免疫反应，这种物质称为免疫佐剂。 佐剂除了延长抗原在体内的存留时间，增加抗原刺激作用外，更主要的是，它能刺激网状内皮系统，使参与免疫反应的免疫活性细胞增多，促进T细胞与B细胞的相互作用，从而增强机体对抗原的细胞免疫和抗体的产生。 常用的佐剂是福氏佐剂（Freund adjuvant）,其成分通常是羊毛脂1份、石腊油5份，羊毛脂与石腊油的比例，视需要可调整为1：2～9（V/V），这是不完全福氏佐剂，在每毫升不完全佐剂加入1～20mg卡介苗就成为完全佐剂。 配制方法：按比例将羊毛脂与石蜡油置容器内，用超声波使之混匀，高压灭菌，置4℃下保存备用。免疫前取等容积完全或不完全佐剂与免疫原溶液混合，用振
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Necroptosis与肿瘤免疫**
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
Necroptosis是一种调节性细胞死亡（regulated cell death，RCD)，具有坏死的基因分子特征，形态上类似于意外坏死（如细胞器膨胀、质膜破裂、细胞裂解和细胞内成分的泄漏），但是分子途径区别于意外坏死。Necroptosis与Apoptosis共用相同的细胞外受体复合物，但是下游分子途径不同。 Necroptosis与Apoptosis 外在细胞凋亡途径和和Necroptosis的多个成分是共同的，比如启动受体复合物，因为大多数正常细胞的“默认设置”是参与外在细胞凋亡，因为它不太可能发生炎症。 然而，当由于遗传、分子或药物干扰而未能引发外在细胞凋亡时，那么最初旨在触发细胞凋亡的促死信号，现在就会引发Necroptosis。 Necroptosis也是有细胞膜的死亡受体（TNFR1, DR4/5, FAS receptor）触发，也可由模式识别受体（pattern-recognition receptors，PRRs)启动。下游则由三个促Necroptosis分子调控：MLKL（ mixed lineage kinase domain-like pseudo kinase），RIPK1（receptor interacting serine/threonine kinase 1）, RIPK3 。这些分子可以作为潜在的生物标志物。 现在研究最多的诱导分子是TNF，其结合TNFR，启动复合物１的形成。复合物１包含RIPK1,TRADD,cIAP1/2,CYLD,TRAF2及其他蛋白，是细胞命运的重要检查点，根据环境（应激水平、刺激强度、信号振幅、细胞类型、疾病环境、药理学和生理情况），形成不同的复合物2（复合物2a,b,c），进而决定细胞不同命运：凋亡或坏死凋亡。 Necroptosis和Apoptosis信号通路之异同 Necroptosis与炎症 Necroptosis通过坏死体促进细胞肿胀和质膜坍塌，最终导致细胞内细胞器和生物分子溢出到细胞外环境。这些释放的细胞内生物分子，并不局限于坏死前产生或存在的危险信号，如损伤相关分子模式／DAMP（隐藏在正常细胞内，并执行非免疫功能；但在细胞死亡后释放以执行免疫功能，如趋化吞噬和免疫细胞激活）。 Necroptosis即使在坏死活动期间，也能在相当长的时间内维持转录和翻译活动。这使
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可电离化阳离子脂质DLin-MC3-DMA的图谱信息介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
说到脂质新材料DLin-MC3-DMA,我相信大家应该不会太陌生。DLin-MC3-DMA作为可电离化阳离子脂质在近可以说是热度很高，在RNA脂质体可是发挥了重要作用，本编文章AVT小编为您带来脂质新材料DLin-MC3-DMA的图谱信息与基本信息讲解！ DLin-MC3-DMA作为新型阳离子脂质—可电离化阳离子脂质，具有“低毒高效”的优势，它的化学名为4-(N,N-二甲基氨基)丁酸 (6Z,9Z,28Z,31Z)-庚三十碳-6,9,28,31-四稀-19-基脂，分子式C43H79NO2，是一种无色至淡黄色的油状液体，pKa=6.44。 也许有的小伙伴还不熟悉DLin-MC3-DMA这款产品，小编把DLin-MC3-DMA的产品信息整理了一下，请查收！ 1、产品名称：DLin-MC3-DMA 2、化学名称：4-(N,N-二甲基氨基)丁酸（二亚油基）甲酯 (6Z,9Z,28Z,31Z)-heptatriacont-6,9,28,31-tetraene-19-yl4-(dimethylamino)butanoate 3、分子式：C43H79NO2 4、生产商：艾伟拓（上海）医药科技有限公司 5、CAS号：1224606-06-7 6、用途：阳离子脂质体 7、性状：无色至淡黄色油状液体 8、纯度：≥98% 9、溶解性：不溶于水，易溶于DMSO、甲醇、乙醇 10、分子量：642.09 11、保存条件：-20℃ 12、注意事项：避免与强酸、强碱、强氧化性物质接触 2018年全球首个用于**家族性淀粉样多发性神经病变的siRNA脂质体产品Onpattro在美上市，成功打开了沉默细胞基因药物的大门。 ▲Onpattro Onpattro中运用的阳离子脂质材料DLin-MC3-DMA也开始备受关注。 可电离的阳离子脂质体DLin-MC3-DMA是一种高效的siRNA运输载体,它能有效封装相应的siRNA并使其进入细胞质内,然后两者分离,siRNA发挥其功效。 ▲ Onpattro中各组分的具体用量 在这之前，DLin-MC3-DMA在国内市场仍是一片空白。AVT基于深耕磷脂、脂质体、脂肪乳方向多年的资源和经验，推出新产品DLin-MC3-DMA。为阳离子脂质材料提供了一种“低毒高效”选择。 重头戏来了，DLin-MC3-DMA的图谱信息是怎样的？接着往下看！
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Countstar Rigel荧光成像法嫁接FCS软件实现细胞周期、凋亡检测研究
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
在细胞实验中，细胞活率、浓度、凋亡、周期等均是细胞检测的重要部分。Countstar Rigel荧光细胞分析仪集合了定焦专利技术、高清成像系统、一体机、触屏式操作、合规性等多方面优势，功能强大、操作便捷、重复性高深受科研工作者的喜爱。 图1、Countstar Rigel 采用AO/PI、台盼蓝方法的准确性和稳定性 但是大家对Countstar Rigel荧光细胞分析仪传统的印象还停留在细胞计数功能上，近年来随细胞**技术的突飞猛进，国外De Novo公司开发的对细胞荧光图像进行量化分析的软件FCS，为细胞各类实验的检测分析提供了新的手段，同时Countstar Rigel优异的软硬件基础也为拓展其新的应用搭载上了这辆顺风车。 图2、De Novo公司开发的FCS软件 传统的周期、凋亡检测借助流式细胞仪，通过单个细胞的荧光信号转化为脉冲电信号进行数据的统计及分析，而Countstar Rigel自身的荧光成像法嫁接上FCS软件之后，通过细胞荧光图像量化分析也可以得到细胞周期、凋亡的数据。相比于流式的方法这种荧光方法可以看到每个细胞的荧光成像，为我们数据的分析提供可靠的依据。 图3、Countstar Rigel检测细胞凋亡单个细胞荧光成像 传统的流式方法虽广为流传，但是流式细胞仪的成本昂贵，一般是好几个中心实验室平台公用一台，然而众多使用者造成供不应求，实验需要根据仪器的空闲度来调节，而且仪器维护成本高，需要定期用专用清洗液、鞘液等，而我们Countstar Rigel可以借助FCS解除流式的困境，同样可以得到类似流式的数据。 图4、Countstar Rigel 结合FCS得到的细胞周期结果 Countstar Rigel与流式细胞仪检测细胞周期和凋亡时，可公用周期检测试剂盒、凋亡检测试剂盒。Countstar Rigel为周期和凋亡的数据分析提供了分析模板，采用Countstar Rigel检测周期或凋亡后，到处FCS格式的数据，导入FCS软件内即可借助粗略的分析模板根据样品的实际情况微调得到最终的分析结果，如图5所示，每部分细胞具体的荧光情况均可以看到，圈门的过程中我们
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台盼蓝、AO/PI荧光计数、明场计数染色法区别及所适用细胞样品类型
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
在细胞实验中，细胞浓度、活率的检测是最基础的一步，不同类型的细胞适用不同的染色方法。 最常见的计数方法是台盼蓝染色原理，这种跨膜染料通过观察活死细胞形态来判断细胞活率，中心透亮未着色的为活细胞，被着色呈现实心的为死细胞。近年来随着细胞**行业的进步，台盼蓝染色原理已经不能满足复杂的细胞样品的计数，比如原代细胞中的碎片、PBMC中残留的红细胞血小板等杂质碎片、培养后期的细胞，尤其在干细胞、CAR-T、NK等细胞**领域台盼蓝计数方法的缺陷尤为突出。 图1 台盼蓝染色原理检测不同阶段的细胞 随之衍生出的AO/PI荧光计数方法（前几期有普及过），采用核酸特异性标记原理，AO（吖啶橙，小分子染料，488激发，525发射）标记细胞核酸发绿色荧光，PI（碘化丙啶，大分子染料，535激发，600发射）标记死细胞核酸发红色荧光，根据活死细胞荧光不同直接排除杂质碎片的干扰，弥补了台盼蓝的不足。AO/PI荧光计数方法在干细胞、CAR-T、NK等细胞**领域广受科研工作者的喜爱。 图2 台盼蓝和AO/PI荧光方法检测不同阶段的细胞 针对常规传代培养的细胞和比较复杂的细胞都有了相应的计数方法，帮助我们准确分析细胞的浓度、活率、平均直径等等，还有一类细胞是需要借助纸片微载体培养的，这类细胞的生长成球状，很难实现在线计数，需要借助专门的裂解液，使细胞裂解后得到裸核，通过检测裸核实现细胞浓度的检测，但是这种裂解液对台盼蓝和荧光试剂均有影响，会使台盼蓝团成絮状物，使AO/PI的荧光发生猝灭，这种细胞的裸核计数用最经典的台盼蓝和AO/PI荧光方法均无法实现。 图3 裂解后的裸核台盼蓝染色视野和AO/PI荧光染色视野 面对这种细胞我们Rigel除了台盼蓝活率计数、AO/PI荧光计数法，还有第三种计数方法，细胞计数—明场计数法，这种方法针对只需要检测细胞的生长浓度，不需要检测活率的实验，对于上述提到的纸片微载体培养后裂解的细胞，不需要染色液直接细胞样品上样即可实现细胞浓度计数。 图4 细胞裂
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猪胆酸在代谢疾病预防与**中的作用
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
糖尿病，一旦患上即终身难逃的慢性疾病，患者需要定时测血糖，长期控制饮食、服用降糖药或注射胰岛素以保持血糖稳定，避免糖尿病并发症的发生。在这个过程中，糖尿病患者的身心都遭受漫长的“折磨”。为了找到更好地预防及**糖尿病的方法，科学家们不断对其进行研究，在好吃懒动的猪身上有了新发现。 猪长得胖又能吃，却不易得代谢性疾病，对饮食诱导的糖尿病有着极强的抵抗力，《本草纲目》也曾记载：猪胆主治“消渴”（糖尿病）。 受此启发，香港浸会大学表型组学研究中心和中医药学院教授、麦特绘谱/绘云生物创始人贾伟教授带领团队进行了深入研究，先后在两大期刊Cell Metabolism 以及Nature Communications上发布猪胆酸与糖尿病之间的联系、背后**机制的研究成果。 这项研究成果对糖尿病的预测和**具有重大意义，将为饱受糖尿病困扰的人们带来新的希望，吸引了新华社、中新网、北京卫视、北京新闻广播、上海广播电视台、第一财经、新浪、搜狐等多家国内重量级媒体的关注。 近日，新华社针对猪胆酸与糖尿病的科研成果，向贾伟教授进行了专题采访： 为什么猪不容易得糖尿病？ “我们给猪打了药，药让猪的肝脏少生产了胆汁酸20%至30%，猪一般很不容易血糖升高，但它血糖很快就升高了20%至30%。我们在升高血糖的猪身上补回胆汁酸后，血糖就下降了，回到原来的水平。“ 贾伟教授在采访中讲到，经过动物实验初步判断，猪之所以对高脂、高碳水化合物饮食引起的糖尿病有非常强的抵抗作用，与它体内胆汁酸总量高、胆汁酸的结构是有关系的。 进一步研究发现，在猪的胆汁酸中有一类小分子代谢物的含量近80%，学界称为猪胆酸及其衍生物（统称猪胆酸HCAs），其在人的胆汁酸中只有2%至3%。 将猪胆酸与L-细胞（肠道内分泌细胞）培养，结果显示在50微摩尔的浓度下，相比其他种类的胆汁酸，猪胆酸能最有效刺激胰高血糖素样肽-1（GLP-1，“L-细胞”所制造的一种激素）的分泌。这一结果说明，猪胆酸能够通过刺激GLP-1的分泌增加
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药用辅料蛋黄卵磷脂的不同生产工艺介绍及其区别
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
蛋黄卵磷脂相信大家都已经很熟悉了，作为一种以磷脂酰胆碱为主要成分的多种磷脂的混合物，被广fan使用，但你知道它的生产工艺有哪些吗？本编文章就由AVT小编来给大家讲解一下蛋黄卵磷脂的生产工艺吧！ 精制蛋黄卵磷脂的生产工艺目前主要有柱层析法、沉淀法。 柱层析法是一种常见的传统的分离方法，它以填料选择多样性以及分离效果的优越性，成为蛋黄卵磷脂主要的分离手段之一。柱层析的填料主要有树脂、硅胶以及氧化铝。 沉淀法提纯卵磷脂又分为溶剂法、金属离子法，溶剂法提纯优于金属离子法，是最先用于卵磷脂提纯的技术；金属离子沉淀法主要是利用金属离子与卵磷脂的特异性结合实现的。 除以上所述，近几年热门的生产工艺还主要有膜分离法、超临界二氧化碳法、酶法等，但是由于成本较高、对仪器设备要求高等因素，暂未得到广fan应用。 精制蛋黄卵磷脂的生产工艺多种多样，尤其近几年新兴的工艺增加了精制蛋黄卵磷脂的提取率，但是，广fan使用和zui具实际生产应用性的还是有机溶剂萃取法。不过，溶剂萃取法适合粗提，但是在溶剂萃取法的基础上加入一些新技术辅助，如微波辅助、超声波辅助等辅助萃取磷脂，可提高溶剂提取的效率。 另外一种重要的提纯分离方式，柱层析法，该法虽然可得到含量在90%左右的高纯度磷脂酰胆碱，但是柱层析法分离周期长，负载量低，而且要用到许多有一定毒性的有机溶剂，产品中易有溶剂残留都是这种方法的缺点。 近几年的热门方法—超临界二氧化碳法，提纯蛋黄卵磷脂的萃取率可高达89.2%，虽然超临界萃取技术需要条件较高，但是因其简单高xiao、无毒无害等完全符合当前绿色环保技术的发展趋势，也是蛋黄卵磷脂生产的一个发展方向。 中文名称：蛋黄卵磷脂 商品名：PL-100M 化学名称：蛋黄卵磷脂 英文化学名称：Egg yolk lecithin CAS号：93685-90-6 备案登记号：F20190001254（A） DMF号：15449 如您对AVT这款备案登记号为F20190001254（A）蛋黄卵磷脂PL-100M感兴趣的话，欢迎来电咨
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肿瘤**：靶向天然免疫
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
先天免疫细胞，如树突细胞(DCs)，通过模式识别受体(PRRs)的病原体相关分子模式及损伤相关分子模式（PAMP/DAMPs），识别病原体及ICD等释放的癌症新生抗原等，以发现早期肿瘤。 这些机制触发促炎程序，释放促炎细胞因子、趋化因子和I型干扰素，并伴随DC细胞成熟和向淋巴结迁移，参与适应免疫系统，启动和激活抗原特异性T细胞。T细胞在趋化因子梯度的吸引下，浸润到肿瘤床，识别其同源抗原后，介导肿瘤消除。 肿瘤免疫循环（文献1） 其他先天免疫细胞，如巨噬细胞和自然杀伤细胞，分别通过吞噬作用和细胞毒性机制直接杀死肿瘤细胞来消除肿瘤。 天然免疫激活药物 Toll-like Receptors (TLRs)激动剂及拮抗剂 TLRs是在多种细胞类型中发现的高度保守的跨膜和细胞内PRRs，在先天免疫细胞监视微生物病原体中起着关键作用。 在人类中，已经鉴定了10个TLRs，它们表达于T细胞、B细胞、APC以及多种非免疫细胞，包括上皮细胞和内皮细胞。TLRs定位在细胞的两个不同区域：细胞膜和细胞内小体。TLR1、2、5和6存在于质膜，TLR3、7、8和9表达于细胞内小体，而TLR4两个位置都有。 TLRs肿瘤免疫双重作用 抗肿瘤活性 TLRs在肿瘤微环境表达于免疫细胞和肿瘤细胞。比如化疗等引起DMAPs，可以激活TLR4等导致DC成熟，激活TLR9激活pDC释放1型干扰素，激活TLR7/8诱导M2型TAM向抗肿瘤的M1型TAM极化。此外TLRs激活可以抑制Treg功能，增强CD8+T的存活，增殖和细胞因子产生。 促进肿瘤 NF-κB轴的激活上调抗凋亡因子（Bcl-XL、Bcl-2、生存素） 而且上调基质金属蛋白酶（MMPs），导致细胞外基质降解，TLR4的激活会导致MMP2和β1-整合素过度表达，TLR9的提高了乳腺癌中的MMP13。 TLR2、TLR4和TLR9诱导PG-E2和COX-2的增加，TLR4诱导EGFR磷酸化，是TLRs介导血管生成中最重要的机制。 激活TLR可刺激肿瘤细胞或肿瘤浸润细胞，产生抑制细胞因子和趋化因子，不仅抑制免疫细胞，而且吸引更多抑制性免疫细胞进
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走近阿斯利康PD-1/CTLA-4双抗研发之路
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
英国制药巨头阿斯利康（AstraZeneca）公司在genOway的PD-1/CTLA-4双免疫检查点人源化小鼠（赛业生物已与genOway达成战略合作伙伴关系并引进该小鼠）上测试了一款新型的同时靶向PD-1和CTLA-4的单价双特异性抗体MEDI5752，研究结果发表在了Cancer Discovery上。 背景 免疫检查点疗法是近来肿瘤**的热门领域，其中，靶向PD-1、PD-L1和CTLA-4的抑制剂都已获批上市，并取得了显著成果。此外，PD-1和CTLA-4抑制剂的联用也在包括黑色素瘤、肾癌、非小细胞肺癌在内的多种肿瘤中表现出了显著增强的抗肿瘤效果。但其中，CTLA-4抑制剂的免疫相关不良事件（(immune-relatedadverse events，irAEs）也一直是个令人头疼的问题，包括常见的胃肠道毒性、皮肤毒性和肝脏毒性等。为了解决这个问题，AstraZeneca公司研发了一款同时靶向PD-1和CTLA-4的单价双特异性抗体MEDI5752。MEDI5752是一种能优先抑制PD-1+ T细胞上CTLA-4的新型免疫抑制剂。 与传统的PD-1/CTLA-4双抗不同，MEDI5752能引发对PD-1的快速内化和降解，并能优先定位和聚积在肿瘤部位。MEDI5752目前正处于phase I 阶段(NCT03530397)，并在两名晚期实体瘤患者中观测到了部分缓解（partial response, PR）。 此外，值得一提的是，AstraZeneca有一款最早由辉瑞 （Pfizer）公司研发是anti-CTLA-4全人源化单克隆抗体Tremelimumab。但由于Tremelimumab在临床试验中一直表现不佳，直至目前为止，还没有获批**任何癌症。AstraZeneca也在尝试将Tremelimumab与其他免疫检查点抑制剂药物联用，例如，Tremelimumab与Imfinzi（anti-PD-L1）联用来**非小细胞肺癌（III期NEPTUNE试验失败）、晚期膀胱癌（III期DANUBE试验失败）、肝细胞癌（III期HIMALAYA试验进行中）等癌症。AstraZeneca将Tremelimumab和一个anti-PD-1 mAb进行组合与改造，构建了MEDI5752。 CTLA-4在多种实体瘤TILs中的PD-1+ T细胞上表达富集 研究人员分析了来自4种肿瘤的44个肿瘤样本：结直肠癌（CRC）、非
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免疫**热门靶点CD39
作者：德尔塔 日期：2022-04-14
想调整研究方向，获得学术研究突破口？想获得论文选题思路，提高发文命中率？你需要了解学科发展态势和未来走向！赛业生物专栏《Gene of the Week》每周二会根据热点研究领域介绍一个基因，详细为您介绍基因基本信息、研究概况和应用背景等，助您保持学术研究敏锐度，提高科学研究效率，期待您的持续关注哦。今天我们要讲的主角是免疫研究热门基因之CD39。 基因基本信息 备注：标有√的意为赛业红鼠资源库有该种保存状态的小鼠 CD39的功能简介 CD39，也称为膜外三磷酸腺苷二磷酸水解酶-1（Ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolase-1），由ENTPD1基因编码而成。CD39是一个跨膜蛋白，具有两个跨膜结构域和一个胞外结构域。CD39的活性中心在胞外结构域上，但有研究表明两个跨膜结构域之间的互相作用也会影响酶活性[1]。功能上，CD39能与胞外ATP（extracellular ATP，eATP）结合，并将其水解为AMP；另一种胞外核酸酶CD73则会将AMP水解为腺苷（adenosine，ADO）。在ATP-ADO通路中，CD39是eATP水解的限速酶，而CD39是AMP水解的限速酶（图1）。此外，CD39也能将水解ADP，但效率较低[3]。 图1. TME中的ATP-ADO通路[2]。 在肿瘤微环境（tumour microenvironment，TME）中，累积的eATP能通过P2嘌呤受体 (P2XRs和P2YRs) 刺激细胞炎症反应，或通过胞外核苷酸酶CD39和CD73被降解为免疫抑制性的ADO。在缺氧的TME中，CD39和CD73在多种细胞类型中广泛表达，且表达量上调。在特定组织或肿瘤类型中，ADO也能通过其它途径产生，例如碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）介导的ATP分解，或由CD38、CD203a 和CD73对NAD+进行顺序分解代谢产生。此外，高浓度的胞外ADO能通过腺苷受体(A2A、A2B等）促进TME中的免疫抑制性微环境，且胞外ADO浓度由腺苷脱氨酶（adenosine deaminase，ADA）调控，ADA能将ADO转化为肌苷。 CD39的表达 CD39在多种免疫细胞和非免疫细胞（e.g., 内皮细胞和成纤维细胞）中均有表达，且CD39和其
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