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如何配制TAE缓冲液
作者：德尔塔 日期：2022-03-31
如何配制TAE缓冲液 1.TAE缓冲液简介 TAE是非常常见的电泳缓冲液之一，用于DNA的琼脂糖凝胶分析。 TAE缓冲液包含有Tris，乙酸和EDTA。 Tris-acetate提供导电性并可以保持pH值。 TAE缓冲液中的EDTA通过螯合二价阳离子（Ca2 +，Mg2 +）来抑制金属依赖性核酸酶，从而在运行中保护DNA免受核酸酶的影响。 TAE缓冲液的缓冲能力低于TBE，因此应避免将其用于长时间和重复的电泳。 TAE缓冲液适用于需要使用DNA修饰酶修饰凝胶洗脱的DNA片段的应用， 在这种情况下，应避免使用TBE缓冲液，因为TBE缓冲液的硼酸盐会抑制许多酶（例如DNA连接酶）。 配制TAE缓冲液需要的材料 试剂种类：Tris碱（C4H11NO3，分子量：121.14）、冰醋酸（CH3COOH，分子量：60.05）、0.5 M EDTA储备溶液（pH 8.0）、去离子水/ Milli-Q水。 器具：一次性量筒、锥形烧瓶/烧杯、磁力搅拌器。 50X TAE缓冲液（原液）的组成 2.0 M醋酸三乙酸 0.05 M EDTA pH 8.2 – 8.4（在25°C下） 1X TAE缓冲液的组成（工作浓度） 40毫米醋酸三乙酸 1毫米EDTA pH 8.2 – 8.4（在25°C下） TAE缓冲液的制备 配制步骤1： 称量出242克Tris碱，并将其转移至2 L烧杯/锥形烧瓶中，加入750 ml去离子水/ Milli-Q水，混合直至所有Tris碱完全溶解。 配制注意事项：可以使用玻璃移液器手动摇动以混合成分。磁力搅拌器使溶解过程自动化且方便。 配制步骤2： 加入100 ml的0.5 M EDTA溶液和57.1 ml的冰醋酸,再次混合溶液,如果需要可将pH调节至8.3。 注意事项：由于pH值取决于温度，因此我们建议在室温（25°C）下调节溶液的pH值。 步骤3： 用去离子水/ Milli-Q水将溶液体积调节至1000 ml，再次混合溶液。 可选：可以过滤溶液以除去所有不溶的物质。 步骤4： 通过高压灭菌（液体循环中从121-124°C在15磅/平方英寸（psi）下20分钟）灭菌溶液。 可以通过0.22μ的过滤器对溶液进行灭菌。过滤除菌可去除所有大于0.22μ的
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分子生物学试剂（简介,概念,常用试剂）
作者：德尔塔 日期：2022-03-31
分子生物学试剂简介： 分子学生物试剂是细胞内活性分析所需的物质，通常在样品制备过程中使用，高质量的混合物可以有效地处理细胞成分，从而提高显微镜观察的可行性。 分子生物学概念： 分子生物学是生物科学的一个分支，涉及细胞各种系统中生物分子之间的生物学活性的分子基础，包括DNA，RNA，蛋白质及其生物合成之间的相互作用以及这些相互作用的调控。分子生物学过程使用的试剂也可以统称为为分子试剂。以下是以下常用分子缓冲液试剂介绍： 常用的分子学生物试剂（去离子水溶液试剂）方法介绍： 1mol/L亚精胺（Spermidine）溶液: 将亚精胺2.55g溶解于足量的去离子水中，最终溶解体积为10ml，然后分装成易于存贮的容量后存于-20℃条件下。 1mol/L精胺（Spermine）溶液：溶解3.48g精胺于足量的去离子去离子水中，使终体积为10ml，分装成小份贮存于-20℃条件下。 10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）溶液：将77.1g乙酸胺溶解于去离子水中，加去离子水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜或针式滤器过滤除菌。 10mg/ml牛血清蛋白(BSA）溶液：加100mg的牛血清蛋白（第五组份或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml去离子水中（为减少变性， 必须将牛血清白蛋白加入去离子水中，而不是将去离子水加入蛋白），容器盖盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加去离子水定容至10ml，然后分装成小份贮存于-20℃条件下。 1mol/L二硫苏糖醇（DTT）溶液：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml去离子水，按照存储条件分装成所需规格贮存于-20℃条件下，或量取100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的去离子水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。 8mol/L乙酸钾（potassium acetate）溶液：溶解78.5g乙酸钾于足量的去离子水中，加去离子水定容至100ml。 1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g氯化钾于足量的去离子水中，加去离子水定容至100ml。 3mol/L乙酸钠（sodium acetate）：溶解40.8g的三去离子水乙酸钠于约9
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如何配制MOPS缓冲液
作者：德尔塔 日期：2022-03-31
如何配制MOPS缓冲液 MOPS是MOPS缓冲液中缓冲化合物的简称，MOPS中文全称是3-（N-吗啉代）丙烷磺酸，pKa为7.20，是许多需要中性pH的生物系统的良好缓冲剂，HEPES是化学上相似的pH缓冲化合物。 1、10x MOPS缓冲液配制的原料 83.7克MOPS；分子量209.3 g / mol 13.6克醋酸钠，三水合物； MW 136.1 g / mol（注意：无水NaAc仅82 g / mol或8.2g） 3.7克EDTA，二水合二钠； MW 372.24 g / mol（再次检查所储存盐的MW） 2、MOPS缓冲液的配置步骤 加入800毫升无核酸酶的蒸馏水；混合溶解； 用NaOH调节至pH 7（在无核酸酶的蒸馏水中制备）； 加去离子水至1000毫升的最终体积。 3、MOPS缓冲液的注意事项 过滤消毒或高压灭菌 室温保存 避光、如果溶液较暗（黄色就可以），请勿使用。 4、最终浓度为10x 400 mM MOPS（缓冲） 100毫米NaAc 10 mM EDTA（Mg2 +螯合抑制核酸酶） 5、MOPS缓冲液的稳定性 与通常的看法相反，MOPS缓冲液具有足够的热稳定性，可以进行高压灭菌。溶液将变为黄色，但这不会影响其缓冲能力。例如：Farrell RNA方法，稻草色的缓冲液很好，但不要使用较深的缓冲液。 6、MOPS缓冲液的应用领域 RNA琼脂糖凝胶 NuPAGE电泳 bis-Tris SDS-PAGE
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4大类常用生物类缓冲液配制方法
作者：德尔塔 日期：2022-03-31
一、通用缓冲液 0.5 M EDTA缓冲液，pH 8：适用于500 mL 将93.05 g Na2•EDTA•2H2O（二水合二钠）重悬于约400 mL 双蒸水（ddH2O）中 添加约9 g固体NaOH 所有NaOH溶解后，用10 N NaOH缓慢调节pH值 用双蒸水（ddH2O）将体积调至500 mL 注意：EDTA在pH达到8之前不会完全溶解。 1 M HEPES缓冲液：1 L 将238.3 g HEPES（游离酸）溶于800 mL 双蒸水（ddH2O） 用10 N NaOH将pH调节至所需值 用双蒸水（ddH2O）将体积调至1 L 50万MES缓冲液：1升 将97.6 g MES（游离酸）溶于800 mL 双蒸水（ddH2O） 用10 N NaOH将pH调节至所需值 用双蒸水（ddH2O）将体积调至1 L 1 M MOPS缓冲液：用于1 L 将209.3 g MOPS（游离酸）溶于800 mL 双蒸水（ddH2O） 用10 N NaOH将pH调节至所需值 用双蒸水（ddH2O）将体积调至1 L 5 M NaCl溶液：用于1 L 将292.2 g NaCl溶解在1 L 双蒸水（ddH2O）的最终体积中 10 M NaOH（= 10 N NaOH）：500 mL 将200 g NaOH溶解在最终体积为500 mL 双蒸水（ddH2O）中 1 M Tris缓冲液：1 L 将121.1 g Tris碱溶于800 mL 双蒸水（ddH2O） 用浓盐酸调节pH至所需值 用双蒸水（ddH2O）将体积调至1 L 琼脂糖凝胶电泳缓冲液50x TAE：1 L 将242.2 g Tris碱溶于约600 mL的双蒸水（ddH2O） 缓慢加入57.1 mL冰醋酸 加入100 mL 0.5 M EDTA，pH 8 用双蒸水（ddH2O）将体积调至1 L 6x DNA上样缓冲液：100 mL 在100 mL量筒中称取60 g甘油 加入12 mL 0.5 M EDTA，pH 8 添加10毫克溴酚蓝 用双蒸水（ddH2O）将体积调至100 mL 10x DNA上样缓冲液：100 mL 在100 mL量筒中测量20 mL 50x TAE 添加40克蔗糖 添加10毫克溴酚蓝 用双蒸水（ddH2O）将体积调至100 mL SDS-PAGE缓冲液1.5 M Tris，pH 8.8（用于分离凝胶的储备缓冲液）1 L 将181.65 g Tris碱溶于约800 mL 双蒸水（ddH2O） 用浓盐酸调节pH值至8.8 用双蒸水（ddH2O）将体积调至1 L注意：在进行最终的pH调节之前，
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缓冲液基础知识分享
作者：德尔塔 日期：2022-03-31
化学上的缓冲溶液，通常包含酸和碱或盐，易于保持恒定的氢离子浓度。 离子是丢失或获得一个或多个电子的原子或分子。 常见缓冲液的例子：乙酸（CH3COOH）和乙酸钠的溶液， 在水溶液中，乙酸钠完全分解成钠（Na +）和乙酸根（CH3COO-）离子。 缓冲溶液的氢离子浓度由以下表达式给出： 其中Ka是乙酸的电离常数，括号中的表示是各物质的浓度。缓冲溶液中氢离子的浓度取决于存在的乙酸和乙酸根离子（或乙酸钠）的相对含量，称为缓冲比。添加酸或碱会引起乙酸和乙酸根离子浓度的相应变化，但是只要所添加物质的浓度比各个缓冲液成分的浓度小，新的氢离子浓度就会保持接近原始值。 可以通过改变缓冲液比例并选择具有适当固有强度的酸来制备具有不同氢离子浓度的缓冲液。常用的缓冲溶液包括磷酸，柠檬酸或硼酸及其盐缓冲液。 因为酸和碱往往会促进广泛的化学反应，所以通过使用缓冲溶液在溶液中维持一定水平的酸度或碱度对于许多化学和生物学实验都是必不可少的。许多生化过程仅在特定的pH值下发生，而这些pH值由体内存在的天然缓冲剂维持。
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如何配制PMSF缓冲液？
作者：德尔塔 日期：2022-03-31
PMSF缓冲液介绍 在生物化学中，PMSF（苯基甲磺酰氟或苯基甲基磺酰氟）是一种丝氨酸蛋白酶抑制剂，通常用于制备细胞裂解液。 PMSF并不抑制所有丝氨酸蛋白酶，它在水中迅速降解，储备溶液通常由无水乙醇，异丙醇，玉米油或DMSO组成。 当PMSF的浓度在0.1 – 1 mM之间时，会发生蛋白水解抑制作用。 在水溶液中的半衰期很短（pH = 7时为110分钟，pH = 8时为35分钟）。 PMSF特异性结合丝氨酸蛋白酶中的活性位点丝氨酸残基，但不结合蛋白中的任何其他丝氨酸残基。 由于PMSF在活性丝氨酸残基上与酶共价结合，因此可以通过X射线晶体学观察该复合物。 因此，它可以用作化学标记，以鉴定酶中必要的活性位点SER。 Enzyme(active) Ser-O-H + F-SO2CH2C6H5 ->EnzymeSer-O-SO2CH2C6H5 + HF 丝氨酸蛋白酶+ PMSF->不可逆酶-PMS复合物+ HF PMSF是一种细胞毒性化学物质，只能在通风橱内处理， 该化合物的LD50小于500 mg / kg。 配制PMSF（10 mM），10 ml： 量取17.4 mg PMSF 加入异丙醇至10ml并溶解。 无需过滤消毒。 分装并储存在–20°C。 注意事项：PMSF在水溶液中不稳定，半衰期约为30分钟， 在使用前立即添加溶液。
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如何制作碘化钾溶液
作者：德尔塔 日期：2022-03-31
制备的碘化钾（KI）溶液只能通过处方获得，任何人都可以在化学药品供应商（甚至是一些较大的照片供应网点）购买碘化钾，并轻松混合自己的碘化钾（KI）解决方案，其效果几乎与片剂一样。 坐在高中\大学科学实验室中等待KI供应，可以保护数百名学生和当地居民！一瓶500克的KI，现在已经在他们的许多架子上，可以提供3846例成人每日剂量或7692例儿童（3-12岁）甲状腺阻断剂量！社区领袖需要团结起来 通常制作两种碘化钾（KI）缓冲液: 饱和、不饱和碘化钾。 使用饱和的碘化钾（KI）溶液，要向固定量的水中添加一点碘化钾（KI），直到某些晶体或颗粒不会溶解。即使剧烈混合，它们也将在溶液底部可见。现在，当该溶液不再吸收和溶解碘化钾（KI）时，它就被视为饱和溶液。 要制备饱和的碘化钾溶液，请在瓶中装满约60％的结晶或颗粒状碘化钾。（一个2液盎司的瓶子，由深色玻璃制成，顶部有坚固的非金属螺帽，大约需要2盎司的结晶或颗粒状碘化钾来填充容量约为60％的2液盎司的瓶子。）接下来，将安全的室温水倒入瓶子中，直至达到90装满％，然后将瓶盖紧紧并用力摇晃至少2分钟，其中一些固态碘化钾应永久不溶于瓶底；这证明溶液已饱和。 使用各种普通家用药物滴管进行的实验确定，一滴碘化钾饱和溶液中含有28至36毫克碘化钾。” 上例如，将26克碘化钾USP恰好混合并溶解在一个1升的水中，例如，将产生1000毫升碘化钾溶液，每5毫升碘化钾（KI）溶液的浓度为130毫克。每1000毫升（1升）中有5毫升中有200份。使用普通的带刻度滴管可以轻松，准确地量出5毫升。 5毫升也等于一茶匙。
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SSC缓冲液介绍
作者：德尔塔 日期：2022-03-31
SSC缓冲液的适用范围 20x SSC缓冲液旨在（稀释后）用于洗涤； 原位杂交应用（CISH或FISH）中的步骤。 备注：该缓冲液只限于在科学实验中使用，不能用于人体或医疗过程中。 2.安全注意事项与处置安全注意事项与处置 使用前请阅读操作说明； 到期后请勿使用试剂； 避免与任何试剂交叉污染和微生物污染； 避免与试剂直接接触，采取适当的防护措施； 措施（使用一次性手套，防护眼镜和实验服）； 如果试剂与皮肤接触，请立即用大量的清水进行冲洗； 切勿用嘴吸移溶液； 试剂的处置必须按照当地环保规定进行处理。 11 20x SSC溶液是由3 M氯化钠和300 mM柠檬酸三钠二水合物，pH 7.0。 20x SSC缓冲液是足以用于2000 ml 1x SSC溶液。 SSC缓冲液的存储 SSC缓冲液必须存储在RT中。 如果适当条件下存储，SSC缓冲液将在不损失性能的情况下运行，至少直到标签上印刷的有效期为止。 SSC缓冲液使用介绍 20x SSC解决方案是20x浓缩液，需要稀释使用； 在根据用户需要使用原位杂交程序（FISH或CISH）之前。 20x SSC缓冲液可以根据下表进行稀释： 通过上游和下游实验步骤，即组织固定，预处理，DNA探针变性，杂交，洗涤和检测。 为了获得特别用户友好的性能，建议您使用ZytoVision的ZytoDot，ZytoFast和/或ZytoLight ISH探针。ZytoVision的探针和ISH系统用于确认20x SSC解决方案的适用性。
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RIPA裂解缓冲液介绍
作者：德尔塔 日期：2022-03-31
关于RIPA裂解缓冲液介绍 RIPA代表放射免疫沉淀测定法，缓冲液是常用的裂解液，用于裂解细胞和组织，同时防止蛋白质降解。 因此，RIPA裂解缓冲液可用于提取蛋白质以进行蛋白质分析，例如Western blot或ELISA实验。 RIPA裂解缓冲液通过苛刻的去氧胆酸钠和SDS以及较温和的NP-40的作用来溶解细胞膜和核膜。 这些去污剂的作用导致脂质膜的分解以及蛋白质与蛋白质的相互作用，从而在溶液中释放蛋白质。 不要忘记在RIPA裂解缓冲液中添加蛋白酶抑制剂，以防止任何蛋白酶过早地消化蛋白质！ RIPA裂解缓冲液配方 以下配方可用于制备100 mL RIPA裂解缓冲液。 试剂 量 最终浓度 Sodium chloride (5 M) 3 mL 150 mM Tris-HCl (1 M, pH 8.0) 5 mL 50 mM Nonidet P-40 1 mL 1 % Sodium deoxycholate (10 %) 5 mL 0.5 % SDS (10 %) 1 mL 0.1 % ddH2O Up to 100 mL 如何制作RIPA裂解缓冲液 量出3 mL氯化钠（5 M），5 mL Tris-HCl（1 M，pH 8.0），1 mL Nonidet P-40、5 mL脱氧胆酸钠（10％），1 mL SDS（10％）并加入一个100毫升的瓶。 用ddH2O加满Duran瓶至100 mL。 通过将磁跳蚤添加到瓶子中并放在磁力搅拌器上来混合试剂。 [可选]在使用RIPA裂解缓冲液之前，将所需量的蛋白酶抑制剂（例如PMSF）添加到溶液中。 RIPA裂解液的储存： 将RIPA裂解缓冲液在冰箱中（+ 2oC – 8oC）存放相对较短的时间（几周）。 RIPA裂解缓冲液中的去污剂可能会随着时间的推移而重新沉淀。如果发生这种情况，请加热溶液（37oC）并混合以溶解组分。 对于更长的存储时间，将RIPA裂解缓冲液等分并存储在冰箱（-20oC）中。用温热（37oC）解冻等分试样，然后将各成分混合回溶液中。解冻后请勿重新冻结。 安全注意事项： 在RIPA裂解缓冲液的制备中处理去污剂（去离子P-40，脱氧胆酸钠和SDS）时要小心，
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WB实验常用试剂（WB实验技术介绍,WB实验常用试剂）
作者：德尔塔 日期：2022-03-31
WB实验技术介绍 WB实验是Western blot（有时称为蛋白质免疫印迹）是分子生物学，免疫遗传学和其他分子生物学学科中广泛使用的分析技术，用于检测组织匀浆或提取物中样品中的特定蛋白质。 简而言之，样品进行蛋白质变性，然后进行凝胶电泳。 WB实验常用生物化学试剂 序号 名称 品牌 单位 等级 规格 单价 1 甘氨酸（Glycine） Biofount 瓶 AR,99.5% AR,99.5% 500g 66 2 Tris Biofount 瓶 AR,99.9% AR,99.9% 500g 126 3 丙烯酰胺 Biofount 瓶 AR,99.0% AR,99.0% 500g 90 4 N,N'-亚甲基双丙烯酰胺 Biofount 瓶 AR 99% 500g 156 5 N,N'-亚甲基双丙烯酰胺 Biofount 瓶 99%电泳级 100g 206 6 考马斯亮蓝G-250 Biofount 瓶 生物技术级 25g 216 7 SDS Biofount 瓶 97% 电泳专用级别 100g 160 8 SDS Biofount 瓶 AR,92.5-99.5% 500g 65 9 甲醇 Biofount 瓶 AR,99.5% 500ml 36 10 磷酸二氢钾(KH2PO4) Biofount 瓶 AR,99% 500g 75 11 磷酸氢二钠(Na2HPO4) Biofount 瓶 AR,99% 500g 76 12 氯化钠(NaCl) Biofount 瓶 AR,99.5% 500g 32 13 氯化钾(KCl) Biofount 瓶 AR,99.5% 500g 38 14 过硫酸铵 Biofount 瓶 AR,98.5% 500g 39 15 脱脂奶粉 Biofount 瓶 Difco Skim Milk 100g 120 16 TEMED Biofount 瓶 99%生物技术级 100ml 196 17 4×分离胶缓冲液（pH=8.8） Biofount 瓶 500ml 90
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缓冲溶液如何起到缓冲作用
作者：德尔塔 日期：2022-03-31
缓冲溶液如何起到缓冲作用： 实验常用的缓冲液由弱酸及其共轭酸盐组合形成，当在缓冲溶液中加入酸时，弱酸盐发生变化转化成为弱酸；当缓冲溶液中加入碱时，溶液中部分弱酸会转化为弱酸盐。而弱酸在水中不完全电离，弱酸盐在水中可以水解，所以弱酸盐溶解后ph变化很小，基本保持了溶液的PH不变。 因为弱酸及其盐、弱碱及其盐组成的混合溶液，能在一定程度上抵消和减轻外加的强酸或强碱对溶液酸碱度（PH值）的影响，所以缓冲液是可以相对比较稳定保持溶液的pH值，也就能达到缓冲的作用。
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如何配制柠檬酸钠缓冲液
作者：德尔塔 日期：2022-03-31
柠檬酸钠缓冲液经常用于RNA分离，因为它可最大程度地减少RNA链的碱基水解，使其在基因组研究期间纯化mRNA和研究转录方面无价。 基于柠檬酸盐的缓冲液还有助于固定组织制剂中抗原的检测，因为它们破坏了抗原与固定介质之间形成的交联。 通过以下简单的步骤，您可以在10分钟内创建pH为6的柠檬酸钠缓冲液。 配制柠檬酸钠缓冲液的两种选择 有两种制作柠檬酸钠缓冲液的方法，具体取决于您可以使用的材料。 方法1：如果您同时具有柠檬酸和共轭碱，则可以通过将21克柠檬酸在1升蒸馏水中和29.4克柠檬酸钠在1升蒸馏水中混合来制备每种的储备溶液。 方法2：如果手头只有柠檬酸，则将2.1克在不到1升的蒸馏水中混合。 柠檬酸和柠檬酸钠溶液混合： 将82毫升柠檬酸溶液与18毫升柠檬酸钠溶液混合。为此，添加足够的蒸馏水以使混合物的体积略低于1升。 调节柠檬酸钠缓冲液pH值 在用磁力搅拌器轻轻搅拌溶液的同时，使用1M氢氧化钠将混合物的pH调节至6.0。然后，在容量瓶中加入更多的蒸馏水，使溶液的最终总体积精确到1升。 需要什么来配置柠檬酸钠缓冲液： 制作柠檬酸钠缓冲液所需的材料很少，使用柠檬酸时，只需要1M氢氧化钠，蒸馏水和校准过的pH探针，柠檬酸钠是可选的。 配制柠檬酸钠缓冲液的工具： 1升的量筒，一个1升的容量瓶和三个1升的介质瓶、一个磁力搅拌棒、一个磁力搅拌器。
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醋酸钠缓冲液的配制方法
作者：德尔塔 日期：2022-03-31
确定需要多少缓冲液以及缓冲液的摩尔浓度。缓冲液的摩尔浓度是溶质或溶解在溶剂中的物质的摩尔数除以溶液的总体积。乙酸钠溶于水时会分解成钠离子和乙酸根离子。因此，乙酸盐的摩尔浓度加上乙酸的摩尔浓度是缓冲液的总摩尔浓度。您需要的摩尔浓度取决于您要执行的实验类型，并且会因不同的实验而异。您所需的缓冲区数量也将有所不同，因此请与您的讲师核对或检查协议以查看所需的内容。 使用浓度比和缓冲液摩尔浓度来找到每种化学药品所需的摩尔浓度。由于乙酸盐的摩尔浓度+乙酸的摩尔浓度=缓冲液的摩尔浓度，并且由于您知道步骤2中的乙酸盐与乙酸的比率，因此可以将该值代入缓冲液的摩尔浓度方程式中，以找到每种组分的摩尔浓度。例如，如果浓度之比为0.169，则0.169 ＝乙酸盐/乙酸，因此（0.169）×乙酸浓度＝乙酸盐浓度。用（0.169）x乙酸浓度代替缓冲液摩尔浓度方程式中的乙酸盐浓度，您 将得到1.169 x乙酸浓度=缓冲液摩尔浓度。由于您知道缓冲液的摩尔浓度，因此可以解决此问题，以找到乙酸浓度，然后求解乙酸盐浓度。 计算您需要添加多少乙酸和乙酸钠。请记住，稀释物质时，M1 x V1 = M2 x V2，这意味着原始体积乘以原始摩尔浓度=最终体积乘以最终摩尔浓度。在步骤3中，您找到了所需的乙酸摩尔浓度，因此您有M2。您知道需要多少缓冲区，所以有了V2。您知道乙酸的摩尔浓度（1 M），因此您有M1。您可以使用这些数字求解V1（应添加的乙酸溶液的量），然后对乙酸钠（也是1 M的溶液）进行同样的处理。 使用带刻度的量筒，测量出您在步骤4中计算出的乙酸钠的体积，并将其添加到烧杯中。对乙酸做同样的事情。现在，添加足够的水以使溶液的总体积达到所需的总缓冲量（步骤4中的V2量）。 搅拌或轻轻搅动溶液以确保混合均匀。用您的pH计测试pH，以确保您的实验具有正确的pH。
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5种常用DNA染液
作者：德尔塔 日期：2022-03-31
在许多选择中，这五个生物染料中是最常见的，首先是使用最广泛的溴化乙锭。 在进行此过程时，不仅要了解污渍之间的差异，而且要了解固有的健康风险，这一点很重要。 溴化乙锭 溴化乙锭可能是用于可视化DNA的最著名的染料。 它可以用于凝胶混合物，电泳缓冲液中，或在电泳后对凝胶染色。 染料的分子附着在DNA链上，并在紫外光下发出荧光，向您确切显示条带在凝胶中的位置。 尽管有其优点，但不利之处在于溴化乙锭是一种潜在的致癌物，因此必须谨慎处理。 SYBR Gold SYBR Gold染料可用于对双链或单链DNA染色或对RNA染色。 SYBR Gold作为溴化乙锭的首批替代品之一进入市场，并被认为更加敏感。 一旦与核酸结合，该染料就会表现出1000倍的更大的UV荧光增强。 然后它会渗透到厚而高百分比的琼脂糖凝胶中，并可以用于甲醛凝胶中。 由于未结合分子的荧光非常低，因此不需要脱色。 自SYBR Gold推出以来，持有许可证的分子探针还开发并销售了SYBR Safe和SYBR Green，它们是溴化乙锭的更安全替代品。 SYBR Green SYBR Green I和II染色剂（再次由Molecular Probes销售）针对不同目的进行了优化。 由于它们与DNA结合，因此仍被认为是潜在的诱变剂，因此，应谨慎处理。 SYBR Green I对双链DNA敏感，而SYBR Green II最适合与单链DNA或RNA结合使用。 像流行的溴化乙锭染料一样，这些高度敏感的染料在紫外线下会发出荧光。 推荐将SYBR Green I和II与“ 254 nm落射照明宝丽来667黑白胶片和SYBR Green凝胶染色照相滤光片”配合使用，以实现每100 pg RNA或单链DNA的检测带。 SYBR Safe SYBR Safe被设计为是溴化乙锭和其他SYBR染料的更安全替代品。 它不被认为是有害废物，通常可以通过常规下水道系统（即下水道）进行处理，因为毒性测试表明没有急性毒性。 测试还表明，对叙利亚仓鼠胚胎（SHE）细胞，人淋巴细胞，小鼠淋巴瘤细胞几乎没有遗传毒性，或者在AMES测试中指出。 该染色剂可与蓝光透射照明器一起使用，这对可见的DNA
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稀释溶液过程如何计算
作者：德尔塔 日期：2022-03-31
稀释液包含溶质（或储备液）和溶剂（称为稀释剂）。 这两个成分按比例组合以产生稀释液。 您可以通过总体积中溶质的量（以比例表示）来识别稀释溶液。 例如，可以按1:10的乙醇稀释液来制备化学品，这表明10毫升的瓶子包含一毫升的化学品和九毫升的酒精。 您可以计算制备稀释液所需的每种成分的体积。 写下所需的溶液最终体积，例如30 mL。 以比例形式写下所需的稀释度-例如1:20稀释度，也称为稀释系数。 将稀释因子转换为分数，第一个数字为分子，第二个数字为分母。 例如，将1:20的稀释倍数转换为1/20的稀释倍数。 将最终所需的体积乘以稀释倍数，以确定所需的储备溶液体积。 在我们的示例中，30 mL x 1÷20 = 1.5 mL储备溶液。 从最终所需的体积中减去该数字即可计算出所需的稀释剂体积，例如30 mL-1.5 mL = 28.5 mL。 测量所需的储备溶液量（在我们的示例中为1.5 mL），然后将其分配到一个大的量杯中。 测量所需的稀释剂数量（在我们的示例中为28.5 mL），然后将其分配到大的量杯中。 用玻璃搅拌棒混合溶液。 现在您有了1:20的稀释溶液。
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