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如何正确检测无菌室洁净度
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
如何正确检测无菌室洁净度 怎么判断无菌室是否达到规定的洁净度，通常无菌室在消毒处理后，无菌试验前及操作过程中需检查空气中菌落数，常有沉降菌和浮游菌测定方法。 （1）沉降菌检测方法及标准： 以无菌方式将3个营养琼脂平板带入无菌操作室，在操作区台面左、中、右各放1个；打开平板盖，在空气中暴露30min后将平板盖好，置36℃士1℃培养48h，取出检查，3个平板上生长的菌落数平均小于1个。 （2）浮游菌检测方法及标准： 用专门的采样器，宜采用撞击法机制的采样器，一般采用狭缝式或离心式采样器，并配有流量计和定时器，严格按仪器说明书的要求操作并定时校检，采样器和培养皿进入被测房间前先用消毒房间的消毒剂灭菌，使用的培养基为营养琼脂培养基或药典认可的其他培养基。使用时，先开动真空泵抽气，时间不少于5min，调节流量、转盘、转速。关闭真空泵，放入培养皿，盖上采样器盖子后调节缝隙高度。置采样口采样点后，依次开启采样器、真空泵，转动定时器，根据采样量设定采样时间。 全部采样结束后，将培养皿置36℃士1℃培养48h，取出检查，浮游菌落数平均不得超过5个/m3。 每批培养基应选定3只培养皿做对照培养。 无菌操作台面或超净工作台还应定期检测其悬浮粒子，应达到100级（一般用尘埃粒子计数仪）检测，并根据无菌状况必要时置换过滤器。 定期更换新的紫外灯管、更换净化系统的初效、中效、高效头： 定期（至少每年1次）更换新的紫外灯管，以确保紫外灯管灭菌持续有效。并同时在使用登记本上做好更换记录，定期归档保存。至少2年1次，或按无菌室验证实际情况，定期更换初效、中效、高效头。以确保净化系统的功能持续有效，并同时在使用登记本上做好更换记录，定期归档保存。 定期进行洁净度再验证： 定期（每季度、半年、1年）或当无菌室设施发生重大改变时，要按国家标准GB/T16292-2010《医药工业洁净室（区）悬浮粒子的测试方法》进行洁净度再验证，以确保洁净度符合规定，保存验证原始记录
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EDTA操作说明书
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
产品简介： EDTA 是一种相对较好的螯合脱钙剂，对组织结构影响小，可以较好的保存组织的某 些酶类，经 EDTA 脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色。但是该法脱钙速度太慢， 一般脱需要数周至数月保存条件： 2～8°C 保存。 操作流程： 1、骨组织脱钙时，取材不易过厚，一般大约 5mm；2、组织固定后，用 PBS 清洗 3 次，每次 20min；3、组织用蒸馏水洗清洗 3 次，每次 20min； 4、组织转移至 20~30 倍体积的 EDTA 脱钙液中，脱钙 10～30 天或更长时间。如果想加快 脱钙速度，可以置于 37°C 进行脱钙。如果必要，更换新的 EDTA 脱钙液继续脱钙，多数组 织脱钙 2 周～3 个月即可，每周更换一次，直至终点； 5、用蒸馏水冲洗数次； 6、常规脱水、包埋。注意事项： 1、 厚度 5mm 的骨组织块脱钙时间一般脱钙 10~30 天即可。 2、 适当加温能加快脱钙的速度，一般不应超过 37～40°C，温度过高容易使骨组织造成松 散解体，尤其不可大于 60°C。 3、脱钙应彻底，防止脱钙不足或过度。脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短 脱钙时间，以免脱钙过长引起组织损害。 4、 脱钙用具避免使用金属容器，尽量使用玻璃容器。5、 骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行，不应先脱钙后固定，以便减少组织的 损伤程度。 6、 每隔一段时间检测一次脱钙程度，避免脱钙过度，脱钙过度会增加组织的损伤程度，影 响染色结果。
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大孔吸附树脂的原理
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
大孔吸附树脂是一种不溶于酸、碱及各种有机溶剂的有机高分子聚合物,应用大孔树脂进行分离的技术是20世纪60年代末发展起来的继离子交换树脂后的分离新技术之一。大孔树脂的孔径与比表面积都比较大,在树脂内部具有三维空间立体孔结构,由于具有物理化学稳定性高、比表面积大、吸附容量大、选择性好、吸附速度快、解吸条件温和、再生处理方便、使用周期长、宜于构成闭路循环、节省费用等诸多优点。大孔吸附树脂主要以苯乙烯、а-甲基苯乙烯、甲基丙烯酸甲酯等为原料加入一定量致孔剂二乙烯苯聚合而成,多为球状颗粒,直径一般在0.3～1.25ｍｍ之间,通常分为非极性、弱极性和中极性,在溶剂中可溶胀,室温下对稀酸、稀碱稳定。从显微结构上看,大孔吸附树脂包含有许多具有微观小球的网状孔穴结构,颗粒的总表面积很大,具有一定的极性基团,使大孔树脂具有较大的吸附能力;另一方面,这些网状孔穴的孔径有一定的范围,使得它们对通过孔径的化合物根据其分子量的不同而具有一定的选择性。通过吸附性和分子筛原理,有机化合物根据吸附力的不同及分子量的大小,在大孔吸附树脂上经一定的溶剂洗脱而达到分离的目的。
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液氮罐中的细胞被支原体污染，处理对策
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
如果冻存的细胞受到支原体污染，感觉整个液氮罐又受到污染了，是否有针对液氮罐的处理方法，可有良策？ 图：冻存细胞常用液氮罐。 以前有人遇到过如上的问题。 我们提供的有效方案是： 将液氮罐儿内的液氮全部倒掉，用德国Minerva Biolabs的MycoplasmaTM支原体喷雾剂或MycoplasmaTM支原体祛除湿巾处理液氮罐内部，即可。反应几分钟后，重新可以使用。 传统方法，可以用甲醛熏蒸，亦可解决。 据报道，液氮罐用过一段时间后，不仅会有支原体污染，也会有细菌和真菌污染（检测方法是用拭子涂抹取样培养鉴定）。 液氮罐常规保养，也是多一年就要消毒、清洗一次。因液氮用久了，杂质较多，液氮挥发后，有些会依附在内胆上，使内胆受到污染，以致腐蚀。 因此，常规清洗消毒是必要的。有介绍先用中性洗涤剂清洗刷净，再用30度清水冲洗。充分干燥内胆后再可充装氮液，当然，也建议后用MB的mycoplasma offTM支原体祛除剂再清洗一下。 另外要注意：要将冻存细胞放在液氮罐的气相，而非液相，这样有助于减少交叉污染。因为如果在液相，如果存在微生物污染，它可能随液氮流入冻存管内。 感谢缔一生物提供相关内容
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分析新型显微镜及它的功能
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
分析新型显微镜及它的功能 近，由韩国首尔基础科学研究所(IBS)分子光谱与动力学中心的Choi Wonshik教授领导的研究团队在深组织光学成像领域取得了重大突破。他们开发了一种新型光学显微镜，可以通过完整的小鼠头骨成像，并在不损失空间分辨率的情况下获取脑组织中神经网络的显微图。 这种新型显微镜被称为“反射矩阵显微镜”，它结合了硬件和计算自适应光学(AO)的功能，该技术初是为地面天文学开发的，用于校正光学像差。传统的共聚焦显微镜仅在照明的焦点处测量反射信号并丢弃所有聚焦光，而反射矩阵显微镜则在焦点以外的位置记录所有散射的光子。然后，该团队于2017年开发了一种新的AO算法，称为单散射闭环累积(CLASS)，对散射光子进行了计算校正。该算法利用所有散射光有选择地提取弹道光并纠正严重的光学像差。与大多数传统的AO显微镜系统相比，天文学类似在天文学中使用AO那样，需要像亮点一样的反射镜或荧光物体作为引导星，反射矩阵显微镜的工作原理是不带有任何荧光标记，并且不依赖于目标的结构。此外，可以校正的像差模式数量是传统AO系统的10倍以上。 诸如光学相干显微镜和双光子显微镜的非侵入性显微镜技术通常用于活体组织的体内成像。当光穿过诸如生物组织之类的混浊物质时，会产生两种类型的光：弹道光子和倍增散射光子。弹道光子直接穿过物体而不会发生任何偏转，因此被用于重建物体图像。另一方面，当光穿过材料时，通过随机偏转产生多重散射光子，并在重建图像中显示为斑点噪声。随着光传播通过越来越远的距离，多重散射光子和弹道光子之间的比率急剧增加，从而模糊了图像信息。 骨组织尤其具有许多复杂的内部结构，这会导致严重的多重光散射和复杂的光学像差。当通过完整的头骨对小鼠大脑进行光学成像时，由于强烈的斑点噪声和图像失真，很难看到神经系统的精细结构。这在神经科学研究中是有问题的，其中鼠标被广泛用作模型生物。由于当前使用的成像技术的局限性，必须将颅骨切除或变薄以显微镜
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工业检支原体和科研检支原体有什么不同，你需要知道
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
工业包括生物药生产、CAR-T、干细胞**、疫苗生产等，需要对主细胞库、病毒收获液、体外扩增的细胞等进行支原体检查。该检查的方法依据中国药典。 科研检支原体则需要保证细胞中没有支原体污染，没有详细的方法规定。 那么，工业和科研检支原体还有哪些区别呢？ 1. 方法上： 工业可使用培养法、指示细胞培养法和NAT法（核酸扩增技术）。NAT法常见的就是PCR和荧光定量PCR。只限定了这三种。NAT在方法验证后，可以替代前面两种方法。它尤其适合CAR-T等的放行检测。 科研则可采用各种方法，但一般不采用培养法，因为太慢。科研检支原体常见方法有PCR法、qPCR法、酶荧光法、恒温扩增法、DNA染色法、细胞感应法等。 2. 用途上： 工业检支原体用于过程控制、放行检测。生产前和生产后的成品都需要检。 科研检支原体是避免支原体污染细胞，干扰实验，一般是一周就要监测一次。 3. 支原体污染程度： 工业上支原体污染风险主要是存在于细胞和成品中。但环境也需注意，需要定期清洁。 科研上支原体污染风险主要是存在于细胞中，但环境也需注意，需要定期清洁。 工业上，支原体在细胞和成品中如果发生污染，也是含量较低，因而需要方法的灵敏度高，通常要求检测限达到10CFU/ml。 科研上，支原体如果污染细胞上清，则因为培养液中含有血清，因而繁殖较快，支原体的污染程度较高，通常每ml能达到10的3次方。因而对方法的灵敏度要求不高，而更看重方便。 目前，市面上大量存在各种品牌的支原体检测产品，以NAT（PCR或qPCR）方法而论，科研和工业领域可考虑德国Minerva Biolabs产品，因其产品大多为冻干粉型，稳定性好，4度即可保存。而且操作较为方便，例如对于科研来说，PCR有预分装型，不用自己再分液，扩增后直接上胶。更重要的是试剂盒灵敏度高，覆盖支原体物种广（100多种）。对于工业来说，qEP和Classic试剂盒还经过全面的方法验证，适合放行检测。 希望以上信息对你有帮助。感谢缔一生物提供相关内容。
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日本嗅觉测定用基准臭液套装使用方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
日本嗅觉测定用基准臭液套装使用方法： 1、准备阶段。 1确认操作者（气味测试员），试料采取者的嗅力为正常。 2测试之前，确认操作人员与受试者的手上是否有异味，如果有需要清洗干净。 2.使用方法。 选定的标准浓度，5种标准气味和低浓度均通过“ 5-2方法”进行测试。 操作员把1-5的数字记录在气味纸上。然后把其中两张的前端（大概1cm处）浸入到一种基准气味液体里。另外三张用同样的方式浸入到对照液中接着拿出。 受试者凑近分别闻这五张气味纸（鼻尖凑近，不要接触），然后指出有气味的两张气味纸。 后测其他气味时，重复做同样的操作，让受试者鉴别出气味纸带有气味的种类，这样测试就合格了。 3、使用上的注意事项。 1闻气味的方法。 集中精力，短时间闻下气味，如果无法快速分辨其中是哪种气味，可以再次短时间去闻。 2气味纸的使用和处理方法。 气味纸贴着基准臭瓶口润浸，防止液体滴落。 气味纸是一次性的，请勿反复使用。用过一次的气味纸要丢入塑料袋中，然后用橡皮筋扎紧投入到带盖的垃圾桶中，这是为了防止空气中留下之前测试的气味，导致测试过程中受到干扰。 4、其他 1基准臭的效期为2年，开封后有效期缩短至1年。 2基准臭储存地为阴暗场所，请勿阳光直晒。
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伴有肺癌的副肿瘤性小脑变性患者中P/Q型钙离子通道抗体
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
P/Q type calcium-channel antibodies in paraneoplastic cerebellar degeneration with lung cancer 伴有肺癌的副肿瘤性小脑变性患者中P/Q型钙离子通道抗体 期刊：NEUROLOGY （IF: 8.77）2002 摘要： 39例副肿瘤小脑变性(PCD)患者中有16例(41%)P/Q型电压门控钙通道(VGCC)抗体水平升高，9例(23%)Hu抗体水平升高。16例VGCC抗体阳性患者中7例为Lambert Eaton肌无力综合征(LEMS)。15份脑脊液样本中有7份有VGCC抗体，其中4份有鞘内合成的证据。应在PCD患者中寻找VGCC抗体，即使没有LEMS的症状，也可能与小脑功能障碍有关。 前言： 副肿瘤性小脑变性(PCD)的病理特征是小脑氏细胞的亚急性丧失1。在这种和其他副肿瘤的情况下，经常有针对肿瘤和神经系统表达抗原的血清和脑脊液抗体1。PCD和小细胞肺癌(SCLC)患者的血清和脑脊液中可能存在Hu抗体，特别是当临床证据表明有小脑以外的神经系统症状时。然而，在相当数量的PCD和SCLC患者中，未检测到Hu或其他抗神经细胞抗体，但在一些病例中有P/Q型电压门控钙通道(VGCC)抗体的报道2,3 。VGCC抗体通常与Lambert Eaton肌无力综合征(LEMS)相关，但并非所有PCD和VGCC抗体的患者都有LEMS的临床证据。VGCC抗体与Hu抗体不同，它结合细胞外决定因子并改变VGCC的表达，如果它们能够进入中枢神经系统，理论上可能直接导致PCD的小脑功能障碍4。 为了阐明P/Q型VGCC抗体的临床和病理相关性，我们回顾了39例伴肺癌的PCD患者，以及寻找LEMS的临床和电生理证据。我们比较了VGCC抗体阳性和阴性病例的预后，并评估了鞘内VGCC抗体的合成。 患者和方法： 从我们的数据库中，选择了终诊断为伴有肺癌的PCD患者。这些患者表现为孤立的或明显突出的原因不明的小脑综合征，或有Hu抗体或发展成肺癌。与以前的工作不同2，我们特别排除了表现为共济失调，但很快出现小脑以外的症状的Hu阳性患者；目的是排除这些与PCD不同但总是含有Hu抗体的副肿瘤性脑脊髓炎病例的1。回顾性检测所有患者VGCC抗
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培养原代细胞的现实价值是什么
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
生物制药行业的发展以及现代疾病的攻克都是科学家们在无数次实验与试错中得来的成果。而这种yao物实验的操作维度已经精que到了细胞等级，其中就包括原代细胞。从哺乳动物的机体中提取出的原代细胞是生物医药研制工作不可或缺的助手。下面就仔细介绍专业原代细胞公司的细胞的现实价值： 一、用作医疗行业基础研究 当一种yao物被研发出之后yao物的yao效检测以及yao物作用机理研究是不可避免的环节。预先使用原代细胞群做有关的yao物检测能够提高yao物的安全与稳定性。同时原代细胞还可以作为某些疾病机理研究的实验对象。当然在基因功能的探秘方面原代细胞亦功不可没。 二、用作制药行业yao物开发 除了检验yao物开发的前期以及中期工作都离不开原代细胞。造福人类以及改善疾病发生概率的许多疫苗的诞生的功臣之一就是原代细胞。一批又一批的原代细胞作为试验者在生物科学家们手中经过了千百次的锤炼促就了一大批造福于世的药物的诞生，比如说基因功臣yao物等。 三、用作的单克隆抗体制备 单克隆抗体可以用作于各类病原微生物以及肿瘤细胞的抗体和抗原检测，在生物医疗行业具有较大的应用价值。而单克隆抗体的制作原料就包括原代细胞。小鼠身上的B细胞作为原代细胞被提取出来后经过一系列其他操作就可以完成单克隆抗体的制备工作。 原代细胞的提取与培养技术对现代生物医学具有非同小可的意义。那么原代细胞可以培养几代？按照目前的官fang定义十代以内的细胞群都可以称为原代细胞。相信在将来各种技术以及猜想的出现会为原代细胞的价值实现提供更大的舞台与空间。
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植物组织中自由水与束缚水含量的测定
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
自由水和束缚水含量常与植物生长与抗性有密切关系。自由水与束缚水比值较高的植物组织或器官，代谢活动较旺盛，生长也较快；反之则生长较缓慢，但抗性较强。因此，自由水和束缚水的相对含量可以作为代谢活动及抗逆性强弱的重要生理指标。 一、 原理 束缚水被细胞胶体颗粒所吸附，水势较低，故不易移动、蒸发和结冰，不能作为溶剂 ，也不易被夺取。可根据这些特点测定束缚水含量。将植物组织浸入浓糖液中脱水， 经过一定的时间后易移动的自由水可全部进入糖液中，组织中剩余的水分可看作束缚 水。根据糖液浓度变化可测得自由水量。由植物组织的总含水量减去自由水量，即可 求出束缚水量。 二、 仪器与用具 阿贝折射仪；电子顶载天平（感量0.1mg）；烘箱；称量瓶若干；打孔器（面积0.5cm 2 左右）；烧杯；瓷盘；量筒。 三、 试剂 60%-65%蔗糖溶液（重量百分浓度）：称取蔗糖60-65g，置烧杯中加蒸馏水40-35g，使 总重量为100g，溶解后备用。 四、 方法 1. 取称量瓶6个，编号（设三次重复），分别称准重量。 2. 在田间选取生长一致的待测植物数株，选各部位、长势、叶龄等一致的有代表性的 叶子数片。 3. 用0.5cm 2 左右的打孔器在叶子两测（避开主脉）对称地打取小圆片共300片， 分别随机地放入已编号地6个称量瓶中（各50片），盖紧，以免水分散失。 4. 准确称取各瓶重量，求出各瓶样品鲜重。然后将其中3瓶置烘箱中于105℃下10min 杀死组织，再于80℃下烘至恒重，求出组织含水量（%）。 将另外三个称量瓶中各加入60%-65%（重量百分浓度）蔗糖溶液5ml，再准确称量，算 出各瓶糖液重量。于暗处放置4-6h，其间不时轻轻摇动。 5. 到预定时间后，充分摇动溶液，用折射仪分别测定各瓶糖液浓度，同时测定原来的 糖液浓度（折射仪用法见实验3），按下式求组织中自水和束缚水含量（%）。
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动物的疫病防疫与免疫抗体监测至关重要
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
通过对动物疫病进行防疫，控制动物传染性疾病的发生，利用免疫学原理对畜禽的某些传染性疾病进行免疫接种，激发畜禽机体产生特异性抗体，达到防止畜禽传染病发生的目的；加强动物疫病监测能及时撑握畜禽体内免疫抗体的消长情况，适时制定下次防疫。两者在动物疫病防控工作中起着关键性作用。 利用防疫控制动物疫病发生，保障畜牧业健康发展为当前动物疫病防治工作的关键。在防疫过程中，动物疫病的抗体监测能为动物防疫部门提供科学的参考依据，指导我们制定防治方案及防治措施，可以说动物疫病的免疫抗体监测是动物疫病防疫工作的眼睛。 因此，动物的疫病防疫与抗体监测在动物疫病防控工作占着极其重要的地位。 动物的免疫抗体监测是控制动物疫情发生关键性工作。通过免疫抗体监测得到的数据，进行分析评估，提前预知畜、禽的机体免疫状况，及时掌握疫情动态，指导动物疫病防疫，制定合理的防控措施是动物免疫抗体监测的意义所在。在实际的畜、禽饲养管理过程中有的养殖专业技术人员忽略了这项工作重要性，错误的认为只要将疫苗打进动物体内就万事大吉，之后再也不问疫苗在动物体内是否产生免疫抗体，更不做免疫抗体监测，等到因免疫失败造成动物疫情发生后此时已为时晚矣。还有拒绝监测的，错误地认为采样会伤害了动物，影响到动物的生长等等现象经常发生。做动物的免疫抗体监测能让你及时掌握自己所养畜、禽的免疫效果，意义深远。
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检测细胞转染效率的方法有哪些?
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
一、实时定量PCR检测实时荧光定量PCR （Quantitative Real-time PCR）是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。Real-time PCR是在PCR扩增过程中，通过荧光信号，对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期，模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系，所以成为定量的依据。但是，荧光定量PCR所检测的是转染后细胞中待测基因的mRNA的表达水平，对于目的基因的蛋白表达水平不能够检测； 二、Wester Blot检测Western Blot又称蛋白质免疫印迹（免疫印迹实验），其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或者生物组织样品进行着色，并通过分析着色的位置和着色的深度获得特定蛋白在所分析的细胞或者组织中表达情况的信息。Western Blot所检测的是组织或者细胞中蛋白质的表达水平。 三、流式细胞术 流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）是一种在功能水平上对细胞或者其他生物粒子进行定量检测和分析的检测手段，它可以高速分析上万个细胞，并能同时从一个细胞中检测得到多个参数，与传统检测方法相比具有更加快速、准确以及定量等特点。使用流式细胞术检测转染效率可以更加精que的确定转染的效率，对转染效率进行量化。 四、荧光显微镜观察当我们转染的质粒DNA含有荧光蛋白基因是，可以通过荧光显微镜观察的方法来确定转染的效率，在荧光显微镜下，可以观察到荧光的强弱以及荧光的效率。
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沙丁胺醇检测卡使用注意事项
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
沙丁胺醇检测卡为瘦肉精-沙丁胺醇胶体金快速检测卡，用于定性检测饲料中瘦肉精-沙丁胺醇残留，整个检测过程（包括样本前处理）需要约5-10分钟，检测尿液的检测限为5ppb,饲料的检测限为60µg/L(60ppb)。 注意事项 1、该产品不能用于检测组织，否则显色不明显，结果不准确。 2、过期或铝箔袋破损的产品，均不可使用。 3、检测卡从冰箱中取出时应恢复到室温后打开，打开的检测卡应尽快使用以免受潮后失效。 4、不要触摸检测卡中央的白色膜面。 5、取液滴管不可混用，以免交叉污染。 6、待检样品溶液需清亮、无混浊颗粒、无细菌污染，否则容易导致阻塞、显色不明显等异常现象，从而影响实验结果的判定。 贮藏及保存期 储藏条件：试剂盒于2-30℃干燥环境下保存。 保质期：该产品有效期为1年，生产日期见包装盒。
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生物分离介质分离纯化中可去除内毒素
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
内毒素概念 内毒素，是革兰氏阴性细菌细胞壁中的一种成分，叫做脂多糖。脂多糖对宿主是有毒性的。内毒素只有当细菌死亡溶解或用人工方法破坏菌细胞后才释放出来，所以叫做内毒素。 其毒性成分主要为类脂质A。内毒素位于细胞壁的较外层、覆盖于细胞壁的黏肽上。各种细菌的内毒素的毒性作用较弱，大致相同，可引起发热、微循环障碍、内毒素休克及播散性血管内凝血等。内毒素可以用鲎试剂检测。 内毒素的去除 被污染的产品去除内毒素即使在生产中采取了有效的工艺和严格的预防措施,原液仍有可能被污染,如何处理已被污染的原液是比较棘手的问题。因为原液中通常已加入保护剂,重新纯化是非常困难的。如果原液及保护剂的分子量与内毒素分子量差别较大,那么选用适当的的超滤膜,通过超滤来去除内毒素是可能的,但由于膜吸附过程中产热及系统残留等原因,活性损失较大。 生物制品在生产过程中去除内毒素也是纯化环节中重要一环节。生物制品的纯化,主要是采用各种柱层析技术,如疏水层析、离子交换、亲和层析、分子筛等,这些技术纯化目标产品的同时也可以有效去除内毒素。 三、各类层析介质去除内毒素原理和情况 1.分子筛：分子筛是利用凝胶的网状结构根据分子大小进行分离的一种方法。一般重组产品分子量为几万道尔顿,而内毒素分子量为几十万至上百万道尔顿,常是多聚体,因此利用分子筛可以有效去除内毒素,但其处理量小,处理时间较长。 2.疏水层析：内毒素的脂肪A部份有很强的疏水性,但在高盐下会凝集,无法挂上疏水层析柱。可选择能结合目标蛋白的疏水介质而去除内毒素。 3.离子交换：离子交换法是通过带电的溶质分子与离子交换剂中可交换的离子进行交换而达到分离纯化的方法。内毒素在pH>2时带负电荷,与阴离子交换介质Q Bio-sep FF或DEAE Bio-sep FF有较强结合,可在洗脱目标蛋白后用高盐缓冲液或NaOH去除,这是离子交换法去除内毒素的基础。Pharmacia公司已开发利用离子交换层析法从白蛋白中去除内毒素的工艺,主要采用
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猪群伪狂犬病毒常见的三种抗体介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
近几年大家越来越重视猪群伪狂犬病毒的监测，伪狂犬病毒的实验室检测多为抗体检测。伪狂犬病毒常见的三种抗体：抗糖蛋白gB抗体、抗糖蛋白gE抗体以及中和抗体。 PRV不同毒株的毒力千差万别。毒力不同致使疾病的严重程度、带毒时间长短、带毒量以及组织嗜性不同。PRV受多基因的控制，这些基因单个或多个缺失可使PRV毒力减弱。与毒力相关的病毒蛋白包括病毒囊膜糖蛋白、病毒编码的酶以及非必需的衣壳相关蛋白。根据糖蛋白在细胞培养液病毒复制中的不同作用，将其分为非必需糖蛋白（gC、gE、gG、gI、gM以及gN）和必需糖蛋白（gB、gD、gH、gK以及gL）。在病毒毒力方面，糖蛋白主要是介导PRV黏附至靶细胞。 由病毒的糖蛋白gB和gE刺激机体免疫系统所产生的相应抗体即为gB抗体、gE抗体。 在PRV入侵三叉神经和嗅神经通路上，糖蛋白gE是一个关键性的蛋白质。PRVgE基因的缺失可以显著降低病毒的毒力，使得神经元细胞感染受到限制，所以活疫苗一般都是缺失gE基因。既然PRV缺失gE基因，那么由此活疫苗复制出来的疫苗毒株不含糖蛋白gE，进而在体内无法刺激机体产生相应的gE抗体。 凡能与病毒结合，使其失去感染力的抗体称为中和抗体。病毒可以刺激机体产生中和抗体，而中和抗体又与病毒结合后使病毒失去吸附细胞的能力，从而丧失感染力；病毒与其特异性的中和抗体相遇之后发生的作用，类似于化学中的相应酸碱相遇之后发生的中和反应，所以称这种作用为中和作用。而根据抗体能否中和病毒的感染性而建立的免疫学试验称为中和试验。
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