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细胞凋亡与坏死的区别和实验观测
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
很多实验小伙伴表示不知如何区分细胞凋亡和坏死,其实细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。 细胞凋亡 是指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主性、有序性的死亡,他涉及一系列基因的激活、表达以及调控等作用,具有生理性和选择性的。 生理学意义 细胞凋亡对胚胎发育及形态发生、组织内细胞群的稳定、机体的防疫和免疫反应、疾病或中毒时引起的细胞损伤和老化、肿瘤的发生进展起着重要作用,并且有着潜在的**意义。 细胞坏死 是极端的物理、化学因素或严重的病理性刺激引起的细胞损伤和死亡,是非正常死亡。 长期以来细胞坏死被认为是因病理而产生的被动死亡,但是近期的研究表明,细胞坏死可能是细胞“程序性死亡”的另一种形式,具有包括引发炎症反应在内的重要生理功能。当细胞凋亡不能正常发生而细胞必须死亡时,坏死作为凋亡的“替补”方式被采用。 细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍常用的形态学检测方法。 1.光学显微镜和倒置显微镜 凋亡细胞的主要特征为核染色质致密深染,形成致密质块,有时可碎裂。在HE染色的组织切片中细胞体积缩小,胞质致密、嗜酸性染色增强,并可形成凋亡小体。在组织中凋亡细胞常以分散单个形式存在,凋亡细胞与周围细胞分离,不引起炎症反应。 本方法简便易行,但在细胞密集的组织中对于改变不典型的细胞判断较困难,常缺乏较为特征的指标,具有较强的主观性,重复性差。本方法可用于调亡现象的初步观察,作为分析指标之一。 1)未染色细胞: 凋亡细胞的体积变小、变形,全面皱缩,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体,凋亡小体为数个圆形小体围绕在细胞周围。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。 2)染色细胞: 姬姆萨(Giemsa)染色、瑞氏染色等:正常细胞核色泽均一;凋亡细胞染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态;坏死细胞
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对细胞培养中一种黑色运动颗粒物的说明!
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
在细胞培养中常可见到细胞及培养液中有一些大小不等、形态不同的黑色颗粒在运动。如果镜下检查(100x)每视野计数在10个以上者就可能使细胞生长受到影响,如果其数量再增多细胞可停止增殖继而死亡。 人们常称这种颗粒为黑胶虫或中毒颗粒。 关于黑胶虫的描述 分类上的描述 对于黑胶虫的分类,学术界没有明确给予说法。关于黑胶虫的分类,目前大部分人认为黑胶虫污染是微生物感染。在一些文章论述上把黑胶虫归为生物污染类型,但是没把它归为确定的生物分类类型,只是把黑胶虫独立为一种未知生物。而根据中国病毒所和军科院鉴定是一种寄生于牛血清内的一种原虫,似乎和草履虫和变形虫有类似之处,但是由于课题经费不够而不能继续下去,最终也没有有力证明黑胶虫是属于原虫。也有一些学者不认为所谓的黑胶虫污染是一种生物污染,而认为是细胞碎片类物质,是在细胞培养时,细胞衰亡破裂产生的;也有在文献中报道说是玻璃瓶中类似氧化硅的物质,那个文献很少人找得到;还有报道黒胶虫是一种纳米级的细菌。 形态上的描述 形态上类似与杆状细菌,但长度比细菌长,直径约在0.5~1微米,显微镜观察为黑色,胶虫成熟后呈线状,而且形态是椭圆形。 运动形式 在400x倒置显微镜小,有典型的布朗运动(不规则的原地小距离抖动),即很多细胞培养者看到的,像黑色的小虫游来游去。可以穿透滤膜,也可以通过空气传播,低倍下为黑色点状,高倍下可看见黑色的小虫游来游去。但是在物理学上来说,颗粒足够小,在液体中也是做布朗运动的,这不足以说明黑胶虫的布朗运动就证明它是生物。 生理上的描述 抗性 抗细菌和抗霉菌的药物对黑胶虫均无效,可以保守的判定黑胶虫不属于细菌。 环境抗逆性 将培养器材150度烘烤8小时,可以消除,而黑胶虫高压灭菌泡酸都不死。可见黑胶虫可以耐高温高压,而且还有点嗜酸,如果证实它是生物的话,那它很有可能是极端微生物,一种古菌。 营养条件 “黑胶虫”可寄生于动物细胞,也可以生存于培养基中
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点击化学是什么?
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
点击化学(Click chemistry)是2001年美国诺贝尔化学奖获得者贝瑞.夏普利斯(K.Barry Sharpless)等提出的一系列反应,其核心是开辟一整套以含杂原子链接单元C-X-C为基础的组合化学新方法,用少量简单可靠和高选择性的化学转变来获得更广泛的分子多样性。 点击化学的原理是在一定环境条件(温和、含水)下,一对功能性基团彼此快速、有选择性地相互反应(“咔嚓”)。即两个相兼容的具有点击功能基团A和B被激活,被激活的两个分子形成稳定的偶联体。 常见点击化学反应 自2001年点击化学提出以来,点击化学已在合成化学、生物靶标、药物设计、ADMET、酶学研究、基因组学、蛋白质组学、免疫学等多个领域得到广泛应用。 蛋白质的二级结构,特别是α-螺旋与β-折叠,是生物相互作用的关键,运用点击化学使非天然氨基酸侧链上叠氮化物与炔基或者氰基形成的五元杂环,能够达到在多肽中稳定这类二级结构,从而提高其生物活性的目的,例如,通过分子模拟优化后,这类杂环结构已成功应用于生物分子cJun(转录过程中的一种α-螺旋同源二聚体)和抗菌肽中。 蛋白质活性表达谱(Activity-Based Protein Profiling,ABPP)是研究重要药物靶点蛋白质的结构与功能的主要方法之一,是利用活性位点导向探针对蛋白质的结构与功能进行研究的新型技术,以一种相对简单明了的方法在分子、细胞水平研究活性小分子与生物大分子之间的复杂相互作用,从而从分子水平揭示生物体在生理或者病理状态下的关键调控机制。Cravatt和合作者通过点击化学将活性位点导向探针链接到蛋白质中,实现实时在位观察细胞环境中蛋白质活性的变化。 点击化学可分为两类: 1 铜催化反应类型 铜(I)催化叠氮化物-炔烃反应(Cu(I)- catalyzed Azide - Alkyne Click Chemistry reaction,CuAAC); 特点: 小型的叠氮化物和炔烃具有优良的底物性质 试验适用条件的最优化(类型&铜来源、还原剂和铜配体) 适用于对铜毒性不碍事的实验(不推荐用于体内或活细胞标记)
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离心机转头无法取出的解决方法
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
实验室里离心机如果使用不当,就会造成转子拿不出来,而耽误实验进程。一般回头没有办法从离心腔内拿出来,主要为因为回头与离心机电机主轴发生粘结所致。根据多年使用离心机的经验,在离心过程当中,可能有冷凝水或失慎洒入的液体沉醉在主轴和回头中心孔之间,当离心结束后,若是回头没有抓紧时间拔出,连续使用很长期,就会在主轴和回头之间发生腐蚀和粘结,最后致使操作人员没有办法拿出来回头。这类现象在高急冷冻离心机上会更容易发生。下边就来描述几种解决这个问题的办法。 1.简易法 首先将原装锁紧螺钉旋出,用一个一致螺纹规格的螺钉拧入主轴螺纹孔内,注意端部不要完全拧入。两人配合,一人双手抱住回头向上轻微提及起,注意不能用力太大,以免于使电机支撑架变形,另一人用锤子经过一个细杆向下敲打电机主轴上部的螺钉。反复几次后,普通可以将回头与主轴脱开。 2.专用工具法 若是上面说的办法无法将回头拿出来,说明粘结状况严重。可以首先在主轴和回头结合部滴入除锈剂进行除锈和浸润。等候一天左右时间后,使用专用拉拔器拿出来回头。同样一个道理,首先根据回头大小选择合适尺寸的拉拔器,而后将拉拔器拔手扣住回头底部,拉拔器丝杆头部顶住主轴螺纹孔内的螺钉,将拉拔器位置扶正后,用扳手顺时针旋转丝杆,根据螺杆机械原理,拉拔器的拔手会产生一个巨大的拉力,进而将回头从主轴上脱离。 3.注意要领 (1)不论何种办法,必须要在主轴螺纹孔内旋入代替螺钉,目的是防护主轴螺纹和原装锁紧螺钉。 不然万一损伤了原来螺纹,可能制造成电机报废。 (2)用力要领会分寸,不要蛮力敲砸。当阻力太大时,可以延长除锈侵润的时间。 (3)回头拿出来后,要用细砂纸打磨主轴外表层和回头内孔表层,将锈迹去除,涂上润滑脂,防止再次发生粘接。 3.防范措施 (1)增强平日的维持,回头和主轴的结合面要常常擦拭洁净,涂上润滑脂。 (2)尤其是高速冷冻离心机,使用完成后,不要立即关闭盖门,应当让离心
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医用离心机新技术与安全使用
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
1离心机新技术简介 1.1 温度制冷 当转子高速旋转时,空气摩擦生热,转子温度会上升,试管中的样品温度也会升高。由于生物学样品对温度敏感。一般要求离心实验中温度保持4℃。没有电脑控制的智能化技术,是不可能做到±1℃的精度。因此,用制冷机对离心腔冷却,而达到冷却转子、冷却样品温度的目的。但测量旋转中的转子的实际温度极为困难,国内外都采用在离心腔底部离转子较近处理设温度传感器,间接测量转子温度。这里T样品=T腔+T补偿。T补偿又与转子的类别、转速及运行时间有关。 1.2 无刷电机直接驱动 离心机是由电机带转子高速旋转的。过去的电机是带碳刷的直流电机,离心机运转时碳刷磨损,带来火花与噪声甚至振动,且有寿命,届时要更换碳刷万能再行运转。更严重的是碳刷的磨损带来碳粉尘的污染,不仅污染离心机,还会污染周围环境,这种污染对卫生行业是不合适的。 1.3 显示数字技术 模拟技术典型的表现形式为拧旋钮选择操作参数(如转速、温度与时间等),以表盘的指针来显示数据。其缺点为:选择参数与数据的读数值受操作人与读数人的人为干扰多,控制精度差。而且每次操作都要这样,重复性差。有的离心机虽数字显示(如旋钮选值而数字显示),虽在读数上有改进,但取值原理未变仍属模拟技术;数字显示典型的表现形式为界面友好、键盘操作、数字化显示、可编程操作的全电脑控制,其核心为智能化控制,是由电脑来实现的。离心机操作所需要一切参数(如转速、温度、时间、加减速率档等),键盘操作输入,并以数字显示出来,因此选择操作参数与读取数误差极小。又由于是可编程操作,可把一组操作参数编成号码,可存取使用。 2 如何安全使用离心机 2.1 正确安装 (1)电源电压:电压波动要符合+10%以内的国家标准,否则一些厂家的离心机是不能正常运转。如果电压波动在此以上,建议用稳压器,以供符合此电网。 (2)地线要牢:房间的电源的布线要符合要求。我国是三相四线制
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细胞分化软骨细胞阿尔新蓝(alcian blue)染色试剂盒使用说明
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
细胞分化软骨细胞阿尔新蓝(alcian blue)染色试剂盒产品说明书(中文版) 主要用途 YIJI细胞分化软骨细胞阿尔新蓝(alcian blue)染色试剂是一种旨在使用阳离子染料阿尔新蓝,使软骨组织上蛋白多糖聚糖染色,呈现深蓝色,来分析固定处理的细胞样本中软骨生成状况的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良传统方法、成功实验证明的。主要适用于动物细胞分化和软骨生成的检测。广泛用于软骨细胞或组织病理生理的研究。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,显色清晰。 技术背景 间质干细胞(mesenchymal stem cell)分化产生脂肪细胞(adipocyte)、成骨细胞(osteoblast)、肌细胞(myocyte和软骨细胞(chondrocyte)。软骨细胞及其细胞外基质(extracellular matrix)构成软骨组织(cartilage tissue),其含有硫酸软骨素(chondroitin sulfate)和硫酸角质素(karatan sulfate)等为主要成分的蛋白多糖(proteoglycan)聚糖(aggrecan),成为软骨生成(chondrogenesis)的标记(indicator)。阿尔新蓝(alcian blue)是一种阳离子含铜染料,使酸性粘多糖(mucopolysaccharide)类蛋白聚糖染色,呈现深蓝色。 产品内容 YIJI清理液(Reagent A) 毫升 YIJI固着液(Reagent B) 毫升 YIJI染色液(Reagent C) 毫升 YIJI去色液(Reagent D) 毫升 产品说明书 1份 保存方式 保存在4℃冰箱里;YIJI染色液(Reagent C),避免光照;YIJI去色液(Reagent D)具有腐蚀性,注意操作安全;有效保证6月 用户自备 核固红复染试剂盒(YIJI40011):用于常规染色后复染 小型染色缸:用于细胞染色操作 光学显微镜:用于细胞染色后观察分析 实验步骤 操作一:细胞载玻片染色 样本固着处理 取出待测的细胞载玻片 小心加上xx微升YIJI清理液(Reagent A)在载玻片上,铺满整个样品表面 小心移去载玻片上的YIJI清理液(Reagent A) 小心加上xx微升YIJI固着液(Reagent B),铺满整个样品表面 室温下,孵育60分钟 小
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植物茎流测量的发展历程
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
德国植物生理学家Huber于1932年提出热脉冲法最先利用热脉冲作为植物液流的示踪物,并率先运用于实际研究。Huber使用一根电阻线作为热脉冲源,通过安装在电阻线下方的单个热电偶感知热脉冲到达的时间,此即茎流计的雏形。但此法却很难解释清除热电偶的温度升降变化。后来Huber又采用了在热源上下不等距设置热电偶探头的方法,将热脉冲在液流传导系统中的运动和外界环境中的热干扰有效地区分开。然而,Huber测得的热脉冲传导速率却显著低于实际液流速率。Marshall改进了Huber的设计,将加热元件和测温结点插入植物的木质部,他假定热脉冲在移动时液流跟木质部之间不存在阻碍,热量可以在树液和边材之间自由交换。但依据Marshall的理论计算出的液流速率也低于实际速率,需要进行修正。Swanson发现以往测算中热脉冲速率和实际液流量存在偏差的真正原因是:“因伤效应”,从而否定了Marshall关于茎内木质部同质性的假设。他认为在安装热敏探头时探头周围损伤部位会产生愈伤组织,使得探头周围区域的热传导性能降低,导致热脉冲速率低于真实液流速率。如果计算中对这种损伤作用加以修正,将大大提高热脉冲技术的可应用性。Swanson于1981年通过数值计算模型模拟热对流及传导现象给出了修正参数表。Swanson的研究是热脉冲技术发展中的一个里程碑。Edwards等为了求得更准确的单位时间内通过树干断面内的流量,研究了形成层以下不同深度处的液流变化,得出了液流速率随深度变化的关系。至此热脉冲液流检测方法及理论系统构建完成。 Granier等又在热脉冲速率法的基础上作出改进,将利用热脉冲滞后效应委员李的热脉冲液流检测仪改进为利用双热电偶检测耗散为原理的热扩散液流探针测量装置。于热脉冲方法相比较,热扩散探针的一个突出特点是能够连续放热,实现连续或任意时间间隔的液流速率的测定。热扩散法具有更高准确度,正越来越广泛的应用于树干液流的研究。 热脉冲法是将两个传感器探针纵向插入被测织物的木质部或茎部中,插入深
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新版GMP下负压称量罩性能确认测试及接收标准探讨
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
现在对于新版GMP的探讨越来越深入,我们了解到新版的要求和法规都在不断提高。作为称量保护装置的负压称量罩在制药企业的取样间、车间称量配料间得到了大量使用。接下来我们就负压称量罩性能确认的一些关注点进行探讨。 新版GMP下负压称量罩性能确认测试及接收标准探讨 1,背景介绍 随着新版GMP的深入和法规要求的不断提高,作为称量保护装置的负压称量罩在制药企业的取样间、车间称量配料间得到了大量使用。在负压称量罩内的称量过程中,产品往往处于暴露状态,因而其自然就应该属于直接影响产品质量的直接影响系统,按照风险控制的原则必须对其进行验证和性能确认。接下来我们就负压称量罩性能确认的一些关注点进行探讨。 2,测试内容 负压称量罩的测试通常应关注高效现场检漏、气流流型、风速及均匀度、排出风量比例、照度、温度、噪声、洁净度等参数。 2.1,高效检漏 高效安装后如不进行检漏,无法保证其安装效果以及运输过程中是否对高效造成损伤,故安装完成后一般会对安装后的高效进行现场检漏。测试使用经过校准的光度计和气溶胶发生器,对称量罩这类设备通常使用冷发烟的气溶胶发生器。待上游产生的气溶胶浓度稳定在20-30ug/L之间后记录上有浓度,然后开始扫描过滤器下游,扫描速度以3-5cm/s,距离过滤器面2-4cm为宜,扫描路线应涵盖所有过滤器面及边框区域,确保扫到每一区域。 判断标准:高效下游不检测到超过0.01%的泄露率。 2.2,气流流型 气流流型测试时应将产品暴露位置,操作者工位,气流从洁净到脏污的流向综合考虑进去。确保产品接触的是未经污染的"第一手的洁净空气",确保无气流涡流、返流或扩散到操作者呼吸区对操作者造成伤害。测试使用气流流型测试专用的水雾发生器,用摄像器材记录下气流流型。 判断标准:气流呈单向流状态,无涡流、返流或扩散产生。 2.3,风速及均匀度 负压称量罩的保护作用是靠一定风速的良好气流形成的,只有均匀的送、回风采能形成良好的气流,且只有一定的风速
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实验室用水选择家用净水器需三思
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
9月中旬,国家质检总局公布了2017年家用净水器产品质量国家监督专项抽查结果,不合格产品检出率高达34.9%,飞利浦、荣事达、九阳,容声等品牌净水器被检出整机卫生安全(耗氧量、挥发性酚)等问题,且有6个品牌连续两年出现在不合格的名单上,让人触目惊心。 净水器产品质量问题总结下来主要有4个方面: 1. 使用了卫生安全不达标的与水接触材料及部件; 2. 使用了低质量的水处理滤芯,导致净水器的出水水质和对污染物(重金属、有机物和微生物等)的去除效果不达标; 3. 使用的电源线截面积达不到标准要求,长时间过载使用将会导致线体发热、绝缘皮老化开裂,产生漏电等事故隐患; 4. 部分生产企业虚标产品额定功率,可能会造成发热等过载现象; 此外,结构性能(静水压力)、回收率、脱盐率等指标也存在一些问题。 这些问题,也应该引起实验室纯水用户的重视。通常会发现,有些实验室为了节约成本,常常直接使用价格低廉的家用净水器或者作为实验室超纯水机的进水设备。 首先,使用卫生安全不达标的材料,会因为溶出物质(无机物或有机物)导致杂质污染物和TOC含量升高,降低产水品质。低质量的水处理滤芯,直接导致出水水质不佳,重金属和微生物超标。这些不但会影响后续超纯水机的纯化效率,给实验或分析带来不可控的影响因素,而且会降低超纯水机纯化柱耗材的使用寿命,造成额外浪费。专业的实验室纯水产品在原材料,零部件选择方面,会更加严格和科学,采用高标准,避免污染。 其次,家用净水器在电气方面的不达标行为会给实验室运行带来很高的风险。纯水设备包括水和电两个方面,如果漏水漏电,水电无情,造成的危险或伤害将不堪设想。上海乐枫(RephiLe)的纯水设备从设计上会针对这些问题做好水路和电路系统的细节设计,而且都已通过权威机构的认证(CE,RoHS等), 用户使用无后顾之忧。上海乐枫(RephiLe)的纯水机还会配上漏水保护装置,一旦出现漏水,会自动切断水源并报警,消除隐患。 另外,家用净水
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《Nature Immunology》:写入教科书!RNA表观修饰居然能够影响天然免疫
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
前言 DDX46是RNA解旋酶DDX家族成员,对于细胞核内mRNA前体的剪接具有重要的调控作用。《Nature Immunology》杂志8月29日发表了中国医学科学院院长、中国工程院院士曹雪涛研究团队的论文,揭示了RNA解旋酶DDX46通过结合RNA去甲基化酶ALKBH改变细胞核内RNA修饰的新方式,参与调控抗病毒天然免疫应答。这篇文章提出了一种新的天然免疫与炎症调控机制,为病毒感染和炎症性疾病的防治提供了新的潜在靶标与思路,伯豪助力完成了实验转录组可变剪接的分析部分。 研究思路 DDX解螺旋酶对于RNA的识别和代谢具有重要的调控作用,其家族成员DDX46一般专一地在细胞核内发挥作用,调控mRNA前体的剪接。免疫系统在受到病毒侵染时,会快速激活抗病毒天然免疫反应中相关mavs、traf3等I型干扰素的转录,在核内产生大量相关转录本。文章发现DDX46可以与干扰素转录本结合,并阻碍其出核,致使干扰素转录本在细胞核内大量累积,而不能进入细胞质进行翻译,进而表现出DDX46对天然免疫反应的负调控。DDX46与干扰素的结合是通过与RNA去甲基化酶ALKBH作用实现的,DDX46在抗病毒免疫反应中会招募大量ALKBH,ALKBH能够清除干扰素转录本上的甲基化修饰。DDX46与ALKBH共同作用,完成了对于I型抗病毒反应中干扰素转录本的m6A去甲基化并将其捕获于细胞核中,导致IFN-β表达显著减少,机体的天然免疫反应受到抑制。 研究结果 DDX46一般特异地在细胞核内发挥作用,主要调控mRNA前体剪接。和其他家族成员相比,DDTX46被敲减以后,能最大程度上促进IFN-β的表达。受到VSV病毒侵染后,DDX46大量聚集于巨噬细胞细胞核中,其表达在受到siRNA干扰以后,IFN-β的表达得到显著提高,过表达DDX46,IFN-β的表达显著下调。通过影响干扰素的表达,DDX46促进了VSV的复制,表明其具有抗病毒免疫反应的负调控作用。 后续的RNAi筛选实验进一步证明了DDTX46专一地影响了I型干扰素的表达。通过CLIP联合转录组测序实验,文章发现了mavs,
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《Nature Immunology》:写入教科书!RNA表观修饰居然能够影响天然免疫
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
前言 DDX46是RNA解旋酶DDX家族成员,对于细胞核内mRNA前体的剪接具有重要的调控作用。《Nature Immunology》杂志8月29日发表了中国医学科学院院长、中国工程院院士曹雪涛研究团队的论文,揭示了RNA解旋酶DDX46通过结合RNA去甲基化酶ALKBH改变细胞核内RNA修饰的新方式,参与调控抗病毒天然免疫应答。这篇文章提出了一种新的天然免疫与炎症调控机制,为病毒感染和炎症性疾病的防治提供了新的潜在靶标与思路,伯豪助力完成了实验转录组可变剪接的分析部分。 研究思路 DDX解螺旋酶对于RNA的识别和代谢具有重要的调控作用,其家族成员DDX46一般专一地在细胞核内发挥作用,调控mRNA前体的剪接。免疫系统在受到病毒侵染时,会快速激活抗病毒天然免疫反应中相关mavs、traf3等I型干扰素的转录,在核内产生大量相关转录本。文章发现DDX46可以与干扰素转录本结合,并阻碍其出核,致使干扰素转录本在细胞核内大量累积,而不能进入细胞质进行翻译,进而表现出DDX46对天然免疫反应的负调控。DDX46与干扰素的结合是通过与RNA去甲基化酶ALKBH作用实现的,DDX46在抗病毒免疫反应中会招募大量ALKBH,ALKBH能够清除干扰素转录本上的甲基化修饰。DDX46与ALKBH共同作用,完成了对于I型抗病毒反应中干扰素转录本的m6A去甲基化并将其捕获于细胞核中,导致IFN-β表达显著减少,机体的天然免疫反应受到抑制。 研究结果 DDX46一般特异地在细胞核内发挥作用,主要调控mRNA前体剪接。和其他家族成员相比,DDTX46被敲减以后,能最大程度上促进IFN-β的表达。受到VSV病毒侵染后,DDX46大量聚集于巨噬细胞细胞核中,其表达在受到siRNA干扰以后,IFN-β的表达得到显著提高,过表达DDX46,IFN-β的表达显著下调。通过影响干扰素的表达,DDX46促进了VSV的复制,表明其具有抗病毒免疫反应的负调控作用。 后续的RNAi筛选实验进一步证明了DDTX46专一地影响了I型干扰素的表达。通过CLIP联合转录组测序实验,文章发现了mavs,
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鸿基洁净无菌隔离器的验证
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
本指导原则是为药典要求无菌的药品、生物制品、原料、辅料、及其他品种无菌检查用隔离系统的验证提供指导。 无菌检查用隔离器是为产品无菌检查试验提供无菌环境的一种设备。 封闭式隔离器不直接与外界环境相连,使用无菌接口或快速转移通道进行物质传递,一般用于无菌检查;开放式隔离器允许材料通过舱门进入,舱门内有一定的压力阻止微生物的进入。物品可通过无菌传递进入隔离器,整个传递过程中可保持隔离器内部空间和外部环境完全隔离。隔离器内部能够反复进行灭菌,内壁可用杀孢子剂处理,以去除所有的生物负载,灭菌完成后,隔离器通过高效空气过滤器(HEPA)或更高级别的空气过滤器向其内部输送洁净空气来维持内部的无菌环境。隔离器的使用从根本上避免了操作人员与实验用物品的直接接触,操作人员无需穿着专用洁净服,而是通过隔离器上的操作手套或半身操作服对舱内物品、仪器进行操作。手套-袖套组件或半身操作服是隔离器舱体不可分割的一部分,它们由柔软的材料制成且与所采用的灭菌剂兼容。 因此,使用隔离器进行无菌检验,可以避免实验用物品和辅助设备被污染,提高了无菌试验结果的准确性。
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选择IL-8 ELISA试剂盒时,这些细节不容忽视!
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
白细胞介素 8 (IL-8)是由巨噬细胞和其它类型细胞如上皮细胞、气道平滑肌细胞和内皮细胞产生的趋化因子,在人类中,由 IL8 基因编码。IL-8 可有效促进血管生成,在细支气管炎的发病机制中起重要作用。IL-8 可通过对中性粒细胞的召集和脱颗粒来实现对炎症反应的调节,可作为结肠癌细胞株的自分泌生长因子来作用于结肠直肠癌。高水平的 IL-8 可减少精神分裂症患者抗精神病药的阳性反应。另外,IL-8 与肥胖和囊性纤维化的发病机制也相关。 如何选择EliKine™人 IL-8 ELISA试剂盒? 做科研的我们肯定是希望自己的购买的人 白介素-8 ELISA试剂盒其重复性好、特异性强、敏感性高等优点。但目前市场上的人 白介素-8 ELISA试剂盒质量参差不齐,怎么选择适合自己的ELISA试剂盒就显得特别重要。一方面,主要根据自己样本中待检指标的量,这就要求人 白介素-8 ELISA试剂盒的灵敏度,另一方面科学实验讲求重复性,要求ELISA试剂盒,其板内和板间变异系数应该控制在15%以内等等。简单来说ELISA试剂盒在保证高质量数据的情况下,实验时间越短,操作越便利,越容易受到用户欢迎!这也是选择试剂盒的一个指标。 产品名称及描述 货号 产品说明 EliKine™ 人 IL-8 ELISA定量试剂盒 KET6018 详情 为什么我们选择EliKine™ IL-8 ELISA试剂盒? EliKine™ IL-8 ELISA试剂盒具有极高的灵敏度和特异性。对目标蛋白的类似物检测,尚未发现明显的交叉反应或者背景干扰。EliKine™ 双抗夹心人 白介素-8 ELISA试剂盒高品质捕获抗体和检测抗体,适用于多种类型的样品,同时运用可拆卸式酶标板设计,让您可灵活便捷的使用,并提供48次小包装,让你有更多选择!专业的技术支持,提供售后服务。广受各科研者的喜爱!选择EliKine™ ELISA试剂盒,就是选择放心! EliKine™ 人 IL-8 ELISA试剂盒优势比较: 因此选择集高特异性与灵敏性于一身的Abbkine EliKine™人 白介素-8 ELISA试剂盒:http://www.amyjet.com/products/KET6018.sh
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实验室离心机转速减慢如何应对
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
实验室离心机在使用常遇到的问题是转速减慢,对有些初级使用商家来说可能是致命的,因为很多情况下,客户不知道第一时间如何处理,所以只会,干着急,随着产品对生产或者工作的影响程度,而出现一系列的矛盾,这个时候就已经错过了处理问题的**时机,所以小编在这里建议大家,实验室离心机使用问题一定要第一时间取得跟商家的联系。不要自行拆卸,不然可能会造成更严重的后果,所以请广大新老客户谨记。 实验室离心机密度梯度离心法又分为速率区带离心法和等密度区带离心法。样品在一定惰性梯度介质中进行离心沉淀或沉降平衡,在一定离心力下把颗粒分配到梯度液中某些特定位置上,形成不同区带的分离方法。采用不同的离心速度和离心时间,使沉降速度不同的颗粒分步离心的方法,称为差速离心。将含有两种不同颗粒的混悬液,以常速离心,使大的颗粒下沉,将上清液倾倒于另一离心管中,再加大离心力,离心一定时间,分离小的颗粒,反复多次分离,达到分离目的。差速离心主要用于分离大小和密度差异较大的颗粒。 假如实验室离心机实验过程中,可能会出现电机转速过慢,并且电刷发出很大的火花,这种情况下应该发何处理。分析与检修:此故障系电机碳刷与换向片之间有污物或碳刷弹簧弹力减小,使碳刷与换向片接触不良所致。解决办法: 将机子拆开,旋开电刷盒盖,取出带有弹簧的碳刷,先用无水酒精清洗弹簧、碳刷和换向片上的污物,若碳刷前端有崩缺,可用什锦锉配合砂纸将碳刷崩缺处磨成光滑弧形接触面,使其与圆形换向片吻合良好。再适当调大弹簧的弹力。 实验室离心机通电指示灯、仪表正常,按下启动按钮,实验室离心机不运转。维修与处理:检查控制电路未发现故障,更换实验室离心机碳刷,机器能恢复正常工作。这种现象经常遇到,原因是碳刷耗尽。变压器B,烧毁,整机不能工作。维修与处理:变压器B 初级为380V, 次级有3组输出电压分别为220V,150V,160V。CJ1、CJ2的触点串接在B 的次级绕组(0~150)V之上,CJ1、CJ2为互
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医用离心机新技术与安全使用
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
1 离心机新技术简介 1.1 温度制冷 当转子高速旋转时,空气摩擦生热,转子温度会上升,试管中的样品温度也会升高。由于生物学样品对温度敏感。一般要求离心实验中温度保持4℃。没有电脑控制的智能化技术,是不可能做到±1℃的精度。因此,用制冷机对离心腔冷却,而达到冷却转子、冷却样品温度的目的。但测量旋转中的转子的实际温度极为困难,国内外都采用在离心腔底部离转子较近处理设温度传感器,间接测量转子温度。这里T样品=T腔+T补偿。T补偿又与转子的类别、转速及运行时间有关。 1.2 无刷电机直接驱动 离心机是由电机带转子高速旋转的。过去的电机是带碳刷的直流电机,离心机运转时碳刷磨损,带来火花与噪声甚至振动,且有寿命,届时要更换碳刷万能再行运转。更严重的是碳刷的磨损带来碳粉尘的污染,不仅污染离心机,还会污染周围环境,这种污染对卫生行业是不合适的。 1.3 显示数字技术 模拟技术典型的表现形式为拧旋钮选择操作参数(如转速、温度与时间等),以表盘的指针来显示数据。其缺点为:选择参数与数据的读数值受操作人与读数人的人为干扰多,控制精度差。而且每次操作都要这样,重复性差。有的离心机虽数字显示(如旋钮选值而数字显示),虽在读数上有改进,但取值原理未变仍属模拟技术;数字显示典型的表现形式为界面友好、键盘操作、数字化显示、可编程操作的全电脑控制,其核心为智能化控制,是由电脑来实现的。离心机操作所需要一切参数(如转速、温度、时间、加减速率档等),键盘操作输入,并以数字显示出来,因此选择操作参数与读取数误差极小。又由于是可编程操作,可把一组操作参数编成号码,可存取使用。 2 如何安全使用离心机 2.1 正确安装 (1)电源电压:电压波动要符合+10%以内的国家标准,否则一些厂家的离心机是不能正常运转。如果电压波动在此以上,建议用稳压器,以供符合此电网。 (2)地线要牢:房间的电源的布线要符合要求。我国是三相四线