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通过HPV技术实现QbD与风险管理
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
质量不是通过检验注入到产品中，而是通过设计赋予的。这先进的理念被用于支持一系列的制药生产过程，并被ICH指南收纳，用于指导药品开发1。ICH对人用药品的制造陈述了一条明确的信息：质量可以被设计。质量源于设计（QbD）方法的原则是通过对生产过程的要求、涉及的风险以及如何减少风险的明确认知，将质量建立在生产过程中。 在药物制造过程中，质量控制最大的挑战之一就是生物污染的风险。药物在无菌环境中生产是至关重要的，既能保证患者的安全又能维持生产的效率。调查生物污染事故的原因是一个非常耗时和耗成本的过程。既要执行寻找事故根源的分析测试，同时又要做微生物鉴定和纠正以及预防措施，并且需要控制好已被污染的产品批次。 精心设计和规划有效的消毒灭菌程序是一个十分必要的步骤。在任何药物制造过程中，特别是随着药物开发和监管执法方面的趋势变化，寻找新的好的灭菌解决方案不可或缺。 一、过氧化氢蒸汽（HPV）灭菌法的优势 具有活性的生物药品需求越来越多，如果继续使用终端灭菌法，药物活性会被破坏，因此无菌加工的需求日益增长。欧盟GMP医用药品指南附录1中规定必须遵循的微生物水平2与FDA工业指南对无菌药物生产的无菌处理要求3进一步推动了有效灭菌法技术的需求。 使用清洁剂的传统手工擦拭法不能可靠地达到指南附录1中规定的生物负载（生物污染）水平减少量。现其中的解决方案之一便是使用过氧化氢蒸汽（HPV）灭菌技术。在密闭空间如隔离器、传递舱或房间里，HPV能安全提供经过验证的6-log孢子杀菌效果。HPV灭菌过程可使用嗜热脂肪芽胞杆菌生物指示剂4进行验证，通常对关键区域/表面可达到6-log微生物减少，以及周围环境达到4-log微生物减少（即微生物分别减少1,000,000与10,000个单位）。 最佳的HPV技术结合了带有高速气体分布的专用蒸汽发生器系统，以确保HPV在密闭空间里统一均匀分布。灭菌过程中HPV分布在所有表面形成一层微冷凝（2~6μm，肉眼不可见），实现快速杀菌。使用手工擦拭
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western-blot操作注意事项
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
一．配胶 1． 注意一定要将玻璃板洗净，最后用ddH2O冲洗，将与胶接触的一面向下倾斜置于干净的纸巾晾干。 2． 分离胶及浓缩胶均可事先配好（除AP及TEMED外），过滤后作为储存液避光存放于4℃，可至少存放1个月，临用前取出室温平衡（否则凝胶过程产生的热量会使低温时溶解于储存液中的气体析出而导致气泡，有条件者可真空抽吸3分钟），加入10%AP（0.7~0.8:100, 分离胶浓度越高AP浓度越低，15%的分离胶可用到0.5:100）及TEMED（分离胶用0.4:1000, 15%的可用到0.3:1000，浓缩胶用0.8：1000）即可 3． 封胶：灌入2/3的分离胶后应立即封胶，胶浓度＜10%时可用0.1%的SDS封，浓度＞10%时用水饱和的异丁醇或异戊醇，也可以用0.1%的SDS。封胶后切记，勿动。待胶凝后将封胶液倒掉，如用醇封胶需用大量清水及ddH2O冲洗干净，然后加少量0.1%的SDS，目的是通过降低张力清除残留水滴。 4．灌好浓缩胶后1h拔除梳子，注意在拔除梳子时宜边加水边拔，以免有气泡进入梳孔使梳孔变形。拨出梳子后用ddH2O冲洗胶孔两遍以去除残胶，随后用0.1%的SDS封胶。若上样孔有变形，可用适当粗细的针头拨正；若变形严重，可在去除残胶后用较薄的梳子再次插入梳孔后加水拔出。30min后即可上样，长时间有利于胶结构的形成，因为肉眼观的胶凝时其内部分子的排列尚未完成。 二．样品处理 1．培养的细胞（定性）： ⑴ 去培养液后用温的PBS冲洗2~3遍（冷的PBS有可能使细胞脱落）。 ⑵ 对于6孔板来说每孔加200~300μl，60~80℃的1×loading buffer。 ⑶ 100℃，1min。 ⑷ 用细胞刮刮下细胞后在EP管中煮沸10min，期间vortex 2~3次。 ⑸ 用干净的针尖挑丝，如有团块则将团块弃掉，如果没有团块但有拉丝现象，则可以将EP管置于0℃后在14000~16000g离心2min，再次挑丝。若无团块也无丝状物但溶液有些粘稠，可通过使用1ml注射器反复抽吸来降低溶液粘滞度，便于上样。 ⑹ 待样品恢复到室温后上样。 2．培养的细胞（定量）： ⑴ 去培养液后用温的PBS冲洗2~3遍（冷的
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喷雾干燥法制备芥末油微胶囊化的研究
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
芥末油是人们用于日常料理必不可少的香辛料，但芥末油香味留存时间短，对光、热与氧气十分敏感，这些都限制其应用范围。 微胶囊技术是利用一种天然的或合成的高分子材料，将分散的固体、液体甚至气体物质包裹起来，形成具有半透性或密封囊膜的微型胶囊的技术。被包埋物料与外界环境隔绝，最大限度的保持食品的色、香、味和生物活性，防止营养物质在加工和储藏中的破坏，还可以掩盖某些物料的异味或使原来不易加工储存的气味、液体转化成较为稳定的固体形式，从而防止和延缓劣变的发生。 所以，芥末油微胶囊在保持芥末油的优点的同时，弥补了其自身的不足，扩大了其应用范围，可广泛应用在焙烤制品、膨化制品、中西餐、韩餐中。 固形物含量对芥末油微胶囊化的影响: 芥末固形物的浓度是影响乳状液稳定性和微胶囊包埋率的一个重要因素。并且固形物含量的高低还影响喷雾干燥的速度和微胶囊壁形成的速度，从而影响产品质量。 研究选定固形物的浓度分别为25%、30%、35%、40%、45%、50%，通过对微胶囊化芥末油产品的包埋率的影响，来确定合适的固形物含量。 研究发现，随着固形物含量的增加，微胶囊产品的包埋率呈上升趋势，但超过35%先上升后下降，这是因为当固形物浓度太高时，溶液的流动性和进料速度降低，从而影响产品品质。 因此，35%是最优固形物浓度，此时产品包埋率高。
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如何实现实验室玻璃器皿的标准化清洗？
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
如何实现实验室玻璃器皿的标准化清洗？ 在化学和制药实验室中，玻璃器皿的广泛使用伴随着产生多种潜在的污染物，这对于清洗剂和清洗方法是一个严重的挑战。在使用中，清洗剂必须是有效的和可靠的，但同时不能留下任何残余物。归根到底，您每次使用的玻璃器皿必须彻底清洁。 ● 实验室玻璃器皿的清洁与否直接影响实验数据。 ● 在国内的一些高端实验室，直接采用一次性耗材，试问环保么？在欧美的实验室又有几个人在使用一次性耗材代替容量瓶烧杯？如何实验实验室零排放，或将二氧化碳排放降到最低？ ● 在国外大量实验室采用洗瓶机，可以实验室标准化管理，对玻璃器皿实行有据可查，不使用一次性耗材。 ● 目前国内洗瓶机属于初级阶段，国内高端的实验室越来越接受洗瓶机（青岛永合创信电子科技在国内处于推广的前沿），他给实验室带来了标准化，带来了环保。 ● 使用环保，无污染的清洗剂。 为什么选择玻璃器皿自动清洗机: 当我们对实验数据准确度的要求变得越来越高时，玻璃器皿的清洗和烘干就变得非常重要。清洗过程必须保证器皿在下次使用时，不受上次使用的影响。机器清洗不仅可以使科研人员从劳动密集型的清洗工作中解放出来，而且提供了可复制的更高效的清洗结果。 选择使用专业清洗机的另外一个原因是让实验人员避免因接触有害物质而产生的潜在风险。例如：清洗剂中的化学物质会影响人体健康；残留的传染性和有毒污染物会危害实验人员；手工清洗产生的破碎玻璃可能致伤，从而导致实验人员被病毒等有害生物感染。清洗消毒机是在封闭系统内全程按程序自动运行，因此实验人员面临的潜在危险可以降至最低。这意味着使用机器自动清洗为实验人员提供了最大程度的保护。 此外，机器自动化清洗使得器皿清洗更标准化，便于进行重复验证和相关记录保存。 彻底清洗是可以实现的 用于实验室器皿清洗机的RBS清洗剂是不含磷酸盐、含活性氯的清洗剂及去污剂的一种无泡沫产品；它特别适合用于清洗玻璃仪器不会留下可能干
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双能X线骨密度仪分析小鼠骨小梁丰富区域新指南
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
双能X线骨密度仪分析小鼠骨小梁丰富区域新指南 骨质疏松症已成为世界6种多发病之一，据报填，我国有9000万人患不同程度的骨质疏松症。骨质疏松症已经成为中老年人的常见病，测量人体骨骼中矿物质含量的多少，对中老年人来说是非常有必要的，特别是四十岁以上的城市居民，尤其是中年妇女，缺钙现象比较严重。骨小梁在骨质疏松研究中经常被研究，因为骨小梁的变化是骨质疏松性骨折最常见的原因。双能X线吸收法（DXA）可对骨小梁丰富区域提供精确的测量。在该领域临床前研究中，DXA已广泛用于小动物代谢性骨疾病研究中的骨密度（BMD）及骨矿量（BMC）的测量，与微型计算机断层扫描（CT）相比，它更简单、快速、低辐射。 在临床研究中，DXA对 BMD的测量的准确定位和图像分析对诊断结果至关重要。不当的DXA分析可能导致错误的诊断和**。同人类的DXA研究一样，对小动物的DXA研究可能会因定位不当而受到极大的影响。因此，在纵向研究中获得高质量的图像对结果的评估是非常重要的。目前，在评估小鼠BMD的DXA图像中，没有一种标准化的指南可以准确地定位在骨小梁丰富区域；同时在DXA扫描过程中，还没有相关的小鼠定位标准。鉴于此，加州大学洛杉矶分校相关研究人员开发出了一种标准的方法，用于对骨小梁丰富区域进行精确的DXA分析。这将提高DXA在代谢性骨疾病方面纵向研究的效率。 图一：股骨远端、胫骨近端、椎骨解剖学标志及DXA分析位置 在组织学结构分析中，研究人员在股骨远端和胫骨近端之间定义了四条线：第一条线位于股骨纵轴或胫骨纵轴；第二条线是一条从股骨或胫骨的末端开始并垂直于第一条线的直线；第三条线从股骨上的最近端点开始，到胫骨的最远端且平行于第二条线；第四条线连接骺板的前后缘。通过测量“第二条线”和“第三条线”之间的距离，以及“第三条线”和“第四条线”之间的夹角，分析了骨骺板的距离(EPD)和骨骺板夹角(EPA)。为了在远端股骨的DXA分析中确定髌骨的位置，膝盖骨距离(PD)在膝盖弯曲到90度后测量（图
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实验室离心机关键技术及其发展情况
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
实验室离心机是将样品进行分离的仪器，广泛应用干生物医学、石油化工、农业、食品卫生等领域，它利用不同物质在离心力场中沉淀速度的差异，实现样品的分析分离。离心机自问世以来，历经低速、调整、超速的变迁，其进展主要体现在离心设备和离心技术两方面，二者相辅相成。从转速看，台式离心机基本属于低速、高速离心机的范畴，因此具有低速和高速离心机的技术特点，其结构主要由电机驱动系统、制冷系统、机械系统、转头和系统控制等几部分组成。通用台式离心机的发展已经模糊了低速、高速量离心机的界线，众多的转头为科研人员提供相当广泛的应用范围，成为科研实验室**机型。 交流变频调速将逐步取代直流调速。转速调节系统是离心机的核心部分，由控制、功率驱动和电机三大要素组成，主要是控制电机的转速。在离心机的发展进程中直流调速功不可没，其主要特点是具有良好的起制动、调速范围宽、结构简单、成本低、理论和实践都比较成熟等，因此八十年代前在离心机中得到广泛的应用，至今仍在应用和不断的改进，如改进直流电机铜头和碳刷的耐磨性，以延长电机的寿命和碳刷的更换周期等。 可控直流调速是经典的直流调速方案，结构简单、技术成熟，基本满足离心机调速的需求，因此在国内外离心机中得到广泛的应用。其主要缺点是，整流波形差、电流脉动大、轻负载时易出现断流现象、为维持直流电机电流的连续，需加一笨重的平滑电感，增加了仪器的体积和重量。八十年代后，随着全控功率器件的发展，如功率晶体管和场效应管等，开关功率变换技术逐渐在离心机直流调速系统中得到应用，这种技术主要是通过高频直流斩波，调节脉冲占宽比，改变辅出电压，为直流电机供电。由于开关频率很高，一般小于50KHZ仅靠电机自身的电感滤波，即可获得平滑的直流电流，克服了直流调速的缺点，因此转速更平滑，调速范围更宽。 开环调速是最简单的调速方案，甚至十几个分立器件或一个集成块即可组成一个系统，所以至今国内某些低价位
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自动化遗传毒性检测3T ToxxsAnalyzer 自动化FADU分析优势介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
自动化FADU分析原理 3T ToxxsAnalyzer 自动化FADU分析与传统COMET分析比较 * 时间更短 * 准确度更高 * 高通量
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生物化学发光测量仪的原理和应用
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
生物化学发光测量仪的原理和应用 生物发光和化学发光是自然界中一种普遍现象。至今人们已知能发光的生物种类繁多，从低等的细菌到高等的发光鱼类，从植物幼苗、植物枝叶到人体表面经络穴位、脑、肝、血清等，其发光的主要物质几乎都是由莹光素酶、莹光素及其辅助因子所组成。随着对生物发光机制的深入研究，一些生物体的发光体系已经初步搞清并用这些体系去分析生物体和化学中的一些微量物质。生物发光分析法渐渐地被引入医学领域，诸如通过莹火虫莹光素酶发光体系测量细菌中的ATP，用以确定尿路感染中的细菌数；以发光细菌的发光强度为指标去定量抗菌素的效价、标定环境的污染状况等。因此，对这一领域的研究有着重大的经济和社会效益。 1、工业：发酵工业中测量生物量，控制发酵条件。油脂、食品工业中测量油脂、食品的氧化变质程度。橡胶、塑料工业，测量产品的老化程度，检测掺入抗氧化原料的效果。医药工业，检测抗菌的效价。 2、 农业：根据植物幼苗的发光强度，判断植物的抗寒性、抗热性、抗盐性及农作物营养发育生长状况等，为农业育种和栽培技术提据。 3、 药学：测量吞噬细胞的吞噬作用相伴随的化学发光强度和使用发光免疫分析法，检查肌体的免疫功能，了解体内微量激素、微量元素、维生素及药物的含量。测量体液中 的ATP，判断肌体的能量代谢状况，尿路感染的程度，测量血清（血浆）的化学发光强度。间接地判断疾病的发生、发展和程度，鉴别诊断某些病患。测量自由基的反应，为抗衰老、抗肿瘤、抗辐射筛选有效的自由基药物。 4、 环保：用细菌、动物、植物及化学发光体系的发光指标监测环境污染,同时可对水和废水进行监测。由于发光测量具有灵敏度高、特异性强、稳定性好、反应速度快、使用方便等优点。发光分析技术的研究和应用必将在免疫学、微生物学、生物化学、临床检验、毒理学及医学、农业、工业、环保科学等领域得到广泛应用。为了促进发光分析技术的发展，上海市检测技术所(原上海市技术监
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蒸汽疏水阀的保养和维护
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
蒸汽疏水阀的保养和维护 蒸汽疏水阀不同与其他类型的蒸汽阀门，作为一种自动阀门，蒸汽疏水阀会频繁地动作和开关。使用一定时期后，往往面临着泄漏量增加，密封性下降、反应滞后等问题。 蒸汽疏水阀的使用寿命首先决定与正确的选型。瓦特节能的经验表明不适合的类型和口径会影响疏水阀的实际表现和寿命。其次疏水阀的材料特别是阀芯阀座材料的选择和热处理工艺也很要紧。 使用过程中，工况的变化和好坏和疏水阀的及时维护和保养状况对疏水阀的使用寿命影响也很大。即使同样质量的疏水阀，在不同工艺和应用中寿命的表现往往也不尽一致。 疏水阀出现故障通常难以预料。早起的故障往往是从泄漏量增加开始的，这几乎很难被及时发现。所以疏水阀的预防性保养检测为主。欧美一些工厂实行疏水阀在线检测，但由于检测对象（流量、压力、流速）的不稳定，闪蒸和背压的影响，实际效果也不理想。 瓦特节能认为疏水阀计划性管理就显得很重要。疏水阀阀计划性管理包括疏水阀的数据统计和档案、定期和不定期的检测、定期的维护、重要零部件的跟换计划和跟换、疏水阀过滤器的拆洗、阀芯结垢的清洗、关键疏水阀的磨损度评估等内容 疏水阀计划性管理是企业能源管理的一个重要内容，必须及时建立和实施。 蒸汽疏水阀的寿命，由于蒸汽设备的特性、运转条件、蒸 汽压力、凝结水量、蒸汽疏水阀的使用数量、维修工的熟练 程度、维修作业的认真程度的不同而不尽相同。然而，缩短 疏水阀寿命的最大要素则是，在新安装配管后最初时期，对 于杂质和不纯物质的处理。 如果管道和疏水阀安装后的焊渣和杂质等杂质物质处理不当，就会给蒸汽疏水阀带来显著的恶劣 影响。新施工安装的管道淸洗要彻底，同时应定期清扫过滤 器，清除运转初期所产生的水垢和杂质，这是非常重要的。 根据以往的实践经验，我们认为在投入运转后的一个月中， 每周应清除一次；投入运转后的一个月到三个月之间，每月 应清除一次，以后每6个月进行一次清洗。 在正常使
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普通蒸汽灭菌柜的影响因素和蒸汽的控制
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
普通蒸汽灭菌柜的影响因素和蒸汽的控制 在食品饮料、生物制药、医疗卫生等行业的蒸汽灭菌应用中，决定灭菌效果的蒸汽介质方面的要素包括灭菌温度、作用时间及饱和蒸汽热量等三大要素。 灭菌温度是首要控制的蒸汽参数，微生物对热的耐受力因种类而不同，因此根据灭菌物品污染程度，其所需的灭菌温度和作用时间也各不相同，且灭菌温度和作用时间的选择需随灭菌方式、物品性能、包装材料、要求灭菌过程长短而定。一般而言灭菌温度愈高，所需时间愈短，饱和蒸汽的温度和其压力呈恒定的关系。 蒸汽的温度和灭菌温度有时会不同。当蒸汽中含有3%以上的冷凝水时，虽然蒸汽的温度达标，但由于分布在产品表面的冷凝水对热量传递的阻碍，蒸汽温度经过冷凝水膜时会逐步递减，使得到达产品的实际灭菌温度会低于灭菌温度要求。特别是锅炉携带的炉水，其水质可能会污染灭菌产品。所以通常在蒸汽入口采用瓦特DF200高效汽水分离器会非常有效。 空气的存在会对蒸汽的灭菌温度形成另外的影响，当柜室内的空气未排除或未完全排除，一方面由于空气是热的不良导体，空气的存在会形成冷点，使得附着空气的产品达不到灭菌温度。另外一方面，由于饱和蒸汽的压力和温度是唯一对应的，通常通过控制蒸汽压力来控制温度，但是由于道尔顿分压定律，空气的存在产生部分分压，此时压力表显示的压力是混合气体的总压，实际的蒸汽压力低于灭菌蒸汽压力要求，因此蒸汽温度也无法达到灭菌温度要求，从而导致灭菌失败。 蒸汽灭菌的作用时间是影响蒸汽灭菌效果的另外一方面，灭菌时间应从灭菌柜室内大到要求灭菌温度时算起，直至灭菌完成为止。总时间包括：热力穿透时间，即从灭菌柜内达到灭菌温度至灭菌物品中心部位也达到灭菌温度所需时间，时间的长短取决于灭菌物品的性质、包装的大小、放置位置、灭菌柜内空气排空程度等；灭菌维持时间，即杀灭微生物所需要延长的加热时间，一般为维持时间的一半，其长度视消毒物品而定；而灭菌处理所需时间：预热时间
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如何进行质构仪数据分析？
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
做完质构测试的您还在为数据分析发愁吗？同您分享TPA测试结果的分析知识。 首先，一起了解下什么是TPA测试吧! TPA质构分析方法建立于1967年左右,适用于通用的质构测定仪。TPA质构测试又被称为两次咀嚼测试主要是通过模拟人口腔的咀嚼运动,对固体半固体样品进行两次压缩,测试与微机连接,通过界面输出质构测试曲线。 全质构测试指标如下： 1. 样品高度(Sample height): 自动量测样品高度 2. 硬度 (Hardness): 第一次下压区段内最大力量值 3. 脆度 (Fracturability) : 硬度之前出现的较小峰值 4. 黏性 (Adhesiveness) : A3面积 5. 弹性 (Springiness): T2 / T1 6. 咀嚼性 (Chewiness) : 胶着性x弹性 = A2 / A1 x 硬度 x 弹性 7. 胶着性 (Gumminess) ：A2 / A1 x 硬度 8. 黏聚性 (Cohesivensss)：A2 / A1 9. 回复性 (Resilience)：A5 / A4 TPA图线解释： 全质构分析(TPA)名词解释 硬度 (Hardness) : 最直接反应口感的一项指标，在质地剖面分析中，直接影响咀嚼性 (Chewiness)、胶着性(Chewiness)及凝聚性(Cohesiveness)。 脆度 (Fracturability) : 针对样品有酥脆外壳(外皮)者样品所独有，多数样品都无法测得此参数，一般而言此参数若无法测得，软件会自动隐藏。 粘性 (Adhesiveness) : 样品经过加压变形之后，样品表面若有黏性，会产生负向的力量。在食品领域可以解释为黏牙性口感。 弹性 (Springiness) : 食物在第一咬结束与第二口开始之间可以恢复的高度。 咀嚼性 (Chewiness) : 咀嚼性被定义为胶着性x弹性。可以解释为咀嚼固体食物所需的能量。难以精确测量，因为咀嚼涉及压缩、剪切、穿刺、粉碎、撕裂、切割等，另外也与口腔状况有关(唾液分泌、体温)。这个参数主要用在固体、半固体的口感描述上。 胶着性 (Gumminess) : 胶着性被定义为硬度x凝聚力。半固体食品的一个特点就是具有低硬度，高凝聚力。因此这项指标应该用于描述半固体食品的口感所使用。
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玉米DDGS中霉菌毒素的污染及快速定量检测方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
一、玉米DDGS简介 玉米酒精糟又称玉米DDGS(Distillers Dried Grains with Soluble)，主要是指在现代化技术和设备的条件下，燃料乙醇工厂用玉米籽实与精选酵母、酶等混合发酵生产乙醇和二氧化碳后，剩余的发酵残留物经低温干燥形成的共生产品。 另一类玉米酒糟蛋白饲料为DDG（Distillers Dried Grains），是将玉米酒精糟作简单过滤，滤渣干燥，滤清液排放掉，只对滤渣单独干燥而获得的饲料。前者的能量和营养物质总量均明显高于后者。 二、动物饲料中霉菌毒素国家残留限量标准 三、玉米DDGS的营养价值及应用 1.1 玉米DDGS饲料对不同畜禽的营养价值： 由于DDGS的蛋白质含量在26％以上，已成为国内外饲料生产企业广泛应用的一种新型蛋白饲料原料，在畜禽及水产配合饲料中通常用来替代豆粕、鱼粉，添加比例最高可达30％，并且可以直接饲喂反刍动物。 玉米DDGS不仅具有高蛋白、高有效磷、低植酸磷和高维生素含量的特点，而且还包含玉米发酵过程中融入的糖化曲和酵母的营养成分及其活性因子，被认为是一种高蛋白、高营养、无任何抗营养因子的优质蛋白质饲料原料。 1.2家禽 DDGS是必需脂肪酸、亚油酸的优秀来源，与其他饲料配合，成为种鸡和产蛋鸡的饲料。DDGS缺乏赖氨酸，但对于家禽第一限制性氨基酸是用于生长羽毛的蛋氨酸，所有的DDGS产品都是蛋氨酸的优秀来源。DDGS在不同家禽日粮的最大用量分别为：肉子鸡2.5%，育肥肉鸡5%，蛋鸡15%，种鸡20%，青年母鸡5%，鸭5%，斗鸡5%。 1.3猪 DDGS饲料能预防猪肠道消化疾病并能抑制饲料自身的病原菌，DDGS有效磷含量高，钙含量很低，需要其他矿物原料来补充；B族维生素和维生素E含量丰富，但赖氨酸和色氨酸含量很低，必须添加赖氨酸和色氨酸。玉米DDGS是猪不同生长阶段所需能量、蛋白质和其他主要养分的优秀来源。DDGS在不同猪日粮的最大用量分别为：子猪（7千克~12千克）和生长猪（12千克~50千克）20%，育肥猪（50千克~100千克）20%，怀孕母猪50%，泌乳母猪20%，
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小麦与面粉中呕吐毒素的污染及快速定量检测方案--8min准确定量
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
一、 小麦与面粉中呕吐毒素的污染情况 什么是呕吐毒素？ 呕吐毒素，又称脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)，该毒素最早于 1970 年在日本香川县的一次赤霉病大麦的病毒中发现，因为该种物质可以引起猪产生呕吐症状，故命名为呕吐毒素。由于它们具有很高的细胞毒素及免疫抑制性质，因此，对人类及动物的健康构成了威胁，特别是对免疫功能具有明显的影响。根据 DON 的剂量和暴露时间不同可引起免疫抑制或免疫刺激。当人摄入了被DON 污染的食物后，会导致厌食、呕吐、腹泻、发烧、站立不稳、反应迟钝等急性中毒症状，严重时损害造血系统造成死亡。1998 年，在国际癌症研究机构公布的评价报告中，呕吐毒素被列为 3 类致癌物。 呕吐毒素的产生及其自然分布 主要由禾谷镰刀菌、尖孢镰刀菌、串珠镰刀菌、拟枝孢镰刀菌、粉红镰刀菌、雪腐镰刀菌等镰刀菌产生。呕吐毒素的产毒菌株适宜在阴凉及潮湿的条件下生长，且广泛存在于大麦、小麦、玉米和燕麦中。由于中国传统饮食习惯中粮谷比例大大高于西方，使得呕吐毒素的危害更为突出。因此，呕吐毒素引起的污染 问题越来越受到人们的关注。 小麦和面粉中呕吐毒素问题及控制措施 小麦制品中的呕吐毒素 DON：呕吐毒素主要分布在小麦籽粒中的皮层部位，小麦经过初期加工后， 毒素主要转移至麸皮中，因此麸皮即成为小麦初加工产品中最易被呕吐毒素 DON 污染的基质；面粉中虽然呕吐毒素 DON含量低，但污染范围广。 二、 小麦与面粉中呕吐毒素国家残留限量标准 很多国家和地区都按照谷物形态种类和加工用途制定了DON限量标准。如欧盟规定的DON限量范围为 200-1750μg/kg，美国的为 1000μg/kg，加拿大的为 600-2000μg/kg，日本的为1100μg/kg 等。2015 年国际食品法典委员会(CAC)首次颁布了 DON 限 量标准，规定未加工的谷物中 DON 限量为 2000μg/kg，谷物制品中限量为 1000μg/kg，谷物基婴幼儿食品中限量为 200μg/kg。 三、 上海飞测生物小麦与面粉中呕吐毒素
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western-blot实验过程
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
Western，也称Western blot、Western blotting、Western印迹，是用抗体检测蛋白的重要方法之一。可按照以下步骤操作。 1.收集蛋白样品(Protein sample preparation) 使用细胞裂解液，对贴壁细胞、悬浮细胞或组织样品进行裂解。然后测定每个蛋白样品的蛋白浓度。 2. 电泳(Electrophoresis) (1) SDS-PAGE凝胶配制 SDS-PAGE凝胶（分离胶及浓缩胶）可以参考一些文献资料进行配制 (2) 样品处理 在收集的蛋白样品中加入适量浓缩的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。例如2X或5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。使用5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液可以减小上样体积，在相同体积的上样孔内可以上样更多的蛋白样品。5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液可以参考相关文献资料配制， 100℃或沸水浴加热3-5分钟，以充分变性蛋白。 (3) 上样与电泳 （1）冷却到室温后，把蛋白样品直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。 为了便于观察电泳效果和转膜效果，以及判断蛋白分子量大小，**使用预染蛋白质分子量标准。 （2）电泳时通常推荐在上层胶时使用低电压恒压电泳，而在溴酚蓝进入下层胶时使用高电压恒压电泳。对于Bio-Rad的标准电泳装置 或类似电泳装置，低电压可以设置在80-100V，高电压可以设置在120V左右。 （3）为了电泳方便起见，也可以采用整个SDS-PAGE过程恒压的方式，通常把电压设置在 100V，然后设定定时时间为90－120分钟。设置定时可以避免经常发生的电泳过头。通常电泳时溴酚蓝到达胶的底端处附近即可停止电泳，或者可以根据预染蛋白质分子量标准的电泳情况，预计目的蛋白已经被适 当分离后即可停止电泳。 3. 转膜(Transfer) （1）我们推荐在Western实验中选用PVDF膜。硝酸纤维素膜(NC膜)也可以使用，但硝酸纤维素膜比较脆，在操作过程中特别是用镊子夹取等过程中容易裂开。膜的使用请参考生产商的推荐使用步骤。通常如果使用Bio-Rad的标准湿式转膜装置，可以设定转膜电流为300-400mA，转膜时间为30-60分钟。也可以在15-20mA转膜过夜。具体的
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伯豪客户《EMBO reports》上阐述circRNA在膀胱癌中的作用机制
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
研究背景 膀胱癌（Bladder cancer）是一种常见的泌尿系统肿瘤，由于易转移，死亡率高，5年生存率只有8.1%。因此，研究膀胱癌的发病机制，有助于对膀胱癌的诊断和**。circRNA是一类具有闭合环形结构的非编码RNA，是现阶段转录组学研究的新星。本研究从circRNA的角度出发，深入阐述了一个circRNA在膀胱癌中的作用机制。 研究思路 研究结果 1. 膀胱癌特异性circRNA的筛选与鉴定 为筛选和膀胱癌特异性相关的circRNA，研究人员对3对配对癌组织和正常膀胱组织进行了circRNA特异性的高通量测序（伯豪生物参与），共鉴定到16,353个circRNA。其中，有88.35.%的circRNA来源于exons，有524个在癌组织中下调，47个上调。 接下来，研究人员在膀胱癌细胞系（T24T和UMUC3）中进行了RT-PCR验证，发现circHIPK3稳定地在两种细胞系中表达。进一步的分析和大样本鉴定表明，circHIPK3在79.5%的膀胱癌组织中特异性降低，并与grade, invasion和淋巴结转移相关。FISH实验表明，circHIPK3主要定位于细胞质中。 2. circHIPK3抑制膀胱癌细胞的迁移和侵袭 为探究circHIPK3的生物学功能，研究人员在两个细胞系中过表达circHIPK3，进行细胞表型检测。结果显示，细胞迁移和侵袭受到抑制。当siRNA敲降circHIPK3时，细胞迁移和侵袭增强。因此，circHIPK3在膀胱癌细胞中影响了细胞的迁移和侵袭能力。 3. circHIPK3在膀胱癌细胞中大量吸附miR-558 在第一篇circHIPK3的研究中，其就是通过miRNA sponge方式发挥功能。那么，在膀胱癌中，是否也是ceRNA方式呢？通过miRanda，PITA和RNAhybrid预测，发现有12个miRNA能与之结合。Pull down实验表明，miR-558能在T24T和UMUC3中与circHIPK3结合。进一步的突变实验也验证了两者的结合关系，FISH实验也验证了两者在细胞质中的共定位。因此，circHIPK3能直接结合miR-558。 4. miR-558通过靶向HPSE影响膀胱癌细胞的迁移，侵袭和血管生成 先前的研究表明，miR-558在神经母细胞瘤中通过促进HPSE的转录，而影
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