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蠕动泵技术原理及两种蠕动泵的简要介绍
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
技术原理及其优点 蠕动泵是市场上各种正位移泵中成长最快的几种之一。然而,许多人还不太熟悉这种泵的技术原理及其优点。蠕动泵也称作泵管泵。在过去,这种泵几乎全部用于实验室。但经过重新设计后,这种泵的流速和压力都得到了提高。现在,大量的蠕动泵已成功应用于化学流程控制和生产领域蠕动泵的普及可归因于其设计。该设计采用电机来驱动一组辊子转动。辊子相继碾过柔软的泵管,对其进行反复的压缩和释放。这种挤压作用产生真空,将流体吸入并通过泵管,从而完成泵送过程。因为只有泵管是过水部件,所以这种泵的维护和清洁简单方便。 蠕动泵种类之一分配型蠕动泵: 这类蠕动泵本身具有较大的液晶显示屏,显示屏上有流量显示或者转速显示,还有分装瓶数、装量、灌装时间、间隙时间以及其他必要和非必要的一些参数显示。 蠕动泵种类之二流量型蠕动泵: 流量型蠕动泵和分配型蠕动泵看起来有一些区别,但是这两种泵在硬件上基本上没有太大差异,其主要的还是程序的区别,但是市场上一些商家销售时,流量型蠕动泵比分配型蠕动泵价格要高的多。流量型蠕动泵和分配型蠕动泵是比较常用的,基本型蠕动泵使用起来并不是特别的方便,一般人很少有人选择。
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凝胶成像分析系统CCD的原理介绍
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
每个公司生产的凝胶成像从结构上看都是差不多的,都可以用于DNA/RNA/蛋白质等凝胶电泳不同染色(如EB、考马氏亮蓝、银染)等非化学发光成像检测分析,主要区分看凝胶成像的灵敏度与分辩率,要想拍出的图像质量好主要是取决于CCD的尺寸、像素,还有成像的一个软件功能。 以下是关于CCD的介绍: 一:CCD是Charge Coupled Device(电荷耦合器件)的缩写,它是一种半导体成像器件,因而具有灵敏度高、抗强光、畸变小、体积小、寿命长、抗震动等优点。 (1)CCD尺寸与图像质量 CCD尺寸是影响其成像表现力的一个硬指标,是指CCD对角线的长度,也即是说,CCD的尺寸决定了指感光器件的面积大小。感光器件的面积越大,也即CCD/CMOS面积越大,捕获的光子越多,感光性能越好,信噪比越低。在相同像素的情况下,CCD的面积越大,单个感光单元的面积也就越大,其信噪比和感光能力也就越强,成像质量就越好。相反,单个感光单元的面积越小,其信噪比和感光能力也就越弱,成像的质量就会偏差。 (2) CCD的像素 通常描述摄像头性能的时候都会用多少像素来表示,像素通俗地理解就是构成图像的基础材料,法国有个画派叫点彩派,是在画布上点出几百万个很小的油彩色点的方法来组成画的,当你站在一定距离看点彩派的油画时,这些色点混合起来形成一幅无缝的画;数字图像与点画派的原理是一样的,只不过代替小画点的是一个个称为像素(pixel)的颜色小方块。 像素高低与尺寸大小没有绝对关系,一般直观想法认为CCD的像素越高,所需空间应该越多,相对的CCD的面积尺寸应该越大!对照现在的生产技术来说,这个观念是对,也是不对。事实上,像素面积大小与线路布局精细度才是影响CCD尺寸的关键因素;也就是说,当制成技术越精密,线路所需占得的空间就越小,相对像素面积固定下,可以靠得更紧密,也就可以达到进一步缩小面积的目的,所以说在像素面积一定的情况下,线路布局越紧密,像素越高,CCD尺寸越大,成像质量也就越好。 二 :CCD结构分解 上层为
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无需染色的细胞活力检测介绍
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
细胞活力是总细胞中活细胞所占的百分比,其中台盼蓝染色方法最常见。台盼蓝可穿透变性的细胞膜,与解体的DNA结合,使其着色,而活细胞能阻止染料进入细胞内,故可以鉴别死细胞与活细胞。 激光全息细胞成像及分析系统可以实时监测细胞死亡过程,以及通过图像进行记录。 全息技术无需荧光和染料标记就可以得到细胞形态学数据。Khmaladze A. et al(2012) 和Pavillion N. et al(2012)使用DHM研究细胞死亡过程,观察到死亡过程中细胞体积显著减小。Kuhn et al(2013)使用DHM研究活/死细胞特点时得到实验结果和和基于荧光标记方法结果相一致。他们使用PI和Hoechst标记细胞。 鼠成纤维细胞L929接种在μ-slide 上,肿瘤药物依托泊苷etoposide(100μM)处理细胞,使用激光全息细胞分析系统(M3)分析细胞的死亡,并与台盼蓝染色法进行比较。图1中左图为台盼蓝染色结果,右图为全息结果,细胞越白,细胞越厚。死细胞是圆的,薄的。两种方法得到的结果是一样的。 使用激光全息细胞成像用来分析细胞活力,无需不同时间点进行细胞台盼蓝染色,就可以实时得到细胞活力数据。
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电子天平灵敏度达不到怎样调修?
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
灵敏性是指电子天平对微小的重量或质量变化做出反映的特性,也是指电子天平能觉察出放在秤盘上的物体质量改变量的能力。通常用灵敏度来表示,灵敏度是天平灵敏性的具体量值。电子天平平衡后,每加上1毫克砝码时,指针在标牌上所移动的距离,称为灵敏度。天平空载与全载时左、右盘的灵敏度,是指天平指针尖端的线位移或角位移与其产生位移质量之比。电子天平灵敏度与两盘所称物质的质量无关。天平分度灵敏度是单位质量所引起的电子天平标牌的分度数,天平指针所移动的距离愈大(即偏移的分度数越多),灵敏度越高,天平越灵敏。而分度值是引起单位分度所具有的质量值,因此,这个质量值越小,天平的灵敏性就越好。 电子天平的灵敏度达不到技术指标的故障现象、影响因素及调修方法是: (1)重心过高或过低。可通过降低或升高来调整重心球的位置来解决。 (2)刀子、刀承崩缺或磨损严重。可更换刀子、刀承。 (3)环境湿度太大。天平室应干燥、明亮、温度波动不大,防止水蒸气和腐蚀性气体进入室内,窗口**向北方向开。为避免天平两臂冷热不均,天平周围应采用适当方法将热源隔开,应与暖气、电炉、烘箱、照明灯等热源和功率较大的排风扇、空调等电器设备保持适当距离,以避免天平单臂受冷、热气流的影响。 (4)各零部件安装技术问题。天平的正确安装与使用,对天平的计量性能与使用年限有直接关系,计量性能降低会出现称量误差,影响计量结果。因此,天平应放置在平稳、牢固、离墙的水泥台子上,周围环境如有振动而又无法消除时,应将天平安放在有防振保护功能的台子上,以减少天平的变动并保护刀刃。 (5)空、全载灵敏度不一致故障:①离线:全载灵敏度低于空载。可通过升高边刀使三刀刃成平线进行排除。②吃线:全载灵敏度高于空载。可通过降低边刀使三刀刃成平线进行排除。 (6)左右盘灵敏度不一致故障:①中刀刃两边与刀承的摩擦力不一致。可调整中刀与刀承的位置,磨损严重的应更换中刀。②如两边刀长度、硬度、锋利程度不
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造纸工业废水处理中的预处理介绍
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
目前,污水处理技术尽管很多,但其基本原理主要包括分离、转化和利用。分离是指采用各种技术方法,把污水中的悬浮物或胶体微粒分离出来,从而使污水得到净化,或者使污水中污染物减少至最低限度。转化是指对已经溶解在水中、无法“取”出来或者不需要“取”出来的污染物,采用生物化学、化学或电化学的方法,使水中溶解的污染物转化成无害的物质,或者转化成容易分离的物质。总之,污水处理应使水中污染物朝有利于治理的方向发展。污水处理后可应用于农业、工业、建筑、地下水回灌、景观、娱乐、河流生态维持等方面,不同的用途对污水处理有不同的要求。 一、农业用水 农业用水是城市污水回用的一个大用户,主要包括大田作物、花卉和林地的灌溉。污水回用于农田灌溉时,不仅能给农业生产提供稳定的水源,而且污水中的氮、磷、钾等成分也为土壤提供了肥力,既减少了化肥用量,又增加了农作物产量,而且通过土壤的自净能力可使污水得到进一步的净化,尤其污水回用可控制农村地区无节制地超采地下水。但如果污水水质不能满足要求,则会破坏土壤结构,使农药以及重金属在作物和土壤中积累,降低农产品质量及产量。回用污水中污染物的限度要以作物种类及生长阶段以及水文地质条件等为依据,其水质必须符合《农业灌溉水质标准》。 污水灌溉是具有风险的,由于对污水处理程度不够或长期灌溉风险估计不足,我国的污水灌溉已有很多经验教训,如沈阳张士灌区用污水灌溉20多年后,污染耕地2500h㎡,造成严重的镉污染,稻田含镉5—7mg/Kg;天津近郊因污水灌溉导致2.3万h㎡农田受到污染;广州近郊因为污水灌溉污染农田2700h㎡,因施用含污染物的底泥约13333h㎡的土壤被污染,污染面积占耕地面积的46%;20世纪80年代中期,对北京某污灌区进行的抽样调查表明,大约60%的土壤和36%的糙米存在污染问题。 二、环境用水 主要用于城市水系补充用水以及绿化隔离带和园林灌溉用水。一个城市没有水就没有灵气。用中水补充河湖水系,替
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离心机的日常保养介绍
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
为了延长离心机的使用寿命和正确操作离心机,下面巴玖技术人员为您分析离心机的日常保养介绍: “转鼓” 1、离心机运转前应先切断电源并先松开离心机刹车,可以手试转动转鼓,看有无咬煞情况。 2、检查其他部位有无松动及不正常情况。 3、接通电源依顺时针方向开车启动(通常从静止状态到正常运转约需40-60秒左右)。 4、通常每台设备到厂后均须空车运转3小时左右,无异常情况即可工作。 5、物料尽可能要放置均匀。 6、必须专人操作,容量不得超过额定量。 7、严禁机器超速运转,以免影响机器使用寿命。 8、机器开动后,若有异常情况必须停车检查,必要时需予以拆洗修理。 9、离心机工作时是高速运转,因此切不可用身体触及其转鼓,以防意外。 10、滤布的目数应根据所分离物料的固相颗粒的大小而定,否则影响分离效果。另外滤布安装时应将滤布密封圈嵌入转鼓密封槽内,以防物料跑入。 11、为确保离心机正常运转,转动部件请每隔6个月后加油保养一次。同时查看轴承处运转润滑情况,有无磨损现象;制动装置中的部件是否有磨损情况,严重的予以更换;轴承盖有无漏油情况。 12、机器使用完毕,应作好清洁工作,保持机器整洁。 13、不要将非防腐型离心机与于高腐蚀性物料的分离;另外严格按照设备要求、规定操作,非防爆型离心机切不可用于易燃、易爆场合。 “喘振” 1、制冷离心式机组的离心机常发生“喘振”现象。 2、制冷离心压缩机原理是将大分子量的制冷剂通过高速运动将其积压到小的空间进行压缩,然后通过降温进行冷凝。 3、离心式冷水机组能量调节方式是靠调节高速转动的导片角度来调节压缩比 4、当供冷量下降的时候,导片做的功降低,压缩出去的气体压力和吸入压缩机的气体压力相近,导致气体回流产生机械的强迫震动。(也称“喘振”)喘振会造成机械部件的损坏。 更多的离心机详细信息请点击查看:
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单克隆抗体的克隆化方法介绍
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
实验原理 经过抗体测定的阳性孔,可以扩大培养,进行克隆,以得到单个细胞的后代分泌单克隆抗体。克隆的时间一般说来越早越好。因为在这个时期各种杂交瘤细胞同时旺盛生长,互相争夺营养和空间,而产生指定抗体的细胞有被淹没和淘汰的可能。但克隆时间也不宜太早,太早细胞性状不稳定,数量少也易丢失。 克隆化的阳性杂交瘤细胞,经过一段时期培养之后,也还会因为细胞突变或特定染色体的丢失,使部分细胞丧失产生抗体的能力,所以需要再次或多次克隆化培养。克隆化次数的多少由分泌能力强弱和抗原的免疫性强弱而决定。一般说,免疫性强的抗原克隆次数可少一些,但至少要3~5次克隆才能稳定。 实验步骤 1. 有限稀释法 1) 材料 a. 微量培养盘,盘内各孔于克隆化前一天培养小鼠腹腔细胞(即饲养细胞)每孔2万~4万。 b. HT培养基 2) 操作方法 a. 取出抗体阳性孔细胞,用HT培养液制成细胞悬液。并取样进行台盼兰染色,计数。 b. 用HT培养液将细胞稀释成200个/ml、40个/ml、20个/ml和的悬液。 c. 用吸管将细胞悬液分别种入微量培养盘,每孔0.05ml,细胞含量分别为10个/孔、2个/孔、1个/孔和0.5个/孔。 d. 5%CO2饱和湿度,37℃培养。 e. 每天用倒置显微镜观察克隆生长情况,选择只有一个集落生长的孔,弃掉两个以上和没有细胞生长的孔。 f. 克隆大量繁殖后,布满孔底的1/3~1/2时,测培养液抗体。 g. 抗体阳性孔细胞,移到有饲养层的组织培养瓶中,并传2~4代就可以脱离饲养细胞,建成克隆株。 2. 软琼脂克隆化 借助撒在软琼脂上单个细胞定位生长,而达到克隆化,具体操作如下: 1) 配2.5%的琼脂糖30ml,水浴溶化后,移入45℃水浴中。 2) 将117ml完全DMEM液和3ml 10倍浓度的DMEM液混合,置45℃水浴预热。 3) 将琼脂糖与DMEM液混合,即为含0.5%琼脂糖的完全DMEM液,并加75×108 脾细胞。 4) 每块平皿加10ml,于室温中凝固。 5)
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烟草转化实验流程介绍
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
实验材料烟草细胞:BY-2 实验步骤 1. BY-2 细胞培养 BY -2 细胞悬浮培养在摇床上,避光,温度260 C,转速130r pm,每7天将 1m l 细胞转入20m l新鲜的液体培养基中继续培养。BY -2 愈伤组织生长在固体培养基上,每3-4周继代一次。转基因的悬浮细胞和愈伤组织生长在含相应抗生素的培养基中。 2. 用干转化的农杆菌GV3101的准备 (1)接种农杆菌单菌落到2 ml新鲜的YEB液体培养基中,28“培养过夜; (2)取200ul培养物加到l0ml新的培养基中继续培养3-4小时: (3) '5000 rpm,离心5 min集菌,用BY-2液体培养基重悬菌体,OD为0.5左右,待用。 3. 农杆蔺介导的BY-2悬浮细胞的外源基因转化 (1)取生长到第3或4天的BY-2细胞4 ml,加入上述备用的农杆菌液100ul,共培养 3天; (2) 500 g离心2 min,收获细胞并用BY-2液体培养基(Amp 500 mg/L)洗3次 : (3)将细胞稀释后铺于BY-2固体培养基的平板(Kan 100 mg/L, Amp 500mg /L )上,26℃黑暗培养。 (4)四周后,取出生长良好的愈伤小块,打散后放入液体培养基悬浮培养。 4. 农杆菌介导的BY-2愈伤组织的外源基因转化 (1)取培养2-3周的烟草愈伤组织小块浸入农杆菌液中20 min,取出用无菌滤纸吸干,置BY-2 培养基平板(无抗生素)上培养2天; (2)取出愈伤小块,用无菌水洗4次,然后用含抗生素(Amp 500 mg/L)的无菌水浸泡30-60m in; (3)取出愈伤小块,用无菌滤纸吸干,置于培养BY-2的平板(Amp500mg/L,Kan100mg/)上。 (4)培养四周后,挑出生长的愈伤小块,转移到新的抗性平板(Kan 100 mg/L) 上继续生长; (5)取出生长良好的愈伤小块,打散后放入液体培养基中,26'C, 130 rpm,在摇床上黑暗培养; (6)每7天继代一次。
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干扰素的制备及检测实验介绍
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
实验原理 干抗素是干扰素诱生剂作用于有关生物细胞所产生的一类高活性、多功能蛋白质。它从细胞产生和释放出来以后,又作用于相应的其它同种细胞,使其获得抗病毒及抗肿瘤等多方面的免疫力。 所谓干扰素诱生剂,是指能诱导有关生物细胞产生干扰素的一类物质。能诱导有关生物细胞产生α和β干扰素者称甲类干扰素诱生剂,如各种动物病毒、细胞内寄生的微生物等;可诱导T细胞产生γ干扰素的称为乙类干扰素诱生剂,如脂多糖、链球菌毒素、肠毒素A等。 在实际工作中,制备干扰素多采用两种方法。一是用干扰素诱生剂诱导某些生物细胞产生干扰素,经提取纯化并检定合格后即可使用。该法所用的细胞多为外周血白细胞。二是采用基因工程法进行生产,即将干扰素基因导入大肠杆菌内,通过培养大肠杆菌来生产干扰素。目前,大规模生产干扰素主要采用基因工程法。 实验设备 细胞培养设备(如培养瓶、多孔培养板、温箱、显微镜、旋转培养器等)、水浴箱等。 实验步骤 1. 制备诱生剂:采用NDVF系弱毒株,以鸡胚尿囊液形式保存于-20℃, 其血凝滴度稳定在1:640~1:1 280之间。大量繁殖时,用0.5%水解乳蛋白稀释100~1 000倍,接种于9日龄鸡胚尿囊腔,置37℃培养72h后,收获尿囊液,效价测定应大于1:640,无菌检查应合格。 2. 制备诱生细胞:无菌采取人外周血(多用人脐带血,或血库贮藏血),置于含肝素的无菌瓶内,于4℃保存不超过24h,诱生细胞(白细胞)不单独提取,以全血代替。 3. 制备粗制干扰素: 1) 加诱生剂,按1ml抗凝全血加0.2ml诱生剂(即NDVF系尿囊液,其血凝滴度不低于1:640); 2) 加温吸附,将加有诱生剂的抗凝全血置37℃水浴中1h,每隔15min晃动一次,使NDVF吸附于白细胞上。然后以1000r/min离心20min,弃上清,留沉淀物; 3) 加营养液孵育诱生,按抗凝全血的1~2倍量加Eagle营养液于上述沉淀物中,混匀,置35~36℃温箱内旋转培养18~20h; 4) 离心及酸处理,将上述培养物以2000r/min离心30min,取上清,以6mo
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常见染色液的配制实验介绍
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
实验步骤 一、吕氏(Loeffler)碱性美蓝染液 A液:美蓝(methylene blue) 0.6g 95%酒精 30ml B液:KOH 0.01g 蒸馏水 100ml 分别配制A液和B液,配好后混合即可。 二、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液 A液:碱性复红(basic fuchsin) 0.3g 95%酒精 10ml B液:石炭酸 5.0g 蒸馏水 95ml 将碱性复红在研钵中研磨后,逐渐加入95%酒精,继续研磨使其溶解,配成A液。 将石炭酸溶解于水中,配成B液。 混合A液及B液即成。通常可将此混合液稀释5—10倍使用,稀释液易变质失效,一次不宜多配。 三、革兰氏(Gram)染色液 1.草酸铵结晶紫染液 A液:结晶紫(crystal violet) 2g 95%酒精 20ml B液:草酸铵(ammonium oxalate) 0.8g 蒸馏水 80ml 混合A、B二液,静置48小时后使用。 2.卢戈氏(Lugol)碘液 碘片 1.0g 碘化钾 2.0g 蒸馏水 300ml 先将碘化钾溶解在少量水中,再将碘片溶解在碘化钾溶液中,待碘全溶后,加足水分即成。 3.95%的酒精溶液。 4.番红复染液 番红(safranine O) 2.5g 95%酒精 100ml 取上述配好的番红酒精溶液10ml与80ml蒸馏水混匀即成。 四、芽孢染色液 1.孔雀绿染液 孔雀绿(malachite green) 5g 蒸馏水 100ml 2.番红水溶液 番红 0.5g 蒸馏水 100ml 3.苯酚品红溶液 碱性品红 11g 无水酒精 100ml 制法取上述溶液10ml与100ml5%的苯酚溶液混合,过滤备用。 4.黑色素(nigrosin)溶液 水溶性黑色素 10g 蒸馏水 100ml 称取10g黑色素溶于100ml蒸馏水中,置沸水浴中30分钟后,滤纸过滤 二次,补加水到100ml,加0.5ml甲醛,备用。 五、荚膜染色液 1.黑色素水溶液 黑色素 5g 蒸馏水 100ml 福尔马林(40%甲醛) 0.5ml 将黑色素在蒸馏水中煮沸5分钟,然后加入福尔马林作防腐剂。 2.番红染
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麻醉家兔、大鼠中心静脉压的测定实验介绍
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
实验原理 中心静脉压(central venous pressure CVP)是用来反映右心房内压力变化的一个指标。右心房内压力的变化受到两个因素的影响:第一是上下腔静脉回流的情况,比如大量失血或者丢失体液而发生低血容量性休克时,回心血量明显减少,右心房内压力会降低,中心静脉压降低;第二是右心室内压力变化的情况,比如肺动脉高压时,右心室内压也增高,右心房内血液进入右心室受阻,右心房内压增高,中心静脉压增高。 实验试剂 1. 20%氨基甲酸乙酯注射液或者1.5%戊巴比妥钠注射液 2. 1%普鲁卡因注射液 3. 0.3%肝素生理盐水注射液 实验设备 1. 常用实验器械一套 2. 家兔或者大鼠实验台一个 3. 用于家兔或者大鼠的医用塑料导管(家兔用导管外径为2mm,内径为1.5mm;大鼠用导管外径为1mm,内径为0.8mm,比较柔软的塑料导管) 4. 水检压计或者压力换能器及其多通道生理信号采集记录仪器 实验材料 家兔,体重为2kg左右;大鼠,体重为200~250g左右。 实验步骤 1. 取体重为2kg左右的家兔,用20%氨基甲酸乙酯注射液5ml/kg或者1.5%戊巴比妥钠注射液2ml/kg,耳缘静脉注射麻醉,待动物被麻醉后,将其固定在实验台上,颈部剪毛,用手术剪刀剪开颈部正中的皮肤,用血管钳钝性分离右侧皮下组织,即可看到颈外静脉(有两个分支),用血管钳小心地分离出两个分支融合在一起的血管约2cm,分别在远心端和近心端穿两条手术线备用,先将远心端结扎,轻轻提起远心端结扎线,用眼科剪刀在静脉壁上以45°角度剪口,将充满生理盐水的水检压计的导管或者压力换能器的导管向近心端方向插入大约4cm左右即可。然后用近心端的手术线轻轻结扎血管和导管,再用远心端的手术线轻轻结扎固定导管。打开水检压计的导管或者压力换能器的三通开关,就可以看到中心静脉压的波动变化。 2. 指标及含义 中心静脉压(CVP cmH2O)主要用于监测右心房压力的变化,评价体循环有效循环血容量的情况,或者是右心室压力变化的情况。 注意事项 因为静脉壁比较
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冷冻组织切片的制作实验介绍
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
实验试剂 液氮,干冰,1%明胶,4%多聚甲醛,PBS,含1%NP-40的PBS,3%BSA/PBS稀释抗体,辣根过氧化物酶标记的二抗,DAB/金属盐试剂,3%过氧化氢,0.3%(W/V)氯化镍贮存液,Harris苏木精,乙醇 实验设备 载玻片,Whatman 1#滤纸,低倍光学显微镜 实验材料 未受损伤的组织 实验步骤 1. 将未受损伤的组织切剖成小样本,约lcmXIcmX0.4cm。 2. 将标本放在卡片的一端。标记该卡片,将带有标本的一端浸入液氮中。60s后,取出标本并放在干冰上。修剪卡片,使其大小刚好比组织块稍大些,转入预冷的(-70℃)带有标记的小瓶中。 3. 切片前,用1%明胶包被洁净的载玻片。加热至50℃使明胶溶于水中,冷却,加入0.02%叠氮钠。将玻片浸入明胶溶液中30s,取出,自然干燥。 4. 按照仪器使用说明书,用低温恒温器制备冷冻切片。通常切片厚度在5-10gm之间。用包被过的载玻片收集切片。 5. 让切片自然干燥。浸入新鲜配制的4%多聚甲醛中2min。 6. 用PBS洗数次,放入含1%NP-40的PBS中5rain。用PBS洗数次。 7. 将带有组织切片的载玻片放在湿盒中。加合适稀释度的一抗,用含蛋白质的溶液如3%BSA/PBS稀释抗体。 单克隆抗体**选用杂交瘤细胞培养上清(特异性抗体浓度为20-50gg/m1)。小鼠腹水、纯化的单克隆抗体和多克隆抗体,以及粗制的多克隆抗血清应该测试其稀释度,以使特异性抗体的浓度在0.1~10ug/m1之间。如果特异性抗体的浓度是未知的,则制备并测试初始制品的不同稀释度(1:10,1:100,1:1000和1:10 000)。 8. 将玻片置湿盒中于室温下孵育至少60min。对于某些反应来说,孵育时间可延长至24h,以增加其敏感性。 9. 用PBS洗3次,每次5min以上。 10. 加辣根过氧化物酶标记的二抗(特异性针对一抗)。这些试剂可以购自不同的经销商。如果二抗的确切用量是未知的,测试1:50—1:1000稀释的二抗。用含蛋白质的PBS稀释,如3%BSA/PBS。 11. 将样本置湿盒中,于室温下孵育30min。 12. 用PBS洗3次,每次5min以上。
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磁力搅拌器与普通搅拌器比较及应用介绍
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
磁力搅拌器是一种常用的搅拌仪器,被广泛应用于生物、医药、化学、化工等领域。磁力搅拌器搅拌湖综合热搅拌同时经行,适用于粘度不是很大的液体或者是固液混合物。磁力搅拌器本身存在的优点也是非常多的,这些优点在行业中发挥的作用也是非常大的。那么具体的优点是什么呢?下面小编就来为大家具体介绍一下吧。 磁力搅拌器主要通过微电机带动高温强力磁铁产生旋转磁场来驱动容器内的搅拌子转动,以达到对溶液进行加热,从而使溶液在设定的温度中得到充分的混合反应。搅拌的作用,是使反应物混合均匀,使温度均匀;在一个密闭的容器中加热,需要防止暴沸,例如在蒸馏过程中,可以加入沸石,也可以用磁力搅拌器;加快反应速度,或者蒸发速度,缩短时间。和普通搅拌机相比,它的优点如下: 1、全封闭式加热盘可作辅助加热之用,可长期加热使用; 2、磁力搅拌器采用优质直流电机,噪音小,调速平稳; 3、可在密闭的容器中进行调混工作,使用十分理想与方便; 4、搅拌器可设定温度及温度显示,可长期加热使用,数显直观准确. 5、由聚四氟乙烯和优质磁钢精制成的搅拌子,耐高温、耐磨、耐化学腐蚀、磁性强; 特点:外壳由特殊阻燃增强型塑料注塑成型,磁力搅拌器有非常高的抗热、抗酸碱及有机溶剂的特性。磁力搅拌器广泛适用于不同粘稠度溶剂的搅拌,搅拌速度和加热温度均可连续调节。 加热盘底部采用双重融热装置,可充分提高效率,并避免热量传导至机壳。由铝合金制成,外部喷涂特氟龙材料,使其既有良好的导热效果,又具有较强的抗冷热、耐腐蚀性能。加热盘整体成机壳和其上部的凸面设计可有效防止在搅拌过程中不慎溢出的溶液流入磁力搅拌器内损坏电子器件。
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仪器仪表维护和保养的注意事项
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
仪器仪表,种类众多,在多个领域有着广泛的应用。正因为如此,仪器仪表在使用过程中故障问题也是非常多的,所以平时就需要多注意仪器仪表的维修和保养,可以有效的提高仪器仪表的性能,并能够延长其使用寿命。下面就为大家简单介绍仪器仪表维护和保养的注意事项: 1、在使用逻辑笔、示波器检测信号时,要注意不使探针同时接触两个测量引脚,因为这种情况的实质是在加电的情况下形成短路。检测电源中的滤波电容时,应先将电解电容器的正负极短路一下,而且短路时不要用表笔线来代替导线对电容器进行放电。 因为这样容易烧断芯线。可以取一只带灯头引线的220V,60~100W的灯,接于电容器的两端,在放电瞬间灯泡会闪光。 2、在潮湿环境下检修仪器仪表故障时,对印刷线路用万用表测其各点是否通畅很有必要。 因为这种情况下的主要故障是铜箔腐蚀。 3、在检修仪器仪表内部电路时,如果安装元件的接点和电路板上涂了绝缘清漆,测量各点参数时可用普通手缝针焊在万用表的表笔上,以便刺穿漆层直接测量各点,而不用大面积剥离漆层,不要带电插拔各种控制板和插头。 因为在加电情况下,插拔控制板会产生较强的感应电动势,这时瞬间反击电压很高,很容易损坏相应的控制板和插头。 4、检修仪器仪表时不要盲目乱敲乱碰,以免扩大故障,越修越坏。 5、在拆卸、调整仪器仪表时,应记录原来的位置,以便复原。 6、修理精密仪器仪表时,如不慎将小零件弹飞,应首先判断可能飞落的地方,切勿东找一下,西翻一下,可采取磁铁扫描和视线扫描方法进行寻找。 7、在仪器仪表维修工作中,首先应弄懂仪器仪表的基本原理,并掌握有关电子方面的知识和技能,而且应备好所有仪器仪表的说明书、图纸等技术资料,另外应养成一种良好的工作素质,从而在仪器仪表的维修工作中提高效率,减少失误。 以上内容,就是为大家介绍的仪器仪表的维护与保养应该注意的内容,希望大家能够掌握这些。虽然都是一些简单方法,但是对于用户的使用用处
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ELISA实验常见问题及解决方案介绍
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
感谢您联科生物从,为使您的ELISA实验顺利实施,取得准确的结果,请您在实验前仔细阅读此实验指南。 以下是影响ELISA检测的关键因素,也是众多ELISA 用户在实验中经常遇到的问题及解决方案,希望能对您的ELISA检测有帮助: 温度是ELISA结合反应的重要影响因素。为了使所有样本在一致的温度下反应,实验前务必将所有试剂平衡至室温,包括检测样本。避免因温度的动力学反应差异而导致ELISA检测结果的不准确。 按照推荐方式保存标准品;溶解标准品之前需短暂离心,彻底收集粉末;确保标准品完全溶解和混匀(大约10min),然后再进行后续的系列稀释步骤,确保每一步都充分混匀且精确移液;显色的恰当终止;选择合适的数学拟合方程绘制标准曲线。 为获得更准确的实验结果,强烈建议标准品及样本进行复孔检测。因为复孔检测可以:★计算平均值,确保实验结果更准确;★解决实验中误操作造成的跳孔现象;★计算CV值,对实验的操作和试剂盒的精密度进行评估。 振荡孵育使反应更充分,振荡洗涤使背景更干净。建议使用酶标专用96孔微孔板振荡器。孵育过程振荡,可以加快、加强抗原抗体分子间的相互碰撞接触,使得反应过程更加完全,OD值通常会比未振荡孵育的结果要高;洗涤过程振荡,可以使洗板更干净,在很大程度上能降低背景值,同时可以提高试剂盒检测的灵敏度。 ELISA实验最终需要酶催化底物显色反应来完成,在最佳时间终止反应是ELISA实验成功的重要因素。在HRP-TMB酶促反应系统中,当最高浓度标准品颜色不再变深,倒数2-3个浓度标准品颜色开始有浅蓝色时,便需要终止反应;或者也可以根据最高浓度标准品孔在620nm的OD值来决定,OD620=0.9-0.95之间时即可终止。 首先,酶标仪使用前务必预热10-15min,使测读结果更稳定。其次,ELISA实验采用双波长测定吸光度,可以排除单波长检测时的测定干扰(标本的浓度,干扰色等)。一般采用最大波