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感受态专题:电穿孔转化感受态E.coli TG1细胞的制备
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
材料和试剂 1. 恒温旋转式摇床 2. 三角烧瓶(容量为1或2L) 3. 50ml灭菌离心管 4. 低温高速离心机 5. SB培养基 细菌培养用胰化蛋白胨 20g 细菌培养用酵母提取物 5g NaCl 0.5g 去离子水 950ml 250mmol/L KCl溶液 10ml 以5N的NaOH调节溶液的pH值至7.0,加去离子水至1L,高压蒸气灭菌。 6. 20%葡萄糖溶液 7. 1mol/L MgCl2溶液 8. 10%甘油 操作步骤 1. 从新鲜的LB平板培养物中挑选一个TG1克隆,接种于10m1 SB培养基中。 2. 37℃摇床培养过夜。 3. 取2.5ml培养物转接于0.5L SB中,另添加10ml 20%葡萄糖和5ml 1mol/L MgCl2。 4. 37℃培养直到OD600=0.7~0.8。 5. 将培养物置于冰浴15min,然后4000r/min于4℃离心20min,弃上清。 6. 将菌体重悬于1/2体积的预冷10%甘油中,4000r/min于4℃离心20min,弃上清。 7. 重复第(6)步骤。 8. 将菌体重悬于15ml 10%甘油,并转移至一支50ml的离心管中。3500r/min于4℃离心15min。小心地去掉上清,得到4~5ml细菌。迅速地将其吹打重悬; 9. 分装成200μl或40μl 的小份,操作应在乙醇/干冰浴中进行。贮存于-70℃。 10. 用pUC19质粒测试制备感受态细菌的转化效率,应达到109cfu/μg DNA。
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感受态专题:电转化流程的介绍
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
一、电转化感受态细胞的制备 1.用枪头挑取单克隆菌落,投入盛有10ml LB液体培养基的50ml离心管中。(同时做培养基和枪头的空白对照) 2.37℃,220rpm,培养14-16个小时。 3.第二天,以1:100的比例将这10ml菌液倒入1000ml LB液体培养基中,37度,220rpm,振摇2-3小时,每半小时测一次OD,当OD值达到0.3-0.4时,停止培养。 4.将菌液在冰上预冷30分钟,随后将菌液分装到500ml 预冷的离心杯中,4℃,2500rpm离心10分钟。 5.弃上清,离心杯中加入少量ddH2O,使沉淀悬浮后,再将水注满离心杯,4℃,4000rpm离心10分钟。 6.弃上清,加少量灭菌水,重悬菌体,再将水注满离心杯,4000rpm,4℃,离心10min。 7.弃上清,往离心杯中加入少量10%甘油(灭菌,预冷),重悬菌体,再加满10%甘油, 4℃, 4000rpm, 离心10min。 8.弃上清,每个离心杯中加入5ml10%的甘油,使沉淀悬浮后,将菌液以300ul/管分装于1.5ml的离心管中,-80 ℃冰箱中保存。同时取100 μl感受态加0.01ng puc18直接电穿孔转化,检测转化效率。 9. 次日观察转化子生长情况,并记录。 二、连接产物纯化 1.将连接产物转移至一1.5ml Eppendorf管中,加入下列试剂: 10μl of ddH2O 2μl of 3M NaAC(PH5.2) 50μl of 无水乙醇 轻轻混匀,稍微离心并将其置于-20℃放置1小时以上; 2.4℃,top Speed 离心30分钟; 3.小心移去上清,避免接触到管底的沉淀物; 4.加入500μl70%的乙醇,轻轻颠倒几次洗涤沉淀(注:不要离心混匀); 5.4℃,top Speed离心5分钟; 6.小心移去上清,将此Eppendorf管置空气中直至无乙醇气味; 7.加入10μlddH2O重新溶解沉淀,4℃短期保存,-20℃长期保存备用; 三、电转化 1.从-80℃冰箱中取出感受态细胞,置于冰上解冻; 2.取1 μl 纯化后的质粒于一1.5ml的离心管中,将其和0.1CM的电极杯一起置于冰上预冷。 3.将40~100ul解冻的感受态细胞转移至此1.5ml 的离心管中,小心混匀,冰上放置10min。 4.打开电转仪,调至Manual,调节电压
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感受态专题:细胞瞬时转染
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
原理: 通过脂质体介导转染法及电穿孔等基因转染技术,将靶基因导入细胞,一般在转染后48小时左右,靶基因即可在细胞内表达。根据不同的实验目的,48小时后即可进行靶基因表达的检测等实验。 应用: 观察目的基因及其表达蛋白在某种细胞中的功能(短时间即可进行观察,但效应会很快丢失)。 一般流程: 1)细胞接种:转染实验前天接种细胞,各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进行转染当天细胞密度应达到60%~80%覆盖。 2)细胞转染(脂质体、电穿孔、FuGENE6等) 3)48小时以后鉴定目的基因的表达情况。 前期准备: l构建好的外源基因载体,或目的基因基本信息。 l待转染的细胞系(1×106个细胞,可传代,倍增时间小于48小时)以及细胞培养条件的说明。 l若需要检测靶基因的表达,请提供相应抗体。 结果呈现:
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疯狂的小鼠视觉研究实验
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
疯狂的小鼠视觉研究实验 近些年,神经科学的发展迅速,然而在大脑视觉系统研究中多数研究人员使用的都是小鼠模型,因为小鼠是夜行动物、他们使用鼻子和胡须作为导航,因此一些人担心对小鼠视觉研究实验可能毫无意义! Nature:疯狂的小鼠视觉研究实验 几十年以来,科学家们都在致力于大脑视觉系统的研究,旨在了解视觉信号如何被大脑皮层处理。近十年前,美国的两位科学家开始以小鼠作为研究模型进行基础研究,尽管小鼠的大脑结构与人类相差甚远,但是这种研究不无意义。 当 Cris Niell 说他想研究小鼠是如何看东西的时候,并没有得到更多高级神经科学家的认可。小鼠是夜行动物,它们用鼻子和胡须为自己导航,因此许多研究人员认为关于小鼠的许多视觉实验是毫无意义的。通常情况下,研究人员都用猴子作为替代模型,因为猴子有处于正前方的视野和比小鼠更加敏锐的视觉。更重要的是科学家们可以依靠几十年的成熟的技术,将灵长类动物的实验结果运用到人类的视觉系统。“人们都说,在老小鼠身上研究视觉系统,这太疯狂了,”Niell 回忆说。 但他始终坚信这些啮齿动物能够为视觉系统的研究带来一些独特的东西。自 1960 年代以来,研究人员就利用猫和猴子做过一些研究,发现了大脑将信息从眼睛映射到意识的重要线索。但是想要在细胞水平上进行更加深入的研究,研究人员就必须能够控制和监测神经元,而在猫和猴子的复杂系统中很难做到这一点,在小鼠身上就相对容易得多。如果小鼠处理视觉刺激的进程与灵长类动物相似的话,我们就可以搞清楚大脑是如何在受到外来刺激后从大量的数据中提取信息——甚至弄清楚大脑是如何工作的。 在众多神经科学家对 Niell 的想法表示质疑的时候,他找到了一个支持者,旧金山加州大学的 Michael Stryker。Stryker 为 Niell 提供了在自己实验室里攻读博士后的机会,两人从 2005 年开始着手准备这一项疯狂的小鼠视觉实验。 将近十年后,这两位研究者拥有了更多的研究同仁。在去年举行的神经科
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寄生虫检测制片盒使用说明书
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
寄生虫检测制片盒使用说明书 (改良加藤氏法) 用途:改良加藤氏法是世界卫生组织(WHO)推荐的检测寄生虫卵方法,可同时检测蛔虫卵、钩虫卵、肝吸虫卵等等。本检测制片盒辅助用于显微镜检测粪便中寄生虫虫卵,可提高寄生虫检测效果并能定量分析感染度。 检测盒组成: 1、复合染液1瓶 30毫升/瓶 2、定量板 100片 3、刮片 100片 4、尼龙网 100张 5、玻璃纸 100张 6、载璃片 100片 7、使用说明书 1 份 操作步骤: ⒈ 置尼龙网于受检粪样上,用刮片在尼龙网上轻刮,粪便细渣即由网片微孔中透至网片表面。 ⒉ 取定量板1片放在载玻片中部,用刮片将尼龙网上细粪渣填入定量板的中央孔中,填满刮平。 ⒊ 小心提起定量板,粪样即留在载玻片上。 ⒋ 取1张经复合染液浸渍24小时的玻璃纸盖在粪便均匀展开至玻璃纸边缘。 ⒌ 编号后置于30—40℃,30分钟后即可镜检。 结果判断: 以镜检每片检出的虫卵数的24倍数,即为每克粪便虫卵数(EPG) 注意事项: ⒈ 覆盖玻璃纸时应刮去上面多余的染液。 ⒉ 对薄壳虫卵,如钩虫卵等的透明时间最长不能超过2小时,避免因透明过度而漏检。 ⒊ 建议每份粪样做两张涂片,求其均值,再计算其EPG。 警示及提示性说明: 检测后的样本及其它废弃物应按医用垃圾有关管理规定妥善处理
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动物、植物、微生物中提取高质量的基因组DNA
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
基因组DNA的提取 概 述 基因组DNA的提取通常用于构建基因组文库、Southern杂交(包括RFLP)及PCR分离基因等。利用基因组DNA较长的特性,可以将其与细胞器或质粒等小分子DNA分离。加入一定量的异丙醇或乙醇,基因组的大分子DNA即沉淀形成纤维状絮团飘浮其中, 可用玻棒将其取出,而小分子DNA则只形成颗粒状沉淀附于壁上及底部, 从而达到提取的目的。在提取过程中,染色体会发生机械断裂,产生大小不同的片段,因此分离基因组DNA时应尽量在温和的条件下操作,如尽量减少酚/氯仿抽提、混匀过程要轻缓, 以保证得到较长的DNA。一般来说,构建基因组文库, 初始DNA长度必须在100kb以上,否则酶切后两边都带合适末端的有效片段很少。而进行RFLP和PCR分析, DNA长度可短至50kb, 在该长度以上,可保证酶切后产生RFLP片段(20kb以下),并可保证包含PCR所扩增的片段(一般2kb以下)。 不同生物(植物、动物、微生物)的基因组DNA的提取方法有所不同; 不同种类或同一种类的不同组织因其细胞结构及所含的成分不同,分离方法也有差异。在提取某种特殊组织的DNA时必须参照文献和经验建立相应的提取方法, 以获得可用的DNA大分子。尤其是组织中的多糖和酶类物质对随后的酶切、PCR反应等有较强的抑制作用,因此用富含这类物质的材料提取基因组DNA时, 应考虑除去多糖和酚类物质。 本实验以水稻幼苗(禾本科)、李(苹果)叶子、动物肌肉组织和大肠杆菌培养物为材料,学习基因组DNA提取的一般方法。 1. 从植物组织提取基因组DNA 一、材料 水稻幼苗或其它禾本科植物,李(苹果)幼嫩叶子。 二、设备 移液器,冷冻高速离心机,台式高速离心机,水浴锅,陶瓷研钵,50ml离心管(有盖)及5ml和1.5ml离心管,弯成钩状的小玻棒。 三、试剂 1、提取缓冲液Ⅰ:100mmol/L Tris·Cl, pH8.0, 20mmol/L EDTA, 500mmol/L NaCl, 1.5% SDS。 2、提取缓冲液Ⅱ:18.6g葡萄糖,6.9g二乙基二硫代碳酸钠,6.0gPVP,240ul巯基乙醇,加水至300ml。
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感受态专题:细胞瞬时转染技术
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
原理: 通过脂质体介导转染法及电穿孔等基因转染技术,将靶基因导入细胞,一般在转染后48小时左右,靶基因即可在细胞内表达。根据不同的实验目的,48小时后即可进行靶基因表达的检测等实验。 应用: 观察目的基因及其表达蛋白在某种细胞中的功能(短时间即可进行观察,但效应会很快丢失)。 一般流程: 1)细胞接种:转染实验前天接种细胞,各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进行转染当天细胞密度应达到60%~80%覆盖。 2)细胞转染(脂质体、电穿孔、FuGENE6等) 3)48小时以后鉴定目的基因的表达情况。 前期准备: l构建好的外源基因载体,或目的基因基本信息。 l待转染的细胞系(1×106个细胞,可传代,倍增时间小于48小时)以及细胞培养条件的说明。 l若需要检测靶基因的表达,请提供相应抗体。 结果呈现: 构建好的瞬时转染细胞及相关的外源基因表达分析。
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感受态专题:转化克隆的筛选和鉴定
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
1.目的 学会用酶切法或PCR法筛选重组质粒转化成功的克隆菌。 2.原理 利用转化后宿主菌所获得的抗菌素抗性性状筛选出获得质粒的菌落克隆。再从这些菌落中鉴定出质粒上带有外源基因插入片断的克隆菌落。 3.器材 旋涡混合器,小镊子,微量移液取样器,移液器吸头,1.5ml 微量离心管,双面微量离心管架,干式恒温气浴(或恒温水浴锅),制冰机,恒温摇床,超净工作台,酒精灯,无菌牙签,摇菌管。 4.试剂 LB培养基(加抗菌素),PCR用试剂,引物,质粒提取用试剂,酶切需要的限制性内且酶及其缓冲液,65%甘油(65%甘油,0.1mol/L MgSO4,0.025mol/L Tris-Cl pH8.0)。 5.实验准备 无菌dd water,1.5ml离心管装入铝制饭盒(灭菌)、移液器吸头装入相应的吸头盒(灭菌);牙签(灭菌),摇菌管(灭菌),100mg/mL氨苄青霉素。 6.操作步骤 方法一:酶切鉴定 (1)在超净工作台中取3支无菌摇菌管,各加入3mL LB(含50mg/mL氨苄青霉素),用记号笔写好编号。 (2)在超净工作台中将70%乙醇浸泡的小镊子头用酒精灯烤过,镊取一支无菌牙签。用牙签的尖部接触转化的平板培养基上的一个白色菌落,然后将牙签放入盛有3mL LB(含50mg/mL氨苄青霉素)的摇菌管中。用此法随机取3个白色菌落,分别装入3个摇菌管中。 (3)37℃摇菌过夜后,用碱裂解法分别提取质粒。摇菌管中的剩余菌液保留在4℃冰箱中。 (4)将提取到的3管质粒样品与空质粒同时电泳,根据分子量判断和选区有插入片段的质粒,然后可用酶切、与目的片段一同电泳来鉴定其上的外源插入片断大小是否与预期相符。 (5)将经过鉴定判断为正确的质粒保存。按照编号找到冰箱中原菌液。根据需要进行放大培养提取其质粒或进行诱导表达,或取500mL菌液与500mL 65%甘油混合后-80℃保存。 (6)在被细菌污染的桌面上喷洒70%乙醇,擦干桌面,写实验报告。 方法二:快速PCR筛选法 (1)在转化的平板培养基上随机选取3个边缘清晰的白色菌落,并用记号笔在其所在的培养皿底部玻
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感受态专题:真核细胞的转染实验步骤
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
1. 在6孔板中接种1~3×105细胞/孔,加入2ml完全培养基,置CO2孵箱中37℃培养过夜。 2. 待细胞长到50-80%单层时,在无菌离心管中配制如下溶液: i. 溶液A:将4?g待转染的超纯DNA稀释到250?l无血清培养基中,静置5min ii. 溶液B:将2-25?l LipofectAMINE 稀释到250?l无血清培养基中,静置5min 3. 混合溶液A和B,轻轻混匀,室温放置15-45min。 4. 用2ml无血清培养基轻轻洗涤细胞,加入0.8ml无血清培养基/孔,将脂质体复合物滴加到孔中,轻轻摇晃混匀,置CO2孵箱中37℃孵育2-24hr。 5. 用完全培养基替换转染液,继续培养。 6. 24-72hr后检测蛋白质的表达或传代并加入选择性抗生素以筛选稳定表达株。
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感受态专题:感受态细胞的制备及溶液配制
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
实验试剂 LB培养基,KB培养基,10%甘油,液氮,0.1M CaC12 溶液 实验设备 超净工作台,摇床,离心机,250mL离心瓶,0. 5mL的离心管 实验材料 大肠杆菌,农杆菌和假单胞杆菌 实验步骤 1. 电击感受态细胞的制备 1) -80℃ 保存的大肠杆菌,农杆菌或者假单胞杆菌在固体平板上(DH5a,BL21在LB平板上,GV3101在LB/Gen; P.s. pv. tomato 0288-9和P. syringae pv. tabaci 6505在KB平板上)划线。 2) 接种单克隆于5-10mL液体培养基,37℃ (大肠杆菌)或者28℃ (农杆菌和假单胞杆菌)培养过夜。 3) 按照1:100-1:500转接到500-1000mL液体培养基,37℃ 培养3-4小时(大肠杆菌)或28℃ 培养8-10小时(农杆菌和假单胞杆菌转化)至细菌达到对数生长期。 4) 将菌液装入250mL离心瓶中,冰上放置30分钟后,4℃ 离心15分钟。 5) 弃上清,加入200mL 10%甘油,于冰上缓慢将菌摇散,4℃ 离心15分钟。 6) 重复前一步骤2-3次,最后弃上清,加入少量10%甘油重悬细菌。 7) 分装于0. 5mL的离心管中,每管40ul,液氮速冻,-80℃ 存放。 2. 热激感受态的制备 1) 挑取E.coli BL21单克隆接种到5mL LB培养液中,37℃ 振荡培养过夜。 2) 按照1:100-1:500转接到500-1000mL液体培养基,37℃ 培养3-4小时至细菌达到对数生长期。 3) 将菌液装入250mL离心瓶中,冰上放置30分钟后,4℃ 离心15分钟。 4) 弃上清,加20mL预冷的0.1M CaC12 溶液轻轻悬浮菌体,冰上放置15-30分钟后于4℃ 离心5分钟。 5) 弃上清,加2mL冰预冷的0.1M CaC12 溶液,重悬菌体。 6) 分装于0. 5mL的离心管中,每管40ul,液氮速冻,-80℃ 存放。
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转染专题:脂质体转染的几个实验方法
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
摘要: 本实验介绍了脂质体转染的几个方法。 实验原理 脂质 体(LR)试剂是阳离子脂质体DOTMA和DOPE的混合物(1:1)。它适用于把DNA 转染入悬浮或贴壁培养细胞中,是目前条件下最方面的转染方法之一。转染率高,优于磷酸钙法,比它高5-100倍,能把DNA和RNA转染到各种细胞。 用LR进行转染时,首先需要优化转染条件,应找出该批LR对转染某一特定细胞适合的用量、作用时间等,对每批LR都要做。先要固定一个DNA的量和DNA/LR混合物与细胞相互作用的时间,DNA可从1-5ug和孵育时间6h,开始,按这两个参数绘出相应LR需用量的曲线,再选用LR和DNA两者最佳的剂量,确定出转染时间。因LR对细胞有一定的毒性,转染时间以不超过24h为宜。 细胞种类:COS-7、BHK、NIH-3T3、Hela和Jurkat等任何一种细胞均可作为受体细胞。 实验步骤 1. 操作步骤(方法一): 1) 取6孔培养板,向每孔中加入2ml含(1-2) x 105 个细胞的培养基,37℃、18% CO2 培养基40%-60%汇合时。 2) 转染液制备:在聚苯乙烯管中制备以下两液(为转染1个空细胞所用的量)。 A液:用不含血清培养基稀释DNA使浓度为1-10ug,终量100ul。 B液:用不含血清培养基稀释LR,使终浓度为2-50ug,终量100ul。 轻轻混合A液、B液,室温中置10-15min,稍后会出现微浊现象,但并不妨碍转染。 3) 转染准备:用2ml不含血清培养基漂洗2次,再加入1ml不含血清培养基。 4) 转染:把A/B复合物缓缓加入培养基中,摇匀,置37℃温箱中6-24h,吸除无血清转染液,换入正常培养基继续培养。 5) 其余处理:如观察、筛选、检测等与其他转染法相同。 6) 注意:转染时切勿加血清,血清对转染效率有很大影响。 2. 快速脂质体转染法操作步骤(方法二): 1) 将细胞以5 x 105个/孔接种于6孔板中培养24h,使其达到50%-60%板底面积。 2) 在试管中配制DNA-脂质体复合物。 a. 在1ml无血清DMEM中稀释PSV1-neo质粒DNA或供体DNA。 b. 旋转1s,再加入脂质体悬液,旋转。
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高低温试验箱点检表怎么制作
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
高低温试验箱名环境试验机,试验各种材料耐热、耐寒、耐干、耐湿性能。适合电子、电器、食品、车辆、金属、化学、建材等工厂之用。 高低温试验箱点检表包括:外观、温度显示、湿度显示、加湿器水位、冷凝器清洁、电压是否正常、设定值和显示值有没有差,总共也就那么几点,具体的可分为以下几项: ——检查各温控仪显示是否在范围内 ——保持箱体周围洁净卫生 ——检查电机是否正常 ——检查各功能键及设定开关是否运行正常 ——检查排水管是否畅通 ——检查电源开关是否运行正常 ——检查气管是否有堵塞现象 ——检查试验箱工作室内是否洁净卫生 ——检查水泵运行是否正常 ——检查供水箱内水位是否正常 高低温试验箱的点检表就包涵以上那么多,各个厂家可根据需要酌情增减。
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鼓风干燥箱台式与立式的区分
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
立式鼓风干燥箱采用长方体落地式结构,一般是直接放置在试验室地面上。试验仪表一般是在干燥箱的上边,便于操作。立式鼓风干燥箱采用美国原装进口风机,立式、垂直强迫对流,使工作室内温度均匀,可按国家标准(±2%)因为风道结构比较特殊,风机在箱体的底部,自然空气对流。立式鼓风干燥箱功率和结构较大,适用于各种产品或材料及电气、仪器、仪表、元器件、电子、电工及汽车、航空、通讯、塑胶、机械、化工、食品、化学品、五金工具在恒温环境条件下作干燥和各种恒温适应性试验。 台式鼓风干燥箱采用卧式的箱体结构,仪表在箱体右边,箱体小巧便于试验移动。在工矿企业、大专院校、生物制药、食品加工、科研、医疗单位和各类实验室作非易燃易爆及非挥发性物品的干燥、烘焙、融腊和消毒、灭菌之用。台式鼓风干燥箱采用热风循环系统由能在高温下连续运转的风机和特殊风道组成,工作室内温度均匀,广泛用于玻璃器皿的干燥,实验样本、食品、化学物质的热变性、热硬性、热软化、水分排除,生物工程中器皿、器具的干热杀菌,电子元器件的干燥、老化。
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蠕动泵软管、泵管破损的几种情况分析
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
软管作为蠕动泵的耗材在使用中可能会遇到各种损坏,正常情况下100转的泵转速下输送常温液体,硅胶管的寿命可以达到200-400小时,进口的A-60-F泵管可以达到2000-10000小时。但是在使用过程,由于蠕动泵软管装卡不正确或者液体有一定的腐蚀性会造成软管泵过早磨损和异常磨损。造成这些损坏的原因到底是什么呢?今天就此问题做简单分析。 1、从损坏的破口看蠕动泵软管的损坏原因:损坏的蠕动泵软管如果看起来象刀划破的一样是一个锋利的切口,那么通常是被蠕动泵头的转轮和法兰边割破的。造成这种破损的原因通常是因为泵头内的软管过长,在蠕动泵泵头运转的时候软管在泵头内晃动接触到了转轮的法兰边,法兰边不断的摩擦切割软管。这种损坏的过程会非常的快,通常在十分钟左右就会完全破损。伴随泵管的破损,同时会看到泵内产生很多的软管渣。 解决办法:1、装卡泵管的时候一定要保证泵头内的泵管拉直,不会有过多的软管被窝在泵头内。2、同时在软管泵进出口靠近泵头卡管的位置夹上专用的塑料卡箍(如图所示),防止蠕动泵软管在运转中松动跑位。 2、从损坏软管的形状看损坏原因:软管呈现出完全压扁,失去回弹能力,软管壁厚变薄,表面磨损严重。这种现象通常是因为转轮卡死、蠕动泵压块接触泵管的面和转轮上有杂质、转速过高造成造成的。蠕动泵头的转轮被卡死以后,蠕动泵的转轮直接刮过蠕动泵软管,就会增加软管表面的摩擦造成软管表面温度升得很高和磨损软管表面,过高的温度也会使软管失去弹性,极端情况下产生的温度超过140度以上甚至会造成软管溶化变形。 解决办法:注意检查蠕动泵头转轮的运转是否灵活;注意清洗泵头压管表面;适当降低蠕动泵运转的速度。 3、从损坏的蠕动泵软管尺寸和形状看损坏原因:蠕动泵软管可能输送不同的液体,有一些液体会对某些软管产生腐蚀和溶解。如果我们看到蠕动泵软管变脆、变硬、失去弹性、变色、溶涨、破损等现象,那么通常就是因为软管无法输送这种液体造成的。 解决办法
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如何正确选择蒸汽流量计以及其优点介绍
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
1.1蒸汽流量计的应用概况 其中大口径蒸汽流量计较多应用于给排水工程, 蒸汽流量计应用领域非常广泛。按应用场合有大口径、中小口径、小口径和微小口径之分。中小口径常应用于固液双相等难测流体或高要求场所,如丈量造纸工业纸浆液和黑液、有色冶金业的矿浆、选煤厂的煤浆、化学工业的强腐蚀液、钢铁工业高炉风口冷却水控制、长距离管道煤的水力输送的流量丈量和控制等,而小口径和微小口径常应用于医药工业、食品工业、生物工程等有卫生要求的场所。 1.2蒸汽流量计的精度等级和功能 有些精度高、功能多, 市场上通用型EMF性能有较大差别。有些精度低、功能简单。精度高的仪表基本误差为(±0.5%±1%R精度低的仪表则为(±1.5%±2.5%FS两者价格相差12倍。因此丈量精度要求不很高的场所(例如非贸易核算仅以控制为目的只要求高可靠性和优良重复性的场所)选用高精度仪表在经济上是不合算的 基本误差仅(±0.2%±0.3%R但有严格的装置要求和参比条件, 有些型号仪表声称有更高的精确度。例如环境温度2022℃前后直管段长度要求分别大于10D和3D通常为5D和2D甚至提出流量传感器要与前后直管组成一体在流量规范装置上作实流校准,以减少夹装影响。因此在多种型号选择比拟时不要单纯只看高指标,要详细阅读制造厂样本或说明书做综合分析。 简单的就只是丈量单向流量, 市场上EMF功能差异也很大。只输出模拟信号带动后位仪表;多功能仪表有测双向流、量程切换、上下限流量报警、空管和电源切断报警、小信号切除、流量显示和总量计算、自动核对和故障自诊断、与上位机通信和运动组态等。有些型号仪表的串行数字通信功能可选多种通信接口和专用芯片(A SIC以连接HA RT协议系统、PROFTBUSModbusCONFIGFF现场总线等。 1.3蒸汽流量计的流速、满度流量、范围度和口径 应视流量而定。流程工业输送水等粘度不同的液体, 选定仪表口径不一定与管径相同。管道流速一般是经济流速1.53m/sEMF用在这样的管道上,传感器口径与管径相