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色谱法及其基本分类
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
色谱法及其基本分类 一. 色谱法 色谱法:根据各物质在两相中的分配系数(表示溶解 或 吸附的能力)不同而进行分离、分析的方法。 各组分被分离后,可进一步进行定性和定量分析: 经典:分离过程和其含量测定过程是离线的,即不能连续进行 现代:分离过程和其含量测定过程是在线的,即 能连续进行 经典色谱法:将潮湿的碳酸钙挤出玻璃管,用刀将各色带切下,用适宜的方法进行分析; 现代色谱法:当一个两组分(A和B)的混合物样品在时间t1从柱头加入,随着流动相不断加入,洗脱作用连续进行,直至A和B组分先后流出柱子而进入检测器,从而使各组分浓度转变成电信号后在荧光屏上显示出来。 根据峰的位置(出峰时间 t ) ——定性 根据峰的面积 A (或峰高h) ——定量 二. 色谱法分类 (一)按两相物理状态分 1. 气相色谱法 (gas chromatography 简称 GC)用气体作流动相的色谱法。 2. 液相色谱法 (liquid chromatography 简称 LC)用液体作流动相的色谱法。 3. 超临界流体色谱法 (SFC) 用超临界状态的流体作流动相的色谱法。 超临界状态的流体不是一般的气体或流体 , 而是临界压力和临界温度以上高度压缩的气体 , 其密度比一般气体大得多而与液体相似 , 故又称为 “ 高密度气相色谱法 ” (二)按分离原理分 1. 吸附色谱法( adsorption chromatography ): 根据吸附剂表面对不同组分物理吸附能力的强弱差异进行分离的方法。 如:气一固色谱法、液-固色谱法——吸附色谱 2. 分配色谱法 (partition chromatography ): 根据不同组分在固定相中的溶解能力和在两相间分配系数的差异进行分离的方法。 如:气-液色谱法、液-液色谱法——分配色谱 3. 离子交换色谱法(ion exchange chromatography ) 根据不同组分离子对固定相亲和力的差异进行分离的方法。 4. 排阻色谱法( size exclusion chromatography): 又称凝胶色谱法 (gel chromatography ), 根据不同组分的分子体积大小的差异进行分离的方法。 其中:以水溶液
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创新的双重MRM扫描模式质谱用于药物定量过程中的代谢物检测
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
创新的双重MRM扫描模式质谱 用于药物定量过程中的代谢物检测 Paul D.Rainville,Jose Castro-Perez,Joanne Mather,and Robert S.Plumb Waters Corporation,Milford,MA,U.S. 介绍 市场上的药品及其代谢物的含量水平的测定对新疗法的开发来说非常重要。体液中的药物水平被用来确定药物的生物利用率。此外,药物代谢物信息的解析也至关重要,因为在一定浓度水平下,这些代谢产物是有毒性的,且比原型药具有更强的药效活性,干扰辅药,进而影响肝脏功能。这两块信息通常是从不同的分析实验中获取得到的,这加重了实验室的工作负担,降低了实验室的工作效率。因此,如果通过一次分析就能获得药物浓度、获取代谢物结构有关信息话,这种方式速度更快,也能节约更多成本。样品数量较少的情况下,比如说,在儿科研究中,这种能力对实验室获取必要的定量和定性数据至关重要。沃特世XevoTM TQ MS是一套串联四极杆质谱系统,装配有新型设计的碰撞池,可以通过一次分析过程中获取全扫描质谱和定量的多反应监测(MRM)的数据。下面我们提供一种一次分析就可获取全扫描质谱和多反应监测质谱数据的数据采集方法,并以此测定尿液中药物样品的含量,并利用相关全扫描数据来检测其相关的代谢产物。 下面我们提供一种一次分析就可获取全扫描质谱和多反应监测质谱数据的数据采集方法,并以此测定尿液中药物样品的含量,并利用相关全扫描数据来检测其相关的代谢产物。 实验 尿液是从服用400毫克布洛芬八个小时之后志愿者上采集的。样品进样分析之前冷冻保存。样品的制备是样品以13000RCF的速度离心5分钟,然后用水进行稀释,再把样品注入UPLC/MS/MS系统中。 结果 测定药物的浓度和药物的代谢产物是新药研发过程的两个重要方面。设计本实验的目的是:在依次进样中,用多反应监测质谱来测量尿液中的布洛芬的含量,用采集全扫描质谱数据来检测相关的代谢产物。Xevo TQ MS的碰撞池不断的冲入碰撞气,其独特的碰撞池设计使得该仪器
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ELISPOT酶联免疫斑点分析简介
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
ELISPOT 技术简介 随着酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用 , 使体外检测各种细胞因子及抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用用酶联免疫吸附法( ELISA )检测体液中游离的细胞因子( CK )或抗体,但由于游离的循环抗体或 CK 的半哀期不同,使之在体液中不断的被代谢或与靶器官结合,而不能确切的反映体内的抗体及 CK 的水平。 80 年代,国外的科研工作者根据 ELISA 技术的基本原理,建立了体外检测特异性抗体分泌细胞和 CK 分泌细胞的固相酶联免疫斑点技术( ELISPOT )。因其具有较高的特异性和敏感性,目前正被国内外广泛应用,对探索自身免疫系统疾病发病机制具有重要意义。 ELISPOT 法源自 ELISA ,又突破传统 ELISA 法,是定量 ELISA 技术的延伸和新的发展。两者都是检测细胞产生的细胞因子或其他可溶性蛋白,它们最大的不同在于: ELISA 通过显色反应,在酶标仪上测定吸光度,与标准曲线比较得出可溶性蛋白总量。 ELISPOT 也是通过显色反应,在细胞分泌这种可溶性蛋白的相应位置上显现清晰可辨的斑点,可直接在显微镜下人工计数斑点或通过德国AID的ELISPOT 分析系统对斑点进行计数, 1 个斑点代表 1 个细胞,从而计算出分泌该蛋白的细胞的频率。(某些研究不仅要测细胞因子生成量,还需检测分泌此细胞因子的细胞频率) 由于是单细胞水平检测, ELISPOT 比 ELISA 和有限稀释法等更灵敏,能从 20 万 -30 万细胞中检出 1 个分泌该蛋白的细胞。 捕获抗体为 BD 、 R&D 、 Mabtech 、 Diaclone 生产的高亲和力、高特异性、低内毒素单抗,在研究者以刺激剂激活细胞时,不会影响活化细胞分泌细胞因子。 ELISPOT 检测原理 细胞受到刺激后局部产生细胞因子,此细胞因子被特异单克隆抗体捕获。细胞分解后, 被捕获的细胞因子与生物素标记的二抗结合,其后再与碱性磷酸酶标记的亲和素结合。 BCIP/NBT 底物孵育后, PVDF 孔板出现“紫色”的斑点表明细胞产生了细胞因子,应用德国AID的ELI
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新一代萃取材质为检测安全提升保障
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
质量检测作为食品、医药、化工等行业的重要环节,关系到产品、企业甚至整个行业的发展,而被检测物的提取分离更是起着至关重要的作用,不论在欧洲标准、美国标准……对于数据及效果起到决定因素的正是萃取柱、色谱柱等材料。 据了解,人、动物、植物的体液和组织中微量物质的定性定量分析,如药物代谢研究、违禁药鉴别和食品的安全检测,通常要求使用固相萃取柱做样品预处理去掉绝大部分杂质,以确保分析检测的精确性和灵敏度,也最少程度污染昂贵的仪器。 但是,作为固相萃取柱的主要类型,石墨、聚合物和硅胶基质的“三国演义”,已慢慢呈现出硅胶基质独步天下的局面。尤其是当科奥美萃在全球率先推出以球形B型硅胶作为材料骨架的固相萃取产品之后,彻底改变了原有硅胶基质不规则、无定形等属性所带来的影响。 球形B型硅胶固相萃取产品键合技术好,因此保证了其对于分析物样品的处理能够达到高回收率,低干扰的效果。采用球形B型硅胶固相萃取产品的InnovationTM 系列,经过多方测试得出以下结果:PSA固相萃取柱GC-MS清洁度85%;Aminopropyl固相萃取柱GC-MS清洁度85%;C8+SCX固相萃取柱上三聚氰胺回收率(pH3.5上样)>95%;SCX固相萃取柱上三聚氰胺回收率(pH3.5上样)>95%;C18固相萃取柱GC-MS清洁度95%;羧酸型WCX固相萃取柱上司来吉兰(Seligiline)回收率(pH1上样,500mg/3cc)>95%;EDTA型WCX固相萃取柱上百草枯和敌草快回收率(pH7上样,500mg/3cc)>95%;Phenyl固相萃取柱GC-MS清洁度95%;DEAE固相萃取柱上异丁苯丙酸回收率>95%;SAX固相萃取柱上异丁苯丙酸回收率>90%;C8+SAX固相萃取柱上异丁苯丙酸回收率>90%;Cyano固相萃取柱GC-MS清洁度95%;Diol固相萃取柱GC-MS清洁度95%。 可见球形B型硅胶不论在清洁度还是在回收率上均能够帮助使用者获得最佳效果。 而且球形B型硅胶的压力降小,通透性好,对血浆等较为粘稠的样品很好操作,没有无定形无机硅胶固相萃取产品经常会发生的粘稠样品阻塞问题。
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洁净室质量控制及其检测方面的讨论
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
洁净室质量控制及其检测方面的讨论 关键词:洁净室 质控标准 检测 空气微生物 悬浮粒子 制药 生物制品 洁净室对于制药工业的重要意义已为人们肯定。生物制品 是制 药工业的一部分,对生产厂房有很高的洁净要求[1,2]。Gilland等曾在市售的 嗜酸乳杆菌产品中,分离到人为污染的短乳杆菌、发酵乳杆菌和植物乳杆菌等[3] 。生物制品生产中,尤其是活菌、活疫苗的生产中,经常受到不同程度的污染,因此,不仅 需要重视洁净室的建立,更要重视质量控制方法及标准。 朝鲜战争中,美国发现大量电子仪器失灵,最后找到了主要原因,是灰尘在作怪,促成了洁 净技术的起步。1961年,诞生了世界上最早的洁净室标准,既美国空军技术条令203,1963 年,颁布了国际上最著名的洁净室标准:美国联邦FS209。1966年,颁布了修订后的209A, 时至1992年,建立了迄今被广泛采用的209E。国际上为了加强药品、生物制品质量管理规范 (GMP),把洁净室定为必备的生产硬件之一。GMP对厂房、设备等,明确规定了相应的洁净要 求,并制订了有关标准。 1 洁净室的污染源 洁净室污染源按性质可分物理、化学、生物等。直径在0.001-1000μm的固态、液态或二者 的混合物质,包括生物粒子和非生物粒子,我们称为悬浮粒子(airborne particles)。微生 物一般以无生命的粒子作载体而悬浮,以气溶胶(Aerosol)形式存在于空气中,1μm以下 者永外悬浮,10μm以上者会逐渐沉下来而形成菌尘。洁净室污染可分为外部污染和内部污 染。外部污染指大气尘污染,可以通过光电法测得。内部污染,是由人和有关的物品、设备 等引起的。人是洁净室最大的污染源,占90%左右。人和环境造成了洁净室的污染,所以在 洁净室中,人的数量和活动应有特别严格的限制。一般男性每人每分钟向周围排放1000个以 上的含菌粒子,女性为750个以上。穿衣服时,静止态发菌量为10-300个/min·人,行走时 的发菌量为900-2500个/min·人。咳嗽一次发菌量为70-700个/min·人,喷嚏
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固相萃取--样品预处理的关键核心技术
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
固相萃取柱用于HPLC,GC,LC-MS/MS,GC-MS或其他技术分析样品的制备。广泛应用在药物代谢及动力学、药物分析、生物检测、毒品和兴奋剂检测、食品安全分析、环境分析等领域。 固相萃取柱应用的科学原理很简单:一是让待检测的化合物通过固相萃取柱,而让杂质保留在固相萃取柱上,应用广泛的实例包括C18,PSA,NH2固相萃取柱于农残分析;另一种策略就是让杂质穿过固相萃取柱,固相萃取柱有选择性地浓缩和保留待检测的化合物。固相萃取就是一种“开、关”原理,待检测化合物要么完全保留再洗脱,要么完全不保留。部分保留或者部分洗脱意谓着一个失败的固相萃取应用。 一个成功的固相萃取产品或方法应该: 1、 让待检测化合物的回收率达到近100%,美国FDA农残分析条例规定回收率为70-110%,是基于许多实际应用中不能达到100%理想状况的一种妥协。然而实际上如果正确的的固相萃取产品和应用方法,100%的回收率很容易达到。 2、 有很高的选择性。固相萃取作为样品的预处理的核心技术,必须要让处理后的分析样品有尽可能干净的背景。常规HPLC方法的开发几乎总是从C18作为出发点,反相色谱占了80%以上的应用。但固相萃取的实用战略和HPLC有很大不同。HPLC用于比较干净的样品的分析,而固相萃取用于真实世界复杂样品的前处理。使用反相固相萃取柱吸附杂质而达到部分清洁无可厚非,而在目前文献和官方方法中成千上万的使用C18、HLB等硅胶或聚合物反相固相萃取柱吸附待测化合物并回收, 这明显偏离了固相萃取的精髓,达不到最佳效果。这不仅是因为C18、HLB等反相固相萃取柱没有通用的方法,而且反相技术选择性差,得到的样品背景较脏,有许多情况下甚至不及液-液萃取,等于将固相萃取“降级”。 有很高选择性的固相萃取产品实际上是硅胶机制的离子交换或C8+SCX混合床等产品。 3、 有广泛的应用范围。现实生活中的许多应用,都是在“全盲”条件下进行。譬如食品安全分析中对某一具体食品、农产品的农残分析,运动会对兴奋剂的检
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如何延长色谱柱的使用寿命
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
色谱柱的使用寿命,除了与所分析的样品和流动相及使用频率有关系外,最主要的是与日常的委会密切相关。为延长色谱柱的使用寿命,维护您的利益,请仔细阅读此部分。 色谱柱的使用寿命主要是分局柱效和柱压两个指标来衡量,如果一支色谱柱柱效太低或柱压太高,通常被认为该色谱柱已经结束。因此,延长色谱柱使用寿命的关键是,消除引起柱效下降和柱压升高的因素。以下是色谱柱的日常维护方法: 一、流动相的PH应在使用的范围内 Welch公司的色谱柱除反相氰基柱PH1.5-9.0外,其反相色谱柱的PH范围均为1.5-10,由于填料中存在Si-C和Si-O键,流动相超过其PH范围将会导致硅胶基质流失和键合相碳链断裂,使柱效下降,使用寿命变短。由于流动相的PH 控制不当而对色谱柱造成的损害,通常很难是色谱柱恢复,因此必须认真对待,严格控制流动相的PH值。 二、去除样品和流动相中的固体颗粒 样品和流动相中含有的固体颗粒物质会堵塞色谱柱筛板,筛板被堵住不仅会引起柱压的升高,而且也会引起柱效下降,因为筛板的堵塞会引起液流不均,导致色谱峰型拖尾、变宽,从而使柱效下降。因此,建议使用超纯水和色谱纯试剂,在分析样品前对样品进行针筒过滤,流动相过0.45μm滤膜。 三、使用保护柱或在线过滤器 样品和流动相经过滤后并不能完全消除固体颗粒物质,因为泵的磨损、密封圈和管路的老化也会产生固体颗粒物质,这些固体颗粒被流动相带入色谱柱,堵塞筛板,导致柱压升高、柱效下降。保护柱和在线过滤器上都有筛板,其孔径与色谱柱孔径相同,因此可以阻止固体颗粒物质到达色谱柱,有效防止色谱柱筛板的堵塞。由于柱压升高在分析故障中占很大 比例,因此,除对样品和流动相进行过滤外,建议您在色谱柱进样端加上保护柱或在线过滤器。 如果去人色谱柱柱压升高是由于进样端筛板被堵引起的,科选择一下方式进行补救: 1、先在色谱柱前加上保护柱或在线过滤器,然后用甲醇、水=20/80ml/min反向冲色谱柱180min。 2、先在
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Ca2+外流作为细胞防御过程中的标志性反应
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
Ca2+外流作为细胞防御过程中的标志性反应 Ca2+ 外流作为烟草对假单胞菌超敏反应的指标 p{text-indent:2em; margin:6px 3px 6px 3px; line-height:21px;} 跨膜离子流在启动和调控防御机制中起着重要的作用。植物在受到外界环境刺激以后,离子通道迅速做出调整,在识别病原体反应中离子流是其中较早发生的事件之一。Lev G. Nemchinov等科学家推断在植物的病原超敏反应中,质膜Ca2+-ATP泵是超敏反应的关键。 美国农业部(USDA)的科学家采用“非损伤微测技术(MIFE)”检测了经丁香假单胞菌处理之后Ca2+流的变化情况,发现Ca2+内外流与细菌处理的时期有关,经细菌长时间处理后烟草叶片出现Ca2+外流。Ca2+通道阻断剂钆和镧都可以显著地将黑暗条件下的Ca2+流转变为外流,铯则明显削弱了光诱导的Ca2+流,但并不产生Ca2+外流。与之相反的是,Ca2+-ATPase的抑制剂CPA无论是在光照条件下还是黑暗条件下都能够增强Ca2+吸收。 Ca2+不仅在激活防御反应中作为第二信使起作用,而且可能在后期的加速细胞死亡、抑制病原体侵染扩散以及结束防御反应中作为下游调控者。本研究通过Ca2+流的转变认识到了细胞防御反应中的关键成分,建立了细胞死亡与防御过程中的离子流模型。 上图:使用非损伤微测技术检测到烟草叶肉细胞经P.syringae pv syringae 61处理后Ca2+流以及在光暗交替处理后、在缓冲液中平衡不同时间后Ca2+流的变化情况。正值为内流。 .tmp_b1{ margin:6px 6px;} 关键词:钙离子外流(Ca2+ efflux); 超敏反应(Hypersensitive response); 非损伤微测技术(MIFE) 参考文献:Lev G. Nemchinov, et al. Plant Cell Physiol. 2008, 49: 40-46 全文下载: Abstract: Using a model plant Nicotiana benthamiana, we have demonstrated that initial calcium uptake in response to the HR (hypersensitive response)-causing pathogen Pseudomonas syringae pv syringae 61 is followed by net calcium eff
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反相液相色谱柱不是LC-MS/MS分析的主流
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
对于LC-MS/MS色谱柱人们的惯性思维通常是由反相液相色谱柱开始研发, 产生这种惯性思维是因为常规高效液相色谱分析中C18等反相高效液相色谱柱占有统治地位,另一方面是色谱公司不懂LC-MS/MS分析误导用户的结果。这惯性思维是不正确的! LC-MS/MS分析的实用战略和HPLC有很大不同! LC-MS/MS分析的方法的选择性最重要! 色谱公司不能简单地将现成的反相液相色谱填料装成5cm x 2.1mm短柱充当LC-MS/MS柱使用, 但事实上几乎所有色谱公司都是这样做的。这样的反相液相色谱LC-MS/MS柱有三个明显的弱点: (1) 许多极性化合物难以保留,质谱灵敏度差。 许多重要的物质,如抗癌药物DTIC, 抗痛药物河豚毒素,污染物质三聚氰胺, 中草药中糖肽等非常极性, 在反相液相色谱柱上没有保留。还有许多的化合物比较极性, 使用少量的甲醇或乙腈就从反相液相色谱柱上洗脱。在药物代谢研究中, 观察到许多化合物自己疏水, 但代谢产物亲水的情况。甲醇或乙腈含量低, 离子化程度低, 质谱灵敏度差。所谓水相C18柱在LC-MS/MS分析中没有价值。 (2) 用常规反相色谱填料装成2.1mm内径的色谱柱在LC-MS/MS和LC/MS应用中常陷入记忆效应(Carryover Effect)的“陷阱” LC-MS/MS和LC/MS应用中另一个重大问题是记忆效应(Carryover Effect)。记忆效应是指在进样后, 再进一针空白在同样的保留时间仍然观察到化合物峰。记忆效应的副作用是明显的: 它可能人为地增加下一样本的MRM信号, 影响定量分析的精密度和准确度。US FDA Bioanalytical Regulatory Guidances限制最高校准标准(highest calibration standard) 的记忆效应不能超过20 %最低校准标准(lowest calibration standard)MRM信号的20%。 由于大部分色谱公司都使用现成的反相液相色谱填料简单地装成5cm x 2.1mm短柱充当LC-MS/MS柱, 在许多情况下,使记忆效应强, 校准标准曲线范围必须人为缩短, 或不得已在进样后, 再进一针甚至两针空白最小化记忆效应, 然后进下一个样品。所有这些
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食品中农药残留检测的前处理技术进展
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
农药施用到农作物上以后,绝大部分因多种原因而转化,但作物内会有少量的残留。长时间摄食残留农药会影响人体的健康。近年来,在茶叶、粮谷、蔬菜及水果种植中由于不少农户忽视农药的正确、合理使用,农药污染问题经常发生,农药残留量超标相当严重,并逐年加剧。为了对食品农药残留量进行监控,开展农药残留检测的前处理技术研究是非常必要的。 1 样品前处理技术及其进展 随着科学技术的发展,需要分析的环境污染物种类越来越多,欲测组分的含量越来越低,这就对样品的前处理方法提出了新的挑战。样品处理的好坏直接影响检测结果。下面对样品的前处理技术做一综述。 1.1 常用样品前处理技术 1.1.1 溶剂萃取(LLE) 液体样品最常用的萃取技术之一是溶剂萃取,利用样品中不同组分分配在两种不混溶的溶剂中溶解度或分配比的不同来达到分离、提取或纯化的目的,通常又叫做液——液萃取。根据基质的不同,可分为液——液萃取、液——固萃取和液——气萃取(溶液吸收)。现在的液——液萃取技术已经发展到连续萃取和逆流萃取,有利于处理含有低分配系数物质的样品;微萃取技术有利于提高灵敏度和减少溶剂用量;萃取小柱技术模仿了传统的液——液萃取技术,而且使样品收集变得非常容易,同时避免了样品乳化问题;在线萃取和自动液——液萃取等方式能够减小人为误差,有利于处理大体积样品。 1.1.2 固相萃取(SPE) 固相萃取就是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附,使其与样品的基体和干扰化合物分离,然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附,达到分离和富集目标化合物的目的。与液——液萃取等传统方法相比,固相萃取具有如下优点:(1)高的回收率和富集倍数。(2)使用的高纯有毒有机溶剂量很少,减少了对环境的污染,是一种对环境友好的分离富集方法。(3)无相分离操作,易于收集分析物组分,能处理小体积试样。(4)操作简便、快速、易于实现自动化。应用固相萃取可以分析食品中有效成分或有害成分,以及环保水样中各种污染物等。 1.1.
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渗透压:细胞生长和免疫反应的秘密
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
报道:加州大学圣地亚哥分校(UCSD)医学院的研究人员证明细胞渗透压对细胞的生长和机体抵御侵染的免疫反应是至关重要的。这些发现可能对自身免疫病、移植排斥和找出潜在的癌症**方法有一定意义。相关文章发表在2004年7月5日的Proceedings of the National Academy of Sciences(PNAS)的网络版上。 这项对小鼠的研究首次 提出证据,证明一种开启基因表达的转录因子对一定渗透压环境下细胞的正常增殖非常重要,也是机体对入侵病原物产生免疫反应所必须的。 当细胞内、外环境的分子浓度不同时就会产生渗透压。这种情况下,水分通过渗透流入或流出细胞,从而改变细胞的内环境。高渗透压迫使水分从细胞中扩散出来导致细胞收缩,这种情况会使DNA和蛋白遭到破坏、细胞周期停滞以及最终使细胞死亡。细胞通过激活渗透压反应途径来响应渗透压变化。这个途径由一种叫做NFAT5(T细胞活化核因子5,nuclear factor of activated T cells 5)/TonEBP(弹性增强结合蛋白,tonicity enhancer binding protein)的基因控制。NFAT5/TonEBP蛋白是唯一已知的能由高渗透压激活的哺乳动物转录因子。 Ho在叙述研究组的工作时说,之前人们认为肾脏是身体中唯一受到渗透压影响的组织:肾脏通过一种机制来控制血液中水分和盐的量,从而导致肾脏局部区域的渗透压非常高。 “作为免疫学研究者,当发现一种能协助肾脏细胞适应渗透压的蛋白也在免疫系统中得到表达时我们感到相当的疑惑,”Ho说。“因为,之前没有证据说明身体内免疫系统细胞或肾脏以外的细胞也明显地受到渗透压的影响。” 研究身体内细胞所承受压力的其中一个难点是在实验室中几乎不可能精确地再现活体状态下具有特殊微环境的组织的复杂性。为了研究渗透压,研究组构建出一种不表达NFAT5/TonEBP的小鼠。他们发现小鼠免疫系统受损,渗透压存在时小鼠细胞不能生长。 “我们现在认为某种组织微环境中的细胞增殖过程细胞是暴露在渗透压下的,”Ho说。“如果细胞不能适应渗透压,那么它就不能生长
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空心阴极灯使用注意事项
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
1、空心阴极灯超过最大电流会使阴极材料大量溅射,热蒸发或阴极熔化,寿命缩短,因此使用中**不要超过最大电流。 2、长期放置的灯会因气体遗漏等原因而不能正常使用,一般在三个月左右将灯点燃一段时间。 3、长期使用的灯会老化的,产生噪声大,信号不稳定,能量小,可采用反接激活法。除去杂质气体。 4、刚刚熄灭的的熔点灯应等其冷却后从灯架上取下。 5、注意光窗不能沾污,如有脏的,可用高级镜头纸擦干净
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空心阴极灯异常现象产生的原因和解决方法
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
一、 异常现象:阳极光闪动 产生原因:阳极表面放电不均 处理方法:一般不影响使用,如有影响,在10-20mA电流下反放电约半小时 二、异常现象:阳极辉光变淡 产生原因:灯内有杂质气体 处理方法:将灯在10-20mA电流下反放电几分钟到半个小时。如无效,可在80-150mA电流下反放电,激活吸气剂。 三、异常现象:阴极外侧和后部发光,使发射线略有减弱 产生原因:屏蔽管与阴极距离过大或有杂质气体 处理方法:发射线稳定仍可使用,必要时在10-20mA电流下反放电约半小时。 四、异常现象:屏蔽管外面发光,使发射线减弱不稳定 产生原因:少数灯溅射的金属成针状结晶或片状脱落,使阴极和屏蔽管接通 处理方法:震动灯壳,使接通处断开 五、异常现象:阴极内跳动的火花状放电,无测定线发射 产生原因:阴极表面有氧化物或杂质 处理方法:在30-50mA下反向放电,或加大与灯串联的稳流电阻到2-10千欧 六、异常现象:测定灵敏度低,甚至为零 产生原因:灯有背景发射,波长选择错误;单色器通带过宽;喷射器堵塞,燃;燃烧器狭缝不在光轴下方 处理方法:检查灯的背景发射和阳极光色调,不正常 处理同1 七、异常现象:在阴极极口处发光,无测定线强度,工作电压生高 产生原因:在阴极极口处发光,无测定线强度,工作电压生高 处理方法:更换新灯 八、异常现象:不发光 产生原因:灯头漏气或灯头接线脱落;电源有故障 处理方法:先用其它灯检查电源,再用高频真空查漏器检察,如灯壳内无氖光就是漏气(更换新灯)有氖光为接线脱落。 九、异常现象:发光色调正常,特征线发射很弱或不能检出 产生原因:阴极金属耗尽或砷、硒、碲、铋、铯元素所用光电倍增管或放大器不合适 处理方法:如阴极谨慎耗尽,更换新灯;重新选择合适的光电倍增管或放大器。
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比色皿的使用注意事项和清洗方法
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
一、比色皿注意事项 比色皿一般为长方体,其底及两侧为磨毛玻璃,另两面为光学玻璃制成的透光面采用熔融一体、玻璃粉高温烧结和胶粘合而成。所以使用时应注意以下几点:: 1、拿取比色皿时,只能用手指接触两侧的毛玻璃,避免接触光学面。同时注意轻拿轻放,防止外力对比色皿的影响,产生应力后破损。 2、凡含有腐蚀玻璃的物质的溶液,不得长期盛放在比色皿中。 3、不能将比色皿放在火焰或电炉上进行加热或干燥箱内烘烤;。 4、当发现比色皿里面被污染后,应用无水乙醇清洗,及时擦拭干净。 5、不得将比色皿的透光面与硬物或脏物接触。盛装溶液时,高度为比色皿的2/3处即可,光学面如有残液可先用滤纸轻轻吸附,然后再用镜头纸或丝绸擦拭。 二、比色皿成组性测试 在测量时如对比色皿有怀疑,可自行检测,方法如下: 1、用户可将波长选择置实际使用的波长上,将一套比色皿都注入蒸馏水,将其中一只的透射比调至100%处,测量其他各只的透射比,凡透射比之差不大于0.5%,即可配套使用。 2、比色前将各个比色皿中装入蒸馏水,在比色波长下进行比较,误差在±0.001吸光度以内的比色皿选出4-8个进行比色测定,可避免因比色皿差异造成测量误差。 3、我公司的比色皿,在出厂前检测,原则上是0%误差。 三、比色皿的洗涤方法 随着光谱分析仪器的迅速发展,微量、半微量、荧光等一些比色皿不断出现,对使用维护、清洗比色皿有更高的要求。一般在国外都是一次性使用,在国内为了节约成本,开源节流而重复使用。如何对比色皿进行清洗,只能按照各种试剂,采用能溶解中和的方法来进行清洗,原则上一是不能损坏比色皿的结构和透光性能;二是能够采用中和溶解的方法来达到比色皿干净如初的效果。而分光光度计中比色皿洁净与否是影响测定准确度的因素之一。因此,必须重视选择正确的洗净方法。下面介绍几种清洗方式: 1、比如测定溶液是酸,如果不干净,就用弱碱溶液洗,要是测定溶液是碱,如果不干净,就用弱酸溶液洗,要是测定溶
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比色皿的使用注意事项和清洗方法
作者:德尔塔 日期:2022-05-01
一、比色皿注意事项 比色皿一般为长方体,其底及两侧为磨毛玻璃,另两面为光学玻璃制成的透光面采用熔融一体、玻璃粉高温烧结和胶粘合而成。所以使用时应注意以下几点:: 1、拿取比色皿时,只能用手指接触两侧的毛玻璃,避免接触光学面。同时注意轻拿轻放,防止外力对比色皿的影响,产生应力后破损。 2、凡含有腐蚀玻璃的物质的溶液,不得长期盛放在比色皿中。 3、不能将比色皿放在火焰或电炉上进行加热或干燥箱内烘烤;。 4、当发现比色皿里面被污染后,应用无水乙醇清洗,及时擦拭干净。 5、不得将比色皿的透光面与硬物或脏物接触。盛装溶液时,高度为比色皿的2/3处即可,光学面如有残液可先用滤纸轻轻吸附,然后再用镜头纸或丝绸擦拭。 二、比色皿成组性测试 在测量时如对比色皿有怀疑,可自行检测,方法如下: 1、用户可将波长选择置实际使用的波长上,将一套比色皿都注入蒸馏水,将其中一只的透射比调至100%处,测量其他各只的透射比,凡透射比之差不大于0.5%,即可配套使用。 2、比色前将各个比色皿中装入蒸馏水,在比色波长下进行比较,误差在±0.001吸光度以内的比色皿选出4-8个进行比色测定,可避免因比色皿差异造成测量误差。 3、我公司的比色皿,在出厂前检测,原则上是0%误差。 三、比色皿的洗涤方法 随着光谱分析仪器的迅速发展,微量、半微量、荧光等一些比色皿不断出现,对使用维护、清洗比色皿有更高的要求。一般在国外都是一次性使用,在国内为了节约成本,开源节流而重复使用。如何对比色皿进行清洗,只能按照各种试剂,采用能溶解中和的方法来进行清洗,原则上一是不能损坏比色皿的结构和透光性能;二是能够采用中和溶解的方法来达到比色皿干净如初的效果。而分光光度计中比色皿洁净与否是影响测定准确度的因素之一。因此,必须重视选择正确的洗净方法。下面介绍几种清洗方式: 1、比如测定溶液是酸,如果不干净,就用弱碱溶液洗,要是测定溶液是碱,如果不干净,就用弱酸溶液洗,