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动物颅脑给药实验的操作方法

动物颅脑给药实验的操作方法

作者:德尔塔 日期:2022-04-13

动物颅脑给药实验的操作方法   在脑科学基础研究领域中,颅脑给药已经成为大多数动物实验的重要环节。根据实验设计,常见有三种给药方式:单次注射给药、多次反复给药和持续释放给药。前者通常采用立体定位仪配合微量注射泵给药,第二种通常采用套管给药,第三种通常通过植入式缓释泵给药。主要用于给小鼠、大鼠、猴等实验动物的目标脑区进行反复多次给药,也可结合配套光纤使用(光遗传),在给药的同时或者给药后继续对目标脑区进行光刺激。常应用于人类神经性疾病动物模型、高级脑功能、情感、认知等相关研究。   1.仪器设备与配件 脑立体定位仪、显微镜、冷光源、手术器械包、酒精棉球、干棉球、颅钻(包括钻头)、异氟烷气体麻醉系统(或注射麻醉药品)、给药系统(PE/PVC管路、转环、转环支架、栓绳 、颈静脉)、微量注射泵  大小鼠剃毛器(非必须,可手术剪去毛)、快速灭菌器(主要用于手术器械消毒,避免引起小鼠颅内炎症)、颅骨水平校准器(非必须,主要降低实验上手操作难度)、颅钻夹持器(非必须,可手持颅钻钻孔替代)   2.试剂 碘伏、酒精、双氧水、生理盐水、牙科水泥(牙托水和牙托粉)、抗生素、异氟烷(或注射用麻醉药物)   3.操作步骤 1   根据脑图谱或文献确定目标脑区的三维坐标:AP 值(Anterior-Posterior,Y 轴,头部到尾部)、ML 值(Medial-Lateral,X 轴,中缝到两侧)和 DV 值(Dorsal Ventral,Z 轴,背侧到腹侧)。 美国KOFP902双臂脑立体定位仪   2   将动物麻醉,头部固定到脑立体定位仪上。调平颅骨,而后定位至目标脑区利用颅钻钻孔(同时在孔位附近钻 2-3 个小孔,用于旋入颅钉,作为牙科水泥着力点,防止牙科水泥脱落。同时这些小孔直径需要小于颅钉,这样颅钉才能旋紧,起到提供附着力效果),然后用针轻微刺破目标脑区上方孔德硬脑膜,暴露颅脑;颅钉固定位置硬脑膜无需刺破。将颅钉旋入孔内约三圈,然后将准备好的导管,通过夹持器缓慢植入颅内,再用牙科水泥

持续压力引起抑郁、焦虑等精神疾病免疫学基础讲解

持续压力引起抑郁、焦虑等精神疾病免疫学基础讲解

作者:德尔塔 日期:2022-04-13

前言:为了某些重大事件,“打鸡血”,不知疲倦...;但是此状态不宜持续存在,事件过后,放空自己,恢复机体稳态...;否则精神疾患会“主动”找上你...。   为了定义大脑与免疫系统之间的双向关系,20世纪60年代引入了“心理神经免疫学”一词。免疫系统的变化会导致情绪和行为等心理状态的深刻改变,而细胞因子则是联系神经,内分泌和免疫系统的基础。 全身感染、癌症、自身免疫性疾病期间,促炎细胞因子(IL-1,IL-6,TNF-α和IFN-γ等)可引起行为症状,称为疾病行为,伴随着情绪低落、食欲障碍、睡眠障碍、心理运动障碍、疲劳、能量丧失、思维或集中困难。这些研究表明细胞因子在情绪障碍和行为功能障碍中起着关键作用。 临床研究中,患有抑郁症的患者,观察到促炎细胞因子的血浆浓度增加与精神疾病的严重程度、下丘脑垂体-肾上腺(HPA)轴的过度活跃,神经递质5-羟色胺(5-HT)的缺乏密切相关。 Stress与神经炎症(文献1)   细胞因子 细胞因子是从外周免疫细胞(单核细胞、巨噬细胞和淋巴细胞)及一些非免疫细胞释放的信号分子, 它们作为细胞间信使,参与免疫系统的激活、细胞分化和细胞死亡。 细胞因子包括促炎症细胞因子和抗炎症细胞因子。促炎细胞因子,如IL-1β、IL-6、IFN-γ和TNF-α,它们激活炎症。相反,抗炎细胞因子IL-4、IL-10、IL-13抑制炎症。细胞因子相互作用,保持促炎和抗炎细胞因子之间的平衡。 全身注射促炎细胞因子可诱导抑郁样行为,而抑郁症中抗抑郁药的**可抑制细胞因子的产生及其作用。外周免疫系统产生的促炎细胞因子直接传递到中枢神经系统,或通过增加一氧化氮(NO)、前列腺素(PGE2)间接影响大脑。细胞因子也由大脑的神经元和胶质细胞(小胶质细胞、星形胶质细胞和少突胶质细胞)产生,并可引起中枢神经系统的异常。 神经炎症 外周细胞因子具有亲水性,由于其相对较高的分子量,在正常条件下不能通过血脑屏障(BBB)。在病理条件下,BBB通透性增加,外周细胞因子可以通过BBB。   此外,外周

ibidi µ-Patterns 上细胞粘附的实验参数和优化操作讲解

ibidi µ-Patterns 上细胞粘附的实验参数和优化操作讲解

作者:德尔塔 日期:2022-04-13

本应用说明讨论了对于细胞粘附到 ibidi µ-Patterns 的重要实验参数。此外,它还解释了如何优化细胞粘附和模式覆盖。 关键词 · µ-Patterning、粘附、结合基序、单细胞模式、多细胞微模式、细胞培养、粘附细胞 细胞类型 ibidi µ-Patterning 的成功实验仅限于贴壁细胞类型——悬浮细胞不能附着在图案表面。此外,对 µ-Pattern 表面的粘附高度依赖于细胞类型,因为并非所有细胞类型都与所有结合基序结合。因此,在开始实验之前,有必要测试所选细胞类型是否能够粘附在图案表面上。   结合基序 ibidi µ-Patterning 技术为细胞粘附提供共价结合的结合基序。这些结合基序的表面密度可能不同于经典的蛋白质涂层。因此,结合基序可能导致细胞形态或粘附行为的改变。测试您的细胞是否与结合基序兼容的最佳方法是将它们接种在具有大粘合面积的图案点上(例如,多细胞图案)。验证单元格兼容性后,您可以切换到更小的模式,例如单单元格模式。   几何图案 由于结合基序的数量,图案几何形状会影响细胞的粘附行为。例如,较小的形状呈现较少的结合基序,与较大的形状相比,这可能会降低细胞粘附。特别是对于单细胞实验,需要在图案上实现单细胞占有率,图案尺寸非常重要,因为太小的图案阻碍了适当的细胞粘附和扩散,而太大的图案会导致多个细胞粘附在一个单点。此外,当所用细胞类型的间距太小时,粘附斑块之间的间距会影响理想的细胞接种浓度和细胞从一个点到另一个点的桥接。 细胞接种浓度 接种浓度是优化粘附过程的另一个关键参数。较低的浓度会导致图案上的细胞较少,或者只有稀疏占据的斑点,但结块较少。较高的细胞浓度可以提高细胞覆盖率,但要承担 a) 结块和 b) 在单细胞粘附位点上出现多个细胞的风险。如果细胞浓度太高并且细胞在附着到粘附点之前开始聚集,这些漂浮的聚集体可能会从模式中分离粘附细胞并阻止进一步的细胞粘附。   细胞悬液质量 细胞悬液的均匀性高度影响实验输出。没有任何细胞聚集体的

药用玻璃碱性溶出及玻璃脱片对药品质量威胁及人体危害的分析研究

药用玻璃碱性溶出及玻璃脱片对药品质量威胁及人体危害的分析研究

作者:德尔塔 日期:2022-04-13

一、玻璃脱片现象及其对药品质量的威胁 玻璃作为硅酸盐无机类材料,是各种性能最稳定的材料之一,且光洁透明,适宜药品的包装贮存和保质。同时,相对于其他材料,玻璃价格较低廉。近年来,我国的药用玻璃工业及产品得到了长足的发展,已成为药品包装领域的主要包装材料之一。 玻璃虽具有以上优点,但也存在一个主要缺点:在特定条件下会有玻璃薄片从玻璃容器的内表面脱落,直接进入到溶液中形成玻屑,有时肉眼难以觉察。在过去的几年中,注射药物中存在玻屑的问题日益增多,已引发了全球范围内诸多产品的召回事件。如2020年美国FDA官网公布16起注射剂召回事件,其中由于发现微粒物质、安瓿瓶破裂等可能与玻璃容器有关的召回共有8起,给企业和社会都造成了巨大损失。 而对药品生产企业而言,玻屑等可见异物的控制相对于其它项目来说算是最难控制的一项。其难于控制的原因有两个:一是,难于发现;二是难于找到真正的原因。 难于发现,是因为一旦生产工序中存在具有影响可见异物的因素,它不会导致每个单元产品的可见异物都不合格,在抽检的过程中很难发现。且可见异物不像其它项目那样,一旦发现就立刻可以锁定相关环节,在那个环节进行排查即可,相反影响可见异物的生产工序较多,一旦发现有可见异物,需要排查的工序有很多。 因此,对药品生产企业而言,选择高品质的玻璃包材,尽可能降低玻璃容器对药品质量的干扰,无疑是一个明智之举。   二、玻璃脱片的人体危害及相关标准 美国FDA向药品生产企业发布的关于某些注射药物中可能会形成玻璃脱片的公告中提到,尽管尚没有与玻璃脱片直接相关的不良事件被报告,但静脉注射用药物中存在的这些玻璃薄片可能会导致血栓和其他血管事件(如静脉炎)的发生;对于皮下接种,脱片可能导致异物肉芽肿的发生、局部注射部位反应和免疫原性的增加。 脱片这一问题的症结在于玻璃的耐受性。一些玻璃容器的内表面在与药液的长时间接触过程中受到各种因素的影响易产生脱片。一些情况已与

细胞把脉-细胞的状态分析与解决操作方法

细胞把脉-细胞的状态分析与解决操作方法

作者:德尔塔 日期:2022-04-13

细胞养着养着就变样了,状态不好“生病了”,怎么办? 教您细胞界的“望、闻、问、切”,给您的细胞“把把脉~”   细胞状态不好,总结下来可以从以下几点出发考虑: 导致细胞污染的原因主要有以下几方面: 1. 环境:水浴锅、培养箱水盘、细胞培养箱内壁、超净台、桌面及试剂瓶身、细胞房空气消毒。 2. 操作:细胞复苏、传代、冻存等过程中也可带入污染。 3. 试剂:血清、基础培养基、胰酶、辅助试剂、营养添加物等。 4. 耗材:培养皿或培养瓶、枪头。 5. 细胞本身:本身携带污染、细胞老化、分化等。 接下来我们按照此步骤一步步进行分析: 环境 环境需要考虑到的因素有: 水浴锅、培养箱水盘 由于长期处于潮湿状态,水是一个很重要的污染源,建议两周更换一次高压灭菌水。并且添加水浴锅专用消毒预防试剂(Aquaguard-2,货号: 01-916-1E)和培养箱水盘(Aquaguard-1,货号: 01-867-1B)专用消毒预防试剂。 Aquaguard-1 用来消毒培养箱中的水盘,可有效杀灭细菌、芽孢、支原体、真菌(酵母菌、霉菌)和病毒;无毒;对不锈钢无腐蚀性;不挥发。 用法: 1. 培养箱建议每两周进行一次系统地清洁和消毒。 2. 稀释100倍即可使用,即将1L水中加入10ml的Aquaguard-1溶液。 Aquaguard-2 用来消毒水浴锅,可有效杀灭细菌、芽孢、支原体、真菌(酵母菌、霉菌)和病毒。 用法: 1. 建议每周进行一次系统地清洁和消毒水浴锅。 2. 稀释500倍即可使用,即将1L水中加入2ml的Aquaguard-2溶液。 细胞培养箱内壁 每星期需要清洁一次,保持洁净状态。每年对CO2、温度探头校准一次。 超净台、桌面及试剂瓶身 要经常擦拭,以防带入外源污染。 细胞房空气消毒 可选择紫外杀菌、高锰酸钾-甲醛熏蒸、过氧化氢-过氧乙酸干雾灭菌、臭氧灭菌等方法彻底清洁细胞房空气,每种方式各有优缺点、可综合考虑及比较后择优使用。 培养箱内壁、超净台、桌面及试剂瓶身都可考虑使用:   Pharmacidal™ Sprays and Solution 消毒喷壶

靶标代谢流解决方案介绍与应用

靶标代谢流解决方案介绍与应用

作者:德尔塔 日期:2022-04-13

基于13C或者15N标记的靶标代谢流分析能够系统地定量细胞或者组织内特定代谢通路代谢网络的流量分布及各代谢途径的相对贡献,其优点是可以利用细胞内代谢物的质量同位体信息的分析方法,不但在很多情况下能够直观地表明代谢流量的整体走向,而且通过计算能够准确定量地揭示细胞内各个代谢反应的活性,以及深入理解平行反应、可逆反应等多种复杂的细胞内代谢过程,直观揭示细胞胞内的主要活性途径及各个途径的相对贡献及其分布变化特点,从而鉴定出相关疾病发生发展过程的早期诊断的标志物及其关键的主要代谢通路,并揭示其相互调控规律,为疾病发生的临床早期诊断、药物靶点**和预后判断提供强有力的科学依据。   Ex vivo and in vivo stable isotope labelling of central carbon metabolism and related pathways with analysis by LC-MS/MS 一、靶标代谢流解决方案 BIOTREE能量代谢之靶标代谢流解决方案:主要集中在能量代谢明星通路精细化代谢速率研究, 包含糖酵解途径、三羧酸循环、磷酸戊糖途径。 糖酵解途径(EMP)是指糖原或葡萄糖分子分解至生成丙酮酸的阶段,是体内糖代谢最主要途径。此途径在动植物和许多微生物中普遍存在。在需氧生物中,糖酵解途径是葡萄糖氧化生成二氧化碳和水的前奏。糖酵解生成的丙酮酸可进入线粒体,通过三羧酸循环(TCA)及电子传递链彻底氧化成二氧化碳和水,并生成腺嘌呤核苷三磷酸。   代谢流-糖酵解途径(部分物质)   三羧酸循环是(TCA) 需氧生物体内普遍存在的代谢途径,是生物机体获取能量的主要方式,是糖,脂肪和蛋白质三种主要有机物在体内彻底氧化的共同代谢途径,是体内三种主要有机物互变的中心枢纽   代谢流-三羧酸循环(部分物质)   磷酸戊糖途径(PPP) 是葡萄糖氧化分解的一种方式,在动物、植物和微生物中普遍存在。在生物体内磷酸戊糖途径(PPP)除了提供能量外,主要是为合成代谢提供多种原料。如为脂肪酸、胆固醇的生物合成提供还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸

Treg三种表型中有抗肿瘤活性的部分解析

Treg三种表型中有抗肿瘤活性的部分解析

作者:德尔塔 日期:2022-04-13

前言:调节性T细胞(regulatory T cells ,Treg)在我们的潜意识中成了免疫抑制,促进肿瘤的“坏细胞”。但其实不然... 调节性T细胞及其稳定性 Treg作为免疫系统的调节因子,维持内稳态,防止自身免疫性疾病发生发展。 Treg抑制功能通过多种机制发挥作用: 分泌抑制性细胞因子:IL10、IL35、TGFβ 产生CD39、CD73、腺苷产生或IL2剥夺,破坏代谢 通过颗粒酶B直接溶解免疫细胞 通过LAG3和CTLA-4调节DC的发育和功能等 肿瘤微环境(TME)的独特之处在于它营养不良、缺氧和酸性,对于效应T细胞(Teffs)非常不友好,因为其依赖糖酵解提供能量。与此相反,Treg依赖于氧化磷酸化,并被认为在缺氧、酸性环境中具有增殖和功能优势。 Treg的稳定性被定义为Foxp3的持续表达,CNS2位点的低甲基化,并维持抑制功能。现在这些观点在逐渐改变,Treg不稳定性最初被定义为细胞中Foxp3表达的缺失,随后抑制功能的丧失,最近几年,研究者发现另外一群脆弱型Treg, 表达Foxp3,但是没有抑制功能。 调节性T细胞的三种表型   Cancer Immunol Res; 6(8) August 2018 根据Treg是否表达Foxp3以及是否具备抑制功能,将其分为三类   稳定型Treg: 表达Foxp3,具有抑制功能 脆弱型Treg:表达Foxp3, 但IL-10等抑制因子表达下降,无/低抑制功能,分泌IFN-γ,具有抗肿瘤活性 不稳定Treg:不表达Foxp3,无抑制功能 Foxp3表达缺失部分原因是由于Foxp3基因某些位点缺乏去甲基化。该位点的去甲基化于2007年首次被描述,Foxp3位点的5’UTR中发现了一个保守的去甲基化CpG基序的区域(称为TSDR/CNS2)。这种去甲基化模式在小鼠和人类外周血的胸腺和成熟的周围Treg中均可观察到。相比之下,CNS2在效应CD4+T细胞中被甲基化。 Foxp3位点的低甲基化被认为是Treg稳定性所必需的,但它不依赖于Foxp3的上调而发生。 抗肿瘤活性-脆弱型Treg   Cell 169, 1130–1141.e11 (2017). 多种因素对Treg脆性很重要,包括Nrp1、Foxo1和Eos。   Nrp1缺

最接近生物表型的组学:代谢组学介绍与分析流程

最接近生物表型的组学:代谢组学介绍与分析流程

作者:德尔塔 日期:2022-04-13

■ 什么是代谢组学 在基于基因组-转录组-蛋白质组-代谢组的系统生物学框架内,代谢组学 (metabolomics/metabonomics) 处于最下游,最接近生物表型,主要通过考察生物体系在某一特定时期内受到刺激或扰动前后所有小分子代谢物 (分子量小于 1500 Da) 的组成及含量变化,寻找代谢物与生理病理变化的相对关系。   图 1. 基于基因组-转录组-蛋白质组-代谢组的系统生物学   ■ 代谢组学的优点  1、代谢组处于系统生物学的最下游,基因组和蛋白质组的细微功能变化可以在代谢层面上放大,检测更容易; 2、植物、动物、微生物的代谢物数量远远少于基因和蛋白质,且常见的代谢物在不同生物体系中很相似,所以代谢组学可适用不同的生物体系; 3、可与生物表型变化建立直接相关性。   ■ 代谢组学的常见类型 图 2. 常见的代谢组学的分类   ■ 非靶向代谢组学检测的案例 肝细胞癌 (HCC) 是全球第三大致死性癌症,目前常采用影像学方法 (如 CT、B 超等) 和血清生物标志物 (甲胎蛋白) 来筛查和诊断 HCC,但是敏感性仍然很低,该研究旨在寻求新的 HCC 早期生物标志物。 在这篇研究中,从多个临床中心共纳入 1448 名受试者,包括健康对照、慢性乙型肝炎患者、肝硬化患者和 HCC 患者,首先作者团队采用 LC-MS/MS 法对受试者的血清样本进行生物标志物的筛选和验证 (图 3)。   图 3. 实验设计 发现阶段 (发现候选生物标志物),测试阶段 (验证上述发现的候选生物标志物) 和验证阶段 (确定最终生物标志物)   最终研究者确定了一组新型的血清标志物:苯丙酰色氨酸和甘氨胆酸盐 (图 4)。在高危肝硬化人群中,该标志物组合表现出比甲胎蛋白更好的诊断能力。若与甲胎蛋白联用可以更好的预测临床前 HCC。   图 4. 一组新型的血清标志物的确定 综上,该研究团队发现并验证的这一组血清生物标志物,对早期 HCC 具有很好的诊断能力,有望成为肝癌临床前预测的新指标。 MCE 代谢组学服务 MCE 代谢组学技术服务主要包括非靶向代谢组学和靶

Plant Phenomics | 园艺植物表型组学研究应用文章合集

Plant Phenomics | 园艺植物表型组学研究应用文章合集

作者:德尔塔 日期:2022-04-13

Plant Phenomics | 基于光流法分析水分胁迫条件下番茄叶片萎蔫与茎直径变化的关系 Optical Flow-Based Analysis of the Relationships between Leaf Wilting and Stem Diameter Variations in Tomato Plants Kazumasa Wakamori and Hiroshi Mineno https://doi.org/10.34133/2019/9136298   Plant Phenomics | 利用体内表型分析进行番茄干旱胁迫的早期检测 In Vivo Phenotyping for the Early Detection of Drought Stress in Tomato Michela Janni, Nicola Coppede, Manuele Bettelli, et al. https://doi.org/10.34133/2019/6168209   新方法!预测芸薹属植物花期耐热抗旱性的无损表型测量方法 | Article Nondestructive Phenomic Tools for the Prediction of Heat and Drought Tolerance at Anthesis in Brassica Species Sheng Chen, Yiming Guo, Xavier Sirault, et al. https://doi.org/10.34133/2019/3264872   来阵风,就知道!一种植物无损快速振动表型分析方法 | Aticle Nondestructive and Fast Vibration Phenotyping of Plants E. de Langre, O. Penalver, P. Hémon, et al. https://doi.org/10.34133/2019/6379693   利用机器视觉量化葡萄白粉病严重程度的高通量表型系统 | PPhenomics Article A High-Throughput Phenotyping System Using Machine Vision to Quantify Severity of Grapevine Powdery Mildew Andrew Bierman, Tim LaPlumm, Lance Cadle-Davidson, et al. https://doi.org/10.34133/2019/9209727   Plant Phenomics | 潜在空间表型:用于抗性研究的自动化图像表型 Latent Space Phenotyping: Automatic Image-Based Phenotyping for Treatment Studies Jordan Ubbens, Mikolaj Cieslak, Przemyslaw Prusinkiewicz, Isobel Parkin,  Jana Ebersbach,  and Ian Stavness https://doi.org/10.34133/2020/5801869   Plant Phenomics | 使用高通量表型技术评估拟

UGDH通过增加SNAI1 mRNA的稳定性促进肿瘤转移

UGDH通过增加SNAI1 mRNA的稳定性促进肿瘤转移

作者:德尔塔 日期:2022-04-13

UDP-glucoseaccelerates SNAI1 mRNA decay and impairs lung cancer metastasis. Doramapimod purchased from MCE. 癌症转移是肿瘤发病率和死亡率的主要原因,占癌症相关死亡的 95%。癌细胞经常重新调整它们的新陈代谢来有效地支持细胞增殖和存活。然而,在很大程度上,肿瘤的这些代谢变化是否以及如何促进肿瘤细胞的迁移仍不清楚。UDP-glucose6-dehydrogenase ((UGDH)是糖醛酸途径中的关键酶,将糖醛酸转化为糖醛酸。研究发现,EGFR 激活后,UGDH 在人肺癌细胞中被酪氨酸 473 磷酸化。磷酸化的 UGDH 与 Hu 抗原 R (HuR)相互作用,将 UGDH-葡萄糖转化为 UGDH -葡萄糖醛酸,减弱了UGDH -葡萄糖介导的抑制 HuR 与 SNAI1 mRNA 的结合,从而增强了 SNAI1 mRNA的稳定性。增强 SNAL 的表达启动了上皮-间质间的转化,因此促进了肿瘤细胞的迁移和肺癌的转移。此外,UGDH 在酪氨酸 473 位点的磷酸化与肺癌转移复发和预后不良有关。研究人员的研究显示 UDP-葡萄糖在肺癌转移中的抑癌作用,揭示了 UGDH 通过增加 SNAI1 mRNA 的稳定性促进肿瘤转移的机制。 UDP-glucose6-dehydrogenase (UGDH) is a key enzyme in the uronic acid pathway, and converts UDP-glucose to UDP-glucuronic acid.  Afteractivation of EGFR, UGDH is phosphorylated at tyrosine 473 in human lung cancer cells. Phosphorylated UGDH interacts with Hu antigen R and converts UDP-glucose to UDP-glucuronic acid, which attenuates the UDP-glucose-mediated inhibition of the association of HuR with SNAI1 mRNAand therefore enhances the stability of SNAI1 mRNA. Increase dproduction of SNAIL initiates the epithelial–mesenchyme transition, thus promoting the migration of tumor cells and lung cancer metastasis. Researchers’findings reveal a tumor-suppressive role of UDP-glucose in lung cancer metastasis and uncover a

注射剂与药用玻璃相容性研究的目的意义、步骤及法规要求

注射剂与药用玻璃相容性研究的目的意义、步骤及法规要求

作者:德尔塔 日期:2022-04-13

一、注射剂与药用玻璃相容性研究的目的和意义 药品的包装材料和容器是药品的“第二生命”,它伴随药品的生产、流通、使用全过程,是药品不可分割的一部分,其质量关乎着药品的疗效与人体安全健康。 药用玻璃因其高阻隔性、耐高温、易消毒、成本低、可回收、环境污染相对较小等优点,被广泛应用于各类注射针剂、生物制品、血液制品及输液制品等。尤其在注射剂药品包装中,占小容量注射剂药品包装的绝大部分。 近年来,药用玻璃包装的注射剂药品因“玻屑”问题而被抽检不合格或召回的案例不断发生。2012年底,药监总局紧急叫停碳酸氢钠注射液所用的普通钠钙玻璃瓶包装,原因是这种玻璃容易与碱性物质发生反应生成硅酸盐玻屑。2015年7月,某盐酸多巴酚丁胺注射液被药监部门抽检为劣药,经调查发现药品本身没有质量问题,而是注射液玻璃瓶出了问题,检查人员在玻璃瓶里发现了玻璃颗粒和碎屑,属于可见异物。 即使在发达国家,药用玻璃与注射剂相互作用产生质量问题的案例也时有发生。如2010年及2011年,欧美药品市场发生大量涉及玻璃包装注射剂产品的召回。召回的主要原因,是药品和玻璃包材不相容,在储存期内发生非常细小的碎片剥离,导致严重安全隐患。 然而,即使选用高质量的药用玻璃包材包装合格药品,也不一定能得到合格的包装系统,注射剂与药用玻璃两者之间存在相容性的问题,只有适宜的包装系统才能保证药品质量。而药用玻璃是否“适宜”药品,关键在于二者的相容性试验研究。 综上所述,为保证药品质量,应当在选择符合各国药典标准的高质量药用玻璃包材基础上,开展充分的相容性研究。 IRAS长期低碱处理管瓶,使用日本专有技术,低碱性,无脱片,符合各国药典标准!   二、注射剂与药用玻璃相容性研究的法规要求 相对于欧美发达国家,我国相容性研究开展的比较晚。随着因药用玻璃产生“玻屑”导致注射剂被召回的事件逐渐增多,国家食品药品监督管理局2012年11月下达了《关于加强药用玻璃包装注射剂药品监

真空抽濾系統&废液抽吸系统操作使用说明书

真空抽濾系統&废液抽吸系统操作使用说明书

作者:德尔塔 日期:2022-04-13

​可攜式真空抽濾系統、废液抽吸系统 Lafil 300 - LF 30 Lafil 400 - LF 30 Lafil 300 - SF 10 / LF 32 Lafil 400 - SF 10 / LF 32 Lafil 400 - LF 5a - 500 Lafil 300 Plus Lafil 400 Plus Lafil 300 - BioDolphin Lafil 400 - BioDolphin 重要注意事項 ⚫ 使用本產品前請先詳讀本說明書。 ⚫ 請依相關的法令規範丟棄包裝材料。 ⚫ 請依主機上標示的電源規格,確認供應電源的電壓與頻率正確。 ⚫ 請於室內通風的平台上操作設備,並注意周遭不可有易燃物。 ⚫ 過濾瓶組(包含防溢保護裝置)適用大部份低濃度之酸鹼有機溶液,並非所有溶劑。 ⚫ 請先洩壓到真空錶的指針為零後,再打開電源開關。 ⚫ 本產品並非耐腐蝕幫浦,不適合應用於抽酸鹼有機氣體。 ⚫ 在每次使用後,請依保養方法,進行過濾產品、管路及外觀的清潔。 ⚫ 更詳細的產品資訊請參閱最新的型錄與官方網站。 拆裝前檢查 在拆封本產品前,請先確認包裝盒無任何損害。使用前請先比對產品型號與核對組件清表,確認所 有的配件數量相符,如有任何問題,請保留序號與包裝盒,並接洽當地經銷商以獲得處理 。 日常維護 1. 漏斗蓋、過濾杯、過濾基座、 廢液抽取轉接蓋、接收瓶蓋、防溢保護裝置與接收瓶為耐高溫 材質,請以清水沖洗乾淨,  若需要再以高溫蒸氣滅菌來消毒滅菌後,擦拭乾淨後收藏保存。 2. 不鏽鋼過濾杯與不鏽鋼過濾基座為 SS316 材質,請以清水沖洗乾淨,  若需要再以高溫蒸氣滅 菌來消毒滅菌後,擦拭乾淨後收藏保存。 3. 矽膠管與矽膠 O 型環皆可耐高溫,可用清水沖洗乾淨,再以高溫蒸氣滅菌來消毒滅菌後,擦 拭乾淨後收藏保存。 4. 高溫蒸氣滅菌建議以溫度 121 度至少滅菌 30 分鐘。 5. Lafil 400 主機內含無油式真空幫浦,無需進行保養但在使用之後,請先關閉電源,並將凹槽 中的殘流水漬以乾布擦拭乾淨後收藏保存。 6. 廢液抽吸套件組的零組件,請依其盒中提供的操作手冊進行保養。 7. 消音器與矽膠管屬消耗材,請定期檢查並更換新品,以確保流量的充足 。

Nucleofection核转处理步骤及提高电转染效率的小技巧

Nucleofection核转处理步骤及提高电转染效率的小技巧

作者:德尔塔 日期:2022-04-13

01 Nucleofection™核转的处理 –  简单的操作方案   步骤一: 获取目标细胞   步骤二: 混合和结合 转移至Lonza认证的电转杯或电转板条中   步骤三: 选择Nucleofector™程序,放入电转耗材,按下开始按钮   步骤四: 用培养基将电转耗材的细胞转移出来   步骤五: 转移至培养皿中。Nucleofection™电转后3-8小时即可检验   02 提高Nucleofection™核转效率   小技巧: 1.准备好加了新鲜培养基的多孔板,并在实验前于37°C下预平衡。 2.使用传代次数少并具有推荐融合度或密度(对数生长)的细胞。 3.限制胰蛋白酶暴露时间,仔细监测细胞分离情况。 4.根据优化方案进行细胞计数并使用适量细胞数;所用细胞过少可能导致细胞死亡率增加。 5.采用高质量DNA,使用内毒素去除试剂盒进行纯化;请通过测定A260:A280比值检查各质粒制备液的纯度。 6.室温下以离心速度80-100×g和方案规定的时间进行离心。 7.离心后加入Nucleofector™溶液,混匀溶液/细胞沉淀制备成单细胞悬液,避免对细胞沉淀进行额外操作或用移液器枪头抽吸。 8.Nucleofection™核转后,用核转试剂盒内配的一次性移液管在电转耗材中的细胞顶部加入约500μL预热培养基。 •轻轻将一次性移液管吸头置于电转耗材底部,收集细胞 •将细胞悬液轻轻接种至制备的多孔板中 •请勿重复抽吸混合细胞

评估化学胁迫下微藻非光化学淬灭对温度和光照相互作用的新方法

评估化学胁迫下微藻非光化学淬灭对温度和光照相互作用的新方法

作者:德尔塔 日期:2022-04-13

基于叶绿素a荧光评估光合生物生理状态的方法是近50多年来植物和微藻研究的**技术。叶绿素荧光作为无损的探针可以直接探测细胞的光合机制,特别是光系统II(PSII),另外,一定程度上也可以探测到光系统I(PSI)。叶绿素荧光的研究结果可以用来理解光合生物体的生理过程,但也不仅限于此,因为大多数生物代谢途径直接或间接地依赖于光合作用。多年来,研究人员已经开发了大量叶绿素a荧光测量的技术和方法并得到了广泛用的应用,例如直接闪光诱导荧光,脉冲幅度调制荧光(PAM),高分辨率快速荧光诱导,快速重复频率荧光(fRRF),以及星载的地面荧光观测。所使用的仪器最初是由研究人员自己制造的,后来渐渐地商业化。其中一种仪器是德国WALZ公司生产的IMAGING-PAM,它通过CCD相机测量叶绿素a荧光并将荧光数据图像化。叶绿素荧光成像系统的优点是可以同时测量多个样品或大型光合生物的多个区域,可以轻松评估样品的异质性。 了解温度、光照、营养物质、pH值和CO2等多种非生物胁迫对光合生物生理性能的交互影响是预测和理解植物应对气候变化响应的基础。传统上,评估以上多重胁迫的相互作用既费时又费力,亟需新的方法来改善这类研究过程。近日,New BIOTECHNOLOGY (IF=5.1)杂志刊登了悉尼科技大学Andrei Herdean的最新研究文章“Phenoplate: An innovative methodfor assessing interacting effects of temperature and light on non-photochemicalquenching in microalgae under chemical stress”。文章中作者展示了一个新的实验方案,用于同时沿多个胁迫梯度进行高通量光生理测量。具体方案的细节是通过将IMAGING-PAM与实验室PCR实验中广泛使用的热循环仪相结合来实现的。 图1 Phenoplate方案及示例数据:IMAGING-PAM+热循环仪,示例数据 上述文章的实验旨在研究微藻对多种环境胁迫相互作用的短期响应,从而揭示其部分表型。改变不同样品中磷(P)的含量,目的是为了限制其对类囊体膜ATP合酶的可用性,以观察这种限

Cell Metabolism | 中国代谢研究:现在与未来

Cell Metabolism | 中国代谢研究:现在与未来

作者:德尔塔 日期:2022-04-13

在过去的几十年里,中国见证了经济增长和社会福利的巨大飞跃。与此同时,中国人也受到了营养过剩、缺乏体育锻炼以及代谢紊乱(包括肥胖、糖尿病、非酒精性脂肪肝和心血管疾病)的影响。国家统计局调查结果显示,老龄化进一步加剧了代谢紊乱。另一方面,代谢领域的研究进展也取得了重大进步。清华大学生命科学学院的李蓬院士团队对中国代谢领域研究进行了全面梳理,旨在加深对从实验室研究到临床实践代谢应用的进一步理解,相关成果发表于《Cell Metabolism》。     中国代谢领域发表文章现状 以“代谢”和相关术语作为关键词,对2011-2020年中国代谢研究发表的论文进行检索,要求第一作者的第一单位是中国研究机构。结果(图1)显示,与代谢相关出版物总数稳步增长了600%以上(2011年为1,447篇,而2020年为9,034篇)。同时,在PubMed中以“代谢”为关键词的国际出版物总数比例显著增加(从2011年的8%到 2020年的25%;图 1A)。以“糖代谢”或“脂代谢”为关键词的出版物也增加了800% 以上(图1B)。以关键词“免疫代谢”或“癌症代谢”定义的跨学科研究工作也显著增长(图1C)。作者还调查了发表在《Cell Metabolism》杂志的文章(图1D),在过去十年,《Cell Metabolism》杂志每年发表220篇文章。根据第一作者或最后一位通讯作者的单位定义,中国的出版物在过去十年的前五年保持稳定,而在 2017-2020 年期间出现显著增长,从 5 篇/年增加到15 篇/年。对代表性期刊的调查表明,中国代谢领域研究在质量上也有显著提高。   由于代谢调节涵盖了从分子、细胞和生理到群体水平的所有领域,本文总结了中国在代谢传感、亚细胞器网络、组织间交互作用和人类临床队列研究领域的代谢研究进展。 图1. 根据NCBI PubMed数据库,2011-2020年中国学者在代谢领域的年度出版物统计   代谢物传感和转运 葡萄糖在不同生物界能量代谢中占据中心位置:在分解代谢中充当丰富的燃料分子,在合成代谢中充当多功能生物合成前体。作为葡萄糖的细胞通