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葡萄糖在小鼠克隆胚胎发育中的作用

葡萄糖在小鼠克隆胚胎发育中的作用

作者:德尔塔 日期:2022-04-25

实验步骤 1. 克隆胚胎制备和胚胎培养 卵母细胞在含有5.5mM葡萄糖的CZB培养液中培养。用含有5.5mM葡萄糖和2.5ug/ml 细胞松弛素B的HEPES-CZB液(HCZB)作为工作液,卵母细胞在此液中被去掉纺锤体-染色体复合体;用卵丘细胞作为核供体。用注射针反复吸入、吹出卵丘细胞,以除去其细胞膜和大部分细胞质,然后用注射针将裸卵的核注入去除纺锤体-染色体复合体的卵母细胞中。 孤雌胚胎所用的卵母细胞与用于制备核移植胚胎的卵母细胞来源相同。 孤雌胚胎和核移植胚胎用不含Ca2 、却含10mM Sr2 和细胞松弛素B的CZB培养液进行激活。所有步骤中都不使用二甲基亚砜,以避免其对克隆胚胎造成的不受控制的影响。单细胞正常受精胚胎是通过超排的(B6D2)F1雌鼠和(B6D2)F1雄鼠交配获得的。 所有胚胎用Whitten 培养液(MW)培养。之所以选择此培养液是因为利用(B6D2)F1小鼠卵母细胞制备的受精胚胎、孤雌胚胎和核移植胚胎在此种培养液中更利于它们除了二细胞期之外的胚胎发育。对正常胚胎发育有更好的促进作用的其他培养液,对克隆胚胎却有阻滞作用,所以不被采用。 2. 分析葡萄糖代谢 胚胎在WM中过夜培养,到单细胞后期或二细胞中期时用来进行葡萄糖代谢分析。我们利用[1-14C]葡萄糖、[6-14C]葡萄糖、[5-3H]葡萄糖,来分析葡萄糖代谢情况。使用[1-14C]葡萄糖时,14 CO2 经过戊糖磷酸途径或三羧酸循环释放。使用[6-14C]葡萄糖时,14 CO2仅通过三羧酸循环释放。使用[5-3H]葡萄糖时,3 H2O 仅通过糖酵解途径释放。14CO2和3H2O用一种装置收集然后通过一种方法进行量化。通过比较三种不同位置同位素标记的葡萄糖的代谢率,可以确定不同途径的代谢率。为了准备用于测量代谢的培养液,我们在真空条件下冷冻适量的[1-14C]葡萄糖、[6-14C]葡萄糖、[5-3H]葡萄糖,然后用不含葡萄糖的HCZB进行溶解。用冷的非放射性葡萄糖将溶液中葡萄糖的含量增加至4mM。 根据放射性物质的放射性强弱,将5-20枚胚胎放到1ml注射器的空心活塞中。注射针管中放有600ul 0

移液器的来源及工作原理

移液器的来源及工作原理

作者:德尔塔 日期:2022-04-25

在遥远的一百多年前,实验室里的精英们开始用移液管来转移液体。所谓移液管,就是一根空心的玻璃管,上面标着一到N个刻度。把这根玻璃管插到液体里面,在管子的另一头用嘴(刚开始,我们的精英们只能用他们宝贵的嘴巴来干这个活)或洗耳球把液体吸到管子里,而上面的刻度则告诉我们里面有多少液体了。在吸满我们需要的量之后,用拇指把吸液的这一头堵上,然后把管子放到另外一个容器里,让管子里的液体流入这第二个容器中。这样我们转移液体的任务就搞定了! 然而随着社会的进步,精英们发现这个管子实在不好用,又累又慢,而且还很不好清洗。于是偷懒的念头在脑子里积累,积累,然后爆发——于是移液器诞生了!也就是说,移液器和移液管的作用相同,仅有的几个区别是:一,准确性更高(基于和旧移液管相比,因为有些新移液管中的精英其准确性也是很不错的);二,效率更高(易操作);三,结构更复杂(移液管就是一根管子,而移液器则是由数十个部件组成);四,功能更强大(除了移液外,很多移液器还有很多功能);五,也是最重要的一点,价格更高!(高科技的价格肯定会高点的。) 移液器的工作原理 对于所谓的精密仪器,大多时候总要认真的介绍一下其深奥的原理,但是移液器的原理很简单——就是通过弹簧的伸缩力量使活塞上下活动,排出或吸取液体。 一般说来,移液器分为两种,一种是空气置换式;另一种是外置活塞式,常被作为特殊移液器,应用范围比较窄,这种类型的移液器可以用于移取粘稠度高的样品。 所谓空气置换式,就是下压活塞,把移液器下端内部的空气压出,之后在活塞上移的时候,移液器下端内部的气压就小于外部气压,这样在外部气压的作用下就可以把液体吸上来了。简而言之,就是空气出去,液体进来! 而所谓外置活塞式,其实和针筒的道理一模一样,见过针筒的工作过程,也就大概能明白外置活塞式的原理了。有关移液器的工作原理有兴趣的用户可以查阅莱贝以前的文章,莱贝在《移液器选择和使用——移液器

解析顶空进样器的工作原理

解析顶空进样器的工作原理

作者:德尔塔 日期:2022-04-25

顶空进样器是中一种方便快捷的样品前处理方法,其原理是将待测样品置入一密闭的容器中,通过加热升温使挥发性组分从样品基体中挥发出来,在气液(或气固)两相中达到平衡,直接抽取顶部气体进行色谱分析,从而检验样品中挥发性组分的成分和含量。使用技术可以免除冗长繁琐的样品前处理过程,避免有机溶剂对分析造成的干扰、减少对及进样口的污染。该仪器可以和国内外各种型号的气相色谱仪相连接。 顶空进样器概述 顶空进样器对于其它样品处理技术来讲,它消除了复杂的容易产生错误的步骤。能使您在较短的时间内获得大量有用信息。 顶空进样器特点 目前顶空分析方法有手工方式、气密针进样方式、平衡式加压系统、定量环加压系统、静态-动态补偿式这五种进样方式。下面就是这几种进样方式各自的特点。 一、手工方式(烘箱或水浴法)Manual Injection 1)样品加热后达到热平衡状态 2)用注射器将样品抽出 3)迅速拿到气相上进样分析 二、气密针进样方式Gas-Tight Syringe Injection 1)样品加热后达到热平衡状态 2)通过可加热气密针将样品抽出 3)移动到气相进样分析 三、平衡式加压系统Balanced-Pressure System 1)样品加热后达到热平衡状态 2)用导管通入载气加压 3)样品随载气一起进样 四、定量环加压系统Pressure-Loop System 1)样品加热后达到热平衡状态 2)加压将样品引入定量环 3)阀将样品打入传输通道进样 五、静态-动态补偿式——AutoHS顶空进样器 5.1、采用专利的技术为样品提取提供了更多的手段。 5.1.2、吹扫模式 5.1.3、恒定模式 5.1.4、多次顶空模式 5.1.5、温度渐进模式

土地面积测量出现面积误差的处理方法

土地面积测量出现面积误差的处理方法

作者:德尔塔 日期:2022-04-25

在基础土地利用信息系统的数据库中存储的海量多时态土地利用数据,一般通过地图数字化方式获取,而数字化数据的精度与质量直接影响系统应用分析的可靠性和应用目标的实现,同时影响土地利用的日常管理。在地图数字化(扫描矢量化)以及GIS数据采集和建库过程中,由于土地面积测量仪系统误差和数据采集时的误差导致土地利用面积与法律登记面积有差异。而已经进行土地登记过的面积也是通过一定的测量方法得到的,面积值也存在误差。如何消除或减弱这些误差的影响,保证土地利用面积的准确性,是GIS系统数据建库中的关键问题之一。长春市国土局在进行土地利用数据GIS建库时,遇到利用数字化方法获取地块的土地面积与法律登记面积存在差异问题,若不进行误差处理会给日常的管理工作带来一定的影响,不能充分发挥GIS的作用。针对这个问题,本文提出面积处理的方法并编制面积误差处理软件,从而保证建库数据的精度与质量。    面积误差处理:    1.独立地块的面积平差对于某些独立和单个地块,由于地块间相互不关联,可直接采用建立条件方程进行平差。    2. 多地块面积的整体平差处理在土地利用面积数字化过程中,一个区域(街坊)是由许多相邻地块构成的、没有缝隙的、相对独立的区域的集合。由于多个地块的存在,就产生了多个面积误差条件方程,并且地块间是相互关联的。若每一地块都进行单独平差,不考虑其相关性,平差后的结果是相邻地块间边界不完全重合,从而有缝隙或交叉,平差计算无使用价值,且破坏了相邻地块之间的相邻关系,其结果不能送入GIS库。    因此必须进行多地块面积整体处理,组成条件方程统一进行平差,通过平差计算求出各地块顶点数字化坐标观测值的改正数及相应的平差值。当观测数据量特别多时,可采用地块面积分级平差处理。    针对长春市国土局土地利用数据GIS建库时数字化地块的面积与法律登记面积之间存在差异的问题进行讨论,并建立面积误差的平差模型,通过实例计算与分析表明,建立

旋转圆盘电极应用研究(一)

旋转圆盘电极应用研究(一)

作者:德尔塔 日期:2022-04-25

旋转圆盘电极应用研究(一)     PINE旋转圆盘电极的经典应用:氧还原反应(Oxygen Reduction Reaction, ORR)几乎是所有燃料电池、金属-空气电池的**阴极反应,也是许多金属腐蚀过程中的主要反应。 为什么旋转圆盘电极可以应用于ORR 旋转圆盘电极的优点就是电极溶液界面反应物的扩散层厚度与电极转速之间有着明确的函数应用,因此可以通过系统的改变反应的转速来调控反应物、产物的传质。对光滑电极上发生的可逆性不好的氧还原反应,可以通过简单的数学处理,完全排除传质的影响从而获得电极对反应的内在动力学参数。 Pine旋转圆盘电极氧还原研究应用案例 Angew. Chem. Int. Ed,Sulfur and Nitrogen Dual-Doped Mesoporous Graphene Electrocatalyst for Oxygen Reduction with Synergistically Enhanced Performance; Angew. Chem. Int. Ed,Nitrogen-Doped Ordered Mesoporous Graphitic Arrays with High Electrocatalytic Activity for Oxygen Reduction; NATURE MATERIALS,Co3O4 nanocrystals on graphene as a synergistic catalyst for oxygen reduction reaction; ACS Applied Materials & Interfaces,NiCo2S4@graphene as a Bifunctional Electrocatalyst for Oxygen Reduction and Evolution Reactions; Angew. Chem. Int. Ed, Nitrogen-Doped Carbon Nanosheets with Size-Defined Mesopores as Highly Efficient Metal-Free Catalyst for the Oxygen Reduction; Elsevier, An Efficient Bi-functional Electrocatalyst Based on Strongly Coupled CoFe2O4/Carbon Nanotubes Hybrid for Oxygen Reduction and Oxygen Evolution; pine旋转圆盘电极用于多铜氧化酶催化氧还原动力学研究; pine旋转圆盘电极用于金属掺杂聚吡咯碳化物PPY-M 的制备及其氧还原反应电催化活性的研究; pine旋转圆盘电极用于石墨烯的功能化修饰及其在氧还原电催化中的应用研究; pine旋转圆盘电极用于碳基无金属

土壤养分速测仪的选用技巧

土壤养分速测仪的选用技巧

作者:德尔塔 日期:2022-04-25

在长期的农耕中人们总结出一套耕作的经验,在化肥施用盛行的今天,经验施肥的存在是十分普遍的。但是经验施肥也导致了养分的不平衡,这不仅降低了肥效,也降低了农田产量,更是会导致环境的污染,所以,平衡施肥,测土施肥都成为了国家要的农业技术。测土施肥需要依靠上壤养分分析,多年的实践经验表明,能否选择好土壤养分速测仪,常常是测土施肥成败的关键。 我们认为选择土壤养分速测仪应注意以下几个方面:国家对计量器具的生产有严格的管理,土肥仪属于计量器具,必须经计量产品监督检验部门对样机的性能、可靠性进行检验认定。例如滤光式光电比色土肥仪要检验仪器的稳定性、重复性、灵敏度和线性误差,还要检验仪器的耐震动、耐温度变化、绝缘安全性等。它必须符合国家检定规程”G179一90和电子测量仪器有关电源试验、环境试验和安全试验的要求,才能由计量管理部门颁发计量器具样机试验合格证书。在样机试验合格的基础上,技术监督部门还要对生产设施、人员技术水平、技术文件、检定条件、管理制度等生产条件进行考核,通过考核,才颁发计量器具制造许可证证书。 应该指出,样机试验合格证还只是说明仪器性能达到了国家检定规程的要求,对于土壤养分速测仪土壤养分测试而言,一般可以满足氮和钾的测定精度要求,而对于有机质和磷的测定精度却不能保证例如JJG179一90规定稳定性误差应小于1.5%,而当磷的含量低于10毫克/公斤,有机质含量低于10克/公斤时,稳定性误差只有低于0.5%(**低于0.3%,这是光栅式l类分光光度计的检定标准)才能符合农业部土壤分析技术规范对平行测定允差的要求.所以购仪器时要实地检查一个仪器的稳定性。检查的方法是:¹接通电源将仪器预热5一10分钟;º将仪器遮光盖盖上,调整仪器使显示器读数为零;观察仪器读数变化,三分钟内仪器最大和最小读数之差除以满量程读数,即为仪器的稳定性误差。俗话说仪器术怕不准就怕不稳,稳定性不合格的仪器是不能用的。

土壤养分速测仪测定土壤养分前的取样方法

土壤养分速测仪测定土壤养分前的取样方法

作者:德尔塔 日期:2022-04-25

测土配方施肥技术是农民节本增收的重要途径,通过2年来的工作经验积累,我们发现在土壤和作物测试工作中,一般地说,采样误差常比现场操作误差、试剂误差、食品误差等偏大。所以一定要根据速测的目的和要求,注意采集有代表性或典型性的样品。土壤养分速测仪是测定土壤养分含量的重要仪器之一,其结果也十分准确可靠。 土壤养分速测仪在进行土壤养分速测时,通常用来化验的土样是少量的,而化验的结果却作为较大面积地块的代表。采样误差一般要比化验误差大的多。缩小采样误差的关键是采集的土样要有充分的代表性。一般先把采样区域划分为若干采样地块。同一采样地块里的地形、近期耕作施肥措施、作物长相和产量水平等应基本一致。每一采样地块的面积不应过大,一般不超过3.3hm2(50亩)。采样点的分布应尽量照顾到土壤的全面情况,不要太集中,不要在路旁、沟边、渠道附近和粪堆底等地方采样。因为这些地方不代表地块的平均肥力水平。 利用土壤养分速测仪的测定发现,上述采样方法在实际应用时,要结合当地的耕作和栽培方式进行。例如为了制定施肥方案,可在播种前或施肥前,在垄台上采样,取样深度应从垄台高度算起,横断垄向取0~20cm深的土样。如果在作物生育期,为指导追肥采样,则应考虑到作物根系范围,特别是玉米株间距离较大,播种时埯内施有口肥,根域附近或较远的地方地力差异大,因此要在植株附近(约10cm处)和两埯之间顺垄向多点、等量采样,然后混合。如果玉米和其他作物实行间种,为玉米追肥采样时,则只在间种玉米的地段取样。

异氟烷吸入式麻醉在动物手术中的应用优势

异氟烷吸入式麻醉在动物手术中的应用优势

作者:德尔塔 日期:2022-04-25

动物手术前的麻醉不仅是为了减少动物疼痛满足动物福利的要求,也是为了保证动物手术顺利进行。目前注射麻醉在我国的动物麻醉中最为普遍,其优点是不需要昂贵的设备,只需要注射器就行,但麻醉剂注射动物后,必须经肝脏代谢完后,动物才苏醒;剂量过大会造成动物麻醉过度死亡,剂量过小动物不能进入麻醉状态或进入麻醉状态比较慢。在发达国家,气体吸入式的麻醉非常普遍,与传统的药物注射麻醉方式相比,具有以下显著的共同优点: * 动物进入麻醉状态较快,苏醒也迅速,一旦停止麻醉,一般2分钟内动物即可苏醒 * 麻醉深度容易控制,若在手术过程中发现动物状态不佳,可马上停止麻醉或者快速充氧进行抢救,因此安全性非常好; * 动物的发病率和死亡率低,动物手术的成功率高; * 更重要的是,吸入式麻醉剂在体内不参与代谢,几乎完全由肺泡经呼吸排出,对实验结果不造成影响,研究成果易得到国际认可。 在具体的实际应用中,我们可以明显地看到异氟烷吸入式麻醉方式的优势,下面就一些典型的动物实验采用异氟烷麻醉方式的优势: 1. 套管慢性给药、微透析和光学刺激/生理信号记录(光遗传学) 导管植入颅内,待动物恢复后,首先拔出导管帽,然后植入注射内管(探针或光纤)、通过管路(光纤跳线)连接注射器(激光器)。然而,植入内管(探针或光纤)和连接管路(光纤跳线)这一过程(如图1、2和3所示),虽然花费时间很短,也就几分钟的时间,如果动物不麻醉,动物会挣扎,配合不好,导致无法插管(插入光纤);如果在戊巴比妥钠、乌拉坦等注射麻醉后进行,操作容易进行,但是这些麻醉方式的维持时间很长,往往达3-5个小时,不利于后期做清醒自由活动动物的给药或光刺激,而且额外增加了使用这些麻醉剂带来的副作用,测得的指标不准确,影响实验结果的客观性和可靠性。然而,如果使用异氟烷吸入式麻醉,则避免了这些问题的发生,而且操作简单,只需将动物放置于实验平台上,带上麻醉面罩,即可开始进行操作。 图1 套管

小麦总RNA的提取方法

小麦总RNA的提取方法

作者:德尔塔 日期:2022-04-25

实验步骤 1. 所有容器高温灭菌两次,DEPC高温灭菌,所有的试剂用DEPC配制,高温灭菌。 2. 在一灭菌2mL管中加入:5mol/L异硫氰酸胍0.7mL、苯酚0.4mL、NaAc(pH4.0) 0.1mL。 3. 称取0.2g小麦黄化苗的叶片,迅速在液氮中研磨成粉末,转入已准备好的离心管中,剧烈震荡。 4. 混匀,冰浴30min。 5. 4℃,12000rpm,10min。 6. 上清至另一离心管中加0.4mL氯仿,剧烈震荡。冰浴放置5min。 7. 4℃,12000rpm,10min。 8. 弃有机相(下层) 加入0.4mL氯仿和0.4mL酚,室温放置5min。 9. 4℃,12000rpm,10min,弃有机相,加入等体积异丙醇。-20℃放置1h。 10. 4℃,12000rpm,10min,沉淀用70%乙醇洗两次。 11. 室温稍干燥。 12. 沉淀加20μLDEPC水溶解(-20℃保存) 13. RNA电泳:1%琼脂糖胶20mL,8μL样品,1μL样品缓冲液,1μLSYBR,100V恒压电泳,测OD260和OD260/OD280。 注意事项 1. 步骤1目的是去除RNA酶(外源)的影响。高温灭菌两次可以破坏RNA酶的复性过程,虽然RNA酶极易复性,但两次连续的高温会打乱它的复性历程,从而使RNA酶失活。 DEPC是RNA酶的非竞争性抑制剂。DEPC可以与RNA酶的活性中心的组氨酸咪脞环上的N结合,从而使RNA酶失活。因为DEPC能与RNA的N结合,从而修饰RNA,所以必须将DEPC最终除去。在高温灭菌时,DEPC因高温分解而挥发。UV也能修饰RNA,实验时应避免。DEPC灭菌后称为DEPC水,它是不含DEPC的。实验过程中要勤换手套,必要时要在超净工作台中进行。 2. 必须提前准备好变性剂。异硫氰酸胍可以变性RNA酶,也可以破细胞。本试验不可以用酶法破细胞。因为蛋白酶K的适合的条件也可以使RNA酶有活性。 NaAc酸性可以使DNA在有机相(酚相)中,而在碱性条件下,DNA和RNA都在水相中,无法分离。苯酚用于抽提DNA和蛋白质。 3. 低温防止内源性RNA酶降解RNA。剧烈震荡是使所有的细胞散开,浸在变性剂中。低温的细胞在相对高温的液体中是会形成一团,这样就会使内部的RNA没有水解RNA的机会。小麦的黄化苗因为没有光

成年猪胰岛分离纯化方法的优化

成年猪胰岛分离纯化方法的优化

作者:德尔塔 日期:2022-04-25

实验试剂 胶原酶V,512 kut/mg(Sigma公司),DNA酶(Sigma公司),胎牛血清(Gibco公司),RPMI1640培养液(Gibco公司),Dextran(Pharmacia公司),Hanks平衡盐溶液(Gibco公司)。 实验设备 离心机,注射器,显微镜,超净工作台等。 实验材料 成年杂种猪,猪龄12 mo,体质量150 kg左右,猪被屠宰放血后,在相对无菌条件下迅速取出胰腺,保存于4℃ Hanks液中送至实验室,热缺血时间少于10 min,冷缺血时间少于90 min。 实验步骤 1. 胰岛分离 胰腺取回后,置于超净工作台上,快速去除胰周组织、脂肪、血管及外科被膜,保留固有被膜。从胰头、胰体交界部横断胰腺,找到主胰管,用20 G套管针插入,缝合线结扎,尾部远端亦结扎切断,每次均取约15-20 g组织,注入4℃含Ca2 Hanks液配制的复合胶原酶溶液(1.5 g/L,内含DNA酶0.3 g/L),注入量 = 胰质量×2,注射速度7 mL/min,3-4 min内完成,置入玻璃容器内,在38.5±0.1℃水浴中震荡消化,震速100 r/min,在消化过程中间断加入0.1 mmol/L的NaOH,使消化液pH值尽可能维持在7.8左右,从消化20 min开始每间隔4 min取样一次,双硫腙染色镜检,当胰腺组织被消化裂解成细沙状,镜检见大部分结构完整的胰岛从外分泌组织中脱落出来,立即用4℃冷Hanks液(含100 mL/L胎牛血清)终止消化,充分混匀后,用40目钢网过滤,收集消化后组织,4℃离心冼涤2次,去除脂肪等杂质细胞,取样镜检计数和观察消化后胰岛分离情况。 2. 胰岛纯化 用Dextran配制成密度为1.037,1.054,1.070,1.096,1.11 kg/L的不连续密度梯度液,依次将不连续密度梯度液各10 mL加入50 mL离心管中,最后将洗涤后的消化组织每0.5 mL与1.037 kg/L密度梯度液10 mL混匀,小心移至离心管中液体上层,形成不连续密度梯度。将2-4个离心管置入低温离心机中,先800 r/min离心5 min,然后2 500 r/min离心15 min,离心后在1.096-1.054 kg/L之间收集纯化的胰岛,4℃离心洗涤2次。分别取样镜检计数,估计纯度和行生物学活性及组织学鉴定。 3.

线粒体(Mitochondrion)的活体染色的及电镜照片观察

线粒体(Mitochondrion)的活体染色的及电镜照片观察

作者:德尔塔 日期:2022-04-25

实验原理 线粒体是细胞内一种重要细胞器,是细胞进行呼吸作用的场所。细胞的各项活动所需要的能量,主要是通过线粒体呼吸作用来提供的。活体染色是应用无毒或毒性较小的染色剂真实地显示活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种染色方法。詹纳斯绿B 是线垃体的专一性活体染色剂。线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态呈蓝绿色,而在周围的细胞质中染料被还原,成为无色状态。 实验试剂 1. 1/300 詹纳斯绿B 染液 2. Ringer 氏液(哺乳类用) 实验设备 1. 显微镜 2. 手术器材一套 3. 解剖盘 4. 小平皿 5. 载片 6. 盖片 7. 吸水纸 8. 10ml注射器 9. 吸管 实验材料 兔子一只、线粒体的电镜照片。 实验步骤 1. 兔肝细胞线粒体的活体染色    1) 用空气栓塞处死兔子,置于解剖盘内,迅速打开腹腔。    2) 取兔肝边缘较薄的肝组织一小块(2~3mm3),放入盛有Ringer 氏液的平皿内洗去血液(用镊子轻压),用吸管吸去Ringer 氏液,在平皿内加1/300 詹纳斯绿B 染液,让组织块上表面露在染液外面,使细胞内线粒体的酶系可进行充分的氧化,这样才有利于保持染料的氧化状态,使线粒体着色。当组织块边缘染成篮色时即可,一般需要染30 分钟。    3) 染色后,将组织块移到载片上,用镊子将组织块拉碎,就会有一些细胞或细胞群从组织块脱离。将稍大的组织块去掉,使游离的细胞或细胞群留在载片上,加一滴Ringer 氏液,盖上盖片,吸去多余水分。 2. 结果    1) 显微镜观察,肝细胞质中许多线粒体被染成蓝绿色,呈颗粒状。    2) 线粒体的光镜切片观察 用詹纳斯绿B 染色的兔肝细胞光镜切片,肝细胞中的线粒体呈蓝绿色的颗粒。    3) 线粒体的电镜照片观察 不同细胞中线粒体的形态和数目不同。线粒体的外形多样,如圆形、椭圆形、哑铃形和杆状。线粒体的数目与细胞类型和细胞的生理状态有关,线粒体多聚集在细胞生理功能旺盛的区域。线粒体脊的数目与分布方式是多种多样的。一般与线粒体长轴垂直排列,

防腐蚀隔膜泵泵体和电动机过热的原因分析

防腐蚀隔膜泵泵体和电动机过热的原因分析

作者:德尔塔 日期:2022-04-25

使用过程中,常常出现过热的现象,此时我们需要区分对待,要弄清楚到底是泵体过热还是电动机过热,再根据具体问题具体分析。 防腐蚀隔膜泵泵体发热 防腐蚀隔膜泵泵体过热常见的原因是由于轴承损坏造成摩擦所致,或者是由于润滑系统缺油、油质不好造成。因此在发现防腐蚀隔膜泵泵体过热后应首先检查润滑系统是否缺油或润滑油含有杂质等,其次排查轴承是否损坏。对于刚刚经过检修的泵体出现过热还应检查滚动轴承或托架盖是否间隙过小。经过上述检查后泵体仍然出现发热应检查泵轴是否弯曲或两轴不同心、同时检查叶轮平衡,调整泵轴或调整两轴同心度,清除叶轮平衡孔,以此保证泵轴与叶轮的转动平衡,排除故障。 防腐蚀隔膜泵电动机过热 防腐蚀隔膜泵电动机过热是常见的故障之一,原因主要有哪些呢? 造成电动机过热的原因主要是由于电压偏高或偏低、传动不畅、通风系统故障或机组故障造成电动机过热。电动机过热严重时会造成绝缘烧坏、转子断条等情况发生。因此,在发现电动机过热时应采用气动其他动力方式,进行停机检修。 电压原因造成的电动机过热应对电动机供电系统进行检查,通过恢复稳定供电,解决防腐蚀隔膜泵电动机过热故障。 另外传动不畅也会造成电动机过热,由于电动机与防腐蚀隔膜泵间的传动不畅造成电动机负载过大,出现小马拉大车的现象,电动机过载是温度升高。此种情况必须及时进行检修,造成机组故障。对电动机与防腐蚀隔膜泵的传统系统进行彻底排查,常见的传统不畅主要由于传动系统转动轴承缺油、轴承损坏等造成。找出故障所在点进行更换或润滑即可。 由于同分系统故障引起电动机过热时最为常见故障之一,其主要是由于风扇损坏、通风孔道堵塞、轴承磨损等原因使得通风系统不能完成所应承担的工作,造成电动机过热,严重的还将烧毁线圈。此种情况必须逐项排查,找出故障原因,通畅通风孔道、修补风扇、更换轴承即可解决故障。

量化成像流式细胞技术在心血管研究中的应用

量化成像流式细胞技术在心血管研究中的应用

作者:德尔塔 日期:2022-04-25

“我国每5个成年人中就有1个心血管病患者,每10秒钟就有1人死于心血管疾病“,心血管疾病在致中国城镇与农村居民死亡疾病中占首位。因此可见,心血管疾病的预防与**是未来临床与科研重点关注的研究方向。转化医学这一概念的提出促进了临床实践向基础研究提出新的命题,基础研究提出可能的解决方案进行临床验证,相互转化。目前中国转化医学的研究重点在心血管疾病与肿瘤,集中在疾病的发病机制、疾病的早期非创伤性诊断、疾病的规范**及新药物新技术的开发等。细胞水平建立体外疾病模型从而研究相关发病机制与**手段,是心血管疾病关注的重要方向。流式细胞检测和显微成像,是细胞水平研究的两大传统方法。利用流式细胞技术,科研人员可以分析上万个细胞,获得每个细胞的相对大小、颗粒度和荧光信号的数值,从而得到细胞群体的各种统计数据,筛选出稀有的细胞亚群。但是传统流式细胞检测技术存在一定局限,获得高通量的同时忽略了细胞承载的丰富信息。研究人员仅仅得到散点图上的一个点,而不是真实的细胞图像,缺乏细胞形态、亚细胞器结构与荧光信号空间分布的相关信息。要想获得基于细胞图像的数据,研究人员必须借助各种显微成像设备进行观察,但显微镜能够观察到的细胞数量是非常有限的,容易遗漏稀少事件,手动分析数据耗费大量人力和时间,而且受实验人员的主观因素影响,实验结果的稳定性很差,难以提供准确的细胞群体量化与统计数据。因此,量化成像流式细胞技术()的出现结合了流式检测的高通量与荧光显微镜的高内涵,同时提供细胞图像与群体统计数据,给传统细胞分析带来了重大变革,在流式细胞分析、分选的传统技术之外开创了“成像流式“下一代专家级流式细胞技术的发展方向。 心脑血管研究经常涉及分离分析原位组织中的干细胞、前体细胞等,若仅仅使用传统流式分析方法,难以精确鉴定细胞。荧光显微镜又受通量的限制,难以捕获稀有现象。量化成像流式细胞技术的优势在于高功率激光器与785nm SSC专用激光器适合

不同机型全自动凝胶染色仪的比较

不同机型全自动凝胶染色仪的比较

作者:德尔塔 日期:2022-04-25

凝胶染色是生物实验室内经常会遇到的实验操作,包括硝酸银染色实验和考马斯亮蓝染色脱色实验2大类。传统的凝胶染色实验一般都需要借助脱色摇床来完成,主要操作步骤有加液、换液、排液和清洗等,全程比较依赖人工参与,因此我们常把传统的凝胶染色称为人工或手动凝胶染色。由于使用脱色摇床而带来的非封闭性操作,手动凝胶染色实验过程中有时容易溅出染液,不仅污染实验室环境和实验人员衣物,有时甚至危害到实验人员的健康。此外,如果遇到多块凝胶同时染色的情况,传统的手动凝胶染色可能会有更多不便。针对这些问题,全自动凝胶染色仪应运而生。目前国内实验室见得到的主要有美国、日本和国产三类产品,各自的代表机型如下: 1. 美国GE Healthcare的(以下简称PP) 细心的用户会在现有的仪器资料上发现机身有Hoefertm这个商标,是的,这款仪器正是由美国电泳产品厂商Hoefer代工。PP分两种型号,一个是做自动凝胶染色的Gel Stainer(注意,gel和stainer中间有空格,不带空格GelStainer则是DHS家的凝胶染色仪产品,后面会有简单介绍),一个是做自动Blot膜处理的Blot Processor。其实两者主要区别在于槽体部分的构造,Blot Processor槽体比较复杂,由若干带连接管道的凹陷小池构成,可以一次处理2-4块标准转印膜;Gel Stainer外观很像普通摇床,但池子为长菱形,有19*29cm和 29*35cm两种尺寸可选,染色池内有凸起的若干管口,作为进液口出液口分别连接到各种试剂瓶。PP内置了9个预设程序并允许自定义4个程序,染色池可容125-400ml的试剂,可以同时染色4-6块 8*7cm小尺寸凝胶、1-2块14*16cm标准尺寸凝胶、1-2块12.5*26cm大尺寸凝胶。图片: GE Gel Stainer GE Blot Processor  2. 日本ATTO的 ATTO在国内可能并不出名,但在日本可是凝胶电泳界的老牌厂商,已有50年历史。而这款AE-6630机型官方外号“染次郎”(不得不说有种东洋风味的萌呵),其外观设计以及实际做工如ATTO其他凝胶电泳设备一样,简约紧凑,扎实细致。主

大肠菌群检测新方法——酶底物法检测系统

大肠菌群检测新方法——酶底物法检测系统

作者:德尔塔 日期:2022-04-25

水质大肠菌群系统:   由LK-2010程控定量封口机、51或97孔定量检测盘、100mL定量瓶、酶底物检测试剂四部分组成。检测水样范围:饮用水、源水、瓶装水、中水、二次供水、管网水、废水、食品水、畜牧用水、医疗用水等。   该检测方法采用大肠杆菌产生β-半乳糖苷酶分解色源底物-ONPG(Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside) 使培养液呈黄色。大肠埃希氏菌产生β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase)分解MUG(4 - methyl-umbelliferyl-β-glucuronide)使培养液在波长366 nm 紫外光下产生荧光的原理,来定性定量水中总大肠菌群、粪大肠菌群(耐热大肠菌群)及大肠埃希氏菌。   序号 指标名称 技术指标 1 名称 程控定量封口机 2 用途 用于GB5750-2006酶底物法检测水质总大肠菌群、大肠埃希氏菌,粪大肠菌群 3 可靠性 无漏液,无破孔 4 稳定性 可检测40,000个样品以上,使用寿命大于5年 5 方便性 开/关及退格键有定量数显窗口,有保洁窗口 6 快捷性 无需无菌室,24h检测水中总大肠菌群\大肠埃希氏菌\耐热大肠菌群 7 重量 ≤16kg 8 尺寸 39cm 长 X 27cm 宽 X 30cm 高 9 预热时间 ≤14min 10 噪音