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婴幼儿乳品中脂肪含量检测法盖勃法介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
[导读] 近几年来，食品的质量问题曝光不止， 其中也不乏婴儿乳食品中的高糖份与高脂肪问题。很多人都“谈脂色变”。婴儿食用过量的糖份与脂肪，除了引起肥胖外，还会影响婴儿的钙质吸收，伤害婴儿的心血管，导致非正常发育。 那么， 如何检测婴幼儿乳食品中的脂肪含量？ [国标] 2011年国家公布了GB5413.3—2010号“婴幼儿食品和乳品中脂肪的测定”，清楚地说明了可使用2种方法来检测脂肪。第一种是莫氏法，该法适用于巴氏杀菌乳、灭菌乳、生乳、发酵乳、调制乳、乳粉、炼乳、奶油、稀奶油、干酪和婴幼儿配方食品中脂肪的测定，原理为碱水解；第二种是盖勃法，其适用于巴氏杀菌乳、灭菌乳、生乳中脂肪的测定，原理为酸水解。 这里重点介绍能够快速检测乳品中脂肪的盖博法。 [检测方法] 盖勃法 [检测原理] 盖勃法酸水解的原理是在乳中加入硫酸破坏乳胶质性和覆盖在脂肪球上的蛋白质外膜，离心分离脂肪后测量其体积。 [实验试剂材料] 实验试剂： 1）硫酸（H2SO4）：分析纯，密度约为1.84 g/L。 2）异戊醇（C5H12O）：分析纯 实验仪器： 仪器名称 品牌 型号 乳脂离心机 （带加热功能，配盖博管适配器） 瑞士盖博仪器 Gerber Instruments Gerber centrifuge Universal 盖博乳脂计 瑞士盖博仪器 Gerber Instruments Milk Butyrometer Original Gerber 单标吸乳管 瑞士盖博仪器 Gerber Instruments 03.1003（10.75mL） 水浴槽 瑞士盖博仪器 Gerber Instruments 或Bibby Stuart Waterbath Butytherm mini or SWB24D 乳脂离心机 盖博乳脂计 水浴槽 [分析步骤] 1）于盖博乳脂计中先加入10 mL 硫酸（11.1），再沿着管壁小心准确加入10.75 mL 样品，使样品与硫酸不要混合，然后加1 mL 异戊醇（11.2），塞上橡皮塞，使瓶口向下，同时用布包裹以防冲出。 2）用力振摇使呈均匀棕色液体，静置数分钟（瓶口向下），置65 ℃～70 ℃水浴中5 min，取出后置于乳脂离心
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亚硝酸盐中毒解决控制方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
亚硝酸盐中毒一直是养殖过程中碰到的比较棘手的问题，现在免费公布降解亚硝酸盐的七大有效方法。希望给养殖户带来一点启发近几年养殖实践证明，亚硝酸盐中毒一直是养殖过程中碰到的比较棘手的问题，往往给养殖户带来比较惨重的损失。当前还没有能降解亚硝酸盐的特效药，但实践中，可以选择各种措施来缓解和降低亚硝酸盐带来的危害。措施虽然很多，但如何合理灵活选择却让许多鱼病防治工作者和养殖户犯难。笔者针对当前养殖中亚硝酸盐的控制方法及其效果进行了归纳与总结，供大家。 一、直接降解法 1、氧化法 亚硝酸根离子中的氮为中间价态，具有被氧化的特性。当介质中的NO2-遇氧化剂时则会改变氮的价态，发生得失电子的变化而被氧化，最终NO2-离子会转变为毒性较小甚至无毒的物质。具有氧化亚硝酸根离子能力的物质很多，如：臭氧、双氧水、次氯酸钠等很多物质，但适合在养殖水体中使用的仅三氯异氰脲酸、二氯异氰脲酸、溴氯海因、二氧化氯等几种强氧化消毒剂。 用强氧化剂来氧化NO2-离子使其成为NO3-离子的优越之处在于反应速度快、成本低、氧化效率高。但在实际生产中很少采用这种方法来降解亚硝酸盐，主要原因是在这些强氧化消毒剂在常规使用浓度下对亚硝酸盐减降解率低（低浓度下降解亚硝酸盐效果不明显，高浓度下会造成药害），此外氧化法降解亚硝酸盐还存在容易反弹的弱点。在生产中出现以下情况时优先选择这种方法：①正常预防消毒，但亚硝酸盐含量在0.2毫克/升左右时，可以选用颗粒型三氯异氰脲酸（如氯立得，能直接到达池底，改良底质，控制亚硝酸盐的生成）全池抛洒，既预防了鱼病又能控制亚硝酸盐；②爆发鱼病需要消毒，亚硝酸盐含量在0.2毫克/升左右时，优先使用二元二氧化氯，既杀灭了病原体，又改善了环境，缩短了康复时间。 2、还原法 近几年来，有些专家在研究时，利用NO2-在酸性条件下具有氧化性而被还原的特点，考虑使用某种还原剂将NO2-还原降解为易挥发气体而自动脱离反应体系。例如张秀云
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十年一剑！SMC单分子检测技术——蛋白检测下限高达fM级别
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
历经50亿公里和将近十年的飞行，新视野号飞行器终于按照预订的轨道飞到了冥王星，成为了这个在寒冷太空中孤寂天体的第一个访客。NASA早已迫不及待地要给冥王星开第一个新闻发布会，炫耀以光速飞行5.6个小时才能传回的宝贵照片。科学家们十年铸剑的努力得到了辉煌的回报，我们已经访问了太阳系内的每一个行星！而平凡渺小如同你我，也可在十年的平静生活之后，一睹50亿公里外的芳容。 虽然生命科学与空间科学可谓隔行隔山。不过在我们每天熟视无数遍的一个小小的离心管中，发现的机会却并没有什么本质的不同：在传统技术，例如酶联免疫等方法的帮助下，我们仅能检测生物样本中5%-30%的蛋白质种类。但多数蛋白的浓度真的太低，与我们的“时空距离”太遥远了。如同我们站在冥王星上看太阳，小到无法判断她是一个圆面，只能看到一个光点；在ELISA板上，致命发现已经被掩藏在四散发射的背景光子里了。 SMCTM单分子检测技术原理图 我们无法忽视工具的差别，没有飞到冥王星的工具，我们能看到的也多不过一个点。没有彻底的改变，浓度较低的蛋白生物标志物的检测也非常艰难。经过十年的砥砺，今年夏天，默克密理博把搭载单分子检测技术（Single Molecule Counting technology, SMCTM）的Erenna免疫检测系统导入了生命科学日常研究。在蛋白标志物探测领域，Erenna免疫检测系统能够在溶液中检测含量极低的生物标志物分子，其检测灵敏度相对于传统技术ELISA提高了几百至上千倍，检测下限低至1fM, 而其操作流程却并不比ELISA复杂。其卓越的检测能力极大拓展了人类发现蛋白标志物的能力，作用堪比新视野号。该技术已被广泛应用于多种疾病生物标志物的检测，包括心血管疾病，炎症，糖尿病，神经疾病，癌症等等。另外，针对创新性生物标志物的研究，Erenna免疫检测系统更是提供工具，帮助研究者便捷地自行开发和优化检测试剂盒。其专家定制化服务可使用户在资源和时间有限时，获得试剂盒研发和生物标志物检测相关服务。默克密理博通
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气相色谱常识问答(上)
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
一、气相色谱法有哪些特点？ 答：气相色谱是色谱中的一种，就是用气体做为流动相的色谱法，在分离分析方面，具有如下一些特点： 1、灵敏度：可检出10-10 克的物质，可作超纯气体、高分子单体的痕迹量杂质分析和空气中微量毒物的分析。 ２、高选择性：可有效地分离性质极为相近的各种同分异构体和各种同位素。 ３、高效能：可把组分复杂的样品分离成单组分。 ４、速度快：一般分析、只需几分钟即可完成，有利于指导和控制生产。 ５、应用范围广：即可分析低含量的气、液体，亦可分析高含量的气、液体，可不受组分含量的限制。 ６、所需试样量少：一般气体样用几毫升，液体样用几微升或几十微升。 ７、设备和操作比较简单仪器价格便宜。 二、气相色谱的分离原理为何？ 答：气相色谱是一种物理的分离方法。利用被测物质各组分在不同两相间分配系数（溶解度）的微小差异，当两相作相对运动时，这些物质在两相间进行反复多次的分配，使原来只有微小的性质差异产生很大的效果，而使不同组分得到分离。 三、何谓气相色谱？它分几类？ 答：凡是以气相作为流动相的色谱技术，通称为气相色谱。 一般可按以下几方面分类： 1、按固定相聚集态分类： （１）气固色谱：固定相是固体吸附剂， （２）气液色谱：固定相是涂在担体表面的液体。 2、按过程物理化学原理分类： （１）吸附色谱：利用固体吸附表面对不同组分物理吸附性能的差异达到分离的色谱。 （２）分配色谱：利用不同的组分在两相中有不同的分配系数以达到分离的色谱。 其它：利用离子交换原理的离子交换色谱：利用胶体的电动效应建立的电色谱；利用温度变化发展而来的热色谱等等。 3、按固定相类型分类： （１）柱色谱：固定相装于色谱柱内，填充柱、空心柱、毛细管柱均属此类。 （２）纸色谱：以滤纸为载体， （３）薄膜色谱：固定相为粉末压成的薄漠。 4、按动力学过程原理分类：可分为冲洗法，取代法及迎头法三种。 四、气相色谱法简单分析装置流程是什么？
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气相色谱常识问答(中)
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
十、色谱柱管材料应根据什么原则选择？常用的柱管是由什么材质制成的？ 答：对色谱柱管材质，应按如下要求选择： １、应与固定相、试样、载气不起化学反应。 ２、要易于加工成型。 ３、管内壁应光滑，横截面应均匀呈圆形。一般色谱柱管形状呈Ｕ型或螺旋形，大多由铜、不锈钢，玻璃等材质制成。 十一、新的色谱柱管（铜或不锈钢管）应怎样处理后方能使用？ 答：新柱管应先用稀酸或稀碱（1：1盐酸或氢氧化钠）洗涤，以除去油污等脏垢，而后用自来水冲洗,继而用蒸馏水冲洗至中性，再用干净的空气吹洗并烘干后，即可使用了。 十二、什么叫担体？对担体有哪些要求？ 答：担体是一种多孔性化学惰性固体，在气相色谱中用来支撑固定液。对担体有如下几点要求： １、表面积较大，一般应在0.5－2米/克之间； ２、具有化学惰性和热稳定性； ３、有一定的机械强度，使涂渍和填充过程不引起粉碎； ４、有适当的孔隙结构，利于两相间快速传质； ５、能制成均匀的球状颗粒，利于气相渗透和填充均匀性好； ６、有很好的浸润性，便于固定液的均匀分布。完全满足上述要求的担体是困难的，人们在实践中只能找出性能比较优良的担体。 十三、担体分几类？其特点如何？ 答：通常分为硅藻土和非硅藻土两大类，每一类又有种种小类。 １、硅藻土类型：（１）白色的：表面积小，疏松，质脆，吸附性能小，经适当处理，可分析强极性组分；（２）红色的：有较大的表面积和较好的机械强度，但吸附性较大。 ２、非硅藻土类型： （１）氟担体：表面惰性好，可用来分析高极性和腐蚀性物质，但装柱不易，柱效率低些。 （２）玻璃微球：表面积小，用它做担体柱温可以大大降低，而分离完全且快速。但涂渍困难，柱效低。 （３）多孔性高聚物小球：机械强度高，热稳定性好，吸附性低，耐腐蚀，分离效率高，是一种性能优良的新型色谱固定相。 （４）炭分子筛：中性，表面积大，强度高，祛寿命长，在微量分析上有无比的优越性。 （５）活性炭：可以单独做为
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气相色谱常识问答(下)
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
十八、何谓固体固定相？大体可分为几类？ 答：指直接装填到色谱柱中作为固定相的具有活性的多孔性固体物质。固体固定相大体可分为三类： 第一类是吸附剂。如：分子筛、硅胶、活性炭、氧化铝等； 第二类是高分子聚合物。如国内的ＧＤＸ型高分子多孔微球，国外porapak系列等； 第三类是化学键合固定相。在气相色谱中，通常是将固定液涂敷在载体表面上。采用化学键合固定相分析极性或非极性物质通常都能够得到对称峰，柱效很高，固定相的热稳定性也有所改善。 十九、什么是固定液？对固定液有哪些要求？ 答：一般是一种高沸点的有机物的液膜，通过对不同组份的不同分子间的作用，使组份在色谱柱中得到分离。对气相色谱用的固定液，一般有如下几点要求： １、在操作温度下蒸气压低，热稳定性好，与被分析物理或载气不产生不可逆反应； ２、在操作温度下呈液态，而且粘度愈低愈好。物质在高粘度的固定液中传质速度慢，柱效率因而降低。这决定固定液的最低使用温度； ３、能牢固地附着在载体上，并形成均匀和结构稳定的薄层； ４、被分离的物质必须在其中有一定的溶解度，不然就会很快地被载气带走而不能在两相之间进行分配； ５、对沸点相近而类型不同的物质有分离能力，即保留一种类型化合物的能力大于另一种类型。这种分离能力即是固定液的选择性。 二十、固定液的选择原则有哪些？ 答：根据被分离组分和固定液分子间的相互作用关系，固定液的选择一般根据所谓的“相似性原则”，即固定液的性质与被分离组分之间的某些相似性，如官能团、化学键、极性、某些化学性质等，性质相似时，两种分子间的作用力就强，被分离组分在固定液中的溶解度就大，分配系数大，因而保留时间就长；反之溶解度小，分配系数小，因而能很快流出色谱柱。 下面就不同情况进行讨论： a、分离极性化合物，采用极性固定液。这时样品各组分与固定液分子间作用力主要是定向力和诱导力，各组分出峰次序按极性顺序，极性小的先出峰，极性越大，出峰越慢；
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实验室装修之实验室规划设计
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
实验室装修之实验室规划设计及施工流程重点 一间现代化实验室设立前,需有专业能力的设计公司参与,才能做到功能性兼美观性一体化，首先实验室设立场地的挑选可分为： · 在建的建筑物 · 土建完工，末有人员进驻过的建筑物 · 使用多年地点、格局均符合设立条件的旧建筑物 场地决定后再来就是何配置设计，通常可分为： · 全面性配置设计先决条件是经费充足，场地空间宽敞。就可规划出依性质、类别不同的实验室。如有研发室、品管室、精密仪器室、药品室、高温加热室、前处理室、化学实验室、样品室等。适用于大型企业、研究机构。 · 选择性配置设计：因经费及场地的考虑，无法将全面性设计纳入。因此只能选择适用的产品，功能加以浓缩规划。适用于中小型实验室。 以上因素都确定后，一份实验室设计平面图及规划内容即可绘出，再来就是考虑日后影响施工品质的三大因素： 1. 进水管、排水管施工方式。 2. 实验室总用电量及分配方式。 3. 排气设备风管的路线，风机电机排气量的计算。 进排水管施工方式： 在建的建筑物：需提供设计平面图给建筑师，再依照设计图面所标示位置、距离尺寸，以暗管或吊管方式预留纳入建筑物本体施工。 已完工未进驻或使用多年变更为实验室的场地：因上述两种建筑物之前并不是实验室用途设计，本身进排水管大多不符合使用，因此需找到进排水之来源。以明管或吊管方式施工。 实验室总用电量及分配方式： 在建的建筑物：按设计平面图设立电源总开关箱适当位置。再输送至每间实验室。 已完工未进驻或使用多年变更为实验室的场地：先找出既有的电源总开关加以评估电力是否足够。如有不足，如何增加容量。再依整修或隔间，施工期间以暗管或明管施工。 上述施工方式的总电量。如何去预估呢？首先必需请使用者提供各项仪器设备用电量。如安培数、瓦特数的大小，来设计回路的多寡。 排气设备风管的路线，风机电机排气量的计算： · 在建的建筑物：可规划风管的路线提供给建筑师。讨论设立管道井或以预留洞
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液相色谱仪新技术：微柱液相色谱及输液泵系统
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
微柱技术经历了数十年的发展，从早期的使用不锈钢管的微孔填充柱，发展到使用熔融硅胶毛细管的毛细管填充柱。进入20世纪80年代后期，随着生命科学研究、临床医学研究、新型药物研制、生物工程技术的发展、对产品质量控制和环境监测指标的升级，提供了大量组成复杂样品的分析任务。 为此必须提供具有高效分离能力和高灵敏度检测能力的全新分析方法，并用于微量和痕量组分的分离和检测。 纳米（标度）液相色谱技术和超高压液相色谱技术正是适应上述分析要求，先后于20世纪80年代末期和90年代初期先后提出。他们突破了常规液相色谱仪理论的约束，采用粒径约为1.0μm的粒子填充色谱柱。在实验装置上采用当代的最新技术，用微流路处理器提供纳升数量级微小、稳定的流动相流量，用微芯片制作技术在硅晶片上蚀刻出纳米尺寸的色谱柱管，制造了填充压力高达410MPa（60000psi）的高压输液泵和耐压1030MPa（150000psi）的高压进样阀，实现了前人从未实践过的毛细管液相色谱分离技术。创建了理论塔板数高至20~40万块/m的高柱效，完成了组成复杂生物样品的分离，还实现了与MS的联用。从这些新技术的进展，可充分看到色谱工作者的创造能力。 用于微柱液相色谱仪分析的高压输液泵，其输出流量应当准确，并有良好的重复性。由于输出流量较小，早期曾使用气动放大泵和螺杆注射泵，后经改造常规往复式柱塞泵，使其也可输出低流量流动相。 现多采用小型螺杆注射泵和往复式柱塞泵。往复式柱塞泵由于螺杆注射泵，它具有对大的柱反压的补偿能力，快的流路平衡和稳定性，并可用于梯度洗脱。由于液流的混合有一定的困难，在低流速下柱加压是一个耗费时间的过程，若在梯度洗脱中使用螺杆注射泵，会明显的增加梯度延迟。 当对微柱进行二元、三元、四元梯度洗脱时，使用低压梯度仍是最经济的方法，此时应使用精密时间比例电磁阀。此阀能准确控制每种溶剂的比例，确保不存在渗漏和粘结，使每种低流量溶剂在小体积混合器中彻底混合。当使用高压梯度
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实验室装修的PCR实验室平面图
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
PCR实验室平面图第一部分为平面设计，甲方（使用方）先拿出最根本的功能要求、分布方案，乙方（设计院）、丙方（实验室规划与设计专业公司）与甲方参与实验室建设设计小组，共同讨论，三方共同确认后方进入第二程序。因为传统实验室建筑设计按国家建筑标准，仅是以外型和室内结构为主，并非以实验室功能为主，建筑设计与功能设计脱节。我们公司在这方面就有很多教训。 第二部分为单台功能，单台结构设计，应逐项、逐件、逐层，从整栋大楼、分层、分房间、分单件设计确定，全面细分确认； 第三部分，全部确认后，邀请用户高层领导参与实验室建设演示会，当场表态决策；由甲方请乙方、丙方的项目监理严格监督安装、建筑过程中标准执行情况跟踪实验室建设项目的顺利完工；建设实验室规划与设计和产品招标分为两部分。 一、单台结构功能设计系统 不同专业采用不同实验室专用基础配套装备，系列产品共分五大部分：A、实验台部分；B、仪器台部分；C、功能柜部分；D、仪器设备部分；E、输出系统部分； A、实验台部分 1、实验台的分类： ①实验台按实验室的功能划分为：物理实验台（主要用于电子、电工、物理实验）；化学实验台（主要用于有机、无机化学实验）；生物实验台（主要用于净化无菌实验，如简易解剖台、不锈钢操作台等）； ②按结构划款式分为：MM（由钢制支撑架、基箱、台面、试剂架、连接件、辅件组成）MR（基箱、台面、试剂架、连接件、辅件组成）。 ③按用途可分为：中央实验台、边台实验台、洗涤实验台、试剂架、基箱、实验凳。 2、基箱的分类： 基箱按材质可分为：钢木制基箱、铝木制基箱、全木制基箱。 按制作工艺分为：钢制欧式基箱（即门面板与侧板连接）、钢制美式基箱（即门面板装嵌在基箱内） 按款式可分为：活动式基箱、落地式基箱、悬挂式基箱。其中活动式基箱、悬挂式基箱用于MM款。落地式基箱用于MR款。钢木制基箱是我们公司新开发的产品，侧板、门面板为钢制材质，其它如层板、顶板、抽屉
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STAT3在模式小鼠中对肺癌的抑制作用
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
发现新的抑制癌细胞生长因子STAT3 肺癌是引起死亡的常见癌症之一，由于迄今为止尚未有有效的方法治愈吸烟引起的肺癌，所以该领域的探索是急待加强的。 Beatrice Grabner 教授等人的研究发现在模式小鼠中STAT3具有抑制肺癌的重要作用，该项发现在2015年3月的Nature Communications杂志上发表。 深入研究被激活的信号通路，可以作为靶向**肺癌的新途径，该信号传导通路或许会成为以后潜在的新型**方法。阻断多种癌症（例如白血病，直肠癌）中可以加速癌细胞生长的转录因子STAT3的传导已经变成临床上的重要研究方向。 通过维也纳Ludwig Boltzmann癌症研究所的Grabner教授、Casanova教授及国外的科学家们研究，我们惊奇的发现在模式小鼠中STAT3在抑制肺癌方面十分重要。当阻断了STAT3信号时，肿瘤的恶化速度加速。 b:利用每mm2 肿瘤面积的CD31+ 确定 肿瘤细胞。每个模式小鼠中至少有3个肿瘤区域被分析（每组有4-7个小鼠重复）。结果如图所示： 在肺癌的肿瘤侵袭定量分析，血流参数分析及蛋白质活性的检测方面与奥地利TissueGnostics公司合作，利用TissueFAXS,HistoQuest与TissueQuest软件分别进行。该文章发表在新的Nature Communications杂志上，揭示了依赖阻碍STAT3信号传导以达到治愈癌症的方法的安全性仍需确认，例如加速病情恶化及降低存活率等，因此我们需要对STAT3采取进一步的关注与研究以确定STAT3**方法的安全性。 原文链接： 联系公司：奥地利TissueGnostics GmbH 北京华威中仪科技有限公司 400-898-1980 官网：
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模式生物高通量多维表型研究方法概述
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
摘要： 动物个体内，多数由基因突变与生物活性分子所引发的复杂生理应答机制，无法使用细胞培养模型进行预测，而动物水平研究却进展缓慢。本研究中，我们利用微米分辨率的高通量光学投影层析成像系统，结合高效的大颗粒流式分选系统（Union Biometrica），实现了脊椎动物的整体多维度扫描。系统以前所未有的速度与细节，在三个维度水平，自动获取了半透明斑马鱼幼体数以百计的独特形态特征与复杂表型。通过聚集、量化多种表型特征，我们能够实现同时检测、分类多个生物学进程中的精细变化。我们将这种方法称为体内多维表型研究。为了验证体内多维表型研究方法的巨大作用，我们利用200个独立形态检测参数，对数十种致畸剂（可引起软骨形成异常）效应进行分析，结合致畸剂的已知机制，识别其相似和不同之处。 背景： 针对多种因素引起的形态学变化特征，进行高通量筛选，是现代生物学研究与药物筛选中必不可少的。当前研究中，在细胞学水平高通量筛选（HTS）获得的有效药物，在进一步动物水平研究和临床研究时，结果不尽如人意。即使是最复杂的体外模型，也无法完全展现器官形成的复杂程度与构成等信息。为了克服体外模型在药物筛选等应用中的不足，越来越多的化学药物使用斑马鱼(zebrafish、Danio rerio)个体进行筛选研究。斑马鱼幼体是目前广泛应用于药物筛选的脊椎动物模型。针对斑马鱼的大规模基因水平筛选工作已经开展了数十年，但由于所读取的结果往往无法定量说明或局限在有限的参数记录，因此需要更完善的解决方案。 为了将数百种表型的改变进行定量记录分析，并实现高内涵筛选（HCS），我们应用高通量光学投影层析成像系统（high-throughput optical projection tomography system，OPT），该系统结合高效的大颗粒流式分选系统（Union Biometrica），配合特殊的图像处理算法，能够兼容各种显微镜，从而获得微米级分辨率的3D器官或复杂形态学特征参数。这一技术帮助我们从大量动物样本中快速获得数百种
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实验室中常用的七种通风柜介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
实验室中常用的七种通风柜介绍 变风量通风柜：带有变风量自适用控制系统的智能通风柜，安全高效，环保节能，是主流发展方向的通风柜类别。 顶抽式通风柜：顶抽式通风柜适合有热量产生的场合。特点是结构简单、制造方便。 补风式通风柜：对于有空气调节系统的实验室或洁净实验室，使用补风式的通风柜既能节省能量，同时又不影响室内的气流组织。 活动式通风柜：活动式通风柜常用于通用实验室比如实验大厅，使用木材、塑料或轻金属制作成，可以进行方便的移动。如：实验工作台、水盆通风柜等设备都可随时移动，不用时也可推入邻近的贮藏室。 旁通式通风柜：旁通式通风柜将柜门全闭时，也不会影响到室内的换气量，因此当实验室考虑幅度通风柜排除室内空气时，采用这种通风柜比较理想。 狭缝式通风柜：狭缝式通风柜是在通风柜的顶部和后侧设有排风狭缝。结构比较复杂制作也较麻烦，但是对各种不同工况都能获得良好的效果。 自然通风式通风柜：自然通风式通风柜不能够使用在毒性较高和不产生热量的实验，有的房间在夏季也不宜使用。但是自然通风式通风柜的优点有很多，如：能日夜连续换气且不耗电（经实测室内换气可达6次/h）、没有机械设备构造简单、无噪声和振动、容易保养、造价低廉。
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如何选择电化学反应的电解池
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
以氧还原反应为例，氧还原反应（Oxygen reduction reaction，ORR）是燃料电池空气阴极的主要反应，用来评价催化剂的性能，受到了众多研究者的广泛关注。实验操作过程中，电解池是必不可少的组成部分，对电化学的测试效果也有着影响，这往往被很多研究者所忽视。那么如何选择合适的电解池，就显得尤为重要了。 电解池影响电化学反应的主要因素： 1、电解池的容积，氧还原反应（ORR）需要提供很好的液体层流状态，从而获得均匀的电流分布。从液相传质过程分析来看，在远离电极表面的溶液中，对流作用是主要的传质过程，电极表面附近溶液层中的传质则主要依靠扩散过程。然而在一般情况下很难将这两种传质过程严格区分开来，因为总有一段空间区域是两种传质方式交叉作用的。因此，为了既可以排除电迁移的影响，又能分开扩散传质区和对流传质区，就需要电解液的体积相对较大，从而需要配备较大容积的电解池。当旋转圆盘电极旋转时，可以认为电解池中各位置的电解液浓度是均匀一致的。同时，选择较大的电解池，旋转圆盘电极与电解池池壁相距足够远，液流和电极的运动不受池壁的影响，常用电解池容积以150 mL为宜，容积过小（如50-100 mL）则会对实验结果造成不利影响。 2、电解池的几何形状，电化学电解池的等效电路如图1表示，Ru为工作电极和参比电极溶液间的电阻，工作电极与参比电极距离越小，则电阻越小，Piontelli曾系统研究过参比电极放置位置对电化学测试结果的影响，结果表明，当参比电极在工作电极的正下方且参比电极顶部开口部分靠近工作电极时，测试效果**。但是这种放置位置的设计在实际操作中却不可行，原因是当旋转圆盘工作电极旋转时，会和参比电极产生摩擦力，从而对层流状态造成极大的干扰。Barnartt研究表明当工作电极与参比电极末端的距离为参比电极半径的四倍（即5mm左右）时测试效果**，在这个距离时，因电解质的低导电率或在高电流密度下所产生的IR降可以得到校正。目前电解池常见的几何形状如图2所示
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核酸探针标记的实验过程
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
实验原理 分子生物研究中，最常用的探针即为双链DNA探针，它广泛应用于转基因植物拷贝数的鉴定、临床诊断等方面。双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。 切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的3'羟基末端。同时该酶具有从5'→3'的核酸外切酶活性,能从切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同时又在切口的3'端补上核苷酸,从而使切口沿着DNA链移动,用放射性核苷酸代替原先无放射性的核苷酸，将放射性同位素掺入到合成新链中。最合适的切口平移片段一般为50-500个核苷酸。切口平移反应受几种因素的影响: (a) 产物的比活性取决于[α-32P]dNTP的比活性和模板中核苷酸被置换的程度。(b) DNA酶的用量和E.coli DNA聚合酶Ⅰ的质量会影响产物片段的大小。(c) DNA模板中的抑制物如琼脂糖会抑制酶的活性, 故应使用仔细纯化后的DNA。 实验试剂 (1) 10×切口平移缓冲液: 0.5M/L Tris-Cl (pH7.2)； 0.1M/L MgSO4； 10mM/L DTT； 100ug/ml BSA。 (2) 未标记的dNTP原液：除同位素标记的脱氧三磷酸核苷酸外,其余3种分别溶解于50mM/L Tris·Cl (pH7.5)溶液中,浓度为0.3mM/L。 (3) [α-32P] dCTP或[α-32P]dATP:400 Ci/mM, 10uCi/ul。 (4)E.coli DNA聚合酶Ⅰ：(4单位/ul)：溶于50ug/ml BSA, 1mM/L DTT, 50%甘油，50mM/L Tris·Cl(pH7.5)中。 (5) DNA酶:1mg/ml。 (6) EDTA :200mM/L (pH8.0)。 (7) 10M/L NH4Ac。 实验步骤 (1) 按下列配比混合: 未标记的dNTP 10ul 10×切口平移缓冲液 5ul 待标记的DNA 1ug [α-32 P]dCTP或dATP(70uCi) 7ul E.coli DNA聚合酶 4单位 DAN酶 I 1ul 加水至终体积 50ul (2) 置于15℃水浴60分钟。 (3) 加入5ul EDTA终止反应。 (4) 反应液中加入醋酸铵,使终浓度为0.5M/L, 加入两倍体积预冷无水乙醇沉淀回收DNA探针。 注意事项 1、3H，32P及35S标记的dNTP都可使用于探针标记，但通常使用[α-32 P]-d
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多克隆抗体的制备步骤
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
实验试剂 生理盐水（或PBS） 弗氏完全佐剂（Freund’s complete adjuvant，FCA） 弗氏不完全佐剂（Freund’s incomplete adjuvant， FIA） 二甲苯，酒精棉，脱脂棉，2% NaN3 实验设备 剪刀（剪兔毛用）一把、弯头眼科手术镊子（游离血管用）一把、直头眼科手术剪（剪血管用）一把，手术刀架，手术刀片，注射器（1ml、10ml，25ml）附针头，兔子固定架，灭菌三角烧瓶（200ml）或平皿（直径18cm）、弯头止血钳四把，直头止血钳两把，手术缝合线，塑料放血管，纱布等。 实验材料 1. 免疫原：蛋白或KLH偶联的多肽。每次免疫100-200μg免疫原。 2. 兔子的选择，兔子的重量应在四斤以上，两耳光滑，明显可见耳静、动脉，健康。 实验步骤 1. 免疫 用生理盐水稀释免疫原，然后与相应的佐剂进行1:1混合。抗原和佐剂完全混合形成稳定的乳剂，将该乳剂在兔子双肩周围的皮肤下进行皮下注射和后大腿进行肌肉注射。每个区域大约用1/4的免疫原。这样免疫原可以持久存在从而提高免疫应答。 注： 抗原注射以前需要收集一些正常血清，已备检测抗体时作为阴性对照。待兔子在新环境中稳定，大概需要四天左右时间，可以进行耳动脉取血。取血量约5ml足矣。 免疫用的抗原必须纯化，否则影响抗体的质量。抗原经FCA或FIA充分乳化后才能注射。将抗原液与佐剂等比例混合后，置于混合器上使之剧烈振荡使抗原充分乳化，乳化过程比较费时、费力，但若乳化不充分，会影响免疫的效果，振荡后，1000rpm离心一分钟，如水相和油相不分层即可注射。首次免疫用FCA，以后都用FIA。 免疫方法可采用背部多点注射法。即于家兔脊柱两旁选4-6点皮下注射，每点注0.1ml，间隔2周后再于上述部位选不同点注射（不要选择临近位点，否则溃疡愈合不好）。每次免疫的抗原量约100μg。免疫次数在四五次即可，抗原用量大可以减少次数。 2. 取血 免疫一周后，可以耳动脉取血检测抗体效价。因为起初几次免疫产生的抗体的效价比较低，头两次取血，够检测用即可。在三
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