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肉灌肠中亚硝酸盐的检测方案
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
一、概述 亚硝酸盐在肉类制品中作为发色剂限量使用,让肉制品看起来红红的好看,但是人类食入0.3~0.5克的亚硝酸盐即可引起中毒甚至死亡。由亚硝酸盐引起食物中毒的机率较高,中毒事件也经常发生。 肉灌肠中亚硝酸盐检测可以用离子色谱法和分光光度法,本文主要说明分光光度法。 二、方案介绍 1、测定标准及方法 GB 5009.33-2016,分光光度法 2、所需仪器及试剂 722S可见分光光度计、十分之一电子天平、电炉、水浴锅、常用玻璃仪器等, 饱和硼砂溶液、亚铁氰化钾溶液、乙酸锌溶液、亚硝酸钠标准使用液、氨基苯磺酸溶液、盐酸萘乙二胺溶液等。 3、实验步骤 试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后,在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后,再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料,外标法测得亚硝酸盐含量。具体如下: (1)前期准备 用烧杯盛水并用电炉加热至沸腾,备用(制备70度左右的水); 水浴锅打开电源,让水沸腾,备用; 取出肉灌肠切开,并剁碎,用电子天平称取5g试样置于500 mL容量瓶中,加12.5 mL 饱和硼砂溶液,搅拌均匀,加入70℃左右的水约300 mL,于沸水浴中加热 15 min,取出置冷水浴中冷却,并放置至室温。 (2)提取净化 往样品瓶中加入5 mL 亚铁氰化钾溶液,摇匀,再加入 5 mL 乙酸锌溶液,混匀并振荡提取液,加水至刻度,摇匀,放置30 min,除去上层脂肪,上清液用滤纸过滤,弃去初滤液30mL,滤液备用。 (3)样品测定 吸取40.0 mL 上述滤液于50 mL 带塞比色管中,另吸取0.00 mL、0.20 mL、0.40 mL、0.60 mL、0.80mL、1.00 mL、1.50 mL、2.00 mL、2.50 mL 亚硝酸钠标准使用液(相当于0.0μg、1.0μg、2.0 μg、3.0 μg、4.0 μg、5.0 μg、7.5 μg、10.0 μg、12.5 μg亚硝酸钠),分别置于50 mL 带塞比色管中。 于标准管与试样管中分别加入2 mL 对氨基苯磺酸溶液,混匀,静置3 min~5 min 后各加入1 mL盐酸萘乙二胺溶液,加水至刻度,混匀,静置15 min,用2 cm 比色杯,以零管调节零点
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中药检测项目有哪些?
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
中药包括中药材、中药饮片和中成药,我国药典规定,加强对重金属及有害元素、毒性成分、残留溶剂、真菌毒素及生物安全等检测。中药的检测项目有很多,主要有化学、物理、微生物等方面,检测项目的完备有助于中药的质量保证。本文主要介绍中药化学成分的分析以及微生物检测项目。 一、中药化学成分分析 1、指标性成分定量分析 如多糖、皂苷、儿茶素、三萜类等。 2、马兜铃酸 3、黄曲霉毒素(Aflatoxin B1、B2、G1、G2)、赭曲霉毒素及霉菌毒素等 4、防腐剂(苯甲酸、己二烯酸、去水醋酸)等 5、硫磺(二氧化硫,SO2)及其他漂白剂等 6、矿物质及重金属 ♦人体必须矿物质:钠(Na)、钾(K)、钙(Ca)、镁(Mg)、铁(Fe)、锌(Zn)、磷(P)等 ♦有害重金属分析:砷(As)、铅(Pb)、镉(Cd)、汞(Hg)、铜(Cu)等 7、农药残留 ♦定性分析:有机磷、胺基甲酸盐 ♦定量分析:有机磷、胺基甲酸盐、有机氯 8、类固醇、激素 9、抗生素残留 10、含水量、水溶性浸出物含量、醇溶性浸出物含量、酸不溶性灰份、总灰分、精油含量等。 二、中药微生物检测项目 各种口服药剂、一般外用药剂以及中草药属于非规定无菌之药品,故污染微生物之机会较多,这些药品都必须进行微生物之检验及监控。检验项目包括: 1、规定无菌的药品 ♦无菌试验 ♦抑细菌性及抑真菌性确效试验 2、非规定无菌之药品及中药材(微生物限量试验) 菌落总数、霉菌、酵母菌、大肠菌群、真菌、梭状芽孢杆菌、肠杆菌/革兰氏阴性菌 三、常用中药哪些检验项目经常不合格 1、红花经常染色,一般染色金橙里面会混一些黄沙 2、金银花混有山银花 3、酸枣仁中掺有理枣仁 4、海金沙掺有沙子,用显微镜很容易鉴别出 5、地龙经常总灰分、酸不溶性灰分不合格 6、天竺黄体积比经常不合格 7、川贝母经常掺有小平贝母 8、白芍、白及、黄精经常二氧化硫超标 9、钩藤经常有不带钩的杆子多,而且有很多黑色的钩藤,属于死了的钩藤 四、中药有害物质的检查中必须要检测的项目有哪些 中
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实验室仪器设备采购管理规定
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
概述 实验室采购的东西很多,包括检测设备、仪器硬件、软件、流程性材料(即与检测有关的试剂和消耗材料)和服务以及他们的组合。 为了确保采购过程处于受控状态,保证所采购的产品满足规定的质量要求。因此制定相应的采购管理规定很重要。 一般采购管理需要有相关人员负责,首先是实验室相关部门负责采购的提出,实验室技术负责人负责供应商的评价及采购文件的审核,办公室负责供应商的调查及采购的实施,然后实验室主任或者第一负责人负责采购的批准,进料由相关检测室负责检验。 一、供应商的选择 选择和购买重要的消耗品、供应品,通过ISO9001认证的供应商应优先考虑。检测设备则需有CMA标志。 对提供影响检测质量的重要消耗品和计量服务的供应商,需由办公室负责人对其进行调查,并将调查结果记录于《供应商评价表》,经技术负责人评价后,由主任决定是否列为合格供应商。 供应商评价包括以下内容: 1、被提名供应商的资信能力; 2、供应商的供货业绩; 3、供应商的质量保证能力; 4、价格;交货情况;服务情况等。 对于提供计量服务的供应商除须进行评价外,还应符合以下要求: 1、资格:该项目已通过国家实验室认可或有计量授权。 2、测量能力:其测量不确定度满足校准链的规定要求。 3、溯源性:测量结果能溯源到国际或国家基准。 办公室负责人将合格的供应商登录于《供应商一览表》。 二、采购流程 购买实验室分析仪器或其他供应品时,由相关部门负责人填写《委托采购申请表》,并交技术负责人对其内容进行审核,报主任批准后由办公室负责执行。 1、询价和比价 办公室负责人应向合格供应商询价,比价时要求两家以上的供应商提供价格,选择品质、成本、交货日期及售后服务等符合本单位要求的供应商。若供应品和技术独占市场则不在此限之内。 2、订购 当办公室负责人采购对检测结果有影响的物品或设备时,需向供应商清楚、详细地描述技术要求,包括型式、类别、等级、规格、数量、图纸等信
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色谱基础理论平均速度与速度方程的介绍
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
一、平均速度 色谱又称色层法或层析法,是一种物理化学分析方法,它利用不同溶质(样品)与固定相和流动相之间的作用力(分配、吸附、离子交换等)的差别,当两相做相对移动时,各溶质在两相间进行多次平衡,使各溶质达到相互分离。 也就是说,当样品中某组分进入色谱柱内,将在固定相和流动相中达到一定的分配。流动相总是以一定的速度流动,而固定相则固定不动。那么在流动相中的组分分子将以流动相流速u向前行进,而固定相中的组分分子则和固定相一起停留不动。那么这个组分,它的平均运动速度是多少呢? 组分能够在色谱柱上得到分离,就是说他们在色谱柱上的流出时间不同。我们知道流出时间t = 色谱柱长度L / 组分平均运动速度v。色谱柱长度L对所有组分都是一样的,那么之所以能够被分开,关键就在于不同组分,他们的平均运动速度不同。为什么相同载气条件下,不同组分平均运动速度会不同?这就说出了色谱分离的内因:不同组分在固定相和流动相之间的分配系数K不相同。那么什么是色谱分离的外因?当然是存在流动相与固定相之间的相对运动。 由于不同组分的分配系数K不同,因此平衡状态下,在固定相和流动相中的分子个数比就出现了差异,平均移动速度因此出现了差异,于是他们从色谱柱中流出的时间也就出现了差异了。 由于色谱分离靠的是不同的分配系数,因此我们说色谱分离方法是一种物理分离方法。 二、速度方程 色谱法能够分离不同组分的内因是分配系数K的差异。 什么是分配系数呢?分配系数是物质在两相之间达到平衡时,在两相中浓度的比值。两相之间,并不是专指气体、液体、固体之间呢,我们用汽油萃取水中的碘,水和汽油都是液相,但由于并不混溶,因此也是两相。分配系数是一个重要物理化学参数,与组分在两相中的溶解度密切相关,影响因素除了组分和两相的组成外,还包括温度、压力等。这个压力并不是外界压力,而是组分的分压。在理想气体情况下,其他气体分子的压力对组分在两相中的平衡没有影响。
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锐博生物:Genome Research丨lncRNA在精子发生过程中的关键作用
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
Genome Research丨lncRNA在精子发生过程中发挥重要作用 一直被很多科学家认为是真核生物基因组进化中“垃圾”信息的非编码RNA(ncRNA),既不编码蛋白质,又缺乏生物学功能的遗传学证据,近几年得到了“平反”,越来越多的研究表明ncRNA 在剂量补偿效应(Dosage compensationeffect)、表观遗传调控、细胞周期调控和细胞分化调控等众多生命活动中发挥重要作用,成为遗传学研究热点。 随着高通量测序技术发展,越来越多的lncRNA被证明在睾丸和脑组织中呈现高度特异性表达,这暗示着在精子发生与神经调控两个基础生命学过程中,lncRNA的功能机制具有代表性。 清华大学高冠军实验室于2016年9月1号在Genome Research正式刊发题为《Critical roles of long noncoding RNAs in Drosophila spermatogenesis》的文章。此文章详细阐述了lncRNA在精子发生过程中的重要作用,为揭示“暗物质lncRNA”具有重要生物学功能提供了大量的遗传学证据。 高冠军研究小组选择基因强净化的模式生物果蝇为代表,通过高通量遗传动物模型的建立,鉴定了128个睾丸特异性表达的lncRNA。然后运用优化后的CRISPR技术建立了105个lncRNA基因敲除体。通过观察并分析雄性果蝇精子发生、发育、活力等,发现近1/3的lncRNA基因的缺失会导致精子发育异常甚至完全不育。 图1 剔除研究的睾丸特异性lncRNA的鉴定和选择的流程图。使用生物信息学和在FlyBase中注释的lncRNA的分析的新型lncRNA组合以构建lncRNA起始库。然后,通过睾丸特异性表达筛选和RNA原位杂交,选择128种睾丸特异性lncRNA候选物用于靶向敲除。这些lncRNA位于三个不同的染色体上,包括染色体2的左臂和右臂,染色体3的左臂和右臂和染色体X。 图2 lncRNA突变体导致雄性特异性生育缺陷。 (A)105个lncRNA突变体的生育概况。 (B)删除lncRNA CR44455 / 6导致雄性不育,而CR44455 / 6 - / - 雌性完全能育。 (C)对CR42858 - / - 的雄性和雌性突变果蝇进行定性生育力测定。 删除CR42858大大降低了
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磷酸化蛋白质组鉴定技术路线及经典案例介绍
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
今天,小编跟您聊聊磷酸化蛋白质组鉴定! 蛋白质翻译后修饰(PTMs)几乎参与了细胞所有正常生命活动的过程,并发挥十分重要的调控作用。蛋白修饰已经成为国际上蛋白质研究的一个极其重要的领域,目前研究比较成熟的有磷酸化、乙酰化、糖基化、泛素化等。 蛋白质磷酸化是生物体中最常见、最重要的一种蛋白质翻译后修饰方式,它可以通过激发、调节诸多信号通路进而参与调控生物体的生长、发育、逆境应激、疾病发生等多种生命过程,一直是生物学研究的重点与热点。根据客户需求,金开瑞蛋白质组平台可提供磷酸化蛋白质组全谱鉴定、label-free定量技术服务。 磷酸化蛋白质组全谱鉴定以组织、细胞等较为复杂样本为研究对象,目的在于鉴定样品中发生磷酸化的蛋白质以及相应的磷酸化位点。首先对蛋白样本进行酶解,TiO2或IMAC-Fe或IMAC-Ti富集磷酸化多肽,5600-plus质谱检测,利用得到的质谱谱图与相应数据库搜索比较,从而得到肽段序列结果,同时通过生物信息软件计算出磷酸化位点。对于磷酸化位点鉴定,为了增加定位修饰位点的准确性,金开瑞采用较流行的Ascore算法对发生在各位点的磷酸化修饰做进一步打分评估,从而正确辨别真实修饰位点。 技术路线: 技术特点: ●富集方法特异性高,对低PH溶液、去垢剂、盐类、其它低分子污染物有更高的耐受性,容易与非磷酸化肽段分离; ●通量大,一次可以鉴定1000个以上磷酸化位点。 适用范围: ●已知物种基因组序列、ESTs序列或蛋白质序列全库; ●无其他特别要求。 经典案例: 题目:Identification of tyrosine-phosphorylated proteins associated with lung cancer metastasis using label-free quantitative analyses.(用Label-free定量技术鉴定肺癌转移相关的酪氨酸磷酸化蛋白) 期刊:Journal of proteome research 主要技术:Label-free定量技术 文章摘要:酪氨酸磷酸化(P-酪氨酸)蛋白可参与肺癌的侵袭和转移,但目前已被报道的数量还较少。本文
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微生物学实验室的主要设备介绍
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
(一)净化工作台(Clean Bench) 净化工作台是一种局部层流装置,能在局部形成高洁度的工作环境。它由工作台、过滤器、风机、静压箱和支撑体等组成,采用过滤空气使工作台操作区达到净化除菌的目的。室内空气经预过滤器和高效过滤除尘后以垂直或水平层流状态通过工作台的操作区,由于空气没有涡流,所以,任何一点灰尘或附着在灰尘上的杂菌都能被排除,不易向别处扩散和转移。因此,可使操作区保持无菌状态。 与无菌室和接种箱比较,使用净化工作台具有工作条件好、操作方便、无菌效果可靠、无消毒药剂对人体危害、占用面积小且可移动等优点。如果放在无菌室内使用,无菌效果更好。其缺点是价格昂贵,预过滤器和高效过滤器还需要定期清洗和更换。 (二)微生物发酵罐(Microbial fermentor)进行微生物深层培养的设备统称发酵罐。一个优良的发酵装置应具有严密的结构,良好的液体混和性能,较高的传质、传热速率,同时还应具有配套而又可靠的检测及控制仪表。由于微生物有好氧与厌氧之分,所以其培养装置也相应地分为好氧发酵设备与厌氧发酵设备。对于好氧微生物,发酵罐通常采用通气和搅拌来增加氧的溶解,以满足其代谢需要。根据搅拌方式的不同,好氧发酵设备又可分为机械搅拌式发酵罐和通风搅拌式发酵罐。 机械搅拌式发酵罐是发酵工厂常用类型之一。它是利用机械搅拌器的作用,使空气和发酵液充分混合,促进氧的溶解,以保证供给微生物生长繁殖和代谢所需的溶解氧。比较典型的是通用式发酵罐和自吸式发酵罐。 (三)高压蒸汽灭菌锅(High-Pressure Steam Sterilization Pot) 高压蒸汽灭菌锅是一个密闭的、可以耐受一定压力的双层金属锅。锅底或夹层内盛水,当水在锅内沸腾时由于蒸汽不能逸出,使锅内压力逐渐升高,水的沸点和温度可随之升高,从而达到高温灭菌的目的。一般在0.11MPa的压力下,121℃灭菌20~30min,包括芽孢在内的所有微生物均可被杀死。如果灭菌物品体积较大,蒸汽穿透困难,可以适当提高蒸汽
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利用核酸提取仪进行核酸自动化提取的常见问题分析
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
利用核酸提取仪进行核酸自动化提取的常见问题分析 来源:洛阳吉恩特生物科技有限公司 随着磁珠法核酸提取技术的日益普及,基于磁珠法核酸提取开发的全自动核酸提取仪,因其高通量、自动化、减少操作者与试剂及样本的接触、减少人工操作引起的误差,结果稳定,重复性好等特点使得全自动核酸提取仪越来越被市场所接受。目前市场上基于磁珠法的核酸提取仪大致可分为两类:移液式和磁棒式。 本文着重介绍磁棒式核酸提取仪在实际操作中可能会遇到的问题,及相应的解决方案。 1、 手工提取与上机提取结果存在显著差异 磁棒式核酸提取仪通常采用磁保护套(搅拌套)来转移磁珠、混匀液体,深孔板底部采用加热模块加热深孔板孔内的液体,从而模拟手工操作的流程。手工提取的实验结果只能说明手工操作流程及试剂质量没有问题,转移到仪器上后,要综合考虑。 磁珠法通用的操作流程:裂解、结合、洗涤、洗脱,在手工操作时都可以分步骤实现,而在上机操作时考虑到最大限度避免人工操作,通常会把裂解与结合放在一个孔位内进行,客户一般会采用醇类作为结合液,这样操作不但稀释了裂解液,还影响裂解效率,而且由于孔位内液体温度不断升高,导致醇类挥发影响结合效率。此外,仪器一般采用底部加热模式,孔位内的温度不能以仪器设置温度为标准,不同厂家的仪器之间加热效率也会有所不同,所以单说裂解这一步就需要对上机的体系进行一些优化。 2、 仪器孔位之间提取效率有所差异 磁棒式核酸提取仪通常采用卡片或弹簧钢珠固定96孔深孔板,底部有凹槽形的加热条,在进行有加热条件的实验时,如果深孔板的孔位与底部加热凹槽贴合的不紧密,会直接影响实验结果,这种情况导致孔位间的实验结果不稳定是随机出现的。如果发现某一固定孔位的提取结果总是与其他孔位相差比较大,可以考虑仪器加热模块是否有问题,同时观察该孔位的上游裂解孔位内是否有磁珠残留,可用空白样本检测仪器在孔位间的转移
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粘虫板如何巧诱杀害虫?
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
粘虫板是一种高效环保、防虫治虫、无抗性的新产品、新方法,诱杀技术是利用害虫对颜色的趋性诱杀害虫的新兴的一种物理防治技术。不同种类害虫对不同色彩的敏感性不同。根据害虫的趋色性,制成不同颜色的粘虫板来诱杀蔬菜害虫。 诱杀蔬菜害虫种类 经多年试验,同翅目的粉虱、蚜虫、叶蝉等,双翅目的种蝇、斑潜蝇等及缨翅目的蓟马多种害虫成虫对黄、蓝色具有强烈的趋性,所以防治这些害虫,可以通过悬挂黄色、蓝色粘虫板诱杀。粘虫色板不仅可诱杀蚜虫、飞虱、白粉虱、斑潜蝇、叶蝉、蓟马等小型昆虫,而且对由这些昆虫为传播媒介的作物病毒病也有防治效果。 田间使用方法 (1)应用时间和悬挂方法 从蔬菜苗期和定植期开始使用。用铁丝或绳子带子穿过粘虫板上的两个悬挂孔,将其固定好,将诱虫板两边拉紧垂直悬挂在温室上部。在露地环境里,应使木棍或竹片固定在粘虫板两侧,然后插入地里,固定好。对低矮类蔬菜,应将诱虫板悬挂于距离蔬菜上端15至20公分处。并随作物生长随时调整粘虫板的高度。对趋嫩性很强的白粉虱,悬挂黄板的高度以下沿高出蔬菜植株顶端15公斤的效果为佳;黄板诱集蚜虫的适合高度为32至40公分;诱集斑潜蝇和黄曲条跳甲的适合高度为4至20公分。 (2)根据当地蔬菜害虫发生情况确定放置粘虫板的数量和种类 防治粉虱、蚜虫、斑潜蝇、叶蝉等害虫,刚开始悬挂3至5张黄色粘虫板,以监测虫口密度。防治蓟马、种蝇等害虫,每亩地悬挂24×40cm的蓝色诱虫板20片或12×20cm蓝色诱虫板40片或视害虫为害情况增加诱虫板的数量。当粘虫板上粘着的害虫数量比较多的时候,用钢锯条或木、竹片或刮刀批刀及时将虫体刮掉,这样诱虫板可重复使用,节省开支。 应用注意事项 (1)粘虫板刚开始使用时间应以蔬菜定苗后为佳,这样可以有效地控制蔬菜害虫的繁殖数量和蔓延速度。并要随蔬菜的长高而调整粘虫板的高度。 (2)晴天的诱杀效果明显比阴雨天好。害虫对颜色的趋性在运动时远远大于静止时。粘虫板应与其他综合防治措施配
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云飞粘虫黄板的正确使用方法
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
最近进入害虫防治高峰期,许多种植户纷纷询问自制粘虫黄板的方法,在此小编整理了粘虫黄板的使用注意事项,希望会对农户们有所帮助! 粘虫黄板使用方法: 1、用量:每亩用大规格15-20片,中规格30-40片,小规格60-120片,也可根据虫情发生情况增加或减少。用绳子系住粘虫黄板两角,每15平方米左右用一张。 2、位置:粘虫黄板悬挂的位置不合适,也会导致粘虫效果大打折扣。作物苗定植后即可挂上粘虫黄板,以控制害虫的繁殖数量和蔓延速度,要视粘虫情况定期更换。放置高度作物顶部15-20cm处,可随作物的长高而提升粘虫黄板高度,可将粘虫黄板悬挂于作物之间及害虫最密集的地方。 3、针对不同种类害虫的悬挂高度可采取如下做法:把每个棚的粘虫黄板分成高低不同的两组,其中一组粘虫黄板的高度设为高出栽培作物顶部10厘米以内,以专门诱杀迁飞性较差的粉虱类害虫;另一组粘虫黄板的高度设为高出栽培作物顶部生长点30-40厘米处,以针对迁飞性更强的蚜虫等害虫。 4、不同昆虫的趋色性也不同,粘虫黄板采用稳定的光谱技术,黄板对蚜虫、白粉虱、斑潜蝇、枣红蜘蛛、春尺蛾、金纹细蛾、茹蚊蝇、果蝇、草履蚧、梨径蜂、梨黄粉蚜等蚊类有强力诱杀害虫成虫。蓝板对蓟马、稻飞虱、二化螟、棉蛉虫、茶叶夜蛾捕杀效果出众。防治蓟马的粘虫黄板需要悬挂或用竹竿插在作物基部的近地表处。紫板对白粉蝶有诱杀作用。 自制粘虫黄板并且按照正确的方法使用,不但节省成本、绿色环保,而且防治害虫效果明显,减少了给蔬菜打农药的次数,种植出绿色无公害蔬菜,增产增收!粘虫黄板不仅可以用在蔬菜上,果园、花园及各种农林业都可以使用,用途广泛,简便快捷!
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粘虫黄板在稻田的试验报告
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
稻飞虱是目前影响江西水稻稳产、高产的主要害虫之一。为研究稻飞虱的调査新方法,在江西省植保局的组织安排下,我们进行了不干胶粘虫黄板调查稻飞虱试验。通过试验探索不同虫口密度下粘虫黄板调查与常规调查的有效性、准确性和效率,以及不干胶调査的最简便最有效的调査方法,为用不干胶法调查稻飞虱提供依据。 1 试验环境条件 试验设在万安县芙蓉镇光明村下官、下桥等3个村小组,试验区主要作物为水稻,总面积约2600亩。是县水稻病虫主要调査监测区之一。地势平坦,排灌方便,肥力较好。为历年水稻种植区域,早稻 产量为400-550kg。试验区水稻长势良好,田间稻飞虱95%是白背飞虱,以白背飞虱若虫为主,且有80%达到或超过防治指标。 2 试验方法 试验分准确性(多人同田调査)试验、效率(拍打次数与粘虫数量的关系)试验、与常规病虫监测相结合的定点定期调査试验3种。 粘虫黄板为一般文具商店销售的不干胶纸,规格为A4,依托不干胶纸的是文具商店销售规格为A4大小的写字板。 2.1准确性(多人同田调查)试验 在稻飞虱一至四龄若虫发生高峰期〈本要求在稻飞虱发生初期、中期和高峰期调查3次,因为接受 工作后万安县的稻飞虱已是发生高峰期,所以只调查了一次),分别组织植保专业测报人员(段德康、 郭锦彪、刘佐花〕、农民人员(刘良和、刘辉)、乡植保员(曾慧珍、谢圣权)各二人共6人进行调查, 笔机定10块田为调查田,每人每块田用平跳五点法取样,每点拍査两丛水稻,每丛水稻拍打2次;每亩田每人用一张粘虫黄板调査。每张粘虫黄板记录调査人的姓名、调查田的序号、调査日期,带回室内计数系粘稻飞虱的数量。 2.2效率(拍打次数与粘虫数量的关系)试验 按稻飞虱数量分多、一般、少的3种类型田,每种类型田用法取样,每点随机用不干胶拍査2丛水稻,共调査10丛水稻,每丛水稻拍稻丛茎部3次,每拍1次用1张不干胶调査飞虱。即每丛水稻拍1 次,换1张不干胶,共拍3次,用3张不干胶。在每一张粘虫黄板记录被调査水稻田的
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购买孢子捕捉仪应该注意哪些方面?
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
现代农业的追求绿色环保,这是在以往的掠夺式种植的经验教训之下流行推广的种植方式。种植植物的时候植物病害的发生是不可避免的。在以前,都是靠打农药来治病害的,但是这不仅污染环境破坏生态对可食用的果实也是一种危害,造成农药的残留。在防治病害的过程中,现在推行的农业仪器主要有孢子捕捉仪。在绿色生态农业的前提下孢子捕捉仪的应用领域也越来越广泛。 但是,太多的孢子捕捉仪的出现,日新月异难免不会导致市场的混乱,出现质次价低的产品,质量也无法得到保障。我们应该如何来辨别优质的厂家与商品成了一大难题。 以往的捕捉方法和捕捉器采用涂抹凡士林的载玻片或胶棒作捕捉载体。这两种捕捉载体都不适于连续捕捉。借鉴产孢量测定方法中的粘贴法,本仪器采用透明胶带作为捕捉载体。 透明胶带柔软可弯折,采样长度相对不受限制,适于连续采样。因采样的透明胶带取回室内需以乳酚油作浮载剂将其粘于载玻片上放到显微镜下计数孢子,还因载玻片宽度为26mm,所以采用20mm宽的透明胶带作捕捉带。 为能实现连续孢子捕捉,每一时段空中孢子的数据应记录在捕捉带不同的区域上。同样为便于显微镜下计数,设计将空中孢子一小时的数据记录在捕捉带2mm的长度上,即每小时取样面积为20mm2mm。本仪器为连续7d工作,所以可以计算出捕捉带的最小长度为336mm。 在电路设计上要加线性化处理电路及温湿度补偿电路,或借助于单片机系统,由软件查表等方法进行处理、修正(用软件实现传感器的校正补偿功能可降低仪器功耗)。 河南云飞科技是专业生产销售植保仪器的企业,有着良好的信誉。想了解更多的关于孢子捕捉仪或者其它植保仪器的,可以登录我们的网站,或请来电咨询。我们将竭诚为您服务,帮您找到适合您的产品。
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植物材料RNA的3种提取方法
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
1. 利用RNeasy Plant Mini Kit提取总RNA 1) 于1.5 ml离心管中加入0.5 ml RLT缓冲液和5ul β-巯基乙醇; 2) 称取约100 mg材料,液氮研磨后转移到提取液中,涡旋混匀,56℃,2 min; 3) 加入紫色柱子,23℃, 12000 rpm,离心2 min; 4) 滤液转入一新的1.5 ml离心管中,加入1/2体积的无水乙醇,用枪头混匀,移入粉色柱子,23℃, 12000 rpm,离心15 sec; 5) 弃滤液,加入700 ul RW 1,23℃,12000 rpm,离心15 sec; 6) 将柱子移入一新的2 ml收集管,加入500 ul RPE,23℃, 12000 rpm,离心15 sec; 7) 弃滤液,加入500ul RPE,23℃, 12000 rpm,离心2 min; 8) 加20 ul DEPC处理过的水,室温静置15 min,23℃,12000 rpm,离心1 min; 9) 再分别加入40 ul和20ul DEPC处理过的水,室温静置15 min,23℃,12000 rpm离心1 min; 10) 合并三次收集的RNA,取2ul电泳检测纯度和质量。-20℃短时间保存,或-80℃长期保存。 2. 利用TRIZOL试剂盒提取RNA 1) 于1.5 ml离心管中加入1 ml TRIZOL提取液; 2) 称取约100 mg液氮研磨后的材料,转移到提取液中,混匀,2-8℃,≤12000 g离心10-15 min; 3) 取上清,于15-30℃放置5min,加0.2 ml氯仿,剧烈摇动15 sec, 15-30℃放置2-3min,2-80C, ≤12000 g,离心15 min; 4) 取水相,加等体积异丙醇,15-30℃放置10 min,2-8℃,
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不同种类的孢子捕捉仪使用时该注意哪些问题?
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
当前在对空气中病原菌的动态监测中,应用最多的就是孢子捕捉仪,由于空气中病原菌数量与植物病害的发生有非常密切的关系,因此利用孢子捕捉仪来明确环境因子与空气中病原菌数量之间的动态关系,了解病害发生的初侵染菌量或再侵染菌量,对于认识病害的流行规律和提高病害的预测预报水平有十分重要的作用。 由于孢子捕捉仪对于病害的控制和管理有如此重要的作用,因此现代植保工作中,孢子捕捉仪的应用是越来越多,而为了适应不同监测的需要,孢子捕捉仪又可以分为固定式、车载式、便携式,而对于不同种类的孢子捕捉仪,需要注意的事项也是不一样的。 比如固定式孢子捕捉仪由于是固定在地面上的,因此在安装的时候固定螺栓要牢固,以确保机体稳固;同时还要保证接地装置良好接地;由于其所处的环境是室外,在遇到狂风暴雨天气应及时切断电源,防止雷击;其他需要注意的事项还包括机体装车运输时,严禁斜放、倒置;定期清理进气口的异物;存放地要干燥,严禁强力挤压机体,以防变形等。 车载式孢子捕捉仪和便携式孢子捕捉仪都属于可移动的孢子捕捉仪,因此它们的功能是非常类似的,因此使用注意事项也差不多,由于它采用的是蓄电池供电,因此使用的时候一定要保证蓄电池电压充足,电压不得低于DC12V;同时如果长时间不适用孢子捕捉仪,还应该每个月对蓄电池充电一次,以确保蓄电池寿命;另外孢子捕捉仪的体积较小,携带方便,因此在使用的过程中,还应该注意小心轻放,严禁斜放、倒置。 车载式孢子捕捉仪、便携式孢子捕捉仪和固定式孢子捕捉仪有相同的一个使用注意事项,那就是要保证存放地要干燥,严禁强力挤压机体,以防变形,这一点针对于所有的孢子捕捉仪,都是适用的。总之了解孢子捕捉仪的使用注意事项,就是为了延长孢子捕捉仪的使用寿命,提高其监测的精度,最终的目的都是为了服务于农业生产。
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简述细胞蛋白水平与mRNA丰度间的依赖关系
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
近20年来,高通量技术的发展支持了大规模的基因组、转录组和蛋白质组定量分析。这些数据被用来分析在不同系统和条件下转录组与蛋白质组的定量关系。这些研究有时候会导致一些冲突的结论,尤其是究竟在何种程度上mRNA的量控制了蛋白质的量。 基础生命科学研究和转化生命科学研究的一个核心问题是:基因组信息是如何通过自身的表达来决定表型的。中心法则将DNA、RNA和蛋白质这三种分子紧紧联系在了一起。来源于同一基因座的转录本的量与蛋白的量之间的关系并不简单。蛋白的表达水平除了被转录本的量调控以外,还存在其他许多重要的调控途径。这些途径包括(1)翻译率:翻译率受到mRNA序列的显著影响,比如上游的开放阅读框,内部的核糖体结合位点;(2)翻译率的调控:调控的方式有蛋白结合到转录本上的调控原件,非编码RNA的结合,转录本与核糖体的结合能力;(3)蛋白质的半衰期:泛素化途径的降解或者细胞自噬不依赖于转录本的量;(4)蛋白质合成的延迟:蛋白合成需要时间,因此转录的改变需要在一个短暂的延迟后才能影响蛋白的水平;(5)蛋白的转运:蛋白在空间上被转运出了它所合成的地方。因此直接比较蛋白的丰度与mRNA的丰度是不可取的。 蛋白与mRNA的相互比较有两种不同的形式。一种是(Figure 1A)在不同的个体、条件或者时间点,比较来源于同一个基因的蛋白与mRNA的量,这样做是为了研究mRNA水平的变化在何种程度上影响了蛋白量的变化。另一种(Figure 1B)是比较多个不同的蛋白和与之对应的mRNA的量,这样做是为了研究在何种程度上蛋白水平能反应mRNA的不同。 Figure 1. 不同形式的蛋白与mRNA相互较 Y Liu,A Beyer,R Aebersold. On the Dependency of Cellular Protein Levels on mRNA Abundance. Cell. 技术的进步加深了我们对mRNA与蛋白水平关系的理解。基因组层面的研究需要高精度、高灵敏度和高准确度的技术(Figure 2)。