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制作植物标本的步骤

制作植物标本的步骤

作者:德尔塔 日期:2022-04-21

在野外采集、制作植物标本,是一件很有意义和乐趣的事。春天来了,正好趁此机会去郊外走走看看,享受一下大自然的乐趣。 要采集制作植物标本,需准备植物标本夹和吸水的草纸,标本夹可以自己动手制作,用木条做两片网式架,架上要留有可绑绳索的头,两条木架之间放吸水的草纸,用绳绑好随身携带。 植物标本是植物教学和科研的一个重要手段,植物标本的制作是生物教学的主要内容之一,也是学生必须掌握的技能之一。制作植物标本的五个步骤:采集、压制、上台纸、固定和贴标签。具体制作方法: (一)工具准备:吸水纸、标本夹、采集袋、记录本、号牌、台纸(白色、长40厘米、宽27米、卡纸) (二)标本采集 1、采集标本力求完整。(茎、叶、花、果) 2、采集时记录要详细。 3、及时挂上吊牌。 4、标本装入采集袋。 (三)标本压制 1、修剪:坏的、脏的叶子;叶子易脱落的植物可放在沸水中浸1分钟再晾干。 2、压制:给标本铺上几层吸水纸,用标本夹夹住,通风处晾干。 3、换纸:每天换纸一次,使标本保色。 (四)标本制作 1、整理标本:将干制的标本整理。 2、上台纸:标本平铺在台纸上,调整叶子排布均匀,使同一标本同时看到正面与反面叶的形态。 3、固定:用透明胶粘贴标本:透明胶宽度0.6厘米最漂亮。 4、贴标签:在右下角贴上标签。内容:标本名称、采集地点、采集时间。 河南云飞科技专业生产植物标本盒、昆虫生活史标本盒、昆虫针插标本盒、标本夹等标本制作产品,天然木材,质量保障,标本盒厂家就找河南云飞。 标本盒:www.yflinye.com 标本盒系列:www.nonglin17.com 标本夹:www.hnyfkj.cn

RPA(重组酶聚合酶扩增)技术原理及RPA与LAMP对比

RPA(重组酶聚合酶扩增)技术原理及RPA与LAMP对比

作者:德尔塔 日期:2022-04-21

英国TwistDx公司(前身为ASM科技有限公司)成立于1999年,基于英国剑桥Babraham研究院建立的生物技术公司。该公司通过突破等温DNA扩增,开发的重组酶聚合酶扩增专利技术(RPA),被誉为DNA诊断领域的革命性创新。(http://.uk)                      What is RPA?   概念:重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。RPA技术主要依赖于三种酶:能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链DNA结合蛋白(SSB)和链置换DNA聚合酶。这三种酶的混合物在常温下也有活性,最佳反应温度在37°C左右。   RPA技术原理:   重组酶与引物结合形成的蛋白-DNA复合物,能在双链DNA中寻找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就会发生链交换反应形成并启动DNA合成,对模板上的目标区域进行指数式扩增。被替换的DNA链与SSB结合,防止进一步替换。在这个体系中,由两个相对的引物起始一个合成事件。整个过程进行得非常快,一般可在十分钟之内获得可检出水平的扩增产物。   Who uses RPA?   以此为基础的TwistAmp® 核酸扩增产品,能够在15分钟内进行常温下的单分子核酸检测该技术对硬件设备的要求很低,特别适合用于体外诊断、兽医、食品安全、生物安全、农业等领域。 产品名称 货号 规格 储存 检测方法 TwistAmp Basic TABAS03KIT 96次 -20℃ 终点检测:如凝胶电泳   产品名称 货号 规格 储存 检测方法 TwistAmp exo TAEXO02KIT 96次 -20℃ 实时荧光定量检测   产品名称 货号 规格 储存 检测方法 TwistAmp nfo TANFO02KIT 96次 -20℃ 测流层析试纸检测 RPA技术有哪些特性: RPA的特性: 快速检测 15min进行单分子检测试验 简易包装 稳定冻干形式试剂 无需热循环过程 摆脱任何仪器束缚 便携 设备要求低,贫瘠条件亦能 完成检测 RPA能实现多重化吗 可以。RPA技术支持在同一个管中同时进行多个扩增反应。不过,

教你如何挑选物美价廉的实验室家具

教你如何挑选物美价廉的实验室家具

作者:德尔塔 日期:2022-04-21

实验室无论是新建、装修或改造,都需要购买新的实验室家具,实验室家具有一定的特殊性,它与我们日常生活中所使用的家具不同。挑选实验室家具是一件很费心力的事,特别是对于一些初次购买实验室家具的消费者,由于存在一定程度上的盲目现象,很容易被销售人员误导,从而买到不适合自己实验室的产品。那么怎样才能买到质量好又适合的实验室家具呢? 选购实验室家具时,首先考虑的是厂家的资历,看它做过的实验室案例,可以通过参观厂家之前的实验室案例来做考察,也可以多听听厂家以前的合作者对他们的评价。另外,如果可以的话直接去实验室家具工厂参观一下加工过程是**的。 接下来,在选购实验室家具的时候,一般要注重考虑一下几点: 1、实验室家具设计的合理性:家具的尺寸、规格是否能够满足自己公司的要求,家具结构是否合理、设计是否规范。 2、实验室家具实用性:家具是否实用、是否耐用、是否能承重、是否能达到标准。 3、实验室家具人性化:家具的设计是否能给实验室工作人员在操作中提供方便。 4、实验室家具材质:不同的材质有不同的特点,需结合自己实验室的特点选购不同材质的家具。 5、实验室家具配置:水电气安装配置、其他操作功能的实现等。 挑选到满意的产品以后先不用急着付款,要仔细检查产品细节,查看家具的封边是否平滑,是否存在脱胶、不严实现象;查看金属配件的质量,合页的安装;打开柜门或抽屉闻一闻有没有刺激性气味等等。另外,如果是购买实验台产品,一定要问清楚台面的使用材质,因为台面材质的好坏关系到实验台的使用寿命。 选购实验室家具不要只看价格便宜的,很多客户都选择过便宜的实验室家具,可最后很多因为质量问题,不得不在几个月内重新采购。好的实验室家具可以用到十年或更长时间,未名雷蒙特实验室家具以其过硬的品质得到了市场的充分认可,15年来致力于为客户提供专业的实验室规划设计和实验室家具生产、安装及售后服务一体化服务,是实验室家具定制第一品牌。公

氧化值速测液在测定时常见的问题

氧化值速测液在测定时常见的问题

作者:德尔塔 日期:2022-04-21

氧化值速测液怎么测定? 使用晨尿中段尿滴入,对比色卡说明得出现在的身体情况,同样状况下(如饮食,喝水等情况前后一致时)再做一次尿检,对比色卡,通过颜色区别一周内是否有改善; 氧化值速测液测定流程: 氧化值速测液测定时,可使用晨尿中段尿滴入,对比色卡(色卡可随货赠送)根据色卡上标注的颜色区域从而判定说明并得出现在的身体情况,同样状况下(如饮食,喝水等情况前后一致时)再做一次尿检,对比色卡,通过颜色区别一周内是否有改善; 氧化值速测液在测定时遇到的问题: 1, LPO KIT的商业价值在哪里?    只要与健康、美容有关的行业、公司行号、会员团体、个人均可利用LPO KIT来做为健康、美丽、衰老、老化的指标检测。 2.哪些销售通路可以运用LPO KIT?    传销、直销、会议营销、会场行售、访问行销、见证行销、危机行销、赠品搭赠、服务销售、电视购物、电台销售、目录行销、邮购等通路均适用。 3.哪些行业可以运用LPO KIT?    保健食品、美容保养品、健康器具、运动器材、药品、医院、诊所、健康中心、健诊中心、医学美容、美容院、SPA、休闲度假中心、药局、药房、中医诊所、有机品店、健身中心、健康食疗等行业均可。 4.哪些商品(产品)可以运用LPO KIT?    功能饮用水(电解还原水、氢素水、离子水、能量水)、抗氧化保健食品(维生素C、OPC、SOD)、抗老化化妆品(植物萃取物、抗自由基)、健康器具(远红外线系列、健康用品)等均可适用。 5.LPO KIT如何运用在销售上?    如会员的免费检测、使用前与使用后的比对、产品的搭赠品等。用量大时亦可以直接销售。 6.功能水机如何运用LPO KIT做销售?    1.访问时的免费检测、2.销售时服用功能水前检测一次、服用后再检测一次做比对、3.购买时的赠送品、4.售后服务的配套产品等。 7.功能水机如何做验证行销?   喝了500cc~1000cc的功能水后,约30分钟~2小时之间再检测一次,一般的人均有明显的改善。 8.美容院(沙龙店)、SPA如何运用LPO KI

肝脏胆汁酸失调联合推动肝癌的发生

肝脏胆汁酸失调联合推动肝癌的发生

作者:德尔塔 日期:2022-04-21

胆汁酸全谱分析 胆汁酸是一大类胆烷酸的总称,在脂肪代谢中起着重要作用。胆汁酸的生理功能可概括为:影响胆汁分泌、促进肠道对脂类物质的吸收并影响肠道功能。胆汁酸作为消化液的组成部分之一是由肝合成并随胆汁排入肠内,促进对脂类物质的消化和吸收。主要包括胆酸、鹅去氧胆酸、脱氧胆酸、石胆酸、熊去氧胆酸等及其甘氨酸和牛磺酸结合型。肝分泌到胆汁中的胆汁盐是强有力的乳化剂,胆汁流经小肠上部后,胆汁盐乳化脂肪,助其消化吸收。在乳化脂肪小滴的脂肪酸和甘油酯被小肠下部吸收以后,胆汁盐也被重吸收。它们回到肝并被重新使用,因此,胆汁盐总在肝和小肠间循环。肠道中大量的微生物会对这种肝肠循环产生影响。主要的影响菌类有乳酸菌、双歧杆菌、肠杆菌、拟杆菌和梭状芽孢杆菌。这些菌通过影响宿主胆汁酸的种类和含量,进而对诸如膳食脂肪和脂溶性维生素的吸收,促进脂质吸收,保持肠道屏障功能,信号系统内分泌功能,并能够在一定程度上调节甘油三脂、胆固醇、葡萄糖和能源体内平衡。 背景: 为了研究肝脏内经肠道菌群代谢的胆汁酸的堆积是否会导致肝细胞的持续损伤密集而引发肝纤维化和肝癌的科学假说,我们使用链脲佐菌素结合高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝-肝癌小鼠模型(NASH-HCC),在对非酒精性脂肪肝发展为肝癌过程中肠道细菌变化研究的基础上,我们对肝癌发展过程中肝脏胆汁酸代谢变化及其作用机制进行了进一步的研究。 实验方法: 该模型小鼠在6周时即出现脂肪肝,8周时出现脂肪性肝炎,12周内全部发生肝纤维化,到16 周时开始形成肝癌。另一组小鼠在其高脂饮食中添加离子交换树脂以清除肠道中经细菌代谢的疏水性的胆汁酸。对三种小鼠的血清、肝脏及粪便中的胆汁酸进行靶向定量代谢组学研究。 结果: 肥胖肝癌小鼠血清及肝脏中的牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)、牛磺胆酸(TCA)及甘氨胆酸(GCA)均正常对照组,而与模型组小鼠相比,清除了肠道中经细菌代谢的胆汁酸后,小鼠的肝损伤明显减弱,并且未发

高低温试验箱的正确运输和放置方法

高低温试验箱的正确运输和放置方法

作者:德尔塔 日期:2022-04-21

一、高低温试验箱的搬运及运输     1.搬运时,应抬底脚,不能抓住门把手上施力,更不能在地面上拖拉;     2.箱体最大倾斜角不能超过15度,更不能倒置或横放,否则会损坏压缩机或使压缩机中的冷冻油流入制冷管路,影响制冷,而且易造成压缩机脱簧。     3. 运输过程中,要防止磕碰和剧烈震动,要防止雨淋水浸。 二、放置方法     1.高低温试验箱应安放在远离热源,不受阳光直射的地方,因工作时需要与外界进行热交换,既通过冷凝器向外界散热,外界环境温度越高,散热越慢,增大耗电量,制冷效果差。      2.压缩机应安放在湿度小的地方,由于高低温试验箱外壳,冷凝器和压缩机等均是金属材料,如果空气湿度太大,会使这些部件生锈,缩短高低温试验箱的使用寿命。同时潮湿过热环境,会造成试验箱表面凝露,影响机器性能。     3. 应安放在通风良好的地方,如果高低温试验箱周围堆满杂物,或者靠墙太近,不利于散热会影响制冷效果。     4. 应安放在平坦坚实的地面上,并使压缩机保持水平。这不仅出于安全的需要,而且可使压缩机平稳工作,减少震动和噪音。      5. 不应安放在温度过低的地方。因为温度过低,压缩机启动困难。     6.不应安放在易燃,易爆和有腐蚀性物品的环境中。        文章来源:北京雅士林试验设备有限公司

脾脏、胸腺和淋巴结中单个核细胞分离和培养

脾脏、胸腺和淋巴结中单个核细胞分离和培养

作者:德尔塔 日期:2022-04-21

基本方案 从小鼠脾脏、胸腺和淋巴结制备单个核细胞分离和培养。 实验材料 1.RPMI-5或DMEM-5完全培养基。 2.新鲜分离的小鼠器官:≤6周龄的小鼠胸腺;6周至6个月龄的小鼠脾脏和淋巴结。 3.60mm×15mm培养皿。 4.剪刀和镊子(保存在70%乙醇的烧杯中)。 5.装有19G针头的6ml注射器。 6.200μm尼龙滤网。   实验方法 1.将新鲜分离的器官放入盛有3ml RPMI-5或DMEM-5完全培养基的60mm×15mm培养皿(每种器官一个培养皿)中,用剪刀将器官剪碎。 2.用6ml注射器的活塞将组织块向培养皿底面用力挤压直至仅剩纤维组织。 3.用装有19G针头的6ml注射器将组织悬液反复抽吸数次,以进一步粉碎组织团块。 4.将细胞悬液通过200μm尼龙滤网滤入离心管中。用约4ml完全培养基洗一次培养皿,如需要则重复一次,之后将洗液通过滤网加入离心管中。 5.在Sorvall H-1000B离心机中以1000r/min(200g)离心10min后弃上清(如需要去除红细胞和死细胞,见辅助方案)。用20ml完全培养基将沉淀重悬后离心,再以适量培养基重悬以便计数。 6.如细胞不能立即处理,**的保存细胞活力的方法是将细胞悬液置于冰块中。这种处理也能减少因细胞贴壁引起的细胞损失。   附录: RPMI-5完全培养基: RPMI1640培养基(Life Technologies) 5%FBS, 56℃热灭活1h 10mmol/L HEPES 20μg/ml 硫酸庆大霉素 50μmol/L 2-ME 过滤除菌 PriCells提供产品 1. 各种原代细胞特制基础培养基; 2. 各种原代细胞培养特制添加剂; 3. 原代细胞分离试剂盒; 4. 原代细胞鉴定试剂盒; 5. 原代细胞转染试剂盒; 6. 原代细胞总蛋白质抽提物; 7. 原代细胞总RNA; 8. 原代细胞总DNA;

用包被特异性抗体或抗IgG抗体的免疫磁珠分选、分离、纯化原代细胞的方法

用包被特异性抗体或抗IgG抗体的免疫磁珠分选、分离、纯化原代细胞的方法

作者:德尔塔 日期:2022-04-21

用包被特异性抗体或抗IgG抗体的免疫磁珠分选、分离、纯化原代细胞的方法:   可以在几分钟内从复杂的原代细胞混合物中分离出很高纯度的目的原代细胞。   用包被特异性抗体或抗IgG抗体可以分离出非常纯的原代细胞群体,而且有极好的回收率和存活率。依据细胞频率和标记表达水平的不同,原代细胞的纯度可达95%-99.9%。 基本原理: 已包被用包被特异性抗体磁珠与原代细胞表面相应分子特异性结合,或者抗IgG抗体磁珠与预先已与细胞表面分子特异结合的特异性抗体结合。磁珠携带与之结合的细胞吸附于分离柱/试管上,实现阳性细胞分离或阴性细胞分离。   基本分类: 免疫磁珠法分为阳性细胞分离法和阴性细胞法: 阳性细胞分离法-磁珠结合的细胞就是所要分离获得的细胞。阴性细胞分离法-磁珠结合不需要的细胞,游离于上清液的细胞为所需细胞。 一般而言,阴性细胞分离法比阳性细胞分离法的磁珠用量大。   基本步骤: 1、离心收集待分离细胞,用少量PBE孵育液(0.5%BSA、0.08%EDTA pH7.2 PBS,真空抽滤除菌及液体内气体)充分混悬细胞(0.5ml/1×108细胞),包被特异性抗体磁珠或抗IgG抗体,4°C孵育30分钟。 2、用20倍体积PBE洗细胞一次,再加PBE(0.3ml/1×108细胞)充分混悬细胞后,加入相应二抗包被的超微磁珠,混匀后置8~15°C孵育10~15分钟。 3、将分离柱安装入磁场中,加入0.5ml PBE,在重力作用下自然流尽,以预处理分离柱。 建议: 1、分离细胞全过程在超净台中完成。 2、超微磁珠及微小磁场系统适合于106-107细胞分离。 3、分离柱一般只能一次应用。 4、尽量去除死细胞。 5、细胞悬液加入分离柱中时,应将滴管伸至底壁后加入,避免将细胞悬液沿管壁流入。

Isolation and culture of smooth muscle cell

Isolation and culture of smooth muscle cell

作者:德尔塔 日期:2022-04-21

1.Male Wistar rats of about 250g body wt were anesthetized with ether and were decapitated.   2.Kidneys and thoracic aorta were removed, rinsed with sterile ice-cold phosphate-buffered saline (PBS; 1.5 mmol/L KH2PO4, 2.7 mmol/L Na2HPO4, 153.8 mmol/L NaCl), and placed in PBS on ice.  If renal vascular trees were isolated for cell culture, the following steps were carried out under a laminar flow hood obeying sterile conditions.   3.After complete and deep resection of the renal artery, kidneys were decapsulated and longitudinally bisected, and the medullae were removed. 4.Kidney halves were pressed with their surface against stainless steel grids of 40 and 50 mesh size (420 and 300 m openings, respectively).   5.Renal vascular trees were gently rubbed against the grids and washed with cold isotonic saline.   6.The optimal force, which was exerted on the vessels, represented a compromise between purity and viability, corresponding to high and low force, respectively.   7.By this procedure, renal parenchyma passed through the meshes, while entire renal vascular trees were retained on the grid and could be picked up with fine forceps.   8.Finally, renal vascular trees were extensively washed on a grid of 150 mesh size (100 m openings) with a jet stream of cold isotonic saline.   9.Renal vascular trees were treated with collagenase and transferred into 25 cm2 culture flasks, which contained 1 mL Dulbecco's modified Eagle medium (DMEM) supplemented with 20% fetal bovine serum (FBS), penicillin (100U/mL), and streptomycin (0.1 mg/mL).   10.Culture flasks were coated with collagen

组织源性正常小鼠原代真皮纤维原细胞培养实验方法

组织源性正常小鼠原代真皮纤维原细胞培养实验方法

作者:德尔塔 日期:2022-04-21

一、实验试剂 1、培养基: Primary Cell Medium + 10% FBS + 1% P/S + Primary Cell Supplement 2、冻存液: Primary Cell Medium + 20% FBS + 10% DMSO 3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S 4、染色液: 0.4% Trypan Blue 5、消化液: Isolation of Primary Cell Kit 6、检测试剂:抗小鼠Fibronectin抗体,荧光标记二抗,乙醇丙酮混合液(1:1)   二、实验器械 1、培养皿 2、培养瓶 3、直剪和眼科剪 4、眼科镊 5、玻璃滴管 6、15ml离心管 7、200目网筛   三、实验流程 取材 ↓ 取皮片,削成厚度为0.5mm的皮片 ↓ 皮片浸泡在75%酒精中消毒 ↓ 1 × PBS (pH 7.4 )清洗皮片两遍 ↓ 皮片剪成(3-5)mm×(10-15)mm大小 ↓ 置于消化液中4℃消化过夜 ↓ 剥去表皮,并刮去真皮下的其他组织 ↓ 将组织块剪成1mm3左右 ↓ 加入消化液,37℃消化至消化液浑浊 ↓ 停止消化,悬液过200目网筛 ↓ 收集细胞悬液,800rpm离心5min ↓ 重悬细胞,重复离心一次 ↓ 重悬细胞,Trypan Blue染色计数,以5×105的数量接种于培养瓶中 ↓ 37℃,5%CO2培养   四、实验操作 1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶,置于超静台吹干或45℃烘箱烘干(切记保持无菌),4℃冰箱放置,备用。   2、取材:从小鼠身上取皮片,削成厚度为0.5mm左右的皮片;   3、材料预处理:将皮片浸泡在75%的酒精中消毒;用1 × PBS (pH 7.4 )清洗两遍(每次约5min)以清除血细胞;   4、初步消化:将皮片剪成(3)mm×(10)mm大小,去除皮下组织;将裁剪好的皮块置于消化液中4℃消化过夜;第二天,取出消化好的细胞,用镊子尽可能剥去表皮,并刮去真皮下的其他组织;   5、再次消化:处理好后,将组织块剪成1mm3左右,加入消化液,37℃震荡消化至消化液浑浊(1h左右);   6、中止消化:中止酶反应,悬液过200目网筛; 7、收集重悬细胞:收集细胞悬液,800rpm离心5min;弃上清,用培养基重悬细胞,重复离心一次;   8、细胞密度计数:培养基重悬细胞,0.4% Trypan Blue染色计数,以5×1

正常人外周血白细胞的分离实验方法

正常人外周血白细胞的分离实验方法

作者:德尔塔 日期:2022-04-21

一、自然沉降法  正常人外周血红细胞与白细胞的比例约为6000~1000:1,两类细胞的沉降速度不同,进行正常人外周血白细胞分离。   1、试剂及配制 1)无Ca2+、Mg2+ Hank’s液。 2)含10%~20% 灭活小牛血清Hank’s液。   2、操作方法 1)取静脉血2ml,放入加有抗凝剂的试管中,轻轻混匀。 2)将试管直立静置于室温或37℃温箱中30~60min,待红细胞自然沉降。此时可见试管中的悬液分3层,上层为淡黄色血浆,底层为红细胞,在紧贴红细胞层上有一呈灰白色的白细胞层(正常人外周血白细胞)。 3) 用毛细管吸取位于红细胞层上面的富含白细胞的细胞悬液,移入另一试管中; 4) 加入无Ca2+、Mg2+Hank’s液至离试管口3cm处,混匀,以水平离心机2000r/min 离心10min,弃上清,同法在洗涤两次。 5)沉淀细胞用适量10%~20% 灭活小牛血清的Hank’s液重悬,计数,配成所需的细胞浓度的悬液,一般常用2×106/min。   二、加速红细胞沉降法  利用高分子量的聚合物促使红细胞凝聚成串钱状,从而加速红细胞沉降,使之与白细胞分离。常用的高分子聚合物有明胶、右旋糖酐、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)及甲基纤维素等。   1、试剂及配制 1)3%明胶(粘度为25泊以上):选取优质明胶,用生理盐水配成3%溶液,置沸水浴加热溶解,分装,高压蒸汽灭菌8磅15~20min。 2)6%右旋糖酐(分子量200~400KD):用生理盐水配制。   2、操作方法 1)取抗凝静脉血加入等量3%明胶盐水或6%右旋糖酐溶液中,混匀。 2)将试管直立静置室温或37℃温箱中30~60min,利用明胶与红细胞的粘合作用,促使红细胞快速下沉,而白细胞留在明胶溶液中。 3)用毛细吸管吸取富含白细胞的上层液,移入另一试管中。 4)加入无Ca2+、Mg2+Hank’s液至离试管口3cm处,混匀,以水平离心机2000r/min 离心10min,弃上清,同法在洗涤两次。 5)沉淀细胞用适量10%~20% 灭活小牛血清的Hank’s液重悬,计数,配成所需的细胞浓度的悬液,一般常用2×106/min。   三、正常成人白细胞正常值 1、白细胞数

组织源性正常大鼠原代心肌细胞培养实验方法

组织源性正常大鼠原代心肌细胞培养实验方法

作者:德尔塔 日期:2022-04-21

一、实验试剂 1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement 2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO 3、洗涤液: 1×PBS(pH 7.4)+ 1% P/S 4、染色液: 0.4% Trypan Blue 5、消化液: PriCells Isolation of Primary Cell Kit 6、检测试剂:一抗小鼠抗大鼠α-横纹肌肌动蛋白,二抗FITC标记山羊抗小鼠IgG,乙醇丙酮混合液(1∶1)。 二、实验器械 1、培养皿 2、培养瓶 3、直剪和眼科剪 4、眼科镊 5、200目网筛 6、玻璃滴管 7、烧杯 8、15ml离心管   三、实验流程 取材 ↓ 取心肌组织放入D-Hanks中洗涤3次 ↓ 剪碎至1mm3+消化液(PriCells) ↓ 37℃水浴8min,吸弃上层悬液(非心肌细胞) ↓ 余下组织加消化液(PriCells) 37℃磁力搅拌10min,60r/min ↓ 上层悬液加消化终止液(PriCells) ↓ 余下组织再加消化液(PriCells)继续消化3-5次 ↓ 收集所有混悬液过200目网筛 ↓ 收集滤液1000RPM/10min ↓ 去上清,收集沉淀,2ml培养基重悬 ↓ 染色计数 四、实验操作 1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶,置于超静台吹干或45℃烘箱烘干(切记保持无菌),4℃冰箱放置,备用。   2、取材:出生1—3天幼鼠。   3、材料预处理:将获取的心脏放入含有1% P/S的1×PBS(pH 7.4)中,剪去心房,反复洗涤,至心室内无血渍,洗涤液澄清为止。   4、消化:将心室肌用眼科剪剪成1mm3大小组织块,加入消化液10ml,37℃水浴8min后,吸取上层混悬液遗弃;余下组织加入消化液10ml,37℃水浴并用磁力搅拌器搅拌10min;吸取上层混悬液,终止反应;剩余沉淀物再加消化液消化3-5次,直至组织块完全消化。   5、终止消化:按1∶1加入消化终止液,中止酶反应。   6、收集重悬细胞:收集中止后的消化液于离心管中,1000 rpm,离心10 min,弃去上清,加入培养液重悬,染色计数细胞。   7、培养细胞密度:调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。   8、培养:放置于37℃,5% CO2培养箱中。   五、细胞鉴定 1、显微鉴定:接种后

组织源性原代细胞培养实验室组建的基本要求

组织源性原代细胞培养实验室组建的基本要求

作者:德尔塔 日期:2022-04-21

一、实验室设计 1、细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。   2、细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。   3、细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于一室,为10万级洁净环境的洁净室。而洗刷消毒工作设在洁净室外,避免物品污染洁净室内环境。细胞洁净室需要一个空调系统并对外界保持一定的正压。   4、解剖实验室主要用于对器官组织的分离,需要有无菌操作台、解剖显微镜、各种手术器材等。   二、实验室设备 1、超净工作台/生物安全柜 细胞培养需要无菌要求高的环境,在进行操作细胞的实验时,需要在100级的空气下进行,那我们就需要购买能提供百级洁净度的超净工作台或生物安全柜了。 对绝大多数实验来说,超净工作台已经可以完全满足实验员的操作需要。至于超净台的尺寸,要看实验室的大小以及人员的多少来确定,是买单人的还是双人的,是买单面的还是双面的,以及买几台等等。如果操作的实验具有生物危险性,则应选择较之超净台更加高级的生物安全柜。安全柜和超净台在使用上没有多大区别,但是安全柜对人员具有保护,适用于那些对人体有害的病毒或细胞细菌等实验。需要说明的是,超净台或安全柜的摆放应当避开房门,空调等扰动附近气流的地方。   2、二氧化碳培养箱 细胞培养所用的缓冲体系是碳酸氢钠+HEPES体系,所以需要二氧化碳提供缓冲能力维持pH。这时我们就需要一个二氧化碳培养箱来对细胞进行培养。并且由于二氧化碳培养箱通常不具有制冷压缩机,所以需要用户确定其细胞房内在夏天也有全天候的空调制冷,否则会造成箱内温度超标。另外二氧化碳培养箱也分为气套式和水套式,所谓的气套式就是直接的电热丝加热,箱体升温较快,但是温度精度及保温效果会稍差;而水套式则利用浸泡在水中的电热丝加热包裹在箱体内胆外的水套来达到控温的

孢子捕捉仪日常使用中如何进行保养?

孢子捕捉仪日常使用中如何进行保养?

作者:德尔塔 日期:2022-04-21

农业是人类社会和经济发展的基础,在全球人口逐年增长的形势下,可持续农业成为世界农业发展的趋势。而植物病害是制约农业可持续发展的一大因素,是农业生产中存在的一个严重威胁。要想防治病害,就要做到对症下药,如果可以预测和预知植物病害的发生,我们就可以提前做好准备应对病害。为此河南云飞科技发展有限公司研制并生产了孢子捕捉仪。孢子捕捉仪是专门为收集随空气流动、传染的病毒病原菌孢子及花粉尘粒而研制的。孢子捕捉仪目前已经成了各大植保部门采购的必须产品,那么在日常使用过程中应该如何保养孢子捕捉仪呢,下面详细介绍一下。 1、植物病害发生最频繁的时期是夏天,夏天自然也是孢子捕捉仪使用的高峰期。不过夏天容易出现雷电天气,所以如果孢子捕捉仪安装在雷雨区的话,建议必须装上避雷装置,这样才能维护孢子捕捉仪的使用寿命。 2、其次孢子捕捉仪安装的时候也要远离易燃、易爆、腐蚀性的物品,以免对仪器造成损害。 3、当孢子捕捉仪出现问题故障的时候,如果不是专业的维修人员,一定不要自己随意拆卸机器,以免发生危险。就算是有相关经验的人员进行维修,也一定要切断电源再进行检查,来保证安全。 4、孢子捕捉仪是专门用于检测病害孢子存量及其扩散动态,为预测和预防病害流行、传染提供可靠数据,不可作为它用。 上面这些内容就是孢子捕捉仪的保养事项,如果好好保养孢子捕捉仪,不仅可以极大的提高孢子捕捉的效率,也可以延长它的使用寿命。河南云飞科技是专业生产销售植保仪器的企业,有着良好的信誉。想了解更多的关于孢子捕捉仪或者其它植保仪器的,可以登录我们的网站,或请来电咨询。我们将竭诚为您服务,帮您找到适合您的产品。

农业物联网解决方案的组成部分介绍

农业物联网解决方案的组成部分介绍

作者:德尔塔 日期:2022-04-21

农业物联网解决方案按照其应用领域划分,可以分为农业物联网解决方案和养殖生产物联网解决方案两个类别,下面来分别说说农业物联网解决方案是由哪些系统和平台组成的? 一、农业物联网解决方案主要包括以下部分: 1)环境监测系统:空气;土壤温湿度;光照;CO2空气传感器 2)通信控制系统:无线网关;中继;路由器 3)设备控制系统:浇灌系统;通风,遮阳;加湿;无线智能插座 4)视频监控,手持终端、进程大屏幕:智能终端,平板,电脑 5)应用管理平台:智能感知、智能预警、智能决策、智能分析、专家指导。 二、养殖生产物联网解决方案要包括以下部分: 1)环境监测系统:空气温湿度;光照;CO2空气传感器 2)通信控制系统:无线网关;中继;路由器 3)设备控制系统:通风,遮阳;加湿,无线智能插座 4)视频监控安放系统,手持终端、进程大屏幕:无线监控系统,偷盗安防系统智能终端,平板,电脑 6)应用管理平台:智能感知、智能预警、智能决策、智能诊疗、专家指导。 农业物联网是农业生产的高级阶段,是集新兴的互联网、移动互联网、云计算和物联网技术为一体,农业物联网解决方案依托部署在农业生产现场的各种传感节点(环境温湿度、土壤水分、二氧化碳、图像等)和无线通信网络实现农业生产环境的智能感知、智能预警、智能决策、智能分析、专家在线指导,为农业生产提供精准化种植、可视化管理、智能化决策。