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如何从香蕉中提取DNA?
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
提取香蕉DNA您需要准备什么工具? 香蕉、盐、温水、洗手液、搅拌机、牙签、滤网、玻璃罐、擦酒 刀 提取香蕉中的DNA你都需要点什么呢? 用刀将香蕉切成小块,露出更多的细胞。 将香蕉片放入搅拌器中,加入一茶匙盐,然后用温水稍微覆盖混合物。 盐将帮助DNA在糖化过程中保持在一起。 在搅拌机中混合5至10秒钟,以确保混合物不会太粘。 通过过滤器将混合物倒入玻璃罐中。 您希望罐子装满一半。 加入约2茶匙液体肥皂,然后轻轻搅拌混合物。 搅拌时,应尽量不要产生气泡。 肥皂有助于分解细胞膜以释放DNA。 小心地将非常冷的可擦酒精倒在玻璃杯的顶部附近停住的一侧。 等待5分钟,以使DNA从溶液中分离出来。 用牙签提取漂浮在表面的DNA,这将是漫长而严格的。 实验注意事项: 倒入酒精时,请确保形成两个独立的层(最底层为香蕉混合物,最上层为酒精)。 提取DNA时,请缓慢扭转牙签。 确保仅从顶层除去DNA。 请尝试使用其他食物(例如洋葱或鸡肝)再次重复该实验。 DNA提取工艺说明: 捣烂香蕉会暴露出更大的表面积,可从中提取DNA。 加入液体肥皂有助于分解细胞膜以释放DNA。 过滤步骤(通过过滤器倒入混合物)可以收集DNA和其他细胞物质。 沉淀步骤(将冷酒精倒入玻璃杯的侧面)使DNA与其他细胞物质分离。 最后,通过用牙签提取从溶液中除去DNA。 什么是DNA? DNA是包含遗传信息的生物分子。它是组织成染色体的核酸。 DNA中的遗传密码提供了蛋白质生产和生命繁殖所需的所有成分的说明。 在哪里找到DNA ? 可以在我们细胞的细胞核中找到DNA。称为线粒体的细胞器也产生自己的DNA。 什么构成DNA? DNA由长核苷酸链组成。 DNA的形状如何? DNA通常以扭曲的双螺旋形状的双链分子形式存在。 DNA在遗传中的作用是什么? 基因在减数分裂过程中是通过DNA复制而遗传的。我们一半的染色体是从母亲那里遗传的,一半是从父亲那里继承
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缩合剂Condensing agent
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
缩合剂Condensing agent 缩合剂Condensing agent是指将在缩合反应中加入的助剂。 通常存在催化助剂和催化助剂,其可以与在缩合过程中产生的分离的原子或原子团结合。 Condensing agent refers to an adjuvant which would be added in the condensation reaction. Generally there are catalytic adjuvants and catalytic adjuvants which can combine with the isolated atom or group of atoms generated during the process of condensation. 缩合剂的技术应用: 缩合剂是可以与DNA强烈相互作用的成分之一,可以预期在DNA纳米结构中引起实质性的结构变化。 DNA缩合剂通过多种机制(包括但不限于体积排阻)来压缩双链DNA。 以下是常用的缩合剂及配套试剂: 碳二亚胺类别的缩合剂 产品编号 中英文产品名 CAS号 化学结构式 JH0667 二环己基碳二亚胺 N,N'-Dicyclohexylcarbodiimide, DCC, 99% 538-75-0 JH0666 N,N'-二异丙基碳二亚胺 N,N'-Diisopropylcarbodiimide, DIC, 99% 693-13-0 JH0630 N-(3-二甲氨基丙基)-N'-乙基碳二亚胺盐酸盐N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimide hydrochloride, EDC.HCl, 99% 25952-53-8 JT5913 4,5-二氰基咪唑 4,5-Dicyanoimidazole, DCI, 1122-28-7 JH0650 N,N'-羰基二咪唑 N,N'-Carbonyldiimidazole , CDI, 530-62-1 JH0657 N-Hydroxysuccinimide N-羟基丁二酰亚胺 6066-82-6 SS3930 N-Hydroxysulfosuccinimidesodiumsalt N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐 106627-54-7 磷正离子类别的缩合剂 产品编号 产品名称 CAS 化学结构式 JH0677 1H-Benzotriazo
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史上最全缓冲液的配制方法:
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
试验中常用的不常用的缓冲液的配置方法都可在这边查资料了: 三羟甲基氨基甲烷缓冲液的配制的配制(PH值值8.0):量称量取三羟甲基氨基甲烷粉末12.14g,量取无菌无酶水800ml,进行搅拌溶解,后稀释至1000ml,用6mol/L浓度的盐酸溶液调节缓冲液的配制PH值值至8.0。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液的配制的配制(PH值8.0): 量称量取氯化钙0.294g,量取0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解,用1mol/L盐酸溶液调节PH值值至8.1,量取无霉无菌处理水稀释至100ml。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液的配制(PH值9.0): 称量取三羟甲基氨基甲烷6.06g,量取盐酸赖氨酸3.65g,氯化钠5.8g,乙二胺四醋酸二钠0.37g,再量取无霉无菌处理水均匀搅拌进行使成1000ml,调节PH值值至9.0。 乌洛托品缓冲液的配制:称量取乌洛托品75g,量取无霉无菌处理水均匀搅拌进行溶解后,量取浓氨溶液4.2ml,再用水稀释至250ml。 巴比妥缓冲液的配制(PH值7.4):称量取巴比妥钠4.42g,量取无霉无菌处理水使溶解并稀释至400ml,用2mol/L盐酸溶液调节PH值值至7.4,过滤。 巴比妥缓冲液的配制(PH值8.6):称量取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g,量取无霉无菌处理水使溶解成2000ml。 甘氨酸–盐酸缓冲液(0.05mol/L)缓冲液的配制:取若干毫升0.2 mol/L甘氨酸和若干毫升0.2 mol/L HCI,再无菌处理水稀释至200毫升,PH值值根据需求调节。(如PH值2.0时,甘氨酸溶液50ml,hcl溶液44ml) 邻苯二甲酸–盐酸缓冲液(0.05 mol/L) 的配制:取若干毫升0.2 mol/L甘氨酸和若干毫升0.2 mol/L HCI,再量取无菌处理水稀释至200毫升。 巴比妥-氯化钠缓冲液的配制(PH值7.8):称量取巴比妥钠5.05g,量取氯化钠3.7g及水适量使溶解,另称量取明胶0.5g量取无霉无菌处理水适量,量取热溶解后并入上述溶液中。然后用0.2mol/L盐酸溶液调节PH值值至7.8,再用水稀释至500ml。 甲酸钠缓冲液的配制(PH值3.3):称量取2mol/L甲酸溶液25ml,量取酚酞指示液1滴
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电泳有哪些应用
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
电泳有哪些应用?电在生物技术中的作用与它在其他技术中的作用同样重要,电正在通过许多微妙而有趣的方式应用于的科学领域中。 电泳是生物化学中最为广泛的一种技术,电泳是指使用电流来操纵蛋白质分子以用于一系列生物医学研究、诊断和制造目的实验过程。 电泳过程的工作机理是什么? 有机分子通常带有正电荷或负电荷,这会使它们对电流作出响应。带正电荷的分子向电场的负极迁移,带负电荷的分子向正极迁移。电荷较大的分子在施加电荷时趋于更快地移动,并传播的更远。但是,它们也会因相互摩擦而减慢运动速率,而摩擦又受分子的大小和形状以及测试所用介质的影响。通过控制电流和测试介质提供的摩擦力,科研人员可以创造条件来有效分离生物分子,从而可以对它们进行分离和研究。它也使研究人员可以观察电流对分子的影响,从而识别出分子之间的差异。电泳实验室一个科研非常实用的工具之一,在一系列的实验和生物医学中均有应用,但其中有一些特别值得注意。 电泳在DNA分析实验中的应用 电泳的一种主要的应用途径就是鉴定和研究DNA和DNA片段。 DNA以其负电荷的一致性而著称,这意味着电流向DNA的任何部分施加大致相等的力,在这种压力下,越来越大的DNA片段开始分离,因为它们会受到测试介质摩擦的不同影响。当除去电流时,通常是琼脂糖凝胶或丙烯酰胺凝胶的介质会将分离的片段“冻结”在适当的位置,从而可以高分辨率对其进行检查。通常将染色剂(如溴化乙锭)添加到凝胶中,以使其更易于查看和解释结果。 电泳可以促使蛋白质和抗体相互作用 电泳的另一种常见形式是免疫电泳,它可以分析某些特定蛋白质的存在展现和行为。许多医学情况下,包括多发性硬化症,肾脏疾病以及某些癌症,都会导致异常的蛋白质分子产生。通过对尿液、血液样本进行电泳实验,观察这些蛋白与正常蛋白质数量和类型的差异,达到检测这些蛋白质。免疫电泳还可用于检测被称之为抗体的特定蛋白质,称为免疫球蛋白。这些是人体免疫系统
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如何制作1M Tris-HCl缓冲液(pH 8.0)
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
Tris-HCl缓冲溶液基本介绍 三(羟甲基)氨基甲烷盐酸盐(Tris-HCl)是常用实验常用的缓冲溶液,Tris-HCl在分子生物学中的主要作用是控制溶液的酸度和渗透压。Tris hcl缓冲液的基本物理特性,Tris-HCl通常是裂解缓冲液的主要成分,该溶液的pH最通常是在7.0至8.0之间。 1 M Tris-HCl缓冲液的使用方法pH 8.0 称出12.11 g Tris,然后加入100 mL Duran瓶中。 量出80毫升蒸馏水,然后加到Duran瓶中。 添加磁力跳蚤并将其放在磁力搅拌板上以混合溶液。 将pH计添加到溶液中以观察pH。 使用巴斯德慢慢添加浓盐酸(HCl)溶液 用移液管将pH降至8.0或其他所需的pH值,注意不要一次性添加过多,因为pH值的变化会滞后。 达到所需的pH值后,使用蒸馏水稀释即可。 要灭菌,在液体循环中高压灭菌溶液(在15 psi下20分钟)。 1 M Tris-HCl pH 8.0缓冲溶液的存储 在室温(+ 15oC – + 25oC)下储存1 M Tris-HCl pH 8.0溶液。 Tris-HCl缓冲液的安全主要事项 Tris碱未分类为有害物质,但是在pH调节步骤中使用HCl时要小心。 浓盐酸溶液是一种腐蚀性很强的酸。 使用前请务必阅读材料安全数据表。
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如何配制TAE缓冲液
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
如何配制TAE缓冲液 1.TAE缓冲液简介 TAE是非常常见的电泳缓冲液之一,用于DNA的琼脂糖凝胶分析。 TAE缓冲液包含有Tris,乙酸和EDTA。 Tris-acetate提供导电性并可以保持pH值。 TAE缓冲液中的EDTA通过螯合二价阳离子(Ca2 +,Mg2 +)来抑制金属依赖性核酸酶,从而在运行中保护DNA免受核酸酶的影响。 TAE缓冲液的缓冲能力低于TBE,因此应避免将其用于长时间和重复的电泳。 TAE缓冲液适用于需要使用DNA修饰酶修饰凝胶洗脱的DNA片段的应用, 在这种情况下,应避免使用TBE缓冲液,因为TBE缓冲液的硼酸盐会抑制许多酶(例如DNA连接酶)。 配制TAE缓冲液需要的材料 试剂种类:Tris碱(C4H11NO3,分子量:121.14)、冰醋酸(CH3COOH,分子量:60.05)、0.5 M EDTA储备溶液(pH 8.0)、去离子水/ Milli-Q水。 器具:一次性量筒、锥形烧瓶/烧杯、磁力搅拌器。 50X TAE缓冲液(原液)的组成 2.0 M醋酸三乙酸 0.05 M EDTA pH 8.2 – 8.4(在25°C下) 1X TAE缓冲液的组成(工作浓度) 40毫米醋酸三乙酸 1毫米EDTA pH 8.2 – 8.4(在25°C下) TAE缓冲液的制备 配制步骤1: 称量出242克Tris碱,并将其转移至2 L烧杯/锥形烧瓶中,加入750 ml去离子水/ Milli-Q水,混合直至所有Tris碱完全溶解。 配制注意事项:可以使用玻璃移液器手动摇动以混合成分。磁力搅拌器使溶解过程自动化且方便。 配制步骤2: 加入100 ml的0.5 M EDTA溶液和57.1 ml的冰醋酸,再次混合溶液,如果需要可将pH调节至8.3。 注意事项:由于pH值取决于温度,因此我们建议在室温(25°C)下调节溶液的pH值。 步骤3: 用去离子水/ Milli-Q水将溶液体积调节至1000 ml,再次混合溶液。 可选:可以过滤溶液以除去所有不溶的物质。 步骤4: 通过高压灭菌(液体循环中从121-124°C在15磅/平方英寸(psi)下20分钟)灭菌溶液。 可以通过0.22μ的过滤器对溶液进行灭菌。过滤除菌可去除所有大于0.22μ的
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分子生物学试剂(简介,概念,常用试剂)
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
分子生物学试剂简介: 分子学生物试剂是细胞内活性分析所需的物质,通常在样品制备过程中使用,高质量的混合物可以有效地处理细胞成分,从而提高显微镜观察的可行性。 分子生物学概念: 分子生物学是生物科学的一个分支,涉及细胞各种系统中生物分子之间的生物学活性的分子基础,包括DNA,RNA,蛋白质及其生物合成之间的相互作用以及这些相互作用的调控。分子生物学过程使用的试剂也可以统称为为分子试剂。以下是以下常用分子缓冲液试剂介绍: 常用的分子学生物试剂(去离子水溶液试剂)方法介绍: 1mol/L亚精胺(Spermidine)溶液: 将亚精胺2.55g溶解于足量的去离子水中,最终溶解体积为10ml,然后分装成易于存贮的容量后存于-20℃条件下。 1mol/L精胺(Spermine)溶液:溶解3.48g精胺于足量的去离子去离子水中,使终体积为10ml,分装成小份贮存于-20℃条件下。 10mol/L乙酸胺(ammonium acetate)溶液:将77.1g乙酸胺溶解于去离子水中,加去离子水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜或针式滤器过滤除菌。 10mg/ml牛血清蛋白(BSA)溶液:加100mg的牛血清蛋白(第五组份或分子生物学试剂级,无DNA酶)于9.5ml去离子水中(为减少变性, 必须将牛血清白蛋白加入去离子水中,而不是将去离子水加入蛋白),容器盖盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加去离子水定容至10ml,然后分装成小份贮存于-20℃条件下。 1mol/L二硫苏糖醇(DTT)溶液:在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml去离子水,按照存储条件分装成所需规格贮存于-20℃条件下,或量取100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加0.65ml的去离子水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。 8mol/L乙酸钾(potassium acetate)溶液:溶解78.5g乙酸钾于足量的去离子水中,加去离子水定容至100ml。 1mol/L氯化钾(KCl):溶解7.46g氯化钾于足量的去离子水中,加去离子水定容至100ml。 3mol/L乙酸钠(sodium acetate):溶解40.8g的三去离子水乙酸钠于约9
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如何配制MOPS缓冲液
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
如何配制MOPS缓冲液 MOPS是MOPS缓冲液中缓冲化合物的简称,MOPS中文全称是3-(N-吗啉代)丙烷磺酸,pKa为7.20,是许多需要中性pH的生物系统的良好缓冲剂,HEPES是化学上相似的pH缓冲化合物。 1、10x MOPS缓冲液配制的原料 83.7克MOPS;分子量209.3 g / mol 13.6克醋酸钠,三水合物; MW 136.1 g / mol(注意:无水NaAc仅82 g / mol或8.2g) 3.7克EDTA,二水合二钠; MW 372.24 g / mol(再次检查所储存盐的MW) 2、MOPS缓冲液的配置步骤 加入800毫升无核酸酶的蒸馏水;混合溶解; 用NaOH调节至pH 7(在无核酸酶的蒸馏水中制备); 加去离子水至1000毫升的最终体积。 3、MOPS缓冲液的注意事项 过滤消毒或高压灭菌 室温保存 避光、如果溶液较暗(黄色就可以),请勿使用。 4、最终浓度为10x 400 mM MOPS(缓冲) 100毫米NaAc 10 mM EDTA(Mg2 +螯合抑制核酸酶) 5、MOPS缓冲液的稳定性 与通常的看法相反,MOPS缓冲液具有足够的热稳定性,可以进行高压灭菌。溶液将变为黄色,但这不会影响其缓冲能力。例如:Farrell RNA方法,稻草色的缓冲液很好,但不要使用较深的缓冲液。 6、MOPS缓冲液的应用领域 RNA琼脂糖凝胶 NuPAGE电泳 bis-Tris SDS-PAGE
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4大类常用生物类缓冲液配制方法
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
一、通用缓冲液 0.5 M EDTA缓冲液,pH 8:适用于500 mL 将93.05 g Na2•EDTA•2H2O(二水合二钠)重悬于约400 mL 双蒸水(ddH2O)中 添加约9 g固体NaOH 所有NaOH溶解后,用10 N NaOH缓慢调节pH值 用双蒸水(ddH2O)将体积调至500 mL 注意:EDTA在pH达到8之前不会完全溶解。 1 M HEPES缓冲液:1 L 将238.3 g HEPES(游离酸)溶于800 mL 双蒸水(ddH2O) 用10 N NaOH将pH调节至所需值 用双蒸水(ddH2O)将体积调至1 L 50万MES缓冲液:1升 将97.6 g MES(游离酸)溶于800 mL 双蒸水(ddH2O) 用10 N NaOH将pH调节至所需值 用双蒸水(ddH2O)将体积调至1 L 1 M MOPS缓冲液:用于1 L 将209.3 g MOPS(游离酸)溶于800 mL 双蒸水(ddH2O) 用10 N NaOH将pH调节至所需值 用双蒸水(ddH2O)将体积调至1 L 5 M NaCl溶液:用于1 L 将292.2 g NaCl溶解在1 L 双蒸水(ddH2O)的最终体积中 10 M NaOH(= 10 N NaOH):500 mL 将200 g NaOH溶解在最终体积为500 mL 双蒸水(ddH2O)中 1 M Tris缓冲液:1 L 将121.1 g Tris碱溶于800 mL 双蒸水(ddH2O) 用浓盐酸调节pH至所需值 用双蒸水(ddH2O)将体积调至1 L 琼脂糖凝胶电泳缓冲液50x TAE:1 L 将242.2 g Tris碱溶于约600 mL的双蒸水(ddH2O) 缓慢加入57.1 mL冰醋酸 加入100 mL 0.5 M EDTA,pH 8 用双蒸水(ddH2O)将体积调至1 L 6x DNA上样缓冲液:100 mL 在100 mL量筒中称取60 g甘油 加入12 mL 0.5 M EDTA,pH 8 添加10毫克溴酚蓝 用双蒸水(ddH2O)将体积调至100 mL 10x DNA上样缓冲液:100 mL 在100 mL量筒中测量20 mL 50x TAE 添加40克蔗糖 添加10毫克溴酚蓝 用双蒸水(ddH2O)将体积调至100 mL SDS-PAGE缓冲液1.5 M Tris,pH 8.8(用于分离凝胶的储备缓冲液)1 L 将181.65 g Tris碱溶于约800 mL 双蒸水(ddH2O) 用浓盐酸调节pH值至8.8 用双蒸水(ddH2O)将体积调至1 L注意:在进行最终的pH调节之前,
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缓冲液基础知识分享
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
化学上的缓冲溶液,通常包含酸和碱或盐,易于保持恒定的氢离子浓度。 离子是丢失或获得一个或多个电子的原子或分子。 常见缓冲液的例子:乙酸(CH3COOH)和乙酸钠的溶液, 在水溶液中,乙酸钠完全分解成钠(Na +)和乙酸根(CH3COO-)离子。 缓冲溶液的氢离子浓度由以下表达式给出: 其中Ka是乙酸的电离常数,括号中的表示是各物质的浓度。缓冲溶液中氢离子的浓度取决于存在的乙酸和乙酸根离子(或乙酸钠)的相对含量,称为缓冲比。添加酸或碱会引起乙酸和乙酸根离子浓度的相应变化,但是只要所添加物质的浓度比各个缓冲液成分的浓度小,新的氢离子浓度就会保持接近原始值。 可以通过改变缓冲液比例并选择具有适当固有强度的酸来制备具有不同氢离子浓度的缓冲液。常用的缓冲溶液包括磷酸,柠檬酸或硼酸及其盐缓冲液。 因为酸和碱往往会促进广泛的化学反应,所以通过使用缓冲溶液在溶液中维持一定水平的酸度或碱度对于许多化学和生物学实验都是必不可少的。许多生化过程仅在特定的pH值下发生,而这些pH值由体内存在的天然缓冲剂维持。
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如何配制PMSF缓冲液?
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
PMSF缓冲液介绍 在生物化学中,PMSF(苯基甲磺酰氟或苯基甲基磺酰氟)是一种丝氨酸蛋白酶抑制剂,通常用于制备细胞裂解液。 PMSF并不抑制所有丝氨酸蛋白酶,它在水中迅速降解,储备溶液通常由无水乙醇,异丙醇,玉米油或DMSO组成。 当PMSF的浓度在0.1 – 1 mM之间时,会发生蛋白水解抑制作用。 在水溶液中的半衰期很短(pH = 7时为110分钟,pH = 8时为35分钟)。 PMSF特异性结合丝氨酸蛋白酶中的活性位点丝氨酸残基,但不结合蛋白中的任何其他丝氨酸残基。 由于PMSF在活性丝氨酸残基上与酶共价结合,因此可以通过X射线晶体学观察该复合物。 因此,它可以用作化学标记,以鉴定酶中必要的活性位点SER。 Enzyme(active) Ser-O-H + F-SO2CH2C6H5 ->EnzymeSer-O-SO2CH2C6H5 + HF 丝氨酸蛋白酶+ PMSF->不可逆酶-PMS复合物+ HF PMSF是一种细胞毒性化学物质,只能在通风橱内处理, 该化合物的LD50小于500 mg / kg。 配制PMSF(10 mM),10 ml: 量取17.4 mg PMSF 加入异丙醇至10ml并溶解。 无需过滤消毒。 分装并储存在–20°C。 注意事项:PMSF在水溶液中不稳定,半衰期约为30分钟, 在使用前立即添加溶液。
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如何制作碘化钾溶液
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
制备的碘化钾(KI)溶液只能通过处方获得,任何人都可以在化学药品供应商(甚至是一些较大的照片供应网点)购买碘化钾,并轻松混合自己的碘化钾(KI)解决方案,其效果几乎与片剂一样。 坐在高中\大学科学实验室中等待KI供应,可以保护数百名学生和当地居民!一瓶500克的KI,现在已经在他们的许多架子上,可以提供3846例成人每日剂量或7692例儿童(3-12岁)甲状腺阻断剂量!社区领袖需要团结起来 通常制作两种碘化钾(KI)缓冲液: 饱和、不饱和碘化钾。 使用饱和的碘化钾(KI)溶液,要向固定量的水中添加一点碘化钾(KI),直到某些晶体或颗粒不会溶解。即使剧烈混合,它们也将在溶液底部可见。现在,当该溶液不再吸收和溶解碘化钾(KI)时,它就被视为饱和溶液。 要制备饱和的碘化钾溶液,请在瓶中装满约60%的结晶或颗粒状碘化钾。(一个2液盎司的瓶子,由深色玻璃制成,顶部有坚固的非金属螺帽,大约需要2盎司的结晶或颗粒状碘化钾来填充容量约为60%的2液盎司的瓶子。)接下来,将安全的室温水倒入瓶子中,直至达到90装满%,然后将瓶盖紧紧并用力摇晃至少2分钟,其中一些固态碘化钾应永久不溶于瓶底;这证明溶液已饱和。 使用各种普通家用药物滴管进行的实验确定,一滴碘化钾饱和溶液中含有28至36毫克碘化钾。” 上例如,将26克碘化钾USP恰好混合并溶解在一个1升的水中,例如,将产生1000毫升碘化钾溶液,每5毫升碘化钾(KI)溶液的浓度为130毫克。每1000毫升(1升)中有5毫升中有200份。使用普通的带刻度滴管可以轻松,准确地量出5毫升。 5毫升也等于一茶匙。
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SSC缓冲液介绍
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
SSC缓冲液的适用范围 20x SSC缓冲液旨在(稀释后)用于洗涤; 原位杂交应用(CISH或FISH)中的步骤。 备注:该缓冲液只限于在科学实验中使用,不能用于人体或医疗过程中。 2.安全注意事项与处置安全注意事项与处置 使用前请阅读操作说明; 到期后请勿使用试剂; 避免与任何试剂交叉污染和微生物污染; 避免与试剂直接接触,采取适当的防护措施; 措施(使用一次性手套,防护眼镜和实验服); 如果试剂与皮肤接触,请立即用大量的清水进行冲洗; 切勿用嘴吸移溶液; 试剂的处置必须按照当地环保规定进行处理。 11 20x SSC溶液是由3 M氯化钠和300 mM柠檬酸三钠二水合物,pH 7.0。 20x SSC缓冲液是足以用于2000 ml 1x SSC溶液。 SSC缓冲液的存储 SSC缓冲液必须存储在RT中。 如果适当条件下存储,SSC缓冲液将在不损失性能的情况下运行,至少直到标签上印刷的有效期为止。 SSC缓冲液使用介绍 20x SSC解决方案是20x浓缩液,需要稀释使用; 在根据用户需要使用原位杂交程序(FISH或CISH)之前。 20x SSC缓冲液可以根据下表进行稀释: 通过上游和下游实验步骤,即组织固定,预处理,DNA探针变性,杂交,洗涤和检测。 为了获得特别用户友好的性能,建议您使用ZytoVision的ZytoDot,ZytoFast和/或ZytoLight ISH探针。ZytoVision的探针和ISH系统用于确认20x SSC解决方案的适用性。
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RIPA裂解缓冲液介绍
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
关于RIPA裂解缓冲液介绍 RIPA代表放射免疫沉淀测定法,缓冲液是常用的裂解液,用于裂解细胞和组织,同时防止蛋白质降解。 因此,RIPA裂解缓冲液可用于提取蛋白质以进行蛋白质分析,例如Western blot或ELISA实验。 RIPA裂解缓冲液通过苛刻的去氧胆酸钠和SDS以及较温和的NP-40的作用来溶解细胞膜和核膜。 这些去污剂的作用导致脂质膜的分解以及蛋白质与蛋白质的相互作用,从而在溶液中释放蛋白质。 不要忘记在RIPA裂解缓冲液中添加蛋白酶抑制剂,以防止任何蛋白酶过早地消化蛋白质! RIPA裂解缓冲液配方 以下配方可用于制备100 mL RIPA裂解缓冲液。 试剂 量 最终浓度 Sodium chloride (5 M) 3 mL 150 mM Tris-HCl (1 M, pH 8.0) 5 mL 50 mM Nonidet P-40 1 mL 1 % Sodium deoxycholate (10 %) 5 mL 0.5 % SDS (10 %) 1 mL 0.1 % ddH2O Up to 100 mL 如何制作RIPA裂解缓冲液 量出3 mL氯化钠(5 M),5 mL Tris-HCl(1 M,pH 8.0),1 mL Nonidet P-40、5 mL脱氧胆酸钠(10%),1 mL SDS(10%)并加入一个100毫升的瓶。 用ddH2O加满Duran瓶至100 mL。 通过将磁跳蚤添加到瓶子中并放在磁力搅拌器上来混合试剂。 [可选]在使用RIPA裂解缓冲液之前,将所需量的蛋白酶抑制剂(例如PMSF)添加到溶液中。 RIPA裂解液的储存: 将RIPA裂解缓冲液在冰箱中(+ 2oC – 8oC)存放相对较短的时间(几周)。 RIPA裂解缓冲液中的去污剂可能会随着时间的推移而重新沉淀。如果发生这种情况,请加热溶液(37oC)并混合以溶解组分。 对于更长的存储时间,将RIPA裂解缓冲液等分并存储在冰箱(-20oC)中。用温热(37oC)解冻等分试样,然后将各成分混合回溶液中。解冻后请勿重新冻结。 安全注意事项: 在RIPA裂解缓冲液的制备中处理去污剂(去离子P-40,脱氧胆酸钠和SDS)时要小心,
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WB实验常用试剂(WB实验技术介绍,WB实验常用试剂)
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
WB实验技术介绍 WB实验是Western blot(有时称为蛋白质免疫印迹)是分子生物学,免疫遗传学和其他分子生物学学科中广泛使用的分析技术,用于检测组织匀浆或提取物中样品中的特定蛋白质。 简而言之,样品进行蛋白质变性,然后进行凝胶电泳。 WB实验常用生物化学试剂 序号 名称 品牌 单位 等级 规格 单价 1 甘氨酸(Glycine) Biofount 瓶 AR,99.5% AR,99.5% 500g 66 2 Tris Biofount 瓶 AR,99.9% AR,99.9% 500g 126 3 丙烯酰胺 Biofount 瓶 AR,99.0% AR,99.0% 500g 90 4 N,N'-亚甲基双丙烯酰胺 Biofount 瓶 AR 99% 500g 156 5 N,N'-亚甲基双丙烯酰胺 Biofount 瓶 99%电泳级 100g 206 6 考马斯亮蓝G-250 Biofount 瓶 生物技术级 25g 216 7 SDS Biofount 瓶 97% 电泳专用级别 100g 160 8 SDS Biofount 瓶 AR,92.5-99.5% 500g 65 9 甲醇 Biofount 瓶 AR,99.5% 500ml 36 10 磷酸二氢钾(KH2PO4) Biofount 瓶 AR,99% 500g 75 11 磷酸氢二钠(Na2HPO4) Biofount 瓶 AR,99% 500g 76 12 氯化钠(NaCl) Biofount 瓶 AR,99.5% 500g 32 13 氯化钾(KCl) Biofount 瓶 AR,99.5% 500g 38 14 过硫酸铵 Biofount 瓶 AR,98.5% 500g 39 15 脱脂奶粉 Biofount 瓶 Difco Skim Milk 100g 120 16 TEMED Biofount 瓶 99%生物技术级 100ml 196 17 4×分离胶缓冲液(pH=8.8) Biofount 瓶 500ml 90