-
人elisa试剂盒样品的采集和存储
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
人elisa试剂盒的样品采集和存储： 血清-使用血清分离管，使样品在室温下或凝块一夜之间两个小时，在大约1000×4oC G.测定新鲜制备的血清离心20分钟，立即或存放样品在-20°C或稀释后使用80oC。避免反复冻融循环。 血浆采集血浆用EDTA或肝素作为抗凝剂。15分钟，离心样品×G在2到8摄氏度范围内采集30分钟。去除血浆和即刻检测或者储存样品。 液体类标本： 1.血清： 室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 2.血浆： 应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 3.尿液： 用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。 4.组织标本： 切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，分装后一份待检测，其余冷冻备用。 5.细胞培养上清： 检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
-
促贴壁物质和包被方法详解
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
许多细胞必须添加促贴壁物质才能贴壁生长， 促贴壁物质一般为细胞外基质， 如纤连蛋白、层粘连蛋白等。 不同细胞外基质对细胞粘附的效果一样吗？ 细胞外基质的包被浓度是什么标准？ 今天我们就来扒一扒 那些常见的促贴壁物质和包被方法~ 胶原蛋白（Collagen） 是支持细胞和组织生长的重要胞外基质蛋白，其形成的胞外环境有利于多种细胞的粘附、生长、迁移和分化。I型胶原可促进正常细胞和转染细胞的贴壁和增殖。胶原主要包括I型胶原，Ⅱ型胶原，Ⅲ型胶原，Ⅳ型胶原，Ⅴ型胶原，Ⅵ型胶原几种。 I型胶原——最常见的胶原蛋白，促进细胞的贴壁和增殖，用于内皮细胞，肝细胞，肌细胞等的培养。 软骨细胞对II型胶原的黏附性较好；上皮细胞在Ⅳ型胶原底物上贴壁良好，而在I、II、III型胶原底物的培养板上贴壁情况较差。 胶原应用及建议细胞基质浓度： 纤粘连蛋白（Fibronectin，FN） 一种位于细胞表面和血浆中的大分子蛋白质，是一种主要的细胞黏附分子，在细胞纤维基质中发挥结构和黏附性作用。 建议以1-5ug/cm2或者 0.5-50ug/ml的浓度作为细胞基质，但最佳浓度取决于细胞类型或研究目的、应用方向。 BI也提供Fibronectin solution（货号: 03-090-1），可参考如下方法包被： (1) 19ml 无菌的PBS加1ml的纤连蛋白 (浓度50ug/ml)； (2) 之后一个T25 (表面积25 cm2)需用2.5ml包被, 所以视使用情形分装包被； (3) 一个T25加2.5ml纤连蛋白溶液； (4) 放4度至少30分钟； (5) 吸出纤连蛋白溶液； (6) 用无菌的PBS润洗一次, 即可培养细胞。 层粘连蛋白（Laminin） 是细胞外基质的重要组成，存在于所有上皮细胞和内皮细胞的基底侧，同时也是某些细胞与细胞间交互作用的中间媒介。层粘连蛋白有细胞及组织特异性，对于调节细胞功能具有重要作用，如：协助粘附、促进生长、引导迁移、调控分化、维持表型、防止细胞凋亡等。 在哺乳动物胚胎中，Laminin-521和511是最早表达的胞外蛋白，在2-4细胞期，已经可以检测到。LN-111支持hPSCs高效，
-
β-酪蛋白检测介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
近日，澳大利亚和中国的研究人员共同开展了一项新的研究，发现在中国学龄前儿童中，用A2牛奶替代传统牛奶可减轻与乳糖不耐受有关的胃肠道症状，并改善了儿童的认知能力，该项研究结果已经发表在《儿童胃肠病学和营养学杂志》上面。 酪蛋白和乳清蛋白是牛奶中的两种主要蛋白质，比例为 80：20。其中β-酪蛋白是一种主要的酪蛋白，约占牛奶蛋白总量的 30%。而牛奶中其它蛋白质的含量则较低，包括抗体和乳铁蛋白。 A2-β酪蛋白身份大揭秘！ β-酪蛋白是牛奶中主要的一种酪蛋白，A2-β酪蛋白是现代奶牛β-酪蛋白的天然原型。最初，所有家养的牛只含有A2类β-酪蛋白，后来因自然基因突变，出现了A1蛋白质的变体，即今天全球普遍存在的A1类牛奶β-酪蛋白，A2-β酪蛋白更接近母乳的蛋白质，更贴合人体的消化系统，能更天然地呵护消化吸收A2-β酪蛋白则不会生成BCM-7, BCM-7与部分婴儿的1型糖尿病风险升高、免疫反应、消化功能紊乱，自闭症和呼吸功能障碍之间存在关联。 A2 β-酪蛋白和 A1 β-酪蛋白有什么不同？ β-酪蛋白可呈现两种主要类型中的其中一种：A1 或 A2，其区别在于蛋白链中第 67 位氨基酸不同。 A1和A2β-酪蛋白的蛋白质结构存在差异， A1在消化过程中可生成β-酪啡肽-7（BCM-7），而A2 则不会生成BCM-7，BCM-7是一种外啡肽，可与机体多种系统相互作用。多项研究表明，A1或BCM-7与部分婴儿的1型糖尿病风险升高、免疫反应、消化功能紊乱,自闭症和呼吸功能障碍之间存在关联。另有研究表明，A2β-酪蛋白不会生成BCM-7，与母乳中的β-酪蛋白相似。因此,基于A2β-酪蛋白制成的配方奶因其不含A1β-酪蛋白，因而可能与母乳更接近，更有利于促进婴幼儿的生长发育。 在A2奶在婴幼儿奶粉市场大行其道的今天，A1奶对健康的不利效果，或者说A2奶比A1奶在某些方面更健康的研究，还有待科研工作者们进行更深入的探索。但是根据目前的研究，可以比较确定的说，A2奶对于本身
-
上色的扫描电镜介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
扫描电镜（SEM）是我们观察微观世界强有力的工具，然而，成像原理限制了它们只能以黑白图片的形式呈现在我们面前。 黑白图片往往给人一种复古又带着一丝单调的感觉，而彩色图片更贴近现实生活，艳丽、唯美、淡雅。科学工作者们也耐不住寂寞，发挥着艺术天赋，想尽办法给电镜图片上色，用更加直观的图片让人们感受大自然美。 为什么扫描电镜只能是黑白成像？ 这与扫描电镜的成像原理有关。如图 1 所示，电子束从顶部的电子枪阴极发射出来，在加束电压的作用下，电子束经各级电磁透镜聚焦汇聚成一束极细的电子束，并在扫描线圈的驱动下在样品表面作有序的光栅扫描。 高能电子束入射到样品表面时会激发出各种信号（二次电子，背散射电子和 X 射线等），这些信号由相应的探测器检测，经放大后传送到显示屏上来调制显示屏的亮度。 样品在不同位置上产生信号的量是有差异的，直接反映在图像中就是相应位置的亮暗不同，产生信号越多的位置越亮，产生信号越少的位置越暗。因此，扫描电镜只能成黑白图像。 图1 SEM 成像原理图 如何给 SEM 图片上色？ SEM 图片上色其实就是利用各种软件来处理图片，改变图片中特定目标的颜色。无论使用何种方法，思路一般分为两步： 1. 选区，也就是选择图片中需要改变颜色的区域 2. 变换想要的颜色 目前最常用的方法就是 PhotoShop。PhotoShop 作为一款功能非常强大的图片处理软件，图片选区的方法有多种（选框工具、套索工具、魔棒工具等），上色的方法也有很多（色彩平衡、通道混合器、色相/饱和度等）。 PhotoShop 功能虽然强大，但是操作界面还是相对复杂，对使用者有一定的要求。 今天，飞纳电镜推荐一款简单易用的软件—— Phenom Image Viewer。软件的操作界面如下，非常简洁： 我们看看用这款软件做出来的图片效果，简单列举一二： 球菌 硅藻 纳米氧化铁 锂电池正极材料 MOF 材料 植物种子
-
小鼠F-框亮氨酸丰富重复蛋白3试剂盒说明
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
小鼠F-框亮氨酸丰富重复蛋白3试剂盒说明 双抗体夹心法: 1、用缓冲液将抗体稀释至1-1a0ug/ml。在反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次。 2、加样：加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。 3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。 4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。 5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml 6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。 间接法(检测未知抗体)： 1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml， 每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。 2、加样：加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照) 3、加酶标抗体：于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.05ml，37℃孵育30-60分钟，洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。 4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。 5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml 6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。
-
细胞培养不贴壁的常见处理办法
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
我们可能都有过这样的经历： 辛苦呵护的细胞，怎么也不愿意贴壁； 贴壁了又很容易成块或者成团掉下来； 原本贴壁的细胞，复苏后细胞不贴壁了； ........ 遇到这样的问题你都如何解决？ 这次我们就来聊聊 细胞贴壁和什么有关？ 为啥你的细胞为这么矫情，不愿贴壁呢？ 如何促进细胞贴壁？ 体外培养细胞贴壁与什么有关？ 首先并不是所有的细胞在体外培养的情况下都会贴壁，但大部分来自实体组织器官的细胞都会贴壁。 贴壁的过程可能是这样的：细胞首先分泌细胞外基质，这种细胞外基质黏附在支持物的表面（培养瓶，培养皿的底面）。然后，细胞通过其表面表达的黏附因子与这些细胞外基质结合。 所以细胞贴壁与否和细胞本身分泌细胞外基质的能力以及细胞本身表达的黏附分子的数量有关，也与培养皿壁的表面结构有关。 细胞为什么要贴壁？ 细胞贴壁的过程使形态发生很大变化，细胞形态改变是细胞内骨架（是真核细胞中的蛋白纤维网架体系，由微管、微丝及中间纤维组成的体系）本身和细胞外基质共同作用的结果。 密度大于培养基的细胞（绝大部分细胞）会沉降在底面上，那么细胞要生存必定得改善这个环境，分泌细胞外基质，改善底面的结构，然后很自然就贴附在底面上了。 密度小于水的细胞，如脂肪细胞，漂浮在液面上，所以不可能贴在底面上，但是如果将培养液加满，那么细胞能够与培养瓶上面的壁接触同样可以贴壁。因此可以说，细胞贴壁是适应环境的一种反应。 参考文献：刘梅芳， 徐国恒. 细胞体外培养时为什么会贴到培养皿壁上.生物学通报，2007，42（9）：54. 细胞不贴壁，可能是这些原因？ 细胞的传代最重要的是胰酶处理时间：消化不够细胞本身就是成团的；若胰酶处理太久，容易造成细胞膜蛋白损伤，使细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。 缺少贴壁因子：血清中含有促贴壁因子，而无血清培养基工艺中由于缺少这种促贴壁因子，细胞的贴壁效果会下降很多。 支原
-
IVD行业常见的核酸提取方法及原理
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
核酸是分子生物学的基础，而核酸提取是整个分子行业绕不过去的门槛，很多时候一份样本的核酸提取的好坏直接决定了检测结果的有效性。 核酸的基础知识 核酸分为脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA），其中RNA又可以根据功能的不同分为核糖体RNA(rRNA)，信使RNA（mRNA）和转移RNA（tRNA）。 DNA主要集中在细胞核内，线粒体和叶绿体中，而RNA主要分布在细胞质当中。 核酸中因为嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键，所以核酸具有紫外吸收的特性，DNA钠盐的紫外吸收在260nm附近，其吸光率以A260表示，在230nm处于吸收低谷，因此可以使用紫外分光光度计对核酸进行定量及定性测定。 核酸为两性电解质，相当于多元酸，可以使用中性或偏碱性的缓冲液使核酸解离成阴离子，置于电场中向阳极运动，这就是电泳的原理。 核酸提取纯化原则和要求 1、保证核酸一级结构的完整性 2、排除其它分子的污染（如提取DNA时排除RNA的干扰） 3、核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和高浓度的金属离子 4、尽可能降低蛋白质、多糖和脂类等大分子物质 核酸提取纯化方法 1、酚/氯仿抽提法 1956年发明，通过酚/氯仿处理细胞破碎液或者组织匀浆后，在水相中主要溶解以DNA为主的核酸成分，在有机相中主要是脂类物质，蛋白质位于两相之间。 2、醇沉淀法 乙醇能够消除核酸的水化层，使带负电荷的磷酸基团暴露出来，NA﹢等带正电荷离子能与磷酸基团结合，形成沉淀。 3、层析柱法 通过特殊硅基质吸附材料，能够特定吸附DNA，而RNA和蛋白质顺利通过，然后利用高盐低PH结合核酸，低盐高PH值洗脱，来分离纯化核酸。 4、热裂解碱法 碱法提取主要是利用共价闭合环状质粒与线性染色质在拓扑学上的差异来分离他们，在碱性下，变性蛋白是可溶的。 5、煮沸裂解法 加热处理DNA溶液，利用线性DNA分子的特性，通过离心将DNA片段与变性蛋白质和细胞碎片形成的沉淀分离。 6、纳米磁珠法 运用纳米技术对超顺磁性纳米颗粒的表面进行改良和表面修饰
-
人肺癌组织源细胞细胞培养试剂盒操作说明
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
人肺癌组织源细胞细胞培养试剂盒操作说明 主要功能： （1）血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。 （2）表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1，参与血管壁的炎症反应。 （3）与血管疾病的进展和稳定有关。 生理变化： （1）主动脉硬化。 （2）主动脉瘤 （3）主动脉钙化。 基本特性： （1）组织来源于正常大鼠大动脉组织。 （2）鉴定：肌动蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。 （3）原代细胞培养末期液氮冻存。 （4）每冻存管细胞数：>5×105 cells/1ml。 （5）肌动蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。 （6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。 培养指南： 对于贴壁细胞，传代可参考以下方法： 1人肺癌组织源细胞细胞培养试剂盒图片. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。 3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 对于悬浮细胞，传代可参考以下方法： 方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
-
Mabtech颗粒酶（Granzyme）的使用和原理
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
颗粒酶是由细胞毒性T细胞和自然杀伤（NK）细胞内的细胞质颗粒释放的丝氨酸蛋白酶。它们在靶细胞中诱导程序性细胞死亡（细胞凋亡），从而消除已经变成癌细胞或被病毒或细菌感染的细胞。颗粒酶也杀死细菌并抑制病毒复制。在NK细胞和T细胞中，颗粒酶与穿孔素被一起包装在细胞毒性颗粒中。也可以在粗面内质网，高尔基体和反式高尔基体网中检测颗粒酶。颗粒酶是丝氨酸酯酶家族的一部分。它们与先天免疫细胞表达的其他免疫丝氨酸蛋白酶密切相关，如中性粒细胞弹性蛋白酶和组织蛋白酶G。 颗粒酶B通过激活半胱天冬酶（尤其是半胱天冬酶-3）来激活细胞凋亡，所述半胱天冬酶裂解许多底物，包括半胱天冬酶活化的DNA酶以执行细胞死亡。颗粒酶B还在没有半胱天冬酶活性的情况下切割许多负责细胞凋亡的蛋白质。其他颗粒酶通过半胱天冬酶依赖性和半胱天冬酶非依赖性机制激活细胞死亡。 除了杀死它们的靶细胞外，颗粒酶还可以靶向并杀死细胞内的病原体。颗粒酶A和B通过切割电子传递链的组分诱导细菌中的致死性氧化损伤，而颗粒酶B切割病毒蛋白以抑制病毒活化和复制。颗粒酶直接与核酸DNA和RNA结合; 这增强了它们对核酸结合蛋白的切割。 最近，除T淋巴细胞外，已显示颗粒酶在其他类型的免疫细胞中表达，例如树突细胞，B细胞和肥大细胞。此外，颗粒酶也可以在非免疫细胞中表达，例如角质形成细胞，肺细胞和软骨细胞。由于许多这些细胞类型不表达穿孔素或不形成免疫突触，因此颗粒酶B在细胞外释放。细胞外颗粒酶B可以在与失调或慢性炎症相关的疾病的细胞外空间中积累，导致细胞外基质蛋白的降解和组织愈合和重塑受损。细胞外颗粒酶B参与了动脉粥样硬化，动脉瘤，血管渗漏，慢性伤口愈合和皮肤老化的发病机制。 艾美捷科技作为专业的生命科学领域解决方案供应商，为您推荐Mabtech品牌的各类载脂蛋白产品，产品优质，发表多篇高分文章。 颗粒酶A： 产品名称 产品货号 规格
-
细胞界百变女王-间充质干细胞
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
干细胞，一种多元多功能的细胞，具有「自行再生」与「分化成各类细胞」的潜能（下图 1）；在不久的未来，我们的生活中可能到处都充满干细胞的影子噢！觉得惊讶吗？是哪种干细胞这么厉害呢？ 就让 BI-MSC 课堂好好来介绍一下 细胞界颜值最能打的女主角：间充质干细胞（Mesenchymal Stem Cell） ▲ 图 1：间充质干细胞具有「自行再生」与「分化成各类细胞」的潜能。（EUROSTEMCELL WEBSITE） 什么是间充质干细胞？ 谈谈咱们的女主角- 间充质干细胞（为表示对女主角的尊重，以下简称「她」）的出道历程： 最早-由德国科学家 Friedenstein 在骨髓中发现。 1991 年-美国科学家 Caplan 将她命名为「间充质干细胞」。 1999 年-科学家 Pittenger 首次证明她具有多向分化能力（能分化为脂肪、成骨、软骨等细胞）。 2002 年-发现她有强大的免疫抑制能力。 由于咱们女主角实在是太红了，国际细胞**协会（ISCT）特别在 2006 年 统一对「间充质干细胞」的定义（所有研究间充质干细胞的辨识金标准）： 1. 有贴壁性，能附着于塑胶培养容器。 2. 细胞表面表达特定抗原：CD105、CD73、CD90 等。 3. 具有体外培养分化能力，可分化为成骨质、软骨与脂肪细胞（下图 2）。 ▲ 图 2：间充质干细胞除了能分化成骨质、脂肪与软骨细胞，还能分化成不同细胞，如肌肉细胞、神经细胞等。 （CHAN, IMPROVED EXPANSION OF MSC WITHOUT LOSS OF DIFFERENTIATION POTENTIAL, www.RnDSystems.com） 为什么间充质干细胞这么 HOT？ 间充质干细胞属于「多能干细胞」的一员（下图 3），有分化成特定细胞或组织的能力；而多变的她，同时也属于「成体干细胞」，一类广泛存在骨髓、脐带、脂肪等部位的干细胞，所以较其他类干细胞容易取得；因为她的多变潜能及容易取得，让「间充质干细胞」在细胞生物学研究舞台上越来越被注意。 一个学生有能力做 3 种以上的课题，又总是随传随到。你说，老师会不会爱他？ ▲ 图 3：干细胞分化潜能分类 目前间
-
QbD（Quality by Design）理念在新药研发中的作用
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
QbD（Quality by Design）的概念最早是在2004年由美国FDA提出的，并被纳入到ICH质量体系当中成为指导原则和指南。QbD，即质量源于设计，是指药物的质量控制应该从最早期的研发设计环节做起。与之前的QbT(Quality by Test), QbP(Quality by Product)相比，进一步向前推进了质量控制包括的环节，为整个过程可以更加充分、科学的研究和开展奠定基础，使新开发的药物能够更加顺利的通过检验。设计空间(Design Space)是一个与之相伴随的概念，指的是药品质量（如溶解度等）与多个生产条件要素参数之间的多维度函数，在此函数中符合药品质量要求的区域被称为设计空间，其意义在于之后的研发和生产操作都应在此空间之内，一旦超出则视为变更，需要重新评估调控。 图中的横纵坐标代表了生产条件的两个重要参数，图中白色的设计空间即可理解为在设计中符合预期标准的空间。在这个空间内任何条件的组合都被认为是符合预期质量控制的。 设计空间的概念主要在ICH的Q8指导原则中有详细介绍。Q8、Q9和Q10三个指导原则是ICH在2005年和2008年发布的三个关于质量控制和质量实施工作的指导原则，清晰地解释了QbD原则及其在整个过程中的各方面应用。Q8（药物研发）、Q9（质量风险管理），和Q10（药物质量系统），是三大贯穿于从处方开发、工艺开发到生产整个药物生命周期的指导法规，共同发挥作用促进产品的质量系统。其中，Q8（R2）法规中包括了目标产品质量概况（QTPP）和设计空间（DS）的建立和潜在的关键质量属性（CQAs）的确定；Q9法规包括了产品开发过程中的风险评估(QRM)，建立控制策略时的风险控制和产品质量持续提升中的风险回顾；Q10主要阐述了药物质量系统（PQS），包括了工艺性能和产品质量监测系统、CAPA系统、变更管理系统和管理回顾。值得强调的是，三个指导法规是共同，在产品的整个生命周期中发挥作用，将QbD的研发理念付之于实践的指导原则当中。 那么引入QbD概念的意义在哪里呢？ 从环节上看，它加入了更前端的环
-
防晒霜中二氧化钛含量检测的操作
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
入伏以来，只要一出门， 小编和烤肉的差别就只少一撮孜然了， 为了不被晒黑， 只想好好抱紧防晒霜这根救命稻草…… 然而各种明星同款、某宝爆款层出不穷， 它们真的如传说中那样效果好吗？ 标注的防晒值是否有水分？ 防晒霜会对皮肤造成伤害吗？ 又到了小编为您揭秘的时刻了，今天我们就来带您——走进防晒霜 防晒霜，是指添加了能阻隔或吸收紫外线的防晒剂来达到防止肌肤被晒黑、晒伤的化妆品。 选择防晒霜的时候，不应该流于表面的只看它的SPF值，PA值，也不要仅仅靠皮肤的感受说它是不是清爽，是不是温和不刺激。而应该从三个方面进行有效的测评：对紫外线的防护能力、稳定性和健康危害。一支理想的防晒霜应能够同时提供对UVA和UVB的防护，包含的有效成分在阳光下不会分解，有效和非有效成分对成人孩子都是安全的。 防晒霜分为物理防晒霜与化学防晒霜，前者通过反射、散射紫外线来避免皮肤损伤，后者则靠吸收紫外线。物理防晒霜的主要成分是氧化锌和二氧化钛。化学防晒霜的主要成分正是实验中的四种成分，阿伏苯宗、羟苯甲酮、奥克立林与依莰舒吸收紫外线，同时自身发生分解。化学防晒霜中所含的化学成分，会进入人体血液，物理防晒剂要更安全一些。 现在，小编就来给大家介绍一下， 物理防晒霜中二氧化钛含量的测定。 实验操作步骤： 准确称取1.25g 左右的化妆样品置于100ml的锥形瓶中，加入5ml浓硫酸，10ml浓硝酸，1.00g硫酸铵混合均匀，放置1.5小时。将浸泡好的样品铺放在电炉加热消解，至溶液呈微黄色。将消解好的样品冷却至常温，加20ml 的去离子水混合均匀，继续加热至产生白烟，至溶液中的沉淀溶解。将消解液移至500ml 烧杯中，加150ml 去离子水，用25﹪氨水和硫酸凋节溶液的PH值在2-3之间。于45-50℃水浴条件下，缓缓加入25ml10﹪单宁酸溶液，混台均匀。在不断搅拌下逐滴加入25ml20﹪安替比林溶液，形成橙红色的无定形沉淀后。放置一定时间后，用定量滤纸过滤沉淀，并用去离子水洗涤沉淀至中性。于850℃马弗炉
-
哮喘的**方法与形成原因
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
春天万物复苏，一到小花园就嗓子难受，难道是花有毒？冬天天寒地冻，一降温就咳嗽两声，难道是冻着了？那一有灰尘就胸闷气短呼吸困难，真的只是体弱肺不好？怕不是得了哮喘（惊吓脸）。“哮喘是会呼吸的痛，它活在我身上所有角落。”那么，哮喘具体是个啥？快往下看。 什么是哮喘？ 哮喘全称支气管哮喘（Bronchial Asthma），是一种异质性疾病，常以慢性气道炎症为特征。主要临床表现为随时间变化和加剧的呼吸系统相关症状，运动后症状明显，常在夜间或凌晨发作。多数人可自行缓解或经**后缓解。但是，如果哮喘不及时**控制，容易使呼吸系统功能受损，并伴随肺部感染等症状，严重可造成呼吸衰竭，危及生命。 哮喘是目前全球最常见的慢性疾病之一，全球每20个人中可能就有1个患有哮喘。据世界卫生组织（WHO）估计，2015年全世界有38.3万人死于哮喘，目前全世界大约有2.35亿人患哮喘。现在很多国家哮喘发病率超过10%，我国哮喘近年来持续增长，发病情况也不容乐观。 1998年12月11日设立世界防治哮喘日，从2000年起改为每年5月的第一个周二。旨在让人们加强对哮喘病现状的了解，增强患者及公众对该疾病的防治和管理。 图片来源：https://ibaotu.com 哮喘的诱因有哪些？ 目前认为支气管哮喘是一种有明显家族聚集倾向的多基因遗传性疾病，它的发生受遗传因素和环境因素的影响。当患者的亲人（有血缘关系、近三代人）中有哮喘或其他过敏性疾病（如过敏性鼻炎、湿疹）病史时，可导致患者自身遗传到过敏性体质，且血缘关系越近，患病率越高，患病后越严重。受环境因素的影响，当接触、服用或吸入可能诱发过敏反应以及刺激气道的物质和颗粒，或遇负面情绪、运动、药物（如阿司匹林）等，都可能诱发哮喘。 那么，如果出现了反复发作的喘息、咳嗽和胸闷等症状，如何确定是得了哮喘，还是单纯的嗓子卡了鸡毛，或者急火攻心犯了心脏病？ 目前可以根据临床表现、临床分期、分级加检测（变应原检测、肺功能
-
RNA研究热点技术介绍总汇
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
头条消息：2019年8月16日，2019年国家自然科学基金评审结果发布，今年国自然重点资助项目743项，总金额达22.184亿，北京大学、浙江大学位居前两位，分别获得37项和34项，总计超过1亿元，而上海交通大学（30项）、复旦大学、清华大学、南京大学、中山大学、天津大学、华中科技大学、同济大学紧随其后，分别位列第3到第10位。在医学科学领域，上海交通大学项目数、经费数位列全国第一；生命科学领域，中国农业大学经费数列全国第一。 随着2019年国自然基金的正式出炉，国自然课题申请结果成为了近期大家热议的话题。正所谓几家欢喜几家愁，您的课题是否得到了国家自然科学基金的资助呢？云序生物为大家解读国自然热点方向，RNA甲基化，环状RNA以及外泌体的相关中标结果。 热点1：表观转录组学--m6A RNA甲基化修饰 RNA甲基化作为生命科学领域最热门的研究方向之一，已经受到了国内外科研院所和高校的广泛关注，云序生物课堂在往期公众号当中已经多次为大家解析了来自Nature Cell等核心期刊的研究成果，2019年国自然项目当中的RNA甲基化相关项目也是重要组成部分，其中m6A修饰相关研究占据绝大多数。一起来看看RNA m6A相关立项金额前十项的具体项目（表1）。 表1：m6A项目中标金额Top10 *红色为部分云序客户m6A课题获国自然资助情况。 从2013年到2019年，m6A国自然项目的中标金额和中标项目有明显涨幅（图1），从项目研究内容来看，甲基化研究的领域也从肿瘤学发散至代谢、损伤应急、生殖、胚胎发育等领域（图2），这一趋势同当今国际领域SCI论文发表的走势保持一致。同济大学孙奋勇课题组对甲基化影响肝母细胞瘤增值相关项目收到高达297万元的重点资助，上海生命科学院童明汉课题组建立减数分裂与RNA甲基化研究同样受到了307万元的资金资助。这一结果提示RNA m6A修饰在在当下以及未来相当长的一段时间都将是生命科学领域的重点，是不折不扣的科研热点。 图1：m6A研究方向中标数目从2013年到2019年节节攀升 m6A的相
-
间充质干细胞MSC诱导分化与染色实用指南
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
间充质干细胞（MSC）具有多向分化的潜能，在体外一定条件下可以诱导分化为脂肪细胞、成骨细胞、成软骨细胞。 BI NutriStem® MSC系列拥有众多明星产品，除了NutriStem® MSC无血清培养基，也提供MSC诱导分化试剂—MSCgoTM XF Differentiation Kits。 为何选择MSCgoTM XF Differentiation Kits ？ 不含血清，无异源， 促进多种来源hMSC分化为 成骨、成脂细胞、成软骨细胞 分化效果更加明显 成骨分化可短至7天。 成脂分化 成骨分化 成软骨分化 如何做好干细胞诱导分化？ 成骨 1. 接种hMSC：用MSC Attachment solution (BI；P/N: 05-752-1，1:100 DPBS 稀释) 预包被24孔盘，每孔加入0.5ml MSC NutriStem® XF，接种6x104细胞 (3x104cells/Cm2)。 （注意：若使用其他培养器皿，请适当调整体积。) 2. 置于37°C，5% CO2培养箱中培养。 3. 分化：培养24h后即细胞融合度达到80%时，将MSC NutriStem® XF 培养基吸除，每孔加入0.5ml分化培养基。 （注意：若细胞融合度
咨询热线
18133906270
德尔塔官方微信