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上海恒远分析:酶联免疫分享试剂盒设对照参数是否浪费?

上海恒远分析:酶联免疫分享试剂盒设对照参数是否浪费?

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

今天上海恒远小编带大家了解酶联免疫分享试剂盒设对照参数是否浪费?1、对照的设置对于测定结果的可靠性影响很大,尤其是待测液中含有与测定原理中拟直接检测的产物一样的物质时。通过设置对照,不仅可以排除本底的影响,而且可以排除其它一些未知的复杂影响,保证测定结果可靠。 2、我司提供的试剂盒首先考虑的是保证测定结果可靠。因此,有些试剂盒只设空白对照,但是有些试剂盒每个样品都设对照。其中后者是根据反应原理,为了排除可能的复杂影响。 3、那么设置更多的对照是否造成浪费呢?首先保证测定结果可靠,因为如果测定结果不可靠,就不可能得到正确结论,那么所有的研究投入,包括前期的样品培养与处理、购买试剂盒的费用和用户的时间与精力,都是浪费,而且还会误导读者,造成更大浪费。为此,我们精心权衡,在必要时每个样品都设对照。其次,有些用户出于节约时间和经费,不惜减少重复,甚至减少测定步骤,擅自改变测定体系。不过这样做会导致测定结果不可靠。我们通常会提醒用户,不过没有办法保证用户不这么做。zui后这样做,会影响测定结果的可靠性,有时甚至导致测定失败,用户反过来埋怨试剂盒质量,我们会觉得很冤枉。尤其是用户在论文中标明是用我们公司生产的试剂盒,又不严格按照说明书进行测定,会影响我司试剂盒的美誉度。      上海恒远多年专业酶免服务,为专业的酶联免疫分析试剂盒(仅供科研使用)供应商,质量保证,价格低,是国家重点实验室及国内各大院校长期供应商,我司还可提供免费代测服务,欢迎您的来电!

ATCC细胞检测方法双抗体夹心法

ATCC细胞检测方法双抗体夹心法

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

ATCC细胞检测方法双抗体夹心法 双抗体夹心法是检测抗原zui常用的方法,操作步骤如下: 双抗体夹心法 一、将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质。 二、加受检标本:使之与固相抗体接触反应一段时间,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。 三、加酶标抗体:使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。 四、加底物:夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。 根据同样原理,将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物,即可用双抗原夹心法测定标本中的抗体。 在临床检验中,此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要获得针对受检抗原的异性抗体,就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗体的来源为抗血清,包被和酶标用的抗体分别取自不同种属的动物。如应用单克隆抗体,一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗,分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性,而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应,作一步法检测。 在一步法测定中,当标本中受检抗原的含量很高时,过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合,而不再形成"夹心复合物"。类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象,此时反应后显色的吸光值(位于抗原过剩带上)与标准曲线(位于抗体过剩带上)某一抗原浓度的吸光值相同,如按常法测读,所得结果将低于实际的含量,这种现象被称为钩状效应(hook effect),因为标准曲线到达高峰后呈钩状弯落。钩状效应严重时,反应甚至可不显色而出现假阴性结果。因此在使用一步法试剂测定标本中含量可异常增高的物质(例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等)时,应注意可测范围的zui高值。用高亲和力的单克隆抗体制备此类试剂可削弱钩

未雨绸缪:ELISA实验过程中也许会遇到的问题

未雨绸缪:ELISA实验过程中也许会遇到的问题

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

在实验过程中加样可能会遇到一些问题,而这些问题往往会弄的大家措手不及。恒远为了方便大家更好的完成实验,技术人员特将实验过程中可能碰到的问题以及解决办法整理分析出来,希望能帮到大家。 可能遇到的问题: 1、过长(特别是室内温度较高时) 2、手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间; 3、加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。.血清或血浆标本分离不好即进行加样。   相应解决办法: 1、标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。 2、加样后及时放入孵箱。 3、加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 4、如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 5、标本较多时,请分批操作。                              上海恒远拥有一对一全程指导服务,的ELISA检测试剂盒,让您赢在*步。公司主营:Elisa试剂盒,人Elisa试剂盒,大鼠Elisa试剂盒,小鼠Elisa试剂盒,生物试剂,血清,抗体,培养基,标准品,国产血清、GIBCO胎牛血清等。

上海恒远分享白介素作用

上海恒远分享白介素作用

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

白细胞介素,简称白介素,是指在白细胞或免疫细胞间相互作用的淋巴因子,它和血细胞生长因子同属细胞因子。两者相互协调,相互作用,共同完成造血和免疫调节功能。白细胞介素在传递信息,激活与调节免疫细胞,介导T、B细胞活化、增殖与分化及在炎症反应中起重要作用。   特征 白介素2(IL-2)分子量为1.5万的糖蛋白,对T细胞激活及生长有作用。IL-2主要由CD4+和CD8+T细胞产生,IL-2主要以自分泌或旁分泌方式发挥效应。不同种属间,IL-2沿种系谱向上有约束性,向下无约束性。IL-2是参与免疫应答的重要细胞因子,并参与抗肿瘤效应和移植排斥反应。   白介素作用 IL-2对T细胞的作用 IL-2是T细胞生长因子,能使T细胞在试管内长期存活,刺激T细胞进入细胞分裂周期。IL-2能增强T细胞的杀伤活性,在体外它与IL-4、IL-5和IL-6一起共同诱导细胞毒性T细胞(Tc)的产生,并使其活性大大增强,延长其生长期;在体内IL-2也能增强抗原诱导的TC活性,甚至可以辅助抗原和半抗原直接在祼鼠体内诱导产生TC¬。 白介素由IL-2诱导产生的TC输入体内后可产生明显抗肿瘤作用,但TC在体内不易存活,如同时再输入少量IL-2,则可明显延长Tc在体内的存活时间,并增强其抗肿瘤效果。 IL-2并可诱导T细胞分泌IFN-γ, TNF, CSF等细胞因子。   IL-2对NK细胞的作用 IL-2可促进NK细胞的增殖,维持NK细胞长期生长。肿瘤病人经IL-2**后,血中NK细胞数量明显增加。IL-2在体内、外都能增强NK细胞活性。在体外,IL-2于短时间内就可使NK细胞活性增强。肿瘤病人经IL-2**后NK细胞活性变明显增强,且有累积效应,即随着IL-2剂量的增加和疗程的延长,NK细胞活性亦因之不断增强,IL-2并能矫正NK细胞活性低下状态,使之恢复正常或超过正常。白血病病人外周血单核细胞(PBMC,其中10%是NK细胞),经IL-2培养后具明显的细胞毒作用,以此输回给病人**白血病。IL-2还能促进NK细胞分泌IFN-γ,增加其表达IL-2R+亚基等。         上海德尔塔生物公司还为您提供R&D、BI

佛波酯PMA应用实例(仅作参考)

佛波酯PMA应用实例(仅作参考)

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

PMA(同义名:TPA)是一种广泛用于体内外实验的佛波酯(phorbol ester) PKC激活剂。PMA结合PKC(Ki =2.6 nM)并激活其功能,在细胞和组织中都呈现出极其广的抑制谱。PMA可以抑制Fas诱导的细胞凋亡,但又可以诱导HL-60细胞的凋亡。PMA在肝细胞中可以诱导iNOS的表达。PMA可以增强forskolin诱导的cAMP形成。PMA是一种的肿瘤促进剂,可以促进小鼠皮肤瘤的形成。尽管PMA毒性较强,但是在人体内仍显示出抗白血病和抗中性白细胞减少的活性。应用实例(仅作参考):为研究PMA(TPA)对急性髓细胞白血病人的**效果,给白血病人静脉注射不同剂量(0.25mg, 0.5mg,1mg)的PMA(TPA),12个病人的血液或骨髓中白血病细胞数量都有减少。给病人静脉注射1mg TPA会有短期呼吸困难,发烧,寒冷等副作用,但这些副作用是可逆的[4]。给实体瘤病人静脉注射0.125-0.25mg PMA(TPA),提高了白细胞和嗜中性粒细胞的数量,在单剂量静脉注射0.25mg TPA 24h后大部分病人被检测到白细胞和嗜中性粒细胞水平提高,有40%病人出现短暂的微热或微冷,40%病人在注射处有疼痛感[5]。给羊静脉注射5μg/kgPMA(TPA)提高肺中嗜中性粒细胞和凝血噁烷B2,并降低血中白细胞数量[6]。给兔子静脉注射40μg/kgPMA(TPA)导致呼吸窘迫,血中嗜中性粒细胞数量显著降低[7]。注意事项:本产品为化学试剂对皮肤和粘膜具有强刺激性,另外PMA为肿瘤促进剂,在使用PMA时需要特别防护,戴好手套和面罩,避免任何途径直接接触。本产品仅用于科研用途,禁止用于人身上

上海研域生物实验室所需哪些免疫组化

上海研域生物实验室所需哪些免疫组化

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

免疫组化实验试剂 PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L. 0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液(CB,pH6.0,1000ml):柠檬酸三钠 3g,柠檬酸 0.4g. 0.5mol/L EDTA缓冲液(pH8.0):700ml水中溶解186.1gEDTA·2H2O,用10 mmol/L NaOH调至pH8.0,加水至1000ml. 1mol/L的TBS缓冲液(pH8.0):在800ml水中溶解121gTris碱,用1N的HCl调至pH8.0,加水至1000ml. 酶消化液: a、0.1%胰蛋白酶液:用0.1%CaCl2(pH7.8) 配制。 b、0.4%胃蛋白酶液:用0.1N的HCl配制。 3%甲醇-H2O2溶液:用30%H2O2和80%甲醇溶液配制。 封裱剂: 甘油和0.5mmol/L碳酸盐缓冲液(pH9.0~9.5)等量混合 油和TBS(或PBS)配制 TBS/PBS pH9.0~9.5,适用于荧光显微镜标本;pH7.0~7.4适合于光学显微镜标本 免疫组化实验操作流程: 脱蜡和水化 脱蜡前,应将组织芯片在室温中放置60分钟或60℃恒温箱中烘烤20分钟。 组织芯片置于二甲苯中浸泡10分钟,更换二甲苯后再浸泡10分钟; 无水乙醇中浸泡5分钟 95%乙醇中浸泡5分钟 70%乙醇中浸泡5分钟

ELISA试剂盒研发历程

ELISA试剂盒研发历程

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

江苏科晶生物科技有限公司拥有良好信誉,的实验团队,丰富的实验经验,热情的销售人员专业经销众多生命科学领域的ELISA试剂盒,标准品,细胞,生化试剂,抗体,培养基,血清,实验耗材,实验设备等实验室用品,是你采购的选择!。 ELISA实验目的:ELISA试剂盒用于测定血清、血浆及相关液体样本中所检测指标的含量。 ELISA实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人所检测指标的 水平。用纯化的所检测指标的t抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入所检测指标的,再与HRP标记的所检测指标的抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的所检测指标的呈正相关。用酶标仪在150nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人所检测指标的浓度。 注意事项: 1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6. 底物请避光保存。 7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9. 本试剂不同批号组分不得混用。 江苏科晶生物为科研试剂供应商之一,质量被全国各大院校科研机构认可,并为Elisa试剂盒长期供应商,作为战略合作伙伴。我公司一直秉持着顾客的需

HA标签融合蛋白-纯化,检测,封闭供你所需

HA标签融合蛋白-纯化,检测,封闭供你所需

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

HA标签来源于人类流感血凝素的98-106位氨基酸,具很强的免疫反应性,被广泛用于HA融合目的蛋白的分离、纯化、检测和示踪。重组的HA标签蛋白可以使用偶联有HA高 特异性单克隆抗体的树脂来完成纯化。   PurKine™抗DDDDK标签树脂4FF已广泛用于Flag融合蛋白的亲和纯化。树脂由90μm交联的4%琼脂糖珠组成,已经偶联了DYKDDDDK标签的小鼠单克隆抗体。测试确认性能等于或超过其他供应商的流行防DDDDK标签树脂,并且在至少五次重复使用后不会降低性能。此外,其高流动性能使其适用于放大。   产品名称 产品形式 货号 规格 PurKine™ Anti-HA Tag Resin 4FF Agarose Resin BMR21504 1ml/5ml/50ml   图1、Abbkine PurKine™是一系列独特的净化产品组合,可用于固定树脂,预包装旋转柱和全套工具,可用于大多数样品的纯化和制备。   图2、与传统的树脂生产方法相比,Abbkine正在利用的合成工艺,采用技术进行树脂开发和配件优化。PurKine™工具可用于您的样品从融合蛋白,核酸,抗体和生物分子标记,提高生产力,简化工作流程和节省成本。   特点与优势 •高容量 - 每mL树脂超过1mg DYKDDDDK标记的蛋白质。 •成本效益 - 至少五次重复使用同一批树脂后性能下降。 •灵活 - 多种格式,包括散装树脂,旋转柱和成套工具。 •坚固耐用的高交联珠粒可承受高达300厘米/小时的线性流速。 产品名称 产品形式 货号 规格 Anti-HA Tag Mouse Monoclonal Antibody (4F6) WB/IF/IP A02040 50ul/200ul/1ml/10ml Anti-HA Tag Rabbit Polyclonal Antibody  WB/IP ABP50078 30ul/100ul/200ul/10ml HRP Conjugated Anti-HA Tag Mouse Mab (4F6) WB A02045 30ul/100ul/200ul/10ml HA Tag Peptide WB/BL PRQ100040 5mg/20mg/100mg 武汉艾美捷作为Abbkine中国区域总代理,艾美捷将为客户提供的常规免疫学试剂,如各种标签抗体、内参抗体

Protein A 标签融合蛋白-纯化

Protein A 标签融合蛋白-纯化

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

Protein A 标签融合蛋白-纯化 串联亲和纯化(TAP)是一种研究蛋白质相互作用的技术,与常规的亲和纯化系统不同,TAP通过两步亲和纯化,可有效减少非特异性结合的假阳性。Protein A 标签就被广泛应用在TAP技术中。PurKine™Protein A-Tag IgG Resin 4FF以高度交联的4%琼脂糖凝胶为基质,共价偶联有人IgG,可以在较高流速下,实现对Protein A融合蛋白的纯化。 Protein A标签蛋白纯化工具 使用protein A Tag IgG树脂填料,纯化Protein A融合蛋白 产品名称 产品形式 货号 规格 PurKine™ Protein A-Tag IgG Resin 4FF  Agarose Resin BMR21604 2ml/10ml/50ml/100ml   武汉艾美捷作为Abbkine中国区域总代理,艾美捷将为客户提供的常规免疫学试剂,如各种标签抗体、内参抗体、常规一抗以及全系列二抗,抗体检测底物,蛋白质纯化产品以及相关试剂盒等。同时我们作为多家的的中国代理或区域代理,艾美捷能为您提供系列的实验室解决方案。如果您对上述AmCyan抗体产品感兴趣。

质粒提取

质粒提取

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

一、导论 已经提出过许多方法用于从细菌中提纯质粒dna, 这些方法都含有以下3个步骤: (一)细菌培养物的生长 从琼脂平板上挑取一个单菌落,接种到培养物中(有含有行当抗生素的液体培养基中生长),然后从中纯化质粒,质粒的提纯几乎总是如此。现在使用的许多质粒载体(如pUC系列)都能复制到很高的拷贝数,惟致只要将培养物放在标准LB 培养基中生长到对数晚期,就可以大量提纯质粒。此时,不必造反性地扩增质粒DNA。然而,较长一代的载体(如pBR322)由于不能如此自由地复制,所以需要在得到部分生长的细菌培养物中加入氯霉素继续培养若干小时,以便对质粒进行性扩增。氯霉素可抑制宿主的蛋白质合成,结果阻止了细菌染色体的复制,然而,松弛型质粒仍可继续复制,在若干小时内,其拷贝数持续递增。这样,像pBR322-类的质粒,从经氯霉素处理和未经处理的培养物中提取质粒的产量迥然不同,前者大为增高。多年来,加入足以完全抑制蛋白质合成的氯霉素μg/ml)已成为标准的操作、用该方法提取的质粒DNA量,对于分子克隆中几乎所有想象到的工作任务。 (二)细菌的收获和裂解 细菌的收获可通过离心来进行,而细菌的裂解则可以采用多种方法中的任意一种,这些方法包括用非离子型或离子型去污剂、有机溶剂或碱进行处理及用加热处理等。选择哪一种方法取决于3个因素:质粒的大小、小肠杆菌菌株及裂解后用于纯化质粒DNA的技术。 尽管针对质粒和宿主的每一种组合分别提出的裂解条件不切实际,但仍可据下述一般准则来选择适当方法,以取得满意的结果。 1)大质粒(大于15kb)容易受损,故应采用漫和裂解法从细胞中释放出来。将细菌悬于蔗糖等渗溶液中,然后用溶菌酶和EDTA进生处理,破坏细胞壁和细胞外膜,再加入SDS一类去污剂溶解球形体。这种方法zui大限度地减小了从具有正压的细菌内部把质粒释放出来所需要的作用力。 2)可用更剧烈的方法来分离小质粒。在加入EDTA后,有时还在加入溶菌酶后让细菌暴露于去污剂,通过煮沸或碱处

酶联免疫吸附实验(ELISA)实验方法

酶联免疫吸附实验(ELISA)实验方法

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

酶联免疫吸附实验(ELISA) 酶免疫测定是将抗原抗体反应的高度特异性和酶的催化作用相结合,发展建立一种非放射性标记免疫分析方法。由于ELISA具有灵敏度高、特异性强,酶免疫试剂的性质比较稳定,操作方法简便快速、无放射性污染以及应用范围广等很多优点,在医学基础理论研究,临床病毒学和生物化学检验等工作中应用十分广泛。 该法需将纯化的抗原包被在固相载体,与一定稀释度的待侧血清反应,然后与酶标记的第二抗体(抗人IgG,IgA,IgM或抗人IgG.A.M的混合物)反应,酶可催化色原反应,在酶标测定仪一定波长下进行比色,测定吸光度。 ELISA试剂盒的关键是要具备高质量纯化或重组的抗原,对生产厂家的抗原要求很高。由于纯化的或重组的抗原越来越多,以及商品化的高质量的ELISA试剂盒的面市,它应用于临床免疫实验室的自身抗体的检测已日渐增多,该法检测自身抗体快速、敏感及特异性高。 免疫荧光法----自身抗体诊断的标准技术(IFA) 免疫荧光测定法可分为直接和间接两类,在自身抗体检测中,以间接免疫荧光法zui为常用。由于自身抗原的位置决定了其相应的抗体的典型荧光模式,该法能通过显微镜观测地判断组织或细胞内荧光的分布。 将已稀释血清与实验基质进行温育,令特异性抗体与实验基质中相应抗原结合,然后再与荧光标记的第二抗体温育,zui后在荧光显微镜下观察相应部位的特异性荧光模式。 此方法敏感、重复性好。但需要一台质量较好的荧光显微镜,且对操作人员要较高,操作复杂耗时长,繁琐。 免疫印迹法(Immunoblot assay)(westerblot) 此法是将聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白及多肽与免疫反应的高特异性相结合的一项技术。蛋白质在电泳中依分子量大小分离,然后将分离好的蛋白转印到硝酸纤维薄膜上,用酶标记的抗体或蛋白A进行染色。该法简单、快速。是目前美国、中国等上众多国家卫生机构的zui终确认方法。但其制备方法繁琐、成本相对较高。

血清使用过程中的常见问题

血清使用过程中的常见问题

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

有关血清的问题,数十年来我们始终面临的是同样的问题。因此,我们特别整理了一些实验室里常会遇到的问题,供大家参考: 1、如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?     将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。     长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。     建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。 2、血清中包含絮状沉淀,它们是什么,怎么处理?     沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除去沉淀,离心血清(400g,1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部,将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以,使用产品时要摇动并加热血清至37℃,沉淀会自然消失。 3、如何避免血清中产生沉淀? 按如下操作可避免沉淀的产生: (1)解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。 (2) 血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。 (3) 勿直接由-20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。 (4) 勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质。 (5) 血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。 (6) 若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。

无血清培养基优点

无血清培养基优点

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

1、含血清成分培养体系的劣势培养动物细胞,无论是为了增殖病毒,还是为了获得相关的生物制品,都力求使细胞大规模、高密度生长,并在高密度下维持高的细胞活性,简化下游纯化工艺,提高生物制品的安全性和产率,降低产品的成本,提高市场竞争力。但是常规细胞培养基的组分——血清的存在严重制约了动物细胞的规模培养,使用户不得不每次都要费心挑选出不同批次的血清中质量。 2、无血清培养体系的优势无血清培养基(serum free medium, SFM):是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。简单地认为是体外细胞培养过程中的细胞培养基中不含有动物或人的血清,称为无血清细胞培养基。无血清培养基的基本配方是基本成分为基础培养基及添加组分两大部分。大多数的无血清培养基含有必须的向细胞内转运离子的转铁蛋白和调节葡萄糖摄取量的胰岛素,以及一些蛋白质如纤连蛋白、球蛋白、细胞生长因子等。

培养基箱体操作设备结构与注意事项

培养基箱体操作设备结构与注意事项

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

隔水式恒温培养基箱(以下简称培养箱)外形为立式。箱体和外箱门采用钢板、表面喷塑,箱门采用钢化玻璃观察窗,能清晰直接观察箱内的培养基,工作室(内胆)采用不锈钢亚弧焊接制成,可任意改变搁板的高度。外门与箱体磁性门封条,以保证工作室的密封性。工作室采用“U”型水箱隔水加热,箱体左上侧有一加水口,左下侧有一放水口,左背后有一溢水橡皮管。工作室后背装有一只低噪声小型风机,保证箱内温度均匀性。箱体外壳和工作室间填充超细玻璃棉隔热。   培养基控温系统由传感器(Pt100铂电阻)、温度控制器、加热器等组成,当温度控制器接受传感器输出电阻信号(0℃时为100Ω,0.3Ω/℃)后,在PV屏显示工作室内测量实际温度,当输入信号小于设定值时,功率管(双向可控硅)导通,使加热器获得足够的电功率产生热量。反之,功率管无电功率输出加热器不加热。温度控制器具有PID调节输出特性、电功率输出大小可调、测量温度的误差校正、定时控制及改变等功能及超温或高、低水位有灯光及自动切断输出报警的安全功能。 培养基操作箱的注意事项: 1.打开包装箱时,应检查设备外观是否有损坏 2.箱外壳必须有效接地,以保证使用安全; 3.培养基箱应放置在具有良好通风条件的室内,在其周围不可放置易燃易爆物品; 4.培养箱无防爆装置,不得放入易燃易爆物品; 5.箱内物品放置切勿过挤、过重,四周必须留出空间,以利热空气循环,防止搁条损坏; 6.箱内外应经常保持清洁,如长期不用,应将水套内的水放掉,在电镀件上涂中性油脂或凡士林,以防腐蚀,培养箱外面套好塑料防尘罩,将培养箱放在干燥的室内,以免温度控制器受潮损坏; 7.过程中发现培养基箱内相对湿度不够,可放一水盘,通过水自然蒸发,一般可达90%RH左右; 8.在夏季环境温度较高时,当设定温度低于40℃时,应采用“空调”降低环境温度保持(25~28)℃之间,(夜间必须保持此温度)以避免引起温度失控,产生静差。

ELISA试剂盒载体的形状

ELISA试剂盒载体的形状

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

ELISA试剂盒载体的形状主要有三种:微量滴定板、小珠和小试管。以微量滴定板zui为常用,于EILSA的产品称为ELISA板,上标准的微量滴定板为8×12的96孔式。为便于作少量标本的检测,有制成8联孔条或12联孔条的,放入座架后,大小与标准ELISA板相同。ELISA板的特点是可以同时进行大量标本的检测,并可在特制的比色计上迅速读出结果。现在已有多种自动化仪器用于微量滴定板型的ELISA试剂盒检测,包括加样、洗涤、保温、比色等步骤,对操作的标准化极为有利。聚苯乙烯经射线照射后,其吸附性能特别是对免疫球蛋白的吸附性能增加,应用于双抗体夹心法可使固相上抗体量增多,但用于间接法测抗体时空白值较大。