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胰岛素的说明及用途
作者:德尔塔 日期:2022-04-11
胰岛素是由胰脏内的胰岛β细胞受内源性或外源性物质如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等的刺激而分泌的一种蛋白质激素。胰岛素是机体内降低血糖的激素,同时促进糖原、脂肪、蛋白质合成。外源性胰岛素主要用来糖尿病**。 【用途】 本品系胰岛素的干燥粉末,充氮熔封于硬质玻璃管中。供作胰岛素生物检定用。【效价】 本品每毫克相当于27 单位。【装量】约20 mg。【标准溶液的配制】 迅速精密称取本品适量,精确加每100 ml中含0.2 g 的甲酚并用0.1 mol/L 盐酸调节pH 为2.5 的0.9%氯化钠溶液,溶解使每毫升含20 IU,分装熔封于2ml 安瓿中(安瓿于120℃烘干1 小时),置冰箱内贮存,如无沉淀析出可使用6个月。试验当日用pH 2.5 的0.9%氯化钠溶液稀释至所需浓度。【保存条件】本品应避光冷藏。 我司热卖胰岛素产品,还提供各种生物学检测试剂盒,进口常规生化试剂、抗体、化学试剂、药典级试剂、标准品、血清等产品,现折扣优惠,敬请来电订购! 原创作者:德尔塔
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德尔塔阐述人雌二醇(E2)的临床意义
作者:德尔塔 日期:2022-04-11
雌二醇为经皮肤吸收的雌激素**剂。补充女性卵巢分泌的17-β雌二醇的不足,同时又可避免因口服引起的副作用(乳房疼痛、体重增加、高血压、胆结石及肝功能异常等)。雌激素能促使细胞合成DNA、RNA和相应组织内各种不同的蛋白质。 此临床意义为:1.增高 见于女性性早熟、男性乳房发育、妊娠(尤其双胎或多胎)、雌激素分泌瘤、促排卵药物(如氯来芬)、男性女性化、卵巢肿瘤、无排卵性子宫功能出血和肝硬化等。2.减低 见于卵巢肿瘤、葡萄胎、宫内死胎、妊娠高血压综合征、下丘脑肿瘤、腺垂体功能减低、卵巢功能不全、卵巢切除、青春期延迟、原发性和继发性闭经、绝经、口服避孕药等。3、雌二醇值增高的病理病因 1)卵巢疾患:卵巢颗粒层细胞瘤、卵巢胚瘤、卵巢脂肪样细胞瘤、性激素生成瘤等,均表现卵巢功能亢进,雌二醇分泌量增加。2)心脏病:心肌梗塞、心绞痛、冠状动脉狭窄。3)其它:系统性红斑狼疮、肝硬化、男性肥胖症。4、雌二醇降低的病理原因 1)卵巢疾病:卵巢缺如或发育低下,原发性卵巢衰竭、卵巢囊肿。2)垂体性闭经或不孕。3 )其它:甲低或甲亢、柯兴氏综合征、阿狄森氏病、恶性肿瘤、较大范围的感染、肾功能不全、脑及垂体的局灶性病变等,均可使血浆雌 二醇降低。 我司德尔塔一家知名的elisa试剂盒供应商,提供人雌二醇(E2) ELISA试剂盒ELISA试剂盒,生化法试剂盒,放免试剂盒等.全程提供技术指导,提供售后服务,有质量问题免费包退换,免除您实验的后顾之忧。如有需要欢迎联系! 原创作者:德尔塔
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关于丙二腈,你了解多少
作者:德尔塔 日期:2022-04-11
主要成分: 纯品 外观与性状: 无色结晶。 熔点(℃): 30.5 沸点(℃): 220 相对密度(水=1): 1.05 饱和蒸气压(kPa): 2.67(109℃) 燃烧热(kJ/mol): 1650.3 闪点(℃): 112 溶解性: 溶于水、醇、苯,微溶于氯仿、乙酸。 丙二腈,毒性似。的特异作用为抑制细胞呼吸,造成组织缺氧。大鼠皮下注射近致死量的本品,出现呼吸困难、紫绀和抽搐,尿中硫氰酸盐排出量增加。 环境危害: 对环境有危害,对水体可造成污染。 燃爆危险: 本品可燃,高毒。 危险特性: 加热至 120℃,与碱性物质接触,立即猛烈聚合。受高热分解放出有毒的气体。 用途:有机合成原料。医药方面,用于合成维生素B1、甲氨蝶呤、氨苯喋啶等一系列重要药物。染料方面、农药方面及其他方面都有重要的用途。也可用作金的萃取剂。 采取措施: 皮肤接触:立即脱去污染的衣着,用流动清水或5%硫代硫酸钠溶液彻底冲洗至少20分钟。就医。 眼睛接触:提起眼睑,用流动清水或生理盐水冲洗。就医。 吸入:迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。如呼吸困难,给输氧。呼吸心跳停止时,立即进行人工呼吸(勿用口对口)和胸外心脏按压术。给吸入亚硝酸异戊酯,就医。 食入:饮足量温水,催吐。用1:5000高锰酸钾或5%硫代硫酸钠溶液洗胃。就医。危险特性:加热至 120℃,与碱性物质接触,立即猛烈聚合。受高热分解放出有毒的气体。 有害燃烧产物:一氧化碳、二氧化碳、氮氧化物。 灭火方法:采用抗溶性泡沫、干粉、二氧化碳、砂土灭火。禁止使用酸碱灭火剂。 操作注意事项:严加密闭,提供充分的局部排风和全面通风。操作尽可能机械化、自动化。操作人员必须经过专门培训,严格遵守操作规程。建议操作人员佩戴自吸过滤式防毒面具(全面罩),穿聚乙烯防毒服,戴橡胶手套。远离火种、热源,工作场所严禁吸烟。使用防爆型的通风系统和设备。避免产生粉尘。避免与氧化剂、还原剂、酸类接触。充装要控制流速,防止静电积聚。搬运时要轻装轻卸,防止包装及容
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德尔塔:细胞自噬研究
作者:德尔塔 日期:2022-04-11
细胞自噬(autophagy)是依赖溶酶体途径对胞质蛋白和细胞器进行降解的一种过程,在进化上具有高度保守性,广泛存在于从酵母、线虫、果蝇到高等脊椎动物的细胞中。细胞通过对自噬底物的识别、自噬囊泡的形成,再经过与溶酶体的融合,清除老化细胞器以及降解长周期蛋白和异常积聚蛋白。因此,自噬在蛋白质的代谢、细胞器更新以及组织发育中有着重要作用,其功能调控直接参与了机体对细胞稳态的维持和对疾病的抵抗。 目前已有大量研究表明,自噬与疾病的发生密切相关,如心血管病、肿瘤、炎症和免疫以及神经退行性疾病等。对于细胞自噬更深层次的理解,将对健康医疗有极大的促进和帮助作用。(2016年生理学与医学奖刚刚就颁给了细胞自噬哦~) 下面就来跟大家分享一下细胞自噬研究前沿成果: 无法正常清除死细胞可能会导致红斑性狼疮(SLE)。有一种非传统自噬路径靠着LC3关联的吞噬作用(LAP)曾被发现可以召集自噬作用的分子成分,促进吞噬作用成熟已达成死细胞清除。一项新研究发现若是这种非传统吞噬作用,而不是传统的自噬作用有缺陷,小鼠会产生类似SLE的症状。 (Nature, 2016) 自噬作用是一个高度保守的细胞机制。以往自噬作用的细胞质分子成分已循序的被发现,但是它的基因转录及调控并不为人所知。新的发现证实一种组蛋白精氨酸甲基转移酶CARM1是一个转录因子EB TFEB 重要的共机活因子。它可在细胞饥饿的状况下经由 AMPK-SKP2-CARM1 信号轴心来引导自噬作用。(Nature, 2016) 鞣花酸代谢物 Urolithins 是鞣花单宁的代谢分子,它存在于石榴,坚果及浆果。新研究发现 Urolithin A (UA) 可以增强秀丽隐杆线虫(C. elegans) 的健康度以及延长其寿命。UA可引导粒线体的自噬作用,并防止有功能障碍粒线体的累积。在啮齿动物理,UA可经由粒线体引发增进运动能力,这些新的发现建议UA在增进粒线体和肌肉功能方面有医药潜力。(Nature Medicine, 2016) 自噬作用失调: 疾病和基因 德尔塔公司主要代理产品: E
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德尔塔:细胞培养的注意事项
作者:德尔塔 日期:2022-04-11
1)切记,细胞培养基的储存条件是2-8℃。如果细胞培养基不小心被冻,您应该融化培养基并观察是否有沉淀产生。如果没有沉淀产生,培养基可以正常使用,如果出现沉淀,只能丢弃这些培养基。 2)贮存在冰箱中的瓶口已开的培养基,可能在放置几天后颜色变紫。这主要是由于在暴露到周围的CO2水平时,碳酸氢钠导致了pH值的上升。您可以在使用前松开瓶口,在CO2培养箱孵育培养基10-15min,来校正溶液的pH值(确定松开瓶口以保证气体交换)。 3) 当在无血清培养基中添加抗生素时,降低至少在有血清培养基中所使用浓度的50%。血清蛋白会结合和灭活一些抗生素。在无血清培养条件下,抗生素不被灭活,可能对于细胞达到毒性水平。 4)一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时,您应该在两到三周内使用它。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。 5)总之,大部分添加物和试剂*多可以冻融3次,如果次数更多都会在包含蛋白的溶液引起一定水平的降解和沉淀,将会影响它的性能。 6)血清的热灭活在免疫分析时可以灭活补体系统。在免疫学研究,培养ES细胞,昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。热灭活是以往公认的操作步骤,并没有确凿的证据说明这样做是有益的。相反,对大部分细胞而言,GIBCO和HyClone都不推荐热灭活血清。因为加热可能使血清中的沉淀增加,使您误以为污染。 7)在进行传代培养时,我们强烈推荐进行台盼兰活性记数。研究者常常通过一个简单的稀释(1∶4或1∶2)进行传代,不进行活性检测,您可能接种比你认为的低得多的浓度的细胞,这常常可能导致生长缓慢或培养物根本不生长。 8)在订购的细胞到达后,应立即复苏,如果培养基还没有准备好,可将其放入液氮中,尽快复苏。千万不能放置在-20或-80℃的冰箱内。 9)细胞复苏往往是比较容易出问题的步骤。请在订购细胞时就向供应商索取详细的复苏步骤,并仔细阅读。有些供应商就不推荐在复苏时离心,对此类细节,应特别留意。 10)如
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德尔塔:常见蛋白表达系统
作者:德尔塔 日期:2022-04-11
在生物学研究中,重组蛋白的研究越来越受到关注,而重组蛋白*为重要的莫过于表达系统的选择。蛋白表达系统是指用模式生物如细菌、酵母、动物细胞或者植物细胞表达外源基因蛋白的一种分子生物学技术。常见的蛋白表达系统分为原核表达系统和真核表达系统,具体又可以细分多种,每一种有各自的优缺点。在此,小编给大家整理了各表达系统间的差异,供大家参考。 表达系统 代表工程菌株 特点 产量 原核生物 大肠杆菌 BL21-PET系统 具有原核细胞良好的可操作性,成本低,产率高,但不能进行糖基化修饰,胞内分泌形成包涵体,且易产生内毒素。 外源蛋白占细菌总蛋白量:胞内表达10%-70%,胞外表达0.3%-4%。 枯草芽孢杆菌 B.subtilis系统、B. brevis系统 细胞壁不含内毒素,很强的胞外分泌蛋白能力,蛋白酶易对目的蛋白降解,重组表达质粒不稳定,真核蛋白分泌量低。 外源蛋白占菌体总蛋白量: 10%-30%。
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看你对Schiff氏试剂显色的了解
作者:德尔塔 日期:2022-04-11
Schiff 试剂,中文全称为:品红醛试剂,主要用于生物学实验中鉴定DNA的存在。 Schiff 试剂是由碱性品红和亚硫酸钠配制而成。可以和醛基反应形成紫红色的溶液。在生物实验可以和经过酸化的DNA 发生反应,DNA 被染成紫红色,而不和核仁,细胞质发生反应,因此可以来鉴定DNA的存在。 称取0.5g碱性品红加入到100ml煮沸的蒸馏水中(用三角瓶),时时振荡,继续煮5min(勿使之沸腾),充分溶解。然后冷却致50℃时用滤纸过滤,滤液中加入10ml1mol/LHCl,冷却致25℃时,加入0.5g偏重亚硫酸钠(Na2S2O5)或偏重亚硫酸钾(K2S2O5),充分振荡后,塞紧瓶塞,在室温暗处静置至少24h(有时需要2至3天),待溶液红色褪去,呈现无色或淡黄,然后加入0.5g活性碳,用力振荡一分钟,*后用粗滤纸过滤于棕色瓶中,封瓶塞,外包黑纸。滤液应为无色也无沉淀,贮于冷暗处(如4℃冰箱中)备用,可保持数月或更长时间。如有白色沉淀,就不能再使用,如颜色变红,可加入少许偏生亚硫酸钠或钾,使之再转变为无色时,仍可再用。 schiff试剂染色DNA时需在避光条件下进行。与shiff试剂反应的DNA,必须是被解离过的,因为显色原理是DNA中醛基与无色品红结合得到,而完整双链DNA也无醛基的,只有被水解后碱基与脱氧核糖之间的键打开,才会在脱氧核糖上形成游离醛基。因此schiff常与过碘酸试机合用,过碘酸用以把脱核糖和糖类的羟基氧化成醛基,从而使得schiff碱得以与之结合,这正是PAS染色的基本原理。 希夫试剂遇醛类都显紫红色吗? 关于这个问题,许多有机化学书上都是这样叙述的:“希夫试剂又称品红醛试剂,它与醛类作用显紫红色,反应很灵敏,而酮类不与希夫试剂作用,因此希夫试剂常用于鉴别醛和酮”。 希夫试剂(Schiff)又称品红亚硫酸试剂。品红是一种红色染料,将二氧化硫通入品红水溶液中,品红的红色褪去,得到的无色溶液称为品红亚硫酸试剂。它能跟醛作用显紫色,与酮作用不显色。这一显色反应非常灵敏,可用于鉴别醛类化合物。使用这种方
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科普:正确配置DNS试剂的步骤
作者:德尔塔 日期:2022-04-11
DNS试剂,一种可用于物质中还原糖含量测定的试剂。用途是1.在生化试验中,DNS常用于还原糖含量的测定;也可用于生物质中半纤维素含量的测定。它们均要与标准葡萄糖曲线进行比对。 酒石酸钾钠18.2g,溶于50ml蒸馏水中,加热,于热溶液中依次加入3,5-二硝基水杨酸0.63g,NaOH2.1g,苯酚0.5g,搅拌至溶,冷却后用蒸馏水定容至100ml,贮于棕色瓶中,室温保存。但是一定要注意,3,5-二硝基水杨酸和NaOH的加入时间一定要很近,或者是先加入NaOH。否则会产生难溶的沉淀,导致配制溶液失败。且配置过程中,溶液加热温度不宜超过50摄氏度。 DNS试剂配制标准: Ghose法 DNS试剂的配制 甲液:将6.9 g结晶苯酚溶于15.2 mL10%NaOH溶液,蒸馏水稀释至69 mL,在此溶液中加入6.9 g亚硫酸氢钠。 乙液:将255 g酒石酸钾钠溶于300 mL10%NaOH溶液中,再加入880 mL1%的3,5-二硝基水杨酸溶液。 将甲乙二溶液混合即得黄色试剂,储于棕色瓶中放置7-10 d后使用。在棕色瓶内保存一年有效。 轻工业部标准DNS试剂的配制 称取3,5—二硝基水杨酸(10土0.1) g,置于约600 mL水中,逐渐加入氢氧化钠10 g,在50 ℃水浴中(磁力)搅拌溶解,再依次加入酒石酸甲钠200 g、苯酚(重蒸)2 g和无水亚硫酸钠5 g,待全部溶解并澄清后,冷却至室温,用水定容至1000 mL,过滤。贮存于棕色试剂瓶中,于暗处放置7 d后使用。 农业部标准DNS试剂的配制 称取3,5-二硝基水杨酸3.15 g(化学纯),加水500 mL。,搅拌5 s,水浴至45 ℃。然后逐步加入100 mL 0.2g/ mL的氢氧化钠溶液,同时不断搅拌。直到溶液清澈透明(注意:在加入氢氧化钠过程中,溶液温度不要超过48℃)。再逐步加入四水酒石酸钾钠91.0 g、苯酚2.50 g和无水亚硫酸钠2.50 g。继续45 ℃水浴加热,同时补加水300 mL,不断搅拌,直到加入的物质完全溶解。停止加热,冷却至室温后,用水定容至1000 mL。用烧结玻璃过滤器过滤。取滤液,储存在棕色瓶中,避光保存。室温下存放7 d后可以使用,有效期为
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免疫组化的技术发展
作者:德尔塔 日期:2022-04-11
一、免疫组化技术的基本原理 应用免疫学及组织化学原理,对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。 众所周知,抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性,即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来,以其作为抗原或半抗原去免疫小鼠等实验动物,制备特异性抗体,再用这种抗体(抗体)作为抗原去免疫动物制备第二抗体,并用某种酶(常用辣根过氧化物酶)或生物素等处理后再与前述抗原成分结合,将抗原放大,由于抗体与抗原结合后形成的免疫复合物是无色的,因此,还必须借助于组织化学方法将抗原抗体反应部位显示出来(常用显色剂DAB显示为棕黄色颗粒)。通过抗原抗体反应及呈色反应,显示细胞或组织中的化学成分,在显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物,从而能够在细胞或组织原位确定某些化学成分的分布、含量。组织或细胞中凡是能作抗原或半抗原的物质,如蛋白质、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、受体、酶、激素、核酸及病原体等都可用相应的特异性抗体进行检测。 二、免疫组织化学染色方法 1、按标记物质的种类,如荧光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等,可分为免疫荧光法、放射免疫法、酶标法和免疫金银法等。 2、按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二步、三步或多步法);与直接法相比,间接法的灵敏度提高了许多。 3、按结合方式可分为抗原—抗体结合,如过氧化物酶-抗过氧化物酶(PAP)法和亲和连接,如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)法、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法等,其中SP法是*常用的方法。 三、几种常用免疫组织化学方法的原理 1、免疫荧光方法 是*早建立的免疫组织化学技术。它利用抗原抗体特异性结合的原理,先将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察。当抗原
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探究人免疫球蛋白G
作者:德尔塔 日期:2022-04-11
人免疫球蛋白G是由健康人的血浆制备而成的生物制剂。含蛋白质100g/L。其中人免疫球蛋白(γ球蛋白)含量不低于90%,IgG 分子单体加二聚体含量不低于90%。含甘氨酸22.5g/L,氯化钠9g/L。 主要用于预防麻疹和传染性肝炎。若与抗生素合并使用,可提高对某些严重细菌和病毒感染的疗效。是预防和防止感染的进一步扩散的作用。 抗体能产生千百万种不同的免疫球蛋白分子,几乎所有进入体内的抗原,都可与相对应的抗体起特异性反应。能够编码如此大量抗体的遗传物质,即基因,从何而来,主要有六种学说对此加以解释。① 胚系学说。早期观点认为人生下来,就有配备齐全的用于编码抗体分子的全部基因,它通过生殖细胞遗传下去。随后得知,每个淋巴细胞皆具有Ig分子的遗传信息,这样,VL和VH基因产物提供了与各种抗原结合的位点,这种Ig基因的亲代与子代垂直遗传的关系,保证了子代细胞基因中V、D、J片段的多样性。② 体细胞突变学说。认为每一个生殖细胞并非具有形成Ig分子的全部遗传信息,它仅继承了少数V区基因。但在个体发育过程中,由于体细胞突变,V基因产生多样性。为此,每一免疫细胞皆可表达不同的特异性。③ 自由组合学说。Ig可变区(V区)分为 V片段、D片段及J片段。这些基因自由组合,构成具有一个V-J编码的轻链和具有一个 V-D-J编码的重链。进而可组合成很多具有轻、重链的 V区。V区基因再与不同的C基因组成完整的轻重链的基因。轻重链的基因又可重新组合成更多的Ig基因。④ 连接多样性理论。编码κ轻链的第3可变区中第96位氨基酸的核苷酸,可因V,J片段结合时顺序的不同而产生多样性。这种连接顺序的多样性也存在于重链中。⑤ 多框架中D基因翻译的多样性。D基因编码Ig多样性时,按照三种框架进行翻译。首先是*合适的框架,其次为向前框架或向后框架。每一种翻译形式都可指导一个D片段翻译成多种氨基酸的顺序。具体到一个B细胞究竟采取哪一种形式,多取决于产生抗体的特异性。⑥ 小基因插入理论。在D片段和J片段连结过程中,V
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免疫组化切片注意事项
作者:德尔塔 日期:2022-04-11
切片组织得到很好处理后在进行切片之前还应对玻璃片进行处理,由于我们检测抗原是多种多样的,因染色操作程序复杂,时间较长,有些抗原是要进行各种抗原修复处理,如微波、高压、水溶酶等,玻片如果得不到很好的处理,将易造成脱片,为保证免疫组化实验的正常进行,要求在贴片前对载玻片作适当处理,必须在清洗干净的玻片上进行粘合剂的处理以防脱片。1)Poly-L-Lysine 一般采用分子量30000左右的0.5%多聚赖氨酸,也可用试剂公司出售的其浓溶液以1:10去离子水稀释。方法是将玻片浸泡其中,倾尽余液,在60℃温箱中烤干备用,此方法的优点是可以用于多种组织化学、免疫组化及分子学检测中的应用,粘贴效果,但价格稍贵。2)明胶硫酸铬钾法 将2.5g明胶加热溶于500ml蒸馏水中,完全溶解冷却后加入0.25g硫酸铬钾搅匀充分溶解即可使用。方法是将玻片浸泡其中2 min,取出控尽液体入温箱中烤干备用。此法价格便宜、方法简单,任何实验都可以使用,特别适用于大批量的使用,但应注意,如果液体变蓝或粘稠状停用。3)APES (3-氨丙基-乙氧基甲硅烷) 此法必须现用现配。将洗净玻片入1:50丙酮稀释的APES中,浸泡20s,取出稍停再入丙酮或蒸馏水中刷去末结合的APES晾干即可。用此方法粘合的玻片应垂直烤片不能平拷,否则组织片中易出现气泡。 切片必须保持切片刀锐利,切片要薄而平整、无皱摺、无刀痕,如有上述问题的切片在进行免疫组化染色都将出现假阳性现象,切片厚度一般为3~4μm,切好的切片在60℃温箱中过夜,注意烤片的温度不宜过高,否则易使组织细胞结构破坏,而产生抗原标记定位弥漫现象。 原创作者:德尔塔
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超氧化物歧化酶-人体内的垃圾清道夫
作者:德尔塔 日期:2022-04-11
超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase简称SOD)是一种新型酶制剂。它在生物界的分布极广,几乎从动物到植物,甚至从人到单细胞生物,都有它的存在。SOD被视为生命科技中*具神奇魔力的酶、人体内的垃圾清道夫。SOD是氧自由基的自然天敌,是机体内氧自由基的头号杀手,是生命健康之本。 SOD是Super Oxide Dismutase 缩写,中文名称超氧化物歧化酶,是生物体内重要的抗氧化酶,广泛分布于各种生物体内,如动物,植物,微生物等。SOD具有特殊的生理活性,是生物体内清除自由基的首要物质。SOD在生物体内的水平高低意味着衰老与死亡的直观指标;现已证实,由氧自由基引发的疾病多达60多种。它可对抗与阻断因氧自由基对细胞造成的损害,并及时修复受损细胞,复原因自由基造成的对细胞伤害。由于现代生活压力,环境污染,各种辐射和超量运动都会造成氧自由基大量形成;因此,生物抗氧化机制中SOD的地位越来越重要! SOD类型:超氧化物歧化酶按其所含金属辅基不同可分为三种,种是含铜(Cu)锌(Zn)金属辅基的称(Cu.Zn—SOD),*为常见的一种酶,呈绿色,主要存在于机体细胞浆中;第二种是是含锰(Mn)金属辅基的称(Mn—SOD),呈紫色,存在于真核细胞的线粒体和原核细胞内;第三种是含铁(Fe)金属辅基的称(Fe—SOD),呈黄褐色,存在于原核细胞中。 作为一种生化酶制剂,广泛应用于临床和科研上,可抗衰老,抗肿瘤、调节人体内分泌系统,提高免疫力。 SOD测定虽然是一种非特异的辅助诊断指标,但对机体自由基代谢紊乱、自由基清除干预对策、以及对于同一病患者病程转归(自由基损伤的加剧或降低、自由基清除剂药物或手术**效果)的判断,实时动态监测具有重要参考价值。 原创作者:德尔塔
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德尔塔提供性激素6项放免实验代测
作者:德尔塔 日期:2022-04-11
德尔塔提供性激素6项放免实验代测 六大激素包括以下方面: 1、促卵泡成熟激素(FSH):是垂体前叶嗜碱性细胞分泌的一种糖蛋白激素,其主要功能是卵巢的卵泡发育和成熟。FSH值低见于雌、孕激素**期间、FSH值高见于卵巢早衰、原发性闭经等。 2、促黄体生成素(LH):主要功能是促进排卵,形成黄体分泌激素。血LH浓度,在排卵前期2-15U/L,排卵期20-100U/L,FSH如再加高LH,则卵巢功能衰竭已十分肯定。LH/FSH>=3,则是诊断多囊卵巢综合征的依据。 3、催乳素(PR1):主要功能是促进乳腺的增生及乳汁的生成和排乳。在非哺乳期,血PR1正常值为0.08-0.92nmol/L。高于1.0nmol/L即为高催乳素血症。 4、雌二醇(E2):由卵巢的卵泡分泌。主要功能是使子宫内腺生长成增殖期,血E2的浓度在排卵期为48-52lpmol/L,排卵期370-1835pmol/L,排卵后期272-793pmol/L。 5、孕酮(P):由卵巢的黄体分泌。主要功能是促使子宫内膜从增殖期转变为分泌期。排卵后期7.6-97.6nmol/L。排卵后期血P值低,见于黄体功能不全、排卵型子宫功能失调性出血。 6、睾酮(T):女性体内睾酮,5主要功能是促进阴蒂、阴唇和阴阜的发育,对雄激素有拮抗作用,对全身代谢有一定影响。女性血浆睾酮水平在0.7-2.1nmol/L,T值高,可引起女性不育。 德尔塔是专业的放免检测机构,我们有熟练的技术人员,专业的检测仪器,精准的试剂盒,为您提供优质放心的代测服务。放免代测时间为7-10个工作日,提供原始数据,实验数据,标曲数据,实验室仪器型号,产品说明书等,欢迎来电咨询! 原创作者:德尔塔
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ELISA试验中细胞样本的处理
作者:德尔塔 日期:2022-04-11
对于培养细胞样品: 1. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的*终浓度为1mM。 2. 对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。 对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。 3. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。 裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。 对于组织样品: 1. 把组织剪切成细小的碎片。 2. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的*终浓度为1mM。 3. 按照每20毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。) 4. 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。 5. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。 6. 如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。 注:RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取
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“生命制品”白蛋白的神奇作用
作者:德尔塔 日期:2022-04-11
人血白蛋白,是由健康人体血浆经低温乙醇蛋白分离法提取,并经病毒灭活处理制成。白蛋白的分子结构已于1975年阐明,为含585个氨基酸残基的单链多肽,分子量为66458,分子中含17个二硫键,不含有糖的组分。在体液pH7.4的环境中,白蛋白为负离子,每分子可以带有200个以上负电荷。它是血浆中很主要的载体,许多水溶性差的物质可以通过与白蛋白的结合而被运输。这些物质包括胆红素、长链脂肪酸(每分子可以结合4-6个分子)、胆汁酸盐、前列腺素、类固醇激素、金属离子(如Cu2+、Ni2+、Ca2+)药物(如阿司匹林、青霉素等)。人血清白蛋白(HSA)是由肝脏合成的,含量丰富的多功能非糖基化血浆蛋白,具备多种生理功能。白蛋白通常占血浆蛋白质总含量的50%以上,浓度约为0.6mmol/L。HSA是小的球形蛋白质,由585种氨基酸组成的 (66-69kd),有许多带电的残基(例如赖氨酸、天冬氨酸和没有辅基的基团或者碳水化合物),有少量的色氨酸或者甲硫丁氨酸残基。X线衍射晶体分析法显示白蛋白有一个心形的三级结构,但在HSA溶液中为椭圆体。大约67%的HSA三级结构由多个α螺旋组成。实际上,蛋白是由3个对应结构域组成(Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ),每一个含有两个亚级结构域(A和B),每个亚级结构域又由6个α螺旋组成。两个亚级结构通过脯氨酸残基提供灵活的环结构作相对移动,这有助于结合物质,就如结构域之间二硫键连接那样灵活。HSA包含35个半胱氨酸残基,其中大部分形成二硫键(共17个),构成整个的三级结构。生理作用(1)维持血浆胶体渗透压的恒定白蛋白是血浆中含量*多、分子*小、溶解度大、功能较多的一种蛋白质。水肿。(2)血浆人血白蛋白的运输功能血浆白蛋白能与体内许多难溶性的小分子有机物和无机离子可逆地结合形成易溶性的复合物,成为这些物质在血液循环中的运输形式。由此可见白蛋白属于非专一性的运输蛋白,在生理上具有重要性,与人体的健康密切相关。人血白蛋白,适用于低蛋白血症的防治,**肝硬化及肾病引起的水肿或腹水。(3)血浆白