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B-hCD137(4-1BB)在不同靶点癌症免疫**的作用
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
各位看官晚上好，欢迎来到百奥赛图知识扩展学院，今天小编带来一种因吹斯汀分子——B-hCD137(4-1BB)，相信各位都不会陌生呢。在目前嵌合抗原工程化T细胞（CAR-T）的开发过程中，4-1BB作为胞内信号共刺激分子具有重要作用，此外其抗肿瘤效用也被应用于不同靶点癌症免疫**研究以及临床。那么接下来，咱们就一起瞧瞧这个有趣的靶点分子吧~ B-h4-1BB基因功能简介 功能简介 4-1BB 即CD137，TNFRSF9（TNF receptor superfamily member 9）为TNF受体超家族成员，主要表达在活化的T细胞、NK细胞、单核细胞表面。通过连接其配体CD137L或利用激活型CD137单克隆抗体激活CD137，既能提供共刺激信号激活T细胞，使T细胞活化增殖并分泌细胞因子，同时它介导的共刺激信号能够诱导抗原提呈细胞增殖并分泌细胞因子。 许多实验表明干预CD137共刺激途经可以调节T细胞和抗原提呈细胞的功能产生抗肿瘤免疫作用，为肿瘤免疫**提供了新的靶点。 Figure 1. Multimerization of CD137 by natural ligand (CD137L) and agonist mAbs. 基本信息 打靶策略 B-h4-1BB蛋白表达分析 图2. B-h4-1BB人源化小鼠脾细胞活化及流式检测 结果显示：在C57BL/6小鼠中可检测到m4-1BB+细胞。在B-h4-1BB纯合鼠中，可检测到h4-1BB+细胞。 B-h4-1BB抗体药效验证 图3 利用B-h4-1BB小鼠进行抗人4-1BB 抗体（Urelumab Analog）药效验证实验 将小鼠结肠癌细胞MC38移植到B-h4-1BB纯合小鼠皮下，待肿瘤体积约150±50mm3时将动物入组至对照组和**组(n=6) 。 结果显示：抗人4-1BB抗体（Urelumab Analog）对肿瘤生长有非常明显的抑制作用。A. 肿瘤平均体积±SEM，B. 小鼠平均体重±SEM。结果证明：B-h4-1BB小鼠是评估人4-1BB抗体体内药效的有力工具。 B-h4-1BB抗体毒性评估 药物有效性和安全性是临床前评价的关键指标，现有实验数据表明靶向4-1BB mAb 在癌症免疫疗法的**潜力，并且在T细胞活化，持久性和记忆中起重要作用
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Small RNA—从功能研究到基因**
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
在过去的十年里，小RNAs（small RNA）已经成为基因表达和基因组功能的重要调节因子，几乎在生物学的各个方面都发挥着作用。许多小RNAs通过RNA干扰（RNAi）相关机制发挥作用，这些机制通过对RNA诱导沉默复合物（RISC）进行编程以识别和抑制目标。还有一类天然microRNAs（miRNAs），可在体内调节基因表达程序。miRNA功能的改变是导致人类疾病的一个重要因素，而对特定miRNA的调控正成为一种新的**手段。小RNA的用途远不止如此，快来跟小编一起深入了解small RNA—从功能研究到基因**。 （1）小RNA 起源 目前，我们对于通过RISC发挥作用的小RNAs的发生，认识比较全面。在动物中，这种小RNAs主要有三类：小干扰RNA（siRNAs）、PIWI相互作用RNA（piRNAs）和miRNAs。siRNAs是由RNAseⅢ家族酶dicer处理的双链前体衍生而来。在哺乳动物中，内源性siRNA在生殖细胞中较为丰富，但在无脊椎动物中则更为广泛。miRNA前体包含成熟miRNA序列的短发夹片段。这些前体通过两个双链RNA酶（dsRNA酶）Drosha和Dicer的串联作用进行处理。piRNAs主要在生殖细胞中表达，在生殖细胞中它们保护转座子的活性。它们的生物起源仍有待充分了解。 （2）小RNA 发现 下一代测序技术使小RNAs的研究发生了革命性的改变。在将特定的连接子连接到小RNAs之后，可以生成cDNAs，这非常适合使用短读平台进行测序。这些方法扩大了被认为通过RISC起作用的小RNAs的种类，并使人们能够发现新的小RNAs。深度测序也被证明有助于检测特殊小RNA的表达；另一方面，如微阵列和定量pcr（qpcr），也提供了经济的替代方案，目前数据库已经在线提供已知的小RNA库。 （3）小RNA 功能研究 了解小RNAs的功能通常从研究它们的表达模式开始。潜在靶点的识别依赖于小RNA和靶点必须具有一定的序列互补性的假设。计算算法根据miRNA-mRNA相互作用的假定特征及其结合位点的保守性预测miRNA靶点。此外，还发展了几种生物化学方法，如交联免疫沉淀法（CLIP）和串联亲和纯化miRNA靶基因mRNAs（Ta
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正夯血小板裂解物的科普
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
血小板 长久以来，我们都知道当组织受伤的时候，血小板会很快地聚集在伤口附近形成血液凝块，堵住伤口，发挥止血的功能。然而，近年来许多的研究证实，血小板还具备另一重要功能–帮助我们调节体内的新陈代谢，促进组织的修复与愈合。 血小板：我不只有止血功能噢！ 血小板是一种叫做巨核细胞（Megakaryocyte）的细胞质小碎片彼此黏附在一起所形成的，寿命约7～14天，每天约更新总量的1/10。虽然血小板没有细胞核，但含有来源于巨核细胞的mRNA，能转录并独立进行蛋白合成；在正常的状态下，血小板外形像平滑的小圆盘（下图左）；被激活时，外形就变成了海胆的样子，上面长满了很多突起小刺（下图右），这时候血小板内部的诱导物质会因血小板活化而被释放出来，开始刺激微血管生长、促进伤口愈合，这些物质就是所谓的生长因子（如PDGF，TGF-β，VEGF，EGF和IGF等）。 平滑的小圆盘（未活化） ▲ 海胆状血小板（已活化）▲ 血小板跟间充质干细胞培养有什么关系？ 近年来，许多学者针对干细胞（Stem Cells）做深入的研究，证实了多种干细胞的细胞膜上，有上述生长因子的接受体，当这些生长因子和干细胞的细胞膜上的接受体结合后，会启动细胞内的信号传导途径，引起基因序列的表达，诱导mRNA转录，进而合成各种蛋白，促进干细胞增殖。而间充质干细胞在人体组织中比例较低，若要达到临床**所需细胞数量，就必须要进行体外大规模扩增，而血小板会释放生长因子的特性，能完美的帮助我们完成这个任务。 如何从血液中取到足够的血小板呢？ 想要搜集足够的血小板，最简单的方式就是制备“富血小板血浆（Platelet Rich Plasma，PRP）”，就是将全血通过梯度离心后而得到的血液制品，换句话说就是血小板的浓缩物（血小板浓度由20万颗/ml，提升到100万颗/ml），但其中依然含有大量细胞碎屑，若直接应用在细胞培养中会有较强的免疫原性，因此诞生了PLTGold®人源血小板裂解物（
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更安全更快更耐用的的锂电池材料新体系
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
实施效果 来源：计算模拟平台 利用Materials Studio分子模拟平台，调用各种模拟方法，如量子力学方法、分子力学和动力学方法、蒙特卡洛方法等，对电极材料的储锂容量、嵌锂电位、电子导电性能、锂离子扩散、脱嵌锂过程中的体积和结构变化、电化学窗口宽度、结构稳定性等指标进行计算，从而帮助研发人员可按预定目标去设计和发现更优的新材料体系，指导实现合成。形成不断深入的研究和开发，最终开发出能量密度更高、安全性能更好、充放电速度快的高性能锂电池材料。 方案详情 研发目标：提高电池的充放电效率 1、MS模拟正负极材料中锂离子的扩散能垒 扩散能垒越低的材料，扩散速率越大，则相应的倍率性能则越高，充电越快 图中(a)-(d)为LiFePO4 及掺杂Mn、 Co、La的扩散能垒研究。 模拟结果表明，掺杂Co和La能降低锂离子的扩散能垒，且掺杂La的效果优于Co。 模拟为实验正极材料合成中选择合适的掺杂元素指明方向 2、MS模拟锂离子的动态扩散过程及扩散系数 扩散系数越高的材料，扩散速率越大，则相应的倍率性能则越高，充电越快 3、MS模拟电子电导 材料的离子电导率和电子电导率共同影响着材料的倍率性能，能带结构的带隙越小，电子由价带被激发到导带越容易，本征载流子浓度就越高，电导率也就越高。 研发目标：提高电池的容量，无“里程焦虑” 1、MS模拟嵌锂电压 提升锂离子电池的工作电压是增大电池能量密度的重要途径之一 2、MS模拟能量密度（质量能量密度和体积能量密度） 3、MS模拟电解质“电化学窗口” 电化学窗口是衡量电解质稳定性的一个重要指标，较宽的电化学窗口可使电解质在较宽的电压范围内保持电化学性能稳定。 MS模拟LiFePO4和LiMnPO4的晶胞参数和嵌锂电压及与实验结果的对比 电化学窗口为LUMO和HOMO轨道能级差。MS支持直接计算得到LUMO和HOMO能级 研发目标：电池无安全隐患，使用寿命长 1、MS模拟正负极材料嵌锂脱锂过程的结构变化 脱锂
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细胞呼吸RC与RR可预测癌症抑制性药物的敏感性
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
参考文献：Teh JT, Zhu WL, Newgard CB, Casey PJ, Wang M (2019) Respiratory capacity and reserve predict cell sensitivity to mitochondria inhibitors: mechanism-based markers to identify metformin-responsive cancers. Mol Cancer Ther 18:693-705. 二甲双胍已被广泛应用于癌细胞代谢和抗癌潜力的研究。尽管有证据表明服用二甲双胍的糖尿病患者的癌症发生率显着降低，但该药物的II期癌症试验未能达到理想效果，很可能是因为缺乏基于分子机制的实验基础。。为了验证二甲双胍对癌症有抑制作用，新加坡国立大学在基因敲除和药理学抑制电子传递链组分来降低呼吸能力的研究中，发现线粒体呼吸能力和能量储备能力（在癌细胞中差异很大）与体外及体内的二甲双胍抑制癌细胞生长的敏感性密切相关。，研究者将实验研究扩展到22个不同组织来源的癌细胞系，包括肺癌、胰腺癌、结肠癌、肝癌、乳腺癌、皮肤癌和卵巢癌细胞。这些癌症细胞系对二甲双胍抑制增殖表现出广泛的敏感性（35倍），并且它们的敏感性似乎与组织来源无关。这些数据证实了二甲双胍的癌细胞生长抑制作用与癌细胞自身的最大呼吸能力和能量储备能力具有一定的相关性。 实验一：该实验通过测量22种人体癌细胞系发现，细胞最大呼吸能力和细胞储备能力与二甲双胍的癌症抑制作用具有相关性 细胞基础呼吸水平代表了一定条件下细胞的呼吸水平，但是不能表明细胞应对一定压力或者应激的能力。而细胞最大呼吸能力（Max.resp.capacity RC）和细胞储备能力（Respiratory reserve RR）则表现了细胞能够承受刺激和应对外界压力的特性。研究者对22种人体癌细胞系的RR与RC分别进行的监测，并加入二甲双胍观察期间癌细胞的生长情况。结果发现：RR和RC能力较强的癌细胞，其二甲双胍的抑制作用降低；而RR/RC能力较弱的癌细胞，其二甲双胍的抑制作用较强。说明癌细胞RR/RC的能力与二甲双胍的抑制作用有较高的相关性。 图1：细胞最大呼吸能力和细胞储备能力与二甲双胍对
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DS在抗体领域的解决方案——人/鼠PD-1交叉反应抗体的发现和结合机制的研究
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
实施效果 通过Discovery Studio软件预测了人/鼠PD-1交叉反应抗体的结合模式，并辅助以实验验证，从而精细解释了具有人/鼠交叉反应抗体的交叉反应性机制，为后续PD-1抗体研发做出指导。 方案详情 程序性死亡受体1（PD-1）是一种重要的免疫抑制受体分子，以PD-1为靶点的免疫调节在抗肿瘤、抗感染、抗自身免疫性疾病及器官移植存活等方面均有重要的意义。PD-1抗体是当前备受瞩目，广为关注的一类肿瘤疗法。考虑到PD-1抗体在**各种癌症中的重要性和广泛应用，文章作者希望开发同人/鼠PD-1有交叉反应的抗体以加速PD-1抗体的临床前研究。目前批准用于临床或正在研发中的PD-1抗体都只靶向人hPD-1，而并不显示与鼠mPD-1有交叉反应。因此，本文开发并首次报道了一种具有人/鼠PD-1交叉反应的功能性抗体，并将该抗体的表位与仅同hPD-1结合的抗体表位进行了比较。 文章作者首先用hPD-1和mPD-1免疫大鼠，通过筛选大量的大鼠杂交瘤克隆发现了既能靶向hPD-1又能靶向mPD-1的抗体R9和只靶向hPD-1的抗体R11。为了快速识别两个抗体的表位，本研究采用了丙氨酸扫描，并基于ELISA和表面等离子共振技术。同时结合分子模拟的方法，采用Discovery Studio（DS）中MODELER程序构建出了R11和R9抗体结构模型，并在此基础上使用DS_ZDOCK/RDOCK蛋白-蛋白对接/优化程序，将这两个抗体与hPD-1进行了对接，预测了两种抗体不同的结合模式，研究了他们的结合表位，从而精细解释了具有人/鼠交叉反应抗体的交叉反应性机制。
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DS在药物设计领域的解决方案——基于阻碍FL-FLT3相互作用的抑制剂筛选
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
实施效果 来源：计算模拟平台 通过Discovery Studio软件和Pipeline Pilot软件虚拟筛选出针对FMS样酪氨酸激酶3受体（FLT3）的抑制剂小分子，该小分子结构新颖，并具有较强的抑制效果，其IC50为18 μM。 方案详情 外周神经性疼痛（PNP）是一种比较难**的慢性疾病。背脊髓相关背根神经节中存在的体感神经元致敏性是一个关键的生理病理过程。研究发现，造血细胞在神经损伤位置可产生细胞因子FL，即FMS样酪氨酸激酶3受体（FLT3）的配体。通过坐骨神经内注射FL激活FLT3，产生疼痛的超敏感性，进而激活了外周神经性疼痛相关的基因表达，产生短期或长期的敏感神经元的敏感性。本研究通过一系列实验，基于不同的老鼠模型发现背神经节中的FLT3对于外周神经性疼痛的产生和持续起关键作用。同时发现阻碍FL-FLT3之间相互作用的抑制剂可以减缓外周神经性疼痛，该方法有望成为**外周神经性疼痛的一种新疗法。 为了寻求该类抑制剂，文章作者对商业可获得的类药化合物库共290万个化合物，使用Pipeline Pilot按照氢键受体大于等于1，氢键供体大于等于4，可旋转键数目小于等于10，芳香环数目大于等于1，极性表面积小于等于90Å，预测的水溶性大于等于50μM等规则进行了第一轮筛选，并通过结构预处理，得到343,847个具有三维结构的异构体构象。然后使用Discovery Studio中的Receptor-Ligand Pharmacophore Generation工具产生基于FL-FLT3晶体复合物结构的药效团模型，并利用DS_Screen Library模块对之前343,847个化合物进行了第二轮筛选。以Fitvalue值在3以上为标准，得到285个结构不同的化合物，最后进行聚类分析和相互作用观察，得到28个化合物，经购买和活性测试发现化合物BDT001是一种全新的FLT3抑制剂，其IC50为18 μM。
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用脂肪细胞培养骨头并成功植入人体的可行性
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
以色列Bonus 生物集团公司在临床试验中，将实验室培育的半流质植骨成功注入到11个人的颌骨去修复骨质流失。公司CEO Dr.Shai Meretzki称这是世界上首次利用在实验室培育的植骨去成功修复受损的骨组织。全球干细胞再生**又取得了突破性发展. （点击下方图片查看视频▼） 植骨的材料是利用病人自己的脂肪细胞培育的， 它被注入进和填满有问题骨骼内的空洞，再经过几个月时间变硬，与现有骨骼结合在一起。 将来，我们再也不需要使用异物的骨骼代替物，可直接培植自体骨头，完全不用担心排斥问题；而且，也不需要任何抽取骨髓的痛苦过程了。除了经临床试验已经成功**的骨质酥松、骨质流失以外，Bonus生物集团将更进一步发展骨骼断裂回生，还有培养自体骨骼的增高疗程。 该实验中，干细胞培养所用培养基正是以色列Biological Industries生产的NutriStem® MSC 无血清培养基。 Shai Meretzki & Biological Industries Shai Meretzki博士是国际知名生物科技公司以色列Biological Industries（BI）的董事长。 逍鹏生物作为BI的中国市场部，曾经多次邀请Dr. Shai Meretzki来中国参加学术研讨。2013年干细胞技术临床转化应用论坛，Shai Meretzki应邀作为参会嘉宾做主题为“三维骨骼移植技术”的精彩报告，深受好评。 BI MSC无血清培养基 NutriStem® MSC XF Medium是无血清、无异源动物组分，促进多种来源的MSC长期生长的培养基，如骨髓、脂肪组织和脐带，同时还能保持自我更新及多向分化潜能。 规格最高：无血清、无源动物成分，全合成培养基，无批次差。 效果更好：比常规血清培养基和无血清培养基有更好培养效果，细胞增殖快、形态好，背景分化率低，促进hMSC的长期生长，同时还能保持自我更新及多向分化潜能。 质量有保障：生产环境完全符合cGMP要求, 拥有CE认证。 使用方便：不需额外添加谷氨酰胺，降低成本，减少污染概率。 依据美国原料药的要求， 以色列BI的MSC无血清培养基已通过了FDA药物评价及研究中心 （Cente
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PRI-8800:开启SOM分解对温度响应的新培养和测定模式
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
土壤有机质(SOM)对温度变化的响应，不仅影响土壤养分循环、还影响陆地生态系统碳源/汇效应。土壤有机质分解的温度敏感性（Q10）不仅是生态学和土壤学研究的核心科学问题之一，也是全球变化生态学研究的热点领域。国内外学者对Q10的影响因素或机制开展了大量卓有成效的研究工作，并有不少相关的综述或展望；然而，迄今为止有关培养与测定模式的探讨却非常少。 技术难点 传统上，科研人员广泛采用了恒温培养+间断测定模式（CDM模式）；即通过设置3~6个恒定温度对土壤进行培养（如5、10、15、20、25℃等），然后在天、周、月间隔，测定土壤有机碳分解速率（Rs）；在测试方法上，大多采用碱液吸收法或气相色谱法进行测定，然后再利用所测定的Rs和对应温度计算Q10。后来，也有人在此基础上提出将土壤培养改良为连续变温的模式，即连续变温培养+间段测试模式（VDM模式）。这两种经典模式极大地推动了SOM分解对温度响应的研究，但却无法从理论、算法、操作上克服其固有的问题。 为了克服CDM和VDM模式的弊端，在总结前人相关研究的基础上，北京普瑞亿科科技有限公司和中国科学院地理科学与资源研究所何念鹏研究团队合作研发了PRI-8800全自动变温土壤培养温室气体（同位素）分析系统，并发展了Q10研究的连续变温培养+连续自动测试的新模式（如图所示）。 SOM分解对温度变化响应的连续变温培养+连续测定模式（VCM模式） VCM模式充分利用连续变温培养+连续–高频土壤微生物呼吸测定装置联用的优势，实现了对土壤样品连续变温培养，基本克服了CDM模式中土壤微生物对特定培养温度的适应性和底物消耗不均的重要缺陷。VCM模式通过开发连续–高频土壤微生物呼吸测定系统，可结合培养过程的温度特征，在升/降温过程中对每个样品进行连续的、高频度的测试。通过测定更多温度下土壤微生物呼吸速率，从而提高Q10的拟合精度。同时，在新设备支持下，VCM模式的培养与测试过程非常简单快捷，有利于开展大量样品
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DS解决方案——抗体人源化设计/基于胰岛素肽的设计和筛选
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
DS 在抗体领域的解决方案——抗体人源化设计 实施效果 来源：计算模拟平台 通过Discovery Studio中的Antibody Modelling， Predict Humanizing Mutations模块对鼠源抗体进行人源化。DS中的Predict Humanizing Mutations模块会寻找人的Germline序列，对比各位点氨基酸在人源中出现的频率给出相应的突变位点信息，结合抗体结构选择相应氨基酸进行设计改造。 方案详情 抗体人源化主要指异源单克隆抗体以基因克隆及DNA重组技术改造，重新表达的抗体，其大部分氨基酸序列为人源序列取代，基本保留亲本单克隆抗体的亲和力和特异性，又降低了其免疫源性，有利应用于人体。Discovery Studio中专门的抗体人源化模块可以快速准确的进行异源抗体人源化的设计。本项目即通过DS中的Antibody Modelling， Predict Humanizing Mutations模块对一条鼠源抗体进行人源化设计，共设计出9条人源化抗体，并通过实验进行了验证，结果如下： 结果显示通过DS设计出的9条人源化抗体中有6条亲和力与亲本鼠源单克隆抗体亲和力保持一致，证明了通过DS进行抗体人源化的准确性。 DS 在多肽药物领域的解决方案 基于胰岛素肽的设计和筛选 实施效果 来源：计算模拟平台 通过Discovery Studio软件设计指导了变构肽配体（Altered peptide ligands，APLs）用于**I型糖尿病。 方案详情 I型糖尿病在人类和非肥胖糖尿病小鼠中均是一种自身免疫系统缺陷的疾病，有研究表明其主要由于CD8+ T细胞介导的β细胞损伤，使之不能正常分泌胰岛素。变构肽配体（Altered peptide ligands，APLs）可以有效抑制抗原-特异性T细胞失效，凋亡或转移。因此开发有效的APLs用于I型糖尿病的**很有必要。本文通过分子模拟技术对变构肽配体进行了设计和优化。 文章作者基于已知的变构肽配体与受体的复合物结构，首先通过Discovery Studio突变了复合物结构中的关键氨基酸残基，确定了变构肽的关键改造
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转录组的重编写：RNA编辑
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
前 言 基因的功能探索是生命科学研究的永恒主题。近几年以CRISPR-Cas9技术的发展让直接在高等生物体内进行基因的功能研究成为可能。但除了DNA之外， DNA的转录产物--RNA在生命活动中也发挥着极其重要的作用，且与癌症等多种疾病的发生密切相关。因此，对RNA进行功能研究和错误RNA的纠正，成为了科学界的新一大热点。特别是前2个月，北京大学和MIT分别在Nature Biotechnology与Science上发文，提出了名为“LEAPER”的A-to-I RNA编辑工具[1]和名为“RESCUE”的C-to-U RNA编辑器[2]，被Nature Reviews Genetics和Nature Reviews Drug Discovery两篇杂志分别点评是“拓宽了RNA单碱基编辑器的选择”[3]和“拓展了RNA编辑的工具箱”[4]，在业内引起了广泛的关注与讨论，进一步打开了我们深入认识RNA的大门。 那么，RNA编辑是什么？我们又是怎样实现对RNA进行编辑的呢？接下来这几期的公众号文章，小编就带着大家走入RNA编辑这个新的热点领域，看一看在转录组的水平，神奇的编辑工具是怎么大展身手的。首先，让我们从RNA编辑的原理开始讲起。 01、翻译前RNA水平调控 相信大家对中心法则都不陌生吧。而在中心法则连接的三大生物大分子中，起到承上启下作用的便是RNA了。在翻译前，RNA水平的调控是自然状态下生命活动的一大重要组成部分，对每一个活细胞而言都极为重要。经典的RNA水平调控主要可以分为两大类。 第一类：剪接（Splicing） 剪接是我们最为熟知的一类RNA水平调控。通过剪接，pre-mRNA中的内含子序列被剪掉，而外显子被拼接起来。剪接是可变的，是调节基因表达和产生蛋白质组多样性的重要机制。由于可以通过可变剪接产生不同类型的转录本从而产生不同类型的蛋白，此方式是导致真核生物基因和蛋白质数量较大差异的重要原因，对多种生命活动的发生具有重要意义[5]。 图1. RNA的可变剪接示意图 （注上图从左到右：方式1：正常的剪接；方式2：外显子跳跃，剪接掉了中间的一个外显子；方式3：外显子扩展，是内含子剪接不完
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小鼠抑制素A酶联免疫试剂盒说明
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
小鼠抑制素A酶联免疫试剂盒说明 样品收集: 1. 血清：全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟，取上清即可检测，收集 血液的试管应为一次性的无热原，无内毒素试管。 2. 血浆：抗凝剂推荐使用EDTA-Na2，样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟，取上清即可检测。避免使用溶血，高血脂样品。 3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。 4. 细胞培养上清：取细胞培养上清于1000×g离心20分钟，除去杂质及细胞碎片。取上清检测。 5. 其它生物样品：1000×g离心20分钟，取上清即可检测 6. 样品应清澈透明，悬浮物应离心去除。 7. 样品收集后若在1周内进行检测的可保存于4℃，若不能及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃(1个月内检测)，或-80℃（6个月内检测），避免反复冻融。 8. 如果您的样品中检测物浓度高于标准品值，请根据实际情况，做适当倍数稀释（建议先做预实验，以确定稀释倍数）。
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大鼠白介素32酶联免疫试剂盒说明
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
大鼠白介素32酶联免疫试剂盒说明 爱上秋天，却不能拥有她到永远，总是飘然而至，又每每不辞而别。总是因她的来而欢欣鼓舞，也总是因了她的离去万般寂寥。接下来介绍 大鼠白介素32酶联免疫试剂盒说明 注意事项 1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4．请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。 5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6．底物请避光保存。 7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9．本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
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间充质干细胞的神奇再生功能
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
激萌逗趣的《银河护卫队2》燃爆了整个宇宙 Baby 格鲁特简直萌化了怪阿姨们的少女心啊 格鲁特一出场 仿佛周围都冒着粉色泡泡 怪阿姨说：银河拿走，格鲁特留下！ 格鲁特可以控制树木， 并融合树木治愈自己的伤口， 实现自身组织的修复 于是乎网友们脑洞大开地谈论 “如何科学培养一只战斗力爆表的树精宝宝？” 是应该通过干细胞培养吗？ 这样 。 。 。 不过，这个世界没有能够自我修复的格鲁特 但有神奇的间充质干细胞 实现身体组织和器官的再生 如 脱落的牙齿再生 脂肪可以培养骨头 修复肌肉损伤 **肝硬化 间充质干细胞(MSC, mesenchymal stem cells)是干细胞家族的重要成员，来源于发育早期的中胚层，属于多能干细胞，具有多向分化潜能及免疫调节作用，可作为理想的种子细胞用于衰老和病变引起的组织器官损伤修复，受到了科学家们越来越多的关注。 Biological Industries NutriStem® MSC 家族 Biological Industries（BI）是国际知名的以色列生物科技公司，一直为细胞生物学研究提供最优质的产品。 NutriStem® MSC系列拥有最多的明星产品（无血清培养基、消化试剂、冻存液、分化试剂等），且均无动物源成分，可用于临床。 BI MSC无血清培养基应用重大成果，可点击此文 （BI MSC无血清培养基应用新成果！以色列用脂肪细胞培养骨头并成功植入人体 ） MSC增殖—NutriStem®MSC无血清培养基 无血清、无动物源成分，无批间差。 DMF No：29469， 在国外可以用到临床 培养效果极佳，细胞增殖快、形态好，背景分化率低，促进hMSC的长期生长，同时还能保持自我更新及多向分化潜能。 MSC消化—Recombinant Trypsin EDTA Solution 传统胰酶的完美替代者 无动物源成分，无PMSF、EDTA等任何蛋白酶抑制剂，比传统胰酶使用方便，大大提高细胞培养效果。 MSC冻存—MSC Freezing Medium 即用型，用MSC冻存液冻存融解后，细胞表现出极佳的复苏率、生长活性。 MSC分化—MSCgoTM XF Differentiation Kits 促进多种来源hMSC
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浮游菌采样数据完整的重要性
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
数据完整性问题一直是药企各种检查中的焦点，常见于QC实验室，但在研发、生产、市场甚至药事管理部门也同样存在，怎样保证数据完整性是药企需要长期研究的课题。 今年5月份ISPE发布了一份新的《生产记录的数据可靠性指南》，其中给出了关于生产系统数据完整性的快速解决方案，指导用户在有限资源的情况下最大限度提高生产系统数据完整性，以帮助评估各种数据可靠性改进措施的优先度。 该指南提出的使用现有技术，寻求快速解决数据完整性影响的方案，包括但不限于： ▼ 实验人员登录 ▼ 限制访问已验证的设置或CPPs ▼ 确保权限分离 ▼ 禁止共用和通用账户 ▼ 限制更改时间的能力 ▼ 安全的电脑桌面（锁定用户操作界面，以防止进入后台数据文件夹（让用户在desktop桌面操作，不能点开C盘，d盘文件夹）） ▼ 禁止人为誊抄GMP记录 ▼ 在系统报告功能中，启用并验证其数据校对功能 ▼ 确保备份频率适宜和成功备份的测试 ▼ 审核关键电子数据（如测试、运行、程序、失败、成功、废弃） 从这份解决方案中，我们不禁联想到空气微生物监测该怎样实现数据完整性。 我们生产、制造、销售的空气微生物采样器是否能做到数据完整性，可不可以也遵循这个方案？今天要介绍的意大利ORUM公司生产的第四代浮游菌采样仪则完全符合，对于空气微生物采样的数据完整性，ORUM小黄人是认真的。以下是依次对应的解决方案： 1.输入数据的质量 ISPE指南部分描述为对于在批量生产过程中手工输入的关键数据，需要额外检查数据的完整性和准确性。这种检查可以由第二名操作员进行，也可以通过已验证的电子手段进行。错误或不正确输入系统的数据的严重性和潜在后果应通过风险管理过程加以处理。 ORUM方案：蓝牙扫码器，ORUM TRIO.BAS系列浮游菌采样仪通过蓝牙扫码器可以实时的记录采样人、采样地点和培养皿编号，数据原位产生并通过蓝牙传输到仪器记录下来，减少了数据记录的人为誊抄。降低空气微生物采样关键数据的手工输入，确保检查数据的完整性和准
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