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青春的秘密-抗衰老因子GDF11
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
近日，巴斯德研究所（Institut Pasteur）和CNRS的研究人员阐明了血液中一种分子（GDF11）在延缓衰老方面的作用。在小鼠模型中，他们表明该GDF11分子可以起到与限制卡路里相似的好处。这项研究的结果发表在2019年最近一期的《Aging Cell》杂志上。(https://onlinelibrary.wiley.com/doi/pdf/10.1111/acel.13038 ) 抗衰老是一个永恒的话题，关于GDF11的抗衰老机制，自然也成为各国学者的研究焦点。2014年，哈佛大学干细胞研究所在《Science》杂志发表的两篇论文指出，给相当于人类70岁的老年小鼠注射GDF11蛋白后，小鼠的运动能力和脑部嗅觉区功能得到了提高。2013年，哈佛大学的干细胞生物学家艾米·维杰斯博士（Amy Wagers）和心脏学家理查德·李（Richard Lee）博士发表在《cell》杂志上的研究发现，联体小鼠（通过外科手术将年轻小鼠与老年小鼠的血液循环系统相连，示意图见下）中的老年小鼠在接触年轻小鼠的血液4周后，它们心肌肥大的症状得到了显著的改善，心肌细胞的体积也减小了，而这种变化与血流动力学和联体后的小鼠行为改变并不相关。随后，利用蛋白质组学方法，研究者发现血液中的GDF11会随着年龄的增长而逐渐减少。随后，研究者为老年小鼠注射了GDF11，使其血液内GDF11的水平与年轻小鼠相当，这一实验的结果与在联体小鼠中观察到的现象相一致，证明了GDF11在逆转衰老造成的心脏功能下降上的作用。 生长分化因子11（growth differentiation factor-11，GDF11）是转化生长因子β（transforming growth factor-β, TGF-β）超家族中骨形态发生蛋白（bone morphogenetic proteins, BMPs）亚家族中的一个重要成员，在哺乳动物的骨骼、肾等多种器官组织上均有表达，除了与哺乳动物的抗衰老作用联系越来越紧密，GDF11在胚胎发育、骨骼和肌肉形成等方面也起着重要作用。 最新的研究发现系统性地补充重组 GDF11 蛋白，可以让年老的小鼠有以下改变： 增加肌肉干细胞的数量，并引发骨骼肌肉纤维的生长。 经由激活 TGF-β
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百欧林播客第一期 | 表界面科学——从更大的视角研究微观世界
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
百欧林播客第一期 | 表界面科学——从更大的视角研究微观世界 表面和界面无处不在。在这期播客中，我们将深入探究与表面相关的现象，更近距离地了解它们是如何影响我们和我们所生活的世界的。我们邀请了来自不同领域的顶尖科学家，就表界面相关的概念和术语到物理原理、历史方面、挑战和未来展望等专题进行了有趣的讨论。 表界面科学——影响我们日常生活的科学 表界面的定义是什么?与表面有关的科学是什么样的? 最重要的是，表面科学真的对我们的日常生活有影响吗? 在这一期的《表面科学——从更大的视角研究微观世界》中，我们采访了瑞典查尔默斯理工大学的物理学教授Bengt Kasemo教授。Kasemo教授长期从事表界面科学研究，是瑞典皇家科学院和瑞典皇家工程科学院的成员。 我们从表面科学基础开始，讨论了表面的定义以及与与表面相关不同类型的科学。我们还讨论了这个领域的研究是如何、何时、为何开始的，为什么这类研究如此重要，以及有哪些影响我们日常生活的发明起源于这个领域。 全部详情请点击链接查看采访录音。
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百欧林表界面科学播客第二期 | 纳米技术——机遇和安全挑战
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
百欧林表界面科学播客第二期 | 纳米技术——机遇和安全挑战 纳米技术已经存在了几十年，今天这些微小的纳米实体通过防晒霜、食品、运动服和电子产品等产品进入我们的日常生活。为什么“纳米”会变得如此流行?当我们接触这些纳米工程物体时会有什么风险? 在这一期的《表面科学——从更大的视角研究微观世界》中，我们采访了瑞典查尔默斯理工大学的物理学教授Bengt Kasemo教授。Kasemo教授是瑞典皇家科学院和瑞典皇家工程科学院的成员。Kasemo教授长期从事表界面科学研究，他也从事纳米毒理学和纳米安全方面的大量工作。 在这一期的《表面科学——从更大的视角研究微观世界》中，我们讨论了纳米技术是如何起源的，这个特定的尺寸范围相对于其他的尺寸范围有什么优势，以及是什么使纳米技术如此具有吸引力。我们还讨论了相关的风险和安全挑战。Kasemo教授列举了一系列在未来可能实现的、但是现在尚未开发的机会。 全部详情请点击这里的链接查看采访视频。
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房颤**药物关键中间体的连续放大合成
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
一、背景介绍 BMS-919373 zui近被定义为心房颤动的候选**药物之一。其传统的合成路径以 3，5-二溴吡啶（3）为原料，首先通过金属卤素交换形成杂芳基配体（4），然后加入由磺酰氯生成的磺酰氯 5，再在 5 的粗混合物中引入叔丁基胺，得到 2。 该工艺在实验室规模上表现良好，但在 kg 级规模上镁与溴交换不完全，增加试 剂用量也不能解决这一问题。 由于粗品中杂质含量高，混合物中 2 的中间收率较低造成无法结晶。放大出现的 问题的原因并不清楚，因为所有实验室规模的小试中，镁与溴交换阶段都实现了 完全转化。用 react-IR 进行的稳定性研究表明，格氏中间体 4 随时间衰减，原因 可能是水分的影响。 BMS-919373 众多的合成路径中均包含关键中间体 5-溴-N-(叔丁基)吡啶-3-磺胺（以下称“中间体 2”），目前该药物已经走到临床研究阶段，对于中间体 2 的需求量日益增大，因此很有必要建立一条稳定的、可放大生产的中间体 2 合成路线。 二、路线选择 默克公司 Antonio Ramirez 的过程研发小组开发了一条中间体 2 的连续合成路线：一种多步连续流动工艺，包括 1) 镁卤素交换，2) 硫酰氯磺酰化反应，3) 叔丁胺磺酰化反应。 因此，作者希望通过连续合成处理，以解决 Grignard 4 收率低的问题。并尽量减少实验室到工厂范围内传热和传质环境的变化，提高工艺的稳定性，减少放大效应。 运用连续合成路线可以带来的好处： l 实现实时监控反应结果，从而降低不符合质量要求的风险。 l 连续过程将严格控制反应时间，在确保完全转化的同时zui大限度地减少中间产物等不稳 定中间体的分解。 l 连续过程换热效果更好。因为改进了表面积与体积比，降低了这些高度放热转换的固有 风险。特别是磺酰化步骤显示出 51℃的绝热温升，这可能导致热分解。 l 流动反应器还有一个额外的好处，就是反应可以在一定的压力下进行。这样可以减少由 于 THF 和 DCM 溶剂的挥发性而导致釜式体系过度增压的可能性，在连续过程中快速混 合和快速换热，可以提高反应
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Science：脑科学研究，您还在用小鼠模型吗？
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
人类为何能说话、会思考、善学习、有情感？谜底藏在人脑860亿个神经元、几千亿个神经胶质细胞、100万亿个神经突触之中，它们错落交织而成的复杂网络如迷宫一般，筑成人类探索自然“最后的疆域”。然而想要弄清楚大脑的工作方式却是一件非常困难的事情，为了搞清楚这一点，科学家一直致力于寻找与人类相似的大脑进行实验研究，目前最常用于人脑部科学研究及药物开发的是小鼠动物模型。 此前人们也曾对小鼠模型提出质疑，那些不同的声音主要是围绕小鼠并没有与人类相似的意识和思维。而最近美国西雅图儿童研究所的神经科学家Parthiv Haldipur和Kathleen Millen教授则是从小脑发育模式的角度表明小鼠和人类小脑之间的差距。该研究发表在国际顶级期刊《Science》杂志上，研究表明：在大脑研究中，小鼠的小脑可能不是人类小脑研究的最佳模型。 （https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/31624095） 小鼠的小脑发育中缺少独特的祖细胞 尽管小鼠与人类的脑部结构有着许多共同特征，例如大脑皮层、神经元形态和叶状结构等，支持着科学家将小鼠纳为脑研究模型。但不同的是，人类的小脑的表面积是小鼠的750倍，并且人类小脑中80%都是神经元组织。这就意味着，在神经元数量增加、神经元亚型变化以及叶片板层等方面小鼠的小脑模型并不能完全模拟反映人类小脑。 人类小脑发育的轮廓 Haldipur和Millen以及一组国际研究人员观察了人类在受孕后30天到出生后9个月之间小脑的发育情况，并将其与经常用于大脑研究的小鼠和猕猴进行了比较。通过检查和比较这些发育中的大脑的形态和分子表达，研究人员在人类身上发现了一些独一无二的祖细胞，而人们并未在小鼠或是猕猴的大脑区域中发现这些细胞。 正是因为存在着这些明显的差异， 一些小脑研究并不能在小鼠模型中找到答案。虽然人们一直都期望在小鼠模型中找到启发和灵感，但不得不承认小鼠模型并没有想象中的那么完美。同时这项研究也给正在苦于埋头研究的脑科学家提醒可能使用的生物模
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细胞形态异常，鱼骨图来帮忙（五）
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
细胞培养过程中 细胞辅助试剂是不可或缺的角色 那么它是怎么影响细胞形态的呢？ BI中国市场部带您分析分析~ 细胞辅助试剂可分为以下四部分： 接下来我们逐条分析！ （点击图片，可查看详细鱼骨图链接） 胰酶 ★☆★☆★☆ 什么情况下是胰酶可能出现了问题呢？ 一旦发生消化时间逐渐拉长，或是细胞消化不下来，需注意胰酶是否已经失活。由于胰酶为蛋白类产品，反复冻融容易影响其活性。 品质不佳的胰酶也容易带入支原体或动物源性污染源，BI所生产的胰酶经过辐射照射处理，确保品质及有效杜绝支原体的引入。 临床培养可选用重组胰酶，以避免引入未知动物源病原体。 解决方案： 一般胰酶保存方式，建议15或50ml分装后-20℃冻存，使用前必须37℃水浴或培养箱回温，胰酶消化后使用不含钙镁的缓冲液清洗细胞，以稀释残余的胰酶。 若使用无血清培养基培养时（血清中含有胰酶抑制蛋白），使用胰酶消化后可使用胰酶抑制剂终止残存胰酶反应。 Biological Industries（BI）可提供： （点击产品货号，可查看产品链接） 产品名称 货号 Trypsin Solution B（0.25%）, without Calcium and Magnesium, without Phenol Red 胰蛋白酶（不含钙和镁，不含酚红，不含EDTA） 03-046-1A/B Trypsin Solution B（0.25%）,10X Conc, without Calcium and Magnesium, without Phenol Red 胰蛋白酶（不含钙和镁，不含酚红，10X浓缩液） 03-046-5B Crystalline Trypsin Solution（0.02%）, without Phenol Red 水晶胰酶（不含钙和镁，不含酚红，不含EDTA） 03-047-1A/B Trypsin EDTA Solution A（0.25%）,EDTA（0.02%）, with Phenol Red 胰酶（胰蛋白酶0.25%，EDTA 0.02%） 03-050-1A/B Trypsin EDTA（0.5%）, EDTA（0.2%）,10X Conc, without Phenol Red 胰
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免疫共沉淀试剂准备
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。 试剂准备 1. 预冷PBS，RIPA Buffer，细胞刮子（用保鲜膜包好后，埋冰下），离心机。 2. 用预冷的PBS洗涤细胞两次，最后一次吸干PBS。 3. 加入预冷的RIPA Buffer(1 ml/107个细胞、10 cm培养皿或150 cm2培养瓶，0.5 ml/5×106个细胞、6 cm培养皿、75 cm2培养瓶）。 4. 用预冷的细胞刮子将细胞从培养皿或培养瓶上刮下，把悬液转到1.5EP管中，4℃，缓慢晃动15 min（EP管插冰上，置水平摇床上）。 5. 4℃，14000 g离心15 min，立即将上清转移到一个新的离心管中。 6. 准备Protein A agarose，用PBS 洗两遍珠子，然后用PBS配制成50%浓度，建议减掉枪尖部分，避免在涉及琼脂糖珠的操作中破坏琼脂糖珠。 7. 每1 ml总蛋白中加入100 μl Protein A琼脂糖珠（50%），4℃摇晃10 min（EP管插冰上，置水平摇床上），以去除非特异性杂蛋白，降低背景。 8. 4℃，14000 g离心1 5min，将上清转移到一个新的离心管中，去除Protein A珠子。 9． （Bradford 法）做蛋白标准曲线，测定蛋白浓度，测前将总蛋白至少稀释1：10倍以上，以减少细胞裂解液中去垢剂的影响（定量，分装后，可以在-20℃保存一个月）。 10. 用PBS将总蛋白稀释到约1 μg/μl，以降低裂解液中去垢剂的浓度，如果兴趣蛋白在细胞中含量较低，则总蛋白浓度应该稍高（如10 μg/μl）。 11. 加入一定体积的兔抗到500 μl总蛋白中，抗体的稀释比例因兴趣蛋白在不同细胞系中的多少而异。 12. 4℃缓慢摇动抗原抗体混合物过夜或室温2h，激酶或磷酸酯酶活性分析建议用2 h室温孵育。 13. 加入100 μl Protein A琼脂糖珠来捕捉抗原抗体复合物，4℃缓慢摇动抗原抗体混合物过夜或室温1 h，如果所用抗体为鼠
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Nanolive新突破---无标记神经元网络动态研究
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
在人的大脑中有几十亿条神经在活动，他们形成了灵活的连接，这些连接，在学习和记忆形成过程的信息处理中，处于稳定状态；反过来，就处于不稳定状态。神经细胞的培养和成像是一个特殊的挑战，因为成熟的神经元不发生细胞分裂，因此神经网络培养的一个主要问题是他们的存活期比较短，易受感染，对介质蒸发产生的高渗压敏感以及观察全网络活性需要数周至数月，使得提高体外神经元生存能力和延长神经元寿命变得极其重要；因上述体外培养的压力导致用传统方法对神经元活细胞成像受到很大限制，制约着该领域研究的深入发展。 3D Cell Explorer 显微镜采用360度全息无标记成像技术，避免了上述干扰，可极大改善对脑细胞的基础研究；检测过程无需样品准备，能够快速、无创和无偏差的对活细胞观测。此外，3D Cell Explorer 的激光使用的能量比传统荧光成像方法最低能量的激光低100倍，这使得活细胞长期成像（长达数周）成为可能。 视频1链接：https://v.youku.com/v_show/id_XNDQyMDk2MDA2OA==.html?spm=a2h3j.8428770.3416059.1: 视频2链接：https://v.youku.com/v_show/id_XNDQyMDk2MDA2OA==.html?spm=a2h3j.8428770.3416059.1 第一个视频，我们观测了培养的大鼠海马神经元生长过程，紫色视频是数字化染色后的3D 结构。当这些细胞已经成为“成熟的神经元”时，它们的分化速度为7div。 第二个短视频中，3D Cell Explorer 高清晰的观察到了两种独特且属于海马神经元正常的生理特征：囊泡迁移和神经元可塑性的动态变化，实现神经元活细胞成像研究的新突破。 样本提供方：the lab of prof. Šuput’s group at the Institute of Pathophysiology, Faculty of Medicine, University of Ljubljana, Ljubljana, Slovenia. 并且通过Nanolive 3D Cell Explorer的精彩活神经元视频拍摄，还观测到了活的、完全未受干扰的神经元的线粒体在轴突、树突和细胞核内运动的动力学和行为。这是传统荧光标记方法很难观测到现象。 视频3链
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一文详解：PD-1、二代PD-1抗体
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
在2018ACSO大会上，一组关于M7824药物的临床数据引起轩然大波，这个进化版的PD-1融合蛋白抗体药物以其86%的有效率令整个行业及市场摩拳擦掌，为之兴奋。 PD-1抗体药物一直是近年来医药界关注的焦点之一，它的发展也并非一帆风顺，之前成功上市的多个PD-1药物虽然在这条免疫思路上获得极大突破，但是单个药物使用的有效率却只在20%-30%左右。这也催动了二代PD-1的突破，令其备受瞩目。 PD-1抗体作用原理 说起肿瘤免疫**，我们先考虑一个问题，既然肿瘤细胞是基因突变的结果，与我们人体正常的细胞已经千差万别，为何我们的免疫系统不能识别出这些细胞并杀死他们呢？如果我们可以利用我们自身的免疫系统来查杀肿瘤细胞，一来可以时时监控细胞的癌变，二来可以用最自然最温和的方式来杀死这些细胞，免去手术、化疗等**手段的痛苦。 科学研究发现，肿瘤细胞确实可以通过一系列的机制来逃逸免疫系统的识别和清理，从而大规模的繁殖。这些机制中很重要的一环便是跟我们今天的主题PD-1相关。PD-1的全称是Programmed Death-1，是T细胞膜上的受体分子，接收信号后可以诱导T细胞的凋亡。与其对应的就是PD-L1，它是T细胞膜上的受体配体，也就是PD-1接收的那个信号。这条通路原本可以调节免疫反应，防止过度免疫，是保护人体的天然机制。 但是，也许你已经猜到了，诡计多端的肿瘤细胞在不断的变异筛选中“学会”了应对T细胞捕捉和杀伤的方法。科学家在肿瘤细胞的表面发现了PD-L1受体配体，也就是说，当T细胞接近肿瘤细胞时，就会因为上面的PD-L1而被诱导凋亡，失去免疫作用。 针对此逃逸机制，PD-1、PD-L1抗体药物的思路应运而生。这种针对PD-1受体或PD-L1受体配体而设计的抗体蛋白可以阻断PD-1和PD-L1的结合，从而防止T细胞被肿瘤细胞诱导凋亡，继而利用自身的T细胞来杀死体内的肿瘤细胞。 PD-1抗体单药现状 目前全球上市 6 个 PD-1/PD-L1 药物，分别为 BMS 的 Opdivo（2014）、Merck 的 Keytruda（2014）、罗氏的 Tecent
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微生物接种方法详解指导
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
一、平板划线分离法 平板划线分离法:是指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基表面，通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。有时这种单菌落并非都由单个细胞繁殖而来的，故必须反复分离多次才可得到纯种。其原理是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离目的的。 为方便划线，一般培养基不宜太薄，每皿约倾倒20ml培养基，培养基应厚薄均匀，平板表面光滑。划线分离主要有分区划线法和连续划线法两种 分区划线法是将平板分四区，故又称四分区划线法。划线时每次将平板转动60~70°划线，每换一次角度，应将接种环上的菌烧死后，再通过上次划线处划线； 另一种连续划线法是从平板边缘一点开始，连续作波浪式划线直到平板的另一端为止，当中不需灼烧接种环上的菌。 1）连续划线法 将琼脂平皿半开盖倒置于培养箱内至无冷凝水，接种环于酒精灯外焰烧至红透，接种棒也要充分灼烧，最后再集中烧接种环至红。 轻轻摇匀待接种试管，左手手心托待接种试管底侧部，右手执接种环，右手小指拔下试管塞，于酒精灯附近将接种环伸进试管，稍候，再插入待接接种液中，蘸一下，取满一环，抽出、烧塞、盖盖、放回试管架。或将接种环通过稍打开皿盖的缝隙伸入平板，在平板边缘空白处接触一下使接种环冷却，然后以无菌操作接种环直接取平板上待分离纯化的菌落。 于靠近酒精灯处打开平皿盖约30°，右手将环伸进平皿，将菌种点种在平板边缘一处，轻轻涂布于琼脂培养基边缘，抽出接种环，盖上平皿盖，然后将接种环上多余的培养液在火焰中灼烧，打开平皿盖约30°伸入接种环，待接种环冷却后，再与接种液处轻轻接触，开始在平板表面轻巧滑动划线，接种环不要嵌入培养基内划破培养基，线条要平行密集，充分利用平板表面积，注意勿使前后两条线重叠，划线完毕，关上皿盖。灼烧接种环，待冷却后放置接种架上。
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网红靶向制冷超低温冰箱的突出优势
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
在前两期的《礼赞70周年》系列报道中，小编为大家讲述了国产第一台超低温冰箱和行业量产上市、温度最低的超低温冰箱的诞生！由此引发了一众粉丝对于这两款产品通用的制冷技术——靶向制冷的浓厚兴趣！ 靶向制冷，2006年荣获国家技术发明二等奖。它使用深冷混合制冷工质，让不同制冷工质以“接力赛”的形式，在不同的样本储存温区发挥作用，最高效率的保证储存箱达到所需的存储温度，确保了使用此制冷技术的超低温冰箱具备高效制冷、安全稳定和节能环保等突出优势！ 那么，这项具有自主知识产权的超低温制冷技术，除了孕育了国产第一台超低温和行业温度最低的极低温储存箱外，还催生了哪些刷新行业记录的产品呢？ 今天，小编要为大家讲述的便是—全球容积最大的超低温冰箱DW-HL1008的故事！ 2017年4月，美菱生物医疗曾报道，全球首台，1000L+超大容积的-86℃超低温冷冻储存箱落户四川宜宾学院！这标志着了，国产超低温技术在储存容积方面，又向前迈出了一大步！道理和上篇所提到的，仅15℃之差却禁锢了科研人员的脚步一般，超低温产品要兼顾容积和稳定性，对于制冷方式、制冷材质和工艺等方面提出了更高的要求！当我们介绍DW-HL1008时，通常会说道：“这是我们全球量产上市容积最大的超低温产品”，但1008的优点，“岂止于大”！ 继第一台1008升超低温冰箱落户宜宾学院后，DW-HL1008陆陆续续进入了中国食品药品检定研究院、国家畜牧兽医总站和拉萨市城关区疾控中心以及济南市妇幼保健院等单位，获得了用户的广泛认可！ 美菱生物医疗将继续潜心研究更多安全、可靠的生物医疗产品，服务千万医疗、高校和科研等单位！正如做《礼赞70周年》系列报道的初衷一般，我们期待与全球更多用户一同见证国产超低温技术的成长、腾飞，也想用最前沿的科技成果献礼祖国70周年生日！ 延伸推荐： -86℃超低温冷冻储存箱DW-HL1008 更多产品信息请点击：www.zkmeiling.com
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量子产率超过90％荧光标记的最强荧光——藻胆蛋白
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
藻胆蛋白是源自微藻和蓝细菌的光合作用光捕获蛋白家族。这些蛋白质具有共价连接的线性四吡咯基团，称为藻胆素，其在捕获光能中起关键作用。在微藻和蓝细菌中，由这些藻胆素吸收的能量通过荧光共振能量转移（FRET）有效地转移到叶绿素色素用于光合作用反应。 与化学合成荧光染料相比，藻胆蛋白由于其相对高的荧光量子产率和消光系数而发出强烈的荧光信号。因为它们的荧光不被生物分子猝灭，所以藻胆蛋白可以在许多应用中用作有价值的荧光标签。与生物分子（例如免疫球蛋白，蛋白A或链霉抗生物素蛋白）缀合的藻胆蛋白已经在流式细胞术，荧光激活细胞分选（FACS），组织化学，成像和有限程度的活性氧物种检测中取得了巨大成功。目前市面上最主要两种类型的藻胆蛋白是的藻红蛋白（PE）和别藻蓝蛋白（APC）。 藻红蛋白（PE） PE（2558）显示出非常明亮的黄橙色荧光，消光系数（ε）为1,960,000cm -1 M -1 ，量子产率（Φ）为0.84。相比于Cy3® （141） 的消光系数是150000 M -1 cm -1 和量子产率（Φ）为0.24的，PE荧光强度明显强很多。 藻红蛋白有两种形式，从红藻（RhodophytaI）中分离的R-藻红蛋白（R-PE）和从红毛菜目（Bangiales）中分离的B-藻红蛋白（B-PE）。B-PE和R-PE均由三种类型的亚基组成：α（~20 kDa），β（~20 kDa）和γ（~30 kDa）。虽然它们具有相似的亚基结构，但由于它们的亚基的发色团含量不同导致其吸收峰的相对强度产生差异。 R-PE和B-PE的吸光度和发射光谱的比较 别藻蓝蛋白（APC） APC（2554）呈现明亮的红色荧光，消光系数为700,000 M -1 cm -1 ，量子产率（Φ）为0.68，相比于Cy5® （151）（消光系数ε=250000 M -1 cm -1，量子产率（Φ= 0.20），APC荧光亮度明显强很多。 APC的激发和发射光谱 属性 R-PE B-PE APC 共同的亚基 （αβ）6个 γ （αβ）6个 γ （αβ）3 MW 240000 240000 105000 Ex 565nm 545nm 651nm
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猴分泌型免疫球蛋白ELISA试剂盒说明书
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
猴分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA试剂盒注意事项 ．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡5-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未 用完，板条应装入密封袋中保存。 2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间zui好 控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4．请每次测定的同时做标准曲线，zui好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值 大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计 算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。 5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6．底物请避光保存。 7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9．本试剂不同批号组分不得混用。
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FDA和NIST对细胞**中的细胞计数
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
近年来，由于细胞**方法的兴起，人们日益需求能够高质量、稳健、有效进行细胞表征测定的方法。细胞计数，作为细胞疗法中最基础的检测项目，现今需要更高的检测可信度。2017年4月，美国国家标准与技术研究院（NIST）&食品与药物管理局（FDA）共同举办了一场专注于细胞计数的研讨会，聚焦于选择、设计和验证细胞计数方法，以及如何得到充分的计量保证。近50位来自于工业界、学术界和政府监管机构的专家参与了研讨会。Nexcelom Bioscience作为为数不多的受邀细胞计数设备制造商之一列席参加了本次会议，与业界专家们共同讨论细胞**中关于细胞计数的各种问题。本文总结了此次会议的讨论重点。 研讨会的总体主题：我们需要根据细胞样品的属性，细胞计数的目的和要求，来选择适合目的（fit-for purpose）的测量方法。例如，药物筛选和细胞**产品生产与放行过程中的细胞计数要求会有显著不同。Fit-for purpose是指选择的方法是否适合细胞计数的预期目的。理想的适用性需要满足两方面的要求，一是能解决生物学问题，二是获得的数据质量（灵敏度、精密度、准确度）足够好，足以支持下游决策。一个更标准化的设计、限定和验证符合fit-for purpose原则的细胞计数方法的流程，将加速产品的开发和转化。 研讨会上讨论的主要内容： 细胞计数测量过程 细胞计数遵循相同的常规步骤：（i）样品准备，（ii）手工计数或使用仪器设备的自动计数，（iii）数据分析（如图1）。 Figure 1. General cell counting measurement process (Adapted from Lin-Gibson et al. Bioinsights, 2016). 测量过程中的很多方面都可能给结果带来显著的可变性。此外作为测量过程中“输入”的细胞样品，属性可能会有大范围的波动，也会给计数结果带来显著的可变性。细胞样品本身就很复杂，具有一系列稳定或者变化的性质 - 样品配方（如培养基组分）、成分（如不同细胞类型和功能）和固有的生物学可变性（如供体变化和细胞状态）。认识到细胞计数过程和细胞样品相关
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扫描电镜低加速电压成像
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
扫描电镜的加速电压与束流强度对成像有着决定性的影响。 通常来说，操作人员更愿意使用更高的加速电压去成像，当加速电压较大时，信噪比更好，分辨率更高，更容易得到“清晰”的图像。但低加速电压却是当今扫描电镜的发展趋势，这是什么原因呢？今天，这篇文章将围绕“低加速电压成像”展开讨论。 电子束与样品相互作用将会激发出多种电子信号，包括背散射电子（BSE）、二次电子（SE）等。二次电子（SE）主要表征样品的表面形貌信息，激发深度一般低于 10nm，主要表征样品的表面形貌信息。 当使用较高加速电压去观测样品，二次电子来自样品表面 5~10nm 范围，最表层的形貌被削弱，甚至掩盖；而用低加速电压观测样品时，由于入射电子束与样品的相互作用小，信号更多来源于材料的表面，加速电压越低，观测的形貌效果越接近表层，且低加速电压对样品的损伤也较小。 现在，通过几组照片，让大家更好地理解低加速电压成像的优势： 样品为金项链在不同加速电压（5kV 与 15kV）下的扫描电镜图像，当加速电压为 5kV 时，金项链的孔洞、裂纹等缺陷得以体现，具有更多的表面细节，而加速电压为 15kV 时，表面更为平整。 石墨颗粒在不同加速电压（5kV、10kV、15kV）下的三张照片：5kV 时的束流穿透是最弱的，展示了最多的结构信息，具有更好的形貌衬度。 陶瓷在不同加速电压（5kV、15kV）下的两张照片： 加速电压为 5kV 时，可以看到烧结陶瓷的缺陷。 样品是泡沫聚苯乙烯在不同加速电压（5kV、15kV）下的两张照片，对于轻元素样品（高分子材料等），低加速电压可以减少对样品的损伤。
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