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细胞培养过程中 细胞辅助试剂是不可或缺的角色 那么它是怎么影响细胞形态的呢？ BI中国市场部带您分析分析~ 细胞辅助试剂可分为以下四部分： 接下来我们逐条分析！ （点击图片，可查看详细鱼骨图链接） 胰酶 ★☆★☆★☆ 什么情况下是胰酶可能出现了问题呢？  一旦发生消化时间逐渐拉长，或是细胞消化不下来，需注意胰酶是否已经失活。由于胰酶为蛋白类产品，反复冻融容易影响其活性。 品质不佳的胰酶也容易带入支原体或动物源性污染源，BI所生产的胰酶经过辐射照射处理，确保品质及有效杜绝支原体的引入。 临床培养可选用重组胰酶，以避免引入未知动物源病原体。 解决方案： 一般胰酶保存方式，建议15或50ml分装后-20℃冻存，使用前必须37℃水浴或培养箱回温，胰酶消化后使用不含钙镁的缓冲液清洗细胞，以稀释残余的胰酶。 若使用无血清培养基培养时（血清中含有胰酶抑制蛋白），使用胰酶消化后可使用胰酶抑制剂终止残存胰酶反应。 Biological Industries（BI）可提供： （点击产品货号，可查看产品链接） 产品名称    货号 Trypsin Solution B（0.25%）, without Calcium and Magnesium, without Phenol Red 胰蛋白酶（不含钙和镁，不含酚红，不含EDTA） 03-046-1A/B Trypsin Solution B（0.25%）,10X Conc, without Calcium and Magnesium, without Phenol Red 胰蛋白酶（不含钙和镁，不含酚红，10X浓缩液） 03-046-5B Crystalline Trypsin Solution（0.02%）, without Phenol Red 水晶胰酶（不含钙和镁，不含酚红，不含EDTA） 03-047-1A/B Trypsin EDTA Solution A（0.25%）,EDTA（0.02%）, with Phenol Red 胰酶（胰蛋白酶0.25%，EDTA 0.02%） 03-050-1A/B Trypsin EDTA（0.5%）, EDTA（0.2%）,10X Conc, without Phenol Red 胰酶（不含酚红，10X浓缩液） 03-051-5B Trypsin EDTA Solution B（0.25%）,EDTA（0.05%）, with Phenol Red 胰酶（胰蛋白酶0.25%，EDTA0.05%） 03-052-1A/B Trypsin EDTA Solution C（0.05%）,EDTA（0.02%）, with Phenol Red 胰酶（胰蛋白酶0.05%，EDTA 0.02%） 03-053-1A/B Trypsin EDTA Solution C（0.05%）,EDTA（0.02%）, without Phenol Red 胰酶（胰蛋白酶0.05%，EDTA 0.02%，无酚红） 03-054-1A/B Soybean Trypsin Inhibitor 50X Conc., 5mg/ml 大豆胰蛋白酶抑制剂 03-048-1C   缓冲液 ★☆★☆★☆ 细胞在胰酶消化传代之前，应使用PBS洗涤残留的完全培养基（完全培养基中的血清含有胰酶抑制蛋白），如果是对于一些更难消化的细胞，则必须使用不含Ca2+，Mg2+离子的PBS，因为这些离子也会抑制酶的活性。 解决方案： Biological Industries（BI）可提供： （点击产品货号，可查看产品链接） 产品名称 货号 Hanks' Balanced Salt Solution，With  Calcium and Magnesium With Phenol Red HBSS平衡盐溶液（含钙，镁和酚红） 02-015-1ACS Dulbecco's Phosphate Buffered Saline (DPBS),  without Calcium and Magnesium DPBS缓冲液 02-023-1ACS Dulbecco's Phosphate Buffered Saline (DPBS),  10X Conc., without Calcium and Magnesium DPBS缓冲液（10X浓缩液） 02-023-5ACS Phosphate Buffered Saline (PBS),  PH=7.4, without Calcium and Magnesium PBS缓冲液 02-024-1ACS Phosphate Buffered Saline (PBS),  PH=7.4, without Calcium and Magnesium，10X Conc. PBS缓冲液（10X浓缩液） 02-024-5ACS 应从正规供应商处购买，以确保品质，如渗透压、无菌等。   冻存液 ★☆★☆★☆ 冻存液中的抗冻剂对细胞多少具有毒性，所以细胞解冻复苏时，不宜在冷冻管内悬浮太久，需在解冻复苏后尽快转移到完全培养基中，并在隔天置换掉含有抗冻剂的培养基。 细胞的状态不佳，可提高培养基内血清的比率，隔天就更换培养基，以置换掉含有DMSO的培养基。也有可能有些细胞本身冷冻后存活率不佳或冷冻时的细胞数较少。 如以上都有注意到，但复苏率仍然不佳，就必须考虑是否为冻存操作步骤出了问题，是否程序降温、或冻存前细胞状态已不佳（存活率低）。 （详细冻存手法可戳此处） 解决方案： 建议选取指数增长时期的细胞冻存，此时细胞状态较佳。 Biological Industries（BI）可提供： （点击产品货号，可查看产品链接） 中文名称 货号 无血清细胞冻存液 05-065-1 无血清间充质干细胞冻存液 05-712-1 无血清干细胞冻存液 05-710-1 D10无血清冻存液 05-713-1 抗生素 ★☆★☆★☆ 细胞在体内是无菌生长状态，所以抗生素对细胞会有一定程度的影响。 已知某些抗生素对细胞的不同影响，如： 1. β-内酰胺类抗生素（青霉素）--会影响蛋白质合成，抑制细胞生长增殖； 2. 氨基糖苷类/氨基糖类（链霉素，卡那霉素，庆大霉素）--会减少蛋白质合成，ATP水平降低，产生细胞毒性； 3. 内酯类（两性霉素B/fungizone, 制霉菌素）--干扰细胞膜，产生细胞毒性； 所以一般常规细胞培养，请尽量降低抗生素使用率，避免上述影响及细菌抗药性产生。 解决方案： Biological Industries（BI）可提供： （点击产品货号，可查看产品链接） 中文名称 货号 两性霉素B 250mg/ml 03-028-1B 两性霉素B 2500mg/ml 03-029-1B 制真霉素 03-030-1C 青链双抗 03-031-1B 青链双抗，10X浓缩 03-031-5B 青链霉素+制真霉素 三抗 03-032-1B 青链霉素+两性霉素B 三抗 03-033-1B 青链霉素+新霉素 三抗 03-034-1B 硫酸庆大霉素溶液 03-035-1B 卡那霉素溶液 03-049-1B 使用抗生素的时机： 1. 原代细胞培养时---因为在从组织分离时易带入污染； 2. 观察到，并且确认是微生物污染时（去除微生物后，应立即停用抗生素）； 3. 尽量避免使用抗生素作为预防的方法；                              好啦，本期介绍就到此处啦 大家可以点击下方链接回顾精彩内容 希望能帮助到各位噢 感谢大家对以色列BI的关注 --BI中国市场部 往期精彩回顾 ▼ 细胞形态异常，鱼骨图来帮忙（一） 细胞形态异常，鱼骨图来帮忙（二） 细胞形态异常，鱼骨图来帮忙（三） 细胞形态异常，鱼骨图来帮忙（四）   关注微信公众号 可留言或私信我们 BI中国市场部：上海逍鹏生物科技有限公司 产品咨询：021-58785545-8006, 18917190011 技术支持：400-820-3979 了解详细信息可戳原文 原文请点击：阅读详情