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Nature子刊：雄激素受体通过上调ADAR1抑制circRNA表达，促进肝细胞癌
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
浙江大学医学院附属邵逸夫医院蔡秀军教授在腹部外科、肝胆胰外科、微创外科、移植外科等研究方面有丰富的经验，近期其团队利用Arraystar circRNA芯片研究了肝细胞癌（HCC）中雄激素受体（AR）对circRNA表达的影响。研究发现AR可以结合到RNA编辑酶ADAR1的启动子区上调ADAR1 p110的转录，从而抑制circRNA的表达。同时研究发现ADAR1高表达的HCC患者预后不良并且与AR表达正相关。此外，circARSP91是受AR-ADAR1调控并且下调的circRNA，可以在体外和体内抑制HCC肿瘤的生长。该研究成果2017年成功发表在国际知名学术期刊Cell Death and Disease(IF:5.965)上。（芯片实验由康成生物提供技术服务） 研究背景 肝细胞癌（HCC）是由于复杂的遗传和表观遗传改变而导致的异质性恶性肿瘤，是全球癌症相关死亡的第二大原因。HCC的特点是具有明显的性别差异，但其机制尚不明确。雄激素受体（AR）在HCC发生和发展过程中性别差异的作用已有文献报道。另外，环状RNA（circRNA）是一类新的非编码RNA分子，通过多种机制发挥生物学功能以及影响癌症等疾病的发生发展。作用于RNA的腺苷脱氨酶ADAR1可以通过中断RNA编辑促进HCC的发生发展，同时有报道ADAR1是circRNA形成的关键调控分子。然而，由RNA编辑酶调控的circRNA在HCC中的潜在功能和分子机制至今仍然知之甚少。 本研究的目的就是通过circRNA芯片研究HCC中AR通过RNA编辑酶ADAR1抑制circRNA的表达，从而影响HCC，并通过一系列功能机制实验研究该调控的作用机制。 研究思路 为了研究HCC中AR对circRNA表达的影响，首先作者通过qRT-PCR检测了一些已经报道的宿主基因不受AR调控的circRNA，发现AR过表达或者敲除后circRNA表达发生下调或者上调。然后作者通过Arraystar circRNA芯片对AR高表达的HCC细胞系和AR敲除后的HCC细胞系中的circRNA表达谱进行了研究，筛选发现AR敲除后上调的有331个，远高于下调的177个，同时上调的差异倍数也大于下调的差异倍数。这些结果表明AR可以抑制H
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circRNA研究揭示矽肺炎症和肺纤维化的干预靶点
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
东南大学医学院巢杰教授课题组主要研究方向为肺炎和肺纤维化的机理机制的研究。该课题组利用Arraystar CircRNA芯片研究发现circRNA circHECTD1通过HECTD1/ZC3H12A依赖的泛素化介导SiO2诱导的矽肺中巨噬细胞活化，释放相关炎性因子和纤维化因子，继而影响矽肺纤维化的进程，结果表明circHECTD1/ ZC3H12A/HECTD1可能是矽肺炎症和纤维化的有效干预靶点。该研究成果发表在课题组在国际知名学术期刊Theranostics（影响因子8.766）。（芯片实验由康成提供技术服务） 研究背景： 矽肺是由于长期吸入游离二氧化硅（SiO2）粉尘所引起的以肺组织持续慢性炎症、进行性肺纤维化为主，并伴有全身系统性炎症为特征的全身性疾病。矽肺一旦发生，肺损伤呈进行性发展，即使停止粉尘暴露，肺部病变依然进展，导致肺功能障碍，呼吸衰竭，甚至死亡。由于对矽肺的发病机制知之甚少，因此发现矽肺早期诊断分子标志物以及干预肺纤维化进程的靶标已成为迫切需要解决的问题。 CircRNA是一类具有闭合环状结构的非编码RNA，在发育、细胞功能和特定的病理学应答中比如癌症生物学中起到非常重要的作用。circRNA可以作为microRNA海绵竞争性结合miRNA，从而来调控基因表达。研究circRNA和它们参与疾病发生发展的机理机制以及为临床诊断及**提供靶点已经变得越来越重要。 研究思路： 本研究着重于研究SiO2吸入引起肺部细胞激活，释放的细胞因子和化学趋化因子，参与炎症反应和肺纤维化的过程及其机制，为了研究circRNA在这一过程及机制中的作用，研究者运用Arraystar Mouse circRNA芯片研究SiO2诱导的小鼠矽肺模型的肺组织和生理盐水处理的正常小鼠的肺组织的circRNA差异表达谱，筛选出120个差异表达的circRNA（其中73个circRNA上调，47个circRNA下调），结合实验室前期研究，差异表达的circHECTD1的宿主基因HECTD1可以通过泛素化参与SiO2诱导的矽肺的炎症反应和肺纤维化， 因此将circ HECTD1作为重点研究。 qRT-PCR研究发现，cir
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空气过滤器对纯水储存的作用
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
由于实验室级水处理系统的流速、容量要求及生产工艺限制，纯水的储存是纯水系统中必须的步骤。实验证明，合适的储水系统材质、紫外灯和空气过滤器，可以防止空气污染和内部生物膜的形成，以保证储存过程中的纯水质量能够满足实验对电阻率、TOC和细菌含量的需求。 01 空气过滤器的组成和作用 在纯水储存系统的外部污染中，排气口是主要的污染源，空气过滤器能有效降低空气中污染物的进入，维持水质稳定。 1、颗粒和微生物截留 滤膜必须有较低的压降才能让储水系统进行正常的注水和排水，为此我们采用了0.65微米疏水Durapore®滤膜，它具有良好的颗粒和细菌截留率。 2、挥发性有机物截留 通过实验台装置测试了不同的活性炭对挥发性有机物的截留能力。 3、降低二氧化碳的溶入 二氧化碳溶解于水中形成碳酸，电离后形成碳酸盐、氢离子，导致纯水的离子含量升高。苏打能够吸附自身重量25%-35%的二氧化碳。 02 空气过滤器对挥发有机物截留能力测试 活性炭C对丙酮的截留能力约是活性炭A的两倍，活性炭B的三倍；对于甲苯，对应的倍数为1.5和2.5。因此，活性炭C被选作空气过滤器的填充材料会有最佳的截留效率。 03 空气过滤器对TOC控制的作用 空气过滤器的有效性测试是将其安装在30L储水系统进行的。试验结果与无活性炭空气滤膜进行比较，模拟一个普通工作8小时实验室用水情况，安装在储水系统出口端的泵按照设定的程序自动清空储水系统30分钟，出口端的TOC仪监控总有机碳的含量。为了稳定导入污染空气，排气口与一个含有甲苯蒸汽的30L储水系统连接，该瓶中的挥发性有机物的TOC高达7050ppm。 空气过滤器有/无活性炭的储水系统中TOC水平。从数据中可以看出，达到平衡后，无活性炭的空气过滤器比有活性炭的空气过滤器的储水系统中的TOC含量高60-100倍。 04 储存的纯水，水质究竟会如何变化？ 一个60L的储水系统与Elix 10 纯水机相连接，进水和储水由Elix系统自动控制，配置Milli-Q®专用过滤器。实验前，连续两次注满、排空储
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最主流的细胞活力检测方法—CTG(CELL TITER-GLO)发光法简介
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
细胞增殖检测技术已广泛应用于分子生物学、遗传学、肿瘤生物学、免疫学、药理和药代动力学等研究领域。细胞增殖是指细胞在周期调控因子的作用下，通过DNA复制、RNA转录和蛋白质合成等复杂反应而进行的分裂系列过程。细胞通过分裂的方式增殖，细胞增殖是生物体的重要生命特征 。单细胞生物以细胞分裂的方式产生新个体，多细胞生物以细胞分裂的方式产生新的细胞，从而补充体内衰老和死亡的细胞。细胞增殖的同时，在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞，活细胞在总细胞中所占的百分比叫做细胞活力。 检测细胞存活与增殖的方法主要包括观察DNA合成含量和检测细胞代谢活性两种，前者主要是DNA前体物质（胸腺嘧啶核苷类似物）掺入法，比如BRDU、EDU法；后者主要为MTT、XTT、MTS、CCK-8、WST-1及WST-8法等，在后者中现在最主流的就是CTG(CELL TITER-GLO)发光法，此法可快速灵敏的检测活细胞数量，市场上常用的是Promega公司CellTiter-Glo化学发光细胞活性检测试剂盒。 ATP腺嘌呤核苷三磷酸(简称三磷酸腺苷)参与生物体内多种酶促反应，是活细胞新陈代谢的一个指标，其含量直接反应了细胞的数量及细胞状态：实验过程中向细胞培养基加入等体积CellTiter-Glo™试剂，测量发光值，在光信号和体系中，发光值与ATP量成正比，而ATP又和活细胞数正相关，因此可通过检测ATP含量得细胞活力。同普通的MTT、CCK8法相比，CellTiter-Glo™发光活细胞检测系统的检测试剂具有最高灵敏度和较长的信号持续时间，此系统已经广泛地应用在生命科学研究领域中，如一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等，各实验室已普遍使用此技术。此法还有很多优点，如细胞活性分析是高效的“加样－混合－测量”系统，实验操作方便快捷，同时节约细胞用量。CellTiter-Glo™试剂和细胞培养中的常用培养基兼容，如RPMI1640、MEM、DMEMand Ham's F12，也不受酚红和有机溶剂的影响，误差小，准确率高。同MTT、CCK8
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关于无油真空泵优缺点
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
无油真空泵是一种无需任何油作润滑既能运转工作的机械真空泵。它具有结构简单、操作容易、维护方便、不会污染环境等优点。无油真空泵耐用性好，是抽真空，压缩，两用真空泵，是一种应用范围非常广泛获得真空的基本设备。无油真空泵优缺点。 无油真空泵与油泵相比真空度低，抽气量小，但体积小巧，易于安装，维护简单，移动方便，不产生油烟，不污染环境，尤其在要求较高的实验室使用较好。也是实验室最常备的设备之一。 因此在选购无油真空泵时要先确定要求工作的真空度，如果需求的真度高，而选的真空泵就要高于需求的真空度，否则达不到抽真空的要求，就会达不到工作要求。其次是无油真空泵抽气速率，选型时就要稍大于所需求的抽气速率，这样就能更好的满足需要。最后看抽取的气体有无腐蚀性，有腐蚀的气体会腐蚀泵，必须要用特殊的材质才能满足需求。 洛科生产的实验室真空泵主要以中小型的实验室泵为主，依功能种类分成Rocker系列无油式真空泵、Chemker系列耐腐蚀真空泵以及Tanker系列实验室油式真空泵等三个种类。 Rocker 系列实验室真空泵采用活塞式运作(piston pump)及直驱式马达动力传输，完全不需加油保养，使用高级吸震脚垫，提供最大的动力输出及最低的噪音值和震动。Rocker 系列实验室真空泵具备极轻巧外型及环保无油式设计，带给您更多实验室空间的利用及舒适的工作环境。
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VHP灭菌技术的发展及历史沿革
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
VHP灭菌技术的发展及历史沿革 1、概述 汽化过氧化氢（VHP）灭菌技术，是利用过氧化氢在常温下气体状态比液体状态更具杀孢子能力的优点，经生成游离的—OH，用于进攻细胞成分，包括脂类、蛋白质和DNA，达到完全灭菌的要求的一种技术。常用于隔离室、隔离器等密闭空间的灭菌。 2、概念 VHP=Vaporized Hydrogen Peroxide(H2O2) 气化过氧化氢（H2O2）俗称双氧水，过氧化氢常态为液态，经过加热变成气态 3、VHP历史沿革 (1)1980年代末，美国Sterilse Co 首先发现气体过氧化氢相对于液态过氧化氢，仅需较低浓度即可达到同样灭菌效果。 (2)1990年气化过氧化氢正式通过美国EPA核淮，作为灭菌剂，并很快在各个工业领域运用。 4、VHP灭菌原理 (1)过氧化氢因具有氧化还原作用而具有杀菌效果,特别对厌氧芽孢杆菌杀灭效果好。 (2)过氧化氢的作用原理是通过复杂的化学反应解离具有高活性的羟基，破坏细胞膜。 5、VHP 技术特点 (1)低温灭菌工艺（4-80°C）。 (2)在蒸熏程序完成，残留物很少（不需再次清洁） (3)蒸熏后无有毒副产品(健康& 安全) (4)对于其他物品无影响（装置，电器，洁淨室牆板等） (5)VHP灭菌工艺十分容易验证(符合法规要求, 工艺控制) (6)环保(健康& 安全) (7)对高效过滤器HEPA 穿透性好(玻璃纤维) (8)在低气体浓度(1-2mg/l = 1000ppm)下对大多数的微生物灭菌效果很好 (9)灭菌所需时间短 (10)节约成本(停机时间短) 6、VHP与各类型灭菌方式比较 6.1甲醛使用现状 (1)气体是由甲醛溶液或福马林加热形成 (2)作用慢，需要长蒸熏时间 (3)结晶状残留物 (4)未有出版物证明灭菌前后的效果有效 (5)十分难验证灭菌程序 (6)蒸熏时人员必须撤离(停机时间长) (7)剧毒且被归类为'Class A' 致癌和导致细胞变异的物质 (8)易燃 6.2 VHP与各类型灭菌方式比较-ClO2和VHP (1)二氧化氯是由氯气容器生成 (2)ClO2 是可见, 黄绿色气体，气化速度很快 (3)相较于VHP，ClO2 的毒性较强，对于材料的相容性较差.
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VHP灭菌器与VHP灭菌系统的最新动态观察
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
VHP灭菌器与VHP灭菌系统的最新动态观察 摘要：以淄博威施医疗科技有限公司研制生产的低温汽化过氧化氢（VHP灭菌器）MQ系列灭菌系统为例，介绍了目前VHP灭菌器的最新技术动向，并探讨其在GMP管理方面的优势。 关键词：VHP灭菌器；设备特性；GMP; 在已经发布的我国2010版GMP中，大幅度地提升了对无菌药品的生产要求。而且，灭菌一直都是无菌药品生产的关键环节。为提高药品质量，选择适当的灭菌方法显得尤为重要。 在各种灭菌技术中，液体过氧化氢的杀菌性能早在100多年前就得到了认可，但是，液态过氧化氢要求有很高的浓度和很长的接触时间，才具有杀孢子能力。后来经研究发现，气态过氧化氢在低浓度的状态下比液体状态下具有更高的杀孢子能力。其主要原理是生成游离的氢基，用于进攻细胞成分，包括脂类、蛋白质和DNA。基于此点，淄博威施医疗科技有限公司设计出了一种新型的、适用于医药产业的低温汽化过氧化氢（VHP灭菌器）MQ系列灭菌系统，能够广泛应用于医药产品包装和诊断仪器消毒。 1、设备特性 MQ系列VHP灭菌器提供一种高效的低温灭菌方法，利用汽化过氧化氢作为灭菌剂进行灭菌。该设备被设计为一个独立的单元，能完全融入流水线生产方式。与传统灭菌方式相比，大大缩短了灭菌循环时间。设备的控制系统能够全程控制灭菌循环、选择与监控，实现过程全自动化。触摸屏设计使得系统的操作变得更为简易。并且，设备的灭菌方法具有很好的材料兼容性，适用于许多金属和塑料。灭菌后仅产生氧气和水等无毒残留物质。VHP灭菌器对微生物有广谱杀菌作用，适用于杀灭各种真菌、细菌、病毒和芽孢。 此外，VHP灭菌器还具备以下特性： （1）独立的温度和压力循环检测系统； （2）符合GMP要求的设计； （3）适用于参数放行； （4）循环程序永久记忆； （5）水蒸汽和氧气等副产品符合环保要求； （6）无需附加通风解毒设备； （7）不要求等离子体。 2、设备结构与工作原理 2.1 设备结构 MQ系列灭菌器主要由以下几个
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国产自主第三代电转技术Celetrix——挑战Amaxa技术
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
某些真核动物细胞，比如原代的T细胞，神经细胞，和干细胞等，其特性决定了被广泛使用的脂质体转染等化学试剂法必定不可能获得可接受的转染效果。而病毒转染的繁琐程序和潜在危害性又使得大规模应用病毒来解决这些细胞的转染实验成为实验者不愿意选择的路径。 15年前Amaxa技术出现，改进了古老的电转技术，针对真核细胞做了电击波形和能量优化，又特别提出了保护细胞在电击瞬间的保护液（转染液）配方，从而大幅提高了这些原代真核细胞电转的效率和存活率，由于电转导致的DNA进入细胞特别快，从而蛋白表达也可在几个小时内观察到，由此amaxa公司特别“制造”了一个词“核转染”来说明这种技术的优越之处。由此，Amaxa定义了第二代电转技术。（Amaxa公司后来被Lonza公司收购，进来逐渐被称为Lonza核转染仪） 15年前，Amaxa技术是革命性改进，但是随着人们越来越多的使用amaxa电转设备，还是逐渐暴露出其一些固有缺陷。 1）amaxa技术支持常说的一句话：“这是你细胞的问题。” amaxa技术基于美国ATCC所谓“标准”细胞而设定，但实际上实验室内使用的细胞都是本实验室或者友好实验室扩增传代一代一代传下来的，其和ATCC标准细胞早已千差万别。对于电转这种在刀尖上跳舞：“增加一分则细胞电死，减少一分则细胞电不进去”的原理，这种细胞性状的细微差别就导致了电转效果的巨大差别，这就是为什么大多数人反馈，达不到amaxa标准实验Protocol上的电转效果：别人明明是60%转染效率，为什么我死活做出来就只有30%？ 由于Amaxa设备是按照细胞类型编码转染程序，而为了防止技术泄密，其采用了过度保护的措施，每个程序编码代号完全是乱码字母数字，导致用户完全无法针对本实验室细胞对amaxa程序进行优化调整。也就是说，一旦转染效果不理想，排除其它因素以外，如果确认细胞不标准，Amaxa/Lonza的技术人员就只能建议你去买ATCC的标准细胞来满足达到amaxa技术的效果。这是典型的“削足适履”，全球实验者对此意见都非常的大。 2）细胞死亡
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水质检测仪比色计和分光光度计的区别
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
目前水质检测仪的测定方法有很多，但在日常中一些人很容易将这些方法搞混，尤其是很多人不知道比色计与分光光度计的区别，这两种水质检测传感器都是通过对光的分析得出参数，但在结构和检测原理方面是有所区别的，从原理上来说比色计主要是通过光波的三色值来确定水质参数，而分光光度计则是通过水质中污染物的反射率等波长分析来的是水质的参数。从结构上来说分光光度计比较复杂。因此大家在购买时要根据自己的需求来选择。 比色计水质检测仪的特点： 比色计被设计为通过模仿人类的眼睛、大脑感知来执行物理样本的分析。换句话说它的设计就是按照分析水质颜色的方式。通过使用一组光源和CIE 10度标准观察器组合以及隔离宽波段的三色吸收滤光片，比色计将色彩信息提取为三色值以产生客观的色彩数据。如果需要可以将这些参数与标准进行比较。 应用： 比色计非常准确，非常适合测定色差，以及相似颜色的常规比较。但它们对于质量控制是非常重要的。 缺点：虽然比色计可以产生高度准确的颜色测量值，但它们不能识别异构体或着色剂的强度，不适合于颜色配制，并且不能在可变的光源观察者条件下使用。 分光光度计水质检测仪的特点 分光光度计是一种通过全光谱颜色测量进行水质物理样品检测的仪器。通过对水质的反射率，吸光度或透射率特性进行逐波长光谱分析，可以产生超出人眼可观测的精确数据。而且分光光度计也可以用来计算物理的比色信息。 应用：分光光度计比比色计具有更高的灵活性和多功能性，部分原因是它们提供多种光源观测器组合，可以在多种几何布局（包括45°/ 0°和d / 8°）下工作。因此分光光度计能够测量同色异谱，识别着色剂强度，分析范围广泛的样品类型，并允许用户在包括或不包括镜面反射之间进行选择以考虑几何属性。全光谱分析还提供了更高的特异性，可能会识别比色计更小的颜色差异。分光光度仪器非常适用于研究和开发阶段的广泛应用，以及整个生产过程中的质量控制。 缺点：分光光度计的原理比较复
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为什么要使用多重荧光方法进行western blot的检测？
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
最近关于western blot数据造假的学术新闻成了科研的热搜词条，其数据造假包括，均存在一图多用，用了剪切，拼接，翻转，旋转，调整大小，故意抹平背景等P图手法，那我们来看看这些造假的数据。 一、一图两用——用同一条带，P图后代表不同实验结果。 两个不同实验，同一条带代表不同蛋白（GST-IkBa和Caspase） 《锌指蛋白A20对氧化性低密度脂蛋白介导的巨噬细胞与血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制的研究》，2005年6月 二、抹平背景 为了达到预期的实验效果，故意调整对比度，将不要的条带抹去。 Kagami, A. et al. Acetylation regulates monopolar attachment at multiple levels during meiosis I in fission yeast. EMBO Rep. 12, 1189–1195 (2011). 三、拼图粘贴 ABCD变成了ACBD --Metformin inhibits cell proliferation, migration and invasion by attenuating CSC function mediated by deregulating miRNAs in pancreatic cancer cells.Cancer Prevention Research (2012） 四、一组对照多次使用 像GAPDH、β-actin这些基本都是阳性的结果，所以有时候有些小伙伴就图省事儿，做一次GAPDH、β-actin的WB图，可以用一阵子，发几篇文章了，有时候调调亮度，有时候增加以下对比度，有的时候镜像反转一下。 --Increased Ras GTPase activity is regulated by miRNAs that can be attenuated by CDF treatment in pancreatic cancer cells.Cancer Letters (2012) 那么我们如何遏制这样造假数据的发生的，**的办法是选择合适合理的检测方法和提供真实的图片信息。 A、z验人员应该采用现在动态范围更宽的多重荧光western blot检测方法来进行western blot检测，多重荧光检测二抗使用荧光基团标记，膜上的靶标蛋白浓度与荧光信号强度呈线性关系，实现真正的定量要求，无需玻剥离膜和二次孵育，进行上样质控，目标蛋白和内参蛋白在同一张膜上，就不会发生上面数据造假的情况发生。 成像仪器要提供
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【示踪】利用DeaLT技术揭示成人心肌细胞再生的来源
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
4月26日，国际学术期刊《Circulation》在线发表了中国科学院生物化学与细胞生物学研究所周斌研究组的研究成果“Genetic Lineage Tracing of Non-myocyte Population by Dual Recombinases”。该研究工作利用新建立的双同源重组技术（DeaLT）揭示了在胚胎心脏发育、成体心脏稳态维持及损伤修复、成体骨骼肌稳态维持和损伤修复过程中，非肌肉细胞分化形成肌肉细胞的潜能。 南模生物为该研究构建了超过15种小鼠模型。 Highlight 待解决问题:如何排它性地分别标记非肌肉细胞和心肌细胞？ 解决方法: 利用DeaLT 双同源重组示踪报告基因系统（Dual-recombinase-activated lineage tracing）将 Dre-rox 重组系统与传统的 Cre-loxP 重组系统结合起来，交错的 loxP 和 rox 位点可以在 Cre-loxP 或 Dre-rox 重组后切除另一套重组系统，在可能引起重组酶异位表达的细胞中将另一套重组酶的识别位点切除掉，从而有效地阻止异位重组，使细胞排它性地被标记上 ZsGreen 或 tdTomato 荧光，增加谱系示踪结果的准确性。 根据 loxP 和 rox 的位置顺序不同，分为 IR 和 NR 两种报告基因系统。 方案一:IR 先用心肌细胞Marker的Dre使心肌细胞被标记上tdTomato红色荧光； 再用诱导型Cre，在药物诱导后表达Cre重组酶，将除了心肌细胞以外的所有非心肌细胞都永久标记上ZsGreen绿色荧光； 如果非肌细胞向肌细胞转化，那么由非肌细胞转化而成的新生心肌细胞将是ZsGreen绿色荧光标记的。所以只需要在心肌再生过程中寻找是否有带绿色荧光的心肌细胞即可。 方案二:NR 首先心肌细胞Marker的Dre和广泛型表达的Cre将细胞分为两类，一类是表达tdTomato红色荧光的肌细胞，一类是表达ZsGreen绿色荧光的非肌细胞； 如果发生非肌细胞向肌细胞的命运转化，那么在新肌细胞生成过程中，心肌细胞Marker的Dre会介导原来绿色荧光标记的细胞被标记上tdTomato红色荧光，因此会同时存在绿色和红色两种标记均阳性的新生肌细胞，产生黄色荧光信号。 研究背景 心
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干燥箱日常使用问题集锦
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
干燥箱又名“烘箱”、“烤箱”，根据干燥箱类型又可分为普通干燥箱、鼓风干燥箱和真空干燥箱。 干燥箱应用于化工，医药，铸造，汽车，食品，机械等各个行业。 一般分为镀锌钢板和不锈钢内胆的，指针的和数显的，自然对流和鼓风循环的，常规烘箱和真空类型的。 接下来关于大家在使用干燥箱过程中经常会遇到的一些问题，集思仪器将一一为大家解答。 一、为什么干燥箱不加热？ 答：一般情况下可能控温仪、电热管、风机出问题： 1.测量控温仪输出； 2.测量加热管阻值； 3.风机是否转？ 二、鼓风干燥箱台式和立式有什么区别？ 答：**从外观，台式与立式的区别在于：一个是落地式，一个是卧式。 1）立式烘箱和台式烘箱仪表所处的位置分别是: a、立式烘箱的仪表在箱体下面（如客户提出仪表在上面，也行）。 b、台式烘箱的仪表在箱体左边，立式烘箱和台式烘箱仪表功能差不多，就是其结构形状不太一样。 2）立式烘箱和台式烘箱风机所处的位置分别是： A、立式烘箱可按国家标准（±2%）因为风道结构比较特殊，风机在箱体的底部，自然空气对流。 B、台式烘箱的风机在箱体的后面,强迫空气对流。 三、真空干燥箱和鼓风干燥箱有什么区别？ 答：真空干燥箱与鼓风干燥箱是我们常用的两种干燥设备。我们知道，要将干燥物料进行干燥，无非是通过直接加热、抽真空负压抽湿等方式达到干燥的目的。可是，这两者区别在哪儿呢？ 通过直接加热方式，当然有的还有鼓风排风辅助方式，它是通过对物料中的水分、溶剂或挥发性组分分子热作用，使其分子快速运动从而脱离干燥物料而逐渐使物料得到干燥。它的干燥速度可以很快，干燥温度可以很高。 特别是鼓风干燥箱，在风机的作用下，快速的将物料表面挥发出来的挥发性物质分子通过空气交换而带走，从而达到快速干燥物料的作用。 真空干燥箱是通过真空泵将干燥物料所在的空间抽成负压即所谓真空状态。我们知道，在真空状态，或低压状态下，物料中的水分、溶剂及其他挥发性组分的沸点降低
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R300A真空抽滤装置和砂芯过滤器的区别和不同应用范围
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
R300A真空抽滤装置是一种全新的实验室抽滤产品，其在设计、选用的材质和使用操作上均和产品砂芯溶剂过滤器有着诸多差异，大幅度简化了操作步骤，让过滤变得更简单。 传统的砂芯溶剂真空过滤器整体均采用玻璃材质制造，在使用过程中如果误操作，玻璃本身是一种易碎材质，容易摔碎、破裂，增加了后期的易损件购买成本；中部支撑滤膜的垫片，使用砂芯玻璃材料制造，如果过滤有色、粘稠的样品，非常容易造成砂芯的堵塞和污迹，由于砂芯孔径细密，清洗比较困难；由于玻璃无法制作出非常复杂的结构，所以传统溶剂过滤器在对滤膜和砂芯滤膜基座进行密封时，只能使用夹具固定，由于上下玻璃部件没有软性材料密封，密封性能差强人意，同时夹具的固定在操作上也比较麻烦。 而R300A从设计之初就是为了改变旧款产品的诸多缺陷，避免漏液漏气提升密封性能、减少误操作对过滤器的损坏、让过滤器变得更加简单易用而使得在过滤时不需要人员看护。其和传统砂芯溶剂过滤器相比，主要变化有： 1.创新的自动进样设计，即可以传统的手工倾倒滤液，也可以自动进液。只需要将进液软管的一端放入待过滤的液体中，另一端和漏斗杯盖的进液口连接，抽真空后液体会自行吸入滤杯，不需要手工倒液。 2.旋卡式过滤漏斗的过滤杯和滤膜放置基座采用旋卡式方式连接，只需轻轻旋转过滤杯即可将过滤杯和漏斗基座分开和组装好，和传统砂芯过滤器用夹具密封滤杯和基座部分相比，旋卡式过滤漏斗不需要使用夹具、卡箍等附件固定。取拿滤膜方便，密封性能更好。 3.过滤瓶泵管接头带有保护帽，保护帽可以彻底防止在插拔真空泵管时用力过大容易弄断玻璃抽滤瓶接口的问题。减少后期易损件的购置费用，为用户省去一笔费用。 4.底部带有固定底座可以吸附在光滑的桌面上，防止过滤瓶摇晃、倾倒。 5.过滤瓶和抽滤杯都标有刻度线，方便用户观察。 6.标配带有真空表和真空调节阀，方便使用人员在过滤时根据实际需要调节过滤速度。 7.带有防废液倒吸的阻水过滤器，可
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recision BioScience公司 off-the-Shelf T细胞**技术
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
自体CAR-T细胞过继转移可诱导复发/难治性血液恶性肿瘤患者的持续缓解，但是同时也存在一系列问题：1. 重症癌症病人，可能无法获取自体T细胞进行CAR-T生产 2. 自体CAR-T细胞的异质性可能带来不可预测的临床反应。 Precision BioScience通过其专利ARCUS基因编辑技术平台，使用健康人T细胞建立通用CAR-T细胞，获得了生物制药商Baxalta17亿美金投资。通过基因编辑去除细胞原有TCR，避免内源TCR引起的移植排斥反应，通过基因编辑，改变免疫耐受，提高CAR-T到肿瘤局部的能力，且具有保证批间一致性的优势。 Precision BioScience 在2018年三月份Best Practice & Research Clinical Haematology上发表了其off-the-Shelf T细胞**技术体系Off the shelf T cell therapies for hematologic malignancies。 Off the shelf T cell技术流程：文章系统介绍了Off the shelf T cell技术 1. Gene editing for production of allogeneic CAR-T cells from unrelated healthy donor cells 2. Allogeneic CAR-T cells with targeted CAR insertion by homologous recombination 3. Additional gene edits to reduce immunogenicity and resist suppression within the tumor microenvironment 4. Allogeneic CAR-T cell manufacturing 5. Allogeneic CAR-T cell analytical methods 5.1 Viability and cell count 5.2 Cellular phenotype 5.3 Functional analysis Traditionally, functional response of any T cell to antigenic challenges is estimated by cytokine production, cytotoxic activity, and T cell proliferation. Interferon gamma is a classical target to analyze T cell potency and is utilized as indicative of the biological functionality of manufactured T cell products. Conventional ELISA is a time-consuming procedure which requires well trained personnel or additional expenses for the
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半数有效量（ED50）的测定
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
药理学实验报告 实验：半数有效量（ED50）的测定 一、实验目的和原理 其中S＝i 二、实验材料 小鼠50只，（sodium pentobarbital solution）小鼠笼，天平，0.5ml或0.25ml注射器。 2、给药：取体重25g左右的健康小鼠50只，查随机数字表，随机分为5个组，每组8只(除去极端重量小鼠2只)。按表1所列的各组给药浓度分别腹腔注射0.1ml/10g。 3、记录结果：以翻正反射消失为入睡指标，观察药物的催眠效应，记录各组腹腔注射后15min内睡眠鼠数，填入表1。 四、实验结果
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