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试剂盒酶的底物分类
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
试剂盒酶的底物 酶的底物 1.3.3.1 HRP的底物 HRP催化过氧化物的氧化反应,最具代表性的过氧化物为H2O2,其反应式如下:DH2+ H2O2 D+ H2O上式中,DH2为供氧体,H2O2为受氢体。 2.在ELISA试剂盒中,DH2一般为无色化合物,经酶作用后成为有色的产品,以便作比色测定。常用的供氢体有邻苯二胺(O-phenylenediamine, OPD)、四甲基联苯(3,3",5,5tetramethylbenzidine, TM和ABTS[2,2"-azino-di-(3- ethylbenziazobine sulfonate-6)]。 3.OPD氧化后的产品呈橙红色,用酸中止酶反应后,在492nm处有最高吸收峰,灵敏度高,比色便当,是HRP结合物最常用的底物。OPD自身难溶于水,OPD?2HCL为水溶性。曾有报道OPD有致异变性,操作时应予留心。OPD见光易蜕变,与过氧化氢混组成底物运用液后更不安稳,须现装备现用。在试剂盒中,OPD和H2O2一般分红二组分,OPD可制成一定量的粉剂或片剂方法,片剂中含有发泡助溶剂,运用更为便当。 4.过氧化氢则配入底物缓冲液中,ELISA试剂盒有制成易保存的浓缩液,运用时用蒸馏水稀释。先进的ELISA试剂盒中则直接配成含保护剂的作业浓度为0.02% H2O2的运用液,只需参与OPD后即可作为底物运用液。TMB经HRP作用***产品显蓝色,目视对比明显。 5.TMB性质较安稳,可配成溶液试剂,只需与H2O2溶液混和即成运用液,可直接作底物运用。其他,TMB又有无致癌性等利益,因此在ELISA中运用日趋广泛。酶反应用HCL或H2SO4中止后,TMB产品由蓝色呈黄色,可在比色计中定量,最适吸收波长为405nm。 6.ABTS虽不如OPD和TMB灵敏,但空白值极低,也为一些试剂盒所选用。另一种HRP的底物为3-(4-羟基)苯丙酸[3-(4-hydroxy)phenly propionic acid,HPPA],经HRP作用后,产品显荧光,可用荧光光度计测量。用于ELISA的利益为可加宽定量测定的线性规划。 7.HRP对氢受体的专一性很高,ELISA试剂盒仅作用于H2O2、小分醇的过氧化物和尿素过氧化物(urea peroxide)。H2O2运用最多,但尿素过氧化物为固体,作为试剂较H2O2便当、安
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实验室纯水分为几个等级
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
实验室纯水分四个等级,即: 1、蒸馏水: 实验室最常用的一种纯水,虽设备便宜,但极其耗能和费水且速度慢,应用会逐渐减少。蒸馏水能去除自来水内大部分的污染物。 2、去离子水: 应用离子交换树脂去除水中的阴离子和阳离子,但水中仍然存在可溶性的有机物,可以污染离子交换柱从而降低其功效,去离子水存放后也容易引起细菌的繁殖。 3、反渗水: 反渗水克服了蒸馏水和去离子水的许多缺点,利用反渗透技术可以有效的去除水中的溶解盐、胶体,细菌、病毒、细菌内毒素和大部分有机物等杂质。 4、超纯水: 超纯水在TOC、细菌、内毒素等指标方面并不相同,要根据实验的要求来确定,如细胞培养则对细菌和内毒素有要求,而HPLC则要求TOC低。
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5张细胞动图揭秘绞杀癌细胞之战
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
5张细胞动图揭秘绞杀癌细胞之战,最后1张喜闻乐见! 原创 2015-06-27 ©医学信使 医学信使 1.如果要评选一个最让世人感到恐惧的名词,毫无疑问,“癌症”一定会名列前茅。 2.在医学科技日新月异的今天,癌症依然每年夺走数百万人的生命。人体其实是由一个个细胞组成的“社区”。每个细胞都照章行事,知道何时该生长分裂,也知道怎样和别的细胞结合,形成组织和器官。 3. 而癌细胞与正常细胞不同,癌细胞最显著的特征就是无限分裂、永不停止,而正常细胞则不会无限生长。 4.一旦癌细胞分裂出了足够多的“同类”,站稳了脚跟,就露出了自己的真面目--一群“走火入魔”的细胞。 5.它们不具有任何对身体有益的生理功能,只是不断地繁殖分裂,一个变成两个,两个变成四个四个变成八个……癌细胞四处繁殖,疯狂地吸取身体的养分,挤压正常细胞的生存空间,阻塞血液循环的通路,释放各种毒素,最终将整个身体拖垮,出现谁都不愿见到的情形…… 6.然而体内的细胞毒性T细胞则是癌细胞的克星,它在体内不断地巡逻找出并杀死癌细胞或者感染了危险病毒的细胞。当癌细胞遇到细胞毒T细胞或杀伤性T细胞时,便可杀死癌细胞。如图橙色的是细胞毒T细胞,蓝色的是癌细胞,最近英国剑桥大学的研究人员利用最先进的成像技术,真实记录了杀死癌细胞的过程。
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干燥箱真空泵T170的用途和使用说明
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
干燥箱真空泵T170是目前圣斯特主推的一款真空泵产品,采用了传统的、技术已经非常成熟的油旋片式设计原理。该种类型的真空泵与其他结构原理的产品比较,最为显著的优势在于真空度和抽速两项影响真空泵实际抽吸效果的参数,均比较高。这种优势可以使T170油泵在较短的时间内就可以达到较高的真空度,市场适合在实验室内搭配真空干燥箱共同使用。一般来说大部分真空干燥箱本身所能达到的极限真空度为133Pa,而T170可以达到13Pa的较高真空度,完全超过了大部分真空干燥箱所能达到的极限真空度。同时70L/Min的抽气速率使其在搭配一些内部容积较大的箱体时,也能在短时间内就达到参标真空度,是真空干燥箱的理想伴侣。 干燥箱真空泵T170具体的使用和按照方法如下: 1.连接管路,检查各接口及阀门。 2.将真空泵油倒入泵内,倾倒泵油时检视油泵一侧的油位观察窗,泵油液面应在MIN和MAX线之间,建议油位保持过半,倒完泵油后将盖子拧上(加油盖即不要拧太紧也不要过松)。 3.开机,干燥箱真空泵T170开始工作。(油泵工作过程中会有油雾从倒油口喷溅出来,属于油泵工作时的正常现象。如有需要可选配油雾过滤器或参考本说明中“常见问题及建议”中的第一条。) 4.工作结束后,必须先解除前端容器的真空状态(打开清除接口盖子以排气),再关机。 5.真空泵油的更换方法:油腔底部有排出孔,下面置废液缸后,旋开底部螺母,再旋开顶部的加油口盖,必要时可使泵体倾斜,倾完废油后,旋好排出孔盖子,通过注油孔缓慢加泵油至合理液位,旋好盖子。 更多产品咨询、使用注意事项可来电详询。 是目前圣斯特主推的一款真空泵产品,采用了传统的、技术已经非常成熟的油旋片式设计原理。该种类型的真空泵与其他结构原理的产品比较,最为显著的优势在于真空度和抽速两项影响真空泵实际抽吸效果的参数,均比较高。这种优势可以使T170油泵在较短的时间内就可以达到较高的真空度,市场适合在实验室内搭配真空干燥箱共同使用。一般来说大部分真
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动物细胞培养基常见问题20问
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
培养基是细胞培养中不可缺少的营养成分,但是最基础的培养基却给实验者带来了一系列的问题。别小看细胞培养,这里可蕴含着大学问。 1.怎样查到一个特定细胞株的相关知识和培养条件? ATCC(American Type Culture Collection)收集了绝大多数细胞的详细资料。打开ATCC网页的Cells and hybridomas链接,输入细胞名称就可以搜索ATCC的细胞数据库。数据库中有每一种细胞的详细描述,包括细胞的来源,培养和冻存条件,以及相关文献等资料。 2.如何选用特殊细胞系培养基? 培养某类型细胞没有固定的培养条件。MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199中同样容易生长。总之,**MEM、DMEM做贴壁细胞培养;RPMI1640做悬浮细胞培养;各种目的无血清培养**AIMV培养基(SFM)。新的细胞培养时要详查资料。 3.自己新配制的液体培养基能保存多久? 我们建议将新配制的培养基放置于4℃,避光保存尽量在一周内使用完毕。培养基越新鲜越好。 4.培养基中添加了血清和抗生素后,可长期保存吗? 一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时,您应该在一到两周内使用它。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。 5.培养基中是否须添加抗生素? 除了特殊筛选系统外,一般正常培养状态下,培养基中不应添加任何抗生素。 为防止细菌、真菌污染,可以加入青霉素-链霉素双抗溶液,其培养基中的终浓度为青霉素100U/ml,链霉素为100ug/ml。 6.液体培养基可以放-20℃保存吗? 不可以!因为在-20℃下,培养基中的盐容易析出,培养基融化后,有的盐可能无法重新溶解,从而导致培养基渗透压降低,培养细胞时,细胞容易破裂而死亡。 7.为何培养基保存于4℃冰箱中,颜色会偏暗红色,且pH值越来越偏碱性? 培养基保存于4℃冰箱中, 培养基内之CO2 会逐渐溢出,造成培养基越来越偏碱性。而培养基中之酸碱指示剂(通常为phenol red) 的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之结果, 将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时, 可以通入无菌过
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ELISA方法的基本类型、用途及操作程序
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
ELISA方法的基本类型、用途及操作程序 1、直接ELISA试剂盒 本法首要用于检测抗体。以鸭病毒性肝炎(DVH)抗体的ELISA为例,直接ELISA的操作程序如下: (1) 资料 ① 包被液、洗刷液、保温液、底物液、停止液; ② DVH包被抗原、酶标抗抗体、阴性及阳性DVH参阅血清;待检鸭血清; ③ ELISA检测仪、加样器、聚苯乙烯微量板。 (2) 方法过程 ① 加抗原包被 → 4℃过夜,洗刷三次、抛干 ② 加待检血清 → 37℃ 2小时,洗刷三次、抛干 ③ 加酶标抗体 → 37℃ 2小时,洗刷三次、抛干 ④ 加底物液 → 37℃ 30分钟,加停止液 ⑤ 用ELISA检测仪测定OD值,并计算出P/N比值。 (3) 成果判定 已知阳性血清与已知阴性血清的比值(P/N)≥2.1,并且已知阳性血清的OD值≥0.4;在上述条件建立的情况下,如果待检血清与已知阴性血清的比值(P/N)≥2.1,并且待检血清的OD值≥0.4,则判为阳性,不然判为阴性。 2、双抗体夹心ELISA试剂盒 本法首要用于检测大分子抗原。现以检测鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的双夹心抗体ELISA为例介绍本法的操作程序。 ① 加抗体包被 → 4℃过夜,洗刷三次、抛干 ② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟,洗刷三次、抛干 ③ 加酶标抗体 → 37℃ 30分钟,洗刷三次、抛干 ④ 加底物液 → 37℃ 15分钟,加停止液 ⑤ 用ELISA检测仪测定OD值。 3、双夹心ELISA试剂盒 此法与双抗体夹心ELISA的首要差异在于:它是采用酶标抗抗体查看多种大分子抗原,它不只不用符号每一种抗体,还可进步试验的敏感性。 此法的根本程序为: ① 加抗体(Ab-1)包被 → 4℃过夜,洗刷三次、抛干 ② 加待检抗原(Ag) → 37℃ 60分钟,洗刷三次、抛干 ③ 加用非同种动物出产的特异性抗体(Ab-2)→ 37℃ 60分钟,洗刷三次、抛干 ④ 加入酶标抗Ab-2抗体(AB-3)→ 37℃ 60分钟,洗刷三次、抛干 ⑤ 加底物液 → 37℃ 20分钟,加停止液 ⑥ 用ELISA检测仪测定OD值。
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IT21疑难降解检材DNA分析试剂盒相关问题汇总
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
IT21疑难降解检材DNA分析试剂盒自推出以来,国内多家权威用户在实际案例中使用本试剂进行了分型和研究,解决了疑难降解DNA检材的分型难题;在此就用户关心的相关问题解答如下: 1.IT21适用于哪些检材? 无毛囊发干,陈旧性骨骼等DNA含量低或高度降解的检材; 2.IT21的原理? IT21的分型方法是基于逆转座子(Retrotransposable Elements,RE)的多态性,逆转座子是主要在RNA转换为cDNA的过程中发挥作用的DNA序列,它位于常染色体上,大小在2-500bp,占常染色体40%左右。它是DNA表达的调控序列,包含缺失和插入的序列,每个个体间存在不同的序列,特别适合用于个体识别。 3.每套试剂盒可用于检测多少个样品? 采用推荐的25ul扩增体系,可检测50人份; 采用国内常用的10ul扩增体系,可检测100人份; 4.IT21所需设备有哪些? IT21不需要额外购买任何设备,它适用于目前DNA实验室常规平台,例如9700/3130、3500、3500xl等。 5.采用IT21试剂盒与线粒体测序相比有哪些优势? 操作简单,时间短; 不需要额外设备的支持,适用于实验室常规平台; 双等位基因分析系统,分析简单; 6.是否经过国内权威机构测试? 经过公安部二所,上海803,武汉市局,北京东城分局等多家机构测试。 7.为什么扩增片断可以低至60-125bp? 超短引物设计方案,上游引物(FC)可直接扩增插入或缺失位点序列,而将下游引物分为两种,一种是插入片段引物(RI),可以和部分插入序列结合,从而扩增出插入位点序列;另一种是缺失片段引物(RN),该引物只能和无插入序列的位点结合;每个位点对应三条引物,从而不用将插入序列完全扩增下来,大大降低了扩增产物的大小,增加了对高度降解检材扩增的成功率。具体如下图: 7.为什么IT2灵敏度远高于传统STR分型? IT21的分型方法是基于逆转座子(Retrotransposable Elements,RE)的多态性,逆转座子主要在RNA转换为cDNA的过程中发挥作用,它位于常染色体上,大小在2-500bp,占常染色体40%左右。而常规STR
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COD快速消解方法
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
COD--快速消解方法cod快速消解工作原理:1.根据COD快速消解分光光度法,利用COD标准浓度溶液,绘制出吸光度与COD值之间的标准曲线。2.学习COD快速消解分光光度法的原理,掌握其测定方法。在已知浓度的COD标准溶液试样中,加入已知量的重铬酸钾溶液,在强硫酸介质中,以硫酸银作为催化剂,经过高温消解后,用分光光度法可以测定COD值。1.1mol邻苯二甲酸氢钾可以被30mol重铬酸钾完全氧化,其化学需氧量相当于30mol的氧(1/2O)。因此,可以利用邻苯二甲酸氢钾配置已知浓度的COD标准溶液。2.重铬酸钾能够氧化邻苯二甲酸氢钾,当试样中COD值为100~1000mg/L时,其被还原产生的三价铬(Cr3 )可以在600nm±20nm波长处测定吸光度,则试样中的COD值与三价铬(Cr3 )的吸光度的增加值成正比例关系。3.当试样中COD值为15~250mg/L时,重铬酸钾未被还原的六价铬(Cr6 )和被还原的三价铬(Cr3 )可以在440nm±20nm波长处测定总吸光度,则试样中COD值与总吸光度的减少值成正比例关系。 收集下列物品: 快速消解操作流程 : 1. 打开DRB200消解器,预热到165℃。温度和程序设置与选择参见仪器程序更新。 2. 拧开两支LABII第二实验室COD快速消解预制管试剂的盖子。 确认使用的是合适量程的试剂。 3. 样品准备: 将一支预制管试剂拿住并保持在45°,用移液管或移液枪移取2.00 mL水样到预制管中。 4. 空白样准备: 将另一支预制管试剂拿住并保持在45°,用移液管或移液枪移取2.00 mL去离子水到预制管中。 5. 将试管盖拧紧。用水冲洗外壁并用清洁的纸巾擦干。 如果试管盖未拧紧,可能会在消解过程中漏气并导致不准确的结果。 6. 拿住试管盖的部分,将预制管在水槽上方轻轻地上下颠倒几次使液体混合,然后将预制管内的固体摇晃到悬浮的状态。 预制管在混合的过程中会变得很烫。 7. 将预制管放入已经预热的DRB200消解器中,盖上保护盖。 8. 等待大约8分 钟待消解器的温度回升到165℃. 放满15支预制管需等待大约8分钟,较少的预制管需要较短的时间
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APD,PMT和CCD的介绍
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
Azure Biosystems 公司是一家创新型服务于生命科学领域的的公司,成像产品体现了创新、高技术和颠覆性的精神。在原来C系列多功能成像系统的基础上,我们推出了Azure Sapphire双模式多光谱激光成像系统。采用每个通道用专属的检测器,PMT用于蓝光和磷屏扫描成像,3个独立的APD检测器分别用于绿光、红光和近红外荧光扫描检测,同时具有CCD检测器用于超高灵敏化学发光的检测。 为什么sapphire每个通道要用专属的检测,优势是什么? 光电倍增管(PMT)和雪崩光电二极管(APD)是用在扫描成像系统中常用的光学元件。 PMT检测器:是光子技术器件中的一个重要产品,它是一种具有极高灵敏度和超快时间响应的光探测器件。光电倍增管是一种真空器件。它由光电发射阴极(光阴极)和聚焦电极、电子倍增极及电子收集极(阳极)等组成。当光照射到光阴极时,光阴极向真空中激发出光电子。这些光电子按聚焦极电场进入倍增系统,并通过进一步的二次发射得到的倍增放大。然后把放大后的电子用阳极收集作为信号输出。因为采用了二次发射倍增系统,PMT在300-500nm范围内,信噪比最佳,量子转换效率最大,但在红外和近红外区域量子转换率极低,信噪比低。所以光电倍增管在探测紫外、可见光中蓝色光,具有极高的灵敏度和极低的噪声(图1)。Sapphire在蓝光区使用PMT检测器,量子转换率高,以获得更高的灵敏度。 PMT检测器 光谱效应: 300 to 850nm 最大量子转换效率: 420nm处 图1 APD检测器:是在激光通信中使用的光敏元件。在以硅或锗为材料制成的光电二极管的P-N结上加上反向偏压后,射入的光被P-N结吸收后会形成光电流。加大反向偏压会产生“雪崩”(即光电流成倍地激增)的现象,因此这种二极管被称为“雪崩光电二极管”。APD在400-1100nm 波长范围内具有比PMT更高的量子转换效率和更高灵敏度的硅光电检测器,并且这种扩展的光谱响应可用于扩展扫描系统的工作波长范围(图2),APD探测器比真空管PMT小,在高压偏压下工作的APD也具有类
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武汉英科生物河豚毒素检测试剂盒技术详解 达国际一流水平
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
武汉英科生物技术有限公司开发的河豚毒素ELISA检测试剂盒,检测限量达到2 ppb,在美国、日本、俄罗斯、北欧等食品企业、政府检验机构广为应用,质量合格率达到100%,误差1%左右,大量的实验数据标明,河豚毒素检测试剂盒技术水平国际一流水平。 与LC-MS仪器对比试验,结果符合率100%,批间差异小于0.1%,试剂盒稳定高,抗干扰力强。 1. ELISA标准工作曲线 按照竞争性ELISA操作过程,对不同稀释度的河豚毒素标准液进行测定,以各孔平均OD值与对照组的OD值比值的logit函数为纵坐标,以不同浓度河豚毒素标准品浓度的对数为横坐标,绘制出标准曲线。结果如图所示:线性回归方程为y=-1.9695x+3.3899,R²=0.9902;线性范围为5-500 ng/mL,最低检测限为5 ng/mL。 图1 ELISA标准工作曲线(纵坐标不是抵制率logit(B/B0)) 2. 回收率实验 添加250 ng和500 ng的河豚毒素标准品的1 g河豚鱼鱼肉中,通过竞争性ELISA检测结果如表所示:添加250 ng标准品时,回收率为159%,添加500 ng标准品时,回收率为108%。产品回收率偏高,我们分析可能是由于洗板次数太多,导致少量的抗体抗原脱离,或者是由于实验时间偏长,抗体的效价减弱引起。产品回收率偏高,不影响检测灵敏度,由于产品检测限较低(5 ng/mL),所以该产品可以满足日常对河豚鱼的检测工作要求。 表2模拟样品回收率实验 样品 0 250ng 500ng 河豚鱼肉 ND 398ng 542.5ng 回收率% - 159% 108% CV% 3.7 4.3 6.2 3. 稳定性实验 对浓度为10、50、100、150 ng/mL的标准品进行检测,结果如表所示:10-150 ng/mL 4个标准品浓度变异系数为1.93-3.77%,平均变异系数为2.76%。 变异系数CV %=(标准偏差SD /平均值Mean)×100% 表3
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一种活细胞倒置荧光显微镜温度校准方法的介绍
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
活细胞培养荧光显微镜由于可以进行活细胞常规培养条件,例如:温度控制,湿度控制,CO2浓度控制,O2浓度控制,同时配置高速摄像头可以进行时间序列(Time-Lapse),结合多色荧光滤片切换,LED单波长光源激发,可配备相差(Phase Contrast),微分干涉(DIC),荧光等对照方式可以更加直观详细的进行细胞形态记录而受到广大科研用户的认可。近年来,倒置荧光显微镜配置活细胞培养装置的相关实验越来越普遍,目前市面上集成的荧光成像系统很多,例如:GE公司的DELTAVISION活细胞成像系统,ZEISS公司的CELL OBSERVER系统,或其它大品牌公司的整套活细胞成像系统,价格昂贵(20万美元以上),维护成本高,厂家工程师上门速度通常比较慢或者收费贵,常规实验室难以负担。目前各实验室通常都配备有倒置荧光显微镜,活细胞培养装置是模块化设计的产品,广州科适特科学仪器有限公司提供一种优惠简便的解决方案,定制整套活细胞或对现有的荧光显微镜进行活细胞升级,购置成本低,拆装方便,兼容目前市场主流的各大显微镜平台,例如:徕卡,尼康,奥林巴斯,蔡司等都可以提供定制的适配器。 活细胞培养装置中温度控制是一个重要的实验参数,但是由于活细胞培养的探测器通常位于培养腔室的上壁边缘,由于室温(例如22℃)与培养箱中设定温度(例如37℃)偏差比较大,温度传导散热效应,显微镜细胞培养箱培养皿中细胞真实的温度难以达到设定温度,为了保证真实培养温度精确,显微镜活细胞培养在不同的实验室环境首次使用前通常需要进行校准(Calibration)。 最近刚好广州科适特科学仪器有限公司装机的客户有跟我们问到温度校准的问题,顺便以我们公司代理的IBIDI活细胞培养装置为例介绍一下活细胞培养装置温度校准的问题。广州科适特科学仪器有限公司是德国IBIDI活细胞培养产品的国内授权代理,价格优惠,发货速度快。 一.显微镜活细胞装置的组成通常包含活细胞培养腔体,控制模块单元,加湿柱,连接导管,CO2气瓶,压缩空气瓶等配件
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“你真的了解电子天平吗?”之四——掌控称量的温度“魔力”
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
前情回顾 在本系列上一期中,小编主要针对电子天平的称量原理,校准的定义及分类,砝码的基础知识以及与天平准确度之间的关系等方面为大家做了科普式的讲解,特别是在校准的分类方面着重花了笔墨进行了详细的梳理,想必大家一定对严谨而又考究的天平校准技术留下了深刻的印象吧,不知道小编尽量将复杂的数学原理讲得通俗透彻的方法有没有让大家解开了心中的疑虑呢?其实在天平的称量中,还有一只无形的大手牢牢地掌控着称量的结果,这就是温度。本期小编将为你展现这只大手到底有哪些奇妙的魔力! 称量原理的遗留问题 在上次关于校准的分享中,小编对电子天平的称量原理做了简要的介绍,同时也提到温度、湿度等环境因素也会影响电子天平的传感器,但至于是怎么影响的只是卖了个关子。那么今天我们就来走进电子天平的传感器内部,来一起探究温度是怎么影响称量的。 电子天平一般采用电磁力平衡传感器,其称量原理如下图所示: 电子天平在加载前,电磁力平衡传感器处于初始平衡状态。当被测物置于称量盘后,立柱和遮光板在被测物重力的作用下向下移动,光敏二级管D2检测到发光二极管D1发出的光,并产生电流信号,经过I/V变换电路、PID调节器,转变成与被测物重量相对应的电流并驱动动圈,在永磁体的磁场作用下,动圈产生向上的电磁力,使遮光片向上移动,D2输出的电流信号减小,直至遮光片重新回到初始平衡位置,D2的输出电流降为0。此时,动圈产生的电磁力F与被测物重力相当,即F=G=mg,其中m为被测物体的质量,g为重力加速度。【1】 同时,根据电磁力公式F=BLI sinθ,其中B为气隙磁场的磁感应强度,L为动圈(受力导线)的有效长度,I为动圈电流,θ为通电导体与磁场的夹角。由于传感器中动圈的规格尺寸已固定,所以其B和L均不再改变,而θ为90°,故sinθ=1,因此F 的大小与I成对应关系。综合之前的描述,即得出m=BLI / g。【2】 当温度恒定时,B和L是定值,g也是恒定值,则m与I成正比,通过检测动圈电流,就可以间
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浅谈如何选择合适的光源获得优质的荧光成像
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
荧光显微镜是利用特定波长的激发光照射被检物体产生荧光进行镜检的显微光学观测技术,已有100多年历史。在生物医学领域应用广泛,大多数实验室都有配备高端或者常规的显微成像系统,荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光;另有一些物质本身虽不能发荧光,但如果用荧光染料或荧光抗体染色后,经紫外线照射亦可发荧光,荧光显微镜就是对这类物质进行定性和定量研究的工具之一。 近年来,各种新型荧光染料及各种专业化的荧光探针不断出现,例如:荧光原位杂交(fluorescent in situ hybridization,FISH)相关试剂盒,市场上出现的探针就有十数种之多,Vysis mFISH探针试剂盒(FITC,CY5,TxR, DEAC,SP-Gold), Abbott-FISH探针试剂盒(Spectrum Blue,Spectrum Aqua,Spectrum Green,Spectrum Gold,Spectrum Orange),Zytovision FISH (ZyBlue,DAPI,ZyGreen), Cytocell FISH探针试剂盒,其染料的谱线范围各有差异,如何进行配置合适的荧光显微镜以获得最佳的荧光检测效果成为一个较为复杂的问题。广州科适特科学仪器有限公司一直致力于为客户提供定制化的荧光显微镜成像系统,根据客户的反馈和我们自身的工作实践简单总结一下如何选择合适的光源以获得优质的荧光效果。 一.荧光显微镜简要原理 荧光显微镜的基本构造通常由普通光学显微镜再加一些如荧光光源 、激发滤片、双色束分离器及阻断滤片等附件的基础上组成。同时采用的荧光光源一般为超高压汞灯,它可发出各种波长的光,且每种荧光物质都会有一个产生最强荧光的激发光波长 ,这时需加置激发滤片,通常有紫外、紫色、蓝色及绿色激发滤片,仅需使一定波长的激发光透过并照射到标本上,并将其他光都吸收掉。 二.影响到荧光显微镜成像效果的因素 影响荧光显微镜成像的荧光因素很多,主要包括:荧光样品的制备,荧光光源的选择,滤片转盘的设计,荧光滤片的组合策略(激发光滤片,发
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环状RNA结合功能蛋白!找对方向20分文章水到渠成
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
环状RNA作为研究持续火热的明星分子,不同于对其丰富的表达谱研究,环状RNA功能机制研究还仅仅处在起步阶段。环状RNA研究多为miRNA海绵机制,部分circRNA可竞争性结合miRNA,解除miRNA对靶基因的抑制作用,上调靶基因的表达。其实,环状RNA可以通过结合不同种类的功能蛋白,分别在转录前、后及翻译水平严格调控细胞生殖生长等过程。云序曾对环状RNA经典研究思路进行过详细解析(2018国自然研究热点—环状RNA研究深度剖析),感兴趣的老师可以查询浏览。4月3日,知名免疫学杂志Immunity(IF:22.845)在线发表了中科院生物物理所范祖森教授与王硕研究员为共同通讯作者的文章,介绍发现环状RNA Cia-cGAS定位于细胞核,可结合DNA敏感的cGAMP合酶cGAS并抑制其活性,调控长效造血干细胞(LT-HSC)静息状态。本文极大拓展了核内环状RNA通过结合激酶发挥重要生理功能的研究思路。 研究背景: 造血干细胞(HSC)自我更新和分化之间的平衡打破将导致骨髓衰竭及恶性血液肿瘤发生。然而,HSCs如何维持其静止状态并避免I型干扰素(IFN)介导能量耗竭、细胞凋亡仍未可知。本文一种名为cia-cGAS的环状RNA,它在长效(LT)-HSCs细胞核中高度表达。小鼠Cia-cGAS缺陷将导致I型IFN在骨髓中高表达并伴随静息LT-HSC数量显著减少。在稳态条件下,cia-cGAS在细胞核中通过结合DNA传感器cGAS以阻断其合酶活性,由此保护静息LT-HSC免于被cGAS介导耗尽凋亡。此外,cia-cGAS与线性cGAS相比,与cGAS结合亲和力更强,由此抑制cGAS介导LT-HSCs中I型IFN产生。本文揭示了一个新型环状RNA——cia-cGAS可结合DNA敏感的cGAMP合酶cGAS并抑制其活性,调控长效造血干细胞(LT-HSC)静息状态。 研究思路: 本文首先基于高通量手段比较了小鼠中LT-HSC,ST-HSC和MPPs中全转录组变化,共发现156种显著性差异表达的circRNAs。表达量验证证实9个circRNA在LT-HSC中显著性上调。在细胞表型层面,发现只有干扰D430042O09Rik转录的circRNA——Cia-cGAS后,可明显改变造血干
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电子舌如何科学反映样品的味觉特征?
作者:德尔塔 日期:2022-04-20
电子舌如何科学反映样品的味觉特征? 味觉是什么? 味觉是一个复杂的生物系统,舌头上被称为“味蕾”的味觉感受器是产生味觉的主要组织。一个味蕾由多个味觉细胞构成,一个味细胞有30-50mV的膜电位,在舌面上放一味觉物质,则味觉细胞会发生极化现象,被称为感受器电位变化。一旦产生电位变化,刺激信号就能够从味细胞传到味神经,由味神经产生脉冲放电,不同的味道具有不同刺激,随后,大脑会根据不同刺激强度味觉的感官特性。 电子舌如何模仿味觉特征?(以SuperTongue电子舌为例说明) 电子舌是一种模仿生物感受味觉机制设计的现代化仪器,设计模型源于多传感器和多组分化学分析方法,产生于20世纪80年代中期。利用传感器阵列检测液体样品,通过模式识别处理对样品进行定量或定性分析。主要由3部分组成:传感器阵列、信号采集模块和模式识别模块。其中,传感器阵列对液体做出响应并输出信号,信号进行数据处理和模式识别后,得到反映样品味觉特征的结果。这种技术与传统分析化学方法相比,传感器输出的并非样品成分的分析结果,而是一种与样品某几种特性相关的信号。这些信号经过模式识别后,能够得出样品味觉的总体评价。 电子舌核心原件——电极解析(以SuperTongue电子舌为例说明) SuperTongue电子舌由传感器阵列、组合脉冲驰豫谱信号激发与接收装置及多种智能算法组成。电子舌采用电化学测量三电极体系,即由工作电极、辅助电极和参比电极构成传感器阵列。传感器阵列由6个工作电极和1个辅助电极组成1个独立单元机构,与1个参比电极共同组成一个完整的传感器阵列。辅助电极排列在各个工作电极的中间,确保每个工作电极与辅助电极的距离相等,消除不同工作电极由溶液电阻产生的背景干扰因素。硬件电路由信号激发单元、信号调理单元以及数据采集单元组成。信号激发单元负责产生检测物质体系所需的激励信号;调理单元负责调整脉冲信号,加以组合,以满足不同检测物质的需要;数据采集单元负责采集被检物质对于激励