-
日立离心机售后维修常见故障及解决方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
售后维修热线：0 1 0-6 2 9 4 2 3 5 0 5810R超速离心机是由HITACHI公司制造，上世纪80年代在中国市场推出后，起初一般作为实验室离心机使用，由于该种机型有较好的离心性能，又采用微电脑芯片进行中央控制，自动化程度较高，有一定的故障自诊断功能，目前广泛应用于生物制药行业的梯度离心工艺。5810R超速离心机多数是20世纪90年代的产品，使用时间较长，设备故障率逐年递增，特别是其速度控制系统较为复杂，故障点较多，80%以上的离心机故障发生在速度控制系统。 5810R超速离心机的速度控制系统由速度检测电路、超速保护电路、速度控制电路以及电机驱动电路组成，系统将速度检测电路所获得的速度信号，通过放大和修饰电路转换成较为标准的方波信号，速度信号进入速度控制电路，根据微机主控板给出的加减速控制信号，进行加速、减速和保持速度的控制，速度控制信号输送到电机驱动电路，通过对电机驱动电路的控制，达到对驱动电机转速的控制，从而控制离心转子的速度，离心转子的速度又通过速度检测电路形成对速度控制系统的反馈信号。 1、Hitachi离心机TACH报警故障 故障现象 离心机停止运转，故障显示屏出现TACH闪烁，TACH报警是离心机的速度检测电路故障引起。 故障电路分析 速度检测电路的主要作用是检测离心转子和离心转轴的速度，由于超速离心机的离心转子速度较高，为确保速度检测的可靠性，采用2对光电对管DL、T1和D2、T2分别对安装在离心转轴和离心转子上的速度环进行检测，获得离心转轴和离心转子的各自实际速度信号。为确定速度检测是否处于正常状态，电路中加入光电管检测电路，主要用于光电对管的状态监控，通过电阻R1向光电管供12V工作电压，当光电管的状态处于正常状态时，电阻R1上的电压降为低电压，一旦光电管开路电阻R1上电压降变为高电压，系统出现TACH报警。 故障排查和处理方法 TACH报警故障检修时，首先应测量电阻R1的两端电压，若电阻R1的两端电压是高电压，首先检查光电对管的接插件是否可靠
-
crystal数字PCR如何实现的核酸绝对定量？
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
crystal数字PCR技术是一种核酸分子的绝对定量技术，原理是将PCR反应体系分配到大量微小的反应器中，在每个微反应器中包含或不包含 1 个或多个拷贝的目标核酸分子 (DNA 模板) ，进行"单分子模板"PCR 扩增。扩增结束后，通过阳性反应单元(通过终点荧光信号判断)的数目和统计学方法计算原始样本中靶基因的拷贝数。工作流程包含4个主要环节，即样本DNA/RNA的PCR/RT-PCR反应预混、反应预混液的分散或分区、PCR扩增、荧光信号的采集与数据分析（如下图所示）。 Crystal数字PCR将样本DNA分散到25000-30000万个微滴中，使每个微滴中包含或者不包含1个或多个拷贝的目标分子(DNA模板)，所有微滴以2D阵列的形式单层随机平铺在sapphire芯片中，进行PCR扩增，扩增结束后读取各个反应单元的阴性或阳性荧光信号并进行统计学的分析，就可以计算出原始样本的模板拷贝数。那么我们如何保证每个微滴中只有一个DNA分子呢？ 举例说明：将100个DNA分子分散到100个微滴里，理想情况下，我们希望100个DNA分子平均分布100个微滴中如下图中A图所示，但是实际情况是100个DNA分子以随机的状态分布在100个微滴中，如下图中B图所示。 A．理想情况下的平均分布B．实际情况下的随机分布 图：DNA分子的平均分布（理想情况，A图）和随机分布（实际情况，B图） 如上由于目标DNA分子随机分布于阳性反应单元中，直接进行对阳性反应单元进行计数统计，不是真实的目标DNA分子拷贝数，每个反应单元中可能含有两个或两个以上的目标分子，这时可以使用泊松概率分布公式（1）进行计算。 （1） 上述公式（1）中，λ为每个反应单元中含有的起始 DNA 分子平均拷贝数，p为在一定的λ条件下，每个反应单元中包含k拷贝目标分子的概率。λ由样品溶液的稀释系数m（或者分区数）决定，即λ=cm，其中c为样品的原始拷贝数。当k=0时，即不含目标DNA分子时，p即可为无荧光信号反应单元数与反应单元总数的比值，也就是阴性反应单元的比例，公式（1）可简化为公式（2）： （2）
-
乳及乳制品中黄曲霉毒素M1的污染及快速定量检测方案--8min准确定量
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
一、黄曲霉毒素M1概述 黄曲霉毒素 M1(AFM1)是黄曲霉毒素 B1 的羟化代谢产物, 1963 年由 Alleroft 首先发现, 1965 年被命名为黄曲霉毒素 M1。AFM1 主要存在于动物的可食部分, 如肝脏、肌肉、血液等, 也可以通过尿液和乳汁排出。黄曲霉毒素 M1 毒性很大, 经乳制品摄入会对人体产生巨大的危害。它的熔点相当高, 为 299 ℃, 在 365 nm 的紫外光下产生蓝紫色荧光；其理化性质很稳定，牛奶经过巴氏消毒, 几乎不被破坏。 AFM1 具有强致癌性和致基因突变性。AFM1进入人体后, 对血液、肝脏、肾脏、肌肉有不同程度的破坏, 其中对肝脏和肾脏的危害最大。当与乙肝病毒共同作用于肝脏时形成倍乘风险效应,导致肝癌发生。另外, 当婴幼儿乳品及母乳中含有 AFM1时,对婴幼儿健康会造成很大影响, 可以造成发育迟缓、肾功能降低、肝细胞癌早发甚至可能导致急性中毒死。 二、黄曲霉毒素M1国家限量标准 近年来, 世界各国纷纷制定了乳与乳制品中AFM1 的限量标准。 乳品与乳制品在我国的消费量越来越大, 且品种也越来越多样化。目前, 随着一系列 AFM1 污染事件被报道，人们对它的认识也逐渐深入。AFM1 危害人类最主要的方式就是通过乳及乳制品的摄入, 所以乳及乳制品中AFM1的污染控制极其重要。为了确保乳品市场上商品的安全,乳品中 AFM1 快速检测显得尤为重要。 三、上海飞测生物乳及乳制品中黄曲霉毒素M1快速定量检测方案--8min准确定量 上海飞测生物基于领先的荧光定量FPOCT技术平台，率先推出了黄曲霉毒素M1荧光定量快速检测系统，包含黄曲霉毒素M1检测仪和黄曲霉毒素M1荧光定量快速检测试纸条，可在8min快速准确定量的检测出乳及乳制品中黄曲霉毒素M1的残留含量，样品前处理简单，检测操作简便，结果准确可靠且可现场打印，准确性符合HPLC法的检测结果，适用于各类乳及乳制品加工企业、第三方检测机构及政府监管部门。 3.1.黄曲霉毒素M1荧光定量快速检测系统性能 检测灵敏度：0.025μg/kg；
-
上皮调节蛋白促进唾液腺腺样囊性癌的肺转移
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
研究背景： 唾液腺腺样囊性癌（Salivary adenoid cystic carcinoma, SACC）是常见的唾液腺恶性肿瘤之一，其特点是肿瘤生长缓慢，侵袭性强，肺转移率高，预后差。上皮调节蛋白是表皮生长因子家族的成员，有多种生物功能，如抑制某些肿瘤细胞生长、促进纤维细胞等多种细胞生长。本研究旨在揭示上皮调节蛋白在SACC肺转移及EMT过程中的作用机制，研究成果发表在《Theranostics》IF：8.854。该研究lncRNA芯片服务由伯豪生物提供。 研究思路： 研究结果： 1. 上皮调节蛋白在SACC组织中高表达，患者预后差 对SACC及SMG组织样本中上皮调节蛋白的表达量进行qPCR定量，并经免疫组织化学验证，确定上皮调节蛋白在SACC中高表达，且上皮调节蛋白表达越高的SACC患者肿瘤组织越大，临床分期越高。Kaplan-Meier生存分析显示，就累积存活率及无转移存活率而言，上皮调节蛋白高表达的SACC患者预后差。 2. 上皮调节蛋白诱导体外SACC细胞的预转移，促进体内SACC的肺转移 SACC细胞中的作用，研究者通过建立上皮调节蛋白过表达OE细胞系及上皮调节蛋白敲除siEpiregulin细胞系等，对比发现上皮调节蛋白高表达的OE细胞系能促进细胞的EMT、迁移和侵袭过程，此外研究发现OE细胞系在小鼠模型中的转移潜能显著提高。 3. 上皮调节蛋白增加内皮细胞的血管生成及通透性 利用lncRNA芯片对OE和对照细胞系进行差异基因筛选及功能分析，热图和GO富集分析结果显示除EMT外，血管生成也是显著变化的重要生物过程。rhEpiregulin处理HPMECs，提高了细胞系的毛细血管形成，迁移及通透性。OE细胞系及SACC患者体内均显示血管生成因子VEGFA、FGF-2、IL-8显著提高。 4. 外泌体增强肿瘤血管生成和血管通透性，促进SACC向肺转移 SACC-83细胞系来源的外泌体可显著提高细胞系的转移特性，且可以转运到内皮细胞中，通过提高血管生成因子的表达，促进内皮细胞的侵袭，内皮管的形成及内皮通透性。此外，一系列外泌体注射实验发现外泌体可以促进肿瘤血管生成，提高血
-
DNA提取纯化新技术浅谈——核酸电泳纯化技术
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
核酸的提取和纯化是法医DNA物证检验的关键技术之一，目前实验室最常用的方法包括核酸纯化柱（Spin column）磁珠法和clean-up系统，磁珠法由于操作简便、快速，能够提取到高纯度的核酸DNA,并且可以自动化，因此成为目前法医DNA实验室核酸提取纯化的主要手段。但磁珠法由于磁珠吸附DNA分子的不均衡、且在后续洗脱过程中会造成核酸的断裂和损失，因此在疑难检材的检验过程中，存在PCR扩增失败， DNA检验不成功的情况。 目前在法医物证检验中，疑难检材主要包括以下特征： 1、低拷贝的DNA，如何提高低拷贝（LCN）检材如接触DNA在检验过程中DNA的提取效率，提高检测成功率； 2、抑制剂含量高且种类多，如何有效去除纺织品、毛发、组织、骨头、土壤等检材中含有的抑制剂，提高PCR扩增成功率； 3、高度降解，如何提高高度降解检材的DNA检出率； 据了解，一项由美国司法部资助的研究项目：使用SCODA（同步旋转电场技术）有效去除核酸提取过程中的各种类型的抑制剂，且相关论文已经在国际法医学杂志发表，该论文介绍了该种新型的DNA纯化技术---同步旋转电场技术（Aurora，由加拿大Boreal Genomics 公司提供），论文中作者选择了多种影响PCR扩增的抑制剂，将SCODA技术和当前多款主流的DNA纯化试剂盒性能进行比较，并将纯化后的检材进行STR分型，用来更深入的研究抑制剂对后期分型的影响，论文中包含以下常见的抑制剂： 黑色素：存在于毛发和组织中 胶原和磷酸钙：存在于骨骼和组织中 腐植酸：存在于土壤中 血红素：存在于新鲜血液中 单宁和染料：存在于衣物和各种纺织品中 下图是使用SCODA技术和常见纯化试剂盒对于不同抑制剂去除效果的比较； 图a: DNA样本中加入黑色素和腐殖酸后的纯化效果（使用SCODA技术） 图b: DNA样本中加入黑色素后使用某国际知名品牌纯化试剂盒的纯化效果 图c DNA样本中加入腐殖酸后的使用某国际知名品牌纯化试剂盒的纯化效果 研究结果表明，对于含有对PCR有严重抑制作用的检材，使用
-
瑞捷（Rapid HIT）200 DNA快速检测仪检材规范提取和固定技巧分享
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
随着瑞捷（RapidHIT）200 DNA快速检测仪（以下简称为瑞捷200）在中国多个DNA实验室投入使用，根据技术服务反馈，其快速反应、性能稳定的优势已在多个实际案件中予以体现。实验室人员对设备的灵敏度予以肯定，并一致认为检材质量、规范提取和固定方式对于提高检测成功率有重要意义。根据实验室反馈，瑞源公司将相关内容总结分享如下： 选择恰当的DNA载体 瑞捷200广泛适用于多种DNA载体。固定载体时有以下几点建议： （1）棉签类载体：棉头不宜过大（过大的棉头会影响DNA释放入检测腔，从而降低图谱质量）。棉头不宜过多蘸纯净水或生理盐水（甩干水或吸干后提取）； （2）血卡、FTA卡、唾液卡类载体：用无菌针头(或棉签的棉棍一侧)直接固定； （3）其它类载体：可直接投入试剂盒并用针头(或棉签的棉棍一侧)直接固定。 接触类DNA样品 如接触类DNA载体，建议直接放入试剂盒内检测。 方法：将DNA较多一侧向下，并用无菌针头（或棉签棉棍一侧）固定于试剂舱底部。也可使用植绒拭子等提取后，直接放入试剂盒。 以下是实验室使用中的检材固定图片，供参考:
-
IHC/ICC/IF实验前需要知道的几个要点~！
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
IHC/ICC/IF ,傻傻分不清楚？它们都是用于定位检测抗原表达的免疫检测技术，由于技术相对简单且直观，在科研和临床上都得到了大量使用。但是影响最终检测效果的变量非常多；每一个具体的检测都会遇到多个需要调整的变量。具体到选择何种方法来保存组织样本；固定标本该用醇还是醛；如何选择最合适的一抗；抗原修复具体该用什么样的方法及条件等等一系列的问题都需要考虑。 因此在开始实验之前，**先掌握以下几组免疫检测技术中的常识，能够分清它们的特点将使你做出更好的实验设计，提高实验成功率。 石蜡切片VS冰冻切片 ▶ 石蜡切片 石蜡包埋是最廉价且常用的组织包埋法，适用于需要长期保存的标本。在包埋之前须先将样本固定，固定时间通常在4~24小时，需要考虑过度固定导致的抗原被遮蔽。在不能立即包埋的情况下，固定完成后的组织可以暂存在乙醇中。如果用树脂替代石蜡做包埋剂，可以得到更薄的组织切片（1.5μm vs. 5μm）。石蜡切片步骤繁多，制片中抗原活性有所减低，但组织结构和细胞形态清晰，是免疫组织化学常规制备切片方法。 ▶ 冰冻切片 冰冻切片无法长期保存，而且冷冻过程中冰晶形成容易影响亚细胞结构，使得组织结构不如石蜡切片清晰。冰冻组织切片可以在-80℃ 保存一年。冰冻切片步骤简单快速，样本不需要固定即可直接用液氮或者液态异戊烷、干冰等进行冰冻处理。冰冻和切片之后用乙醇固定切片可以避免表位被甲醛交联，无需进行抗原修复。 在检测诸如磷酸化或者一些对有机溶剂或热的温度耐受能力较差的细胞膜表面抗原和水解酶时，采用冰冻切片是很好的选择。 甲醛固定VS醇固定 ▶ 甲醛固定 甲醛是用于保存蛋白最常用的固定剂。甲醛能够在多种蛋白质末端基团之间形成交联，从而达到固定的效果。但是甲醛固定会改变抗原表位且阻止抗体结合。因此常常用酶消化或热抗原修复法来使蛋白与甲醛交联的醛键断裂开，以便后续染色。在检测磷酸依赖型的表位，选用冰冷的无水甲醇或无水乙醇来固定更为合适。
-
Cell Metabolism 揭示肥胖诱发乳腺癌机制
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
该研究中使用的PiggyBac载体和慢病毒包装质粒psPAX2和pMD2.G由赛业生物提供。 肥胖如何导致乳腺癌？肥胖导致细胞因子释放到影响乳腺癌细胞代谢的血液中，从而使它们更具侵略性。来自亥姆霍兹中心慕尼黑，慕尼黑工业大学（TUM）和海德堡大学医院的科学家在细胞代谢中报道了这一点。该小组已经能够通过抗体**来阻止这种机制。 目前的研究阐明了一个尚未知的机制，使乳腺癌更具侵略性。该研究发现ACC1在该过程中发挥着重要作用，“亥姆霍兹中心慕尼黑糖尿病与癌症研究所（IDC）副主任Mauricio Berriel Diaz博士说， “ACC1是脂肪酸合成的关键组成部分，Berriel Diaz说，”但是其功能受细胞因子瘦素和TGF-β的损害。“这些细胞因子的水平特别是在严重超重受试者的血液中增加。该研究中使用的PiggyBac载体和慢病毒包装质粒psPAX2和pMD2.G由赛业生物科技（VectorBuilder）提供。 脂肪酸前体促进转移 科学家们证实，抑制ACC1导致脂肪酸前体乙酰辅酶A的积累。这种前体转移到某些基因“开关”，这又通过激活特定的基因程序来增加癌细胞的转移能力。 该研究的第一作者马科斯·里奥斯·加西亚（Marcos Rios Garcia）说：“使用乳腺癌转移的人体组织，我们能够证明ACC1在这方面的活性显着降低。当科学家用抗体（针对瘦蛋白受体）阻断了尚未知的信号传导途径时，这导致乳腺癌肿瘤的转移扩散在实验模型中显着降低。 未来，研究人员希望在进一步的研究中证实新发现的机制的数据。此外，他们还在考虑可能在**上被利用的相关干预措施。 Herzig说：“阻断信号通路并切断转移相关基因可能是一个**靶点。 “作为所谓的新辅助**的一部分，在手术切除肿瘤之前，可以减少转移的风险或肿瘤的复发。” 文献原文：Acetyl-CoA Carboxylase 1-Dependent Protein Acetylation Controls Breast Cancer Metastasis and Recurrence 来源：/——由赛业生物科技有限公司转载发布
-
高压蒸汽灭菌器的灭菌时间要多长？
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
简而言之：灭菌温度越低,需要的灭菌时间越长；灭菌温度越高,需要的灭菌时间越短 压力蒸汽灭菌的时间，要从灭菌器柜室内达到灭菌要求温度时算起，直至灭菌完成为止。 总时间包括： 1、 热力穿透时间 即从消毒柜内达到灭菌温度至消毒物品中心部位亦达到灭菌温度所需时间。时间的长短取决于消毒物品的性质、包装的大小,放置位置和高压锅内空气排空程度和灭菌器的种类。 2、 消毒维持时间 即杀灭微生物所需的时间，一般用杀灭脂肪嗜热杆菌芽胞所需时间来表示。在115℃时需30分钟，121℃时需12分钟，132℃时需2分钟。 3、 安全时间 一般为维持时间的一半，其长短视消毒物品而定。对易导热的金属器材的灭菌，不需要安全时间。 下表提供的数据可供实际工作中参考。 注： *包装体积 < 30×30×30cm3 **对于粘性液体，如琼脂培养基等，应延长时间5～10分钟。 1) 一般下排气式高压灭菌器所需时间为：115℃需要30分钟、121℃需要15分钟、126℃需要10分钟 2) 115℃常用于制药工业上的灭菌。在微生物实验室内，有些含糖培养基亦用115℃30分钟灭菌，因为在更高温度下糖会分解。 3) 121℃～126℃常用于医疗卫生和防疫工作中的灭菌。 以上所述知识灭菌时间的概数，1次灭菌中具体使用多少时间，需要根据物品的种类、包装的大小、安放情况和灭菌器的性能来确定。
-
生物安全柜空气过滤器检漏法浅谈
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
导语 冬天到了，雾霾随之而来，原本洁净的空气中漂浮着数不清的不可见的微小颗粒，随着你的每一次呼吸进入身体，是不是细思恐极？所以大家为了自己的健康，都会选择佩戴防雾霾口罩。而在实验室中，我们会使用生物安全柜来保护样品和操作人员，作为其核心部件之一，空气过滤器的品质至关重要。 在滤器的安装中和使用过程中，可能会出现滤器破损的情况，这种情况就是比较危险的，可能会对人员和样品造成潜在的污染。所以对滤器进行检漏是及其有必要的。 1那么，空气过滤器检漏究竟是什么呢？ 高效过滤器检漏是指高效过滤器及其系统安装后的现场检漏，主要是检查过滤器滤材中的小针孔和其他损坏，如框架密封、垫圈密封以及过滤器构架上的漏缝等。检漏的目的是通过检查高效过滤器及其与安装框架连接部位等处的密封性，及时发现高效过滤器本身及安装中存在的缺陷，采取相应的补救措施，保证区域的洁净度。现场安装完毕以后对高效过滤器进行检漏是为了检查高效过滤器是否有泄漏或泄漏是否在规范允许的范围之内。如果高效过滤器装置经检漏是合格的，就可以确保洁净室运行的安全可靠性，若此时室内洁净度仍未达标，就应该从洁净室的其它方面查找原因啦。 2空气过滤器检漏的方法都有什么呢？ 传统检漏法气溶胶为DOP, DOP为邻苯二甲酸二辛酯，但是这种物质有致突变性，怀疑对人有致癌作用，已经在90年代被PAO替代。PAO为聚α烯烃，对人体无害，目前被普遍使用。因此高效过滤器检漏PAO/DOP法原理是一样的，只是检漏发尘源（气溶胶）的不同。 此外，检漏方法的检测可使用气溶胶光度计或粒子计数器。粒子计数器检测的是粒子的粒子分布，常以“粒/L”为单位表示，而光度计检测的是粒子的质量浓度，以“mg/L”表示。因此在检测滤器效率时，使用粒子计数器和光度计得到的结果会有差别。尘埃粒子计数器与气溶胶光度计相比灵敏度及精度稍差。对于现场检漏而言，因光度计使用方便，检测结果易于判断，对泄漏检测比较敏感而得到广泛应用。
-
生物工艺知识就是力量,提升小型生物制药生产商竞争力
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
技术外包是一种获得深入的生物工艺技术的有效途径，但对于外部资源的依赖可能限制企业内部的知识提升。是否存在一种两全其美的途径呢？ 作者：Nick Hutchinson、Floris De Smet、Miriam Monge 开发出最高效且有效的生物工艺，可以提高企业的生物制剂产能、降低其商品成本，从而增强竞争力。不幸的是，知易行难。真正地理解生物工艺并对其进行优化需要卓越的技术能力。在企业内部发展这些能力成本较高，通常只有实力雄厚、资金充足的生物制药公司才会选择这么做。另一种方式是将生产外包，充分利用合同生产商的专业技能。但这种方式的外包可能会限制企业内部的能力提升，导致依赖于外部生产合作伙伴，这在所有企业看来都不是一种理想的状况。 人才争夺战 不久前，开发生物制药生产工艺主要侧重于工艺开发的速度，以使新的生物制品尽可能快速地进入临床。进入临床速度的重要性至今仍未降低，但如今企业也意识到一个经良好开发和高度优化的工艺所带来的效益，这个工艺是尽可能高效的，并且不影响产品质量。生物工艺效率越高，则能带来越低的商品成本。由于该行业处于竞争日益激烈的环境中，故这一点是非常关键的。越来越多的生物类似药登陆市场，凭借远低于原研药的研发成本，它们以较低的价格夺走了一定的市场份额。持有创新药的企业需要尽可能降低其生产成本，以减小来自低价格生物仿制药竞争的影响。 提高生物工艺效率的主要途径之一是应用新技术，如过程分析技术能有效地提高生物工艺的性能。但应用新技术绝非易事。生物制药领域出现了越来越多新颖、复杂的工具和技术，但具备这些技能和知识的工程师却是有限的。客观地说，由于行业的快速扩张以及对于具备科学与工程技能的雇员的依赖，生物工艺企业正忙于一场“人才争夺战”。行业调查凸显出管理者正在经历填补职位空缺方面的困难。这个问题在《The Medicine Maker》的6月份发行版中已进行了讨论。这个问题可能还得持续一段时间，特别是在中学和大学学习理工科专业
-
无DMSO、无血清干细胞冻存技术与使用（非程序降温）
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
含DMSO的冻存液 DMSO是最常用的渗透性冷冻保护剂，广泛应用于细胞的冷冻保存。在细胞水平，DMSO除了是一种DNA致畸因子外，还可渗入细胞内，分子中S=O键可能与细胞内蛋白发生化学反应，致使蛋白变性。因此，有些细胞和组织细胞对DMSO敏感，使用含DMSO的细胞冷冻液会降低细胞复苏后活性，进而影响细胞的功能。临床上，使用经DMSO冻存的细胞会引发广泛的身体不适，最常见的是腹泻（约50%），严重的会造成患者神经系统、呼吸系统损伤甚至死亡（0.2%）。 在没有可替代DMSO的冷冻保护剂以前，为了降低DMSO的毒性，通常采用两种方法——降低冻存液中DMSO的含量以及复苏后洗涤除去DMSO残留。因此，研究者针对不同细胞开发了2.5~10%DMSO并且添加其它不同冷冻保护剂的复合配方。但这些不同种类改良的DMSO冻存液因成分复杂，浓度各异，难以标准化地推广用于多种细胞类型。临床上，使用DMSO冷冻保存的细胞，细胞复苏后**应洗涤并离心2次，尽可能除去将残留的DMSO，减少不良后果。细胞**领域的科学家和医生多年来在研发和寻找无DMSO、低毒/无毒性、冷冻保存效果显著的新型细胞冻存液。 无DMSO冻存液 LiveCyte® DMSO-free的有效成分是单一的两性高分子氨基酸衍生物，不含任何其它冷冻保护成分。这种高分子化合物不会渗透细胞。低温冷冻时，它通过吸水，一方面导出细胞内的水分子，另一方面在细胞膜外形成保护层，抑制冰晶形成和生长，从而避免细胞受到冷冻损伤。值得一提的是，该成分是天然化合物，可被细胞和机体代谢为氨基酸，不会产生毒副作用。 我们经过反复实验证明，LiveCyte® DMSO-free完全可以替代经典的DMSO冻存技术。无DMSO、无动物源/人源成分的冻存液将可以避免DMSO对细胞功能和人体的潜在危害，避免潜在的动物源感染，并且质量稳定可控。因此，LiveCyte® DMSO-free是一款非常适宜于临床使用的细胞冻存产品。另外，我们竭力研发省时、省力的细胞冻存产品。使用时，LiveCyte® DMSO-free比经典的DMSO冻存液更便捷，可节省
-
人（Human）P53蛋白（P53）ELISA检测试剂盒使用说明
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
人（Human）P53蛋白（P53）ELISA检测试剂盒使用说明书 检测原理 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被P53蛋白（P53）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的P53蛋白（P53）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。 样品收集、处理及保存方法 1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。 3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。 5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 自备物品 酶标仪（450nm） 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 37℃恒温箱 操作注意事项 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。 所有液体组分使用前充分摇匀。 试剂盒组成 名称 96孔配置 48孔配置 备注 微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条 无 标准品 0.3mL*6管 0.3mL*6管 无 样本稀释液 6mL 3mL 无 检测抗体-HRP 10mL 5mL 无 20×洗涤缓冲液 2
-
真空干燥箱的真空表读数与真空度Pa该怎么样换算
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
真空干燥箱真空表读数所反映的到底是若干Pa。能不可以用直观的数码来显露? (1)真空表上“0”表达正一个大大气的压力,“-0.1”表达完全真空。真空表上的指使值不表达真空度的完全值，只表达了真空度的相对值。 真空度的换算;依据本表的刻度示值范围，真空度的完全值与相对值可用下式换算： P=1×105(1-δ/0.1) P -真空度的完全值(Pa) δ-真空表的刻度示值完全值 例一：表的示值为O，则P=1×105(1-O/0.1)=1×105 Pa = 1个大大气的压力 例二：表的示值为0.1，则P=1×105(1-0.1/0.1)= 0 Pa为完全真空。 (完全真空是不存在的) 例三：表的示值为0.08，则P=1×105(1-0.08/0.1)=2×104Pa 本产品的真空度指标值为
-
真空干燥箱调整办法
作者：德尔塔 日期：2022-04-20
a.敞开真空箱电源,此时电源指使灯应亮控温仪通电自检,PV屏显露办公室内勘测温度,SV屏显露出厂时设定的温度。控温仪上AT及HEAT等灯应亮,表达仪表进入了加温的办公状况。 b.改正设定温度 按一下子控温仪的功能键(SET);PV屏显露SP字符后,可用键头按键施行设定温度的改正. 改正完结后，再按一下子SET键,PV屏显露ST字符，设定定不时间。 再按一下子SET键,使PV屏显露办公室温度,SV屏显露新的设定温度。仪表AT及HEAT灯亮,此时仪表从新进入了加温的办公状况。 c.当办公室内温度靠近设定温度时,HEAT灯忽亮忽暗,表达加热进入了PID调节阶段,仪表有时候勘测温度超过设定温度，有时候低于设定温度属正常现象。当勘测温度靠近或等于设定温度后,再待1~2h后办公室进入了恒温状况，东西进入了干燥阶段。 d.所需温度较低时，使用二次设定形式，如所需办公温度70℃，次先设定60℃，等温度过冲着手回滞后，再第二次设定70℃，这么可减低甚至于杜绝温度过冲现象，尽量加快进入了恒温状况。 e.当东西干燥完结后,关了电源,假如加速降低温度,则敞开放气阀使真空度为0,待5分钟左右再敞开箱门。 若办公室内干燥物的湿润程度较大，萌生的水蒸气会影响抽气机的性能，提议在干燥箱和抽气机之间，串入一个“干燥/过淋器”。本企业能按需配一个外形尺寸为Φ120×300mm，接口外径Φ16的干燥器。 若在干燥东西的过程中，需求参加氮气等惰性气体，应在合约中注明，增配一个进气阀。 若抽气机正常且合乎技术要求,不可以抽真空,则敞开箱门运用产品附件中的板手将箱体上的门扣向里拧一圈收短,从新打样。 真空干燥箱不可以作为电热干燥箱运用,因办公室不在真空状况,勘测温度与办公室内实际温度误差莫大。 本文来自：
咨询热线
18133906270
德尔塔官方微信