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成瘾药物心理依赖及复发的脑机制研究
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
摘 要 围绕学习、记忆、情绪及应激等心理因素与复发的关系,应用阿片类物质心理依赖研究条件性位置偏爱,条件性位置厌恶,Morris 水迷宫量化觅药动机模型,行为及条件性行为敏感化等多种动物行为模型,从情绪相关学习、记忆在成瘾行为中的作用,不同神经核团与神经递质系统活动性的改变,应激相关因素易化的成瘾易感性,自然奖赏与成瘾药物奖赏相关记忆的比较研究等方面,对应激与记忆相关的药物心理依赖及复发的脑机制进行了系列研究。 关键词 学习记忆,应激,心理依赖,成瘾易感性,觅药动机,自然奖赏。 随着对成瘾行为生物基础认识的逐渐深入,药物成瘾相关的渴求和复吸行为等心理依赖问题,受到了越来越多的重视。在成瘾药物作用下,神经系统发生长时程适应性改变,这种长时程的神经适应性改变,成为以强迫性觅药和复吸为核心特征的依赖行为的物质基础。特别是异常学习记忆的快速形成、长久保持和高度唤醒,与成瘾行为的发生与发展有着重要关系。这种联系体现在行为、细胞分子及基因表达与调控等不同方面。本课题围绕学习、记忆、情绪及应激等心理因素与复发的关系,建立了阿片类物质心理依赖的多种动物行为模型。在此基础上,从情绪相关学习、记忆在成瘾行为中的作用,不同神经核团与神经递质系统活动性的改变,应激相关因素易化的成瘾易感性,自然奖赏与成瘾药物奖赏相关记忆的比较研究等方面,对应激与记忆相关的药物心理依赖及复发的脑机制进行了系列研究。研究内容主要包括如下几个方面: 1)空间及正负性情绪相关学习记忆与成瘾行为获得、保持及受环境调控的复发动机的关系;2)习惯化学习与习惯形成与阿片类物质心理依赖的关系;3)环境应激对成瘾行为获得、保持的影响及其中枢机制;4)成瘾易感性的行为遗传学基础及其与后天环境因素的交互作用;5)学习记忆活动与药物心理依赖关系大鼠及小鸡模型的比较研究;6)人类成瘾患者情绪异常激活的功能影像学研究等。探索环境记忆或应激事件与心瘾产生,激活
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大鼠实验跑台概述
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
一、实验概述 众实实验跑台主要用于大白鼠、兔等小动物做跑台运动训练,可取代传统的游泳训练,使训练量化更加明确,是研究体能、耐力、运动损伤、营养、药物、运动生理和病理及兴奋剂检测等实验的必要手段。段氏实验跑台已荣获国家科技进步奖、奥林匹克萨马兰奇奖等论文达数十篇。 从1986年开发生产,经国家体科所鉴定,已用于北京体育大学、国家体科所、国家兴奋剂检测中心、北京航天医学工程研究所、解放军全军训练伤防治中心、内蒙古体科所、北京中医药大学、上海中医药大学、上海体育学院、香港中文大学、香港理工大学、陕西师范大学等大专院校、医院及科研单位,受到专家和用户的一致好评,为解放军全军军事训练医学研究指定产品,各项技术指标已达到和超过国外同类产品。 二、实验仪器跑台结构由机架、行走皮带、电机、电气控制、有机玻璃罩、光控发声、发光、电刺激等部分组成。 三、技术参数 大白鼠跑台技术参数: 1、共五条跑道,每条长550毫米,宽85毫米,高120毫米。 2、跑道速度无级可调,范围在0-70米/分。 3、计长、速度采用数码管显示,计长最大9999米,速度最大0-70米/分。 4、电刺激开关控制,刺激电流0-2ma可调,(电压230v) 5、红外线控制发光、发声。 6、使用电压220V单相,频率50Hz,总功率200W。 7、尺寸:长850毫米,宽560毫米,高350毫米,重约35公斤。 兔子跑台参数: 1、共两条跑道,每条长1200毫米,宽220毫米,高230毫米。 2、跑道速度无级可调,范围在0-80米/分。 3、计长、速度采用数码管显示,计长最大9999米,速度最大0-80米/分。 4、红外线控制发光、发声。 5、使用电压220V单相,频率50Hz,总功率300W。 6、尺寸:长1500毫米,宽560毫米,高400毫米,重约40公斤。 四、实验方法及应用在运动训练的过程中,密切观察大鼠的运动表现和运动能力的变化,避免运动性过度疲劳的发生。在实验的过程中,每天给大鼠加料、换水、打扫清洁,每周称体重和称量大鼠的饮食量
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分析低温恒温槽6种常见故障
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
作为国内最专业制造低温恒温设备生产厂家。公司拥有多名专业技术人才及先进生产设备,国内用户数量已超过千家,被清华大学,中科院,浙江大学,江南大学,华南理工大学, 武汉大学,华中科技大学,东南大学,湖南大学,四川大学,通用电气,光明乳业,喜之郎,香港科技大学等国内知名高校企业采用。 低温恒温槽整机符合欧盟标准,是自带制冷和加热的高精度恒温源,可在机内水槽进行恒温实验,或通过软管与其他设备相连,作为恒温源配套使用。泛用于石油、化工、电子仪表、物理、化学、生物工程、医药卫生、生命科学、轻工食品、物性测试及化学分析等研究部门,高等院校,企业质检及生产部门,为用户工作时提供一个热冷受控,温度均匀恒定的场源,对试验样品或生产的产品进行恒定温度试验或测试,也可直接加热或制冷和辅助加热或制冷的热源或冷源。完善的售后服务,有力的保证了客户的权益。 总结低温恒温槽常见故障有以下6点: 故障1、低温恒温槽运转中高压过高: 原因分析:运转中高压过高通常是由于a冷却水流量过少或水温过高,只要加大冷却水流量或降低水温就好了;b冷凝器铜管/翅片积垢多,换热效果差,这时需要清洗低温恒温槽的换热器c冷媒过多,冷媒过多时需要往外排放部分冷媒d膨胀阀开启度过小,只需要适当调整膨胀阀开启度; 故障2、低温恒温槽启动不了或启动后立即停机: 原因分析:该故障通常是由于a电源断电或电压过低,只要排除电路故障按低温恒温槽要求供电即可;b温控器调设不当,使触头常开,只需重新调整温控设定值;c冷却水未开,联锁电路断开,这时只需要打开冷却时系统,接通连锁电路即可d保护器件作用后未复位,按一次停机按钮后再开机 故障3、低温恒温槽运转时低压过低: 原因分析:出现低压过低是主要是由以下几个原因引起,a.冷媒不足只需要补漏,补充冷媒或调整膨胀阀,b.过滤器堵塞这时需要清洗或更换过滤器c.膨胀阀开启度过小,适当调整膨胀阀开启度 d.低温恒温槽毛细管堵塞只要清洗或更
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惠合啤酒锥形罐发酵异常情况的解决措施
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
圆柱锥形发酵罐是目前世界通用的发酵罐,该发酵罐设备主体呈圆柱形,罐顶为圆弧状,底部为圆锥形,具有相当的高度(高度大于直径),罐体设有冷却和保温装置,为全封闭发酵罐。锥形罐发酵几种异常现象及处理方法为: 发酵液“翻腾”现象 产生的原因:主要是由于冷却夹套开启不当,造成上部温度与工艺曲线偏差大,罐中部温度更高,引起发酵液强烈对流。另外,压力不稳,急剧升降也会造成发酵液翻腾。 解决办法:检查仪表是否正常;严格控制冷却温度,避免上部酒液温度过高;保持罐内压力稳定。 不锈钢发酵罐结冰 当罐的下部温度与工艺曲线偏差2℃左右,会使贮酒期罐内温度达到啤酒的冰点(-2.3℃—-1.8℃),可能导致冷却带附近结冰。 结冰的原因:仪表失灵、温度参数选择不当、热电阻安装位置深度不合适、仪表精度差、操作不当等。 解决办法:检查测温元件及仪表误差,特别要检查铂电阻是否泄漏,若泄漏应烘烤后石蜡密封或更换;选择恰当的测温点位置和热电阻插入深度;加强工艺管理,及时排放酵母;冷媒液温度应控制在-4℃—- 2.5 ℃,不能采用-8℃以下的冷媒液。 酵母自溶 原因:当不锈钢容器下部温度与中、下部温度差1.5℃—5℃以上时,会造成酵母沉降困难和酵母自溶现象。罐底酵母泥温度过高(16℃—18℃)、维持时间过长,也会造成酵母自溶,产生酵母味,有时会出现啤酒杀菌后混浊。 解决办法:检查仪表是否正常;及时排放酵母泥;冷媒温度保持为-4℃,贮酒期上、中、下温度保持在-1℃—1℃之间。 饮用啤酒后“上头”现象 原因:一般啤酒中高级醇含量超过120mg/L,异丁醇超过10mg/L,异戊醇含量超过50mg/L,会造成饮后“上头”现象。 解决办法:选用高级醇产生量低的酵母菌种;适当提高酵母添加量,减少酵母的增殖量,酵母细胞数以15×106个/ml为宜;控制为12°P麦汁α-氨基氮含量在180mg/L±200mg/L左右;控制麦汁中溶解氧含量在8mg/L—10mg/L;控制好发酵温度和罐压。 双乙酰还原困难 发酵结束后双乙酰含量一直偏高达不到要求
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morris水迷宫实验准则(1)
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
实验准则(1) 实验原理(水迷宫的发展史,以及简单的实验原理和应用领域,以及在我国的发展情况和国内外的主要厂家) Morris水迷宫的组成(主要分为硬件和图像采集,软件) 硬件准则(国内外文献提及到的硬件准则,我们主要针对国内文献提及到的) 实验流程准则(实验细节) 统计方法学准则(遵循统计学原理) 评价指标的准则(实验数据的解释) 实验适用范围准则(实验适用四个领域,与水迷宫的10个优点) 一、实验原理 20世纪80年代初,英国的心理学家Morris和他的同事利用大鼠在盛有水和牛奶混合物的不透明水池中搜索目标物的方法,研究大鼠的海马等脑区受到损害后的学习、记忆和空间定向以及认知能力时取得了令人瞩目的结果。这种装置不但构思新颖、实验设计合理以及方法简便和实用,而且便于观察和记录动物入水后搜索藏在水下平台所需的时间、采用的策略和它们的游泳轨迹,从而可分析和推断动物的学习、记忆和空间认知等方面的能力。虽然起初的实验对象为大鼠,但此后该迷宫系统成为评估啮齿类动物空间学习和记忆能力的经典程序,广泛运用于神经生物学、药理学等领域的基础和应用研究中。它能较客观地衡量动物空间记忆、工作记忆以及空间辨别能力的改变。因此,这种研究方法很快就引起各国神经科学家的关注,并将此法称为Morris水迷宫法。并于90年代初建立了Morris水迷宫图像自动采集和处国外有许多生产Morris水迷宫的公司,比如说德国的TSE公司,美国的Sandiegoinstruments公司等等;20世纪80年代末,中理系统。国内随后出现了许多生产厂家,比如说有北京众实迪创科技等,但是从国际到国内,Morris水迷宫的硬件设备,软件系统,实验方法,以及实验数据的处理方法都不尽相同,因此,从Morris水迷宫法的发明到现在已有20余年的历史了,应该制定一套比较标准的实验准则了。 二、Morris水迷宫的组成 Morris实验系统由水迷宫装置、水迷宫图像自动采集和软件分析系统组成。 1、Morris水迷宫装置:主要由盛水的水池和一个
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morris水迷宫实验准则(2)
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
Morris水迷宫硬件准则要求 1、水池和站台:对于水池的大小,存在一个人为选择的问题,看起来应该统一标准,其实并不容易。但是有个原则就是水池不能太小,站台也不能太大。Morris最初(1981年)用于大鼠的水池是直径1.32米、高为0.6米,水池的水深为0.40米;但后来(1984年)改为直径2.14米、高0.4米,水池的水深为0.25米。对于小鼠的实验水池,文献中介绍的迷宫直径差异巨大,小到0.6米, 大到2.0米。一般而言,过小的水池使小鼠爬上平台的偶然性增加,任务难度减小。过大的水池会使小鼠游泳路径延长,体力消耗过大,爬上站台的机率减少。现在国内文献中所用水迷宫水池大多数为大鼠1.6m或1.8m居多,而小鼠一般为1m或1.2m,高0.5m。站台一般为圆形,直径可分为大鼠12cm,小鼠6cm,表面粗糙,高度一般为30cm。国外文献中所用水迷宫水池大多数为大鼠1.8m或2.0m居多,高0.6m,站台直径10cm;而小鼠一般为1m到1.5m,高0.3m站台直径5cm。 2、水温:水的温度要求实验过程中恒温。大鼠温度范围一般为25± 1℃,小鼠可能低些在18~22℃。有文献报道,对小鼠进行了水温对迷宫成绩影响的观察,结果发现27~28℃组的小鼠成绩最差,而17~18℃组和21~22℃组小鼠的学习成绩没有区别,所以,我们推荐小鼠水迷宫的实验用21~22℃水。水温对潜伏期影响很大,特别是大鼠,如果温度过高,大鼠在游几次后渐渐适应了迷宫环境,它就会把迷宫当“浴盆”了,放进去以后,就漂浮不动;如果水温过低,大鼠体温下降很快,体力也会耗散太多,大鼠游泳能力不能坚持很久,就会出现游几次潜伏期突然增大的现象。甚至有些老鼠会出现较明显的应激反应,比如说会出现抽筋,腹泻现象。水温一般保持25度左右,另外气温也会导致水温偏差过大,应人为的调节水温。所以就要求在水池的底部装有可以恒定保持水温的加热棒或者其他加热装置了。 3、光源:要保证水池水面上没有光影,主要是要避免光线在水面的反射问题,以免留在水面的光照影子被软件的采集系统将光影和鼠的影子混淆
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morris水迷宫实验准则(3)
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
实验流程准则 Morris水迷宫实验主要测定空间学习记忆能力,主要的实验内容有隐蔽站台试验、空间探索试验、反向试验和可视站台试验等。在这里主要介绍下文献里面主要做的隐蔽站台试验和空间探索试验的流程准则。 隐蔽站台试验: 啮齿类动物第一次游泳时,一般不会找到藏于水面下的不可见的站台。若动物在入水游泳60~90s以内仍未能找到水池中的站台或未能爬上站台时,实验人员可将动物引导置于站台上站立10~30s,使动物体会站在站台上的感觉,这样从第二次开始,学习成绩就能迅速提高。动物爬上站台后,让动物在站台上站立5~10s。将大鼠从站台上拿下来,休息30~60s以后再进行下一次训练。在一般情况下,正常大鼠在经过4~6个实验日训练后,很快就学会以最快最佳的轨迹搜索到站台的确切位置。 每天开始时,将鼠任意从四个象限(东北、西北、东南、西南)之一面向池壁放入水中,站台放置于东南象限, 每次实验鼠共游泳60~90s来寻找隐藏的站台。如果成功地找到站台,鼠可以得到在站台上的10~30s休息时间;如果60~90s内未能成功的找到站台,就由实验人员将鼠人工置于站台上,且同样给予10~30s的休息时间。有时鼠可能会在10~30s间隔时间到达之前从站台上掉下或跳入水中继续游泳。一旦这种情况发生,则将鼠重新放回站台,并重新计时,使时间间隔到达(10~30s)。这样可以确保每只鼠在每次实验后有相等的时间来观察和获取空间信息。 空间探索试验: 隐蔽站台试验结束24h后,撤除站台。然后任选一相同入水点将鼠放入水中,记录鼠在60s或120s内的游泳路径,记录鼠在原站台象限的停留时间和穿越原站台次数,观察受试鼠的空间定位能力,及在空间探索过程中的变化规律。在电脑屏幕上用圆形环标记出站台原所在位置,这样可以记录穿越原站台所在位置的次数。 morris水迷宫实验准则(3): 1、实验时间:隐蔽站台试验一般设计天数为4天或者6天,如果是年老体弱鼠可以将天数设计为4天。训练时间一般为60s或90s,也有
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Morris水迷宫实验准则(4)
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
-----统计方法学准则 潜伏期时间为计量资料,可用方差分析,但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验,方差齐,计算F值,用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计;对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换,待满足正态或方差齐要求后,用转换后的数据进行统计;若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的,改用秩和检验进行统计。计数资料,比如说穿越站台的次数,可用X2检验,四格表总例数小于40,或总例数等于或大于40但出现理论数等于或小于1时,应改用确切概率法。 的实验数据较为复杂,其统计分析难度也较大,尤其是对大鼠在寻找隐蔽站台试验中所测得的逃避潜伏期如何进行统计学分析既往存在的问题较多。在过去的研究中,国内文献中有的直接计算每天的平均逃避潜伏期后再进行t检验或方差分析,或根据大鼠的逃避潜伏期在定位航行试验后3d趋于稳定的情况,仅对后3d的平均逃避潜伏期进行t检验或方差分析。有的研究则就1~5d的逃避潜伏期进行单因素方差分析。我们认为以上统计方法均不正确。一个较明显的错误是,以趋于平稳的后3d的平均逃避潜伏期代表记忆水平,首先遇到的问题是仅在生理状态下的大鼠才表现如此,而实验记忆损伤组大鼠往往后3d的逃避潜伏期仍然持续下降。正常青年组和初老年组大鼠的逃避潜伏期在后3d趋于平稳,但实验损伤组大鼠的逃避潜伏期由于学习记忆损伤后其基线较高,第3~5天逃避潜伏期仍然呈下降的趋势,并不象正常对照组一样趋于稳定。不仅如此,还存在上述统计方法对隐蔽站台试验中测得的逃避潜伏期数据统计学特征的认识错误。隐蔽站台试验中的逃避潜伏期具有以下特点:①系重复测量设计,Morris水迷宫实验准则(4)即在给予某种处理后,在不同的时间点上从同一受试对象上重复测量获得的数据(逃避潜伏期);②影响逃避潜伏期(自变量)统计分析结果的至少有动物组别、检测时点等多个效应因子,效应因子之间存在交互影响效应;③同一受试动物的不同时间点所测得的逃避潜伏期存在高度
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morris水迷宫实验准则(5)
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
-----实验适用范围准则 与其他方法相比,在判定啮齿类动物认知功能中具有很多优点: (1)它不需要实验前训练阶段,而且可以在短时间内完成相对大量的动物。 (2)由于对年龄相关性空间记忆损害有可靠的敏感性,Morris水迷宫是判断老年鼠空间学习记忆能力的特别有用的工具。通过探测和转移位置实验的训练,学习和回忆过程可以被记录分析,也可以在各组之间比较。 (3)虽然对于鼠类来说浸入水中是令其厌恶的,驱动动物逃避的是水刺激,而不需要食物剥夺和电击,因此,避免了剥夺食物给实验动物带来的新陈代谢和电击休克方面的问题,而这方面问题对某些品系的动物来说可能是危险的。 (4)气味或痕迹等干扰可以被去除。 (5)将实验动物的学习记忆障碍和感觉、运动缺陷等分离开来,减少它们对学习记忆过程检测的干扰。可见站台实验,可以识别可能影响实验结果的动物视觉缺陷,修正标准Morris水迷宫实验中得到的结果。 (6)通过改变站台的位置,可以完成学习和再学习实验,相应的,在同组动物中也可以测量不同用药量的效果。 (7)既可以检测空间参考记忆又可以检测空间工作记忆。在用固定平台测试小鼠的空间参考记忆后再将平台的位置改为不固定,就可检测它们的工作记忆能力 (8)通过使用窗帘、划分区域等,可以减少实验人员和实验以外的物体对视频跟踪系统记录的干扰。 (9)能提供较多的实验参数,系统全面地考察实验动物空间认知加工的过程,客观地反映其认知水平,显然,寻找不固定平台的认知过程要复杂一些,需要动物对时间和空间上的分离信息加以整合和判断。 (10)操作简便,数据误差较小。 1、Morris水迷宫实验在神经退行性疾病如阿尔茨海默症(AD)和帕金森症(PD)以及血管性痴呆(VD)等的研究方面是非常有效的:这些疾病的最大特征是认知功能的减退。经典的Morris水迷宫所检测的是大鼠在多次的训练中,学会寻找固定位置的隐蔽平台,形成稳定的空间位置认知,这种空间认知是加工空间信息(外部线索)形成的
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神经功能行为、放射学及病理结果的变化
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
一种慢性颈段脊髓压迫的大鼠模型的建立:神经功能行为、放射学及病理结果的变化 摘要: 颈髓病是由于脊柱退行变造成的脊髓的慢性部分受压所致。不管怎么样,慢性颈髓受压的确切机制还没有完全清楚。本研究的目的旨在建立一种有效的新的没有锥板切除的慢性脊髓压迫动物模型,来复制临床过程。系在一块塑料板上的聚乙烯线,用来绑在一个月大的大鼠的C4椎体上,缠绕三圈。术后,随着椎管和椎体的生长,聚乙烯线逐渐长入椎管背侧的骨头里,而产生脊髓渐进性的压缩。结果表明:在形成颈椎管狭窄9个月后,颈椎管狭窄模型的大鼠出现运动障碍和感觉障碍;然而,直到6个月才出现临床症状。12个月后,70%的颈椎管狭窄模型大鼠出现了脊髓内高信号。在病理切片,在形成颈椎管狭窄12个月后脊髓整个周围压缩。运动神经元数目减少,白质显示华勒氏变性。本模型也许能够复制临床慢性颈髓压迫的特征性临床特点,包括在潜伏期和隐形神经云减少后出现,进行性运动和感觉功能,以及代表了人类慢性颈髓压迫。 关键字:动物研究;行为评估;核磁共振;神经元死亡;脊髓损伤。 引言: 一般认为,慢性压迫脊髓病的病因与颈椎的病理特点相关,例如椎关节硬化,韧带骨化,椎管狭窄,以及椎间盘突出,或许由机械性压迫和血管病变两种因素引起所致。慢性压迫性脊髓病隐匿性地和进展性地损伤运动和感觉动能。很多病人数年没有临床症状,尽管这个时期内存在脊髓压迫和缺陷,一旦本疾病出现临床症状,神功功能障碍进行性加重,很少有逆转。随机选择的有症状队列的颈部核磁共振检查的一项研究表明大于64岁的受试者26%出现脊髓损伤,45-64岁受试者16%出现脊髓损伤。临床上,即使那些由神经影像学确诊的严重,检查经常显示不可预料的非重要性神经功能发现,和手术减压后的可观的神经恢复也许是可以预料到。因此,慢性脊髓压迫的一个急性脊髓损伤没有的特点就是脊髓的可塑性。到目前为止,临床上慢性颈髓术后效果在持续提高。不管怎样,仍有一些不满意
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脑立体定位仪实验使用方法
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
脑立体定位仪实验使用方法 一、实验目的 1. 了解脑立体定位技术。 2. 掌握脑立体定位仪及脑图谱的使用方法。 二、实验原理 脑立体定位技术被广泛的运用于脑的损毁、刺激和脑电记录的精确定位中,成为研究脑结构和功能必不可少的工具。脑立体定位技术主要是使用脑立体定位仪作为定位仪器,利用某些颅骨外面的标志(如前囟、后囟、外耳道、眼眶、矢状缝等)或其它参考点所规定的三度坐标系统,来确定皮层下某些神经结构的位置,以便在非直视暴露下对其进行定向的刺激、破坏、注射药物、引导电位等研究,是神经解剖、神经生理、神经药理和神经外科等领域内的重要研究方法。常用的实验动物,如大鼠、小鼠、猫等高等哺乳动物以及鸟类,其均有完全的外耳道,可用(耳棒)来定位。在确定了颅外标记之后,就可按脑立体定位图谱所提供的数据进行定位操作。 三、实验器材 ZS-B脑立体定位仪(规格参数参考网站:),MC-5微操作仪,常规手术器械,钻孔针,纱布,干棉球,酒精,0.4%戊巴比妥钠(麻醉剂,现配现用),生理盐水,1ml注射器,3%双氧水, 小白鼠。 四、实验步骤 1.脑定位仪的使用 1.1 校验仪器 定位仪经过搬动或长期不用后,使用前需先加以校验。重点是检验电极移动架各滑尺是否保持直角,可用三角板测定各滑尺所成的角度是否是直角;各衔接部与螺丝有没有松动;滑尺是否太松;检查主框两臂的平行情况;最后观察固定头的装置两侧对称程度,小框是否与主框平行。检查仪器无故障后,可进行下列校验性操作: (1)将两侧耳杆柱旋松,在主框上前后滑动,然后再按照原规定刻度装好,看两侧耳杆尖是否完全对正。 (2)取下一侧耳杆,将一侧电极移动架装好,前后左右上下移动各滑尺,使装在电极夹上的金属定位针尖正对耳杆尖的中心,记下各滑尺的刻度读数,再卸下移动架再装上,并按上法测定耳杆尖的部位,记下三个滑尺的读数,反复操作取平均数首先将放置水平的脑立体定位仪上的两个滑道,按实验的要求调节好合适的高
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Morris水迷宫_Y迷宫_八臂迷宫实验原理与发展
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
20世纪80年代初,英国的心理学家Morris和他的同事利用大鼠在盛有水和牛奶混合物的不透明水池中搜索目标物的方法,研究大鼠的海马等脑区受到损害后的学习、记忆和空间定向以及认知能力时取得了令人瞩目的结果。这种装置不但构思新颖、实验设计合理以及方法简便和实用,而且便于观察和记录动物入水后搜索藏在水下平台所需的时间、采用的策略和它们的游泳轨迹,从而可分析和推断动物的学习、记忆和空间认知等方面的能力。虽然起初的实验对象为大鼠,但此后该迷宫系统成为评估啮齿类动物空间学习和记忆能力的经典程序,广泛运用于神经生物学、药理学等领域的基础和应用研究中。它能较客观地衡量动物空间记忆、工作记忆以及空间辨别能力的改变。因此,这种研究方法很快就引起各国神经科学家的关注,并将此法称为Morris水迷宫法。国外有许多生产Morris水迷宫的公司,比如说德国的TSE公司,美国的Sandiegoinstruments公司、德国Biobserve公司、荷兰Noldus等等;20世纪80年代末,并于90年代初建立了Morris水迷宫图像自动采集和处理系统。国内随后出现了许多Morris水迷宫生产厂家,北京众实迪创科技是专业生产行为学仪器的公司,但是从国际到国内,Morris水迷宫的硬件设备,软件系统,实验方法,以及实验数据的处理方法都不尽相同,因此,从Morris水迷宫法的发明到现在已有20余年的历史了,应该制定一套比较标准的实验准则了。 光源:要保证水池水面上没有光影,主要是要避免光线在水面的反射问题,以免留在水面的光照影子被软件的采集系统将光影和鼠的影子混淆;如果是白色的水池背景,就可以在水池上方用两根条形的发散日光灯,这样可以减少反射光在水面的背影;如果是黑色的水池背景,就在水池四个象限的上方放置4个60瓦的灯泡或25瓦的管灯,不用功率特别大的灯。灯泡的高度应该足够高,不能被摄像头捕获到。另外还可以在水池四周装一圈帘子(颜色一般是黑色、浅蓝色或者白色),这样可以将光的影子挡住,又保持一定的透光度。同时也
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旷场实验方法
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
【实验目的】 观察实验动物在新异环境中的自主行为、探究行为与紧张度。 【实验器材】 实验装置由旷场反应箱和数据自动采集和处理系统两部分组成,。大鼠旷场反应箱高400mm,底边长1000mm,内壁涂黑,底面平均分为25个4cm×4cm小方格,正上方2 m处架一数码摄像头,其视野可覆盖整个旷场内部。旷场光照为全人工照明,可人为设定“白天”和“黑夜”,白天由两侧墙壁的4只节能灯发出约2001ux照度来模拟,夜晚由一侧墙的红外光源提供照明。实验人员和计算机等设备位于另一房间以减小对动物的干扰,实验室背景噪音控制在65dB以下。 小鼠旷场反应箱高25~30cm,底边长72cm,内壁涂黑,底面(软件)平均分为64个小方格。数据自动采集和处理系统同上。 【实验原理】 旷场实验(open field test)又称敞箱实验,是评价实验动物在新异环境中自主行为、探究行为与紧张度的一种方法。以实验动物在新奇环境之中某些行为的发生频率和持续时间等,反应实验动物在陌生环境中的自主行为与探究行为,以尿便次数反应其紧张度。 【实验动物】 大鼠或小鼠。 【实验方法与步骤】 实验在安静的环境下进行。将动物放入箱内底面中心,同时进行摄像和计时。观察一定时间后停止摄像,观察时间可根据实验拟定,一般为3~5 min。清洗方箱内壁及底面,以免上次动物余留的信息(如动物的大、小便、气味)影响下次测试结果。更换动物,继续实验。 【观察指标】 根据计算机软件设计不同可观察的参数不同,如单位时间内动物在中央格停留时间,某一肢体越过的格子数为水平得分(crossing),后肢站立次数为垂直得分(rearing),修饰次数,尿便次数;运动速度,运动距离,休息时间,沿边运动距离,中央运动距离等。 【注意事项】 (1)动物在24 h内有其活动周期,故每次实验应选择在同一时间段内完成。 (2)实验应在隔音,光强度和温、湿度适宜且保持一致的行为实验室内进行。 (3)两次实验之间清洗实验设备,以免上次动物余留信息影响下次实验
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巴恩斯(Barnes maze)迷宫实验方法
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
巴恩斯迷宫(Barnes maze)是美国学者Carol ABarnes1979年发明的用于检测动物空间记忆的模型。与水迷宫和放射臂迷宫类似,巴恩斯迷宫利用啮齿类动物避光喜暗且爱探究的特性而建立的。动物获得的强化是从一个光亮、敞开的平台上面逃往位于平台下面的一个黑暗、狭小的箱里。该箱称为目标箱。经过训练,动物学习并记忆目标箱的位置。该模型对动物的应激性刺激较小,既不像放射臂迷宫那样需要禁食,也不像水迷宫那样应激性强。因此,在记忆研究中较为常用。尤其适用于与应激相关的记忆研究以及基因敲除小鼠的行为表型研究。 (一) 巴恩斯迷宫。它是由特制医用有机板制成的一个圆形平台,可旋转,直径122cm。平台周边有18个或40个等距离圆洞,分别用于大鼠和小鼠;洞的直径分别为10cm和5cm。其中一个洞(称为目标洞)与一暗箱(即目标箱)相联。其他圆洞则为空洞,不与任何物体相联。暗箱设置成抽屉式,便于从中取出动物。从平台表面看不见目标箱。迷宫抬高140cm。动物通过目标洞可逃至目标箱内。对于小鼠巴恩斯迷宫的设置,也有不同的考虑。例如,有的将迷宫直径缩短(如88cm),洞的数目也减少(例如12个),洞的直径则与上述相当。据认为,这样的设置有利于增加小鼠获得比率。但不管用哪种设置,实验操作都类似。通过训练,动物获得对目标洞的空间定位。 (二) 巴恩斯迷宫实验方法 1. 实验开始前一天,将动物单个从目标洞置于目标箱内适应4min。 2. 将动物置于迷宫中央的塑料圆桶(直径20cm,高27cm)内限制活动5s。 3. 移开圆桶,启动计时器,实验者在挡帘后进行观察。动物四肢均进入目标箱,则计为一次逃避(escape),并让动物在箱内停留30s。每一动物一次最多观察4min。在此期间如果动物仍然找不到目标箱,则将动物从迷宫移开,放入目标箱内并停留30s。利用这一间隙清洁迷宫。动物每天训练两次,连续5~6d。 4. 从第二次训练开始,每次训练之前将迷宫随机转动一至数个洞的位置,但目标箱始终固定在同一方位
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八避迷宫实验方法交流和T形迷宫实验方法交流
作者:德尔塔 日期:2022-04-27
实验方法 1) 动物适应实验环境1周后,称重,禁食24小时。此后每天八臂迷宫训练结束后限制性地给予正常食料(据体重不同,大鼠16-20g,小鼠2-3g),以使体重保持在正常进食大鼠的80%~85%。 2) 第二天,迷宫各臂及中央区分撒着食物颗粒(每只4~5粒,直径约3~4mm)。然后,同时将4只动物置于迷宫中央(通往各臂的门打开)。让其自由摄食、探究10min。 3) 第三天,重复第二天的训练。这一过程让动物在没有很强的应激条件下熟悉迷宫环境。 4) 第四天起,动物单个进行训练:在每个臂靠近外端食盒处各放一颗食粒,让动物自由摄食。食粒吃完或10min后将动物取出。 5) 第五天,将食物放在食盒内,重复前一天的训练,一天2次。 6) 第六天以后,随机选4个臂,每个臂放一颗食粒;八臂迷宫各臂门关闭,将动物放在迷宫中央;30s后,臂门打开,让动物在迷宫中自由活动并摄取食粒,直到动物吃完所有4个臂的食粒。如经10min食粒仍未吃完,则实验终止。每天训练两次,其间间隔1h以上。 Xmaze动物行为学软件会自动记录以下4个指标:1工作记忆错误(working memory errors)2参考记忆错误(reference memory errors );3总的入臂次数;4测试时间,即动物吃完所有食粒所花的时间。 实验方法 A. 传统T-形迷宫实验 (1)适应 在T-形迷宫臂内分撒6粒食丸(45g),让大鼠适应迷宫5min,每天一次,连续5天。 (2)强迫选择训练 将大鼠放入主干臂的起始箱,打开闸门,让大鼠进入迷宫的主干臂。随机、交替选择左右两臂之一放入4粒食丸,同时关闭另一臂,使动物被迫选择食物强化臂并完成摄食;每天6次,连续4天。 (3)延迟位置匹配(delayed matching-to-position,DMP)训练 a)将动物放入闸门关闭的起始箱,打开闸门,让动物进入主干臂。 b)关闭一侧目标臂,强迫动物进入另一侧开放臂以获得2粒食丸奖赏。 c)立即(最短延迟,少于5s)将动物放回主干臂,开始匹配训练中的第二次训练;此时两个目标臂均开放。动物将两前肢