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醋酸菌培养基实验操作方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
1.青海发光杆菌醋酸菌斜面培养基：葡萄糖 1克，酵母膏1克，碳酸钙1克，琼脂2.5克，水100毫升 2.斜面培养斜面制作：培养基按配方调配好（碳酸钙先不加入），分装试管，灭菌备用。碳酸钙按比例分装、灭菌。摆斜面前将培养基和碳酸钙混合，用手搓均匀，然后摆斜面，备用 3. Acetobacter Medium (醋酸菌培养基) Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10g CaCO3 20g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml Adjust (调) pH to 6.8 适用范围：恶臭醋酸杆菌混浊变种 3．1 斜面培养基 葡萄糖8g，酵母粉10g碳酸钙5g琼脂15~20g水1000mLpH5.5，分装试管。0.IMPa灭菌20min。95％酒精(食用级)40mL。摆斜面， 3．2 液体增殖培养基 葡萄糖10g 酵母粉10g pH5.5水1000mL灭菌后加入酒精(食用级)40mL 0.1MPa灭菌20min。 3．3 醋酸菌种的制备 青海发光杆菌扩大培养过程：安瓿管，液体试管1．液体试管2，100mL三角瓶，500mL三角瓶，1000mL三角瓶，种子罐。 3．3．1 安瓿管开启：酒精棉球擦抹三次，用重器撞击，打开，注入0.5mL无菌水，将菌球溶解，全部注入装有10mL液体培养基的18×180试管1内，30℃培养72h，每2h摇动—次 3．3．2 菌体生长：培养基变混浊后，颜色变浅，对光观察摇动时有云雾状金属光泽。每只装有10mL液体培养基的试管2接入lmL或0.5mL菌液，30℃培养48h，每2h摇动—次。 3．3．3 三角瓶三级扩培，三角瓶中培养基的装量为50％，每级按种量在10％左右，在转换振荡器上恒温培养，培养温度均为30℃，时间依次缩短为36、36、24h， 3．3．4 种子罐培养基同前 配料后种子罐夹套加热灭菌100℃保持15min，冷却后，先加入4％食用酒精，无菌操作接入菌种。接种量为10％~12％，温度保持在30℃±1℃，通无菌空气，菌体生长时间为24~36h．视菌体生长情况及镜检结果而定 3．3．5 青海发光杆菌每次接种前，先将菌种进行外观观察 。有异样情况者，作涂片、染色、镜检观察，菌体生长不正常或染菌的三角瓶不得使
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Bradford法测定蛋白质操作说明
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
抗原elisa试剂盒蛋白质与考马斯亮兰染料结合生成蓝色物质，蓝色物质的量与蛋白质浓度的高低成正比。生成的蓝色物质在595nm处有zui大光吸收，通过测定595nm的光吸收，来测定蛋白质浓度。实验中一般利用牛血清白蛋白(BSA)来作标准曲线，此法的灵敏度为25~200ug/ml。甘油、吐温（tween）80、去污剂、乙酸、硫酸铵、三羟甲基氨基甲烷（Tris）和一些碱性缓冲液会干扰该检测反应，可以通过设立当的对照来消除这种干扰。抗原elisa试剂盒试剂准备：1．Bradford储存液：95%乙醇，100mL；88%磷酸，200mL；考马斯亮兰G-250染料，350mg；室温下可长期稳定保存。2．Bradford工作液：双蒸水，425mL；95%乙醇，15mL；88%磷酸，30mL；Bradford储存液，30mL；Whatman I号滤纸过滤，室温保存于棕色瓶中，可用数周，但用前需重新过滤。3．标准蛋白：1mg/mL牛血清白蛋白。抗原elisa试剂盒操作方法：1．以PBS为空白对照，将标准蛋白BSA梯度稀释为20ug/mL、17.5 ug/mL、15 ug/mL、12.5 ug/mL、10 ug/mL、7.5 ug/mL、5 ug/mL、2.5 ug/mL，待测样品做适当稀释，每管100uL。每次实验应做一新的标准曲线；没个样品2~3个重复管。2．加入1mL Bradford 工作液，振荡混匀，室温反应2分钟。由于染料和蛋白的反应时连续的，所以染料应依次加入到个蛋白样品中，所有样品也应按照加入染料的顺序测定A595值。3．测定A595值，测量应在1小时内完成。4．以标准蛋白的浓度为横坐标，A595值为纵坐标画出标准曲线，根据标准曲线，通过待测样品的A595值，确定其浓度。
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酶联免疫检测仪操作方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
1. 牛流行性腹泻病毒PCR-荧光探针试剂盒酶联免疫检测仪是酶联免疫吸附试验的仪器又称微孔板检测器。可简单地分为半自动和全自动2大类，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。 测定一般要求测试液的zui终体积在250μL以下，用一般光电比色计无法完成测试，因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。 光通过被检测物，前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量，特定波长下，同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。检测单位用OD值表示， OD是optical density（光密度）的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度， OD=log（1/trans），其中trans为检测物的透光值。根据Bouger-amberT-beer法则，OD值与光强度成下述关系: E=OD=log（lo/Ι） 其中E表示被吸收的光密度， Ιo 为在检测物之前的光强度，Ι为从被检测物出来的光强度。 OD值公式计算: c为检测物的浓度 b为检测物的厚度 a为摩尔因子 牛流行性腹泻病毒PCR-荧光探针试剂盒在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长，在此波长下，此物质能够吸收zui多的光能量。如果选择其它的波长段，就会造成检测结果的不准确。因此，在测定检测物时，我们选择特定的波长进行检测，称为测量波长。 检测值计算 仪器中的检测器接收透过被检测物的光能量，转换成二进位数字信号，为4095。仪器定义没有光源下的透光值为 0%，没有检测物的透光值为100%。则实际检测中，检测物的透光值均在 0%一100%之间。 牛流行性腹泻病毒PCR-荧光探针试剂盒透光值的计算如下: T=（Meas-Min）/（Max-Min） 其中T为透光值， Meas为检测的二进位数值， Min为在 0%的情况下检测的二进位数值， Max为在100%的情况下检测的二进位数值，举例如下: MaX=3600 Min=20 Meas=30 T=（30-20）/3600-20）=0.0028 OD=log（1/T）=log（1/0.0028）=2.552
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进口elisa酶联免疫试剂盒试验规范
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
进口elisa酶联免疫试剂盒通常有3次加样步聚，即加标本，加酶联络物，加底物。加样时应将所加物加在ELISA试剂盒板孔的底部，避免加在孔壁上部，并留心不可溅起，不可发生气泡。加标本通常用微量加样器，按规矩的量参与板孔中。每次加标本应更换吸嘴，避免发生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加样。有此测定（如间接法ELISA）需用稀释的血清，可在试管中按规矩的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中参与稀释液，再在其间参与血清标本，然后在微型轰动器上轰动1分钟以确保混和。加酶联络物使用液和底物使用液时可用定量多道加液器，使加液进程灵敏结束。在进口elisa酶联免疫试剂盒中通常有两次抗原抗体反应，即加标本和加酶联络物后。抗原抗体反应的结束需要有一定的温度和时间，这一保温进程称为温育（incubation），有人称之为孵育，在ELISA查看试剂盒中似不恰当。ELISA试剂盒属固相免疫测定，抗原、抗体的联络只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例，参与板孔中的标本，其间的抗原并不是都有对等的和固相抗联络的机遇，只需zui靠近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐，因此需经分散才能到达反应的结束。在这以后参与的酶符号抗体与固相抗原的联络也相同如此。这便是为何ELISA查看试剂盒反应老是需要一定时间的温育。温育常选用的温度有43℃、37℃、室温文4℃（冰箱温度）等。37℃是试验室中常用的保温温度，也是大多数抗原抗体联络的适合温度。在树立ELISA方法作反应动力学研究时，试验标明，两次抗原抗体反应通常在37℃经1-2小时，产物的生成可达。为加速反应，可提高反应的温度，有些试验在43℃进行，但不宜选用更高的温度。抗原抗体反应4℃更为彻底，在放射免疫测定中多使反应在冰箱中，以形成zui多的堆积。但因所需时间太长，在ELISA试剂盒中通常不予选用。进口elisa酶联免疫试剂盒的质量凹凸要素取决于这两个方面1.选材目标。2.选材进程。
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硝酸盐还原实验中操作说明
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
（1）微生物菌种原理：硝酸盐还原反应包括两个过程：一是在合成代谢过程中，硝酸盐还原为亚硝酸盐和氨，再由氨转化为氨基酸和细胞内其它含氮化合物；二是在分解代谢过程中，硝酸盐或亚硝酸盐代替氧作为呼吸酶系统中的终末受氢体。硝酸盐还原过程可因细菌不同而异。有的细菌仅使硝酸盐还原为亚硝酸盐，如大肠埃希菌等；有的细菌可使其还原为亚硝酸盐和离子态的铵；有的细菌能使硝酸盐或亚硝酸盐还原为氮，如假单胞菌；有的细菌还可以将其还原产物在合成性代谢中完全利用。（2） 实验方法：微生物菌种将待检菌接种于硝酸盐培养基(内含小倒管)中，35℃孵育1~4d。将甲、乙等量混合液(用时混合)(约0.1ml)加于试管内，立即观察结果。（3）结果：出现红色为阳性反应。若加入试剂后无颜色反应，可能是：①硝酸盐没有被还原，试验阴性；②硝酸盐被还原为氨和氮等其他物质而导致假阴性结果，这时应在试管内加入少许锌粉，如出现红色则表明试验确实为阴性。若仍不产生红色，表明试验为假阴性。若要观察是否有氮气产生，可于培养基管内加1只小导管，有气泡产生，则表示有氮气生成。（4）应用：本试验广泛用于微生物菌种鉴定。肠杆菌科细菌均能还原硝酸盐为亚硝酸盐;铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌等假单胞菌属均可产生氮气;有些厌氧菌如韦荣菌等试验也为阳性。
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人正常组织来源细胞周期的测定方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
一、人正常组织来源细胞原理 细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。 单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法，但它不能代表细胞群体的周期，故现多采用其他方法测群体周期。 测定细胞周期的方法很多，有同位素标记法、细胞计数法等，这里介绍一种利用BrdU渗入测定细胞周期的方法。 BrdU(5-溴脱氧尿嘧啶核苷)加入培养基后，可做为细胞DNA复制的原料，经过两个细胞周期后，细胞中两条单链均含BrdU的DNA将占l/2，反映在染色体上 应表现为一条单体浅染。如经历了三个周期，则染色体中约一半为两条单体均浅染，另一半为一深一浅。细胞如果仅经历了一个周期，则两条单体均深染。计 分裂相中各期比例，就可算出细胞周期的值。 二、仪器、用品与试剂 1、仪器、用品：同常规细胞培养 2、试剂：BrdU(1.0mg/ml)，甲醇、冰醋酸，Giemsa染液，秋水仙素，2×SSC液 三、人正常组织来源细胞操作步骤 1、细胞生长至指数期时，向培养液中加入BrdU，使zui终浓度为10μg/ml。 2、44小时加秋水仙素，使每ml中含0.1μg。 3、48小时后常规消化细胞至离心管中，注意培养上清的漂浮细胞也要收集到离心管中。 4、常规染色体制片(见第三部分：染色体技术)。 5、染色体玻片置56℃水浴锅盖上，铺上2×SSC 液，距紫外灯管6cm处紫外照射30分钟。 6、弃去2×SSC液，流水冲洗。 7、Giemsa液染色10分钟，流水冲洗，晾干。 8、镜检100个分裂相，计*、二、三、四细胞期分裂指数。 9、人正常组织来源细胞计算： 细胞周期(Tc)=48/{(M1+2M2+3M3+4M4)/100}(小时) 附：(1)BrdU配制: BrdU 10mg十双蒸水10ml 4℃下避光保存。 (2)2×SSC配制: NaCl 1.75克，柠檬酸三钠·2H2O 0.88克，加水至100ml，4℃保存。
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原代细胞培养玻璃器皿的清洗
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
①原代细胞浸泡：新购进的玻璃器皿常带有灰尘，呈弱碱性，或带有铅、碑等有害物质，故先用自来水浸泡、水洗，然后再用2%~5%盐酸浸泡或煮沸30min，水洗。要领：培养用后的玻璃器皿要立即泡入清水中，使下道刷洗工作能顺利进行。用后的玻璃器皿常带有大量的蛋白质附着，干涸后不易刷洗掉，用后要立即用清水浸泡。②刷洗：用软毛刷、洗涤剂，刷去器皿上的杂质，冲洗晾干。要领：浸泡后的玻璃器皿用毛刷沾洗涤剂去器皿上的杂质、刷洗次太多，会损害器皿的表面光洁度，洗涤剂有使pH上升的趋势，所以易选用软毛刷和洗涤剂。禁止用去污粉。因其中含有砂粒。会严重破坏玻璃器皿的光洁度。特别注意刷洗瓶角部位。原代细胞酸浸之前要把洗涤剂冲干净。③浸酸：将器皿浸泡于清洁液24h，如急用也不得少于4h。清洁液由重铬酸钾、浓硫酸及蒸馏水配制而成，具有很强的氧化作用，去污能力很强。经清洁液浸泡后，玻璃器皿残留的末刷洗掉的微量杂质可被完全清除。④原代细胞冲洗：先用自来水充分冲洗，吸管等冲流10min，瓶皿需每瓶灌满、倒掉，反复10次以上。然后再经蒸馏水漂洗3次,不留死角。晾干或烘干备用。对已用过的器皿，凡污染者必先经煮沸30min或放3%盐酸中浸泡，未污染者可不需灭菌处理，但仍要刷洗、清洁液浸酸，冲洗等。
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ATCC细胞培养中使用血清的缺点
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
ATCC细胞培养中使用血清的缺点血清成分复杂，虽含许多对细胞有利成分，也含有对细胞有害的成分，使血清有几个明显的缺点：1.对大多数细胞，在体内状态，血清不是它们接触的生理学液体，只是在损伤愈合以及血液凝固过程中才接触血清，因此使用血清有可能改变某种细胞在体内的正常状态，血清可能促进某些细胞的生长(成纤维细胞)同时抑制另一类细胞生长(表皮细胞)。2.血清含一些对细胞产生毒性的物质，如多胺氧化酶，能与来自高度繁殖细胞的多胺反应(如精胺、亚精胺)形成有细胞毒性作用的聚精胺。补体、抗体、细菌毒素等都会影响ATCC细胞生长，甚至造成细胞死亡。3.动物个体不同，血清产地、批号不同，每批质量差异甚大，其成分不能保持一致。4.取材中可能带入支原体、病毒，对细胞产生潜在影响，可能导致实验失败或实验结果不可靠性。5.血清的使用使得实验和生产的标准化困难，其中的蛋白质使得某些转基因蛋白生物药品生产中分离纯化工作很难完成。6.ATCC细胞大规模生产中，血清来源越来越困难，价格昂贵，是构成动物细胞培养对生产成本的主要部分之一。
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这些ELISA实验通用规则，您得知道！
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
我公司elisa试剂盒拥有快速、简便、准确、灵敏度高等几大特点。elisa实验条件主要由实验室的操作环境和操作人员的操作熟练程度两方面组成，但试剂盒对实验室操作环境的要求是几种药物残留检测方法中相对较低的。 由于大部分的试验操作步骤都是由实验人员来完成的，人为的误差相对严重一些。ELISA的实验操作所要求的条件是比较严格的，无论是对实验的硬件条件还是对实验的操作人员的技术要求，都是如此。下面所提到的就是一些在进行ELISA实验时所要注意的一些通用规则。 一、ELISA实验通用规则 1、要保证移液枪的准确性，误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但有专业人员进行矫正。 2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后，要更换枪头。即使是吸取标准品时。 3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出，使各种试剂都恢复到室温，以使结果更稳定。 4、实验时，要使底物避光保存。 5、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。 6、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。 7、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。 8、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。 9、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。 10、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加彻底。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。 11、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。 12、底物是光敏感的，要在临用前现配。 13、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。 14、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。 15、待检样品要澄清，否则会影响结果。 16、温浴时间应遵守试剂盒规定。 17、应尽量做双孔
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地震引起的核辐射到底有多大的危害？
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
由地震引起的核辐射事件，备受大家的关注。大家担心此次事件会给周边地区的居民带来危害。就这个话题，我们来具体介绍一下有关辐射的内容。 人正常的细胞一旦到了其寿命，给新生的细胞让路。而当细胞丧失了这种代谢功能时，癌症便发生了。这种细胞将持续进行细胞分裂增殖，失去控制。一般情况下人体拥有各种机制，阻止正常细胞癌变的发生，并且也有一套完善的新旧细胞替换机制。但辐射会彻底打破这种人体自身的控制体系，使癌症的发生几率大大上升，可见辐射的危害有多大。 尤其当放射性物质在衰变时释放离子辐射，这种辐射可以对人体内部化学环境造成严重伤害，它会打断人体组织的各种原子和分子间的化学键。人体会尝试对这种损害进行修复。但有时候这种伤害将是非常广泛而严重的，修复几乎不可能。并且在自动修复过程中还存在发生错误的可能性。人体内对辐射损伤zui敏感的部位是肠子和胃部的细胞组织，以及骨髓中的造血细胞组织。辐射对人体的损伤取决于你在辐射环境下的暴露时间，以及所受到的辐射强度。 如果你暴露于核辐射环境下，一半的健康成年人无法承受4戈雷的辐射剂量。你可能会得辐射病。这种病是有症状的。几小时内你就会感到恶心呕吐，随后会出现腹泻、头痛或发烧等症状。在zui初的症状过去之后，可能会出现一个短暂的无症状期，但数周后就会出现新的、更严重的症状。在更高的辐射剂量下，这些症状可能出现的更快，也更明显。同时，核辐射会对人体内脏造成广泛的，很多时候甚至是致命的伤害。 在遭遇辐射之后我应该采用遭遇的措施呢？首先，是脱去受污染的衣物，以便防止进一步的辐射污染。随后应当使用肥皂水轻柔的擦拭皮肤，进行清洗。 当前人们已经研制出了可以增加血液中白细胞数量，以便抵消辐射可能对人体骨髓造成的影响，并降低可能由于人体免疫系统的损害而导致的感染风险。现在同样有专门用来降低由于辐射粒子对人体内脏造成的损害的药物可以使用。
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ELISA试剂盒质控血清的制备
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
ELISA试剂盒是国内的生物行业带头企业，是集研发，生产、与销售为一体的生物试剂公司，以用心做好品质，企业方能远航为经营使命，起始于科研，专注于科研，持续为科研单位提供更更放心的科研产品，助力您的科学研究。质控血清的制备：1、收集新鲜的无溶血、无黄疸、无细菌污染的阳性血清。2、56℃加热10小时来活。3、离心或过滤除去沉淀。4、用10%的小牛血清或正常人血清（PBS缓冲液）将收集的血清稀释至所需的浓度。5、抽滤除菌，按一次使用的量分装小安瓿，封口，20℃保存备用，不可反复冻融，被检物要求检出的水平常被认为是质控血清应选择的水平。6、标定含量，20-30次测定结果删除>±2SD数据的均值作为靶值，并与已知定值血清对比测定。ELISA试剂盒信息参数：保存条件：2-8℃低温保存保质期： 六个月用途： 科研实验等领域科学研究，不得用于临床诊断。规格： （1）96T可用做84个标本，12个标准曲线。 （2）48T可用做42个标本，6个标准曲线。
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ELISA试剂盒根据已经使用的结果
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
ELISA试剂盒可通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应，颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比。如果您一直被所困扰，那么也许您该花些时间来优化封闭液。这可能需要时间，但也是值得的。 ELISA试剂盒目前主要有两种类型的封闭液：蛋白和非离子型去污剂。您使用的类型须取决于多个因素，包括微孔板的表面ELISA检测试剂盒、吸附的抗原、您的抗体和检测试剂。好的封闭液应降低非特异性结合，但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。 zui常用的非离子型去污剂是Tween-20。这种封闭液便宜、稳定，在去除洗涤过程中的一些非特异结合上很有用。在这种测定方法中有三个必要的试剂：（1）固相的抗原或抗体，即"免疫吸剂"（immunosorbent）；（2）酶标记的抗原或抗体，称为“酶联物"、“结合物"（conjugate）；ELISA试剂盒酶反应的底物。根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件，可设计出各种不同类型的检测方法。ELISA试剂盒法是免疫诊断中的一项新技术，现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、ELISA试剂盒寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定，认为ELISA试剂盒法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。
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PAA血清如何避免沉淀
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
血清解冻如何避免沉淀物的产生?1、解冻血清时，请按照所建议的逐步解冻法(-2O℃至4℃至室温)，若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃)，实验显示非常容易产生沉淀物。 2、解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。 3、请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害，而影响血清的质量。4、血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。5、若必须做血清的热灭活，请遵守56℃，30分钟的原则，并且随时摇晃均匀。温度过高，时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增多。血清解冻后发现有絮状沉淀物出现，该如何处理? 欲去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心，上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞过滤膜。PAA血清现货供应
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实验室常用的几款血清和品牌
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
实验室常用的血清品牌，HAKATA，HYCLONE，BOVOGEN,SERANA,GINIMI 一、特级类胎牛血清（于干细胞的胎牛血清）（常用血清 备有库存！） 1、Hyclone 北美特级胎牛血清（SH30070.03） 目前，性能的血清，实验室反馈不错的，那就是Hyclone SH30070.03的特级胎牛血清， Hyclone的“头牌”。 这款血清--Hyclone特级胎牛血清（Defined FBS），货号：SH30070，是世界上*经过40纳米过滤的*胎牛血清，的促细胞生长作用及产品稳定性。内毒素含量小于10EU/ml，血红蛋白含量小于10mg/dl。此血清可以广泛用于各种细胞培养，包含任何干细胞系的培养。 2、HAKATA北美特级胎牛血清（16000-044） invitrogen公司在美国原装生产的特级胎牛血清，货号：16000-044，是100nm过滤3次，内毒素和血红蛋白含量都可以与Hyclone的SH30070.03相媲美。也可以用于培养大部分的干细胞系。 二、优等类胎牛血清 1、Hyclone加拿大优等胎牛血清（SH30396） 的是Hyclone加拿大优等胎牛血清（Characterizend FBS），货号：SH30396，血清采自加拿大，由Hyclone公司总部的员工采集加工，采集方法，加工过程，检定标准与美国原产优等胎牛血清完全一致，市场*美国原产的。经过3次100nm过滤，内毒素含量小于25EU/ml，血红蛋白含量小于25mg/dl。此血清，在2005年以前，是很多实验室选择血清的，价格适中，质量过硬，应用细胞非常广泛。 2、Hyclone澳大利亚优等胎牛血清（SH30084） 基本与加拿大的优等血清是一样的，级别也非常相似，各种级别都有。 3、HAKATA澳大利亚胎牛血清（10099-141）与Hyclone澳大利亚胎牛血清差不多，市场价也是3200元/500ml左右。这一级别的血清，也能用于干细胞培养，可是，不象特级胎牛血清那么。 三、普通进口胎牛血清 Hyclone南美胎牛血清（SV30087）HAKATA南美胎牛血10270-106 目前市场上用的zui多的Hyclone血清是南美胎牛血清（FBS） SV30087 ，此血清采自南美，在国内（兰州）过滤并测试检验，经
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细胞周期的相关检测
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
Ⅰ、样品准备 准备以下一种或几种样品 A、组织单细胞悬浮液（如淋巴腺、脾、骨髓、胎盘细胞） B、组织培养细胞 C、Ficoll-hypaque分离的单核细胞 Ⅱ、反应体系－DNA低渗缓冲液 柠檬酸三钠 0.25g Triton-X 100 0.75ml Propidium iodide 0.025g 核糖核酸酶 0.005g 蒸馏水 250ml 我们将该DNA低渗溶液于密闭瓶子中存放数月后并无发现有任何染色活性的丢失 Ⅲ、染色 1、 每一个管子中放入1×106个细胞； 2、 样品离心后尽可能完全地移去上清液，并且不要打碎沉淀块； 3、 入1ml的DNA低渗染色（可用甲基绿进行染色）缓冲液至沉淀中，并混匀； 4、 样品于4℃下避光30分钟或zui长不超过1个小时以备流式细胞仪分析。 注意：延长在低渗缓冲液的曝光时间会引起样品碎片的增加。细胞周期检测可以作为生物相容性评价指标，示例如下： 应用体外细胞培养法，观察不同质量分数羟基磷灰石浸提液对L-929细胞的细胞学形态的影响，同时采用MTT比色法评价羟基磷灰石对L-929生长和增殖的影响，流式细胞仪检测羟基磷灰石浸提液对L-929细胞生长周期及凋亡的影响。结果表明，羟基磷灰石浸提液对体外培养的细胞形态无明显影响，对细胞生长和增殖无明显抑制作用；不同质量分数材料浸提液的细胞毒性为 0~1级，随羟基磷灰石浸提液质量分数的升高，细胞凋亡率逐渐上升；50%、75%、100%羟基磷灰石浸提液组能明显降低G0 /G1 期细胞比例，增加S,G2 /M期细胞比例，能增加L-929细胞DNA的合成，促进细胞生长和组织修复。细胞周期检测是生物材料生物相容性评价的一种可靠方法和指标。 其他资料 细胞周期口诀 以植物细胞有丝分裂为例： 有丝分裂分五段 间前中后末相连 间期首先作准备 间期染体复制在其间 前期 两消两现一散乱 中期 着丝点聚赤道板 后期 丝牵染体两极走 末期 两消两现壁重建 注：动物细胞末期不生成细胞壁。 舜冉（上海）生物科技有限公司更多人AB血清、进口血清、国产血清，豚鼠血清、兔血清、绵羊血清、山羊血清、
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