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分析食用菌菌种鉴定方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
一、青海发光杆菌外观直接观察鉴定外观菌种，菌丝浓白、粗壮、富有弹性，则生命力强；如果菌种菌丝萎缩，干燥无色泽，或菌丝体自溶产生了多量红褐色液体，则生活力已变弱，不宜再用；木块菌种如仍保持硬实，则属于生活力强的菌种，如若木块变得软化松散，则已老化，不宜使用。二、培养观察鉴定对于分离、选育和引进的菌种，通过培养，观察菌丝体对干、湿度和温度等方面的适应特性。如将菌丝体置于偏干、偏湿和干湿相宜的条件下培养，若菌丝在前两种条件下能良好生长，而在干湿相宜的条件下生长*，则说明是好菌种。三、液体培养鉴定配制2％糖水溶液，经常规灭菌消毒，挑取黄豆粒大的菌块，放入100毫升上述溶液中，置于25—28℃温度下培养3—7天后，若液面出现气泡，产生“油皮”，发生浑浊现象，青海发光杆菌说明菌种本身有杂菌；如果苗块下沉，或迟迟才长出很薄的菌丝层，则说明菌种生活力弱；如若液面四周的菌丝生长快，且浓白呈棉絮状，则表明菌种生命力强。四、锯木屑瓶栽鉴定和周期产量鉴定瓶栽鉴定的做法与培育栽培的方法相似，把锯木屑培养料装得松一些，适当加大湿度，把需要鉴定的菌种接种于培养基中，做好记录，在26℃恒温下培养15天。然后使温度降至15—20℃，并给予较好的散射光条件，再培育半个月左右，在瓶壁和料面上就会出现子实体原基和少量子实体。若未发现杂菌和异常现象，再把菌种接在木段上，做周期产量鉴定。如果子实体生长旺盛，高产，青海发光杆菌具备优良品种特性，并且没有杂菌混生，说明菌种可靠，可以保存并投入大面积生产。
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微生物菌种的选择方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
1、微生物菌种选择动物消化道微生物具有多样性和特异性，不同动物种类对菌种的要求不同，同一菌株用于不同动物，产生的效果差异也较大。使用时一定要掌握菌种的特性和功效，选择不当起不到应有效果，反而会破坏原有菌群，甚至引发疾病2、微生物菌种应用时间微生物制剂应用要从子畜开始使用，以保证有益菌优先定植。因为制剂进入体内后要有一段时间进行微生物菌群调整才能定植下来。一般认为，乳酸菌类在各种动物的各阶段添加均较好，芽孢杆菌类在生长期添加较好，在幼龄期可以添加;曲霉菌类在幼龄期，水产动物全期不必添加;酵母菌类在生长期不必添加;在水产动物养殖中，以改善水质为目的时，可将微生物制剂或光合细菌直接洒于水中。3、微生物菌种添加方式一般粉状饲料添加微生物制剂效果较好，颗粒饲料和膨化饲料在加工过程中的高温可造成10%~30%的芽孢杆菌，90%以上的肠球菌以及99%以上的酵母失活，而乳酸杆菌几乎全部被杀灭。因此，在颗粒饲料中要使用耐热，耐挤压的芽孢杆菌制剂。乳酸菌不耐高温，应采用冻干后包被或采用喷雾干燥的方式制成的乳酸菌制剂。使用时采用饮水方式，以利于乳酸菌优先粘附于肠壁。4、微生物菌种剂量与浓度微生物制剂中必须含有相当数量的活菌才能达到效果。当进入动物肠道食糜中外源菌数大于1000万个每克时，都会对肠道内原有菌群产生较大的影响。因此，微生物制剂在产品中活菌数含量为10亿~20亿每克时效果*。我国正式批准生产的微生物制剂中规定每克芽孢杆菌含量要多于5亿个。以酵母菌产品为例，目前市场上销售的产品活菌数从每克几亿到200亿不等，在选择是要认真鉴别。5、微生物菌种抗生素的影响细菌类的微生物制剂对抗生素敏感，不宜与抗生素同时使用，使用微生物制剂的前后二天应停止使用抗生素。先用抗菌药物清理肠道，为益生菌的定植和繁殖扫除障碍，然后再饲喂微生物制剂，可提高使用效果。酵母菌类属于真核生物，生物学活性与细菌完全不同，对抗生素、磺胺类药物和一些抗菌剂有天然
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分析抗原elisa试剂盒实验异常原因
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
在使用抗原elisa试剂盒做实验的时候，有些细节若是做不好会出现实验异常，或者效果不佳，那么是什么原因造成的呢？ ●白板异常：显色步骤结束后，酶标板所有孔均无颜色。阳性对照不显色。 这可能是因为： 1. 试剂已过效期，或不同试剂盒组分混用（解决方式：检查试剂的组分及批号，确认未过期以及所有组分均属对应的试剂盒。不同试剂盒或不同批号的试剂不能混用）。 2. 错加、漏加试剂底物、显色剂 A或B（解决方式：严格按说明书的步骤操作，加完试剂后可观察一下液面高度是否一致，以减少漏加现象）。 3. 洗板及加样过程中，酶标受污染失活失去催化显色剂显色的能力（解决方式：确认盛酶标的容器不含酶抑制剂如叠氮钠等，确认配制洗液的容器已洗干净）。 4. 终止液误作洗涤液稀释或当底物缓冲液配制（解决方式：每次配制时都应看清标签标明物质）。 5. 蒸馏水有问题（解决方式：确认配制洗液的纯化水达到要求且未污染，与好蒸馏水比较）。 ●显色弱、灵敏度低：实验结束后，包括阳性对照、质控在内的所有板孔颜色均较淡。 这可能是因为：试剂盒超过期， 超过有效期的产品可能会产生很弱的信号；试剂盒没有按规定进行保存，受高温影响（实验前检查试剂的组分及批号，确认试剂未过期。不要将试剂盒长时间置于常温下，按使用规定储藏）。 1. 试剂、样品用前未平衡至室温。如何解决？从低温冰箱中取出的试剂及样品应置室温平衡 20分钟左右。 2. 加入试剂的体积和时间有误，移液器计量不准，吸嘴内水分太多或不清洁。如何解决？确定所使用的试剂体积正确，加入时间适当。 校正移液器，移液器与吸嘴配合要紧密吻合。移液不宜太快，排放应完全。 3. 洗板及加样过程中，酶标受污染失活而失去催化显色剂显色的能力。如何解决？确认盛酶标的容器不含酶抑制剂如叠氮钠等，确认配制洗液的容器已洗干净，确认配制洗液的纯化水达到要求且未受污染。 4. 孵育时间及孵育温度未达到要求 ，反应板放入培养箱时注意温度并及时调整。如何解
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牛流行性腹泻病毒PCR-荧光探针试剂盒溢值现象分析
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
牛流行性腹泻病毒PCR-荧光探针试剂盒实验步骤繁琐，操作者们所犯的问题也各有不同。为什么ELISA标准品会出现“溢值”的现象呢？① 样品/标准品不正确稀释。② 孵育时间/温度不正确。③ 在孵育时为盖上酶联板覆盖物：在孵育时需盖上酶联板覆盖物，以防止液体蒸发或孵育期间的污染。每个试剂盒内均有足够数量的酶联板覆盖物。④ 检测波长不正确：要保证分光光度剂的检测波长是正确的。⑤ TMB底物的显色时间过长：请监控显色时间。牛流行性腹泻病毒PCR-荧光探针试剂盒说明书中所示的显色时间可能因为温度和其它检测条件的不同而稍有变化。⑥ 样品不适合此检测：在说明书中会列出每种产品的适用标本范围，超出范围的标本可能不适于此试剂盒或者检测条件需要摸索。⑦ 样品/标准品污染：样品或标准品的污染可能会导致检测结果“溢值”。⑧ 偶合试剂不正确稀释：要严格按照说明书来稀释偶合试剂，浓度过高会造成OD的“溢值”HRP偶合试剂的不正确稀释⑨ 所用稀释液不对：只能使用相应试剂盒内的稀释液稀释样品和标准品。找到问题原因后，解决问题就容易的多了。各位广大科研者们也是一样，在检测的时候一定要认真仔细，并严格按照要求来操作。实验前，对牛流行性腹泻病毒PCR-荧光探针试剂盒说明书仔细的阅读。
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elisa试剂盒前期准备工作和操作流程
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
进口elisa酶联免疫试剂盒前期准备工作： 实验前样本和试剂盒室温平行1小时，如果样本是冻存样本，应提前拿到2-8摄氏度进行解冻（不建议直接室温解冻） 准备好实验所需耗材，蒸馏水（去离子水）。 进口elisa酶联免疫试剂盒操作流程： 1，将要进行实验的版孔进行设定好，标准品5个点，每个点设定平行，需要用到10个孔，空白只需1个孔。剩下孔可以做为样本孔 2，稀释标准，准备好5个EP管，然后在每个EP管中加入150微升标准稀释液，编上编码，分别为1，2，3，4,5，在1号管中加入150标准品，用枪头反复吹打10次左右（注意控制幅度不要过大容易产生气泡）如果有涡旋仪可以在涡旋仪上涡旋5秒左右，然后换枪头，在1号管中取150微升加入到2号管，后面过程一次类推。zui后稀释完，前面4个管中每管液体在150微升，5号管为300微升。浓度是从大到小。 3，标准、样本、空白加样：标准是每个浓度点2个孔（做平行），每孔加入50微升，加样过程中注意换枪头，样本孔中每孔加入50微升，加样过程中注意换枪头，空白孔加入50微升蒸馏水。特别要说明的是，标准加样和样本加样尽量控制在15分钟内加完，如果时间拖的太长，会导致前面孔先反应后面孔才开始反应，这样数值偏差过大。加完样后盖上封板膜，至37摄氏度孵育30分钟. 4，洗版，在孵育过程中可以将洗涤液配好，20ml30倍浓缩洗涤液用蒸馏水或者去离子水定容到600ml即可。每孔加入250-300微升的洗涤液（不要漫过版孔），（如果有震荡仪的话，可以讲板子放入震荡仪上5秒左右，然后静止三十秒，没有请忽略次过程）将板子在桌子上晃动5秒左右，然后静置30秒，甩干，拍板。说明：甩干过程尽量要快，1秒内就可以完成，不要慢慢倾斜倒掉液体，直接翻板甩掉液体即可。拍板过程需要在桌子上垫一层吸水纸或者滤纸，版孔朝下拍几下，拍干区别主要看吸水纸和滤纸上没有明显的水渍为完成。 5，每孔加入50微升的酶标试剂，此处在空白孔中不需要加（空白孔为空），孵育30分钟。 6，洗版同步骤4 7，显色，先
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选择微生物菌种的方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
1、微生物菌种选择动物消化道微生物具有多样性和特异性，不同动物种类对菌种的要求不同，同一菌株用于不同动物，产生的效果差异也较大。使用时一定要掌握菌种的特性和功效，选择不当起不到应有效果，反而会破坏原有菌群，甚至引发疾病2、微生物菌种应用时间微生物制剂应用要从子畜开始使用，以保证有益菌优先定植。因为制剂进入体内后要有一段时间进行微生物菌群调整才能定植下来。一般认为，乳酸菌类在各种动物的各阶段添加均较好，芽孢杆菌类在生长期添加较好，在幼龄期可以添加;曲霉菌类在幼龄期，水产动物全期不必添加;酵母菌类在生长期不必添加;在水产动物养殖中，以改善水质为目的时，可将微生物制剂或光合细菌直接洒于水中。3、微生物菌种添加方式一般粉状饲料添加微生物制剂效果较好，颗粒饲料和膨化饲料在加工过程中的高温可造成10%~30%的芽孢杆菌，90%以上的肠球菌以及99%以上的酵母失活，而乳酸杆菌几乎全部被杀灭。因此，在颗粒饲料中要使用耐热，耐挤压的芽孢杆菌制剂。乳酸菌不耐高温，应采用冻干后包被或采用喷雾干燥的方式制成的乳酸菌制剂。使用时采用饮水方式，以利于乳酸菌优先粘附于肠壁。4、微生物菌种剂量与浓度微生物制剂中必须含有相当数量的活菌才能达到效果。当进入动物肠道食糜中外源菌数大于1000万个每克时，都会对肠道内原有菌群产生较大的影响。因此，微生物制剂在产品中活菌数含量为10亿~20亿每克时效果*。我国正式批准生产的微生物制剂中规定每克芽孢杆菌含量要多于5亿个。以酵母菌产品为例，目前市场上销售的产品活菌数从每克几亿到200亿不等，在选择是要认真鉴别。5、微生物菌种抗生素的影响细菌类的微生物制剂对抗生素敏感，不宜与抗生素同时使用，使用微生物制剂的前后二天应停止使用抗生素。先用抗菌药物清理肠道，为益生菌的定植和繁殖扫除障碍，然后再饲喂微生物制剂，可提高使用效果。酵母菌类属于真核生物，生物学活性与细菌完全不同，对抗生素、磺胺类药物和一些抗菌剂有天然
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外周血淋巴细胞染色体标本制备与分析
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
1. 转化细胞采血及接种培养 1.1 在酒精灯火焰上，用灭菌注射器（一次性注射器）抽取肝素0.2ml，使肝素湿润至管壁。 1.2 常规消毒后，采集外周静脉血5ml，转动注射器使血液与肝素混匀。 1.3 在超净工作台中，预先将RPMI 1640液体培养基（5ml，含植物血凝素60mg/ml、10%小牛血清）加入消毒好的小培养瓶中，再滴加25滴全血（6号针头），水平摇动混匀。 1.4 置37℃恒温培养箱中培养72小时。培养过程中每天水平摇动培养物1～2次，使血液均匀悬浮，再继续培养。 1.5 终止培养前2～4小时，加入秋水仙素，使终浓度达到0.2μg/ml。轻轻摇动培养瓶，使秋水仙素混匀。继续培养至72小时。 2．制片 2.1 收集转化细胞时，去掉瓶塞，用乳头吸管吸取培养液，充分混匀培养物，再将全部培养物吸入刻度离心管中。 2.2 1000 rpm离心8分钟（注意先配平）。 2.3 弃上清液，加入37℃预温的 0.075 mol/L KCl溶液8 ml，用吸管轻轻吹打细胞团混匀后，置37℃恒温水浴箱低渗处理25分钟。 2.4 加入 1ml新配制的固定剂（甲醇：冰乙酸=3：1），用吸管小心吹打、混匀，1000rpm离心8分钟。 2.5 弃上清液，加入8ml固定剂，吹打细胞团制成细胞悬液后，室温下固定20分钟。 2.6 1000 rpm离心 8分钟。 2.7 弃上清液，重复固定一次。 2.8 弃上清液，根据细胞数量的多少适当加入数滴新配制的固定剂，吹打细胞制成悬液。 2.9 吸取少量细胞悬液，滴2～3滴于冰水浸泡过的载玻片上，吹散，气干。 2.10 将标本置Giemsa染液中，染色8分钟，水洗去浮色，气干。 2.11 转化细胞显微镜下观察染色体标本分裂相的多少及分散情况。
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神经细胞分散培养
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
（一） 细胞系选材 常用胚胎动物或新生鼠神经组织。鸡胚常用胚龄6-8d，新生鼠或胎鼠（12-14d）或人胚胎。不过也有认为与组织相关。如大白鼠胚胎以19d为宜，小鼠以18d为宜，大鼠纹状体以10d为宜；若纹状体与黑质联合培养的大鼠胚，则黑质以13d，纹状体18-21d为宜；小脑以20-21d小鼠胚胎，所获蒲氏细胞成活率高，颗粒细胞正在分化；脊髓与DRG联合培养，常用4-7d鸡胚或12-14d小鼠胚胎，取材易，神经成活率高。（二） 取材。脑则取出相应组织，在解剖液中先剪碎，以使胰酶消化。脊髓则固定于琼脂板上，用小刀将其要成背腹两侧，分别培养。（三） 细胞分离与接种。神经组织用0.125-0.25%胰蛋白酶在37℃孵育30min，移入接种液，停止消化，并洗去胰蛋白酶液，用细口吸管吹打细胞悬液，使其充分分散，如此多次，待沉淀后吸出上层细胞悬液，计数，预置细胞密度，接种于培养皿（1×106），做电生理应为5×105或更低。（四） 抑制胶质细胞生长。培养3-5d后，也有人认为培养7d后，用阿糖胞苷，或5-FU抑制神经胶质细胞的生长。（五） 观察。接种6-12h，开始贴壁，并有集合现象，细胞生长突起明显，5-7d胶质细胞增生明显，7-10d胶质细胞成片于神经细胞系下面，形成地毯，2周时神经细胞生长zui丰满，四周晕光明显，一个月后，有些神经细胞开始退化，变形，甚至出现空泡，一般培养2-4周zui宜。但神经细胞只能增大，而不能增殖，只能原代，不能传代，不会有细胞周期，而且随培养时间的延长，细胞数量在下降，但胶质细胞可以，神经胶质细胞也可以。在培养过程中，早期9-12d时，有较多的神经细胞死亡，这是*次死亡阶段，应注意保持条件的恒定。在此之后存活下去的细胞一般突起长而多，且相互形成突触。（六） 常用培养细胞实验有：FCM的蛋白总量分析；膜片钳与离子通道的分析；免疫组化分析；但免疫组化分析应注意，由于抗体直接作用于活细胞，不易穿透活细胞，故对核内抗原定位时，首先考虑膜对抗体的通透性问题。常用化学试剂以增加其通透性或
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结晶紫检测法检测细胞生长
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
1．肿瘤细胞在96孔细胞培养板各孔中加0.1ml含5×104～10×4 WEHI-164细胞的培养液（含10％小牛血清的RPMI-1640培养液），37℃ 5％ CO2的二氧化碳培养箱中培养2～3小时，让细胞帖壁。2．用RPMI-1640培养液10倍递次稀释TNF标准品，根据需要3～5倍递次稀释待检样品，每孔加0.1ml稀释的标准品或待检样品，每个稀释度3个重复孔。对照孔6个，3个阳性对照孔各加0.1ml含4μg TNF的RPMI-1640培养液，3个阴性对照孔各加100μl RPMI-1640培养液。继续培养18～24小时。3．甩去培养液，用PBS小心洗涤一次，每孔加0.1ml 10％甲醇溶液固定肿瘤细胞30秒钟。4．吸去甲醇溶液，每孔加0.1ml结晶紫染液，室温中放置20分钟。5．轻轻甩去染色液，用蒸馏水洗涤各孔，将培养板倒置于吸水纸上吸干水分。自然干燥或37℃烘干。此板可以在室温中长期保存。6．测定前，每孔加0.1ml 33％醋酸脱色，充分振荡后在570nm处测定光吸收度。用光吸收度（OD）值对样品稀释度作图，比较标准品曲线和待检样品曲线即可得到待测样品中的肿瘤细胞因子活性。
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调节血管生长的开关miRNA-132
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
科研人员发现了一种可调节血管生长的“开关”——微型核糖核酸分子miR－132，并且找到了控制该“开关”的方法。这一研究成果有望对癌症和心脑血管疾病的**产生积极影响。这项研究由美国加州大学圣迭戈分校医学院和密歇根大学癌症中心的研究人员共同完成。研究小组在英国《自然·医学》杂志网络版上报告说，他们发现在正常血管形成或再生期间，形成血管内壁的内皮细胞会暴露在一种具有“开关”功效的物质环境中，导致血管开始扩张、生长。通过分析，研究人员确定这个“开关”就是微型核糖核酸分子miR－132。 负责此项研究的病理学家说，血管与这个“开关”的关系好比是汽车与油门、刹车片之间的关系。在肿瘤的血管里，miR－132分子非常丰富，它具有保障血管广泛生长的能力，结果造成病变部位的血管像油门轰响、刹车失灵的汽车一样在人体组织内闯荡。 但他们认为，对于心脑血管疾病患者和因其他疾病血管受损者来说，miR－132分子补充物可能有助于调节其血管生长，缓解病情。 根据这一原理，科研人员制作出了遏制miR－132分子的物质和miR－132分子补充物。在对患有癌症和视网膜疾病的老鼠进行实验时，研究者发现，遏制miR－132分子的物质能使老鼠病变部位的血管生长受到抑制，阻止病情进一步发展。对于miR－132分子补充物的效果，研究者暂时没有提供详细资料。 目前，正在设计一种纳米粒，以期将遏制miR－132分子的物质和miR－132分子补充物准确输送到老鼠的病变部位，并且降低这两种物质的毒副作用。
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三种干细胞类型之间的差别
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
在一项独立的研究中，Ji等人研究了特定DNA甲基化标记在特定细胞系的发育进程中所起作用。他们对造血细胞群进行了全基因组DNA甲基化分析，结果显示了显著的外成弹性。DNA甲基化所发生的变化，也许是作为指导命运选择（如：是致力于骨髓发育，还是致力于淋巴发育）的一个主要因素而出现的。 通过利用不同转录因子对分化的成年细胞重新编程而产生的“诱导多能干”（iPS）细胞，具有“体细胞核转移”（SCNT）所产生的“胚胎干”（ES）细胞和来自自然受精的胚胎的ES细胞的很多典型性质。 然而，这三个细胞类型并不是相同的，现在它们之间一个有趣的差别已被发现：iPS细胞保留它们来自其中的供体组织的一个“外成记忆”，而基于SCNT的重新编程则将成年细胞的DNA甲基化状态重置为接近与ES细胞相似的状态。
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你未必知道的32条ELISA实验秘诀
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
只有不断学习与实验才能逐渐积累经验，做出更好的实验效果。在前面的资讯内容及技术文章中，上海恒远为大家分享许多ELISA试剂盒的操作技巧、要求、方法等相关技术，我公司技术员根据自身多年【ELISA试剂盒实验】经验，整理出的ELISA操作技巧。下面我们一起来看下具体内容，你未必知道的32条ELISA实验秘诀： 1.加样后及时放人孵箱，标本较多时，要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间，防止孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗彻底。 2.显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。 3.加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 4.合理安排检测量，以免反应板过多造成洗板等待时间长。 5.液体全部加入酶标孔后，将酶标板放在桌子上平行轻轻摇晃30s，使液体充分混合均匀，也使其得到充分的反应。 6.洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。 7.吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。 8.要尽量做双孔实验，这样才既能保证数据的准确性，又能反映出试剂盒的精密度。 9.为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。 10.未使用完的酶标板或者试剂，请于2-8℃保存。辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液。 11.作时必须戴手套，穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度。 12.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。 13.样品稀释液应用加液器加注，并经常校对其准确性。 14.剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟，或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。 15.不同批号试剂组分不得混用。 16.ELISA试剂盒实验洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净。
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急!如何寻求让ELISA系统更稳定的方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
ELISA检测系统可谓是免疫学反应应用到科研出产中zui为敏捷的技术手段。可是在新老手操纵过程中老是会泛起或大或小的题目，例如花板，假阳性，全显色，全部显色，显色比空缺还低。 德尔塔生物研究人员一直在寻求让ELISA试剂盒实验，ELISA系统更稳定的方法。让我们的客户实验更加方便，减少更多操作中遇到的困扰。 常用封锁剂有：0.05%-0.5%的bsa；10%的小牛血清或1%明胶；脱脂奶粉，比较价廉，可以高浓度使用（5%－10％）；还有一些稀有用到的各种动物血清（主要为了排除相似蛋白干扰）和酪蛋白等等。详细的试验还要有坚固的理论外也要实践，看一下*可不可以应用到自己试验当中去。但*选用什么，要依据试验详细来实践。应留意以下原理：因为蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的，靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用，这种物理吸附长短特异性的，受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响，大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团，故更易吸附到固相载体表面。小分子必需依赖和大的蛋白载体偶联后才能固定在固相载体上。有的包被原可能不是蛋白，对于生物素和脂类物质或小分子物质我们要事先对其改造再加以包被，亲和素生物素:先亲和素先包被载体，加入生物素化的dna，这种包被方法平均、牢固，已扩大应用于各种抗原物质的定量测定。常用的包被液除了刚才提到的ph9.6碳酸盐缓冲液，还有ph7.2的磷酸盐缓冲液和ph7-8的tris-hcl缓冲液等等。 包被原的性质很重要，蛋白浓度，是否降解，这关系到您做出的抗体可不可以被其识别，所以保留抗原很重要，我做重组蛋白时，师兄都严格警告我一定要在冰浴下缓慢融化就是这个道理。封锁就是让大量不相关的蛋白质充填这些旷地空闲，从而排斥ELISA后的步骤中干扰物质的再吸附。但有时因为试验的需要，包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。 上海德尔塔生物主营：ELISA试剂盒,
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四月浓春 劲马提醒ELISA实验注意这9个事项
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
各位亲们，已四月中旬啦！上海劲马免疫学研究检测中心为大家带来了技术内容。ELISA实验步骤繁琐，总有这样那样的小问题。下面我们来一起看下，四月浓春，劲马提醒ELISA实验注意这9个事项： 一、样品和试剂的混匀 稀释前、后的样品必须充分混匀，所有试剂在加样前也须摇匀，以保证试验的均一性。 二、样品稀释 酶联免疫反应是一种敏感性很高的反应，如果血清不稀释，不可避免会产生很强的非特异性反应，出现假阳性。因此，国外检测血清抗体的试剂盒，均规定将血清稀释至适当的倍数，以降低非特异性反应，使特异性的抗原抗体反应充分体现出来。一般产品的样品稀释倍数均通过大量试验确定，以保证试验的灵敏度和特异性。但是，有些用户未能严格按使用说明书操作，如某些产品应取10μl样品进行稀释，个别用户取5μl甚至1μl样品进行稀释，由于吸嘴上不可避免地沾有样品以及微量移液器的精度不够，因此造成样品稀释倍数不准确，检测结果出现问题。 三、加样 在现在的ELISA商品试剂盒中，必然有使用微量加样器加入样本的步骤。注意的关键点是：加样不可太快，要避免加在孔壁上部，不可溅出和产生气泡。加样太快，无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区，易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。所以，有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性，下次测定为阴性，往往就是上述加样及试剂的错误所致。 四、温育 ELISA作为一种固相免疫测定，抗原抗体的结合反应在固相上进行，要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合，必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比，即温度越高，则所需时间相对较短。zui为常用的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和2～8℃。一些操作者，擅自改变说明书操作，使用自己喜欢的温育时间和温育温度，这样造成一些不必要的麻烦。因为，不同试剂盒有不同的温育时间和温育温度的选择，随意更
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换热器性能试验测控系统
作者：德尔塔 日期：2022-04-06
换热器机能实验普遍采取的办法是等雷诺数法及威尔逊分别系数法。 利用这些办法失掉的丈量数据均是在差别的冷、热流体流量、差别的冷、热流体收支口处温度跟压力下测取的，并据此数据停止数学剖析得出换热器的传热特征与阻力特征。 传统的流量调理办法是经由过程转变分流管阀门开度的年夜小来调理流量,采取变频器后只经由过程转变输出频率来准确把持泵或风机的转速即可。 泵或风机的现实流量与流畅截面积、流体的粘度、管路的安排及转速等诸多要素有关。多种变量的影响对流量的准确把持提出更高的请求。 对薄壁的板式换热器，因为冷、热侧的流量差别或压力波的影响,使板片发生弹性变形，则两侧流量产生变更并彼此影响，因而在测试工况较多时无奈树立准确的把持函数，而智能把持为处理这类庞杂成绩供给了无效的办法。 现在，换热器机能实验台的测试手腕跟把持办法比拟落伍，人工实验义务沉重、实验数据精度无限、难以测验换热器的机能。为此，咱们研制开辟了存在盘算机主动把持、把持办法轻便、丈量数据精度较高的换热器机能实验测控体系。 1、实验体系形式 1）体系构造本体系由两部门构成: 一部门是由冷、热水箱及换热器所构成的现场流程； 另一部门是由现场检测与把持所构成的测控体系(见图1)。数据采集、归档及处理等工作，实现了在较短的时间内完成全部14组数据的测量、整理及报表输出工作。 3、论断 （1）本体系处理了换热器机能实验进程中,数据记载义务沉重、实验时光长、数据存储及数据处置繁琐的成绩。 （2）对多变量影响的换热器流质变化及薄壁换热器流质变化交互影响下的流量把持成绩,宜采取存在无需工具数学模子自顺应才能的把持办法。“客户的满意、行业的发展是我们坚持不懈的目标”，仪器仪表世界网 始终将客户放在*位，尽可能的将服务水平提高到更高的层次，同时也为行业的发展尽自己的一己之力。中仪华世将会与客户携手并进，共同
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