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热烈祝贺昆明动物所发表两栖动物活性多肽发掘与利用的综述文章
作者：德尔塔 日期：2022-04-11
两栖动物皮肤裸露，他们常常受到生物因子或者非生物因子的浸袭(如微生物、寄生虫、猎食者、辐射及其他物理伤害)，两栖动物皮肤中含有大量的活性多肽对应对环境威胁具有重要作用。 中国科学院昆明动物研究所研究员赖仞领导的天然药物功能蛋白质组学学科组长期从事两栖动物与环境相互作用的分子机制及两栖动物活性多肽发掘与利用的研究，获得了众多研究成果，如首次在两栖动物中发现基因编码的神经毒、抗氧化多肽、凝集素、皮肤修复肽、表皮生长因子释放肽等，该课题组从两栖动物皮肤中发掘了超过40个新的活性多肽家族，包括了400个以上多肽成员。这些成果不仅解析了两栖动物环境适应、复杂性状的物质基础和分子机制，同时也提供了大量具有应用前景的功能分子资源。 *近Chemical Reviews 发表了该课题组的综述文章The chemistry ａnd BioLogical activities of peptides from amphibian skin secretions, 2015,115:1760-846。该文得到了评审专家的高度评价，他们在评语中提到，“本文俨然是该领域的百科全书，该文也是天然活性多肽发掘和功能研究的范本，同时也全面揭示了两栖动物环境适应的物质基础和分子机制”。 该研究工作得到了科技部、中科院和云南省科技厅的支持。www.shxfbio.com elisa试剂盒,elisa kit,西安elisa实验代测,SOD试剂盒,IgG试剂盒,IgM试剂盒,WB实验代做,免疫组化实验代做,放免实验代测,GIBCO,AMRESCO-德尔塔 原创作者：德尔塔
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德尔塔告诉大家：发酵罐的保养与其他注意事项
作者：德尔塔 日期：2022-04-11
一、发酵罐的保养 1、如进气管与出水管接头漏气，当旋紧接头不解决问题时，应添加或更换填料。 2、压力表与安全阀应定期检查，如有故障要及时调换或修理。 3、清洗发酵罐时，请用软毛刷进行刷洗，不要用硬器刮擦，以免损伤发酵罐表面。 4、配套仪表应每年校验一次，以确保正常使用。 5、电器、仪表、传感器等电气设备严禁直接与水、汽接触，防止受潮。 6、设备停止使用时，应及时清洗干净，排尽发酵罐及各管道中的余水;松开发酵罐罐盖及手孔螺丝，防止密封圈产生永久变形。 7、操作平台、恒温水箱等碳钢设备应定期（一年一次）刷油漆，防止锈蚀。 8、经常检查减速器油位，如润滑油不够，需及时增加。 9、定期更换减速器润滑油，以延长其使用寿命。 10、如果发酵罐暂时不用，则需对发酵罐进行空消，并排尽罐内及各管道内的余水。 二、其他注意事项 1）.罐体灭菌前务必检查其中液面高度，要求所有的电极都没于液面以下。 2）.打开不锈钢发酵罐电源前务必检查冷却水是否已打开，温度探头是否已插入槽中，否则会烧坏加热电路。 3）.发酵过程中一定要保持工作台的清洁，用过的培养瓶及其它物品及时清理，因故溅出的酸碱液或水应立即擦干。 4）.对罐体安装，拆卸和灭菌时要特别小心pH电极和罐体的易损又昂贵部件。 原创作者：德尔塔
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热烈庆祝西安生科院揭示脑室旁灰质异位发生机制
作者：德尔塔 日期：2022-04-11
热烈庆祝西安生科院揭示脑室旁灰质异位发生机制，西安生科院的老师曾多次订购我司elisa试剂盒，生化试剂，培养基等产品。对于生科院取得的成绩，我们表示衷心的祝贺！1月14日，中国科学院西安生命科学研究院神经科学研究所熊志奇研究组在《神经科学杂志》发表了题为《Rcan1缺乏引起神经元迁移缺陷并引发脑室旁灰质异位》的研究论文。该论文报道了钙调磷酸酶调节蛋白Rcan1在大脑皮层的发育以及脑室旁灰质异位发生过程中的重要作用。脑室旁灰质异位(periventricular heterotopia)是一类大脑皮层发育畸形，表现为在脑室旁出现异常的神经元聚集。诱发脑室旁灰质异位的分子机制至今仍不明确。在这项研究中，熊志奇研究组发现一个与唐氏综合症相关的基因——钙调磷酸酶调节蛋白1(Regulators of calcineurin 1，RCAN1)——在大鼠皮层发育过程中发挥重要作用。利用短发夹RNA(shrna)下调Rcan1的表达会影响神经前体细胞的增殖以及神经元的放射状迁移，并且导致脑室旁灰质异位的发生。细丝蛋白A(Flna)是一种纤维型肌动蛋白(F-actin)的交联蛋白，对于细胞骨架的重构以及细胞的迁移是必需的。Flna的突变是导致人类罹患脑室旁灰质异位症的重要遗传因素。该研究进一步显示，敲减Rcan1的表达会引起Flna的表达下调。此外，在敲减Rcan1的神经元中过表达Flna可以挽救细胞的迁移缺陷。这项研究工作的结果表明Rcan1可以通过调控Flna的表达参与神经元的放射状迁移。Rcan1-Flna信号通路的异常可能是引发脑室旁灰质异位的一种分子机制。 原创作者：德尔塔
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德尔塔为大家提供：考马斯亮蓝测定蛋白质浓度的原理、优缺点
作者：德尔塔 日期：2022-04-11
蛋白质浓度测定的方法有很多，考马斯亮蓝测定蛋白质是实验室*常见的一种方式，它利用比色法和色素法混合方法、操作简便，下文介绍了考马斯亮蓝测定蛋白质浓度的原理、优缺点、操作以及注意事项。 实验原理 考马斯亮蓝（Coomassie Brilliant Blue）法测定蛋白质浓度，是利用蛋白质―染料结合的原理，定量的测定微量蛋白浓度的快速、灵敏的方法。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点，因而正在得到广泛的应用。这一方法是目前灵敏度的蛋白质测定法。 考马斯亮兰G-250染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的吸收峰（lmax）的位置，由465nm变为 595nm，溶液的颜色也由棕黑色变为兰色。通过测定595nm处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。研究发现，染料主要是与蛋白质中的碱性氨基酸（特别是精氨酸）和芳香族氨基酸残基相结合。 考马斯亮蓝染色法的突出优点是： （1）灵敏度高，据估计比Lowry法约高四倍，其蛋白质检测量可达1mg。这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大，蛋白质-染料复合物有更高的消光系数，因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比Lowry法要大的多。 （2）测定快速、简便，只需加一种试剂。完成一个样品的测定，只需要5分钟左右。由于染料与蛋白质结合的过程，大约只要2分钟即可完成，其颜色可以在1小时内保持稳定，且在5分钟至20分钟之间，颜色的稳定性。因而完全不用像Lowry法那样费时和严格地控制时间。 （3）干扰物质少。如干扰Lowry法的K+、Na+、Mg2+离子、Tris缓冲液、糖和蔗糖、甘油、巯基乙醇、EDTA等均不干扰此测定法。 此法的缺点是： （1）由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同，因此考马斯亮蓝染色法用于不同蛋白质测定时有较大的偏差，在制作标准曲线时通常选用g—球蛋白为标准蛋白质，以减少这方面的偏差。 （2）仍有一些物质干扰此法的测定，主要的干扰物质有：去污剂、 Triton X-100、十二烷基硫酸钠（SDS）等。 试剂与器材 一、
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德尔塔告诉大家：做好western印迹的关键所在
作者：德尔塔 日期：2022-04-11
western印迹要想做的好，当然每个步骤都不能马虎 一.配胶 这些小孔的孔径随 “双丙烯酰胺～丙烯酰胺” 比率的增加而变小，比率接近 1：20 时孔径达到*小值。SDS聚丙烯酰胺凝胶大多按“双丙烯酰胺～丙烯酰胺”为1：29 配制，试验表明它能分离大小相差只有3% 的蛋白质。 分离胶及浓缩胶均可事先配好(除AP及TEMED外)，过滤后作为储存液避光存放于4℃，可至少存放1个月，临用前取出室温平衡(否则凝胶过程产生的热量会使低温时溶解于储存液中的气体析出而导致气泡，有条件者可真空抽吸3分钟)，加入10%AP(0.7~0.8:100, 分离胶浓度越高AP浓度越低，15%的分离胶可用到0.5:100)及TEMED(分离胶用0.4:1000, 15%的可用到0.3:1000，浓缩胶用0.8：1000) page配胶的试剂和配方比例对电泳结果的质量当然有决定性的影响，这个配胶的比例，在《分子克隆》上有详细的论述，相信大家都不难查到。容易忽视的问题主要在于过硫酸铵(AP)一定要新鲜——用小指管配AP(写日期)保存在-20度，超过2周的AP扔掉算了，或者已经反复打开使用多次的AP都别用， 灌入2/3的分离胶后应立即封胶，胶浓度10%时用水饱和的异丁醇或异戊醇，也可以用0.1%的SDS。封胶后切记，勿动。 如用醇封胶需用大量清水及ddH2O冲洗干净，然后加少量0.1%的SDS，目的是通过降低张力清除残留水滴 10%的AP现配现用，如在4℃存放勿超过两周。30%的丙烯酰胺如有沉淀，弃掉 过硫酸铵(APS)(10%;w) 取3g过硫酸铵，溶于去离子水，至终体积为30mL。此溶液4℃下在短暂的数日内是稳定的，但建议，对每一组新胶均应新鲜配制 但摇动溶液时不要过于剧烈以免引入过多地氧气 二.样品处理 先制备蛋白样品，后灌注压缩胶，压缩胶灌注后应在20~40min内使用。 上样前蛋白样品离心，上样量不宜过多，以免看结果时，每个条带都弯弯地“笑”你贪多嚼不烂哦。其他的操作，按照说明控制电流，不要过多重复使用电泳Buffer(别小气，重复使用会降低缓冲能力的)，好像基本不会出问题了。当预染的Marker告诉你，
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PCR技术原理、实验步骤和应用
作者：德尔塔 日期：2022-04-11
PCR技术原理、实验步骤和应用 一、实验目的 1.掌握聚合酶链式反应的原理。 2. 掌握移液枪和PCR仪的基本操作技术。 二、实验原理 PCR技术，即聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）是由美国PE Cetus公司的Kary Mullis在1983年（1993年获诺贝尔化学奖）建立的。这项技术可在试管内的经数小时反应就将特定的DN段扩增数百万倍，这种迅速获取大量单一核酸片段的技术在分子生物学研究中具有举足轻重的意义，极大地推动了生命科学的研究进展。它不仅是DNA分析*常用的技术，而且在DNA重组与表达、基因结构分析和功能检测中具有重要的应用价值。 PCR可以被认为是与发生在细胞内的DNA复制过程相似的技术，其结果都是以原来的DNA为模板产生新的互补DN段。细胞中DNA的复制是一个非常复杂的过程。参与复制的有多种因素。PCR是在试管中进行的DNA复制反应，基本原理与细胞内DNA复制相似，但反应体系相对较简单。 PCR由变性－－退火－－延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至94℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应做准备； ②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合； ③引物的延伸：DNA模板－－引物结合物在Taq酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链。 重复循环变性－－退火－－延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟， 2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。 三、实验试剂与器材 模板DNA、2.5mmol/L dNTP Taq DNA聚合酶（5U/μL）、SSR引物 10 ×buffer、15mmol/L Mg2+、ddH2O PCR仪、移液枪、PCR板 四、实验步骤 1、配制20μL反应体系，在PCR板中依次加入下列溶液： 模板DNA 2μL 引物1 1μL 引
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维生素B12检测试剂盒研究成果
作者：德尔塔 日期：2022-04-11
维生素B12活性形式称为甲钴胺或甲基维生素B12，通过一个称为基因表达的表观遗传调控的过程控制大脑的正常发育。值得注意的是，健康的老年人大脑中甲基维生素B12的含量比健康的年轻人低10倍以上。大脑中甲基维生素B12低于正常水平可能会影响年轻人的神经发育并可能在以后的生活中破坏学习和记忆能力。在线杂志《PublicLibraryofScienceOne（PLOSOne）》上的一项新的研究发现，上了年纪的人大脑中维生素B12含量大大减少，与同龄人相比，自闭症和精神分裂症患者更少。例如，10岁以下的自闭症儿童比正常同龄人低三倍，相当于正常人50岁时的含量，说明他们大脑中维生素B12过早的减少。 由诺瓦东南大学（NSU）药学院药理学教授RichardDeth领导的研究团队，分析了已故健康捐赠者和患有有自闭症或精神分裂症患者的组织，并进行了比较。 “这些都是非常重要的发现，因为我们发现了大脑中维生素B12含量随年龄的变化，维生素B12通常在血液中检测，而自闭症和精神分裂症患者血液中没有检测到。”Deth博士说，“自闭症和精神分裂症患者大脑中B12的大量缺乏可能有助于解释为什么患有这些疾病的患者会出现这些神经和神经精神症状的异常。” 研究还发现，61-80岁年龄范围的健康老年人大脑中维生素B12含量较年轻的年龄组低三倍，这是正常衰老的结果。这种正常的下降可能有助于调节大脑的新陈代谢，以维持其在生命周期中的作用。 自闭症和精神分裂症都与氧化应激有关，都在成长过程中有重要作用，氧化应激可能是研究中观察到大脑维生素B12含量降低的基础。研究结果表明，还需要更进一步的研究来确定是否维生素B12补充剂和抗氧化剂如谷胱甘肽的使用可能有助于防止氧化应激和**这些疾病。 原创作者：德尔塔
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德尔塔：Western实验参考步骤
作者：德尔塔 日期：2022-04-11
德尔塔提供：Western实验代测，WB实验代测！ Western可以参考如下步骤进行操作。 1.收集蛋白样品(Protein sample preparation) 可以使用适当的裂解液，例如碧云天生产的Western及IP细胞裂解液，裂解贴壁细胞、悬浮细胞或组织样品。对于某些特定的亚细胞组份蛋白，例如细胞核蛋白、细胞浆蛋白、线粒体蛋白等，可以参考相关文献提取这些亚细胞组份蛋白，也可以使用试剂盒进行抽提，例如碧云天生产的细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒。收集完蛋白样品后，为确保每个蛋白样品的上样量一致，需要测定每个蛋白样品的蛋白浓度。根据所使用的裂解液的不同，需要采用适当的蛋白浓度测定方法。因为不同的蛋白浓度测定方法对于一些去垢剂和还原剂等的兼容性差别很大。如果使用碧云天生产的Western及IP细胞裂解液，可以使用BCA蛋白浓度测定试剂盒。 2. 电泳(Electrophoresis) (1) SDS-PAGE凝胶配制 SDS-PAGE凝胶可以参考一些文献资料进行配制，也可以使用碧云天生产的SDS-PAGE凝胶配制试剂盒。该试剂盒提供了除水和配胶器具外的所有试剂以及配制各种浓度SDS-PAGE的配方。 (2) 样品处理 在收集的蛋白样品中加入适量浓缩的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。例如2X或5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。使用5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液可以减小上样体积，在相同体积的上样孔内可以上样更多的蛋白样品。5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液可以参考相关文献资料配制，也可以使用碧云天生产的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)。 100℃或沸水浴加热3-5分钟，以充分变性蛋白. (3) 上样与电泳 冷却到室温后，把蛋白样品直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。为了便于观察电泳效果和转膜效果，以及判断蛋白分子量大小，使用预染蛋白质分子量标准。 电泳时通常推荐在上层胶时使用低电压恒压电泳，而在溴酚蓝进入下层胶时使用高电压恒压电泳。对于Bio-Rad的标准电泳装置或类似电泳装置，低电压可以设置在80-100V，高电压可以设置在120V左右。SDS-PAGE可以采用普通
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西安德尔塔技术讲座之IgA的分析和提纯
作者：德尔塔 日期：2022-04-11
（一）材料与试剂配制 1．DEAE52纤维素 2．0.10Mol/L ZnSO4液 ZnSO4·7H2O 2.88g 加水至1 000.00ml 3．饱和硫酸铵溶液 4．10％EDTA—Na 5．SephadexG200 6．0.01Mol/L pH7.4PBS液 7．0.10Mol/L pH6.4PBS液 8．血清 （二）操作方法 1．取血清加等量的0.1Mol/L ZnSO4液，调pH至7.0，室温搅拌1h，离心去沉淀。 2．于上清液中加入等量的饱和硫酸铵溶液，混匀后静置30min或冰箱过夜。 3．10 000r/min离心10min，去上清。 4．取沉淀溶于4ml10％EDTA－Na溶液中。 5．生理盐水中透析除盐。 6．过DE52柱，用0.01Mol/L pH7.4PB液洗脱蛋白（IgG）弃去。 7．换用0.1Mol/L pH6.4PB液洗脱，收集蛋白峰，即为IgA。 8．再过SephadexG200柱，洗液为0.01Mol/L pH7.4PBS（0.14Mol/L NaCl），收集洗脱液测OD280值，取峰即为纯化IgA。 9．透析、浓缩、鉴定 原创作者：德尔塔
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热烈祝贺第二军医大学：发表肝癌研究新成果
作者：德尔塔 日期：2022-04-11
热烈祝贺第二军医大学：发表肝癌研究新成果！二医大是我司老客户，经常购买我司elisa试剂盒，生化试剂，放免试剂盒等，对于二医大的老师和同学取得的成绩，我们表示衷心的祝贺！来自第二军医大学的研究人员在新研究中证实，细胞内骨桥蛋白(Osteopontin，OPN)通过抑制Toll样受体(Toll-like receptor，TLR)信号传导，阻碍了肝癌发生。这一研究发现发表在近期的《癌症研究》(Cancer Research)杂志上。 第二军医大学肿瘤研究所所长、国家973计划首席科学家郭亚军(Yajun Guo)教授及第二军医大学的赵健(Jian Zhao)副研究员是这篇论文的共同通讯作者。郭亚军教授的主要研究方向为抗体制药工程，包括新靶点发现、抗体人源化和新型全人源抗体、细胞工程等。在包括science、Nature Medicine等学术期刊上发表百余篇论文。赵健博士的研究方向则是肿瘤病因学和肿瘤生物**。 肝癌是世界范围内发病率的恶性肿瘤，也是我国*常见且恶性程度的肿瘤。目前手术切除仍是**肝癌的方法。然而根治性切除后患者的5年复发率高、转移率高，成为了肝癌临床**的难题。因此，从分子水平研究肝癌的发生机制，并针对此寻找有效的早期诊断及**措施成为当前研究中的重点和难点。 OPN是一种分泌型糖蛋白，在机体发育或某些病理过程中可由多种细胞合成和分泌，细胞内外均可存在，既是一种细胞外基质蛋白，又是一种多功能细胞因子，广泛分布于多种组织和细胞。在骨矿化、骨的吸收与形成、细胞趋化、黏附和迁移、免疫调节、信号传导、抑制细胞凋亡等过程中发挥重要作用。近年来许多研究表明，OPN是一种与多种肿瘤细胞生长、增殖、浸润、转移和预后密切相关的生物学因子，是一种新的肿瘤标志物，也可以作为一个抗癌**的候选靶点。 在这篇新文章中，研究人员证实在小鼠中遗传敲除Opn可使得它们对二甲基亚硝胺(DEN)诱导的肝癌形成变得敏感。Opn缺陷小鼠(Opn小鼠)显示促炎细胞因子生成增加及代偿性的增生。他们发现给予野生型小鼠来源的巨噬细胞OPN抗体，或是向Opn小
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祝贺北大魏文胜课题组在国际著名学术期刊《FEBS Journal》发表综述文章
作者：德尔塔 日期：2022-04-11
热烈祝贺北大魏文胜课题组在著名学术期刊《FEBS Journal》发表综述文章！探索基因及其表达的蛋白在特定生理、病理、发育等过程中所起的作用一直是生命科学领域研究的重要内容。尽管利用RNA干扰鉴定高等生物基因功能的技术已经普及，但是这种方法经常伴随脱靶现象;而且由于只能部分抑制基因表达，往往不足以造成表型变化从而影响对其基因型的判断。近几年基因编辑技术的出现，使得对单一基因进行修饰的遗传手段得到迅速发展，然而在哺乳细胞内基于基因完全敲除进行大规模功能性筛选的方法依然空缺。生命科学学院魏文胜课题组为此开发了一种基于CRISPR/Cas9系统的慢病毒聚焦型人源细胞文库、功能性基因筛选平台以及基于高通量深度测序技术解析数据的完整技术路线。利用这一高效的新型遗传筛选技术，成功鉴定出对两种细菌毒素侵染宿主所必需的宿主受体、以及多种新型蛋白位点。这一强大的高通量基因筛选技术的建立不仅能够帮助人们研究与病菌侵染相关的宿主蛋白及通路，还可以惠及众多生物医学相关领域的研究。这一重要研究结果发表在2014年4月9日的《自然》(Nature)杂志。随后，魏文胜课题组又与华南理工大学、美国马里兰大学的研究人员合作，利用相关技术，首次确定了艰难梭菌关键毒力因子TcdB的细胞受体——CSPG4，通过TALEN-和CRISPR/Cas9介导的基因敲除，证实了它在人类细胞中的作用，为艰难梭菌感染的**提供了一个新的**靶点。相关新闻：北大魏文胜Cell Res解析艰难梭菌毒素侵染机制。近日，魏文胜课题组在著名学术期刊《FEBS Journal》发表题为“High-throughput Screens in Mammalian Cells Using the CRISPR-Cas9 System”的综述文章。在这篇综述中，作者指出，作为一种强大的基因组编辑工具，CRISPR-Cas9系统已经迅速发展成为大型的、基于功能的哺乳动物细胞筛选策略。这种新型基因文库是通过单导向RNA(sgRNA)集合的慢病毒传递而构建，指挥Cas9或者抑制dCas9与效应物融合，来研究基因的功能或调节靶细胞的基因转录。与
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elisa试剂盒化学催化剂知识介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-11
无机分析试剂 无机分析试剂（Inorganic analytical reagent）是用于化学分析的常用的无机化学物品。其纯度比工业品高，杂质少。 有机分析试剂 有机分析试剂（Organic reagents for inorganic analysis）是在无机物分析中供元素的测定、分离、富集用的沉淀剂、萃取剂、螯合剂以及指示剂等专用的有机化合物，而不是指一般的溶剂、有机酸和有机碱等。这些有机试剂必须要具有较好的灵敏度和选择性。随着分析化学和化学工业的发展，将会研制出灵敏度和选择性更好的这类试剂，如1967年以来出现的对一些金属（如碱金属、碱土金属）及铵离子具有络合能力的冠醚（Crown ether）类化合物就是这样。 基准试剂 基准试剂（Primary standards）是纯度高、杂质少、稳定性好、化学组分恒定的化合物。在基准试剂中有容量分析、pH测定、热值测定等等分类。每一分类中均有基准和工作基准之分。凡基准都必须由国家计量科学院检定，生产单位则利用基准作为工作基准产品的测定标准。目前，商业经营的基准试剂主要是指容量分析类中的容量分析工作基准[含量范围为99.95%~100.05%（重量滴定）]。一般用于标定滴定液。 标准物质 标准物质（Standard substance）是用于化学分析、仪器分析中作对比的化学物品，或是用于校准仪器的化学品。其化学组分、含量、理化性质及所含杂质必须已知，并符合规定或得公认。微量分析试剂微量分析试剂（Micro-analytical reagent）适用于被测定物质的许可量仅为常量百分（重量约为1~15毫克，体积约为0.01~2毫升）的微量分析用的试剂。 有机分析标准品 有机分析标准品（Organic analytical standards）是测定有机化合物的组分和结构时用作对比的化学试剂。其组分必须精确已知。也可用于微量分析。 农药分析标准品 农药分析标准品（Pesticide analytical standards）适用于气相色谱法分析农药或测定农药残留量时作对比物品。其含量要求精确。有由微量单一农药配制的溶液，也有多种农药配制的混合溶液。
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德尔塔为大家分享：细胞转染后怎么选择抗生素
作者：德尔塔 日期：2022-04-11
德尔塔为大家分享：细胞转染后怎么选择抗生素 细胞转染后建立稳转细胞系大多用G418来杀，可是这种抗生素的选择是根据什么来确定的呢?还可以用其他的抗生素吗? 如果一个载体上有两个抗生素基因，氨苄青霉素和新霉素，那么建立稳转细胞系时该用哪种抗生素来杀细胞呢?刚结束这方面的知识，不甚了解，恳请高手指点迷津!非常感谢! alfredyu2004认为： 虽然我也是不是太清楚，但是应该看转染是细菌还是细胞 氨苄青霉素是来选细菌的，大肠杆菌。 新霉素是选细胞的，哺乳动物细胞。 wangbadan认为： 标有neo（实际上应该是neo resistance）的载体，指载有降解新霉素的基因，新霉素作用于原核和真核细胞，对两者都有杀伤作用。用于转染后，稳定表达外源基因细胞的阳性筛选。 标有amp（实际上应该是amp resistance）的载体，指载有降解氨苄青霉素的基因（β-内酰胺酶），作用于原核细胞，只对敏感菌有作用。用于克隆菌的筛选。 除此之外，用于克隆菌的筛选的还可能有氯霉素（标有Cm），卡那霉素（标有kana）; 用于阳性细胞筛选的还可能有潮霉素（标有Hyg），等等。。。 所以不管是做细菌克隆，还是其后的做细胞表达都要根据载体的说明选择相应抗生素，不是可以随便用的。 做细胞表达时，如果只是要求短时表达（即所谓瞬时转染），可不必用细胞抗生素。 mikke_2000认为： 应该是质粒转染细胞，筛选出稳定表达新基因的细胞系吧。筛选所选用的抗生素是跟你转染所用的质粒上所带的真核筛选抗性基因有关的。*常见的载体上带有新霉素抗性基因neo，所以筛选的时候用G418，如果带有嘌呤霉素的抗性基因就要选用puro。另外如果双转染，要考虑到两种质粒的筛选抗性的兼容。G418等的筛选浓度也用预试验摸一下~ Elisa试剂盒,elisa kit,西安elisa实验代测,SOD试剂盒,IgG试剂盒,IgM试剂盒,WB实验代做,免疫组化实验代做,放免实验代测,GIBCO,AMRESCO-德尔塔 原创作者：德尔塔
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免疫组化各步骤中应注意事项知多少-德尔塔
作者：德尔塔 日期：2022-04-11
免疫组化各步骤中应注意事项知多少-德尔塔 1．固定：用4%的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片，甲醛固定有时比冰冻丙酮好；但对于不同的组织和抗原，可选用不同的固定液。 有时候商品化的抗体会有比较适合而推荐的固定液，请于购置前注意说明书。 Bouin S固定液：饱和苦味酸750ml，甲醛250ml，冰醋酸50ml，其对组织的穿透力较强，固定较好，结构完整，但因偏酸，对抗原有一定损害，且组织收缩明显，不适于组织标本的长期保存。 PLP液：即高碘酸钠-赖氨酸-多聚甲醛，适于固定石蜡切片。适于富含糖类组织，对超微结构及许多抗原的抗原性保存较好。 2．组织脱水，透明：时间不能太长，否则在切片时容易碎片，切不完整。 3．切片时展片：有些组织在切片后难以在水中展开，这时可适当地在水中加入几滴乙醇。 4．烤片：60℃ 30分钟或37℃ 过夜，温度太高或时间太长，抗原容易丢失。 5．蜡块及切片的保存：在4℃保存 6．脱片问题： Poly-L-Lysine（多聚赖氨酸）为目前免疫组化染色工作中*常用的一种防脱片剂，6ml的多聚赖氨酸溶液可按1:10稀释成60ml的工作液，适合于需要酶消化、微波、高温高压的防脱片处理。如不行，可用双重处理（APES和Poly-L-Lysine）的切片。在以上两种条件都行不通的情况下，可用如下方法：切片在脱蜡前，放在APES 1：50 丙酮溶液中浸泡3分钟，晾干，即可进行下一步。 7．灭活内源性酶：HRP系统：3%双氧水灭活；AP系统：3%HAc灭活。 8．暴露抗原：对于石蜡切片的免疫组化实验时，必须采用高温加热抗原修复，这将有助于暴露抗原决定簇，从而增加免疫组化染色的强度（不同抗体的*佳修复液请参阅抗体说明书）。对于不同的组织，不同的抗原，不同的抗体，所采用的方法应不一样，可进行热修复、胰酶消化、既不修复也不消化。胶原还可以用胃蛋白酶消化等。 9．封闭：在山羊血清封闭，非特异性染色仍然较强时，可延长封闭时间或用浓缩血清封闭 10．抗体稀释：应遵循“现用现配”的原则，对于PBS稀释
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Proclin 300-液体生物防腐剂的优点和原理-西安德尔塔
作者：德尔塔 日期：2022-04-11
Proclin 300-液体生物防腐剂现的优点和原理 液体生物防腐剂,Proclin 300 用途：生化研究 保存：RT 产品来源：国内外生化试剂供应商，产品100%有保障 液体生物防腐剂,Proclin 300包装规格：50ml，100m。 我们用优质的服务赢得广大客户的认可和支持，我们长期供货的客户有：复旦大学、大连大学、湖北鄂州市中心医院、西南大学、浙江精慧尔生物科技有限公司、中南民族大学、郑州宏润堂公司、天津科技大学、西安交通大学、杭州师范大学、广西医科大学、江南大学、河北科技师范学院、东北大学、浙江工业大学等科研单位。 液体生物防腐剂,Proclin 300储存条件：避光、干燥阴凉处封闭贮存，严禁与有毒、有害物品混放、混运。本品为非危险品，可按一般化学品运输，轻搬动轻放，防止日晒、雨淋。 一、ProClin 系列防腐剂的优点 广谱抗菌性，作用速度快；良好的与酶的相容性，不会影响与酶或抗体的相关反应。 使用剂量少，6-20ppm的ProClin300即可达到抑菌的目的。 pH适用范围广（pH2-8.5*）,化学稳定性好。经实验室检测，在25度下保存2年，该防腐剂的活性组分仅损失3%。 毒性远低于同类产品硫柳汞。 与水可以任意比混合。 二、ProClin 系列防腐剂作用原理 ProClin 系列防腐剂的活性成分主要是2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮（MCI）和5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮（CMCI）。这两种成分抑制细胞的生长以及促使细胞凋亡的原理相同。活性成分在与细胞膜接触几分钟后，立即可以渗透到膜内并抑制细胞内酶的活性。目标酶处于细胞代谢KREBS循环的中心位置，ProClin 系列防腐剂作用KREBS循环的四个不同位置：丙酮酸脱氢酶（pyruvate dehydrogenase），a -酮戊二酸脱氢酶（ketoglutarate dehydrogenase），琥珀酸脱氢酶（succinate dehydrogenase）和NADH脱氢酶（NADH dehydrogenase）。从而抑制细胞生长代谢，大分子的合成，引起细胞内能量水平迅速下降。由于能量体系的崩溃，细胞不能合成日常代谢所需要的化合物。所有的细菌及真菌至少
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