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人PDGF-AA ELISA试剂盒报道:长寿的好基因源于什么

人PDGF-AA ELISA试剂盒报道:长寿的好基因源于什么

作者:德尔塔 日期:2022-04-11

德尔塔代理销售人PDGF-AA elisa试剂盒,现货供应,欢迎联系! 全程提供技术指导,提供售后服务,欢迎联系 根据四川省老龄办的数据,截至2014年,全省100岁以上的老人有4942人,比前一年又增加了224人,位于全国前列。四川哪里的百岁老人*多?2014年,成都再次位居榜首。4942名百岁老人中,806人都生活在成都,占比达到16.30%,与2013年的16.27%相比有所增加。四川*长寿老人付素清就在成都天府新区太平街道。7月15日,华西都市报记者再次来到付素清家中,118岁的她,依旧行动自如,一日三顿必吃回锅肉的习惯依旧。   为何这位老人如此长寿?此前,四川省保健科技学会基因与健康专业委员会主任姜俊成和团队专门驱车,从市区来到这个农家小院,对其进行基因检测,了解她的生活习惯,希望从中破译老人的长寿密码。   用一把小刷子,在老人两腮处轻轻刮20下,将其口腔黏膜放进透明的液体中。“这是稳定液,可以用于保存基因样本。”姜俊成说。人体细胞的DNA都是一样的,为何选择口腔黏膜?姜俊成介绍,因为这里的脱落细胞比较多,这样搜集的基因样本也更多一些。采集好的样本,“打飞的”到了西安的专业机构进行基因检测。   吃回锅肉就能长寿?   首先得脂质代谢能力好。付素清的女儿徐淑华说,母亲不太喜欢吃别的菜,但每天三顿必吃回锅肉,而且主要是肥肉。这难道就是老人的长寿秘诀?一些无肉不欢但又担心“三高”的人找到了“破戒”的*佳理由:“四川*长寿的老人都这样吃,我们还怕啥子!”姜俊成却要告诉你,首先,你得有和付素清老人一样好的脂质代谢能力。   基因检测结果显示,付素清的脂质代谢能力比较好。“从她每天吃回锅肉的量来看,完全可以将摄入的脂肪代谢掉,不易引起血脂水平过高。”姜俊成说,然而,超过一半的中国人,脂质代谢能力都不如付素清,“如果像她这样顿顿吃,很多人血脂可能就会升高。时间长了,心脑血管病就难以避免,想长寿就是空想了。”   付素清的长寿秘诀,并不在于吃肉。除了有帮助分解脂肪的好基

P选择素(P-Selectin)ELISA试剂盒:实验室安全知识

P选择素(P-Selectin)ELISA试剂盒:实验室安全知识

作者:德尔塔 日期:2022-04-11

德尔塔代理销售:elisa试剂盒,生化法试剂盒,放免试剂盒,P选择素(P-Selectin)ELISA试剂盒,现货供应,欢迎来电咨询。 (一)实验室安全知识 在实验室中,经常与毒性很强、有腐蚀性、易燃烧和具有爆炸性的化学药品直接接触,常常使用易碎的玻璃和瓷质器皿以及在煤气、水、电等高温电热设备的环境下进行着紧张而细致的工作,因此,必须十分重视安全工作。 1.进入实验室开始工作前应了解煤气总阀门、水阀门及电闸所在处。离开实验室时,一定要将室内检查一遍,应将水、电、煤气的开关关好,门窗锁好。 2、使用煤气灯时,应先将火柴点燃,一手执火柴紧靠近灯口,一手慢开煤气门。不能先开煤气门,后燃火柴。灯焰大小和火力强弱,应根据实验的需要来调节。用火时,应做到火着人在,人走火灭。 3.使用电器设备(如烘箱、恒温水浴、离心机、电炉等)时,严防触电;绝不可用湿手或在眼睛旁视时开关电闸和电器开关。应该用试电笔检查电器设备是否漏电,凡是漏电的仪器,一律不能使用。 4.使用浓酸、浓碱,必须极为小心地操作,防止溅出。用移液管量取这些试剂时,必须使用橡皮球,绝对不能用口吸取。若不慎溅在实验台上或地面,必须及时用湿抹布擦洗干净。如果触及皮肤应立即**。 5.使用可燃物,特别是易燃物(如、丙酮、乙醇、苯、金属钠等)时,应特别小心。不要大量放在桌上,更不要在靠近火焰处。只有在远离火源时,或将火焰熄灭后,才可大量倾倒易燃液体。低沸点的有机溶剂不准在火上直接加热,只能在水浴上利用回流冷凝管加热或蒸馏。 6.如果不慎倾出了相当量的易燃液体,则应按下法处理: (1)立即关闭室内所有的火源和电加热器。 (2)关门,开启小窗及窗户。 (3)用毛巾或抹布擦拭洒出的液体,并将液体拧到大的容器中,然后再倒入带塞的玻璃瓶中。 7.用油浴操作时,应小心加热,不断用温度计测量,不要使温度超过油的燃烧温度。 8.易燃和易爆炸物质的残渣(如金属钠、白磷、火柴头)不得倒入污物桶或水槽

大鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒:ELISA试剂盒代测的优点

大鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒:ELISA试剂盒代测的优点

作者:德尔塔 日期:2022-04-11

大鼠前列腺素E2(PGE2)elisa试剂盒:免费代测之代测的优点 德尔塔代理销售“ 大鼠前列腺素E2(PGE2)elisa试剂盒”,现货供应,可提供免费代测服务,一般待测时间为5到7天,提供原始数据,分析数据,实验室仪器型号,实验报告等,欢迎来电咨询。 代测的优点: 1、采用优质材料生产的试剂盒,高效、灵敏、特异性好; 2、稳定的重复性和可靠性; 3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体; 4、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型; 5、限度的节省实验经费 。 大鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒 ELISA测定 1.酶联免疫斑点(ELISPOT) 检测试剂盒是基于定量夹心ELISA法原理,将刺激后的细胞滴加到包被在贴PVDF微孔中,放置于37℃孵育。在孵育的过程中,细胞分泌的细胞因子即会被包被的抗体所捕获,以下的过程与一般的ELISA实验相同,*后用不溶性的酶联底物进行显色,每一个显色点(斑点)既代表一个分泌细胞因子的细胞。通过专用的ELISPOT分析仪或在显微镜下进行计数,就可以进行分析。ELISPOT法用于检测单个细胞分泌的细胞因子,综合了普通ELISA方法的高特异性和准确定量的优点,而且具有生物活性分析得出与功能相关的结果的优点。 2.双抗夹心ELISA法 双抗体夹心法需制备针对细胞因子不同位点的两个单克隆抗体,一个抗体作为固相抗体用于包被,另一个作为标记抗体。可采用常规双抗夹心法,也可采用一步法。由于血清中细胞因子的含量很低。常规ELISA法不能满足要求,需引入生物素-亲合素系统来提高灵敏度,即加入样品后加入生物素标记。 大鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒 原创作者:德尔塔

人二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒:应该选取什么样本检测比较好

人二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒:应该选取什么样本检测比较好

作者:德尔塔 日期:2022-04-11

西安德尔塔代理销售人二胺氧化酶(DAO)elisa试剂盒,二胺氧化酶主要存在于动物组织(肠粘膜、肺、肝脏、肾脏等),所以在实验收集样本的时候,这些组织是首先。下面我们就二胺氧化酶,做一个详细的介绍。二胺氧化酶(DAO)分布广泛存在于动物组织(肠粘膜、肺、肝脏、肾脏等)、植物组织和微生物中。动物组织中的酶与单胺氧化酶不同,是水溶性的,存在于匀浆的上清液中,在相当精制的肾脏的酶中,含有辅酶磷酸吡哆醛。还可能有FAD或铜。米氏常数虽大,但也能氧化单胺。 二胺氧化酶(DAO)抑制酶活性可受,羟胺、氨基脲等羰基试剂的抑制。 二胺氧化酶(DAO)总结该酶除能分解组胺外,在肠粘膜中还能分解由氨基酸脱羧所生成的胺,起着解毒作用。由反刍动物血浆中的酶巳获得了它的结晶,它能很好地氧化苄胺、精胺,其分子量为25万,含铜和磷酸吡哆醛。植物的酶也能很好地氧化单胺,含铜,呈粉红色。微生物的酶对基质也有很高的特异性,可诱导形成。西安德尔塔提供人二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒,现货供应,全程提供技术指导,提供售后服务和免费代测服务,欢迎来电咨询。 原创作者:德尔塔

WB实验代测之:如何寄送样本

WB实验代测之:如何寄送样本

作者:德尔塔 日期:2022-04-11

德尔塔提供WB实验代测服务,客户只需要提供样本,其余所有试剂均由我司提供。样本用泡沫箱子放干冰加上冰袋运输,代测时间为10-15个工作日。提供原始数据,分析数据,实验报告,实验室所用仪器型号,图片等。欢迎来电咨询。免疫印迹(immunoblotting)又称蛋白质印迹(Westernblotting),它是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹具有SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性,现已成为蛋白分析的一种常规技术。免疫印迹常用于鉴定某种蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析。凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA 结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术*初用于研究DNA 结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA 序列的相互作用。 Western blot 检测  1200元/膜 每张膜1--8样本,一抗另计 EMSA    2800元/膜  每张膜1--8样本,包括探针及试剂 西安德尔塔代做实验项目:ELISA,免疫组化,免疫印迹Western Blot,放射免疫,实时荧光定量PCR,特殊染色,病理学检测技术服务等等!我们拥有的实验室,客户检测项目均提供实验室仪器型号,提供操作详细步骤.欢迎联系!021-60528782Western Blot实验成功完成Western Blot检测,必须满足4个条件:凝胶洗脱:转移期间蛋白质必须从凝胶中洗脱出来,如果蛋白质还截留在凝胶中,将无法在膜上进行分析吸附到膜上:在转移过程中蛋白质必须吸附到膜上,如果蛋白不吸附,将无法在膜上进行分析处理期间仍截留在膜上:在转移后的处理过程中蛋白质必须保持吸附在印迹膜上处理过程中可接近:被吸附的蛋白质必须能够与检测试剂接触,如果蛋白质被掩盖则无法检测

WB实验操作的时候内参的选择应该注意些什么

WB实验操作的时候内参的选择应该注意些什么

作者:德尔塔 日期:2022-04-11

德尔塔提供WB实验代测服务,WB实验,Western Blot技术服务,免疫印迹技术服务。1200元一张膜,包括一抗,二抗等所有试剂,客户仅需自己提供抗体即可,欢迎大家来电咨询。 内参抗体种类很多,比如β-actin、β-tubunlin、GAPDH、Lamin B等,那么针对自己的实验,我们该如何选择呢?下面简单介绍下选择内参抗体应遵循的原则:   一.样本种属来源:   首先要考虑的就是实验样本来源于什么物种。   1、哺乳动物的组织或者细胞样本,通常选择β-actin、β-tubulin、GAPDH、Lamin B、Histone H3、Na,K atpase等。   2、植物来源实验样本,则可以选择plant actin、Rubisco等。   3、其他来源样本研究较少,所以就应该参照文献报导,选择合适的蛋白作为内参。   二.目的蛋白分子量:   选择内参抗体时,应该考虑目的蛋白分子量的大小。通常应该保证目的蛋白与内参蛋白分子量相差5KD以上。比如目的蛋白分子量为45KD,此时不适宜选择β-actin作为内参,可以考虑选择GAPDH或者β-tubulin作为内参。   三.目的蛋白表达部位:   就一般的蛋白检测来说,β-actin、β-Tubulin抗体等就可以了,而针对于核蛋白的定量,特别是样本蛋白就是核蛋白时,选择恰当的核蛋白内参则更能体现内部参照的价值。常用的核内参抗体有Lamin A、Lamin B、Histone H3,除此之外,其它常见的核蛋白内参还有PCNA、K70、K80等,在一些文献报道中,Erk2、TATA binding protein(TBP)以及c-Jun、c-Fos等都有使用。而对于膜蛋白检测,常用的内参抗体为Na,K ATPase。对于线粒体蛋白的检测,常用VDAC1和COX IV作为内参抗体。   以上几条原则只是针对通常情况,但是需要注意的问题是——内参的选择需要考虑实际的试验环境,比如某些细胞中,由于组织缺氧、糖尿病等因素会导致GAPDH的表达增高,不适合做内参。比如在涉及细胞增殖相关试验中,c-Jun由于自身表达变化就不适合做内参;而在凋亡实验时,TBP、Lamin等也不适合作为内参。因此设计实验方案的时候应该考虑这些因素并查询相

205年诺贝尔化学奖究竟花落谁家

205年诺贝尔化学奖究竟花落谁家

作者:德尔塔 日期:2022-04-11

北京时间10月7日下午5点45分,2015年诺贝尔化学奖揭晓,瑞典、美国、土耳其三位科学家Tomas Lindahl、Paul Modrich和Aziz Sancar获奖。获奖理由是“DNA修复的机制研究”。   Tomas Lindahl,瑞典公民,1938年1月28日出生于瑞典斯德哥尔摩,1967年获得博士学位。目前任职于英国弗朗西斯-克里克研究所。   Paul Modrich,美国公民,1973年从美国斯坦福大学获得博士学位。目前为美国杜克大学教授及美国霍华德-休斯医学研究所研究人员。   Aziz Sancar,土耳其公民,1946年出生于土耳其萨乌尔。目前为美国北卡罗来纳大学医学院教授。   DNA修复的细胞工具箱   2015年的诺贝尔化学奖授予Tomas Lindahl, Paul Modrich和Aziz Sancar三位科学家,因为他们从分子水平上揭示了细胞是如何修复损伤的DNA以及保护遗传信息的。他们的研究工作为我们了解活体细胞是如何工作提供了*基本的认识,并有助于很多实际应用比如新癌症疗法的开发。   每一天,我们的DNA都会在紫外辐射、自由基和其他致癌物质的作用下发生损伤,但即使没有这些外部伤害,DNA分子也天生就不是个安分的家伙——细胞的基因组中天天都要发生数千次的自发变化。而且,每当细胞产生分裂、DNA发生复制时,缺陷都会产生,这样的事情每天都在人体中重演上百万次。   而我们身体内的各种遗传物质并不会瓦解、演变成为一场化学混乱的原因则在于,一系列的分子机制持续监视并修复着DNA。2015年的诺贝尔化学奖授予给了这三位先驱科学家,表彰他们为从分子水平上详细揭示若干个此类修复是如何运行的原理而做出的贡献。   在20世纪70年代早期,科学家们认为DNA是一种非常稳定的分子,但Tomas Lindahl却发现,DNA会以一定的速率发生衰变——按此速率,地球上的生物甚至都不该存在并发展下来的。这让他揭示了一种分子机制——碱基切除修复——该机制不断地抵消了DNA的崩溃。   Aziz Sancar绘制出了核苷酸切除修复机制,细胞利用切除修复机制来修复UV造成的DNA损伤。天生缺失

导致遗忘的机制具体是什么,西安德尔塔为大家揭秘

导致遗忘的机制具体是什么,西安德尔塔为大家揭秘

作者:德尔塔 日期:2022-04-11

根据2012年5月10日发表在《神经元》(neuron.2012May10.)杂志上的一项研究报道,来自佛罗里达的科学家们已经准确的描述了形成记忆及清除记忆的重要机制。   人们通常认为记忆*重要的一点是维持自我认知,但通常很少关注遗忘的过程,不管是那些恐怖的经历还是日常琐事。尽管遗忘时刻都在发生,但是人们对于遗忘过程中的分子、细胞学以及内在的大脑遗忘机制仍然是知之甚少。   “这项研究着重关注遗忘过程中的分子生物学特征”,领导该项目的负责人Ron Davis告诉记者,“直到现在,人们认为遗忘是个被动的过程,我们的研究清楚的证实了遗忘是一个规律的主动过程。”   为了更好的理解遗忘的机制,Davis以及他的同事们以果蝇(DrosoPHila)为动物模型,其作为研究对象记忆方式与人类颇为类似。通过实验使这些果蝇对某种特定气味与正面刺激(如食物)或消极刺激(如电击)相结合。随后科学家观察果蝇对于记忆或者遗忘新信息的脑部变化。   结果显示,一小部分多巴胺神经元通过位于脑中的一对多巴胺受体主动调节记忆的获取和学习后的记忆遗忘。多巴胺作为一种神经递质在多种神经过程中扮演重要角色,例如奖惩机制,记忆,学习与认知。   但是多巴胺作为一种神经递质是如何起到完全相反的记忆与遗忘两个作用的?以及这一对多巴胺受体是如何一方面获得记忆同时负责遗忘?   这项研究表明,当新的记忆*初形成时,同时存在一种主动的多巴胺为基础的遗忘机制,除非有一些重要物质的附着,否则这些多巴胺神经元保持清除这些记忆。这个附着的过程被理解为记忆的强化。   这项研究显示,位于脑中的特殊神经元释放多巴胺于两个不同的受体,dDA1和DAMB,这部分神经元对于人类记忆与学习至关重要。这项研究发现dDA1受体主要负责记忆的获取,而DAMB负责遗忘。   当多巴胺神经元开始信号传导的过程,dDA1受体开始激动并且开始形成新的记忆,这也是记忆获取的*重要的部分。一旦记忆获取,同样还是这些多巴胺受体持续产

过碘酸-雪夫(PAS)染色试剂盒实验原理和实验方法

过碘酸-雪夫(PAS)染色试剂盒实验原理和实验方法

作者:德尔塔 日期:2022-04-11

德尔塔代理销售过碘酸-雪夫(PAS)染色试剂盒,现货供应,欢迎联系! 实验原理   胞浆内存在糖原或多糖类物质(如粘多糖、粘蛋白、糖蛋白、糖脂等)中的乙二醇基(CHOH-CHOH)经过碘酸(periodicacid)氧 化,转变为二醛基(CHO-CHO),与雪夫(Schiff)试剂中的无色品红结合,形成紫红色染料而沉积于细胞内多糖所在处。该反应称为过碘酸-雪夫 (PAS)阳性反应,以前也称为糖原染色。 实验方法   材料:   1.高碘酸氧化液:   HIO4·2H2O1g,   蒸馏水加至100ml。   此液溶解后保存于冰箱中待用。   2.Schiff试剂:   将1g碱性品红溶于200ml煮沸的蒸馏水中。摇荡5分钟,冷却至600C左右,过滤,并向滤液中入1mol/LHCl20ml,混匀。冷至 250C时,加2g偏重亚硫酸钠(或钾)(Na2S2O5)。将此液置带塞的棕色玻璃瓶中,放暗处24小时。加1g活性碳,摇动1分钟,滤纸过滤。保存于 冰箱中。   3.亚硫酸液   100g/L偏重亚硫酸钠6ml   1mol/L盐酸5ml   蒸馏水100ml   每次用前新鲜配置。   4.20g/L甲绿   甲绿2g   蒸馏水加至100ml   5.淀粉酶嚼石蜡刺激分泌唾液离心取上清液,内含淀粉酶,将麦芽糖淀粉酶0.1~1.0g溶于0.02mol/L磷酸盐缓冲液(pH6.0)100ml中。   方法:   1.固定新鲜干燥的涂片用品5%乙醇固定10min,蒸馏水冲洗,待干;   2.如涂片需要消化,可加唾液或麦芽糖淀酶,置室温消化60min,然后用蒸馏水冲洗;   3.10g/L高碘酸氧化15~20min,蒸馏水冲洗,待干;   4.置雪夫染液中室温染色30~60min;   5.用亚硫酸溶液冲洗3次后,再用自来水冲洗2~3min,待干;   6.20g/L甲绿复染10~20min;   7.水洗,待干,镜检。 实验结果计算   (1)中性粒细胞糖原含量参考标准:   (-)胞质无颗粒   (+)胞质呈淡红色,无颗粒   (++)胞质呈红色,有少量颗粒   (+++)胞质呈暗红色,颗粒较密   (++++)胞质呈紫红色,颗粒极密   (2)淋巴细胞系: 过碘酸-雪夫(

植物DNA提取试剂盒适合检测哪些植物

植物DNA提取试剂盒适合检测哪些植物

作者:德尔塔 日期:2022-04-11

德尔塔代理销售植物DNA提取试剂盒,欢迎来电咨询! 从植物细胞、组织或真菌细胞样本中分离总DNA,产量可达30 µg 1.高纯度DNA,无污染物和酶抑制剂 2.快速纯化得到即用型DNA 3.无需有机抽提,无需乙醇沉淀 DNeasy Plant Mini Kit通过基于硅胶膜的离心柱形式,可快速便捷的纯化DNA。常规产量为3–30 μg高品质DNA,产量取决于样本来源。DNeasy Plant Mini Kit的DNA纯化过程可在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动化进行。 详细信息: 性能 DNeasy Plant Maxi Kit可快速高效的纯化高品质DNA,可以从不同种类的植物和组织样本中进行纯化,包括较难处理的样本来源(参见"Selection of plant species processed with DNeasy Kits")。样本可以是新鲜、冷冻或者风干的。优化的DNeasy Plant操作流程与QIAshredder Maxi离心柱结合使用,独特的过滤和匀质柱,能够有效的去除细胞碎片并且优化裂解后的样本处理流程。 用DNeasy Kits处理的植物种类简表 Abies alba (银杉) Nicotiana tabacum (烟草) Aesculus hippocastanum(七叶树) Oryza sativa(水稻)4 Arabidopsis thaliana(拟南芥) Pelargonium sp.(天竺葵)4 Avena sp.(燕麦) Petunia sp.4 Brassica napus(油菜) Pinus sylvestris(欧洲赤松),P. brutia 5 Brassica oleracea(大头菜) Populus tremula(白杨) Chicorium endivia(菊苣) Pseudotsuga menziesii(Douglas 冷杉) Citrullini lanatus(西瓜) Quercus robur, Q. petrea(橡树)6,7 Egeria sp. Rhododendron sp.2,4 Fagus sylvatica(榉木)1 Rubus idaeus(覆盆子) Helianthus spp.(向日葵) Solanum tuberosum(土豆) Hordeum vulgare(大麦)2 Sphagnum palustre(苔) Humulus sp.(酒花) Spinacia oleracea(菠菜) Hydrilla sp. Taxus baccata(红豆杉) Kalanchoe spp. Triticum aestivum(小麦)4 Lupinus sp. Ulmus glabra(榆树)6 Lycopersicon esculentum(番茄)3 Vitis spp.(葡萄

德尔塔:正确规范的细胞冻存的方法

德尔塔:正确规范的细胞冻存的方法

作者:德尔塔 日期:2022-04-11

目前,细胞冻存*常用的技术是液氮冷冻保存法,主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻,细胞内外的水分会很快形成冰晶,从而引起一系列不良反应。正确细胞冻存的方法:1.细胞:选对数生长期细胞,收集细胞24小时前换液一次。2.计数:按常规方法把细胞制成细胞悬液,计数,令细胞密度达5×106/ml,离心去上清,吸入离心管中。3.冻存液:先用培养液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO冻存液,按上法一滴滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。4.分装:分装入无菌安剖中,每安剖加1.5毫升细胞悬液。5.封口:用塑料安剖时拧紧瓶口即可;如用火焰封闭安剖口后,仔细检查,定要封严,必要时可浸入蓝色液中观察,为安全起见,把安剖缝入纱布小袋中,以防液氮浸入后,融解时因受热发生爆炸伤人;纱袋一端系以线绳,末端扎有小牌,注明:细胞名称,冻存日期,以便日后查找。 原创作者:德尔塔

德尔塔:蛋白质盐析分离法

德尔塔:蛋白质盐析分离法

作者:德尔塔 日期:2022-04-11

一、蛋白质盐析分离的原理:   蛋白质在稀盐溶液中溶解度会随着盐浓度的增大而上升(盐溶),当盐浓度增大到一定数值时,其溶解度又逐渐下降直至蛋白质析出。盐析的发生是由于盐浓度增大到一定数值时使水活性降低,导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和,水化膜逐渐被破坏,引起蛋白质分子之间相互聚集并从溶液中析出,*后经离心机分离后获得沉淀物和上清液。   二、影响蛋白质盐析分离的因素:   1、蛋白质浓度:   蛋白质浓度过大,盐析时发生共沉现象,分离效果不好。蛋白质浓度太稀,耗盐量过大,蛋白质回收率低。一般蛋白质浓度在2.5%~3.0%较适中。   2、离子强度:   离子强度越大,蛋白质的溶解度越低,越容易产生盐析现象。   3、离子类型:   离子半径小而价数高的离子,对盐析影响较强。离子半径大而价数低的离子,对盐析影响较弱。   4、PH值:   蛋白质所带净电荷越多,溶解度越大。净电荷为零时,溶解度。一般将PH值调到蛋白质等电点附近,这样有利于盐析。   5、温度:   低离子强度或水中,在一定范围内蛋白质的溶解度随着温度的升高而增大。高盐溶液中,蛋白质的溶解度随着温度的升高有时反而下降。一般情况下在0~4℃操作。 原创作者:德尔塔

德尔塔:日本科研团队开发出新装置 可收集血液中的癌细胞

德尔塔:日本科研团队开发出新装置 可收集血液中的癌细胞

作者:德尔塔 日期:2022-04-11

日本研究人员领导的一个科研团队日前开发出一种装置,可从癌症患者血液中高效分离并回收微量癌细胞。研究人员说,这一装置有助早日发现转移的癌细胞,并验证化疗效果。     癌细胞会通过血液从原发病灶传遍全身,从而形成转移病灶,随着病情恶化,血液中的癌细胞也会出现增加趋势。如能迅速检查血液中的癌细胞,就有望早日发现转移的病灶并验证**效果。但是,由于血液中的癌细胞比例极低,发现并分离它们并非易事。    名古屋大学近日发表的公报说,该校教授新井史人领导的研究小组发现,癌细胞的直径比血液中多数细胞都要大12至15微米。他们由此开发出一种芯片,其表面以7微米间隔排列着许多微小的硅胶制圆柱,血液从芯片一侧流过时,较大的癌细胞会被卡在圆柱之间,然后利用微型吸管将它们吸出来。通过检测血液中的癌细胞数目,有助于确认化疗效果,早日发现转移的癌细胞。     研究人员表示,他们下一步准备通过临床试验确认这种装置的分离精准度,争取在10年内达到实用化水平。  原创作者:德尔塔

RIPA裂解液(强)的简介组成以及具体的操作步骤

RIPA裂解液(强)的简介组成以及具体的操作步骤

作者:德尔塔 日期:2022-04-11

RIPA裂解液(强) 产品简介 多种成分均可以从细胞中提取总蛋白,例如Triton.SDS、NP-40等。RIPA裂解液(强)(Enhanced RIPA Lysis Buffer),是采用一种经典的细胞组织快速裂解,并获得总蛋白的裂解液,其裂解强度大于NP-40裂解液、RIPA裂解液(中)。所获得的蛋白质可以用于Western,免疫沉淀(Immunol Precipitation,IP)等。 Enhanced RIPA Lysis Buffer主要由Tris、NP-40、sodium deoxycholate等组成,并含有多种蛋白酶抑制剂成分,可以有效抑制蛋白的降解,并维持原有的蛋白间相互作用。 产品组成:       Enhanced RIPA Lysis Buffe   100ml   -20℃ 自备材料: 1.低温离心机。 2.PMSF。 操作步骤(仅供参考): (-)贴壁培养细胞 1.取Enhanced RIPA Lysis Buffe置于室温溶解混匀,使用前取适量裂解液加入PMSF,使其*终浓度为1mM. 2.去除贴壁细胞的培养液,用PBS、NS或无血清培养液清洗1次,低速离心,弃上清,留取沉淀。 3.按照6孔板每孔加入150-250ul含有PMSF的裂解液的比例,加入RIPA Lysis Buffer。移液器轻轻吹打,使裂解液和细胞充分接触。置于冰上或4℃裂解15-30min,通常裂解液作用于细胞1-3秒内,细胞就会被裂解。通常6孔板每孔细胞加入150ul裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200-250ul。 4.10000-12000g,4℃离心5-10min(如无低温离心机,室温下离心亦可),取上清。 5.进行后续的SDS-PAGE,Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。 (二)悬浮培养细胞 1.取Enhanced RIPA Lysis Buffe置于室温溶解混匀,使用前取适量裂解液加入PMSF,使其*终浓度为1mM. 2. 低速离心悬浮细胞,弃上清,收集沉淀。 3.用手指轻弹细胞,使其松散。按照6孔板每孔加入150-250ul含有PMSF的裂解液的比例,加入Enhanced RIPA Lysis Buffer。通常6孔板每孔细胞加入150ul裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200-250ul。再用手指轻弹以充分裂解细胞,充分裂解后应没有明显的细

德尔塔告诉你质粒抽提

德尔塔告诉你质粒抽提

作者:德尔塔 日期:2022-04-11

质粒是细胞内的一种环状的小分子DNA,是进行DNA重组的常用载体, 质粒是细胞内的一种环状的小分子DNA,是进行DNA重组的常用载体,今天我们所讲述的是质粒抽提,这是目前应用*为广泛的一种方式,为科研人员极大的提高了工作效率,首先我们来了解下什么是质粒。        在生物学中把对质粒的定义就是染色体外能够进行自主复制的遗传单位,其中包括真核生物的细胞器和细菌细胞中染色体以外的脱氧核糖核酸(DNA)分子,目前上现在习惯上用来专指细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体以外的DNA分子。    目前,已发现有质粒的细菌有几百种,每个细胞中的质粒数主要决定于质粒本身的复制特性。按照复制性质,可以把质粒分为两类:一类是严紧型质粒,另一类是松弛型质粒,在目前的基因工程中,还是以人为的构建载体为主。       质料主要有以下几个特点: 1、 质粒的复制 2、 质粒的拷贝数 3、 质粒的不相容性 4、 转移性      今天讲述的质粒抽提主要是从宿主细胞中提取质粒DNA,也是目前DNA重组技术中*基础的实验技能,同时也是*考验新实验员的一门基本功,分离质粒DNA有三个步骤: 1、             培养细菌使质粒扩增, 2、             收集和裂解细菌 3、             分离和纯化质粒DNA      以上三步是质粒提取的*广泛的定义,在实际的实验中我们会遇到各种各样的问题欢迎来电咨询德尔塔 试剂盒采用进口材料生产,专业权威的酶免专家,提供免费代测,数据分析,技术服务。产品远销全国各地。         多年以来我们以极其苛刻的要求控制产品的质量,坚持生物科学研究与世界同步的理念。因此也得到了全国各大医院院校、三甲医院、研究所,科研机构等单位的一致认可,并发表了多篇文献。欢迎来电咨询。       原创作者:德尔塔