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过碘酸-雪夫(PAS)染色试剂盒实验原理和实验方法

发布时间:2022-04-11     作者:德尔塔   分享到:

【产品介绍】:

德尔塔代理销售过碘酸-雪夫(PAS)染色试剂盒,现货供应,欢迎联系! 实验原理   胞浆内存在糖原或多糖类物质(如粘多糖、粘蛋白、糖蛋白、糖脂等)中的乙二醇基(CHOH-CHOH)经过碘酸(periodicacid)氧 化,转变为二醛基(CHO-CHO),与雪夫(Schiff)试剂中的无色品红结合,形成紫红色染料而沉积于细胞内多糖所在处。该反应称为过碘酸-雪夫 (PAS)阳性反应,以前也称为糖原染色。 实验方法   材料:   1.高碘酸氧化液:   HIO4·2H2O1g,   蒸馏水加至100ml。   此液溶解后保存于冰箱中待用。   2.Schiff试剂:   将1g碱性品红溶于200ml煮沸的蒸馏水中。摇荡5分钟,冷却至600C左右,过滤,并向滤液中入1mol/LHCl20ml,混匀。冷至 250C时,加2g偏重亚硫酸钠(或钾)(Na2S2O5)。将此液置带塞的棕色玻璃瓶中,放暗处24小时。加1g活性碳,摇动1分钟,滤纸过滤。保存于 冰箱中。   3.亚硫酸液   100g/L偏重亚硫酸钠6ml   1mol/L盐酸5ml   蒸馏水100ml   每次用前新鲜配置。   4.20g/L甲绿   甲绿2g   蒸馏水加至100ml   5.淀粉酶嚼石蜡刺激分泌唾液离心取上清液,内含淀粉酶,将麦芽糖淀粉酶0.1~1.0g溶于0.02mol/L磷酸盐缓冲液(pH6.0)100ml中。   方法:   1.固定新鲜干燥的涂片用品5%乙醇固定10min,蒸馏水冲洗,待干;   2.如涂片需要消化,可加唾液或麦芽糖淀酶,置室温消化60min,然后用蒸馏水冲洗;   3.10g/L高碘酸氧化15~20min,蒸馏水冲洗,待干;   4.置雪夫染液中室温染色30~60min;   5.用亚硫酸溶液冲洗3次后,再用自来水冲洗2~3min,待干;   6.20g/L甲绿复染10~20min;   7.水洗,待干,镜检。 实验结果计算   (1)中性粒细胞糖原含量参考标准:   (-)胞质无颗粒   (+)胞质呈淡红色,无颗粒   (++)胞质呈红色,有少量颗粒   (+++)胞质呈暗红色,颗粒较密   (++++)胞质呈紫红色,颗粒极密   (2)淋巴细胞系: 过碘酸-雪夫(PAS)染色试剂盒 原创作者:德尔塔