过碘酸-雪夫(PAS)染色试剂盒实验原理和实验方法
【产品介绍】:
德尔塔代理销售过碘酸-雪夫(PAS)染色试剂盒,现货供应,欢迎联系! 实验原理 胞浆内存在糖原或多糖类物质(如粘多糖、粘蛋白、糖蛋白、糖脂等)中的乙二醇基(CHOH-CHOH)经过碘酸(periodicacid)氧 化,转变为二醛基(CHO-CHO),与雪夫(Schiff)试剂中的无色品红结合,形成紫红色染料而沉积于细胞内多糖所在处。该反应称为过碘酸-雪夫 (PAS)阳性反应,以前也称为糖原染色。 实验方法 材料: 1.高碘酸氧化液: HIO4·2H2O1g, 蒸馏水加至100ml。 此液溶解后保存于冰箱中待用。 2.Schiff试剂: 将1g碱性品红溶于200ml煮沸的蒸馏水中。摇荡5分钟,冷却至600C左右,过滤,并向滤液中入1mol/LHCl20ml,混匀。冷至 250C时,加2g偏重亚硫酸钠(或钾)(Na2S2O5)。将此液置带塞的棕色玻璃瓶中,放暗处24小时。加1g活性碳,摇动1分钟,滤纸过滤。保存于 冰箱中。 3.亚硫酸液 100g/L偏重亚硫酸钠6ml 1mol/L盐酸5ml 蒸馏水100ml 每次用前新鲜配置。 4.20g/L甲绿 甲绿2g 蒸馏水加至100ml 5.淀粉酶嚼石蜡刺激分泌唾液离心取上清液,内含淀粉酶,将麦芽糖淀粉酶0.1~1.0g溶于0.02mol/L磷酸盐缓冲液(pH6.0)100ml中。 方法: 1.固定新鲜干燥的涂片用品5%乙醇固定10min,蒸馏水冲洗,待干; 2.如涂片需要消化,可加唾液或麦芽糖淀酶,置室温消化60min,然后用蒸馏水冲洗; 3.10g/L高碘酸氧化15~20min,蒸馏水冲洗,待干; 4.置雪夫染液中室温染色30~60min; 5.用亚硫酸溶液冲洗3次后,再用自来水冲洗2~3min,待干; 6.20g/L甲绿复染10~20min; 7.水洗,待干,镜检。 实验结果计算 (1)中性粒细胞糖原含量参考标准: (-)胞质无颗粒 (+)胞质呈淡红色,无颗粒 (++)胞质呈红色,有少量颗粒 (+++)胞质呈暗红色,颗粒较密 (++++)胞质呈紫红色,颗粒极密 (2)淋巴细胞系: 过碘酸-雪夫(PAS)染色试剂盒 原创作者:德尔塔