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使用eBioscience流式抗体的常见问题
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
Q. 是否能涡旋震荡抗体或重组蛋白？ 我们不推荐震荡蛋白或抗体溶液，这会改变产品的特性。通常在运输过程中，液体有可能已经分散在管子中。推荐使用之前，瞬时离心，这样抗体会沉到管底，以达到标示的体积。 Q. 我能涡旋震荡已经标记了抗体的细胞样品吗？ 可以，短时震荡能保持细胞的最佳状态。 Q. 标记了tandem染料如 APC-eFluor? 780, PE-Cy7等的细胞样品能固定并保存吗？ 大多数情况下，可以将样品保存在IC Fixation Buffer(cat. 00-8222)(100 μL样品混合100 μL IC Fixation Buffer)或者 1-step Fix/Lyse Solution (cat. 00-5333)中，暗处4°C 最长可以保存3天，对检测没有影响。某些影响可能与克隆号有关。 Q. 不能马上检测的样品，我该如何保存？ 首先，要获得**的效果，一定是推荐立即上机检测。 要保存染色完成的样品，可以在IC Fixation Buffer (cat. 00-8222) (100 μL样品混合100 μL IC Fixation Buffer) 或者 1-step Fix/Lyse Solution (cat. 00-5333)中固定保存，暗处4°C 最长可以保存3天。对于tandem染料，如 APC-eFluor? 780, PE-Cy7等，eBioscience的数据显示不会增加它们与APC或者PE的补偿。某些影响可能与克隆号有关。 Q. 我可以用自己配制的固定缓冲液来保存细胞吗？ 我们不推荐使用其他缓冲液，我们只能确保IC Fixation Buffer (cat. 00-8222)或者 1-step Fix/Lyse Solution (cat. 00-5333)的保存效果。 Q. 有文献提到与DEC205+ cells存在不兼容的情况，我能选择哪些其他的标记呢？ 其实CD205已被证实可以与PE-Cy5.5标记抗体和链霉亲和素标记物结合 (Part et al. 2012 J. Immunol Methods 384:184-90); 然而，不能用于CD205+ 的树突状细胞。我们推荐使用 PerCP-Cy5.5 或者PerCP-eFluor 710 标记来替代。 Q. 是否能涡旋震荡抗体或重组蛋白？ 我们不推荐震荡蛋白或抗体溶液，这会改变产品的特性。通常在运输过程中，液体有可能已
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色谱分离基本原理介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
色谱分离基本原理： 在色谱法中存在两相，一相是固定不动的，我们把它叫做固定相；另一相则不断流过固定相，我们把它叫做流动相。 色谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的。使用外力使含有样品的流动相（气体、液体）通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。当流动相中携带的混合物流经固定相时，混合物中的各组分与固定相发生相互作用。 由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中先后流出。与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。
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T迷宫、Barnes迷宫、八臂辐射迷宫、Morris水迷宫比较
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
在非临床有效性研究过程中，主要采用行为学试验研究药物对动物学习记忆功能的影响。人和动物的内部心理过程是无法直接观察到的，只能根据可观察到的刺激反应来推测脑内发生的过程，对脑内记忆过程的研究只能从人类或动物学习或执行某项任务后间隔一定时间，测量他们的操作成绩或反应时间来衡量这些过程的编码形式、贮存量、保持时间和它们所依赖的条件等等。学习、记忆实验方法的基础是条件反射，各种各样的方法均由此衍化出来。目前已经建立了大量的学习记忆研究的行为学方法，各有优缺点。现将常用的迷宫简述如下。 1、正华牌 T迷宫实验 观察指标：动物完成实验所需的时间、每次探索和前一次不同臂的比例。 优缺点：优点是T型迷宫未提供奖惩条件，完全是利用动物探索的天性，因此能最大可能的减少影响实验结果的混杂因素。缺点是啮齿动物有天生的偏侧优势，即动物在T型迷宫中更偏向于一边走（左边或右边），而且这种现象存在种系差异以及性别差异。 由于动物每次转换探索方向时都需要记住前一次探索过的方向，因此T型迷宫实验能很好的测验动物的工作记忆，从而测定动物的空间记忆能力。和T型迷宫类似的还有Y型迷宫，其实验的设计原理和实验方案和Y型迷宫都十分相似，只是把迷宫的形状由T型换成Y型。 2、Barnes迷宫实验（正华牌） 原理：动物利用提供的视觉参考物，有效确定躲避场所的臂所在的部。Barnes迷宫由一个圆形平台构成，在平台的周边，布满了很多穿透平台的小洞。平台的直径、厚度以及洞口宽度根据实验动物不同而不同。洞口数目由实验者习惯而定，一般为10到30个。在其中一个洞的底部放置有一个盒子，作为实验动物的躲避场所；其它洞的底部是空的，试验动物无法进入其中。实验场所和其它迷宫实验场所类似，要求能给实验动物提供视觉参考物。实验方案根据实验者的习惯以及不同的实验要求而定，每次训练后都用70%的酒精进行清洗，并变换正确的洞口，但洞口的空间位置不变，以防止动物通过嗅觉而找到洞口。B
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高压灭菌器的使用维修
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
高压灭菌器是依据液体的沸点与压力为原理，设计的一种灭菌设备，当压力增加时，则沸点升高；压力减小，则沸点降低。下面就为大家介绍高压灭菌器发生故障后应该如何处理。 1.高压灭菌器由专人负贵操作，定期维护和检修，压力表等定期送劳动局指定的压力容器部门校对。（高压灭菌器信息来源：http:///） 2.高压灭菌器故障时，应立即停止使用，并紧急联络设备生产厂商或指定的维修公司。 3.如一时不能修复的，可暂时停止笼具的更换，饲料改用辐照灭菌饲料。 4.长时间不能修复的，笼具更换、清洗后用化学消毒剂浸泡，从缓冲间内喷雾消毒后传入屏障设施内，晾干后使用;其他物品则临时改用辐照灭菌后消毒液喷雾传进屏障设施内。
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Caspase活化、核染色质固缩及DNA片段化
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
Life Technologies提供了用于细胞功能和健康检测的各种试剂。其中许多分析以荧光或比色法为基础，具有灵敏性、便利性和安全性。这些产品已经过多种仪器平台验证，包括显微镜、流式细胞仪、酶标仪和高内涵筛选，能够实现各种细胞功能的分析： 细胞活性和细胞毒性细胞增殖和细胞周期细胞凋亡自噬氧化应激内吞作用和吞噬作用细胞内离子 细胞凋亡(细胞程序性死亡)是细胞正常发育过程中，由遗传控制的细胞消亡现象。凋亡调控异常与许多疾病状态有关，例如阿尔茨海默病、中风以及癌症。区别于坏死细胞的是，凋亡细胞的形态学特征为核染色质固缩、细胞皱缩以及产生膜包裹凋亡小体。细胞凋亡的生物化学特征在于基因组的片段化及几种细胞蛋白的解离或降解。 与细胞活性一样，无法通过任何单一参数来准确界定细胞彻底死亡；因而采用几种不同的方法研究细胞凋亡通常十分有利。候选抗肿瘤药物若无法诱导细胞凋亡，其临床功效通常较差，因此凋亡分析成为重要的高通量药物筛选工具。 3.1 活细胞caspase检测 Vybrant® FAM Caspase Assay Kit和Image-iT® LIVE Caspase Detection Kit以新颖技术检测活细胞中活化的caspase，利用的是caspase的荧光抑制剂(FLICA™)。此试剂中的FMK可通过caspase特异性氨基酸序列与cysteine进行共价反应，并接上carboxyfluorescein基团(FAM)作为信号报告分子。FLICA™可通过识别序列与活化的caspase的酶反应中心相互作用，接着通过FMK共价结合。FLICA™抑制剂可穿透细胞，且不具细胞毒性。未结合的FLICA™分子会扩散至细胞外，经冲洗即可去除；剩余的绿色荧光信号则可直接反映出加入抑制剂时处于活化状态的capase量。Vybrant® FAM Caspase Assay Kit可用于流式检测，Image-iT® LIVE Caspase Detection Kit则可用于成像。 图7. 使用Vybrant® FAM Caspase Assay Kit的原理及检测结果示例。 CellEvent® Caspase-3/7 Green检测试剂是一种适用于活化的 caspase-3/7的新型荧光
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细胞转染方案大全
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
还在为转染实验找不到头绪而吃不下饭？ 还在为自己的细胞找不到合适的转染试剂而发愁？ 还在为找不到合适的转染方案而郁闷吗？ 从现在开始您不需要忧郁了，QIAGEN为做转染的研究者收集整理了来自QIAGEN实验室和全球各地的不同细胞类型的转染成功方案，集成了两个数据库，供研究者参考使用。您可以从已有的转染细胞数据库中，快速找到您可以参考的转染方案，为后续转染成功打下基础： ——来自全球各地转染实验研究者提供的成功数据:http://www.qiagen.com/transfection/celllistlist.aspx 使用方法： 1、打开上述链接，进入如下选择界面： 2、针对自己研究选择转染的核酸、细胞系、转染试剂、转染类型；我们以DNA、MCF-7为例，然后点击Go！ 3、然后我们看到如下界面，系统会调取数据库中针对MCF-7细胞、转染DNA的转染protocol： 4、打开其中一个24-well，可以看到转染方案中使用的核酸量、转染试剂使用量、细胞培养时间、转染效率！ 5、以上数据可以作为我们转染后续实验的一个参考。 ——提供两种方案：方案一：QIAGEN的科研工作人员提供的针对不同细胞成功转染的操作方案。方案二：QIAGEN基于标准化的操作方案。http://www.qiagen.com/transfectionprotocols/transfectionprotocol/ 具体操作步骤： 1、 打开上述链接，进入如下选择界面： 2、 选择需要研究的细胞系、核酸、细胞培养规格；然后点击Create Protocol： 3、点击Create Protocol后，可以看到如下界面，系统会调取数据库中对应的protocol，生成对应的PDF版： 4、点击Download your protocol，即可查看具体的、详细的操作方案。 如果老师对转染实验有任何问题，或者您想订购我们的转染试剂，欢迎您直接致电QIAGEN 浙江、江苏省总代理商-联科生物400-6721-600 浙江订购热线：0571-28828608 江苏订购热线：025-84530667 阅读原文：
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代做实验|蛋白质印迹实验具体操作步骤
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
蛋白质印迹免疫分析的过程包括蛋白质经凝胶电泳分离后，在电场作用下将凝胶上的蛋白质条带转移到硝酸纤维素膜上，经封闭后再用抗待检蛋白质的抗体 作为探针与之结合，经洗涤后，再将滤膜与二级试剂-放射性标记的或辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶 偶联抗免疫球蛋白抗体 结合，进一步洗涤后，通过放射自显影或原位酶反应来确定抗原-抗体-抗抗体复合物在滤膜上的位置和丰度。 【蛋白质印迹实验所需试剂】 1.IgG 标准品 2.羊抗人辣根过氧化物酶（HRP）标记的IgG 抗体 3.转移buffer:Tris 3.03g,Gly14.4g,甲醇200ml,加三蒸水至 1000ml充分溶解，4℃冰箱贮存。 4.Tris buffer（TBS）：Tris 2.42g,NaCl 29.2g,溶于600ml三蒸水，再用1N HCl调至pH7.5,然后补加三蒸水至1000ml. 5.漂洗液（TTBS）：TBS液500ml,加 Tween20 250ul. 6.封闭液：5%脱脂奶粉。 7.抗体buffer:1.5g BSA溶于50ml TTBS. 8.显色液DAB（3.3-diaminobenzidine,3.3-二氨基联苯胺）配制：5mg DAB溶于10ml 柠檬酸buffer（0.01mol/L 柠檬酸2.6ml,0.02 mol/L Na2HPO4 17.39ml），加30% H2O2 10 μl（临用时现配）。 9.脱色液：甲醇250ml,冰醋酸100ml,加蒸馏 水至1000ml. 10.氨基黑染色液（0.1%氨基黑 -10B）：0.2g 氨基黑-10B 溶于200ml 脱色液中，充分搅拌溶解，滤纸 过滤。 【蛋白质印迹实验操作步骤】 一、样品的SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳 按实验四操作步骤进行。加样时，注意在同一块胶上按顺序做一份重复点样，以备电泳结束时，一份用于免疫鉴定，一份用于蛋白染色显带，以利相互对比，分析实验结果。 二、转移印迹 1.转移前准备：将滤纸，硝酸纤维素膜（NC）剪成与胶同样大小，NC膜浸入蒸馏 水中 10-20min 后浸入转移buffer中平衡30min . 2.凝胶平衡：将电泳后的SDS -PAGE胶板置于转移buffer 中平衡 30-60min. 3.按图操作：逐层铺平，各层之间勿留有气泡和皱折。
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免疫组化染色结果容易受哪些因素影响
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
众所周知免疫组化技术对于研究肿瘤的发展规律，进行良恶性分类及鉴别诊断具有重要的作用，因此在做此类实验过程中一定要加倍谨慎起来，尤其是免疫组化染色实验，其结果很容易受某些因素影响。那么，免疫组化染色结果容易受哪些因素影响？ 专家指出：免疫组化染色的结果，与组织的固定、抗原的修复、抗体的保存及使用三个重要因素相关密切。 1、固定 常用的组织固定液是甲醛，标本必须及时固定，这有利于抗原的保存，防止抗原在组织细胞内弥散、丢失或失去免疫活性，但固定时间**为！“ 小时，一般不超过”# 小时，因固定时间越长，部分组织细胞免疫组化标记敏感性会明显降低。其原因为甲醛固定过程中会形成醛键或羧甲基，而封闭了部分抗原决定簇；也会使蛋白与蛋 白之间发生交联，也可能会封闭抗原决定簇，使许多抗原如常用的$%、&$‘（ 等免疫反应明显减弱，甚至消失，致酶标不能得出正确的结果，因此在染色时为取得良好的染色效果，必须对有些抗原进行预先修复，以进一步暴露抗原。 2、修复抗原 外检组织经过甲醛固定、脱水透明及浸蜡过程，组织中的抗原成分已被破坏或封闭，为了恢复组织的抗原性和提高组织对抗体的敏感性，一般需 修复抗原。有人用蛋白酶消化，或微波处理，或高压锅处理，使封闭的抗原成分暴露出来而显色。我们采用高温高压处理切片，切片在弱酸及高温高压下，使封闭的抗原显示出来，提高了阳性检出率和阳性强度，同时减轻了背景着色，使阳性结果清晰可辨。当然，不同组织、不同抗原其所用的高压时间及选用合适的抗原 修复缓冲液及其最适的。' 等均对结果影响甚大。 3、正确保存及使用抗体 抗体是免疫组织化学最基本的试剂与材料，它可分为第一抗体与第二抗体，因为抗体是蛋白质构成，保存或使用不当，不但会造成浪 费，而试剂变质会出现假阴性结果。对抗体及6、7试剂盒均应放置低温冰箱贮存，用一支取一支，对于一次用不完的抗体可保存在# 8冰箱内，而不要放在冰格
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质谱流式细胞术抗体应用研究
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
CyTOF®质谱流式细胞术——The Scientist杂志评选出的2011年十大创新技术。 CyTOF质谱流式细胞术，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体或者染料）标记或识别细胞表面和内部的信号分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用感应耦合等离子质谱（ICP-MS）观察单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱的数据转换为细胞表面和内部的信号分子数据，并通过专业分析软件对获得的数据进行分析，从而实现对细胞表型和信号网络的精细观察。 这项研究通过这个可以称为大量细胞计数法的方法，观察了人类骨髓产生的不同形态细胞中及表面的34种物质，不但能正确归类10多种不同类型的免疫细胞，还能观察到各类免疫细胞的内部变化，从而预知可能发生的变化。这将有助于更快更广泛的测量处方药对人体细胞的反应及功效，提前发现细胞病变，研发出针对个人的**药物。 参考文献： Bendall, S.C., et al., Single-cell mass cytometry of differential immune and drug responses across a human hematopoietic continuum. Science. 332(6030): p. 687-96. 阅读原文：
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ProcartaPlex 免疫检测常见问题及解决方案
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
液相蛋白芯片检测试剂——ProcartaPlex可以为您的生物学研究提供各种多因子检测方案，包括细胞因子、生长因子、趋化因子和其他蛋白。在选择试剂盒及操作时会遇到很多问题，现将常见问题及答复汇总如下，供您参考： 如果不小心将整个试剂盒保存在-20°C. 这个试剂盒还能再用吗？ I accidentally stored the whole kit at -20°C. Can I use it anyway? A. 试剂盒中除微球外，其余都可以保存在-20oC。如果微球在0oC以下保存，会损伤微球使得微球不能再用了。 All the components included in the ProcartaPlex kit are viable except the bead mixture. Storage of the beads at temperatures below 0oC will damage the beads and render them unusable. 如果我同时组合购买了多因子试剂盒和单因子试剂盒，还需要再买基础试剂盒吗？ Do I need to purchase a Basic Kit when combining Simplex Kits with a Multiplex Kit? A. 不需要。 No, when combining a Multiplex kit with Simplex Bead Sets, the Basic Kit is not required. All the non target specific reagents which are included in the Basic kit are components of our Multiplex kits. Only when you are combining multiple Simplex kits (i.e. no Multiplex kit in the panel) will you need to also purchase the Basic Kit. 我能否将小鼠基础试剂盒与人的单因子检测试剂盒搭配使用？ Can I use the ProcartaPlex Mouse Basic Kit with ProcartaPlex Human Simplex and vice versa? A. 不能。基础试剂盒有种属特异性。不同种属的基础试剂盒之间不能交叉使用。 No, the Basic Kits are specific to the species listed, i.e. the Mouse Basic Kit can only be used with Mouse Simplex Bead Sets. The Mouse, Human, Canine, Porcine, Rat and NHP ProcartaPlex Basic Kits are not interchangeable. 多因子检测试剂盒不是同时购买的
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ELISpot实验操作流程介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
ELISPOT全名为酶联免疫斑点检测，英文：Enzyme-linked Immunospot Assay。它结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附技术（即ELISA技术），能够在单细胞水平检测细胞因子的分泌情况。其技术原理，一句话概括就是：用抗体捕获培养中的细胞分泌的细胞因子，并以酶联斑点显色的方式将其表现出来。 将细胞因子特异性单克隆抗体包被于乙醇处理过的PVDF膜板上。具体板子处理和包被方法请参考： 将细胞加入到酶标孔中，不同组加不同的刺激剂或者不加刺激剂。 具体细胞处理方法请参考： 细胞分泌的细胞因子与包被抗体结合。 将多余细胞除去并洗板后，将生物素标记的检测抗体加入到酶标孔中。 加入连霉亲和素标记的酶偶联物 加入底物 使用酶联免疫斑点读板仪读取斑点并分析。信息来源： 阅读原文：
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简单学下的水浴锅基础方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
水浴锅的基本操作步骤 1.接通电源，显示OFF的红色指示灯亮，旋转温度调节旋钮至设定的温度（顺时针升温，逆时针降温），水开始被加热，指示灯ON亮；当温度上升到设定温度时，指示灯OFF亮，水开始被恒温。 2.恒温时为了保证恒温的效果，可在恒温容器于箱体接触的部位用硬纸板封严，恒温容器中的恒温物品应低于水浴锅的恒温水浴面。 3.电子恒温水浴锅应放在固定平台上，先将排水口的胶管夹紧，再将清水注入水浴锅箱体内（为缩短升温时间，亦可注入热 水）。 4.恒温时为了保证恒温的效果，可在恒温容器于箱体接触的部位用硬纸板封严，恒温容器中的恒温物品应低于水浴锅的恒温水浴面。 5.使用完毕后，取出恒温物，关闭电源，排除箱体内的水。并做好仪器使用记录。
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恒温摇床常见的现象维护
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
恒温摇床的维护： 1:正确使用和注意仪器的保养,使其处于良好的工作状态可延长仪器的使用寿命. 2:仪器在连续工作期间,每三个月应做一次定期检查:检查是否有水滴、污物落入电机和控制元件上；清洁轴流风机上的灰尘;检查保险丝,控制元件及紧固螺钉。 3:传动部分的轴承在出厂前己填充了适量的润滑脂（1号钙-钠基），仪器在连续工作期间，每六个月应加注一次润滑脂，填充量约占轴承空间的1/3。 4:仪器经长期使用，自然磨损属正常现象。 恒温摇床常见故障： 1、振荡不工作：一般为传动带坏或打滑，少数为调试控制仪坏。 2、不加热：加热管坏或温控仪坏。 3、整机不工作：电源保险丝断，电源开关坏或定时器故障。
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多肽合成仪历史概述
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
多肽合成的研究及应用现状 多肽是一种与生物体内各种细胞功能都相关的生物活性物质，它的分子结构介于氨基酸和蛋白质之间，是由多种氨基酸按照一定的排列顺序通过肽键结合而成的化合物。到现在，人们已在人体中发现和分离出一百多种肽类，关于多肽的研究与应用，也取得了巨大的进步，引发了空前的研究热潮。多肽的全合成不仅具有很重要的理论意义，而且具有重要的应用价值，多肽研究成为了医学和分子生物学研究的重点对象，世界各先进国家无不拨出巨款来建立各种规模的多肽研究中心，以期在这一重要领域中取得突破性进展。现在具有生物活性的多肽已经广泛地应用在临床检测、医学研究、疾病防治和**等三大方面。 1、多肽合成的研究历史 多肽合成研究已经走过了一百多年的光辉历程，1902年，Emil Fischer首先开始关注多肽合成，由于当时在多肽合成方面的知识太少，进展也相当缓慢，直到1932年，Max Bergmann等人开始使用苄氧羰基（Z）来保护α-氨基，多肽合成才开始有了一定的发展。到了20世纪50年代，有机化学家们合成了大量的生物活性多肽，包括催产素，胰岛素等，同时在多肽合成方法以及氨基酸保护基上面也取得了不少成绩，这为后来的固相合成方法的出现提供了实验和理论基础。1963年，Merrifield首次提出了固相多肽合成方法（SPPS），这个在多肽化学上具有里程碑意义的合成方法，一出现就由于其合成方便，迅速，成为多肽合成的**方法，而且带来了多肽有机合成上的一次革命，并成为了一支独立的学科——固相有机合成（SPOS），为此，Merrifield荣获了1984年的诺贝尔化学奖。Merrifield经过了反复的筛选，最终屏弃了苄氧羰基（Z）在固相上的使用，首先将叔丁氧羰基（BOC）用于保护α-氨基并在固相多肽合成上使用，同时，Merrifield在60年代末发明了第一台全自动多肽合成仪，并首次合成生物蛋白酶，核糖核酸酶（124个氨基酸）。1972，Lou Carpino 首先将9-芴甲氧羰基（FMOC）用于保护α-氨基，其在碱性条件下可以迅速脱除
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色谱分离基本原理
作者：德尔塔 日期：2022-04-12
在色谱法中存在两相，一相是固定不动的，我们把它叫做固定相；另一相则不断流过固定相，我们把它叫 做流动相。 色谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的。使用外力使含有样品的流动相（气体、液体）通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。当流动相中携带的混合物流经固定相时，混合物中的各组分与固定相发生相互作用。 由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中先后流出。与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。 色谱分离基本原理： 在色谱法中存在两相，一相是固定不动的，我们把它叫做固定相；另一相则不断流过固定相，我们把它叫做流动相。 色谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的。使用外力使含有样品的流动相（气体、液体）通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。当流动相中携带的混合物流经固定相时，混合物中的各组分与固定相发生相互作用。 由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中先后流出。与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。
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