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实验室废液抽吸系统三段式防倒吸的结构和作用
作者：德尔塔 日期：2022-04-13
防倒吸保护是实验室细胞房废液抽吸系统使用中的重要环节，如果集液瓶内的液体液位过高未及时倾倒处理，容易造成废液倒吸进入泵内，损坏机器内部零部件。所以有效的防倒吸保护对于保护废液抽吸系统不会出现倒吸引发的故障，提升实验室工作效率有着重要意义。 传统上许多实验室用户也会自行对吸液泵的主机采取一些防倒吸保护的简易措施，例如采用最多的方式就是在主机和废液瓶之间安装缓冲瓶。但是缓冲瓶的防倒吸效果会有一定的局限，首先如果缓冲瓶内部的进口和出口设计不合理，没有高低错位、没有反向口的设计、或是接管时接错方向也都会造成液体的倒吸，而且会加重倒吸现象的发生。此外也会有一些客户在真空泵进口端安装针式过滤器来防倒吸，但是针式过滤器是用于液体过滤的，所以其根本无法阻挡液体，液体会顺利通过内部的滤膜，也无法达到防倒吸的目的。这也是为何很多客户在返修吸液泵时，明明做了防倒吸保护，但是从售后得到的故障原因反馈仍然是液体倒吸，这就是防倒吸保护效率低下，没有其他作用造成的。 圣斯特Sciencetool品牌今年全新推出了一款VS204P4E实验室细胞房废液抽吸系统产品，并为其了设计了一组三段式的防倒吸保护套件组。三段式意思是指防倒吸套件分成三个部分，并且是逐一递进式的保护，可以从不同角度来防倒吸，下面我们来介绍三段式每个部分的结构和作用： ●第一阶段——逆止阀：逆止阀是装在废液瓶吸气接口的一组浮球阀，它有支架和浮子两个部分组成。支架作为遮挡物，可以遮挡少量的液体随气流飘入吸气口；而浮子作用是当瓶内液体上升，会推动浮球上移关闭吸气口，防止大量的液体涌出。 ●第二阶段——阻水保护器：是一个内置滤芯的过滤器，但是不同于针式过滤器的是，其内置的滤芯是疏水性过滤膜，即空气可以通过但液体无法通过。所以当逆止阀关闭时，用户仍然吸液导致有液体吸出时，会进入阻水保护器被阻挡在疏水性滤膜的前端，其保护比逆止阀更彻底。 ●第三阶段——缓冲杯和PP滤芯套件：前两组的
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共聚焦原理解析（十）：无标记荧光寿命成像
作者：德尔塔 日期：2022-04-13
生理学条件下的显微镜成像 很多生物样品都会产生自发荧光。它的光谱往往很宽，会干扰荧光标记。本应用指南论述了自发荧光如何作为荧光寿命成像显微镜(FLIM)中的内在对比度，从而产生多色图像。此外还概述了如何将光谱成像与荧光寿命信息相结合，以区分进而识别生物样品中的不同荧光组分。 显微镜遇见自发荧光 在荧光显微镜观察中，自发荧光通常被视为很多生物样品固有的瑕疵。它往往与内源性荧光信号的光谱相重叠，且有时会掩盖其信号。它可能会导致光谱拆分和荧光强度比率分析定量的困难。自发荧光通常具有极宽的发射光谱，这使它在普通的光谱成像中拆分起来非常困难。 但自发荧光本身也有其优点。它是一种内在的荧光信号，完全自然无需标记。本应用指南旨在通过荧光寿命成像(FLIM)识别几种自发荧光成分，并阐述它们在生物医学研究中的应用 注：有关FLIM技术的基本原理，请参阅应用指南《FRET with Flim - Quantitative in-vivo Biochemistry》 自发荧光遇见生命科学 大多数生物样品含有可引起自发荧光的生化成分。例如，细胞的氧化还原状态反映在其NAD(P)H和flavins的浓度上。前者更适合用IR光源激发，后者也可以用405 nm激发。很多结构蛋白（例如胶原蛋白、弹性蛋白和纤原蛋白）都可以得到其荧光寿命图像。 植物细胞尤其富含大量自发荧光分子。极为常见的有叶绿素、类胡萝卜素、多酚等。通常情况下，这些化合物不仅可以提供无标记自发荧光，还可以提供有关细胞或组织中代谢状态或病理状态的信息。因此，可以通过FLIM和自发荧光结合得出有关细胞功能的结论。 无标记反差 为了说明自发荧光在生物样品中的作用，我们将分别考察动物界和植物界的示例。 我们先来看介壳虫。收集并立即制作这种寄生虫不同发育阶段的标本。使用10倍物镜记录激发波长为470 nm处自发荧光的概览图像（图1）。荧光强度图像FLIM数据创建，充分呈现了样品的结构。此处的强度是每个像素的光子计数，而非标准强度图像。荧光强度无法区分任
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人CD3+T淋巴细胞阳性分选原理及注意事项
作者：德尔塔 日期：2022-04-13
人CD3+T淋巴细胞阳性分选原理及注意事项 一、细胞分选方法概述 细胞学研究中一个很重要的课题就是细胞的分离纯化，尤其是需要对某种特定的细胞进行功能研究，如对细胞培养上清液通过ELISA分析检测细胞因子、细胞共培养检测细胞功能等，都需要得到高纯度的目的细胞。因此，高效地分离所需要的目的细胞是进行细胞功能研究的先决条件。 细胞分选（cell sorting）是指根据细胞所具有的特性把某种特定的细胞亚群从混合的细胞样品中分离出来的一种技术，它是对某一特定细胞进行生化分析和功能分析的前提和基础。常用的细胞分选方法主要有两大类：一类是基于细胞物理性质的密度梯度离心法（Density gradient centrifugation），另一类是基于免疫识别特性的方法，包括荧光激活细胞分选方法（Fluorescence-activated cell sorting，FACS）和磁性激活细胞分选法（Magnetic-activated cell separation，MACS）。 密度梯度离心法是基于不同的细胞群之间存在沉降系数差异的原理建立起来的，在一定的离心力的作用下，不同种类的细胞会以各自不同的速度沉降，在密度梯度不同的区域上会形成区带。这种方法简单易行，但此种方法分离所得到的细胞纯度较低，且细胞表面的标志不明确，特异性较差，目前使用较少。 流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）是20世纪60年代后期发展起来的一种利用流式细胞仪（Flow cytometer）进行快速定量分析细胞亚群的物理化学特性，根据这些物理化学特性精确分选细胞的新技术，FCM主要包括流式分析和流式分选两部分。FACS最初于1972年提出，是指荧光驱动的细胞分选新技术，即利用分选型流式细胞仪分选标记有荧光素偶联抗体的细胞样品，通过荧光系统区分目的细胞和非目的细胞。流式细胞仪通过接受激光照射后液流内细胞的散射光信号和荧光信号反映细胞的物理化学特性，如细胞的大小、颗粒度以及抗原分子的表达情况等，目前已被广泛应用于生命科学及其相关领域的基础研究。流式细胞分选被认为是细胞分选的“金标
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CAR-T细胞疗法简介及步骤
作者：德尔塔 日期：2022-04-13
2021年6月22日，复星凯特CAR-T细胞**产品益基利仑赛注射液（又称阿基仑赛，代号：FKC876）已正式获得批准。2021年9月1日，药明巨诺靶向CD19的CAR-T产品瑞基奥仑赛注射液（Relma-cel，商品名：倍诺达）已正式获批。至此，我国已有2款CAR-T产品获批上市。 关于CAR-T疗法的“神奇”效果，也贴上了各种标签：“天价，120万一针”“只需要注射一次，癌细胞清零”，“2个月癌细胞清零”，“抗癌神药”，“可以治愈癌症”…… 什么是CAR-T疗法呢？ 在体内，T细胞是发挥免疫效应的主力，但T细胞受体 (TCR)一般在主要组织相容性复合体MHC出现的情况下才能被激活，而肿瘤细胞有调低 MHC class I 分子表达的能力，从而避免被免疫系统识别，肿瘤细胞也能逃过TCR的识别，从而发生免疫逃逸，T细胞便不能发挥作用。机体便无法通过免疫反应去杀伤肿瘤。为了克服TCR的这一限制，嵌合抗原受体(CAR)应运而生。 CAR-T细胞是经过基因工程改造、以表达靶向特定抗原的嵌合受体T细胞(Chimeric Antigen Receptor T-Cell)，它能帮助T细胞识别、并消灭相应抗原的细胞。正常的T细胞的TCR识别的多为靶细胞内部的肽段，而且识别必须是依赖靶细胞的MHC分子的展示。CAR-T细胞通过CAR识别靶细胞的表面抗原，包括细胞表面的受体、配体等蛋白，增加了靶点识别的广度，且这种识别不具有MHC的限制。 因此，可以减轻T细胞受体(TCR)诱导免疫的局限性。**时，患者血液中的T细胞被提取出，经过改造后可表达出嵌合抗原受体，从而识别并攻击表达特定抗原的肿瘤细胞及其他B细胞。简单来说CAR-T技术就如同给你的T细胞装上了“GPS导航系统”，能自动识别癌细胞，并进行杀伤，成为免疫军团中的“超级特战队”。 CAR-T细胞疗法大概可以分为以下步骤： 1、**前评估：通过一系列的评估判断患者是否适合CAR-T细胞**（在其它**手段失效后）； 2、T细胞的分离与富集：通过白细胞分离术收集患者的外周血单核细胞（PBMC细胞)，再分离出特定的T细胞亚群； 3、T细胞改造：T细胞在实验室内进
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NCS土壤和肥料BIPEA标准物质的测定
作者：德尔塔 日期：2022-04-13
FlashSmart元素分析仪允许使用导热检测器（TCD）通过动态闪烧法（改进的Dumas法）测定氮、碳和硫。FlashSmart元素分析仪可在N2、CO2、H2O和SO2中完全转换所有类型的样品。BIPEA是一家位于法国的独立非盈利组织，为全球120个国家的近2500座实验室提供定期比对测试，评估不同实验室对同一均质样品的分析能力。赛默飞世尔欧洲技术中心定期参加该组织的评估以印证其分析结果的准确性。 FlashSmart采用NCS结构对本次样品进行测定，仪器结构如下图： 测定结果如下 土壤样品测定结果 矿物肥料 其中TOC测定结果为样品进行酸化加热处理后再次进行测定，与酸化前样品测定数据差减后得到的测定结果。 BIPEA标准品可接受范围 FlashSmart EA的准确性和精密度通过分析土壤和肥料BIPEA（法国跨专业分析局）参考材料进行评估。通过使用凯氏定氮法和燃烧法的实验室比对试验对材料进行了表征。所得结果与BIPEA相关报告中指出的可接受范围进行了比较。结果表明FlashSmart元素分析仪测定数据均在其要求范围内，测量结果可靠。
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共聚焦原理解析（十一）：荧光寿命成像与荧光共振能量转移
作者：德尔塔 日期：2022-04-13
体内生化定量 荧光寿命是荧光团在发射荧光光子返回基态之前保持其激发态的平均时间长度。这取决于荧光团的分子组成和纳米环境。 FLIM将寿命测量与成像相结合：对每个图像像素以测得的荧光寿命进行颜色编码，产生额外的图像反差。因此，FLIM可以提供关于荧光分子空间分布的信息和有关其生化状态或纳米环境的信息。 FLIM的典型应用是FLIM-FRET。FRET是研究分子相互作用的成熟技术。它能用来研究蛋白质结合并在埃的尺度上估算分子间的距离。 FRET—原理 荧光共振能量转移(FRET)描述了存储在激发的荧光分子（供体）中的能量向其附近的非激发的荧光分子（受体）的非辐射转移。FRET的发生必须满足三个条件： 供体发射光谱与受体激发光谱的重叠（图1） 在纳米(10–9 m)级上分子必须非常接近（图2–4） 分子必须具有适当的相对方位 图1：供体的发射光谱（此处为ECFP，蓝线）必须与受体的激发光谱（此处为EYFP，黄线）重叠。这一要求意味着FRET对中的两个分子都具有兼容的能级。 图3：在远大于阈值R0（也称为福斯特半径）的距离r处，无能量转移。 图4：如果分子紧密接触，则来自激发光子（蓝色箭头）的能量以非辐射方式转移到受体。后者又发射光子（黄色箭头）。该过程(E)的效率与r–6密切相关。 影响 由于与r-6密切相关（图4），FRET发生在与生化反应高度相关的空间尺度上，例如蛋白质-蛋白质或蛋白质-DNA相互作用。FRET可以通过灵敏的荧光读数来探测分子间的相互作用。这能让研究人员在体外和体内研究分子相互作用。通过合适的荧光标记将两个相关的相互作用方连接起来，可以分析双分子相互作用。FRET还允许构建生物探针，通过强烈的构象变化导致的分子内FRET来报告第二信使的浓度或离子强度。 FRET无疑已发展成为细胞生物学、生物物理学和生物医学成像中广泛使用的工具。 方法论 有很多技术可以在显微镜环境中检测FRET。常见的的是基于供体（受体光漂白，FRET AB）或受体（敏化发射，FRET SE）荧光强度的
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Gstm1基因与模型小鼠的介绍与应用
作者：德尔塔 日期：2022-04-13
今天和大家见面的是Gstm1基因敲除小鼠。 Gstm1基因 该基因编码mu类谷胱甘肽S-转移酶。mu类酶通过与谷胱甘肽结合，可在亲电子化合物（包括致癌物、**药物、环境毒素和氧化应激产物）的解毒中发挥作用。研究表明，编码mu类酶的基因位于染色体1p13.3上，具有高度的多态性。该基因的突变会改变个体对致癌物和毒素的易感性，并会影响某些药物的毒性和功效。该基因的敲除与多种癌症的风险增加有关，其机制可能是由于机体对环境毒素和致癌物的易感性增加。 表1. Gstm1的基本信息 备注：标有√的意为赛业红鼠资源库有该种保存状态的小鼠 Gstm1基因敲除 2017年的一项研究发现，Gstm1基因敲除纯合小鼠对1,2-二氯-4-硝基苯的代谢能力降低，不同等位基因敲除的纯合小鼠行为异常，且对丙戊酸的反应发生变化，小脑中的血清素和多巴胺水平升高。研究人员通过在1~5号外显子内插入loxP-Neo-loxP元件导致Gstm1基因被破坏。基因敲除小鼠小脑中血清素、多巴胺较WT小鼠显著升高，经丙戊酸**后血清素、多巴胺含量降低（表2）[5]。 表2. Gstm1基因敲除纯合小鼠小脑神经化学[5]。 2006年的一项研究发现，Gstm1敲除纯合与杂合小鼠肝脏和肾脏谷胱甘肽转移酶（GST）对1-氯-2,4-二硝基苯 (CDNB)的活性及GST对1,2-二氯-4 硝基苯 (DCNB) 的活性显著降低（图3）[6]。 图1. Gstm1敲除小鼠肝脏和肾脏细胞溶质样本中的GST-C和GST-D活性[6]。（空心条、灰色条和实心条分别表示野生型、杂合子和纯合子） 小结 小鼠Gstm1基因功能的丧失与多种肿瘤的风险增加有关，这可能是由于对环境毒素和致癌物的易感性增加。鉴于石棉沉着症与口腔白斑都是环境诱导所致并会进一步恶化为肿瘤，所以这些Gstm1敲除小鼠可能为此类病症表型的药理学研究提供重要的动物模型。 参考文献： 1.Lauridsen HL, Bønløkke JH, Davidsen JR, Eldahl F, Huremovic J, Krüger K, Omland Ø, Shaker SB, Sherson D. [Asbestosis and pleural plaques]. Ugeskr Laeger. 201
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细胞冻存与复苏的技术原理和操作步骤
作者：德尔塔 日期：2022-04-13
细胞冻存与细胞复苏，是细胞培养过程中的常见工作。 细胞冻存，是指将细胞贮存在超低温环境中，使细胞暂时“冬眠”的技术，在需要的时候再进行复苏。 细胞复苏，是把冻存在-80℃冰箱或液氮中的细胞快速解冻，并使细胞重新恢复生长的技术。 本文将为大家介绍细胞冻存与复苏的技术要点和操作步骤。 细胞冻存篇 冻存原则 细胞冻存原则为“慢冻”，即让细胞在缓慢降温的条件下逐渐冷冻。 如果直接将细胞悬液放在超低温下快速冷冻，细胞会受到冷冻损伤而死亡。在冻存液中添加的保护剂（如DMSO、甘油）和在冻存盒中添加的异丙醇，都起到程序性降温的作用。 DMSO使用注意事项 DMSO能够快速穿透细胞膜进入细胞中，延缓温度下降速度，减少细胞内冰晶的形成，从而起到保护细胞的作用。 需注意的是，DMSO溶于培养基时，将释放大量热量，所以细胞冻存液需提前配制，不能直接将DMSO加入含有细胞的培养基中，避免烫伤细胞。 另外，DMSO属于致癌物质，使用时应戴好手套，规范操作。 程序冻存液配方 程序冻存液成分一般由基础培养基、胎牛血清、DMSO组成。血清比例为10%~90%，DMSO比例为5%~10%。根据普实验室细胞培养经验，推荐冻存液配比：55%基础培养基＋40%胎牛血清＋5%DMSO，难养细胞可用90%胎牛血清＋10%DMSO冻存。 细胞冻存密度 细胞冻存和复苏过程中，不可避免会损失部分细胞，所以冻存的密度不能太低。提高冻存密度有助于提升细胞复苏存活率，推荐密度为100~300万细胞/mL。 冻存操作方法 方法一：使用程序冻存盒 使用程序降温盒是最常用的冻存方法。市面上的降温盒有些需要添加异丙醇，有些则不需要。 降温盒须恢复室温后再使用。 根据实验室细胞培养经验，使用程序冻存盒冻存效果良好，没有冻存盒的同学可以参照下文方法二和方法三。 操作步骤 步骤1：配制程序冻存液，放在室温备用或放在4℃预冷 步骤2：离心收集对数生长期的细胞（贴壁细胞消化下来离心，悬浮细胞直接离心，转速1200rpm或250g，时间3
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蛋白质含量测定三种常用的方法及注意事项
作者：德尔塔 日期：2022-04-13
Protein Engineer对很多人来说，检测蛋白质的浓度实在不是多困难的实验。但有时我们也不能太过自信，因为即使最简单的方法都有其复杂的机理。为了帮助大家选择正确并且简单的方法测定蛋白质的浓度，小编在这里简单介绍下三种常用的蛋白质含量测定方法的原理及注意事项。 一、BCA（Bicinchoninic Acid）法 BCA方法是近年来广泛应用的蛋白质定量方法。其原理是，在碱性环境下蛋白质与二价铜离子络合并将二价铜离子还原为一价铜离子。BCA与一价铜离子结合形成稳定的蓝紫色复合物。该复合物在562 nm处有较高的吸光值，并与蛋白质浓度呈正比。不方便的是这种方法需要提前制作标准曲线。BCA蛋白质测定方法灵敏度高，操作简单，试剂及其形成的颜色复合物稳定性俱佳。BCA方法适用于表面活性剂存在下的蛋白质浓度检测，可兼容高达5%的SDS，TritonX-100及Tween等。然而，由于BCA方法依靠铜离子进行显色反应，如果溶液中含有与铜离子反应的螯合剂比如EDTA或者还原性试剂比如DTT、β-巯基乙醇，结果将受到很大程度的影响。同时，BCA方法的检测结果也会受到蛋白质内半胱氨酸，酪氨酸，色氨酸含量的影响。 二、Bradford法 Bradford方法是由Bradford于1976年建立的。第一篇描述Bradford方法的文献目前已经被引用数千次，这充分说明了Bradford方法的价值。该方法的原理是，带负电的考马斯亮蓝染料与蛋白质中碱性氨基酸相互作用。考马斯亮蓝在溶液中显红色，吸收峰在465nm处，当与蛋白质结合后，其显蓝色，在595nm处有吸收峰。595nm处的吸光值与蛋白质的浓度呈正比。在应用Bradford方法时有一些注意事项，如下： 1、利用Bradford方法制作的标准曲线并非是直线 上图标准曲线采用赛默飞Bradford蛋白质检测试剂盒（Cat：23200），BSA作为标准品制作。从图中可知BSA作为标准品制作的标准曲线，线形部分只在0.1-1.4 mg/mL浓度区间内。因此需要将待测蛋白质浓度稀释或浓缩至这一浓度区间，方可利用线形拟合的公式计算蛋白质浓度。另外，有必要
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mRNA 与可电离的阳离子脂质之间的相互作用对电离行为的影响
作者：德尔塔 日期：2022-04-13
mRNA 是亲水的，它可以通过静电和氢键与可电离的阳离子脂质相互作用（通常表观pKa < 6.5）。这取决于 LNP 内部的pH值，如果 LNP 外壳对质子具有渗透性——这很可能，因为 2-(对甲苯胺基)-6-萘磺酸 (TNS) 和劳氏紫等离子化染料可以进入 LNP 核，那么LNP内部的pH值与制剂的其余部分应该相似，约为7 到 8，这意味着大多数可电离的阳离子脂质将不带电。 然而，由于可电离的阳离子脂质堆积在核中，它们可能表现出聚电解质行为，导致 Henderson-Hasselbalch 方程的偏差，即滴定曲线的“拖尾”（脂质膜内的可电离脂质的表观pKa可能与实际值有较大偏差，这意味着pKa为6.5左右的可电离脂质在脂质膜内的表观pKa可能与理论值有1~2个pKa单位的偏差，所以pKa为6.5左右的可电离脂质在pH值为7-8之间的脂膜内时，依然有可能绝大部分呈现带正电的状态，注：红色斜体部分是对一些较复杂概念的进一步解读，后同）。此外，mRNA 和可电离的阳离子脂质之间的相互作用可能会影响电离行为。 对于 siRNA，发现与可电离阳离子脂质存在较弱的静电相互作用，这表明至少对于 siRNA-LNP 制剂，内部的pH值接近或等于外部的pH值。对于 mRNA-LNP，尚未进行此类实验研究。mRNA 和阳离子脂质复合的分子动力学模拟研究证明了脂质-脂质簇和脂质-mRNA 簇的形成。静电力和氢键都在驱动阳离子脂质和 mRNA 的相互作用。 Arteta 等人的另一个有趣发现是他们的mRNA-LNP 的外壳是单层的。其他研究人员根据冷冻电镜或 SANS结果分析提出，mRNA-LNPs 的外壳由一个或多个双层组成。这些相互矛盾的发现表明，使用这些技术评估mRNA-LNP 壳的性质是困难的，可能存在多种类型的mRNA-LNP 结构，其结构取决于脂质的性质和mRNA-LNP 的制备方法。反过来，不同的结构可能会对不同配方的稳定性产生影响。总之，问题仍然在于目前我们尚不清楚 mRNA-LNP 的结构以及包封的mRNA 与各种脂质成分之间的相互作用。 对各种 mRNA疫苗成分的分析表明，它们具有共同特征，但也存在差
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关于细菌内毒素检测鲎试剂LAL与TAL检测结果是否可以相互替代的研究
作者：德尔塔 日期：2022-04-13
鲎试剂 鲎的身上流淌着一种十分珍奇的血液。这种血液是淡蓝色的。这种淡蓝色的血液中含铜量很高，而且一遇到细菌就会凝固。 利用鲎血液的这种特殊反应，对它进行处理，可以制成一种特殊的检测试剂——“鲎试剂”。 ▲凝胶法鲎试剂 由于家兔热原检测的局限性，使得鲎试剂应运而生，被广泛用于细菌内毒素的检测中。 内毒素是革兰氏阴性菌的一种细胞壁成分，被内毒素污染的肠胃外制剂、医疗器械会导致严重后果，如发烧、休克、器官衰竭，甚至死亡。 即使细菌死亡，这些成分也会触发鲎试剂的反应，导致它凝结。 鲎试剂检测法是国际上检测内毒素**的方法，它简单、快速、灵敏、准确，因而被欧美药典及中国药典定为法定内毒素检查法，并已被世界各国所采用。 LAL/TAL指的是什么 国际上对鲎试剂的研究很多，那么LAL/TAL指的是什么？ LAL/TAL是鲎Limulus amebocyte lysate (LAL) 或 Tachypleus tridentatus (TAL)血细胞的水提取物。 LAL/TAL来源分别是大西洋鲎 (Limulus polyphemus)和东方鲎（Tachypleus tridentatus Leach）。 鲎试剂由蛋白质组成，用于检测内毒素的存在。 LAL指的是美洲国际鲎试剂，TAL指的是中国鲎试剂。 为了更直观地了解LAL/TAL是否存在差异性，科德角国际生物医学实验室联合国内制药企业采用同一限值的培南类样品应用药典凝胶法对LAL/TAL做了比较研究。 参考药典标准 USP Gel-Clot Technique 中国药典2020版 四部通则 凝胶法 验证实验结果： #小插曲 国内某药厂为国外客户提供培南原料出口业务，培南样品细菌内毒素检测用国产TAL验证合格后出口国外，经过某口岸药检所LAL验证结果为不合格，拒绝放行。 #相应后果 1、不合格样品被退回销毁 2、因原料不合格造成的违约责任 3、国外客户不能按时出货造成违约负连带责任 4、客户解除合作关系 验证结论： 同一产品和同一检测限值，用TAL检测判定合格，用LAL检测不一定合格的。验证实
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PhenoTron®-HSI果实品质高光谱无损检测技术
作者：德尔塔 日期：2022-04-13
易科泰SpectrAPP®创新应用快讯 —PhenoTron®-HSI果实品质高光谱无损检测技术 果实品质的快速、无损、批量检测评价对于果实分等定级、优化果树栽培品种及提升经济效益具有重要意义。易科泰生态技术公司推出PhenoTron®-HSI果实品质高光谱无损检测方案，结合专业的图像及光谱融合分析技术，可快速获取果实的空间及光谱信息，反映其外部特征、表面缺陷、病斑情况、内部结构及化学成分，为果实品质快速、无损、高通量分析检测提供了新思路。 一、技术特点 1.全自动扫描成像，高通量果实自动传送成像分析 2.模块式结构，具备强大的系统扩展功能 3.嵌入式主机，触摸屏控制，全中文操作系统 4.采用星型组网物联网技术，兼容5G通讯技术，可实现远程控制等功能 5.内置温湿度、光照度、GPS、时钟（可根据GPS信息自动校准），可扩展增加传感器 6.支持组合命令（Protocols），可实现自动运行 7.系统自动保护功能，发生短路、过载、欠压时自动断电，避免设备损坏 8.标配VNIR、NIR波段高光谱成像 9.可选高清RGB成像、红外热成像、Thermo-RGB融合成像 二、主要技术参数 1.平台高度规格：标配400mm，可定制 2.有效扫描尺寸：≥300×300mm，可定制 3.移动速度：2-40mm/s，可调，精度：1mm 4.平台控制：全中文PC端软件，可远程控制平台运行、自动运行数据采集存储等功能 5.主机箱：内置10寸触控屏，嵌入式操作系统，全波段对称光源，角度、高度可调，集开关控制、平台控制、杂散光隔离于一体，确保光场均一、稳定的最佳测量环境 6.400-1000nm（VNIR）、900-1700nm（NIR）波段高光谱成像，可选SWIR波段 7.光谱分辨率FWHM：5.5nm（VNIR）、8nm（NIR） 8.光谱通道：224，MROI光谱通道自由选择 9.空间像素：1024px（VNIR）、640px（NIR） 10.F值：F/1.7 11.测量参数：可成像测量分析结构指数、水指数、色素指数、理化指数、健康指数、成熟度等数十种光谱指数，可分析水果水分、糖度、酸度、成熟度、可溶性固体含量等品质指标 三、
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周细胞与肺微血管内皮细胞共培养迁移试验的操作技术总结
作者：德尔塔 日期：2022-04-13
周细胞生长在血管内皮细胞外周，能够辅助血管的成熟。周细胞的缺失能够直接影响血管的形成。但在肺动脉高压（pulmonary arterial hypertension (PAH)）患者肺组织内的内皮细胞与周细胞之间的关联而导致的血管损伤的机理却尚未清楚。 斯坦福的科研人员在研究周细胞（pericytes）和肺血管内皮细胞（PMVECs）关系时，希望能观测到周细胞和PMVECs共培养时，周细胞收到PMVECs细胞的影响而产生的迁移和极化行为。但在传统的实验中，研究人员只能发现周细胞对PMVEC细胞有一趋化行为。但是无法量化这一趋化行为，也无法研究周细胞的极性变化。 SUMOylation of TARBP2 regulates miRNA/siRNA efficiency. Chen C, Zhu C, Huang J, Zhao X, Deng R, Zhang H, Dou J, Chen Q, Xu M, Yuan H, Wang Y, Yu J. Nat Commun. 2015 Nov 19;6:8899. doi: 10.1038/ncomms9899 在文中，研究人员使用Ibidi开发的伤口愈合插件进行了这一共培养“伤口愈合”实验。这是一种双孔的硅胶插件，可以放在培养皿中，插件两孔间的孔壁宽度为500μm。将两种细胞分别种在插件的两个孔中，等待细胞贴壁长满后，将插件移除，这样，两孔间的缝隙就是一个无细胞的“划痕”。不仅能够观测到周细胞向内皮细胞迁移的行为，而且可以使用细胞免疫荧光染色的方法，对周细胞内的细胞骨架排列进行观测，确定细胞的一个趋化行为。 一，实验材料 1) 细胞: PMVECs （C-12282，PromoCell）Pericyte 2) 实验耗材: 伤口愈合插件培养皿 (ibidi, 81176) 3) 细胞培养基: EC-media （C-22120， PromoCell） Pericyte media （ScienCell Research Laboratories） 4) 灭菌镊子 5) 试剂：中性粒周蛋白 （ab4448， Abcam） 鬼笔环肽 （Invitrogen） 二，实验步骤 1）铺细胞（图二） 将ibidi伤口愈合培养皿底部的保护胶带撕除。 在ibidi细胞插件的每孔中分别
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多色显微成像技术解析：多色标记对于避免荧光串扰的重要性
作者：德尔塔 日期：2022-04-13
在成像过程中避免荧光串扰的误导效应 多通道一词是指使用多种荧光染料来检查一个样本中的不同元素。多通道成像可以同时观察相关组分和过程，从而为您的观察添加更多背景信息，最终提供更有意义的结果。 这种多色实验的一个例子是活细胞/死细胞实验，该试验已使用两种颜色，但可与额外的标志物相结合，产生 更高的信息密度。 它还有助于观察采用其他方法可能会遗漏的相互依赖性。 图像： 成年大鼠脑。神经元（Alexa Fluor488，绿色）、星形胶质细胞（GFAP，红色）、细胞核（DAPI，蓝色）。图像由中国广州医科大学附属第二医院神经科学研究所和神经内科徐恩教授提供。 简介 多色或多通道显微成像在研究中常用于更好地描述疾病特征，以及更好地了解生物过程。例如在免疫肿瘤学中，有必要研究不同免疫细胞相对于关键生物标记物的位置。在神经科学中，了解神经元突触的复杂性通常需要研究多种蛋白质。在研究连通性时，必须清楚识别不同类型的神经元及其位置。 多通道成像需要使用多个荧光团来对感兴趣的不同标记物染色。为实验选择合适的荧光团组合至关重要。每个荧光团都有一个特征发射光谱，即其发射光的波长范围。大多数荧光团的发射光谱很宽，因此当使用两个或多个荧光团时，它们可能会重叠，导致信号串扰。如果在实验中不考虑串扰，数据可能会导致假阴或假阳的结果，或其他形式的模糊数据。因此，区分荧光团对于在多通道成像时获得最佳结果至关重要。本文详细讨论了在设置多色荧光实验以及避免重大缺陷方面需要考虑的一些事项。 选择合适的荧光团组合 选择合适的荧光团来标记样本时需要仔细考虑，如果要避免串扰，应确保荧光团与活细胞相容，并消除生理学方面的副作用。 阅读本文，进一步了解荧光团与活细胞的相容性和生理学副作用 尽管市场上提供的荧光染料数量显著增加，但信号分离问题仍然存在。因此，对标记策略的选择仍然非常复杂，而且随着添加的荧光团越来越多，实验的设置也变得更加复杂。 为了
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活细胞多色荧光成像：多色同时成像的优势及注意事项
作者：德尔塔 日期：2022-04-13
同时多色成像，确保实验成功 活细胞成像实验是了解动态过程的关键。这类实验使我们能够观察记录活体状态下的细胞，而不会可能因固定或终止不同活体过程而产生干扰性伪影。 通过活细胞成像可以观察细胞、组织或整个生物体在其自然环境中的动态过程，而不仅仅是获得终点图像和数据。例如，您可以研究细胞或蛋白质的共定位，以查看不同的靶点是否彼此相邻，并观察它们如何相互作用。 为什么使用多个荧光标记很重要？在活细胞显微成像中使用多通道方法可以同步观察多个细胞结构和过程，提供生理学方面更重要的结果，从而为测量数据增加相关信息。通过这种方法可以研究细胞与蛋白质相互作用、动态变化以及这些变化如何相互作用和影响。不过，使用单个荧光团的实验很常见，而使用两个或多个荧光探针对活细胞成像可能会很复杂，并且必须仔细考虑几个要点才能成功。本文将介绍有关成功设置多色活细胞实验的一些关键方面。 选择合适的荧光团设置多色活细胞实验时，首先要选择合适的荧光团，这一点至关重要。荧光团必须与活体样本相容，并具有光稳定性，才能进行长期成像。荧光蛋白标记、活细胞染料、动态标记（如 Ca2+ 指示剂）及其他用于标记感兴趣靶标的方法是达到这类目的的合适工具。但是，由于发射光谱宽，以多通道方式研究活细胞过程时可供选择的荧光染料仍然相当有限。每使用一个额外的标签，找到具有高特异性和高信号输出的激发/探测模式就变得更加困难。将两个或多个荧光团信号一起成像时，需要使用复杂的标记策略最大程度减少光谱重叠。 在生理条件下成像无论使用细胞培养物、类器官、球状体还是较小的模式生物，都必须使用近生理条件来确保样本保持活力。在延时实验中，某些条件必须保持最佳状态，才能确保细胞不仅能够存活，而且不会承受压力，并保持真实的生理机能。通常情况下使用培养箱（37°C、二氧化碳、湿度，有时还包括在一段时间内具有高稳定性的氧气）确保持续提供近生理条件。此外，选择一种低自发荧光
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