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免疫组化抗原修复注意事项
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
经甲醛固定的部分组织细胞,因固定过程中可能会形成醛键或羧甲基而封闭部分抗原决定簇,使免疫组化标记敏感性明显降低,因此在染色前,有些抗原需进行修复或暴露。 抗原修复方法可分为化学方法和物理方法。化学方法是以酶消化方法,常用胰蛋白酶及胃蛋白酶,配制浓度与消化时间要适度。常用的物理方法有单纯加热、微波处理和高压加热。在选用这三种方法时,浸泡切片的缓冲液的离子强度和pH、加热的温度和时间均影响着抗原修复效果。 1、pH的应用范围及选择 抗原修复液的pH非常重要,有效的抗原修复pH要比修复液的化学成分更重要,同样的修复液随着pH的升高染色的强度逐渐增强,但最佳pH范围为6.0-10.0。目前大家公认的**的抗原修复液是pH6.0的柠檬酸盐缓冲液和pH8.0的EDTA缓冲液。作为通用修复液碱性pH的修复液要比酸性的有效,而对固定很长时间旧的存档组织,酸性pH的修复液则优于碱性的修复液。 2、抗原修复时应选择最佳温度 70-90℃的温度对未经固定的蛋白质可发生变性,但经福尔马林固定的蛋白质,温度必须达到92℃以上方能使其变性。研究结果显示,温度为92-98℃是合适的,95℃效果**。 3、抗原修复液必须遵循自然降温规律,否则效果不好或达不到抗原修复的目的 抗原修复持续时间过后,取出放于室温中让其慢慢地降温,绝对不能为了争取时间,强行用冰块或冷水使其降温。这是因为当高温中的抗原蛋白分子链脱离了其他的束缚或联结,要有一个自然环境让其自然放松下来,随着温度的降低,它们会慢慢地恢复原来的形态和构型。 4、尽量使用足量的抗原修复液 应用于抗原修复的液体,一定要充足,防止切片干涸。应用大量的抗原修复液时,由于它的量较大,可延缓液体的沸腾时间,增加切片受微波辐射的量,对抗原修复将达到彻底。 抗原修复必备品: 厂商 目录号 产品名称 规格 目录价 eBioscience 00-4956 IHC Antigen Retrieval Solution – High
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遗传病家系的高通量测序:您需要了解的一些事
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
摘要 高通量测序技术的出现与普及,为遗传病的研究带来了前所未有的机会。它提高了遗传病致病基因克隆和鉴定的效率,使人类对自身基因功能的认识大大加速。本文对遗传病家系的高通量测序分析提出一些注意事项,希望有助于相关的研究。 前言 我国是一个多民族的人口大国,也是遗传病家系资源比较丰富的国家之一。遗传病家系是生命科学基础理论探索和实际应用研究的宝贵材料,是解读人类基因功能的重要证据。依赖于对遗传病家系的连锁分析,对致病基因进行定位克隆曾经是研究遗传病致病基因的重要手段。通过连锁分析对致病基因进行精细定位,往往不容易实现,这需要较大或较多的家系。因此,遗传病致病基因的定位克隆并不容易。近十年来,高通量测序技术的出现与普及,为遗传病的研究带来了前所未有的机会。它提高了遗传病致病基因克隆和鉴定的效率,使人类对自身基因功能的认识大大加速。技术上的进步,使得近几年全世界范围内遗传病研究成果迅速涌现,国际上相关科研论文的发表量也连年快速上升。在国内,许多科研团队准备或者已经用高通量测序技术对所收集的遗传病家系进行分析。上海伯豪生物在多年从事高通量测序技术服务的基础上,对遗传病家系的高通量测序分析提出一些注意事项,希望有助于相关的研究。 一.遗传病家系信息的收集及样本的采集 对所感兴趣的遗传病事先进行充分的了解是非常重要的。它是真正的遗传病吗?遗传病由遗传物质改变引起,可在家族内聚集,但有些在家族内群发的疾病并非遗传病。它的发病频率有多少?发病频率的大小涉及到高通量测序数据的过滤分析,需要注意。它是单基因遗传病还是复杂性状遗传病?后者的研究难度较大。如果研究者不是相关专业的医生,与医疗机构的临床专科医生或遗传咨询医生合作将非常有助于即将进行的研究。合作可以使研究者在短时间内快速了解该遗传病,也可以使其有机会接触更多的该种遗传病的家系。 遗传病家系信息的收集及样本的采集直接影响研究项目的进
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雨量记录仪现场校准方法
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
雨量计是一种气象学家和水文学家用来测量一段时间内某地区的降水量的仪器。 随着科学技术的发展,我国大气监测自动化系统在不断推进,雨量记录仪已陆续投入业务使用。雨量计是科技含量较高的自动观测仪器,传感器都是电信号输出。因此,测量准确度会随时间变化而发生变化。 在风力过大(热带风暴或飓风)时使用雨量计是没有意义的,因为在对雨量计本身造成伤害的同时,所记录的结果也会有过大的误差。此外,雨水粘附在筒壁或漏斗上,会导致测量结果略微偏小。 当温度接近冰点时,雨水在落到雨量计上时可能会结冰,从而导致漏斗堵塞或其他问题。所以,为使量值传递准确、可靠、统一,必须对雨量记录仪定期的进行检定和校准,并使其具有可比性。 雨量记录仪现场校准方法: 1.雨量记录仪现场校准的标准和设备:0-250㎜最小分度值不大于0.05㎜的游标卡尺;157.08ml(相当于10㎜降水量)标准球;水平尺;秒表等。 2.校准点选择在10mm降雨量上进行。 3.承水器口要水平,用水平尺不同方向进行测量;用游标卡尺测量雨量计承水口内径就为200+0.6mm,承水器和承水口内壁应光滑,刃口不得有砂眼、毛刺、损伤等缺陷。雨量计传达室感器采用翻斗脉冲信号来测量地面降水量,每个脉冲为0.1mm。示值校准前应先检查主控机和采集器是否正常,参数设置是否正确。用乳胶管连接标准球和控制阀,不能有渗、漏现象。时间控制后分别以4mm/min和1mm/min的降水强度往雨量计的承水口注水,分别记录自动气象站的雨量测量值,每种降水强度进行三次校准,以三次测量值的平均值减去标准值(以10mm为标准值)作为该降水强度的测量误差。10mm雨量的误差要≤0.4mm。用两种降水强度的测量误差最大值作为自动气象站雨量计传感器的校准结果,可根据本地的雨量强度至少一年进行现场校准一次。
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光照培养箱维护与诊断
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
光照培养箱由顶罩、工作室、供冷供热室和底室等四部分组成。顶罩内装有电脑控制器强电板,顶罩面板上装有电脑控制器弱电板,其中包括液晶显示器、指示灯和操作按钮。此外面板上还装有电源开关。箱体侧面或箱门上分别挂着N组光照日光灯。工作室后壁上装有一支热敏电阻(即温度传感器)。供冷供热室在工作室下方或上方,其左右(或前后)分别与工作室通风道的出入口相连,室内装有蒸发器、防凝结用遮档分流板、电热管和两台循环风扇,向工作室供热或供冷,电热管旁装有过热保护用热敏电阻。底室装有压缩机、冷凝器、冷却风扇、仪器进线接线盒和熔断器。其维护与诊断过程如下: 1、度偏差超过±2℃报警; 2、工作室温度48℃以上(可根据用户不同要求确定该值)强制停止加热; 3、触摸开关短路时报警; 4、温度传感器断、短路时报警,并停止加热和制冷; 5、加热室温度高于55℃,保护继电器吸合,切断加热电源; 6、培养箱突然不工作,请检查熔丝管(箱后)是否烧坏,检查供电情况。
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叶绿素测定仪的7大注意事项
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
叶绿素测量仪通过测量叶片在两种波长范围内的透光系数来确定叶片当前叶绿素的相对数量,也就是在叶绿素选择吸收特定波长光的两个波长区域,根据叶片透射光的量来计算测量值。能够很容易的在野外进行测定。它是一款能够快速测量叶绿素含量的仪器,功能也比较优良,但是在进行操作的时候还是存在一定的问题,所以在使用叶绿素测定仪进行测量的时候要注意以下7大事项,以保证测量结果的准确性: 1. 测量面积仅为2mm/SPAN>3mm,能够用来测量比较小的叶子,样品厚度可以达到1.2mm。中心线指示测量面积的中心。 2. 用手指按住样品夹,直到发出“滴”的一声测量值出现在显示屏上为止。测量值会自动储存在内存中。 3. 当直接在太阳光下利用仪器时,用身体给仪器遮住阳光,这样就不会影响测量结果。 4. 不要企图去测量绝对厚的部分,如叶脉。如果测量的叶片有很多的叶脉,**的办法是进行几次测量并取平均值。 5. 如果一系列的“滴滴”声和“---”闪现在显示屏上,就是错误的执行了测量步骤(样品夹没有完全密封,在测量没有完成之前样品夹被打开,或者样本太厚或太小)。 6. 如果测量值出现小数点闪现、没有小数点或测量值大于50.0 的情况,说明测量精度不能保证,请重新测量。 7. 如果样品夹的发射或者接收窗口变脏或者有一些水,就不会有精确的测量结果。在测量前请先查看样品夹窗口是否清洁。
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对话科学家:膜电阻测量的FAQs
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
EVOM2是WPI全球专利产品,是最新一代用于特异性完成组织培养研究中TEER测量的电阻仪。它不仅可以定性地测量单层贴壁细胞的健康状态,而且也能定量地测量单层细胞的融合情况,可用于上皮细胞、胃肠道和呼吸道黏膜细胞、血管上皮细胞及血脑屏障等培养过程中细胞生长状态的评价以及药效动力学评价。 独特的EVOM2电路设计和STX2电极的完美结合,让其可以监测单层细胞的融合状态,当与WPI公司设计的EndOhm小室结合使用时,它也可以用来完成更加精确的定量测量或更低电阻的测量,如血脑屏障(BBB)内皮生长电阻测量。 下面,我们就大家常见的几个问题进行详细的解答。 1、EVOM2的工作原理是什么? EVOM2 的工作原理是通过主机产生一个10 μA的恒定跨膜电流,同时以一定的频率反转电极的极性,这样电极和膜都没有电荷累积,通过STX2 的两个电流电极(I1和I2)使10 μA 的电流跨过细胞膜,另一对电极(V1和V2)测量要求达到10 μA电流所需要的电压,并将信息发送给处理器。处理器根据欧姆定律将其转化为欧姆,在读数表上显示数字。因为电流是固定的10 μA,因此,很容易就转化出测量结果。如在膜电阻为1000 Ω时,10 μA电流通过的电压应该是10 mV;在200 Ω膜电阻时,10 μA的电流将产生2 mV的电压;不论何种情况,在膜或电极上所消耗的能量都非常小。 2、什么是EndOhm小室?它与STX2电极有什么不同? Endohm作为EVOM2可选电极室,可用来测量低电阻培养细胞或者高精度测量。Endohm与EVOM2一起使用是目前市场上最精确、最经济的一组内皮细胞电阻仪。 小室和盖子每一个都包含一对同中心电极:在中心有一个电压敏感性的银/氯化银半电极,外加一个环状的电流电极,电极上部的高度可以调节以便适应不同厂家生产的培养杯。对称的圆形盘状电极放置于膜的上部和下部,使其比STX2有更加均一的电流密度跨过膜两侧,大大提高了测量的稳定性和可重复性。与STX2最大的不同是培养皿必须从培养板转运至Endohm进行测量,Endohm小室对渗漏组织
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高低温冲击试验箱除霜设定
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
高低温冲击试验箱在做快速的高、低温冲击测试时,压缩机与观察窗上会有结霜现象,观察窗上的比较好处理,在隔化玻璃本质上有一层17V的导电膜有加热阻止结霜的现象,并且观察窗上有一个照明灯,对除霜也有点一定的作用,但高低温冲击试验箱的压缩机除霜就需要几个步骤了。 高低温冲击试验箱除霜设定 自动除霜设定:你可依所需要的试验内容来设定除霜开始条件,例如每100回设定除霜一次,或依你所需的时间来设定,亦可将除霜模式关闭。(建议多以回数设定为主,并以120回为一上限值,如非必要请勿高于120回,结霜的多寡会影响低温区之效能) 开始回数:你可搭配程序中所做的程序回数或时间长短(当你开始条件设定为时间时)来设定你所需之回数或时间。 除霜结束温度:你可设定你所需要之除霜温度,温度愈高除霜时间愈长,但除霜效果较好。( 建议都以10℃为你的除霜温度,可得到最佳的时间与效果平衡 ) 高低温冲击试验箱除霜延迟时间:当你所设定的除霜温度到达时,除霜延迟时间才开始计算,一般建议设定为5~10分钟。
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雨量记录仪的维护方法介绍
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
雨量是气象要素的重要参数之一,降水是大自然中的一种现象。它既能造福于人类,又能给人类带来灾难。因此,准确地测量降水强度和降水量,一直是全国各气象计量单位所面临的重要课题。雨量也是气象部门所观测的气象要素的重要参数。在近几年来对于环境中的风速温湿度等检测均有一定的发展,他们均有自己相对应的检测仪器,风速的监测是风向风速仪,而温湿度的监测则是温湿度监测仪,因此对雨量监测就更加不能落后了,雨量检测仪器直接借助雨量记录仪,这是一款专业的测量雨量监测仪器,广受各区域的喜好。 使用雨量记录仪的过程中还是要进行定期的维护,以此来保证测量的结果准确的同时,还能延长仪器的使用寿命,在市场使用的过程可以按照以下检测方法来进行维护: 1、应定期观察水平泡(旋开外侧螺母,打开外罩即可在底盘上看见),若水平泡不在中心圆圈内,可用小扳手调节水平螺钉,调节时不能用力过大,以防底盘脚断裂。 2、定期检查承水器内清洁情况,如有无尘土、树叶、昆虫等。承水器内的网罩可通过拧松下端的固定螺帽得以清洗。 3、对于仪器内部测量的结构也要进行定期的清洗,但是在清洗的过程中,要比较的小心,以防内部遭到破坏。 雨量记录仪的雨量范围:0.1~4mm/min,雨量精度:±0.4mm,分辨率:0.1mm。满足大部分区域的测量要求。
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玉米叶绿素含量的快速测定的方法
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
叶绿素是植物叶片光合作用的主要光合色素,必不可少。叶绿素含量的测定是实验室的重要项目之一,如采用化学方法Arnon法,分光光度计法,叶绿素测定仪等,不一而足。迄今为止,在实际应用中,我们通常采用叶绿素测定仪,因为其方便快捷,而且精确度高,方便携带。受到广泛农业工作者、科研院所的青睐。 分光光度计法测定结果准确可靠,但是在测定时需要损伤叶片和组织,不利于对植株的系统研究。叶色值反映了植物叶片的绿色程度,与叶绿素含量存在一定的相关性。叶绿素测定仪是一种专门用于测定植物叶绿素含量的仪器,该仪器有多家厂商生产销售,云飞科技也提供叶绿素含量测定仪的销售工作。叶绿素测定仪的测定原理是:测量叶子在红色区域和近红外区域的吸收率。通过这两部分区域的吸收率,来计算出一种SPAD值,它是用数字来表示目前和叶子中叶绿素含量相对应的参数。因为叶绿素在蓝色区域(400—500nm)和红色区域(600—700nm)范围内吸收达到了峰值,但在近红外区域却没有吸收。另外,叶绿素含量测定仪还具有反应氮元素含量的作用。 玉米叶绿素含量的测定有两种方法。叶绿素测定仪法:利用叶绿素测定仪于花期对玉米功能叶片中部进行活体测定。每个材料取3个叶片,最后求平均值。分光光度计法:将叶绿素测定仪法测定完的叶片取回进行分光光度计法测定。用毛刷刷去表面杂质,用水冲洗,擦干,备用。每个叶片在中部用直径9 mm打孔器打孔,取6个圆形叶片,称重后放于15 mL试管,用10 mL95%乙醇避光浸泡96 h,浸泡过程中每天混匀2次,叶片完全变白后进行比色,于665、649、470 nm波长测量光密度值,计算叶绿素含量,取3个叶片的平均值作为该材料的含量值。计算公式为:CA=13.95D665-6.88D649;CB=24.96D649-7.32D665;C其它=(1000D470-2.05CA-114.8CB)/245。
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聚合酶链式反应(PCR)技术概述
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)技术是基因扩增技术的一次重大革新,是分子生物学发展史中的一个重要里程碑。使用PCR扩增技术,可以将极微量的靶DNA片段特异地扩增上百万倍,大大提高了对DNA分子的分析和检测能力。PCR技术具有敏感度高、特异性强、快速简便等优点,在医学、遗传学、法医学、微生物学、食品检验、卫生检验等众多领域中具有巨大的应用价值和广阔的发展前景。 耐热DNA聚合酶的应用是PCR技术的核心。根据是否具有3’→5’端外切酶活性,耐热DNA聚合酶通常分为无校读活性和有校读活性两类。无校读活性的DNA聚合酶(以Taq 酶为代表)具有较高的扩增效率,但由于缺乏校读活性,容易发生碱基错配,故产物中点突变较多。Taq DNA聚合酶还具有末端转移酶活性,可在PCR产物的3’末端非特异地添加碱基,因单个A突出碱基的比例最高,故PCR产物可直接与含有3’末端突出T碱基的载体连接(即TA克隆),方便PCR产物的克隆、扩增和测序。然而,TaqDNA聚合酶在PCR反应第一步升温过程中即可催化错配引物延伸或引物二聚体形成,因而导致非特异性扩增,影响目的片段的合成量。针对这一现象设计的热启动Taq DNA聚合酶,在低温时其聚合酶活性被抑制,通过高温变性,聚合酶的活性恢复,催化特异性结合的引物扩增,因而提高了目的片段的特异性和产量。另一类有校读活性的DNA聚合酶(以Pfu为代表)可选择性地去除错误掺入的dNTP,维持DNA链的正确延伸;然而其扩增效率通常低于Taq DNA聚合酶,特别是对于长片段DNA链的延伸能力较差。基于上述两类酶的特点,可将适量的Taq DNA聚合酶与任意一种有校读活性的DNA聚合酶混合,在适当的反应缓冲液体系中,可获得保真性与扩增性能介于上述两类酶之间的混合酶,用于长片段以及复杂模板的高保真扩增。 PCR实验受诸多因素的影响。优质的商业化耐热DNA聚合酶及其配套缓冲液通常可以满足绝大多数DNA片段扩增的需要。首先应根据模板的性质(基因组、cDNA、质粒等)和目的片段的
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制冰机制冷剂的分析介绍
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
制冰机是一种将水通过蒸发器由制冷系统制冷剂冷却后生成冰的制冷机械设备,采用制冷系统,以水载体,在通电状态下通过某一设备后制造出冰。根据蒸发器的原理和生产方式的不同,生成的冰块形状也不同;人们一般以冰形状将制冰机分为颗粒冰机、片冰机、板冰机、管冰机、壳冰机等等。 制冰机的制冷剂主要有:R22、R134a、R404a,现上海巴玖跟大家一起分别介绍一下各种制冷剂的特点。 R22:含氟利昂的制冷剂,长期以来一直垄断着市场。但是它污染环境,破坏破坏地球上空15km-25km内的臭氧层,从而使更多的太阳能光紫外线能辐射到地球危害到人体健康。 R134a: 新一代的制冷剂,含四氟乙烷,它具有如下主要特点: 1.R 134a不含氯原子,对大气臭氧层不起破坏作用; 2.R 134a具有良好的安全性能(不易燃,不爆炸,无毒,无剌激性无腐性); 3.R 134a的传热性能比较接近,所以制冷系统的改型比较容易。 4.R 134a的传热性能比R 22好,因此制冷剂的用量可大大减少。 R404a:是一种不含氟的非共沸混合制冷剂,在常温下为无色气体,在自身压力下为无色透明液体。它也是一种不破坏大气臭氧层的环保制冷剂。具有如下特点: 1制冷剂R404A组成:HCFC-125(44%)+HFC-134a(4%)+HFC-143a(52%) 2制冷剂R404A是替代R-502的工业标准HFC,用于全世界新型商用致冷设备。 3制冷剂R404A适用于中低温的新型设备或更新设备,最接近于R-502的运作,甚至可以达到15ºF(-9.4ºC)或更冷。 4具有清洁、低毒、不燃,制冷效果好等特点。 以上制冰机信息由上海巴玖提供,更多内容请点击: 实业有限公司现货为您提供性价比高的制冰机技术和销售服务,并保证相关售后服务,欢迎前来选购制冰机!我们还为您提供其他实验室仪器和耗材,如有需要可与我们联系,全国免费热线电话:400-180-588。
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草莓中乙草胺农药含量检测
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
4 月25日,央视财经频道《是真的吗》栏目播出了“央视记者买8份草莓经检测均含致癌农药”的相关讯息。据报道,最近网上流言说,草莓农药残留普遍。央视财经记者随机在北京不同的草莓出售地点购买了8份草莓样品并送到北京农学院进行检测。经检测,百菌清农药残留全部合格。而乙草胺则高出欧盟标准至少1倍。 乙草胺是一种广泛应用的除草剂。是目前世界上最重要的除草剂品种之一,也是目前我国使用量最大的除草剂之一。乙草胺在美国被列为B2类致癌物,长期食用可能会致中毒,有致癌性。 根据相应标准,RephiLe特别推荐下面的草莓中乙草胺含量检测解决方案。该方案采用GC-MS检测,检出限为0.01mg/kg。详细解决方案如下: 一、实验原理 草莓试样中乙草胺经提取溶剂提取,固相吸附剂净化后,用气相色谱-质谱仪测定,选择离子定性和外标法定量。 二、仪器和试剂 气相色谱-质谱联用仪,固相萃取仪,氮吹装置,分析天平,离心管:100mL,高速匀质器离心机,移液枪,Direct-Pure Genie 超纯水系统。 正己烷、乙酸乙酯,以上均为色谱纯。无水硫酸镁,分析纯。氮气:99.99%。 三、试验方法 1、试样称取 称取 5 g(精确至 0.1g)草莓试样于 100mL离心管中,加入 50mL乙酸乙酯溶解,匀浆器上匀浆 2 min,4000r/min离心 10 min,上清液倒入浓缩瓶中,浓缩至干,用 1 mL 正己烷溶解。 2、净化 移取上述提取液于离心管中,加入1.0g无水硫酸镁,0.5gPSA,0.5gODS,剧烈振荡1min,然后放入离心机以5000r/min离心10min。将上清液全部转入氮吹管中,40℃下吹至近干,用正己烷定容至1mL,用于GC-MS检测。 3、GC-MS 测定 3.1 色谱条件 色谱柱型号为DB-5MS,调整程序升温,使色谱柱能在高温条件下更好地分离目标化合物。 色谱柱:DB-5MS,30m ×0.25mm ×0.25μm;载气:高纯氦气;柱流速:1mL/min;检测器:质谱EI检测;进样口温度:250℃;进样方式:无分流进样;进样量:1μL。 柱温条
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快速了解染色质免疫共沉淀技术(ChIP)
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
ChIP技术的原理 在生理状态下把细胞内的DNA与蛋白质交联在一起,通过超声或酶处理将染色质切为小片段后,利用抗原抗体的特异性识别反应,将与目的蛋白相结合的DNA片段沉淀下来,以富集存在组蛋白修饰或者转录调控的DNA片段,再通过多种下游检测技术(定量PCR、基因芯片、测序等)来检测此富集片段的DNA序列。(检测相关技术服务:Real-time PCR技术服务、基因芯片及结果验证服服务、高通量测序及结果验证服务) ChIP技术实验步骤 染色质免疫共沉淀技术包括3个独立的步骤,即固定、沉淀和检测。 第1步 固定 甲醛能有效的使蛋白质-蛋白质,蛋白质-DNA,蛋白质-RNA交联,形成生物复合体,防止细胞内组分的重新分布。首先在体内用甲醛固定DNA和蛋白质复合物,需要注意甲醇的交联时间,如果过长,细胞染色质难以用超声波破碎,影响ChIP结果,而且实验材料也容易在离心过程中丢失;交联时间如果过短,则交联不完全,产生假阴性。交联反应可加入甘氨酸终止。然后用化学(微球菌酶)或者机械(超声波)的手段将其随机切成一定长度的染色质小片段(200~1000bp)。 第2步 免疫沉淀 利用目的蛋白质或者目的蛋白质上标签的特异性抗体,通过抗原和抗体反应形成DNA-蛋白质-抗体复合体,然后沉淀此复合体,特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段。 第3步 目的片段的纯化与检测 经过热处理及交联,释放共沉淀的DNA;再将DNA片段纯化后,对沉淀的DNA样品进行检测。目前检测方法主要有3种:第1种是比较沉淀的模版与阴性和阳性对照PCR信号强度的普通PCR实验,或者相对精确的定量PCR方法。第2种是将沉淀的DNA与DNA微阵列芯片杂交(ChIP-on-ChIP),以检测多基因轨迹全部的相互作用。第3种是高通量DNA测序分析。 ChIP技术的优点 与传统的研究转录因子和DNA相互作用的方法相比,染色质免疫共沉淀技术是一种在体内研究DNA与蛋白质相互作用的理想方法。ChIP的优点在于能够在体内捕获转录因子和靶基因的相互作用,能同时快速地提供一种或者多种
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离心机的工作原理及分类
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
一、离心机工作原理 当含有细小颗粒的悬浮液静置不动时,由于重力场的作用使得悬浮的颗粒逐渐下沉。粒子越重,下沉越快,反之密度比液体小的粒子就会上浮。微粒在重力场下移动的速度与微粒的大小、形态和密度有关,并且又与重力场的强度及液体的粘度有关。 此外,物质在介质中沉降时还伴随有扩散现象。扩散是无条件的绝对的。扩散与物质的质量成反比,颗粒越小扩散越严重。而沉降是相对的,有条件的,要受到外力才能运动。沉降与物体重量成正比,颗粒越大沉降越快。对小于几微米的微粒如病毒或蛋白质等,它们在溶液中成胶体或半胶体状态,仅仅利用重力是不可能观察到沉降过程的。因为颗粒越小沉降越慢,而扩散现象则越严重。所以需要利用离心机产生强大的离心力,才能迫使这些微粒克服扩散产生沉降运动。 离心就是利用离心机转子高速旋转产生的强大的离心力,加快液体中颗粒的沉降速度,把样品中不同沉降系数和浮力密度的物质分离开。 二、离心机的分类: 离心机的分类方法有三种:按用途分、按转速分和按结构分。 ●按用途分类:分为制备型离心机和制备分析离心机。 制备型离心机:仅供分离浓缩,提纯试样的离心机。 制备分析离心机:不但能分离浓缩、提纯试样,而且可以通过光学系统对试样的沉降过程进行观察、拍照、测量、数字输出、打印自动显示的离心机。 ●按转速分类:分为低速离心机、高速离心机、超速离心机。 低速离心机:转速在10000rpm以内或相对离心力在15000 ×g 以内。 高速离心机:转速在10000∽30000rpm以内或相对离心力在15000∽70000 ×g以内。 超速离心机:转速在30000rpm以上或相对离心力在70000 ×g以上。 ●按结构分类: 一般在高速和低速离心机根据结构和功能进行分类,品种繁多,各厂家命名也无统一标准。可分为台式离心机、多管微量台式离心机、细胞涂片离心机、血液洗涤台式离心机、高速冷冻离心机、大容量低速冷冻离心机、低速冷冻离心机、台式高速冷冻离心机、台式低速自动平衡离心
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旋转蒸发仪减压蒸馏操作步骤介绍
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
一、操作规程 1. 用胶管与冷凝水龙头连接,用真空胶管与真空泵相联。 2. 先将水注入加热槽。**用纯水,自来水要放置1-2天再用。 3. 调正主机角度:只要松开主机和立柱连结螺钉。主机即可在0-45度之间任意倾斜。 4. 接通冷凝水,接通电源220V/50Hz,与主机连接上蒸发瓶(不要放手),打开真空泵使之达一定真空度松开手。 5. 调正主机高度:按压下位于加热槽底部的压杆,左右调节弧度使之达到合适位置后手离压杆即可达到所需高度。 6. 打开调速开关,绿灯亮,调节其左侧旁的转速旋钮,蒸发瓶开始转动。打开调温开关,绿灯亮,调节其左侧旁的调温旋钮,加热槽开始自动温控加热,旋转蒸发仪进入试运行。温度与真空度一到所要求的范围,即能蒸发溶剂到接受瓶。 7. 蒸发完毕,首先关闭调速开关及调温开关,按压下压杆使主机上升,然后关闭真空泵,并打开冷凝器上方的放空阀,使之与大气相通,取下蒸发瓶,蒸发过程结束。 二、旋转蒸发仪注意事项 1. 玻璃件应轻拿轻放,洗净烘干。 2. 加热槽应先注水后通电,不许无水干烧。 3. 所用磨口旋转蒸发仪安装前需均匀涂少量真空脂。 4. 贵重溶液应先做模拟试验。确认本旋转蒸发仪适用后再转入正常使用。 5. 精确水温用温度计直接测量。 6. 旋转蒸发仪工作结束,关闭开关,拔下电源插头。 尊敬的客户: 您好,我司是一支技术力量雄厚的高素质的开发群体,为广大用户提供高品质产品、完整的解决方案和优质的技术服务公司。主要产品有可见分光光度计、紫外透射仪等。 本企业坚持以诚信立业、以品质守业、以进取兴业的宗旨,以更坚定的步伐不断攀登新的高峰,为民族自动化行业作出贡献,欢迎新老顾客放心选购自己心仪的产品。我们将竭诚为您服务!