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植物养分利用与重金属毒害原位研究先进技术综述
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
植物生长离不开各种的金属与非金属元素。这些元素通过土壤、大气、水进入植物体内,通过植物体内的运输和一系列生理生化反应分布到植物的各个部位。各种元素对植物的影响一直是植物研究的重要热点之一。这项研究的焦点主要集中在两个方面:1. 由于日趋严重的粮食安全问题,如何获得最优化的施肥方法既可以提高作物产量和质量,又能减少对环境造成的可能伤害(富营养化等)是摆在全人类面前的重大课题;2. 现代工业造成环境中严重的重金属污染,这些重金属通过植物富集并传导到动物圈和人类。为了搞清楚这两个问题的运行规律并找到解决方案,就必须对植物在不同元素条件的生理生态反应进行研究。 图1. 矿物质和水分在植物体内的运输过程(https://online.science.psu.edu/) 很多传统的植物生理生化指标和元素分析方法大都需要将样品取回实验室,并进行破坏性预处理。这一过程中很多重要的信息都可能缺失或者产生变化,而且不能做到对同一个样品进行长期监测,难以估量植物不同生长期的差异变化。本文将介绍一些国际上最先进的用于植物原位养分利用与重金属毒害研究的无损/准无损仪器技术。 一、叶绿素荧光/叶绿素荧光成像分析技术 叶绿素荧光动态分析技术是目前最快捷无损的监测植物生物与非生物胁迫下光合性能的技术,也是用于植物生理学和生态生理学研究的最有效的、最权威的和应用最广的技术之一(Lu,2001;Lu,1999)。因此在叶绿素荧光技术刚刚发展成熟之初,这项技术就被用于植物养分和金属胁迫研究。1985年Sivak发现N、P、K、Mn、Fe、S或Cu缺乏的甜菜,叶绿素荧光曲线与对照组产生了偏离(Sivak, 1985)。Abadia在1988年就提出了用叶绿素荧光测量的方法来快速简便地检测植物营养缺失(Abadia,1988)。 图2. 大麦Mn缺乏与Mn充足造成OJIP快速瞬变荧光动力学曲线变化(Hebbern, 2005) 但是传统的叶绿素荧光技术也有其局限性。一般的叶绿素荧光仪仅能通过光纤测量一个点的总值。无法展示
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动物手术保温与动物伦理和福利
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
动物术中和术后保温是动物实验过程中的一个至关重要的环节,是否做好保温措施直接关系到实验的成败,同时也是科研工作者在进行生命科学相关研究中将实验动物伦理和福利付诸实践的真正体现,是对动物爱心的社会责任感的体现。善待活着的动物,减少动物死亡的痛苦!!! 动物手术保温的科学价值 Responsible scientists know that good science and good animal care go hand in hand, and would not tolerate cruel or inhumane treatment of any laboratory animal. ------The U.S. Animal Welfare Act 美国动物福利法案申明指出“负责的科学家深知,好科学与善待动物是相辅相成的,我们不能容忍残杀或不人道的对待任何实验动物。” 保障动物实验结果准确性:科研效果更好、结果可信、更加客观真实 动物手术低体温的危害 为什么需要对手术动物进行保温? 损害机体免疫功能,减少皮肤血流和氧供,增加伤口感染率 降低血流循环和血液指标,导致凝血发生,非常不利于血液或血流相关指标监测和测定,比如测量血流量、血压等 降低药物在机体组织中的代谢速度,影响机体代谢 延长麻醉恢复时间,可能明显增加动物死亡率 引起其他疾病的发生,比如心血管并发症 无法得到真实或接近真实的实验数据 More……… 动物手术低体温的常见原因 1.麻醉剂的作用:麻醉剂导致扩张血管、抑制体温调节,从而导致体温下降 2.手术室的低温环境,尤其是普通动物室实验环境 3.手术台的“冷”材质,比如不锈钢、树脂材质的台面 4.长时间药物注射:长时间输入与环境等温的液体,对动物体液造成“冷稀释”作用,从而导致动物体温下降 5.皮肤消毒剂的使用,尤其是裸露皮肤大面积的消毒,导致体内热量散失 长时间的手术 6.创伤较大的开胸、开腹手术,造成热量散发较多 7.动物自身年龄、疾病因素,如营养不良、肿瘤模型手术 Others……… 动物手术保温的常见措施 Solution 1 Solution 2 动物手术保温的规范操作 术中 1.如果使用电
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匀胶机使用步骤分析解读
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
匀胶旋涂过程按基片旋转速度及胶质的变化,分几个阶段:滴胶,加速旋转摊胶,匀速旋转匀胶以及去边,其中第 3 阶段匀速旋转阶段是胶质涂层厚度和均匀性控制的重要阶段。 1.滴胶 在滴胶前,胶质需经过亚微米级别的过滤处理,否则薄膜有可能形成彗星图,星状图,戒产生气泡。滴胶阶段是将胶质溶剂沉积在基片上中心位置的过程。可以手动滴加,或用配备的自动滴胶器滴加。一般而言,自动滴胶方式由亍是自动机械化操作,最终薄膜的厚度,均匀性,及可重复性都很好,也可以减少易挥发的毒性气体不身体接触。而手动滴胶是人工操作,适合实验研究要求较高的薄膜制备。滴胶过程可采用静态滴胶或者动态滴胶两种方式,静态滴胶是在基片旋转之前就将胶质滴加沉积在基片中心,动态滴胶则是基片一边以一定的速度旋转(一般是500RPM),一边滴胶。如果胶质或基片是疏水性的,可以选择动态滴胶法,另外动态滴胶法所需的滴胶量也可以略少。 2.摊胶-加速旋转 有些胶质中的溶剂挥发性很强,如果基片没有在短时间内稳定快速的加速到设定的速度,胶质中的溶剂就会快速挥发,从而导致胶质的粘性迅速增强,从而影响对涂层厚度的控制。加速旋转阶段中基片以一定的加速度旋转,胶质溶剂开始向基片边缘扩散,会有部分胶质开始被甩出基片,在加速初始阶段,胶质是以一定的高度堆积在基片表面,胶质的底部与基片表面粘在一起,一起旋转。而胶质的上层由于惯性作用,其转速无法与基片同速,因此胶质形成螺旋状。随着胶质在离心力作用下持续向基片边缘扩散,螺旋状逐渐消失,胶质变薄为涂层,并覆盖基片表面,涂层基片旋转速度完全同步。在基片的加速旋转阶段,旋转速度高精度的控制,以及旋转时间的准确设置非常重要。其实,无论胶质具有怎样的性质,匀胶机都需具备高精度,稳定的马达旋转速度控制系统,这样才可以制作厚度均匀可控的薄膜。 3.旋涂去边 在匀速旋转阶段中,胶质的粘性力和挥发作用是影响薄膜厚度不均匀性的重要因素。胶质溶剂
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SPN1辐射传感器的设计原理
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
SPN1 采用一排7 个微型热堆传感器和控制器控制遮光方式来测量射入日光的直射和散射部分。遮光方式和微型热堆传感器的排放,使得无论太阳在什么位置,至少有1 个热堆传感器完全暴露在阳光下并且至少有1 个完全在阴暗处。所有7 个微型热堆传感器接收同样量的散射光。根据每个热堆的读数,微处理器计算出总辐射和散射的地面光线,并通过这些值得估算出日照状况。 输出:SPN1 为总辐射和散射提供了两个模拟电压输出及日照时数的数字输出。这些输出信号与数据记录器相连,如Delta- T 的DL2e 及GP1。也可以直接通过RS232 串口连接电脑获取读数。 加热器:在结露、结冰、下雪的情况下,内置的加热器可使玻璃圆顶仍保持透明,确保在恶劣的气候条件下也能测得可靠的数据。 SPN1的设计原理:SPN1 的设计原理被试用在Delta-T 的BF3 辐射传感器上,并通过了有效测试。采用微型热堆传感器,高质量的玻璃圆顶和铝制外壳,大大改进了最初的设计。内部电子元件为重新设计为高精确度、低功耗元件。SPN1 将总辐射减去散射可以得出直接辐射。 实验比较结果: SPN1 与Kipp & Zonen CM6B Kipp & Zonen CM6B 传感器中的一个被太阳追踪圆盘遮盖住。以下展示了样品的测试结果。(SPN1无需太阳追踪部件) 日照时数:日照亮度的WMO 极限为与太阳直接光束垂直的平面上所接收到的120W. m-2.. 它不能使用地面余弦校正传感器直接测量,因此SPN1 采用一个基于直接辐射散射比率的运算法则,并结合它们的绝对值来估算其在WMO 标准的少数百分比内。此图表为BF3 和Campbell-stocks 日照记录计,在数月内试验的结果比较图。依据WMO标准,BF3 的每日误差为20 分钟。相对应的,Campbell-stocks 的精确度更差,每日误差将近1个小时。SPN1 是目前BF3 的日照传感器的高级版本,使用的是相同的日照时数运算法则。
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如何利用血清脂肪酸和胆汁酸诊断肥胖个体代谢异常
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
麦特绘谱积极参与各项代谢组学临床研究,致力于基于代谢组学的精准医疗。近年的研究发现游离脂肪酸水平的升高可以通过脂质代谢产物的增加、炎症因子的释放增多、内质网应激和氧化应激等机制导致胰岛素抵抗。胰岛素抵抗与T2DM、高血压、血脂异常等密切相关。 研究还发现胆汁酸不仅在营养物质吸收中起作用,它也是重要的信号分子,通过激活胆汁酸受体来启动信号通路和调节基因表达,在胆汁酸代谢、脂代谢、糖代谢和能量稳态中起着重要作用。但是随着肥胖及其相关糖尿病的发展,胆汁酸水平的变化及其与脂肪酸的相互作用仍然不是很清楚。 为了弄清脂肪酸和胆汁酸的相互作用在肥胖个体代谢中起到的影响,研究采用了麦特绘谱专业的靶向代谢组学方法,对包括199例正常人,78例超重/肥胖患者和66例超重/肥胖T2DM患者的病例对照研究,并对代谢手术干预的肥胖糖尿病患者进行了血清胆汁酸谱和脂肪酸谱的定量代谢检测及系统分析。进一步通过动物和细胞实验阐明可能的机制。 血清脂肪酸在肥胖相关代谢性疾病中的意义 胰岛素抵抗是2型糖尿病发病机制的核心环节。游离脂肪酸与肥胖、胰岛素抵抗、2型糖尿病及代谢综合征的发生发展都有密切的关系。长期暴露于高浓度的脂肪酸情况下,胰岛β细胞分泌胰岛素的功能将受到损害,产生脂毒性作用。循环中高水平的脂肪酸超过脂肪组织的储存能力和外周组织对脂肪酸的氧化能力,过多的游离脂肪酸则以甘油三酯的形式沉积在非脂肪组织,例如肌细胞、肝细胞和胰岛β细胞等,从而造成了胰岛素抵抗、非酒精性脂肪性肝病和2型糖尿病。 因此,脂肪酸水平的变化是肥胖相关的代谢综合征和心血管疾病的重要特点,系统分析代谢性疾病人群脂肪酸水平的变化对疾病的风险预测、早期诊断和**具有重要意义。 血清胆汁酸在肥胖相关代谢性疾病中的意义 胆汁酸在肝脏中合成,是体内清除胆固醇的主要途径。进食后胆汁酸分泌到小肠,对脂质和脂溶性维生素进行消化和吸收。胆汁酸不仅在营养物质吸收中起作用,而且作为
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引物合成的步骤及方法介绍
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
Oligo DNA的人工化学合成始于50年代初期,1980年,全自动的固相DNA合成仪面市后,使得快速、高效合成Oligo DNA成为可能,这大大地推动了生物工程技术的蓬勃发展。 现在一般都采用β-乙腈亚磷酰胺化学合成Oligo DNA,将DNA固定在固相载体上完成DNA链的合成的合成时从3' →5' 方向进行,通常3' 端的第一个碱基结合在Glass担体 (Controlled Pore Glass,CPG)上。其具有高效、快速的偶联以及起始反应物比较稳定的特点。 合成步骤 Step1:脱掉附加在CPG担体上的第一个碱基5' -OH基团上的保护基 (DMTr),准备附加下一个新的碱基; Step2:活化新的碱基单体 (Phosphoramidite),准备与第一个碱基进行反应; Step3:第二个碱基与第一个碱基发生偶联反应; Step4:将没有反应的第一个碱基的5' -OH加帽封死 (Capping),使其不再进一步参与反应; Step5:将核苷亚磷酸酯氧化成更稳定的核苷磷酸酯 (即将三价磷氧化成五价磷)。 Step6:重复进行Step1~Step5的循环,直至合成完所需的Oligo DNA序列。 Step7:合成结束后,将Oligo DNA分子从CPG上切下,再进行进一步的纯化。 图1 Oligo DNA合成原理。N1代表第一个碱基,N2代表第二个碱基,依此类推。 OD数的确定 一般PCR扩增,2 OD引物,可以做200-500次50ul标准PCR反应。如果是做基因拼接或退火后做连接,1 OD就足够了。但是有些研究人员,就做几次PCR,但是却要5-10 OD。做全基因构建的引物都比较长,但是我们有些研究人员也要求高OD数。片段越长, 最后全长得率就越低,出错的几率就越大。超出需要之外的OD数要求,也是一种浪费。 引物纯度检测 实验室方便的作法是用PAGE方法。使用加有7M尿素的16%的聚丙烯酰胺凝胶进行电泳。取0.2-0.5OD的引物,用尿素饱和液溶解或引物溶液中加入尿素干粉直到饱和,上样前加热变性(95℃,2mins)。加入尿素的目的一是变性,二是增加样品比重,容易加样。600V电压进行电泳,一定时间后(约2-3小时),剥胶,用荧光TLC板在紫外
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引物纯化的方法有哪些
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
如今,引物纯化方式多种多样。各位科研君,每天忙碌奔波于核酸提取、载体构建、蛋白表达等环节,没有深入了解过各种引物纯化方式吧!今天,小编带各位对各种引物纯化方式作下对比。各位科研君在以后的研究中,记得对号入座哦! 一般纯化方式 目前,采用的主打的引物纯化方式是脱盐纯化。其只能纯化掉引物中的盐分,并不能去除含的小片段,价格较为便宜,能满足一般常规的应用。 1. C18柱: 又称为简易反相柱,对DNA有特异性吸附,可被有机溶液洗脱,但不会被水洗脱。因此能有效地去除盐分,但不能有效去除比目的片段短的小片段。该方法一般不会对普通PCR反应产生影响。对于需要用于测序、克隆的引物不能使用这个级别。 2. OPC纯化: 采用寡核苷酸纯化柱 (Oligonucleotide Purification Cartridge,OPC)纯化,制品纯度保证80 ~ 90%。此级别制品可用作PCR引物、DNA测序引物、各种探针等。该级别只提供长度在35 mer以下的合成DNA制品。序列更长时,制品的纯度得不到保证。 3. HAP纯化方法 HAP(High Affinity Purification)其原理是利用合成引物5'-端DMT基团对HAP树脂专一性吸附,而不含DMT的短链DNA不被吸附,从而达到分离纯化的目的。制品纯度可达到80~90%,可以满足杂交探针、测序、常规PCR(不再做进一步克隆实验)等用途了。但是因为其专一性吸附 DMT 能力有限,不免仍然有短片段带入的可能,而且负载量小。特别是对长于39 碱基以上的片段纯化效果不好。此级别只提供长度在10-39mer以下的合成oligo DNA制品。序列更长时,制品的纯度得不到保证。 4. RPC纯化 RPC纯化是通过反相净化滤芯 (Reverse Phase Cartridge) 对引物进行纯化,纯化原理与反相HPLC纯化一样。与反相HPLC比较,RPC是一种有效且更加经济的纯化方式。反相净化滤芯通常包含一种疏水基质如 C18的硅胶,能够很好的吸附DNA,并且可以用水轻松地将切割下来的保护基团和短的引物片段从反相柱上洗掉。RPC纯化的引物可以应用于DNA
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PCR技术的发展(下)
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
接着上期,我们继续回到故事里面。 关于Mullis发现PCR的过程,比较公认的版本是,有一天他驾车开过蜿蜒山路的时候,开始琢磨他的检测单碱基突变的方法。这一次他想到的点子是,既然结合一条引物是可行的,为什么不试试看同时结合两条引物呢。于是Mullis开始在脑海里模拟这个实验:设计两条引物,分别结合在DNA的正义链和反义链上,且这两条引物的3’端均位于待测碱基的上游1个碱基的位置。这样,当进行Oligomer Restriction检验的时候,两条链上都会延伸结合上相应的ddNTP。只需要在原先设计引物的时候将两个引物的长度设计得不一样,得到的两个产物就能够在DNA胶上被区分开来。这样,一次检测就能同时得到两个结果,这两个结果可以互为对照组,如果两条链的结果得到的碱基可以互相配对成功,那么证明实验体系没有问题,结果可信;反之,如果两条链结果不一致,那么很有可能是实验过程中出现了问题。 Mullis开始模拟实验:如果混入了dNTP,那么聚合酶在延伸DNA链时则会有时用dNTP有时用ddNTP,使得ddNTP结合的位置就变得不确定,通过他的对照组的设计就能够检测出来,该组实验结果不能采信。很好,对照组的效果不错。那么,有没有什么办法可以避免dNTP的混入呢?比如用碱性磷酸酶(BAP,Bacteria Alkaline Phosphate)呢?用BAP除去原有混合物里面的磷酸基团,随后再加入ddNTP开始反应,这样应该不错。不过得想个办法在加入ddNTP之前除去BAP的活性。 由于一时想不到好的解决办法,于是Mullis便开始想,那么就先这样吧,让那些混入的dNTP先留 在反应体系里面,看看会发生什么事。于是,在那条漫长的公路上,他又开始继续他的思维模拟实验。这一次,他碰到了真理——PCR。当Mullis继续想着他的模拟实验的时候,他距离真理已经越来越近了。如果原先的反应体系里面混有dNTP,那么不妨先加入DNA聚合酶让反应发生,这时dNTP就会被作为原料完成DNA复制的反应;而此时只需要加热使DNA双链变性,再冷却复性时由于引物的量很多,因此
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分子蒸馏是一种高新分离技术
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
分子蒸馏是一种高新分离技术,近十几年来,在国际上得到了十分迅速的发展。特别是随着绿色食品的兴起,这种纯物理分离技术更加倍受青睐。鉴于分子蒸馏是一种温和的分离技术,特别适用于高沸点热敏性物质的分离,因此,它可广泛用于石油化工、生物制药、食品工业、日化工业、香精香料、农药及塑料工业等。 分子蒸馏技术的特点是,它在实际的工业化应用中较常规蒸馏技术具有以下明显的优势。对于高沸点、热敏性及易氧化物料的分离,分子蒸馏提供了最佳分离方法。因为分子蒸馏是在很低温度下操作,且受热时间很短;分子蒸馏可极有效地脱除液体中的低分子物质(如有机溶剂、臭味等),这对于采用溶剂萃取后液体的脱溶是非常有效的方法;分子蒸馏可有选择的蒸出目的产物,去除其他杂质,通过多级分离可同时分离两种以上的物质;分子蒸馏的分离过程是物理过程,因而可很好地保护被分离物质不受污染和侵害。随着工业化的发展,分子蒸馏技术已广泛应用于高附加值物质的分离,特别是天然物的分离,因而被称为天然品质的保护者和回归者。 应用优势: 1.产品品质高。由于分子蒸馏操作温度低受热时间短,因而大大提高了产品品质,特别适于高沸点物质、热敏性物质及易氧化物质的分离,对于保持天然物质的品质有着特殊的功能。 2.生产能耗小,由于分子蒸馏整个过程热损失少,分子蒸馏装置的独特结构形式也使其内部压降极小,因此可节省大量能耗。 11.产品成本低。由于分子蒸馏的分离效率高,产品收率高,因而可降低产品生产成本。另外,由于分子蒸馏装置独特的结构形式,有利于工业化规模的扩大。
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Biotin标签蛋白纯化工具的应用类型
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
Biotin 标签与其它标签的球形蛋白不同,生物素(Biotin)要小得多,这使蛋白质间的干扰更小;同时可以多个生物素偶联在单个蛋白质上,利用链霉亲和素,可使检测效果最大化。此外,生物素含有戊酸侧链,很容易与其它基团反应偶联生成相关衍生物,且不影响链霉亲和素与生物素的结合功能,极大拓展了生物素的应用领域。 PurKine™Biotin-Tag 纯化系统基于创新的高载量基质,确保一步操作即可完成生物素和生物素化底物的纯化。其中链霉亲和素树脂可用于纯化样品中生物素化的抗体、蛋白、多肽、核酸、其它分子以及相互作用的复合物。Abbkine还提供琼脂糖凝胶、树脂填料和磁珠形式产品。 产品名称 产品形式 货号 规格 PurKine™ Biotin-Tag Streptavidin Resin 6FF Agarose Resin BMR20306 2ml,10ml,50ml,100ml PurKine™ Biotin-Tag Streptavidin Packed Column 6FF Packed Column BMC20306 1ml×5,3ml×5 PurKine™ Biotin-Tag Protein Purification Kit (Streptavidin) Kit (Agarose Resin) KTP20306 1ml×5,3ml×5 PurKine™ Biotin-Tag Streptavidin Magbeads Agarose Magbeads BMM20301 1ml, 5ml,10ml PurKine 生物素标签 链霉亲和素树脂(6%交联) PurKine 生物素标签 链霉亲和素树脂(6%交联)可以重复使用而无需再生,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可以对树脂进行清洗,恢复性能。样品在上样前建议离心或用 0.22μm 或 0.45μm 滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。该产品以高度交联的6%琼脂糖凝胶为基质,耐受最高0.3 MPa的压力,可与蠕动泵、AKTA仪器结合适用,适合工业纯化。 PurKine 生物素标签 链霉亲和素预装柱(6%交联) PurKine 生物素标签 链霉亲和素预装柱(6%交联),但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载
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乐枫科普:纯水管中为什么会出现青苔
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
不少实验室纯水仪的用户都会碰到一个问题,就是会发现透明预过滤套筒内的PP棉或是预过滤与设备相连的纯水管路中出现了绿色的“污染物”! 这是怎么回事?难道是预过滤材料质量不过关? 这个现象实际上与预过滤产品的质量无关! 那个绿色的“污染物”是青苔。青苔属于一种藻类,是一种比较低级的植物,不是细菌,没有什么毒性,或者有害的物质。在办公室或家居环境的空气中往往有藻类孢子,特别是潮湿和靠近绿色植物的地方常有青苔孢子存在。藻类属于光能自养生物,自身含有叶绿素,容易在有光照和适宜的温度条件下,利用水、矿物质和二氧化碳进行光合作用,合成藻类所必须的有机物,并以此为基础进行繁殖、衍生,进而形成青苔。 环境是出现青苔问题的主要因素: 1. 空气和自来水中往往含有肉眼所不能见的青苔孢子(一些环境中的绿色植物会释放出绿藻孢子),这些污染源,在适合条件下,很容易与水里的矿物质,发生化学反应。 2. 青苔生长繁殖需要进行光合作用,光合作用的进行需要Ca2+ 、Mg2+ 等微量元素才能正常进行,水中的矿物质元素构成了藻类生长繁殖的营养素。 据有关文献报道:藻类生长需要钾、钙、锰十几种矿物质和微量元素,用不同的水作为藻类培养用水,发现矿泉水因含有丰富的矿物质和微量元素使藻类生长更快,纯净水却没有绿藻生长,可见,矿物质是藻类生长的必备的条件,也是重要的营养源。 3. 接触水源的物体,摆放在阳光直晒、气温较高,或是潮湿的地方,容易生长青苔,其原因有两点:a) 光照造成水温的升高,促使自来水水中余氯的分解,余氯具有抑制藻类胞子生长的作用,其分解为藻类胞子的生长提供了前提条件;b) 藻类胞子属于自养型植物,生长繁殖必须要有光合作用,而光照为这种化学反应提供了可能。如果没有光照,叶绿素无法合成,青苔则无法生长繁殖。 4. 水质差也会引发青苔生长。自来水里一般含有氮和磷这两种矿物质,这两种物质是藻类胞子生长的条件。 在实验室纯水设备预过滤管路或PP棉上
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实验室超纯水机安装后漏水是因为什么呢
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
实验室超纯水机是实验研究重要的设备,小编最近在问答平台看到很多人有这样的疑惑,有些客户回去安装后发现漏水很严重,找半天找不到原因。据小编了解实验室超纯水机漏水有很多原因新手可以从三个点去看: 1、实验室超纯水机配件安装有误 实验室超纯水机由众多配件组合而成,如果发生漏水现象,那么有很大可能是配件在组装中出现问题,发生此种情况,**能参考说明书,从新对实验室超纯水机配件进行排序并组装。正常的安装流程是不会发生漏水现象的! 2、滤壳上胶圈没装好 滤壳是由塑胶材质制成,如果直接连接就会发生漏水故障,一般滤壳内部会配置一种软性胶圈帮助固定。实验室超纯水机漏水可能是滤壳上的胶圈位置没装好,滤壳连接不够紧密,才发生漏水的问题。 解决办法:找到胶圈,并固定到滤壳接口,再将滤壳装上就行了! 3、水管没插好或者漏水 水管在实验室超纯水机的作用是帮助运输水源,在连接实验室超纯水机内部滤芯时基本采用快速接头帮助连接,如果实验室超纯水机内部漏水,可以检查水管和接头之间的连接是否不够紧密。如果是此处发生问题,**能先用切管刀将水管头部平齐剪掉,然后在连接到接头上,并多拉动几次,就能避免漏水现象了! 实验室超纯水机【www.cdkangning.com】发生漏水现象不要着急,将实验室超纯水机机壳打开,检查是那个部位发生漏水,如果是上述三种情况,就以上述方案解决,如果自己不能解决**直接艾柯售后处理。
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NATURE METHODS十大技术之一——光遗传学
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
近期光遗传学之父Dr.Georg Nagel造访了咱们金开瑞,据说这位大大是诺贝尔奖的热门候选者,那么一脸懵逼的吃瓜群众就发问了:啥是光遗传学,听起来好高大上! 何为光遗传学? 光遗传学(optogenetics)是近几年正在迅速发展的一项整合了光学、软件控制、基因操作技术、电生理等多学科交叉的生物工程技术。 其主要原理是首先采用基因操作技术将光感基因(如ChR2,eBR,NaHR3.0,Arch或OptoXR等)转入到神经系统中特定类型的细胞中进行特殊离子通道或GPCR的表达。光感离子通道在不同波长的光照刺激下会分别对阳离子或者阴离子的通过产生选择性,从而造成细胞膜两边的膜电位发生变化,达到对细胞选择性地兴奋或者抑制的目的。 Nature Methods杂志在十周年之际推出了纪念特刊,点评了在过去十年中对生物学研究影响最深的十大技术,其中就包括光遗传学技术。我们可以毫不夸张地说,光遗传学技术给神经学带来了一场革命。现在,这一技术已经迅速成为了许多实验室里的标准工具。越来越多的人相信,光遗传学技术不仅可以阐明疾病机理,还能够**多种人类疾病(比如与视网膜有关的疾病)。 光遗传学技术好在哪儿? 用光读取和控制神经活性的好处很明显,这种技术是非侵入性的,能在精确的时空点上进行靶标,可以同时采用多种波长和位点,能报告特定分子的存在或活性。在信号读取方面,人们开发了高度敏感的探针,检测突触的释放、细胞内钙离子和膜电压。在神经元操纵方面,人们鉴定和优化了一系列激活和失活神经元的蛋白。 光遗传学技术已经渗透到了神经学的每一个角落,研究者们不仅用它来研究大脑的基础功能,还在动物模型中探索疾病的发病机制。光遗传学的激活子和抑制子可以在同一个细胞内表达,这对于因果关系的建立特别有帮助。 在光遗传学领域,开发新探针是至关重要的。人们对光敏蛋白Channelrhodopsin及其突变体进行不断改造,开发了更利于双光子
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BAC文库构建方法与技巧
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
BAC文库构建技巧 -------------------------------------------------------------------------------- 基因组DNA文库有十分广泛的用途,如用于分析、分离特定的基因片段,用以基因表达调控、人类及动植物基因组工程的研究。通常情况下,基因组文库构建的基本流程可以归为4大步骤:分离基因组DNA、对基因组DNA作相关的处理、将基因组DNA片段连接入载体、将重组载体转入宿主细胞。 一、分离基因组DNA(gDNA) 毫无疑问,优质的基因组DNA对于基因组文库构建是至关重要的。研究者需要查阅文献,通过经验来选择合适的基因组DNA分离方法,在分离过程中保证DNA不被过度剪切或降解,同时也要尽量保证DNA的纯度。 二、处理基因组DNA 根据研究目的,研究者需要选择合适的载体。不同的载体对基因组DNA的长度有不同的要求,研究者必须选择合适长度的基因组DNA来构建基因组文库。 构建黏粒基因组DNA文库,研究者需要将基因组DNA用注射器抽打来随机剪切DNA;接着用末端修复酶修复DNA,可以提高DNA连接入载体的效率;然后通过脉冲场电泳或者普通电泳来找到40kb左右的DNA片段,随后使用百博明创的胶回收试剂盒回收DNA。构建BAC基因组DNA文库,研究者需要将基因组DNA用限制性内切酶(常用EcoR I、BamH I或者Hind III)来消化基因组DNA,然后通过脉冲场电泳找到合适长度的DNA片段(比如100kb-150kb),随后透析回收DNA。 需要注意: (1)电泳时,要选用合适的DNA Ladder,以保证电泳后可以准确定位所需分子量的DNA。用百博明创试剂盒构建黏粒文库时,就可以直接采用文库试剂盒内的Control Insert DNA来做marker,既方便又准确。 (2)电泳以后,应该避免用紫外光照射目标DNA,紫外光照射DNA会显著降低克隆效率。解决方法:把marker所在的部分凝胶切下,在紫外灯下做好记号,然后以此为参考定位所需的片段。 (3)回收DNA的时候,应该要避免过度离心,以防止DNA被剪切,降低文库质量。 三、载体的选择 目前,常用的基因组文库
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乐枫科普:为什么超纯水要即取即用?
作者:德尔塔 日期:2022-04-21
分析仪器(如HPLC、IC、AAS、ICP等)、细胞生物学、分析生物学、标准溶液和空白溶液配置、以及纳米材料科学等都会用到超纯水。大家知道自来水中含有千万种会影响科学实验结果的杂质,那么如何去除杂质,制造出“超纯水”?我们需要利用先进的技术来纯化水质。你知道吗?超纯水制造出来的瞬间,即刻开始与接触的环境产生溶解反应,我们可以戏称超纯水为“Hungry Water”,因为超纯水中溶解的离子浓度很低甚至没有, 这样极易会从外界环境中吸收杂质,如颗粒,挥发性有机物、细菌及其他污染物等,也可能从低级塑料和玻璃制造的储水器中吸收化学溶出物污染水质,还可以溶解空气中的二氧化碳,形成碳酸。 碳酸是一种弱酸,但由于超纯水中无任何主导型的相对强酸、强碱、共轭酸、共轭碱,碳酸就成为了唯一主导型的弱酸,也是唯一H+离子的来源(忽略掉H2O的解离)。 CO2(g)+H2O(l) ↹ H2CO3(l) 当超纯水开始曝露在大气下时,二氧化碳的溶解就会无可避免的持续下去,我们可以用电阻率的变化来监测这个过程。实践证明15MΩ.cm以上的超纯水暴露在空气中1个小时后水质就会下降至4MΩ.cm左右。 所以,超纯水**能现场使用,任何方式的贮存或久放,除了会有容器本身造成的污染外,空气中的悬浮粉尘、挥发性有机物、微生物等污染及二氧化碳造成的电阻率下降,pH下降都是无法避免的。另外,久存的超纯水,TOC (总有机碳)及微生物也都有快速升高的隐忧,超纯水**还是得即取即用。 关于上海乐枫生物科技有限公司 上海乐枫专业从事高端水纯化和实验室分离纯化产品的研发、设计和制造,致力于,为生命科学和生物技术提供精锐品质、高附加值的创新产品。乐枫产品线包括实验室纯水系统、密理博纯水兼容耗材和实验室分离纯化产品。成立十年,乐枫创立出了自己的品牌RephiLe(瑞枫),拥有30多项专利和多个软件著作权。产品销往全球近90个国家和地区。 更多 RephiLe 产品信息,请登陆:www.rephile.cn RephiLe 企业微信名:乐枫纯水