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网红靶向制冷超低温冰箱的突出优势
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
在前两期的《礼赞70周年》系列报道中，小编为大家讲述了国产第一台超低温冰箱和行业量产上市、温度最低的超低温冰箱的诞生！由此引发了一众粉丝对于这两款产品通用的制冷技术——靶向制冷的浓厚兴趣！ 靶向制冷，2006年荣获国家技术发明二等奖。它使用深冷混合制冷工质，让不同制冷工质以“接力赛”的形式，在不同的样本储存温区发挥作用，最高效率的保证储存箱达到所需的存储温度，确保了使用此制冷技术的超低温冰箱具备高效制冷、安全稳定和节能环保等突出优势！ 那么，这项具有自主知识产权的超低温制冷技术，除了孕育了国产第一台超低温和行业温度最低的极低温储存箱外，还催生了哪些刷新行业记录的产品呢？ 今天，小编要为大家讲述的便是—全球容积最大的超低温冰箱DW-HL1008的故事！ 2017年4月，美菱生物医疗曾报道，全球首台，1000L+超大容积的-86℃超低温冷冻储存箱落户四川宜宾学院！这标志着了，国产超低温技术在储存容积方面，又向前迈出了一大步！道理和上篇所提到的，仅15℃之差却禁锢了科研人员的脚步一般，超低温产品要兼顾容积和稳定性，对于制冷方式、制冷材质和工艺等方面提出了更高的要求！当我们介绍DW-HL1008时，通常会说道：“这是我们全球量产上市容积最大的超低温产品”，但1008的优点，“岂止于大”！ 继第一台1008升超低温冰箱落户宜宾学院后，DW-HL1008陆陆续续进入了中国食品药品检定研究院、国家畜牧兽医总站和拉萨市城关区疾控中心以及济南市妇幼保健院等单位，获得了用户的广泛认可！ 美菱生物医疗将继续潜心研究更多安全、可靠的生物医疗产品，服务千万医疗、高校和科研等单位！正如做《礼赞70周年》系列报道的初衷一般，我们期待与全球更多用户一同见证国产超低温技术的成长、腾飞，也想用最前沿的科技成果献礼祖国70周年生日！ 延伸推荐： -86℃超低温冷冻储存箱DW-HL1008 更多产品信息请点击：www.zkmeiling.com
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量子产率超过90％荧光标记的最强荧光——藻胆蛋白
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
藻胆蛋白是源自微藻和蓝细菌的光合作用光捕获蛋白家族。这些蛋白质具有共价连接的线性四吡咯基团，称为藻胆素，其在捕获光能中起关键作用。在微藻和蓝细菌中，由这些藻胆素吸收的能量通过荧光共振能量转移（FRET）有效地转移到叶绿素色素用于光合作用反应。 与化学合成荧光染料相比，藻胆蛋白由于其相对高的荧光量子产率和消光系数而发出强烈的荧光信号。因为它们的荧光不被生物分子猝灭，所以藻胆蛋白可以在许多应用中用作有价值的荧光标签。与生物分子（例如免疫球蛋白，蛋白A或链霉抗生物素蛋白）缀合的藻胆蛋白已经在流式细胞术，荧光激活细胞分选（FACS），组织化学，成像和有限程度的活性氧物种检测中取得了巨大成功。目前市面上最主要两种类型的藻胆蛋白是的藻红蛋白（PE）和别藻蓝蛋白（APC）。 藻红蛋白（PE） PE（2558）显示出非常明亮的黄橙色荧光，消光系数（ε）为1,960,000cm -1 M -1 ，量子产率（Φ）为0.84。相比于Cy3® （141） 的消光系数是150000 M -1 cm -1 和量子产率（Φ）为0.24的，PE荧光强度明显强很多。 藻红蛋白有两种形式，从红藻（RhodophytaI）中分离的R-藻红蛋白（R-PE）和从红毛菜目（Bangiales）中分离的B-藻红蛋白（B-PE）。B-PE和R-PE均由三种类型的亚基组成：α（~20 kDa），β（~20 kDa）和γ（~30 kDa）。虽然它们具有相似的亚基结构，但由于它们的亚基的发色团含量不同导致其吸收峰的相对强度产生差异。 R-PE和B-PE的吸光度和发射光谱的比较 别藻蓝蛋白（APC） APC（2554）呈现明亮的红色荧光，消光系数为700,000 M -1 cm -1 ，量子产率（Φ）为0.68，相比于Cy5® （151）（消光系数ε=250000 M -1 cm -1，量子产率（Φ= 0.20），APC荧光亮度明显强很多。 APC的激发和发射光谱 属性 R-PE B-PE APC 共同的亚基 （αβ）6个 γ （αβ）6个 γ （αβ）3 MW 240000 240000 105000 Ex 565nm 545nm 651nm
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猴分泌型免疫球蛋白ELISA试剂盒说明书
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
猴分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA试剂盒注意事项 ．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡5-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未 用完，板条应装入密封袋中保存。 2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间zui好 控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4．请每次测定的同时做标准曲线，zui好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值 大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计 算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。 5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6．底物请避光保存。 7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9．本试剂不同批号组分不得混用。
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FDA和NIST对细胞**中的细胞计数
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
近年来，由于细胞**方法的兴起，人们日益需求能够高质量、稳健、有效进行细胞表征测定的方法。细胞计数，作为细胞疗法中最基础的检测项目，现今需要更高的检测可信度。2017年4月，美国国家标准与技术研究院（NIST）&食品与药物管理局（FDA）共同举办了一场专注于细胞计数的研讨会，聚焦于选择、设计和验证细胞计数方法，以及如何得到充分的计量保证。近50位来自于工业界、学术界和政府监管机构的专家参与了研讨会。Nexcelom Bioscience作为为数不多的受邀细胞计数设备制造商之一列席参加了本次会议，与业界专家们共同讨论细胞**中关于细胞计数的各种问题。本文总结了此次会议的讨论重点。 研讨会的总体主题：我们需要根据细胞样品的属性，细胞计数的目的和要求，来选择适合目的（fit-for purpose）的测量方法。例如，药物筛选和细胞**产品生产与放行过程中的细胞计数要求会有显著不同。Fit-for purpose是指选择的方法是否适合细胞计数的预期目的。理想的适用性需要满足两方面的要求，一是能解决生物学问题，二是获得的数据质量（灵敏度、精密度、准确度）足够好，足以支持下游决策。一个更标准化的设计、限定和验证符合fit-for purpose原则的细胞计数方法的流程，将加速产品的开发和转化。 研讨会上讨论的主要内容： 细胞计数测量过程 细胞计数遵循相同的常规步骤：（i）样品准备，（ii）手工计数或使用仪器设备的自动计数，（iii）数据分析（如图1）。 Figure 1. General cell counting measurement process (Adapted from Lin-Gibson et al. Bioinsights, 2016). 测量过程中的很多方面都可能给结果带来显著的可变性。此外作为测量过程中“输入”的细胞样品，属性可能会有大范围的波动，也会给计数结果带来显著的可变性。细胞样品本身就很复杂，具有一系列稳定或者变化的性质 - 样品配方（如培养基组分）、成分（如不同细胞类型和功能）和固有的生物学可变性（如供体变化和细胞状态）。认识到细胞计数过程和细胞样品相关
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扫描电镜低加速电压成像
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
扫描电镜的加速电压与束流强度对成像有着决定性的影响。 通常来说，操作人员更愿意使用更高的加速电压去成像，当加速电压较大时，信噪比更好，分辨率更高，更容易得到“清晰”的图像。但低加速电压却是当今扫描电镜的发展趋势，这是什么原因呢？今天，这篇文章将围绕“低加速电压成像”展开讨论。 电子束与样品相互作用将会激发出多种电子信号，包括背散射电子（BSE）、二次电子（SE）等。二次电子（SE）主要表征样品的表面形貌信息，激发深度一般低于 10nm，主要表征样品的表面形貌信息。 当使用较高加速电压去观测样品，二次电子来自样品表面 5~10nm 范围，最表层的形貌被削弱，甚至掩盖；而用低加速电压观测样品时，由于入射电子束与样品的相互作用小，信号更多来源于材料的表面，加速电压越低，观测的形貌效果越接近表层，且低加速电压对样品的损伤也较小。 现在，通过几组照片，让大家更好地理解低加速电压成像的优势： 样品为金项链在不同加速电压（5kV 与 15kV）下的扫描电镜图像，当加速电压为 5kV 时，金项链的孔洞、裂纹等缺陷得以体现，具有更多的表面细节，而加速电压为 15kV 时，表面更为平整。 石墨颗粒在不同加速电压（5kV、10kV、15kV）下的三张照片：5kV 时的束流穿透是最弱的，展示了最多的结构信息，具有更好的形貌衬度。 陶瓷在不同加速电压（5kV、15kV）下的两张照片： 加速电压为 5kV 时，可以看到烧结陶瓷的缺陷。 样品是泡沫聚苯乙烯在不同加速电压（5kV、15kV）下的两张照片，对于轻元素样品（高分子材料等），低加速电压可以减少对样品的损伤。
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表面活性剂与表面相互作用的时间分辨分析
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
表面活性剂与表面相互作用的时间分辨分析 表面活性剂是许多涉及表面活性的产品和工艺过程中的关键组分，在此类应用中，表面活性剂与表面相互作用的动力学至关重要。在这里，我们展示了如何以时间分辨的方式在纳米尺度上分析表面活性剂与表面的相互作用。 表面活性剂在表面吸附的监测和定量 在许多产品和工艺过程中，如洗涤剂和清洁剂、药剂配方、石油回收、CMP以及采矿中，表面活性剂和表面的相互作用的动态动力学对其应用至关重要。因此，在纳米尺度上了解这些过程是非常有意义的。本研究采用表面敏感实时技术QSense QCM-D来表征表面活性剂的吸附行为。分析了两种不同的表面活性剂：Triton-X和ßOG。QCM-D测量的重点是分析: 表面活性剂的吸附动力学 表面活性剂的吸附量 表面活性剂与表面相互作用的稳定性 实验设置： 表面活性剂：Triton X-100和Octyl-β-D-glucoside (ßOG) 芯片表面：金 缓冲溶液：PBS pH: 7.4 两种表面活性剂之间的表面相互作用动力学的差异 如图1所示结果，Triton X-100和ßOG均吸附在表面上。 但是，两者之间的吸附速率不同，即使Triton X-100的浓度更低，但是它达到饱和也比ßOG快。 结果还表明，ßOG形成的膜层比Triton X-100厚，冲洗后残留在芯片表面的ßOG比Triton X-100多。 图1. 表面活性剂Triton X-100和ßOG吸附到传感器表面过程中，时间分辨的厚度变化。 时间分辨表面相互作用分析的主要结论: Triton X-100的吸附速度快于βOG βOG形成柔软的水化膜 Triton X-100形成了刚性薄膜 βOG比Triton-X形成的膜厚 结论： 在一些产品和工艺过程中，表面活性剂与表面的相互作用动力学是很重要的，因此在纳米尺度上了解它至关重要。QCM-D分析提供了在各种不同的底物和实验条件下表面活性剂与表面相互作用过程的信息。通过这种表面活性剂与表面相互作用的定量测量，可以得出关于表面活性剂在不同应用中的适用性结论。 更多详情请下载附件研究案例。
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小小转印海绵垫对Western Blot结果的重要性
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
您上一次何时更换的转印海绵垫？答案可能是“从不”。因为如果转印有效，为什么要更换？只有当海绵变成灰色和块状时，才会想起来更换。 但是具有多年Western Blot经验的Azure技术专家对定期更换转印海绵垫给出了必要性的解释，我们来具体看一看： ★ 为什么更换海绵垫很重要？★ 转印问题的常见根源是三明治结构的松紧度。三明治结构一定要紧！请定期更换转印海绵垫，以确保实验结果的准确性。使用额外的滤纸来填补海绵的磨损，可能会导致传输不一致。 我们都会定期更换海绵垫，因为它们会吸收污染物，随着时间的推移，转印海绵垫也会被污染。使用干净的海绵垫对荧光应用尤为关键，因为这些污染物会产生自发荧光，从而导致高背景。 ★ 多久更换一次？★ 更换的频率取决于您做蛋白Western Blot的频率。如果您在繁忙的实验室中工作，并且有许多Western Blot实验，**每月更换一次海绵。 ★ 什么情况下需要更换？★ 如果您的实验没有其他改变，但结果在您的预料之外，海绵垫可能是罪魁祸首。破损的海绵垫可能导致转印不一致，信号减弱以及蛋白的消失。 更多Western Blot的相关内容，可以关注微信公众号“Azure蛋白印象”进行查看！
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为小鼠子孙满堂助力--IVF VS 自然合笼
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
同学们有木有经历过小鼠繁殖了好几代目标小鼠的数量却一直达不到实验需求的情况？遇没遇到过实验室某个传了许多代的小鼠种群数量却越来越少，最后只有一只独苗的情况？ 碰到这种自然繁育难题的时候，IVF(In vitro fertilization)技术就成为获得更多小鼠和稳定种群的最佳方式。所谓IVF就是将雌雄配子在体外受精并植入假孕母鼠体内获得子代小鼠的技术。 技术优势 通常的自然繁育方式是自然合笼，与自然合笼繁殖相比，IVF具有以下几个优势： 其实IVF对自然合笼的优势，我们从二者的繁育方案也能窥见一斑。以2对杂合子起始扩繁16对杂合子为例： IVF方案 自然合笼方案 我们可以看到，通过IVF的繁殖方式，经过一轮繁殖只需要2对杂合雄鼠就可以得到目的数量的子代；而对比自然合笼方法，同样两只突变雄鼠，繁殖时间多了将近半年。因此，IVF 作为一种优秀的代养繁殖手段应用在多种繁殖项目中。 操作流程 说过了IVF的优势，我们再简单和大家聊聊IVF的操作流程。 IVF操作具体分四步： 体外受精用培养皿准备 实验开始前一天在35 mm培养皿中加入2个200 μL TYH培养基液滴 精子的采集 (1) 将符合要求的性成熟（8周以上）的雄鼠颈椎脱臼处死，取出附睾上体尾部，去除脂肪与血迹后，置于一个TYH液滴内。 (2) 利用眼科剪在液滴内横断附睾尾，当精子充分游离出附睾尾后，将组织从液滴内取出，将培养皿置于培养箱。 图1. 雄鼠取精操作 卵母细胞的收集 处死超排后的雌鼠，取出两侧的输卵管，置入培养皿取出卵丘细胞团放入200 μL TYH培养基。 精卵混合 用10 μL移液器从精子滴吸取获能后的精子，加到卵子液滴中，根据卵团大小情况以及精子的活力每滴加8 μL左右的精子。将精卵混合后，把培养皿置于培养箱中培养。 体外受精完成后将胚胎移入假孕母鼠子宫，21天后小鼠就会出生了。 图2. 胚胎移植操作 今天的小鼠IVF的知识就跟大家聊到这里啦。百奥赛图依托海门动物中心，致力于为您提供更好的实验动物
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百变小鼠RenMab创造全人抗体
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
全人抗体RenMab小鼠能给抗体药研发带来什么？ 大约5、6年前，百奥赛图决定开发一款全人抗体人源化小鼠。 做这种小鼠有两种策略：第一种是“KO + transgenic”策略， 是先将小鼠自身的抗体基因敲除掉，然后通过转基因的方式将人的一段抗体基因随机插入到小鼠的染色体上。第二种是“原位替换”策略 (in situreplacement)，是用人的抗体基因将小鼠的抗体基因进行原位替换, 也就是人的抗体基因占据了本该小鼠自己抗体基因在染色体上的家（鸠占鹊巢）。 百奥赛图在开发RenMab时，采取的是 “Hard模式”，即原位替换策略（见下图）。很多文献已经证明，如果Fc区域也替换成人的序列，会导致抗体亲和力不够，所以我们只是替换了抗体轻重链的抗原结合区域。开发过程采用了全新的技术途径，由国际著名专利律师事务所给我们出的法律意见（FTO）表明，百奥赛图在世界范围内拥有RenMab小鼠的全部专利，可以放心使用。 百奥赛图全人抗体RenMab小鼠设计策略 RenMab小鼠免疫系统发育健全，免疫反应完全正常。实际上RenMab 小鼠健康快乐，在各种生理指标上都展示出了傲鼠成绩，就连传宗接代的能力也丝毫不亚于普通小鼠。由于RenMab携带完整的人重链VDJ和轻链VJ区域， 所以，抗原免疫RenMab小鼠后，可以获得zui全多样性的全人单克隆抗体。 将RenMab和gene-targeting结合起来，让抗体开发更强大 有些蛋白人鼠之间氨基酸序列同源性太高，还有像GPCR这样的靶点，要拿到好抗体非常不容易，是很多药企抗体研发中的“pain 点”。为此，百奥赛图正在谋划一件大事，就是在RenMab小鼠上，分别敲除1000多个潜在抗体靶点（非致死基因），做成一个“靶点敲除小鼠library”。这样，想做抗体药的客户可以先在这个library里查查，是否自己感兴趣的靶点已经在 RenMab小鼠上被敲除了 。 如果靶点在RenMab上已经被敲除了，我们就可以在免疫RenMab的时候用“人”蛋白，而在做杂交瘤筛选的时候用“鼠”蛋白，这就有可能筛选出同时识别“人”和“鼠”蛋白、且有相近亲和力
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Agrisera植物病原体相关抗体“集锦”
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
植物病原体（Plant Pathogens）是能寄生于植物体并导致侵染性病害发生的生物，多为异养型的非专性寄生物。主要有真菌、细菌、病毒、线虫等。控制植物病害对粮食生产至关重要，它在农业使用土地，水，燃料和其他投入方面带来了重大问题。 据估计，在比较发达的地区和许多作物品种中，病害通常每年使作物产量减少10%，而在较不发达的地区，病害造成的产量损失往往超过20%。需要在植物病理学方面不断取得进展，以改进疾病控制，并跟上由植物病原体的不断进化以及农业实践的变化所造成的疾病压力的变化。 植物病害给全世界农民造成重大经济损失。据联合国粮农组织估计，大约25%的农作物损失是由病虫害造成的。为了解决这个问题，需要新的方法来及早发现病虫害，例如能够检测植物气味和光谱的新型传感器以及能够诊断植物健康和新陈代谢的生物光子学。 为了助力广大科研工作者对植物病原体的研究，艾美捷科技作为专业的生命科学领域解决方案供应商，为您推荐Agrisera品牌的植物病原体相关抗体。Agrisera提供了全面的经过验证的高质量抗体，在许多植物物种中具有反应性，并在许多科学文章中被引用。 真菌： 产品名称 产品货号 应用类型 Ergotamine, Total IgG (0.2 mg) AS11 1650 ELISA Ergotamine, Total IgG (1 mg) AS11 1673 ELISA SOBIR1 | Suppressor of BIR1 (chicken antibody) AS16 3959 Co-IP，WB SOBIR1 | Suppressor of BIR1 (rabbit antibody) AS16 3204 WB 注解： Ergotamine 麦角胺 除草剂： 产品名称 产品货号 应用类型 Dinitro aromates, Serum (0.1 ml) AS11 1643 ELISA Dinitro aromates, Total IgG (0.2 mg) AS11 1665 ELISA JAR1 | Jasmonic acid-amido synthetase JAR1 AS16 3688 WB Triazine, Serum (0.1 ml) AS11 1637 ELIS
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RNA编辑工具的进化之路
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
RNA作为以DNA单链为模板的遗传信息载体，其编辑相比DNA编辑而言，由于不会永久改变基因组，因此在安全性上有着不言而喻的优势。然而相对于DNA编辑，靶向RNA的编辑还没完全被大众熟悉，其实从上个世纪90年代起，对RNA编辑的自然过程已有了较多的认识。近年来也逐渐开始进化成为真正的RNA“编辑器”，并且已进入一个快速前进的轨道，上一期已为大家介绍了自然状态下RNA在翻译前的调节过程及操作原理，本期具体看看这些神奇的RNA编辑工具。 DNA和RNA的编辑最新发展是基于对ADAR蛋白以及CRISPR技术相关的酶的研究。对这些酶的深入认识为有效地操纵特定的分子特征以测试其功能开辟了新的机会。从整体上来划分，我们可以把RNA编辑（操作）工具分为两大类，其实也就是两大类酶复合物。这两类工具在不同的角度对RNA进行“编辑”，大大拓宽了我们对RNA进行操作的能力。 1.一种是RNA效应元件，这些效应元件主要是可以对RNA进行识别，靶向与切割，这种“编辑”是一种较为宽泛意义上的编辑； 2.另一种可称为单碱基RNA编辑器，这类编辑器主要依托于ADAR蛋白或ADAR蛋白的变体，可以在单个碱基尺度上完成RNA水平上的“A-to-I”或“C-to-U”，并且具有较强的单碱基突变型遗传疾病的**潜力。 RNA效应元件的开发 如小编之前所说，RNA效应元件可以对RNA进行识别，靶向与切割。看到这几个词，大家或许很快就想到了我们以CRISPR/Cas为代表的基因编辑工具。确实，在CRISPR/Cas诞生之后，科学家们也在一直思考，是否可以将基于Cas蛋白结合DNA的一些特性与应用转移至RNA上。而正是在这样的想法催生下，基于CRISPR的RNA效应物诞生了。接下来就一起看看其中的代表吧。 1. RCas9 命名：RCas9，顾名思义，就是RNA靶向的Cas9（RNA-targeting Cas9） 研究团队：基因编辑技术研究的领军人物Jennifer Doudna的团队于2014年开发得到 [1] 原理：利用Cas9可识别与结合PAM序列的原理，设计了一种被称为PAMmers的PAM递呈寡核苷酸，可以让Cas9特异
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分析细胞鉴定金标准-STR（Short TandemRepeat）短串联重复序列
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
STR（Short TandemRepeat，短串联重复序列）分析已被ICLAC、ATCC等权威机构作为金标准应用于细胞鉴定。由于目前使用错误细胞情况非常严重，越来越多的杂志要求在投稿时提供细胞STR分析数据。 经常有小伙伴问小编STR鉴定的结果要怎么看，检测的结果代表的是什么意思？ 今天来给大家梳理解析下STR鉴定结果怎么看。 STR检测流程 首先了解下STR检测流程，提取细胞DNA, 进行PCR扩增，扩增产物进行测序，然后进行结果分析。详细流程如下： ▲图1 STR检测流程 * Dr.Cell 采用的细胞STR鉴定方法完全符合美国国家标准局（NIST）颁布的细胞鉴定标准-ANSI/ATCC ASN-0002-2011, 并且在中国CMA认证与司法鉴定许可的实验室进行检测。 2.STR位点基因分型结果 完整的细胞STR检测报告请查阅（STR Report-Sample），报告上会列出受检细胞系STR基因分型结果附表（图2），表格中将列出所有实际检测位点信息。第2列“Sample”为样本检测得到的STR位点信息, 该结果是根据实际PCR扩增后检测到的片段长度得到的数据信息。第3列为ATCC、DSMZ等数据库中标准细胞STR位点信息。数据库中常规提供9个位点信息，即 Amelogenin, CSF1PO, D13S317, D16S539, D5S818, D7S820, THO1, TPOX, vWA。 ▲图2 STR基因分型结果 STR位点基因分型结果峰图 STR位点基因分型结果峰图 在报告中会给出受检细胞系的STR检测结果峰图（图3），该结果是根据实际PCR扩增后检测到的片段长度和分型信息。位点信息与表1（图2）相同。 ▲图3 STR基因分型结果峰图 *STR: 短串联重复序列（short tandem repeats，STR）也称微卫星DNA（microsatellite DNA）, 通常是基因组中由1~6个碱基单元组成的一段DNA重复序列，由于核心单位重复数目在个体间呈高度变异性并且数量丰富，构成了STR基因座的遗传多态性。 * 纯合子：Homozygote，指同源染色体在同一基因位点上的两个等位基因相同。即显示单个峰。 * 杂合子：Heterozygote，指同源染色体在同一基因位点上的两个等位基因不相同。即显
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细胞形态异常，鱼骨图来帮忙（六）
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
不知不觉 我们的鱼骨图分析已经更新到最后一期啦~ 今天即将帮大家分析 可能性最小但也可能因忽视而导致 细胞培养形态异常的原因 在分析这部分之前 小编带领大家再回顾一下我们之前文章 鱼骨图将细胞形态异常的原因划分成了以下六类 （点击相应模块即可查看往期内容噢） 还不清楚？看它： 欢迎去看往期文章噢~ 接下来我们即将分析鱼骨图的最后一部分---培养耗材 移液管 不同细胞株分盘时需要更换一次性枪头，移液管，以免造成交叉污染。 解决方案： 作为一种低概率事件，不同类型的耗材其未达到灭菌（即可能含菌）的概率1/1,000-1/1,000,000。 这种随机发生的低概率事件是最难追踪调查与预防的，所以在做实验之前需要提前想到并且注意。 培养瓶 培养瓶属于一次性耗材，重复使用将可能造成细胞污染或是细胞无法贴盘、老化、过度活化等等不稳定结果。 塑料耗材从模具取下时可能会带下脱模剂（如高粘度聚硅氧烷、硅油等），影响到细胞生长。 大部分生产耗材车间不是洁净厂房，耗材有可能会夹带异物。 解决方案： 请考察并选用品质稳定，质量达标的耗材，并要求生产商提供测试数据报告。 培养皿/培养孔盘 质量较差的培养耗材底面在显微放大观察下可能凹凸不平，造成细胞分散的贴壁不一致，在凹处形成聚集现象。 解决方案： 请考察并选用品质稳定，质量达标的耗材，并要求生产商提供测试数据报告。 关注微信公众号 可留言或私信我们 BI中国市场部：上海逍鹏生物科技有限公司 产品咨询：021-58785545-8006, 18917190011 技术支持：400-820-3979 了解详细信息可戳原文 原文请点击：阅读详情
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抗炎因子IL-10的功能与作用
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
哈喽，艾瑞巴蒂~~许久不见甚是想念，还记得我们百奥赛图知识扩展课堂上期的内容吗？（点击回顾）今天的大风正式宣告了冬天的来临，各位小主要记得添衣哦。 在这大风呼啸的初冬时节，知识扩展课堂为大家带来了一种抗炎因子--白细胞介素10(IL-10)，下边我们一起来看看这种免疫调节的重要细胞因子吧。 功能简介 白细胞介素10 (IL-10)，也被称为人类细胞因子合成抑制因子(CSIF)，是一种抗炎细胞因子。在人类中，白细胞介素10是由IL10基因编码的。IL-10信号通过两个IL10同源二聚体与一个由两个IL-10受体-1和两个IL-10受体-2蛋白组成的异源四聚体受体复合物传递。下游通过JAK1和Tyk2分别磷酸化IL-10受体1+IL-10受体2的胞质尾端来诱导STAT3信号传递。 IL10通过活化的巨噬细胞来抑制炎症因子如TNF、IL-6、IL-1的表达。IL-10是一种具有重要免疫调节功能的多效细胞因子，主要由抗原呈递细胞如活化的 T 细胞、单核细胞、B 细胞和巨噬细胞分泌。IL10可以影响免疫系统中许多细胞类型的活动。 IL-10与各种癌症如伯基特淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤和非小细胞肺癌的生存、增殖和抗凋亡活性相关。 IL-10 signaling pathway[1] IL-10相关的主要在研药物见下表，其主要是形式有IL-10融合蛋白、聚乙二醇化IL-10和腺病毒三种，适应症包括肿瘤、肠炎，只有Pegilodecakin进入临床阶段。Pegilodecakin抗肿瘤的原理是IL-10能够促进人体免疫系统中称为CD8+ T免疫细胞的存活、扩增和杀伤力（细胞毒性）。CD8+ T细胞可以识别和杀死癌细胞，促进增加肿瘤内CD8+ T细胞水平，可能改善患者的预后和生存。 表1、IL-10相关的主要在研药物 品系信息 验证数据 1.1 RT-PCR 图1. 纯合B-hIL10 mice脾细胞中可检测到人源IL10 mRNA，检测不到鼠源IL10 mRNA。 1.2 ELISA检测蛋白表达 图2. 野生型C57BL/6mice和纯合B-hIL10 mice血清ELISA检测 LPS刺激后，野生型C57BL/6小鼠仅表达鼠源IL10，B-hIL10小鼠仅表达人源IL10.(n=
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单细胞转录组测序（scRNA-seq）的十个问答解惑
作者：德尔塔 日期：2022-04-18
高通量组学研究已经发展了快20年，从最开始的基因芯片到二代测序，从编码基因到lncRNA，circRNA，从三代测序的出现到单细胞组学研究的火热，相信在这个领域中共事的小伙伴们都深有感触。大家都知道高通量单细胞测序现在很火，但是不是所有的研究都适用，是不是所有的样本都能进行单细胞测序呢？本期小编带来单细胞测序Q&A。 Q1：为什么要进行单细胞测序？ A1：单细胞，就是从单个细胞出发去做研究。细胞是组成生命体的最基本单元，从基本单元出发去研究，才能从小到大，以点到面，从局部到整体去理解生物学问题。曾经有朋友给我看了下面的图片，形象地展示了从Bulk研究到单细胞研究的必要性。 Q2：单细胞测序能做哪些层面的检测？ A2：单细胞研究现在最多的是转录组研究，称为scRNA-seq的方法进行单细胞转录组测序。当然，虽然已发表的研究很多，但可实现的检测还有染色质可接近性检测（chromatin accessibility，ATAC-seq）,CNV检测，免疫组库测序，表面蛋白检测。 Integrative single-cell analysis.Nat Rev Genet. 2019 Jan 29. Q3：高通量单细胞转录组测序的样本有什么要求？ A3：要想成功做成单细胞转录组测序，第一个要求是细胞要是活的，现有商用平台对细胞活率要求较高，**能达到90%，原代细胞不能低于70%。另外，高通量检测需要原始提供的细胞数量足够，如果一次实验最终检测到成千上万个细胞，需提供高质量细胞量达到10的5次方以上。同时，细胞形态大小也有要求，一般细胞直径在几十微米以内，**40以下。植物细胞需要去除细胞壁，制备原生质体。 Q4: 不满足上述细胞样本要求，还能做scRNA-seq吗？ A4: 可以。由于实验样本特殊性，不是所有的细胞都能满足现有测序要求，比如神经细胞等。这种情况下，进行细胞核提取，进行核转录组检测是备选方案。当然，细胞核的转录组检测不能反应所有的细胞信息，但是现有的研究已证明核RNA也能反应细胞特征。 Science. 2019 May 17;364(6441):685-689.
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