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琼脂糖的那些事
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
琼脂糖是线性的多聚物,基本结构是1,3连结的β-D-半乳糖和1,4连结的3,6-内醚-L-半乳糖交替连接起来的长链 。琼脂果胶是由许多更小的分子组成的异质混合物。琼脂糖在水中一般加热到90℃以上溶解,温度下降到35-40℃时形成良好的半固体状的凝胶,这是它具有多种用途的主要特征和基础。琼脂糖凝胶性能通常用凝胶强度表示。强度越高,凝胶性能越好。 琼脂糖Agarose,缩写为AG,是琼脂中不带电荷的中性组成成份,也译为琼胶素或琼胶糖。琼胶糖化学结构是由1,3连结的β-D-半乳糖和1,4连结的3,6-内醚-L-半乳糖交替连接起来的长链构成 。 来源于红藻的多糖,其主要成分为多聚半乳糖,其中约70%为琼脂糖,30%为支链琼脂糖。琼脂糖具线型结构,由D-半乳糖和3,6-脱水半乳糖通过β-1,4和α-1,3连接交替形成重复双糖单位。支链琼脂糖则从β-1,3键分出另一链。 用热水从海藻抽提的物质约含40%琼脂。市售的琼脂(俗称洋菜)常呈片状或疏松绳索状,通常作食用胶质,药物包装剂或细菌培养基使用。纯制的琼脂糖常在生物化学实验室中,作为电泳、层析等技术中的半固体支持物,用于生物大分子或小分子物质的分离和分析。 琼脂,它的英文名为agar。这个词来源于马来语的agar-agar,意思是胶状物。又名琼胶、菜燕、冻粉,是一类从石花菜及其它红藻类(Rhodophyceae)植物提取出来的藻胶(phycocottoid),在我国及日本已有三百多年(1658年)的历史。中国人亦称为洋菜或冻粉。日本人称之为寒天(kanten),因为它在冬天收获。中国台湾人叫它菜燕,和燕窝的质感差不多。韩国人的叫法是??(不知道啥意思)。 琼脂作为一种独特的食品在我国已经有悠久的历史。它是从大型海洋藻类石花菜、紫菜、江篱等提取分离制成的,广泛应用于食品和生化等行业。我们常吃的果冻、冰淇淋、糕点、软糖、罐头、八宝粥中都含有琼脂。我国的山东、福建、广东、海南等拥有优越的海洋资源和气候条件,适宜大型海洋藻类的生长,是生产琼脂的主要地区,产品远销世界各地。 琼脂是由琼脂
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二甲基亚砜的信息检索
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
二甲基亚砜的定义是怎样的呢?二甲基亚砜(DMSO)是一种含硫有机化合物,分子式为(CH3)2SO,常温下为无色无臭的透明液体,是一种吸湿性的可燃液体。具有高极性、高沸点、热稳定性好、非质子、与水混溶的特性,能溶于乙醇、丙醇、苯和氯仿等大多数有机物,被誉为"万能溶剂"。 其存在的物化性质有: 1.无色粘稠液体。有吸湿性。能与水、乙醇、丙酮、乙醛、吡啶、乙酸乙酯、苯二甲酸二丁酯、二恶烷和芳烃化合物等任意互溶,不溶于乙炔以外的脂肪烃类化合物。二甲亚砜与酰氯类物质如氰尿酰氯、苯酰氯、乙酰氯、苯碘酰氯、亚硫酰氯、硫酰氯、PCl3等接触时,发生激烈的放热分解反应。与硝酸结合,生成(CH3)2SO·NHO3。 2.无色液体,可燃,几乎无臭,带有苦味。该品是极性高的有机溶剂,可与水以任意比例混合,除石油醚外,可溶解一般有机溶剂。在20℃时能吸收氯化氢30%(重量);二氧化氮30%(重量);二氧化硫65%(重量)。有强烈吸湿性,在20℃,当相对湿度为60%时,可从空气吸收相当于自身重量70%的水分。该品是弱氧化剂,不含水的二甲基亚砜对金属无腐蚀性。含水时对铁;铜等金属有腐蚀性,但对铝不腐蚀。对碱稳定。在酸存在时加热会产生少量的甲基硫醇;甲醛;二甲基硫;甲磺酸等化合物。在高温下有分解现象,遇氯能发生激烈反应,在空气中燃烧发出淡蓝色火焰。 化学性质:二甲亚砜还原生成甲硫醚。受强氧化剂作用氧化成二甲砜; 2.二甲亚砜与酰氯类物质如氰尿酰氯、苯酰氯、乙酰氯、苯碘酰氯、亚硫酰氯、硫酰氯、PCl3等接触时,发生激烈的放热分解反应。与硝酸结合,生成(CH3)2SO·NHO3。与碳酸钡作用可使二甲亚砜再生。与浓HI作用,生成二甲硫磺化合物。 3.二甲亚砜有吸水性,用前需要进行干燥处理。 其基本用途在于因氯化铬,MnCL4等过渡金属卤化物与KCl,氯化钠等卤化物在DMSO中有一定溶解度,故可以应用在有机电化学中。 二甲基亚砜广泛用作溶剂和反应试剂,特别是丙烯腈聚合反应中作加工溶剂和抽丝溶剂,作聚氨酯合成
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血清的保存方法
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
血清的保存应该注意以下几点:(1)生物学实验中需要长期保存的血清储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,预留体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。(2)热灭活是指56℃,30分钟加热已解冻的血清。生物学实验中加热过程中须规则摇晃均匀。此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活。除非,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量。补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞收缩,肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。(3)瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室温,待全部溶解后再分装。生物学实验中在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。(4)一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清。(5)血清中的沉淀物 絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量。可用离心3000rpm, 5分钟去除,也可不用处理。显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染。一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清。(6)切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量。
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【综述】肝星状细胞 与肝纤维化、肝癌研究相关性
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
肝星状细胞(Hepatic Stellate Cells, HSCs)作为肝脏合成细胞外基质的主要细胞群,不仅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等细胞外基质成分,还能合成一定量的胶原酶以维持正常的基底膜结构,还能通过其突起的收缩参与肝窦的微循环调节。肝损伤导致的HSCs的激活、增殖及转化是肝纤维化过程中的重要环节,因此肝星状细胞在探讨新的抗肝纤维化**措施,对降低慢性肝病的发生率和死亡率具有不可估量的理论意义。 图1.肝纤维化与肝脏类疾病 肝星状细胞是肝脏特有的一种非实质细胞,约占肝脏细胞总数的8%-13%,占肝非实质细胞总数的33%,占肝脏总体积的1.4%,为单层的贴壁生长型细胞,细胞呈星形,纺锤形,多边形,梭形,有伪足,细胞质内含较多脂滴,亦称肝贮脂细胞。肝星状细胞位于肝窦内皮细胞(SEC)和肝细胞之间Disse腔(图2),是细胞外基质(ECM)的主要来源细胞。 图2.正常和静息状态下HSC 在正常肝组织中HSC常处于静息状态。但是当肝脏受到物理、化学和微生物感染等病理因素刺激时HSC就会发生增殖活化转变为其活化形式—肌成纤维细胞(MFB),表现出明显的细胞增殖、收缩性增加、大量表达α—平滑肌动蛋白(α—SMA),胞浆中视黄醛减少和细胞膜受体增多等活化特点。 图3.HSC分泌细胞因子参与肝纤维化调节 肝纤维化是机体的一个创伤修复反应,损伤区域被大量的细胞外基质包裹,而HSC是细胞外基质的主要来源,所以HSC活化是肝纤维化的中心事件。HSC的激活为抗纤维化提供了潜在靶点**肝纤维化。另外HSC可以被肿瘤细胞诱导在其周围产生大量的生长因子、细胞趋化因子,有利于肿瘤细胞的增殖和侵袭(图3)。HSC可以分化为具有很强迁移能力的肌成纤维细胞,为肿瘤细胞的生长提供所需的微环境。目前,临床上单纯运用化疗药物**肝癌效果尚有限,相信随着肝星状细胞研究的更加深入,不久将来,将手术和肝星状靶向**相结合的综合**方法将会为临床肝癌的的**带来福音。 图4.大鼠HSC(来源:齐氏生物) 对HSC的**是阻止肝脏疾病纤
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天津大学张雁教授团队揭示噬菌体基因组中二氨基嘌呤取代腺嘌呤的广泛途径
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
北京康润诚业生物科技有限公司(GenStar)是一家从事生物技术产品研发、生产和销售的国家高新技术企业,总部位于北京市中关村生命科学园内,可提供高品质的PCR、qPCR、核酸纯化、DNA Marker、蛋白Marker、快速克隆表达载体、细胞产品、蛋白产品和生化试剂等多个系列千余种产品。GenStar-康润生物高质量的产品和优质的服务已经帮助全国数千家实验室的科研人员轻松完成了实验,结出了累累硕果,目前产品的SCI论文引用总数已达千余篇。GenStar-康润生物在广州、上海、天津和南京等主要城市设立了销售办事处,与清华大学、北京大学、中国农业大学、中科院动物所、中科院遗传所、中山大学、华南农业大学、中科院上海巴斯德所、中科院上海生化细胞所、西北农林科技大学、西安交通大学、天津大学、南开大学、南京大学、东南大学等百余所院校建立了良好的合作关系。同时在全国拥有40多家签约经销商,通过各地的经销商伙伴为广大科研和工业客户提供优质的产品、原料和技术服务。GenStar-康润生物专业的团队,优质的产品,丰富的经验,悉心的服务,就在您的身边。康润生物,伴您生命科学成功之路 !
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操作ELISA试剂盒时,实验室需求留意这几点
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
实验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制实验条件,待检样品应作一式二份,以确保实验作用的准确性。有时本底较高,阐明有非特异性反应,可选用羊血清、兔血清或BSA等封闭。在ELISA试剂盒当中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其间包含: 1. 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其方法可所以凹孔平板、试管、珠粒等。现在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在运用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,调查其显色反应是否均一性,据此判明其吸附功能是否良好。 2. 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体外表时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有必定影响,一般多选用4℃18~24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它实验条件相一同,调查阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。关于多数蛋白质来说一般为1~10μg/ml。 3. 酶符号抗体作业浓度的选择:首先用直接ELISA法进行开始效价的滴定(见酶符号抗体部份)。然后再固定其它条件或采纳“方阵法”(包被物、待检样品的参阅品及酶符号抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其作业浓度。 4. 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体有潜在的致癌作用,应留意防护。有条件者应运用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是现在较为满意的供氢体。ELISA试剂盒底物作用一段时间后,应参与强酸或强碱以停止反应。一般底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物运用液有必要新鲜配制,尤其是H2O2在临用前参与。本公司主营的产品有elisa试剂盒、生化试剂盒、抗体、重组蛋白、标准品、对照品、培养基、血清、酶、实验耗材、进口试剂及实验外包服务等。提供各种抗体、免疫学相关的检测
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MS培养基使用注意事项,及特点分析方案
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
MS是人名Murashige and Skoog的缩写。MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的,其特点是无机盐和离子浓度较高,是较稳定的离子平衡溶液,它的硝酸盐含量高,其养分的数量和比例合适,能满足植物细胞的营养和生理需要,因而适用范围比较广,多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。 基于此,这种培养基就用他们的名字来命名了。 MS培养基是目前使用zui普遍的培养基。其具有较高的无机盐浓度,能够保证组织生长所需的矿质营养还能加速愈伤组织的生长。由于配方中的离子浓度高,在配制、贮存和消毒等过程中,即使有些成分略有出入,也不会影响离子间的平衡。MS固体培养基可用于诱导愈伤组织,也可用于胚、茎段、茎尖及花药的培养,其液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显的成功。MS培养基的无机养分的数量和比例比较合适,足以满足植物细胞在营养上和生理上的需要。因此,一般情况下,不用再添加氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有机附加成分。和其它培养基的基本成分相比,MS培养基中的硝酸盐、钾和铵的含量高,这是它的显著特点。 MS培养基配方表: 注意事项: 1.母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是:每种母液中的几种成分称量完毕后,分别用少量的蒸馏水彻底溶解,然后再将它们混溶,zui后定容到1 L。 2.母液Ⅲ的配制方法是:将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中,边加热边不断搅拌使它们溶解,然后将两种溶液混合,并将pH调至5.5,zui后定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中。 3.MS培养基中还需要加入2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸(NAA)、6 苄基嘌呤(6BA)等植物生长调节物质,并且分别配成母液(0 1 mg/mL)。其配制方法是:分别称取这3种物质各10 mg,将2,4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶,将6BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解,溶解过程需要水浴加热,zui后分别定容至100 mL,即得质量浓度为0 1 mg/mL的母液
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血清在细胞培养中常见问题
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
⚑ 正常情况下,融化后血清的外观颜色应该是? 血清为动物来源,成分复杂,不同批次间会存在一些外观上的差别。一般情况下,它们的颜色可能是金黄色、红色、琥珀棕色或者是介于三者之间。 ⚑ 血清应如何保存? 未拆封的血清应存放于-15至-20℃,避免反复冻融。拆封后的血清应无菌分装成一次的用量并存放于-15至-20℃,在产品质量证书标识的效期内均可使用。2-8℃溶解后建议尽快使用。 ⚑ 血清的有效期是多久? 大部分康宁血清效期是5年,针对每个批次,请通过质检文件确定具体效期日期。 ⚑ 血清应如何融解? 从冰箱中取出血清,放于2-8℃融化,融化过程中不时旋转(swirling mix)混匀。充分融解后分装或平衡到室温后使用 ⚑ 为什么有时血清中出现絮状沉淀?是否需要去除?如何去除? 多种原因可能导致絮状沉淀的形成,最常见的原因之一是融化过程中,脂蛋白聚集所致。该现象一般不会影响产品质量。可以400g离心5分钟,取上清,然后过滤。根据需要选择合适的滤膜孔径,一般的是0.22um PES材质的滤膜。为避免滤膜阻塞,建议离心后取上清加入培养基内一起过滤而不是直接过滤血清。 ⚑ 为什么存放于冰箱中的血清会出现沉淀?如何避免该现象? 在2-8°C条件下存放,血清中的多种蛋白或脂蛋白会形成肉眼可见的沉淀,如血纤蛋白(fibrin),单体时处于溶解状态,在冻融过程中会发生聚集,形成肉眼可见的沉淀。但该现象一般不会影响血清的性能。可以400g离心5分钟,取上清,然后过滤。根据需要选择合适的滤膜孔径,一般的是0.22um PES材质的滤膜。为避免滤膜阻塞,建议离心后取上清加入培养基内一起过滤而不是直接过滤血清。为尽量避免出现上述现象,建议血清分装成一次性用量存于-15°至-20℃冰箱,避免反复冻融和融化后的血清在2-8°C条件下长时间放置。 ⚑ 血清是否需要做灭活处理? 这取决于您的应用。 灭活过程中,会导致血清中某些成分被破坏,如氨基酸,维生素,生长因子等。所以只有在您的实验对血清有特殊要求时,才会考
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关于新药研发中 宿主细胞蛋白 那些事
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
宿主细胞是生产诸如重组蛋白、抗体和疫苗类药物的上游材料,不同用途的药物会采用不同的宿主细胞,重组蛋白类药物常用的细胞有中国仓鼠卵巢细胞(CHO),新型疫苗常采用非洲绿猴肾细胞(Vero)、犬肾细胞 (MDCK)、昆虫细胞、人二倍体细胞,传统疫苗还会采用大肠杆菌、鸡胚等作为宿主细胞。 宿主细胞蛋白如果残留在药物制剂中,会引起人体的免疫应答——过敏反应,如:发热、水肿,甚至休克等。人体的免疫应答性质和效果,会受到HCPs的浓度、数量和个体免疫系统差异影响而不同。药物监管部门最关注患者用药的安全性,所以HCPs的监控变得越来越重要。作为药企来说,药物研发周期很长,成功率也很低,投入和产出不是直接划等号的,因此在药品研发的中后期,药企也会非常关注生产工艺设计过程中HCPs的控制。因为,药物中HCPs残留量会影响临床试验效果,国外曾有报道,由于药企开发的新药在临床实验中出现免疫反应,导致临床实验推迟、搁置或重新设计工艺,如:易普森公司,凝血因子9(IB1001) 临床实验在2012年被搁置,2017才获批。 药品即使被成功开发,但如果想进入不同国家的市场,还要达到当地药物监管部门的标准,所以药企都会遵照不同国家药典要求,严格建立HCP监控体系。中华人民共和国药典2010年版第三部就明确规定CHO细胞残余蛋白占总蛋白含量要小于0.05%以下;对Vero细胞残余蛋白会随不同产品而异,ELISA方法检测法每个剂量不高于2微克或4微克。美国FDA认为可以接受的范围为1-100/100万,即1-100个PPM。 当前,广泛被使用于HCP检测的方法是双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)。在药物研发中,通常会建立通用和专属的HCP ELISA方法。前期可以采用通用HCP ELISA试剂盒。到临床实验时,药企会采用专属试剂盒,即工艺特异HCP ELISA试剂盒,需要单独纯化HCP蛋白,免疫筛选抗体。 HCP ELISA的原理是先将HCP抗体包被酶标板,孵育待测样品,通过HCP抗体捕获和富集样品中HCPs,再加入与包被酶标板的抗体种属不同的,酶
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详细介绍一下连接酶分子生物学酶试剂
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
分子生物学(molecularbiology)是从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学。自20世纪50年代以来,分子生物学是生物学的前沿与生长点,其主要研究领域包括蛋白质体系、蛋白质—核酸体系(中心是分子遗传学)和蛋白质-脂质体系(即,生物膜)。1953年沃森、克里克提出DNA分子的双螺旋结构模型是分子生物学诞生的标志。 T4 DNA连接酶分子生物学酶试剂,DNA连接酶在辅助因子ATP的作用下,可催化双链DNA或RNA上的5'-磷酸末端和3'-羟基末端之间形成磷酸二酯键,可用于催化平末端或黏性末端之间的连接反应,也可修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口。在DNA片段与载体、Linker或Adaptor DNA的连接中具有广泛应用。 本产品提供了常规浓度和高浓度酶的规格,以满足不同使用者的实验需要。 产品名称 编号 规格 包装 单价 加入购物车 T4 DNA Ligase 80107S 20000U, 400U/μL ¥398.00 T4 DNA Ligase 80107L 100000U, 400U/μL ¥1698.00 T4 DNA Ligase(高浓度) 80107H S 100000U, 2000U/μL ¥1698.00 T4 DNA Ligase(高浓度) 80107H L 500000U, 2000U/μL ¥5998.00 T4 DNA连接酶分子生物学酶试剂 产品介绍1、活性单位定义:在20μl 1×T4 DNA连接酶反应缓冲液中,6μg λDNA/Hind III的酶切产物在16℃下反应30分钟,50%的DNA片段被连接所需的酶量定
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肿瘤标志物的来源有哪些?
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
肿瘤标志物又称肿瘤标记物,是指特征性存在于恶性肿瘤细胞,或由恶性肿瘤细胞异常产生的物质,或是宿主对肿瘤的刺激反应而产生的物质,并能反映肿瘤发生、发展,监测肿瘤对**反应的一类物质。肿瘤标志物存在于肿瘤患者的组织、体液和排泄物中,能够用免疫学、生物学及化学的方法检测到。肿瘤标志物的来源有哪些?①肿瘤细胞的代谢产物,如:糖酵解产物、组织多肽抗原、核酸分解产物。②分化紊乱的细胞基因产物,如:异位的ACTH片段,甲胎蛋白、癌胚抗原、胎儿同工酶。③肿瘤细胞坏死崩解释放进入血液循环的物质,主要是某些细胞骨架蛋白成分,如细胞角质素片段抗原21-1(Cyfra21-1),多胺类物质。④肿瘤宿主细胞的细胞反应性产物,如:VCA-IgA、EA-IgA。
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纳氏试剂的配置方法
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
纳氏试剂(Nessler)是指一种利用紫外-可见分光光度法原理用于测定空气中、水体中氨氮含量的试剂。配制方法有两种1、二氯化汞-碘化钾-氢氧化钾( HgCl2-KI-KOH)溶液称取 15.0 g 氢氧化钾( KOH),溶于 50 ml 水中,冷却至室温。称取 5.0 g 碘化钾( KI),溶于 10 ml 水中,在搅拌下,将 2.50 g 二氯化汞( HgCl2)粉末分多次加入碘化钾溶液中,直到溶液呈深黄色或出现淡红色沉淀溶解缓慢时,充分搅拌混合,并改为滴加二氯化汞饱和溶液,当出现少量朱红色沉淀不再溶解时,停止滴加。在搅拌下,将冷却的氢氧化钾溶液缓慢地加入到上述二氯化汞和碘化钾的混合液中,并稀释至100 ml,于暗处静置 24 h,倾出上清液,贮于聚乙烯瓶内,用橡皮塞或聚乙烯盖子盖紧,存放暗处,可稳定 1 个月。2 、-碘化钾-氢氧化钠( HgI2-KI-NaOH)溶液称取 16.0 g 氢氧化钠( NaOH),溶于 50 ml 水中,冷却至室温。称取 7.0 g 碘化钾( KI)和 10.0 g ( HgI2),溶于水中,然后将此溶液在搅拌下,缓慢加入到上述 50 ml 氢氧化钠溶液中,用水稀释至 100 ml。贮于聚乙烯瓶内,用橡皮塞或聚乙烯盖子盖紧,于暗处存放,有效期 1 年。
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常见的肿瘤标志物有哪些?
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
当体内出现癌症病灶时,在血液和尿液中会出现健康时几乎不会出现的特殊蛋白、酵素、荷尔蒙。体检中检测的这些特殊物质被称为肿瘤标志物。一般在日常体检中,基本都是通过高精度的血液和血清检测,来排查这些肿瘤标志物的。 那么常见的肿瘤标志物有哪些呢? PSA:对前列腺癌有特殊反应的肿瘤标志物。良性前列腺肥大、急性前列腺炎等,也可能出现高值。 CA125:发生卵巢癌、子宫癌、肝癌、胆囊癌、胰腺癌、胃癌时,会出现高值。子宫内膜异位症、子宫肌瘤、卵巢囊肿等良性疾病,或月经期、妊娠后期,也可能出现高值。 CEA:发生消化系统癌症(大肠、胃、胰腺、肝、胆管等癌症)、肺癌、甲状腺癌、乳腺癌、卵巢癌等时,会出现高值。肝硬化、慢性肝炎、胃溃疡、肺气肿等,大量吸烟的人群,也可能出现高值。 AFP:对肝细胞癌、转移性肝癌有特殊反应。肝硬化、肝炎妊娠后期,也可能出现高值。 CA19-9:对胰腺癌、胆囊(胆管)癌、卵巢癌特别敏感,会出现强烈高值。胃、唾液腺、支气管、前列腺、结肠、直肠、卵巢等部位癌症发生时,也可能出现高值。急慢性胰腺炎、慢性肝炎、肝硬化、糖尿病、良性妇科疾病等,也会出现高值。 抗P53抗体:对癌症的早期发现起到关键作用的肿瘤标志物。结合其他肿瘤标志物检测项目,可提高癌症的检出概率。 PIVKA-Ⅱ:对肝癌有特殊反应,癌症发生时会出现高值。当身体缺少维生素K,或出现肝脏疾病时,也会有类似反应。 Pro-GRP:肺癌(小细胞癌)的肿瘤标志物之一。 CYFRA:对消化器官癌、肺癌、乳腺癌、胰腺癌诊断非常有用。 CA15-3:乳腺癌标志物,卵巢、子宫、胰腺癌发生时也会上升。 SCC:血清肿瘤标志物。出现宫颈部、肺、食道、头颈部、尿路、性器官、皮肤等部位的鳞状细胞癌症时,会出现高值。 ST439 BCA225:均为乳腺癌肿瘤标志物。
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mNGS及古细菌DNA检测应用推荐PCR去污染试剂盒
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
mNGS及古细菌DNA检测应用推荐PCR去污染试剂盒 描述 在研究和诊断中,PCR是一种检测DNA是否存在的敏感方法。PCR中使用的聚合酶经常被E.coli DNA污染。当检测少量细菌DNA时,污染的DNA可能导致灵敏度降低和假阳性。其他污染源可能是dNTPs、缓冲体系、引物/探针,以及操作过程中引入的DNA污染。一般来说,对细菌的检测和分型采用16S或23S rDNA基因保守区段为靶点的广谱范围探针。该方法对细菌DNA污染非常敏感,而大多数Master mix和聚合酶中都发现细菌DNA的痕迹。当使用qPCR检测或定量少量的细菌DNA时,污染的E.coli DNA可能会导致假阳性结果。 为了解决这个问题,我们开发出PCR去污染试剂盒,既能去除Master mix中细菌DNA污染,又不影响PCR反应的灵敏度。此外,该试剂盒无RNase活性。 优势 1. 减少背景污染,提高目标基因检测下限; 2. 不影响PCR检测灵敏度; 3. 简单易用,操作方便。 应用 1. 去除PCR及RT-PCR的mastermix中E.coli内源DNA污染及其他DNA污染; 2. 用于终点PCR和探针依赖的qPCR; 3. 用于细菌检测及基因分型; 4. 用于古细菌DNA检测。 组分及特性 dsDNase:双链特异性DNA酶,去除Master mix、引物及探针等的污染DNA; DTT:60℃条件下,能够不可逆灭活dsDNase,确保模板DNA不被清除。 不降低反应灵敏度 DNA污染是高灵敏度应用面对的主要问题。这些应用,以低丰度DNA为目标检测基因,极易受到污染DNA的干扰。因此,任何影响PCR灵敏度的去除DNA污染的方法,都是不能使用的。 Figure 2. 用PCR去污染试剂盒处理/未处理的mastermix、5个10倍梯度稀释的gDNA和水(NTC)为模板进行qPCR检测。与NTC untreated组相比,NTC decontaminated组在45个cycle仍然没有信号,说明PCR去污染试剂盒能去除mastermix中的污染。PCR去污染试剂盒处理前/后数据相比,Cq值并没有明显改变,说明基本不影响反应灵敏度。 ArcticZymes Technologies成立于20世纪80年代后期,总部位于挪威。致
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Abbexa褪黑素ELISA试剂盒丨精确的褪黑素浓度分析
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
褪黑素被熟知的功能主要是可以改善睡眠质量(用量0.1~0.3mg),能缩短睡前觉醒时间和入睡时间,改善睡眠质量,睡眠中觉醒次数明显减少,浅睡阶段短,深睡阶段延长,次日早晨唤醒阈值下降。有较强的调整时差功能 。 褪黑素zui大的特点应该是,它是迄今发现的zui强的内源性自由基清除剂。褪黑素的基本功能就是参与抗氧化系统,防止细胞产生氧化损伤.在这方面,它的功效超过了已知的所有体内物质.新研究证明,MT是内分泌的总司令,它控制体内各种内分泌腺的活动。从而间接地控制我们全身的机能. 褪黑素的作用包括: 1.防止病变 由于MT很容易进入细胞,因此可担任保护细胞核DNA的任务。如果DNA受到损害就可能导致癌变。 如果血液中有足够的Mel,就不容易患癌症。 2.调整昼夜节律 褪黑素是一种诱导自然睡眠的体内激素,它通过调节人的自然睡眠而克服睡眠障碍,提高睡眠质量. 3.推迟老化 老年人的松果体逐渐缩小,分泌的Mel相应减少。体内各器官需要的Mel量不足,导致老化而生疾病。科学家称松果体为人体的“老化时钟”。我们从体外补充Mel,便可以拨回老化时钟了。 4.对中枢神经系统的调节作用 大量临床和实验研究显示,褪黑素作为内源性神经内分泌激素,对中枢神经系统有直接和间接地生理调节作用,对睡眠障碍、抑郁症和精神疾病具有**作用,并对神经细胞有保护作用。 5.对免疫系统的调节作用 神经内分泌和免疫系统是互相联系的,免疫系统和它的产物可改变神经内分泌的功能。 6.对心血管系统的调节作用 Mel是具有多种功能的光信号,通过其分泌的改变将环境光照周期的信息传递给体内有关的组织.使它们的功能活动适应外界的变化。因此,血清褪黑素分泌水平可反应一天中相应时刻和一年的相应季节 此外,褪黑素还与人体呼吸系统、消化系统、泌尿系统有调节作用。 Abbexa褪黑素(Melatonin,MT)蛋白,抗体和ELISA试剂盒等提供了一系列独特而可靠的产品来支持研究中的褪黑素分析(仅用于科研,不可用于临床诊断