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质粒抽提过程中内毒素如何去除?
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
内毒素,即脂多糖或LPS,是革兰氏阴性菌(如大肠杆菌)细胞膜的组成部分。细菌外膜的外层脂质部分是完全由内毒素分子所构成的。单个大肠杆菌细胞约包含两百万个LPS分子,每个LPS分子由疏水的脂质A(lipid A)部分、复杂的糖类残基阵列部分及负电性的磷酸基团所组成。因此,每个内毒素分子都具有疏水域、亲水域和电荷域,这使它在与其他分子相互作用时具有其独特的自身性质。细菌在其活性生长期向其周围微环境中散布少量的内毒素,在死亡时则释放大量内毒素。 在质粒制备的细菌细胞裂解过程中,内毒素分子被从外膜释放到溶菌液中。 大肠杆菌细胞膜示意图 内毒素对于生物学应用的影响 内毒素会对原代细胞和敏感培养细胞的DNA转染过程造成重要影响,内毒素水平的升高会导致转染效率的急剧下降。而且,使用不含内毒素的质粒DNA对于基因**的相关应用至关重要,因为内毒素会导致发热、内毒素性休克综合症,并会在动物和人体上激活补体级联反应。内毒素也会干扰如巨噬细胞和B细胞一类免疫细胞的体外转染实验,导致免疫反应的非特异性激活。这些效应还包括对如IL-1和前列腺素等免疫介质的诱导性合成。为了避免对实验结果的错误判断,确保塑料制品、培养基、血清和质粒DNA中均无LPS污染十分重要。 不同质粒制备方法中的内毒素污染 内毒素分子的化学结构与性质,以及它们形成胶束结构的倾向性,都使得它们容易与质粒DNA共同被纯化出来。例如,在CsCl超速离心法当中,CsCl结合的DNA很容易被内毒素分子所污染,因为在CsCl中内毒素与质粒——溴化乙锭复合物具有相似的密度。 在大尺寸DNA纯化树脂上,高分子量胶束样内毒素很类似于高分子量的DNA分子;在阴离子交换色谱法当中,内毒素分子上的负电荷能够与阴离子交换树脂相互作用,从而导致内毒素与质粒DNA被共同纯化下来。不过,质粒DNA中内毒素污染的水平很大程度上依赖于所使用的纯化方法。QIAGEN Plasmid Kit和2xCsCl梯度离心法均能够生成较低内毒素含量
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电泳仪代码故障处理方法
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
电泳仪出现代码故障让很多使用者们着急,很多用户看不懂一些代码的意思,从而从无下手,为了解决您的问题,上海巴玖技术人员特意将一些常见的代码故障整理出来,希望能对您有帮助。 Er1:输出电压超过最大值。 Er2:输出电流超过最大值。 检查电泳缓冲液浓度是否过高。电泳仪运行时是否插拔电泳槽。 Er3:短路。 切断电源后拔掉电泳槽连接线,重新开机看是否不再报警,则正常。 仍旧报警则可能芯片损坏,需返修。 Er4:未接负载。 检查电泳缓冲液浓度是否过低。 电泳槽连接线未插好,或接触不良。怎么弄连接线都弄不好的话返修。 Er5:电压突变(可能插拔了一个负载)。 Er6:电流突变(可能插拔了一个负载)。 切断电源后重新开机,建议不要在电泳仪运行是插拔电泳槽。 Er7:输出功率超过最大值。 检查电泳缓冲液浓度是否过高。电泳仪运行时是否插拔电泳槽。 Er8:输出电压设置为0。 Er9:输出电流设置为0。 重新设置电压、电流数据。 Er11:风扇损坏。 Er12:风扇转速过慢或停止。 风扇损坏或芯片损坏,需返修。 Er15:开机报警。 Er16:开机报警。 前一次使用电泳仪时没有正常关机所致。 所以无视之,按常规使用即可。 Er17:电流监控报警。 电流过大或者超功率,检查电泳缓冲液浓度是否过高。 降低电流或电压的设定值。 ErrS:短路、超载。 切断电源后拔掉电泳槽连接线,重新开机看是否不再报警,则正常。 仍旧报警则可能芯片损坏,需返修。 ErrO:未接负载。 检查电泳缓冲液浓度是否过低。 电泳槽连接线未插好,或接触不良。怎么弄连接线都弄不好的话返修。 查看更多电泳仪知识请进入:
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全基因组扩增技术介绍
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
研究人员通常会在下游分析中遭遇DNA样本量有限或不足的问题。QIAGEN的全基因组扩增技术通过以包括单细胞在内的小量样本或珍贵样本扩增获得基因组DNA,解决此类难题。REPLI-g Kit能够准确地复制原始DNA样本,不会造成偏差,扩增后的DNA可以直接应用于广泛的遗传学分析。 什么是全基因组扩增(whole gemome amplification)?做为一种增加有限DNA量的方法,全基因组扩增技术于1992年出现,该方法特别适于法医学鉴定和遗传疾病的研究,以及如二代测序技术和CGH阵列(比较基因组杂交)等新技术应用,后者的主要难题就在于DNA样本数量有限,但分析需求量又很可观。目前业界已经开发出多种WGA技术,它们之间的实验方案和复制准确度有所不同。WGA技术——PCR技术与多重置换扩增(MDA)技术的比较 业界已经开发出多种WGA技术;不过这些技术在其扩增准确性和易用性等方面有所区别。QIAGEN的REPLI-g Kit采用被称为多重置换扩增的WGA技术,能够提供无偏差的准确全基因组扩增。 基于PCR的WGA技术 基于PCR的WGA技术主要有两种:简并寡核苷酸PCR (DOP-PCR)技术(1)和扩增前引物延伸(PEP)技术(2)。这两种技术之间的主要区别在于PEP技术使用随机引物和低PCR退火温度,而DOP-PCR技术则使用半简并寡核苷酸(例如CGACTCGAGNNNNNNATGTGG)和更高的退火温度。两种方法中都使用了Taq DNA聚合酶,使得扩增长度限制在3 kb(平均片段长度为400–500 kb)以内,并且会在扩增序列中引入一些错误。不仅如此,有研究发现这些技术的基因组覆盖度不够完整,并会在扩增中产生偏向性——由于引物优先结合某些特定区域,造成DNA扩增产物中的一些序列相对增多。 多重置换扩增的WGA技术 REPLI-g使用了称为多重置换扩增(MDA)的恒温基因组扩增技术,该技术包含了随机六聚体与变性DNA的结合过程,以及使用Phi 29聚合酶在恒定温度下进行的链置换合成过程。每个置换链上添加引物后,形成分枝状的DNA结构网络。Phi 29聚合酶不会从基因组DNA模板上面解离下来,这使得生
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台式高速冷冻离心机的操作步骤和使用注意事项
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
目前,使用离心机的行业越来越多,在生物制药和食品等多行业都有重要作用,下面我们简单了解一下关于的操作步骤和使用注意事项。 台式高速冷冻离心机操作步骤: 1.打开离心机电源开关,进入待机状态。 2.选择合适的转头:离心时离心管所盛液体不能超过总容量的2/3,否则液体,易于溢出;使用前后应注意转头内有无漏出液体残余,应使之保持干燥。转换转头时应注意使离心机转轴和转头的卡口卡牢。 3.离心管平衡误差应在0.1克以内。 4.选择离心参数: a)按温度设置按钮,再用数字键设置离心温度,回车确定。 b)按速度设置按钮,可在RPM/RCF设置档之间切换,用数字键设置离心速度,回车确定。 c)按转头设置按钮,再用数字键设置转头型号,回车确定。 d)按时间设置按钮,再用数字键设置离心时间,回车确定。 e)离心机刹车或加速速度一般设置在0~4之间,不宜经常调整。 5.将平衡好的离心管对称放入转头内。盖好转头盖子拧紧螺丝。 6.按下离心机盖门,如盖门未盖牢,离心机将不能启动。 7.按START键,开始离心。离心开始后应等离心速度达到所设的速度时才能离开,一旦发现离心机有异常(如不平衡而导致机器明显震动,或噪音很大),应立即按STOP键,必要时直接按电源开关切断电源,停止离心,并找出原因。 8.机器如发现故障,请及时与有关人员联系。 9.使用结束后请清洁转头和离心机腔,不要关闭离心机盖,利于湿气蒸发。 10.使用结束后必须登记,注明使用情况。 ·台式高速冷冻离心机使用注意事项: 1.离心机在预冷状态时,离心机盖必须关闭,离心结束后取出转头要倒置于实验台上,擦干腔内余水,离心机盖处于打开状态。 2.超速离心时,液体一定要加满离心管,应超离时需抽真空,只有加满才能避免离心管变形。如离心管盖子密封性差液体就不能加满,以防外溢,影响感应器正常工作。 3.转头在预冷时转头盖可摆放在离心机的平
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高速离心机部件产生振动的原因及维护方法
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
在使用和操作中容易发生部件振动,而离心机发生振动就可能导致离心机在使用中对离心物产生影响,那么高速离心机驱动部件振动原因是什么呢?上海利鑫坚离心机为此研究了此问题以及提供了可能的维护方法。 通过对高速离心机的驱动部件进行了分析。分析认为,引起振动的原因是多因素的,其中主要包括转子的剩余不平衡量、电机转子的剩余不平衡量、电机与驱动组件的联接方式和减振器的设置等。根据动力学原理,转子在一定转速下运转时的乎衡方程式为 G+M(e+y)CO :(y +y)。 其中影响较大的是转子的偏心量e及挠度Y,而这两者与转子的制造精度、传动轴的几何尺寸和轴承的支承位置有关。该振源将造成径向和轴向同时振动,主要在径向。根据这一原理, 我们仔细分析了原设计图, 发现原结构在径向上无任何减振装置,而在轴向上又重复破振。 第二,转子与转子盖的影响 检查发现,原转子与转子盖之间的配台有2ram的间隙。第三,弹性联轴器的影响。由于转子和电机始终存在不同程度的剩余不平衡量,这两个不平衡量就是两个不同的振源。在直接驱动结构的高速离心机上,这两个振源叉不得不连接起来,这就需要设计一个有效隔离开两个振源的联轴器。该机原设计的联轴器为一个开有方孔的尼龙套。虽然尼龙套能起一定的阻尼隔振作用,但用在此处还不能满足使用要求。针对上面提出的问题,我们首先在原驱动结构上增加了橡皮隔振圈来隔离径向振动,转子与转子盖之间的间隙由原来的2ram减小到0.1mm,联轴器由原来的尼龙套改为如图2我们称之为万象联轴器的结构。 通过上述改动后,经试验,转速仅用不到3分钟就达到了20000rPm,在驱动电机上测得自振动加速度为4g.这样的驱动部件就没有发生振动了。
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高速离心机的安装之注意事项
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
离心机的安装需要符合要求,才能在后续的操作上能正常进行,比如电源的安装,还有安装需要注意的平衡,以及转子的安装等,下面上海利鑫坚离心机厂家就给大家简单的介绍关于的安装需要注意哪些细节问题。 `正确安装 a电源电压:电压波动要符合10%以内的国家标准,否则一些厂家的离心机是不能正常运转。假如电压波动在此以上,建议用稳压器,以供符合此电网。 b地线要牢:房间的电源的布线要符合要求。我国是三相四线制。三相是产业电中的三相,使用三相电时零线与地线分开,更重要的是不管是三相产业电也好,一般的单相电也好,地线应可靠,以免漏电,地线不能接在热气管、自来水管上。 c地面要平整、牢固:对大型离心机而言,在安装地点搬动地板要牢固,保证离心机的转子正常工作,不陷凹进往,安装固定处地面应平整且牢固。 d找好水平:找较正确的小型水平尺,离心机盖子打开,在主轴上找水平,通过调整4个脚轮旁边的调整螺栓的拧动来找好水平,留意其中一脚不能落空。 `装样找平衡 离心机在设计与制造时,对转子的加工误差带来的不平衡,已作了动平衡试验的补救,但凡是离心机,都有其答应的装样不平衡量。 为了在离心机允许的最大不平衡限量这一指标上与其他厂家竞争,尽量给出较大值。在这较大值上,离心机可以运转,但这时产生的不平衡力以每分钟n次频率猛然冲击轴承及支架,离心机是受损伤的。因此,用户对那些昂贵的离心机,尽量找好平衡后离心,对离心机的寿命有好处。 `清理离心腔内的积水 离心机运转时使用制冷,由于空气的水分,在离心腔内结霜,停机后霜化为水。大部分国外的低速大容量离心机,没有排水孔,离心腔中水愈积愈多。此时,用户应自行拆下转子,清理积水。在重新安装转子时,一定要装好,避免失事故。 `断轴事故 转子没安放好,或装样品不平衡超过量太大,离心机开动。现代的进口离心机虽都有不平衡保护,即当不平衡量超过某一限时,应自动断电,令离心机停转。但在上述情况下,已经
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叶面积仪观测数据的校正方法
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
春小麦叶面积指数测定方法:研究采用叶面积仪获取春小麦叶面积指数。为确保观测数据的高精度,每次利用叶面积测定仪观测叶面积指数的同时,随机采取15个样点采用人工采样方法进行校正。 具体校正方法是:首先数出采样范围内(60cm×60cm)的春小麦数量,再在样区中选取有代表性的10株春小麦观测每株的叶片数,再选取有代表性的20片叶片,用叶面积仪测定单片叶片的面积。所有样品叶片被分开平放在一张已知面积的白纸上,在距叶片大概1.5m高处照一张照片,用与测覆盖度相同的方法测定叶片面积占纸张面积的比例,算出叶片的面积。 为确保高精度的春小麦叶面积指数观测结果,通过人工采样方法对叶面积仪器获取的叶面积指数进行校正。利用叶面积仪器得到的是有效叶面积指数,根据人工采样方法计算得到的是真实叶面积指数,分析了有效值和真实值二者的线性回归关系结果表明,二者呈极显著的线性关系,相关系数高达0.87。因此,利用人工采样方法对叶面积测定仪器观测的叶面积指数进行精度校正是可行的。 在叶面积仪整个观测期间,春小麦覆盖度和叶面积指数随时间的变化趋势相同,都是先达到最大峰值,随后减少。不难发现,春小麦覆盖度和叶面积指数都在6月22日前后达到最大值,而且6月22日也是研究区春小麦株高的极大值观测日期。
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如何判断色谱柱什么时候该换新柱了?
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
色谱工作者常会碰到这样的问题,什么时候该换色谱柱了? 色谱柱的塔板数能体现色谱柱的状态吗?确定表明一支色谱柱应该“退休”的标准,从经验来看,当一支色谱柱的塔板数降低到新柱子时的百分之多少时就可以认为该色谱柱不能再使用了呢?在您的实验室里是如何判断一根色谱柱不可以再用了呢? 相信每个色谱工作者都会关心分辨率,分辨率是考察一根色谱柱分离具体样品的好坏程度的指标。色谱的核心任务就是为了使每个峰完成分离,我们在实际工作中需要得到合理峰宽的窄峰以便获得较低的检测限(这已经不是什么难题,现在的色谱柱都可以达到这个要求)。 较好的方法是使用压力、分辨率和峰形的混合指标来考察一根色谱柱的状态。压力的测量是最容易的,通常我们确定的色谱方法要满足以下的要求:用新柱子时柱压不高于2500psi,在任何情况下压力都不超过3000psi。尽管现代的液相色谱系统都可在更高的压力下使用,但由于高压产生的系统损耗和泄漏的问题会很严重。当压力超过3000psi时,考虑更换进样器和色谱柱之间的0.5mm孔径的在线滤片。如果更换滤片后压力仍然高,则色谱柱的滤片或者是色谱柱已经被污染,这提示我们该换柱子了。有统计表明,超过60%的色谱柱损坏是由于压力过高的原因。 分辨率是我们考察色谱柱的一个非常重要的指标,只要两个组分可以获得基线分离,对该分析物的定量就不会有什么问题。对于对称的高斯峰来讲,1.5的分辨率即可得到基线分离;若Rs在1.7至2.0之间则更好。若峰拖尾严重则需要更高的分辨率。使用分辨率作为色谱柱的评价指标的好处在于我们可以直观地看到相邻的峰的分离情况。 另外一个考察色谱柱质量的标准是峰形拖尾情况,厂家测试报告的峰形都非常漂亮,但这并不代表该色谱柱分析实际样品的情况。实际样品中总是含有或多或少引起峰形拖尾的组分。最值得一提的是含有氮原子的化合物,这些化合物和硅胶骨架上的游离硅羟基结合非常紧密,随着色谱柱使用时间越长,键合相流失,拖尾则更加严重。然
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培养基生产新理念:一键式制备
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等,有点还添加抗菌素、色素、激素和血清。为方便长期保管,培养基的成分均制成粉末状。使用时再配制成可用的培养基,整个制备过程培养基需要严格的灭菌。 目前对培养基灭菌通常使用高压蒸汽法,因为蒸汽具有很强的穿透能力,能够杀死各种微生物,微生物受热死亡的原因,主要是因高温使微生物体内的一些重要蛋白质,如酶等,发生凝固、变性,从而导致微生物无法生存而死。灭菌中加热温度和受热时间与灭菌程度和营养成分的破坏都有关系。营养成分的破坏将影响菌种的培养和产物的生成,所以灭菌程度和营养成分的破坏成为灭菌工作中的主要矛盾, 恰当掌握加热温度和受热时间是灭菌工作的关键。选择一种既能满足灭菌要求又能减少营养成分破坏的温度和受热时间,是研究培养基灭菌质量的重要内容。 由上图实验结果的分析,我们可以得出结论:温度升高,细菌的死亡速率大于培养基成分的破坏速率,在实际生产中为了既达到灭菌目的又能较好地保存营养成分,**采用高温快速灭菌法。为了彻底杀死嗜热菌芽孢,我们通常使用121℃,15-20分钟;135℃,5分钟。 培养基灭菌后的降温过程也尤其重要。目前大家面临了一个普遍的难题:培养基冷却速度太慢,而打开门冷却又害怕外界空气污染。并且培养基在倒平板过程中的污染问题也让大家感到头疼,培养皿长菌的原因成为大家一直的疑问。 德国systec发明一款专门用于培养基灭菌制备的特殊灭菌锅——培养基制备器。这款仪器的问世解决了大家面临的诸多问题: 冷却方面:在systec先进的灭菌锅基础上对冷却系统进行了再度优化,大大减少了冷却时间。培养基制备器快速制冷是通过循环水和压力所进行的。利用与外部水连接的盘状热交换器,能够使内部迅速冷却,整个过程包括:加热、灭菌和冷却(至50° C),依据容器的大小、培养基的数量和冷却水的温
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流式细胞仪光源的那点事
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
激光是一种相干光源,它能提供单波长、高强度及稳定性高的光照,是细胞微弱荧光快速分析的理想光源。细胞处在快速运动的状态,每个细胞经过光照区的时间仅为微秒左右,每个细胞所携带荧光物质被激发产生荧光信号的强弱与被照射的时间和激发光的强度有关,只有细胞接受到足够的光照,才能产生相应可被检出的信号。通常小型流式细胞仪的激光功率在20mW,而贝克曼的CytoFLEX采用的固体激光器最小功率为50mW,最大可达80mW。 应用在流式细胞仪上的激光器可分为两类:1.气体激光器:利用气体或蒸气作为工作物质产生激光的器件。与固体、液体比较,气体的光学均匀性好,因此,气体激光器的输出光束具有较好的方向性、单色性和较高的频率稳定性。但气体的密度小,不易得到高的激发粒子浓度,因此,气体激光器输出的能量密度一般比固体激光器小。2.固体激光器:用固体激光材料作为工作物质的激光器,固体激光器可作大能量和高功率相干光源,目前大多数高端流式细胞仪采用此种激光器。 针对不同的荧光染料需要匹配不同颜色的激光,常用的有405nm的紫激光,488nm的蓝激光,638nm的红激光。其中488nm蓝激光为最常用的激光,贝克曼CytoFLEX是唯一最多可配置3个激光器的小型流式。不要被多色分析所迷惑,只有配备了个数更多、功率更大的激光器的仪器才真正具备强大的性能。
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十招搞定免疫荧光
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
免疫荧光是标记免疫技术发展最早的一种,它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术,通过将抗体与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。免疫荧光步骤包括,细胞固定和通透,封闭,孵育一抗,二抗等。除了这些基本步骤,以下建议可以帮助您获得更好的实验结果。 1、细胞固定和通透为达到最佳的检测效果,细胞需要经过固定和通透。这些步骤非常关键,细胞和抗原需要保证最佳的结构,并利于抗体与抗原结合。通常情况下,需要通过以下步骤得以实现:细胞用2%-4%多聚甲醛固定,之后用0.1%皂角苷或0.02%的Triton X-100进行通透。前者是比较温柔的处理,但是对于核内抗原可能无效,需要用到Triton。使用皂角苷进行通透时,要注意它会引起细胞膜的可逆性通透,也就是除了在通透初期,在每个抗体孵育环节都需要进行通透。另外,细胞可以用冰甲醇进行同时固定和通透,可以避免去垢剂的使用。 2、抗体特异性免疫荧光需要用到特异性非常强的抗体,可以避免高背景和不理想的蛋白定位结果。在大多数情况下,纯化抗体的效果很好,但是正确的对照可以帮助精准定位抗原。使用只有二抗染色的片子作为阴性对照,有利于减少降低背景干扰。 3、合适的抗体稀释比例通过优化抗体稀释比例来优化染色,通常情况下1ug/ml的纯化抗体或者1:100-1:1000的抗血清足够达到特异性染色的结果。但在能保证低背景染色的前提下,可以通过增加浓度来提高信号强度。如果是第一次使用该抗体或测定某抗原,强烈建议浓度梯度实验。 4、优化缓冲液和封闭剂尽管很多抗原在常见的Buffer如PBS中可以很好的被染色,但是对于某些目的抗原,更换一下含有不同离子的缓冲液,比如钙、镁、钾等,可以带来很大程度上的改善。Rockland可提供优化过的IHC用封闭缓冲液,同样适用于荧光染色实验。 5、选择正确的二抗如果您需要做免疫实验,我们强烈建议您选择进行过预吸附的二抗进行单染实验;如果是双重甚至是多
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研究揭示H10N8禽流感病毒感染人的分子机制
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
HA蛋白对人气管组织及鸭子小肠组织的免疫荧光染色 继2013年先后在H5N1和H7N9禽流感病毒跨种间传播研究中取得重要进展后,中国科学院微生物研究所高福课题组在H10N8禽流感病毒感染人的分子机制(Molecular Mechanisms)和跨种间传播趋势评估上取得新的进展,研究结果已经于2015年1月9日在国际杂志(Nature Communications)在线发表。 2013年12月起,我国先后发生3例人感染H10N8禽流感病毒病例,并导致2人死亡。这种能感染人的H10N8病毒是否像H7N9病毒一样具有双受体结合特性,既能结合人源受体,也保留禽源受体结合能力?是否存在大规模扩散的潜在风险? 为了分析这次的H10N8病毒的受体结合特异性,研究人员从病毒层面和HA蛋白层面,对最早的分离株——江西东湖株H10N8禽流感病毒的受体结合特性进行了研究,发现无论在病毒水平还是HA蛋白水平,H10都特异性结合禽源受体,而不像H7N9安徽株一样获得了人源受体结合能力。研究人员还利用免疫荧光的方法检测了多种HA蛋白对人气管组织及鸭子小肠组织的结合能力,证明H10蛋白对表达禽源受体的鸭子小肠组织有很强的结合,但不结合表达人源受体的人气管组织(见下图)。 为了阐明H10蛋白特异性结合禽源受体的分子机制(Molecular Mechanisms),研究人员利用结构学的方法解析了H10蛋白与禽源受体和人源受体的复合物晶体结构。结构分析表明,禽源受体结合位点的137位精氨酸在H10对禽源受体的偏好性结合中起关键作用。 该研究表明这次的能感染人的H10N8病毒依然是一个典型的禽流感病毒,对人源受体亲和力极弱,暗示该病毒并不具备在人群中传播的能力。 该研究工作由高福课题组在中国农业大学的博士生王敏与微所的张蔚博士共同完成。同时,该研究工作还得到了中国科学院北京生命科学研究院的施一、中国农业大学的李向东、刘金华和中国疾病预防控制中心病毒病所的舒跃龙、周剑芳等各位老师的帮助和支持。该项目得到了科技部、自然科学基金委和中科院的基金支持。
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恒温恒湿试验机的常见故障分析
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
在高温试验中,如温度变化达不到试验温度值时,可以检查电器系统,逐一排除故障。如温度升得很慢,就要查看风循环系统,看一下风循环的调节挡板是否开启正常,反之,就检查风循环的电机运转是否正常。如温度过冲厉害那么就需要整定PID 的设置参数。如果温度直接上升,过温保护,那么,控制器出故障,须更换控制仪表。 低温达不到试验的指标,那你就要观察温度的变化,是温度降的很慢,还是温度到一定值后温度有回升的趋势,前者就要检查一下,做低温试验前是否将工作室烘干,使工作室保持干燥后再将试验样品放入工作室内再做试验, 工作室内的试验样品是否放置的过多,使工作室内的风不能充分循环,在排除上述原因后,就要考虑是否是制冷系统中的故障了。 另一种可能就是湿球纱布因使用时间长,或供水水质纯净度的原因,会使纱布变硬,使纱布无法吸收水份而干燥,只要更换或清洗纱布即可排除以上现象。后者的现象主要是加湿系统不工作,查看加湿系统的供水系统,供水系统内是否有一定的水量,控制加湿锅炉水位的水位控制是否正常,加湿锅炉内的水位是否正常。如以上一切都正常,那就要检查电器控制系统,这要请专业维修人员进行检修。 在做湿热试验中,出现实际湿度会达到100%或者实际湿度与目标湿度相差很大,数值低得很多,前者的现象:可能是湿球传感器上的纱布干燥引起,那就要检查湿球传感器的水槽中是否缺水,水槽中的水位是由一水位控制器自动控制的,查水位控制器供水系统是否供水正常,水位控制器工作是否正常。 设备在试验运行过程中突然出现故障时,控制仪表上出现对应的故障显示提示并有声讯报警提示。操作人员可以对照设备的操作使用中的故障排除一章中快速检查出属于哪一类故障,即可请专业人员快速排除故障,以确保试验的正常进行。其它环境试验设备在使用中还会有其它的现象,那就要具体现象,具体分析和排除。
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怎样维护保养离心机
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
一.实验用的维护和保养: 1.使用水或柔和的清洁剂清洗转子室及转子,不应使用碱性溶液或对材料有磨蚀的溶剂,用清水洗干净后用干布把离心腔内抹干。 2.离心机未使用时打开顶盖,保持转子室干燥,以避免电机轴承磨损。 3.使用抹布或镊子移出转子室内的赃物碎片。 4.离心有毒、放射性、污染样品时必须有特殊的安全保护措施。 二.医用附件的维护方法: 1.离心机尽量与其它用电设备保持一定距离,并有良好的接地措施,且进行定期检查。 2. 离心机和转子不得用高强度UV 辐射或长时间受热。清洗时应用中性洗涤剂。 3.如需要,转子可更换。重新安装后,上紧转头螺钉。 4.如有离心管显示颜色变化、变形、泄露等必须停止使用。 5.对离心管进行高温高压消毒时不要拧上管帽,避免管子变形。每种离心管消毒可耐温度见用户手册此节列表。 三.医用冷凝器的维护方法: 1.冷凝器用来冷却冷冻剂,安装于后部,采用风冷方式。 2.冷凝器应定期清理灰尘,以免传热受阻。可用压缩空气吹洗此处。 四.医用离心机转头销钉的维护方法:转头销钉需经常用润滑油润滑,确保离心机运转平稳。 五.医用离心机转子腔体及附件的灭菌和消毒方法:所有常规的消毒剂都可使用。由于及附件由不同材料制成,所以必须考虑到消毒剂的相容性。 六.医用操作者应确保离心机重要部件完好,主要有:电机悬挂稳定、转子和附件没有腐蚀 、转轴无偏离 、螺钉连接紧固及接地良好。
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LncRNA:从分子调控到临床应用的最新成果
作者:德尔塔 日期:2022-04-25
2009年,随着非编码RNA(ncRNA)研究进展的深入,一类新的ncRNA分子—lncRNA掀起科学界的热点话题,并逐渐成为分子生物学及临床医学研究的重要方向。康成生物与美国Arraystar公司合作,利用Arraystar LncRNA系列芯片平台,率先开展lncRNA表达筛查服务。Arraystar公司是lncRNA研究领域的先驱和领导者,该公司的lncRNA系列芯片依据最全面的数据库和经典文献设计,采用最先进的探针设计理念,同时检测生物样本中lncRNA和mRNA,帮助研究者深入开展lncRNA研究。 迄今为止,作为Arraystar中国区唯一代理商,,其中多篇发表在Cancer Cell, Mol Cell,Hepatology等国际顶尖杂志上。 LncRNA在临床医学研究中的新成果 LncRNA是临床医学研究中新兴的热点分子,可以通过不同的分子生物学机制调控编码基因的表达,参与疾病相关的信号通路,从而对疾病的发生、发展及**有重要作用。作为一类新型的具有生物学功能的临床标志物,lncRNA具有非常广阔的临床应用前景。利用Arraystar公司lncRNA芯片,近年来,国内外学者发表一系列高水平科研论文,帮助我们进一步认识lncRNA在疾病的重要作用,开拓临床医学研究的视野,并对我们后续的科研有进一步的指导意义。 1. LncRNA与癌症 癌症相关的lncRNA研究是进展最快,成果最丰富的新兴领域。研究者利用Arraystar LncRNA芯片对不同癌症的鉴别、发生、发展、恶化、转移等现象进行较多的深入研究,为其他领域的lncRNA研究建立完善的方法学体系指引了研究方向。 2. LncRNA与心脑血管疾病 心脑血管疾病以及相关的代谢疾病是一类严重威胁现代人身体健康的疾病。利用细胞、血管、血浆等临床常见样本,研究者使用Arraystar LncRNA芯片对这类疾病进行开拓性的研究。 3. LncRNA与其他疾病 利用不同疾病的临床样本,研究者使用Arraystar LncRNA芯片筛查出疾病特征性lncRNA表达谱变化,提示lncRNA具有广泛而重要的临床应用价值,为lncRNA的深入研究提供了强有力的临床依据。 4. Lnc