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STAT3调控ARF的表达并在前列腺癌的扩散方面有抑制作用
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
科学家发现能够抑制前列腺癌的因子IL-6 前列腺癌是男性中的一种常见疾病。IL-6在调控细胞周期存活及肿瘤生长方面是很重要的细胞因子。STAT3调控ARF的表达并在前列腺癌的扩散方面有抑制作用，该文章发表在2015年7月的Nature Communications杂志上。 极度活跃的IL-6对癌症的扩散有推助作用，并且该物质可以控制致癌因子STAT3的发展。理论上，P19ARF直接靶向STAT3。Pten缺失的患前列腺癌的小鼠中STAT3或IL-6信号的失活能够加速癌症恶化导致癌细胞转移。 所以医学上对抗癌症的许多药物都是以抑制IL-6或者STAT3为依据的。但该种方法在**前列腺癌方面截然相反。 d:WT, IL-6/, Ptenpc/ and Ptenpc/IL-6/ 小鼠38周肝脏与前列腺癌的haematoxilim/eosin 染色切片组织病理学分析。 右侧柱状图显示Ki-67与CC3的阳性细胞比例。利用TissueGnostics公司的HistoQuest 软件对蛋白质进行定量分析（n=5）。 Kenner教授与奥地利TissueGnostics公司合作，扫描方面，采用全景扫描无缝拼接技术得到高分别率的图片；分析方面，利用HistoQuest软件提供定量化的数据分析结果以直方图的形式呈现阳性细胞比例。 Kenner教授和他的研究团队发现：在前列腺癌中激活的STAT3抑制细胞生长。该物质能够阻碍细胞分裂进而抑制肿瘤生长的p14ARF基因。应用临床前模式生物-基因敲除小鼠，将IL-6/STAT3信号通路与ARF联系起来（ARF是调控细胞周期及决定细胞生长的重要基因）。Ludwig Boltzmann 癌症研究所的Pencik博士解释道，该项发现解释了前列腺癌的转移调控机制。 原文链接： 联系公司：奥地利TissueGnostics GmbH 北京华威中仪科技有限公司 400-898-1980 官网：
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实验室装修讲解钢木实验台的安装
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
实验室装修讲解钢木实验台的安装 专业实验室设计、一流实验室设计施工、上海专业实验室、实验室装修公司、专业实验室设计专家 Laboratory renovation on experimental installation of steel and wood 第一步：观察钢架的正，侧面，在钢架上标出柜体的高度或做一个与柜高度相同的靠栅。 The first step: positive, sides of the steel frame, steel frame out in cabinet height or do a highly identical with the cabinet by the gate. 第二步：按照实验台的总长度，选择出相合适的横梁，用自钻螺丝把横梁固定到钢架上 The second step: in accordance with the total length of experimental select suitable for the beam, the beam self drilling screws fixed to the steel frame. 第三步：用水平尺检查钢架的横﹑纵线，是否水平实验室装修 The third step: the transverse, longitudinal level check steel frame, whether level 第四步：在确保水平的前提下，方可挂吊柜体。 The fourth step: to ensure the level of the premise, can be hanging cabinet. 第五步：把装好滑轨的抽屉填进柜体，在抽屉上4mm麻花钻头顶打四只孔 The fifth step: loaded sliding rail drawer filled into the cabinet, drill 4mm Hemp flowers on the drawer head playing four holes 第六步：黏结台面的步骤﹑要求与全钢一样。钢木结构通常先装抽面，后安装台面，若台面上有试剂架安装，待胶固化后再行安装操作。 The sixth step: bonding mesa steps, requirements and all steel. Steel and wood structure is usually installed in the first pumping surface, after the installation of mesa, if the table has the reagent frame installation, after the glue curing after installation and operation.
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Bibby, ART, Gerber之更快更准的食品检测方案
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
食品安全问题从来都是舆论焦点，对食品的严格标准要求与高精度检测也被提上日程。针对食品检测的高标准和高精度要求，英国Bibby、德国ART和瑞士Gerber Instruments三大国际品牌也提供了高品质仪器，为食品检测助力。 [微生物检测] 食品中毒事件多源于微生物性食物中毒，占到食品中毒的原因50%以上。 如何检测食品中的微生物？英国Bibby 的PRIME系列机型提供了基于致病菌特异性基因的快速高效的PCR基因扩增解决方案。其基本原理是：对DNA模板及之后的半保留复制链，反复进行变性--退火--延伸三个基本反应步骤，将待扩目的基因在2至3小时内扩增放大几百万倍，为下一步检测作好丰富的准备。这相对于传统的步骤繁琐结果难辨的血清学分析等方法来说，更省时省力，更灵敏快捷，检测精度也大大提高。 荧光定量qPCR是更为高端的一种解决方案。与常规PCR相比，速度更快、重复性更高，能作定量检测。且能定量等优点，在微生物检测领域具有广泛应用。Bibby 提供的是从ELLUMINA购入改进的荧光定量PRIME PRO 48。 另外，Bibby 的菌落计数器与摇床培养箱系列，也是微生物检测的不二之选，用于菌落计数与微生物培养。 [食品破碎] 在食品的农药残留测试中，对食品原料进行预处理的重要一步是均质破碎，破碎效果的好坏直接影响到分析结果，也就是说分散机是一个非常关键的工具。 德国Miccra ART提供手提式与支架式各种实验室分散机，采用定转子原理，转子高速旋转，最高速度可达39000RPM，产生高剪切力，在一分钟之内即可将食物样品破碎至微米甚至纳米效果。 [食品酸碱度] 食品的PH测试也是食品安全检测中不可或缺的。英国Bibby 带来了一系列的常规PH检测仪，快速，高效，重复性高；而瑞士盖博仪器Gerber Instruments 更提供了一系列乳食品专用PH计，专门测试牛奶和奶酪。 另外Gerber 为肉类食品专门设计了一款PH计，测试头带有坚硬的不锈钢片。其它PH计需先行用刀割开肉类才开始检测，而Gerber 的PH计则可省略刀割步骤，
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实验室装修讲解二级生物安全（P2）实验室
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
实验室装修讲解二级生物安全（P2）实验室 1. 实验室生物安全技术措施 1 样品隔离技术（机械、气幕）防止传染因子进入环境接触人体 2 定向流技术（三级气压系统 ）,，防止传染因子扩散。 3 消毒灭菌技术（物理、化学），灭活感染性生物因子。 2. 生物安全实验室分级 实验室分级 危害程度 处理对象 一级 低个体危害，低群体伤害 对人体、动植物或环境危害脚底，不具有对讲课承认，动植物治病的治病因子； 二级 中等个体危害，有限群体危害 对人、动植物或环境具有中等危害或具有潜在危险的致病因子，对健康成人、动物和环境不会造成严重危害。有限的预防和**措施 ； 三级 高等个体危害，低群体危害 对人体，动植物或环境具有高度危险性，主要通过气溶胶使人传染上严重的甚至是致命的疾病，或对动植物和环境具有高度危害的治病因子，通常有预防**措施 ； 四级 高个体危害，高群体危害 对人体，动植物或环境具有高度危险性，主要通过气溶胶途径传播或传播途径不明，或未知的，危险的致病因子。没有预防**措施 ； 生物危害表示在二到四级生物安全实验室的入口，应明确标识出操作所接受的病原体的名称、危害等级、预防措施负责人姓名，紧急联络方式等。同时应表示出国际通用生物危险信号。 生物安全实验室布局要求 1、安全原则：性强、感染性高的专业实验室与办公区域隔离，成相对独立区域，病原微生物实验室等经来尽量设在人员流动少的区域（新建**独立设置） 2、实验室流向：有安全低毒实验室像高度高感染性实验室过度，高度高感染性实验室应远离人员活动频繁区域，设在建筑物末端 3、人流物流通道尽量分开，人员进出通道和物品通道分开，洁净物品与污染物品通道分开。 4、不同类别和专业实验室宜独立设置，合理分区布局。
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样品制备仪FastPrep-24™ 5G的详细介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
众所周知，在DNA、RNA和蛋白质的提取过程中，生物样本的破碎和匀浆是关键的第一步。谁不想来个开门红？当然，这并非易事。利用传统的液氮研磨，不光费时费力，效果还不是太稳定。尤其在处理多个样本时，面对那一堆研钵，手忙脚乱不说，交叉污染也是个不得不重视的问题。 世界那么大，你应该去看看。如今，机械的样品裂解已成为实验室中**的样品制备方法，因为这个过程不使用酶、化合物和去污剂，也就避免了下游抑制剂的引入。同时，它也足够强大，能对付那些坚硬、耐磨和难以处理的样本。MP Bio的FastPrep-24™ 5G样品制备系统就是这样一台强劲的仪器。 MP Bio之前已推出多款样品制备仪器，而FastPrep-24™ 5G是这个家族的最新成员，5G代表了它是第五代产品。与之前的产品相比，它首次使用触摸屏界面，操作更为简便直观；同时，动力增强，处理样本更加快速。有了FastPrep-24™ 5G，你就能在短短40秒内裂解任何难以处理的样本。 新一代，更厉害 FastPrep-24™ 5G通过剧烈振动样品管内的裂解介质（如硅珠、玻璃珠或陶瓷珠）和样本，来破坏微生物、动物或植物的组织。它采用“8字型”专利运动方式，可以使样品管同时产生旋涡式、振荡式和抽吸式这三种运动方式，从而使裂解介质珠均匀高效地撞击样本，实现了样本的充分破碎。与之前的型号相比，速度从6 米/秒提高到10 米/秒。这下子，再难处理的样本也不在话下了。 大家都知道，植物种子是出了名的难搞。种皮中通常含有抑制PCR的单宁，而种子材料则含有淀粉和脂肪，使裂解难以进行。而利用FastPrep-24™ 5G裂解40秒后，再用相应的试剂盒纯化DNA或RNA，即可获得高产量、高质量的核酸，且不含PCR抑制剂、多糖或多酚。整个过程也不需要使用有机变性剂或蛋白酶。 对于当今热门的宏基因组学研究，FastPrep-24™ 5G也能在样品制备中大显身手。在研究环境或肠道样本时，样品制备和后续分离纯化非常棘手。通常来说，土壤、淤泥和粪便样本成分复杂，包括微生物、植物
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动物实验中吸入式麻醉和注射式麻醉的比较
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
实验动物是研究人类疾病的重要模型，为人类阐明发病机理以及寻找新的**策略提供了基础信息。在众多的实验动物中，小鼠是使用最多和最广泛的动物模型，这是因为其具有与人类的生物相似性、易于繁殖、费用低廉和容易操作等特点。 实际上，许多动物实验都需要实验动物在相对固定的条件下进行，例如活体成像、开颅的脑功能研究以及器官移植等。一般情况下，动物都不会配合这些实验的开展，而且大部分的实验操作还会伴有疼痛感，而麻醉和镇痛技术为这些实验的开展提供了可能。不同的实验动物会因不同的生理属性而影响麻醉剂的作用效率。与大动物（猫狗甚至更大）相比，小鼠的身体尺寸小，对药物的代谢和排除更加迅速，降低了药物的半衰期，也会影响麻醉药物起效和维持的时间。 麻醉是一种无意识、镇静、肌肉松弛以及无反射的状态。目前，按照作用药物的种类可将麻醉分为注射式麻醉和吸入式麻醉。理想的麻醉剂应当具有易于操作、提供快速和充足的麻醉维持、没有副作用、可以逆转以及对动物和操作人员无害等特点。但是，这样的麻醉剂并不存在，最佳的麻醉选择也需要根据不同实验的需求来确定。 目前，阿佛丁、戊巴比妥钠和氯胺酮是小鼠实验中最常用的注射类麻醉剂，它们经常会与诸如乙酰丙嗪、甲苯噻嗪、安定（地西泮）和一些镇静类药物联合使用；而异氟烷、七氟烷和地氟烷是吸入式麻醉中常用的麻醉剂。相比注射式麻醉，吸入式麻醉具有以下优点：（1）应用范围广，更加安全，尤其是针对深入和长时程麻醉实验；（2）心脏保护功能，提高肺部的免疫力；（3）吸入和消除都在肺部，极少被吸收，不会产生肝肾毒性；（4）苏醒快，适于短期麻醉，也利于更改麻醉策略，精确调控麻醉深度。与之相对的是，注射麻醉除了一些显而易见的优点外，其还存在着一些缺点：（1）选择一个合适的麻醉剂量是十分困难的，尤其是在不同麻醉剂的组合使用中，需要大量的摸索尝试；（2）恢复速度慢，不能在注射后立即苏醒，还需要使用逆转剂（解药）来解除
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QB/T2492-2000低聚木糖检测方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
1低聚木糖的测定(高效液相色谱法) 本方法适用于添加低聚糖的保健食品中低聚塘的检测. 1. 1方法提要 低聚糖各组分用高效液相色谱法分离井定量测定。以乙睛、水作流动相在碳水化合物分析柱上糖的分离顺序是先单糖后双糖，先低聚后多聚，以示差折射检测器检测。由T于本产品为>95%的低聚木塘纯品，故可用面积比值法求出样品中低聚搪含量。 1. 2仪器 (1)高效液相色谱仪:，410示差折光射检测器，色谱工作作站。 (2)超声波振荡器。 (3)微孔过湾器(滤膜0. 45um) 1. 3试剂 (1)乙腑(色谱纯) (2)水(三蒸水并经Milli-Q超纯处理) (3) D一木搪(D-xylose)C5H1005上海市化学试剂公司分装(E. Merck分装):定位用.。因Sigma公司无低聚木糖的样品。 1. 4测定步骤 (1)样品处理 用精度0. 0001g的分析大平准确称取胶囊内容物约1.0g，于100ml的容器中.加水约80m1于超声波振荡器中振荡提取15分钟，加水至刻度，摇匀，用0.45um滤膜过滤后直接进样测定。 (2)色谱分离条件: 色谱柱:SUGAR PAK I 6.5MMX300MM COL，SUGAR-PAK INSERTS 10/PK，GUARD-PAK HOLDER 流动相:乙腈+水(85+15) 流速:0.8m1/min 检侧器灵敏度:4 进样最:20uL (3)样品测定: 取样品处理液20uL注入高效液相色谱仪进行分离。1%纯木糖溶液作定位用。根据低聚糖的分离原理，木糖色谱峰后的所有峰为低聚木糖的总和。以其峰面积计算出样液中低聚木糖的含量。 (4)低聚木糖的分离顺序为: 阿拉伯糖(Al)葡萄搪(G1)、木糖(X)、木二糖(X1)、木二糖(X2)、木四塘(X3)、木五糖 (X4)、木六糖(X5)、木七糖(X6). 1.5结果计算 低聚糖的一百分含量:因为各组分均为同系物，所以可用面积归一法计算低聚糖各组分总面积值的百分含量。 低聚木糖%=(x l+x2......x6/Al+G1+X+Xl...... X6)x100 式中:A1:阿拉伯糖 G1:葡萄糖 X:木搪 X1-X6:木二糖—木七搪。 本方法参照: 1、保健食品功效成分检测方法一王亚光主编。（选自Q/YJB000
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实验室装修设计实验室空间尺度
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
实验室功能分区与平面布局之实验室建筑平面设计原则实验室整体规划设计包括以下部分： 1.产品平面布局的规划设计 ：为使用部门提供专业的建议，设计符合实验室标准和使用要求的产品布局规划。确定实验室内产品的类别 规格 数量，使之符合实验室使用要求和标准。 2.水电预留位置的设计 ：在确定了平面布局后，我公司会提供全面水电位置图，交客户交工程施工。 3.通排风系统的设计：在实验室新建或改造项目中，在规划时我们就参与其中，派专业的工程师到现场与相关的人员联系，根据实验室内通风载体的数量（如通风柜 集气罩 排气罩）设计出完整的通风方案，方案内容包括建筑内预留排风的管井的位置尺寸，管道的分布及规格。确保通风的载体使用时的风速 排风量 噪声等指标符合国家标准 ，并与建筑内的空调 消防 照明等线路互不干绕。 4.环保的设计：随着经济的发展人们对环保的要求越来越严格。我公司提供完善的废气净化处理解决方案，使实验中产生的废气得到有效的解决，合符环保的排放指标。 5.产品个性设计 ：根据实验过程及人员的特殊要求，调整产品结构和功能，设计出个性的产品以满足用户的要求。 6.安全设施的设计：按照国际标准，在实验室配置安全柜、柜及紧急事故淋洗器，急救洗眼器等安全设计。 实验室建筑的主要特点是实验内容手段众多，工艺要求繁杂，工程管网较多，工程造价比一般建筑高达一倍或数倍。根据这些特点，实验建筑平面设计除了遵循一般建筑物平面设计原则外，设计还需要遵循下列原则： A．同类实验室组合在一起。 B．工程管网较多的实验室组合在一起。 C．有隔振要求的实验室组合在一起,一般宜设于底层。 D．有洁净要求的实验室组合在一起。 E．有防辐射要求的实验室组合在一起。 F．有毒性物质产生的实验室组合在一起。 遵循上述设计原则，有利于环境卫生，防止不同性质的实验室相互干扰，有利于不同的分析检测顺利进行，并节约投资。 实验室装修、专业实验室设计、
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人山梨醇脱氢酶ELISA检测试剂盒说明书
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
本试剂仅供研究使用 标本：血清或血浆 试验原理： SDH试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知SDH浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将SDH和生物素标记的抗体同时温育。人山梨醇脱氢酶ELISA检测试剂盒洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中SDH的浓度呈比例关系。 自备材料 1．蒸馏水。 2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。 3．振荡器及磁力搅拌器等。 安全性 1．避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。 2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。 3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。 操作注意事项 1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。人山梨醇脱氢酶ELISA检测试剂盒稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。 2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。 3．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。 5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。 6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。 7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。 8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。 9．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。 样品收集、处理及保存方法 1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。 3、细胞上清液---100
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大鼠血小板因子3(PF-3)elisa试剂盒使用说明书
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
大鼠血小板因子3(PF-3)elisa试剂盒使用说明书 Elisa kit规格：48孔配置/96孔配置 标准品稀释液：1.5ml×1瓶 酶标试剂：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96） 【大鼠血小板因子3(PF-3) elisa试剂盒】本试剂仅供研究使用 计算： 以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 试剂盒组成： 封板膜:2片（48）/2片（96） 说明书:1份 密封袋:1个 标准品： 2700ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存 酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存 样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 终止液: 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液:（20ml×20倍）×1瓶 （20ml×30倍）×1瓶 2-8℃保存 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠血小板因子3(PF-3) 水平。用纯化的大鼠血小板因子3(PF-3) 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入血小板因子3(PF-3) ，再与HRP标记的血小板因子3(PF-3) 抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的血小板因子3(PF-3) 呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠血小板因子3(PF-3) 浓度。 目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中血小板因子3(PF-3) 的含量。 服务承诺： 供货期：款到发货。 工作时间内免费的技术咨询和指导 。请来电咨询 为客户提供来样检测服务，最大限度实验结果的有效性(免费代测)。 保存条件及有效期： 试剂盒保存：2-8℃| 有效期：6个月 【大鼠血小板因
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细菌总蛋白和膜蛋白提取方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
细菌总蛋白和膜蛋白提取方法 实验试剂 裂解液（pH 8.5-9.0）：50 mM Tris-HCl，2 mM EDTA, 100 mM NaCl，0.5% Triton X-100，调pH值至8.5-9.0备用； 溶菌酶；蛋白酶抑制剂PMSF；1% SDS溶液；Trizol裂解液；无水乙醇；异丙醇；0.3M盐酸胍； 疏水性蛋白提取液（非裂解液）：1% Triton X-114，150mM NaCl, 10mM Tris-HCl，1mM EDTA，调pH值至8.0备用。 实验设备 高速离心机；超声仪；透析袋；EP管；涡旋仪；水浴锅等。 实验步骤 1. 从新鲜样品中提取总蛋白（简易法） 1) 自配裂解液（pH 8.5-9.0）：50 mM Tris-HCl，2 mM EDTA, 100 mM NaCl，0.5% Triton X-100，调pH值至8.5-9.0备用；用前加入100 μg/ml 溶菌酶，1μl/ml 的蛋白酶抑制剂PMSF。该裂解液用量为10-50ml 裂解液/1g湿菌体。 2) 将40ml 菌液在12000g，4℃下离心15分钟收集菌体，沉淀用PBS悬浮洗涤2遍，沉淀加入1ml裂解液悬浮菌体。 3) 超声粉碎，采用300w，10s超声/10s间隔，超声20min，反复冻融超声3次至菌液变清或者变色。 4) 1000g离心去掉大碎片，上清可直接变性后PAGE电泳检测，或者用1% SDS溶液透析后冻存。 缺点：Western blotting结果表明，疏水性跨膜蛋白提取效率有限。 2. 从Trizol裂解液中分离总蛋白 1) Trizol溶解的样品研磨破碎后，加氯仿分层，2-8℃下10000g离心15min，上层水相用于RNA提取，体积约为总体积的60%。 2) 用乙醇沉淀中间层和有机相中的DNA。每使用1ml Trizol加入0.3ml无水乙醇混匀，室温放置3min，2-8℃不超过2000g离心5min。 3) 将上清移至新的EP管中，用异丙醇沉淀蛋白质。每使用1ml Trizol加入1.5ml异丙醇，室温放置10min，2-8℃下12000g离心10min，弃上清。 4) 用含有0.3M盐酸胍的95%乙醇洗涤。每1ml Trizol加入2ml洗液，室温放置20min， 2-8℃下7500g离心5min，弃上清，重复洗涤2次。最后加入2ml无水乙醇，涡旋后室温放置20min，2-8℃下7500g离心5min，弃上清。 5) 冷冻干燥5-10min，1%SDS
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人热休克蛋白-70ELISA分析检测试剂盒技术原理
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
人热休克蛋白-70ELISA分析检测试剂盒技术原理 本试剂仅供研究使用 标本：血清或血浆 试验原理： HSP-70试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知HSP-70浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将HSP-70和生物素标记的抗体同时温育。人热休克蛋白-70ELISA检测试剂盒洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中HSP-70的浓度呈比例关系。 自备材料 蒸馏水。 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。 振荡器及磁力搅拌器等。 安全性 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。 操作注意事项 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。人热休克蛋白-70ELISA检测试剂盒底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。 样品收集、处理及保存方法 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。 细胞上
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免疫荧光实验原理及操作
作者：德尔塔 日期：2022-04-25
免疫荧光实验原理及操作方法简介 免 疫荧光技术（Immunofluorescence technique ）又称荧光抗体技术，是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体 分子与一些示踪物质结合，利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。 该技术的主要特点是：特异性强、敏感性高、速度快。主要缺点是：非特异性染色问题尚未完全解决，结果判定的客观性不足，技术程序也还比较复杂。 荧光法按反应体系及定量方法不同，还可进一步分做若干种。与放射免疫法相比，荧光免疫法无放射性污染，并且大多操作简便，便于推广。国外生产的TDM用试剂盒，有相当一部分即属于此类，并且还有专供TDM荧光偏振免疫分析用的自动分析仪生产。 由于一般荧光测定中的本底较高等问题，荧光免疫技术用于定量测定有一定困难。近年来发展了几种特殊的荧光免疫测定，与酶免疫测定和放射免疫分析一样，在临床检验中应用。 免 疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性，所以当抗原抗体发生反应时，只要知道其中的一个因素，就可以查出另一个因素。免疫荧 光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体（或抗原）上，与其相应的抗原（或抗体）结合后，在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。 直接法：将标记的特异性荧光抗体，直接加在抗原标本上，经一定的温度和时间的染色，用水洗去未参加反应的多余荧光抗体，室温下干燥后封片、镜检。 间 接法：如检查未知抗原，先用已知未标记的特异抗体（第一抗体）与抗原标本进行反应，用水洗去未反应的抗体，再用标记的抗抗体（第二抗体）与抗原标本反应， 使之形成抗原—抗体—抗体复合物，再用水洗去未反应的标记抗体，干燥、封片后镜检。如果检查未知抗体，则表明抗原标本是已知的，待检血清为第一抗体，其它 步骤的抗原检查相同。 标记的抗抗体是抗球蛋白抗体，同于血清球蛋白有种的特
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小鼠卵清蛋白特异性IgE（OVA-sIgE）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
小鼠卵清蛋白特异性IgE（OVA-sIgE）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中卵清蛋白特异性IgE（OVA-sIgE）的含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠卵清蛋白特异性IgE（OVA-sIgE）水平。用纯化的卵清蛋白特异性IgE（OVA-sIgE）抗体包被微 孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中加入卵清蛋白特异性IgE（OVA-sIgE），再与HRP标记的卵清蛋白特异性IgE（OVA-sIgE）抗体 结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的 深浅和样品中的卵清蛋白特异性IgE（OVA-sIgE）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠卵清蛋 白特异性IgE（OVA-sIgE）的浓度。 试剂盒组成： 试剂盒组成48孔配置96孔配置保存 说明书1份1份 封板膜2片（48）2片（96） 密封袋1个1个 酶标包被板1×481×962-8℃保存 标准品：27μg/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存 标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存 酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存 样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存 显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存 显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存 终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存 浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存 样本处理及要求： 1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4.细胞培养上清：
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组蛋白H3K9me3(H3K9三甲基)多克隆抗体介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-24
名称：Histone H3K9me3 (H3K9 Trimethyl) Polyclonal Antibody 货号：A-4036 应用：ChIP, ChIP-Seq, ELISA, IF, IHC, IP, WB 克隆：多克隆 是否带有标记：无标记 寄主：兔子 同型对照：IgG 纯化：亲和纯化 反应物种：可用物种广泛，人，小鼠，大鼠 浓度：1 mg/ml 描述：兔多克隆抗体是针对K9三甲基化的组蛋白H3相应的合成肽，芯片级 免疫原：一种人工合成的甲基化的肽对应于人的组蛋白H3 K9残基 缓冲溶液：含0.02%叠氮化钠的PBS，50%甘油，pH7.3 储存：短期-20°C，长期-80°C，避免反复冻融 别名： H3K9me3 antibody; H3K9m3 antibody; HIST1H3J; H3/j; H3FJ; Histone H3.1; Histone H3/a; Histone H3/b; Histone H3/c; Histone H3/d; Histone H3/f; Histone H3/h; Histone H3/I; Histone H3/j; Histone H3/k; Histone H3/l; HIST3H3 使用时稀释比例： WB: 1:500 - 1:2000 IHC: 1:50 - 1:200 IF: 1:50 - 1:200 IP: 1:50 - 1:200 ChIP: 1:50 - 1:200 ChIP-Seq: 1:50 - 1:200 背景： 在真核生物中，染色质结构的调整在转录调控中起重要作用。核小体，由DNA缠绕在八个核心组蛋白上组成（H2A，H2B，H3和H4各两个）是染色质的基本结构单位。核心组蛋白的氨基末端进行着各种翻译后修饰，包括乙酰化，甲基化，磷酸化，泛素化。这些修改发生在各种刺激下，并直接影响染色质与转录因子的可亲近性，因此，影响基因表达。在大多数物种中，组蛋白H2B主要乙酰化的位点为Lys5，12，15，20。组蛋白H3主要乙酰化位点为LYS9，14，18，23，27，和56。在一些生物中组蛋白H3的 Lys9乙酰化似乎已经在蛋白沉积和染色质组装中占据主导作用。组蛋白H3的Ser10，Ser28和Thr11磷酸化与有丝分裂和减数分裂过程中染色体凝集有紧密相关。组蛋白H3的THR3磷酸化在许多物种中是高度保守的并由激酶haspin催化。在哺乳动物细胞中的免疫组织化学染色的磷酸化特异性抗体揭示了组氨酸H3的Thr3在有丝分裂前期的磷酸化和后期的
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